CN105381015A - 一种具有抗抑郁作用的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有抗抑郁作用的中药组合物及其制备方法，本发明方法包括首先分别将黄连、肉桂与水混匀后，进行加热回流提取，获得黄连药液、肉桂药液；水蒸汽蒸馏获得肉桂挥发油；然后将黄连药液、肉桂药液、肉桂挥发油混匀后，依次进行浓缩处理、干燥处理，本发明方法制备的抗抑郁中药组合物与传统的水煎煮法制备的“交泰丸”相比，具有化学成分相对明确，疗效显著，且质量可控等优势。本发明方法制备的中药组合物的抗抑郁作用药效明确，见效快，毒副作用小，制备工艺简单，便于操作与推广，为预防和治疗抑郁症及其并发的疾病、障碍或病症提供了一种新的药物来源。

Description

一种具有抗抑郁作用的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种预防、缓解和/或治疗情感性精神障碍神经系统疾病的药物或保健食品及其制备方法，特别涉及一种具有抗抑郁作用的中药组合物及其制备方法，属于中药技术领域。

背景技术

抑郁症(majordepressivedisorder)是情感性精神障碍(mooddisorders)的主要类型，是一种高患病率、高负担、高自杀、易复发、易致残的常见精神疾病，以明显而持久的心境低落为主要表现，可伴有相应的思维和行为改变。

抑郁症的主要临床表现为情绪低落，兴趣缺失，自责，自我评价下降和乏力等，可有神经运动迟滞或激越，多伴有食欲和性欲下降、早醒和体重减轻等症状，同时存在认知功能障碍。抑郁症是一类严重危害人类身心健康的常见精神疾病，由于它所造成的疾病负担不断攀升，世界卫生组织(WHO)的全球疾病负担合作研究预测，到2020年抑郁症将成为第二大疾病负担源，在中国抑郁症的疾病负担将位于恶性肿瘤、心脑血管和呼吸系统疾病之前。2005年亚洲精神疾病高峰论坛报告显示，中国的抑郁症患者已达到2600万。在全球，抑郁症造成的经济负担约占所有疾病负担的4.4％，与缺血性心脏病或腹泻性疾病相当。WHO同时指出，21世纪人类面对的最大疾患是精神疾病，而抑郁症是其中的重点，并认为抑郁症大规模爆发的危险率为15％～20％。同时抑郁症还伴随共病情况，如患有糖尿病、风湿病、心血管疾病、神经系统等疾病的患者常与抑郁症共患病。抑郁症患病率高、复发率高、致残率高，是对公众心身健康影响极大的公共卫生问题，其终生患病率高达15％，15％的重度抑郁症患者可因自杀而导致死亡。抑郁症在具有高患病率、高复发率等特点的同时，兼具辨识率低、治愈率低等问题，给社会和家庭均造成了不同程度的困扰。因此抑郁症严重的危害性迫切要求研究者加速研究抑郁症的发病机制，以及开发疗效更好的抗抑郁药物。

交泰丸是临床常用效方，载于《韩氏医通》、《脾胃论》、《万病回春》、《普济方》等中医学著作中，因治疗的侧重点不同导致药物组成也不一致，而临床最常用的交泰丸为《韩氏医通》所记载。本研究以明朝·韩懋《韩氏医通》记载的交泰丸为对象，方名出自清代·王士雄《四科简要方·安神》，曰：““生川连五钱，肉桂心五分，研细，白蜜丸，空心淡盐汤下，治心肾不交，怔忡无寐，名交泰丸。”本方由黄连和肉桂两味药以10:1(15g:1.5g)的比例组成，临床主要用于治疗失眠、抑郁症、更年期综合征、心律失常、遗精等。《本草纲目》曰：“黄连与肉桂同用，则心肾交于顷刻。”

现代药理研究已明确交泰丸的抗抑郁作用，且未见任何毒副反应报道，但传统煎法用药量大，加工简单，质量控制难，无效成分多，服用起来也较不便，不宜被广泛使用及推广，实现大规模工业生产。

发明内容

本发明的目的是针对现有采用交泰丸治疗抑郁症使用过程中存在的技术难题，提供一种以黄连、肉桂为原料药制备具有抗抑郁作用的新的中药组合物的制备方法及由该方法制备的具有抗抑郁作用的中药组合物。本发明方法克服传统方法制备交泰丸复方用药量大，加工简单，质量控制不便，无效成分较多等缺陷；制备的组合物药物疗效显著，药物吸收增强，生物利用度高，患者服药量少，在取得抑郁症治疗效果，延缓疾病进程的同时，提供保健预防的思路与方法。

为实现本发明的目的，本发明一方面提供一种具有抗抑郁作用的中药组合物的制备方法，包括首先分别将黄连、肉桂与水混匀后，进行加热回流提取，获得黄连药液、肉桂药液；水蒸汽蒸馏获得肉桂挥发油；然后将黄连药液、肉桂药液、肉桂挥发油混匀后，依次进行浓缩处理、干燥处理，即得。

其中，所述黄连与肉桂的重量份配比为5-20:1，优选为10:1。

特别是，对原料肉桂采用水蒸汽蒸馏法的水中蒸馏方式进行加热、回流提取，获得肉桂药液和肉桂挥发油。

水蒸气蒸馏法的蒸馏方式包括水中蒸馏、水上蒸馏(隔水蒸馏)、直接蒸汽蒸馏、水扩散蒸汽蒸馏。

中医学认为“心藏神，肾藏志。”心与肾在协调精神、情志、思维、意识方面关系密切。“肾在志为恐”，肾阳充沛，肾精上济于心，使心神得心气固敛，心血濡养，从而发挥心的“藏神”、“定志”之功。若肾阳不足，不能蒸腾肾精上养于心，则心气耗伤，心血不足，心阴亏虚，心阳失煦，必致心失所养，神失所藏，发为情绪低落、忧悲，情志消沉、神志不宁、表情淡漠、精神萎靡等抑郁征象。黄连味苦性寒入心经，可以清降心火以下交肾水；肉桂味辛性热入肾经，可以温升肾水以上济心火，两药一寒一热，一阴一阳，共奏交通心肾，调神定志之功。

黄连，别名云连、雅连、川连、味连、鸡爪连，为毛茛科植物黄连CoptischinensisFranch、三角叶黄连CoptisdeltoideaC.Y.ChengetHsiao或云连CoptisteetaWall.的干燥根茎。味苦，性寒；归心、脾、胃、胆、大肠经。具有清热燥湿，泻火解毒的功效。用于湿热痞满，呕吐吞酸，泻痢，黄疸，高热神昏，心火亢盛，心烦不寐，血热吐衄，目赤，牙痛，消渴，痈肿疔疮的治疗；外治湿疹，湿疮，耳道流脓。

现代药理研究发现黄连具有1)抗菌抗病毒作用黄连具有显著的抗菌抗病毒作用，且抗菌谱很广，对革兰氏阳性和阴性细菌及流感病毒，真菌类均有一定的抑制作用。对钩端螺旋体，在试管中有相当强的杀灭作用。极低浓度即开始阻止霍乱、肠伤寒、痢疾菌的繁殖，它也有抗金黄色葡萄球菌、链球菌等革兰氏阳性菌和肠伤寒菌、志贺氏痢疾菌、淋菌等革兰氏阴性菌的作用。2)对糖尿病的改善作用唐代名医孙思邈所著的《千金要方》中记载有用黄连配伍生地治疗消渴。近年来随着黄连药理研究深入，天然植物提取的黄连素对血糖的调节作用倍受降糖药物研究者的重视。黄连素对糖尿病的并发症(心脑血管的损伤、神经系统损伤、肾损伤等)均有一定的改善作用。3)对心脑血管疾病的改善作用黄连对心血管的作用主要表现在抗心律失常、抗心力衰竭及治疗心肌炎等方面，对脑血管疾病的作用，则主要表现为改善急性脑缺血、脑缺氧。临床上对脑血管病患者广泛使用黄连解毒汤，获得与脑循环代谢改善药相同的改善率，并具有益智的作用。研究还表明黄连解毒汤对低氧性脑障碍有显著保护作用，能预防或治疗因高热或中毒引起的神昏。4)抗肿瘤作用黄连及其有效成分可通过细胞毒作用抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡、增强机体免疫功能、调节细胞信号传导、抗氧化、诱导细胞分化等机制发挥抗肿瘤作用。

肉桂为樟科植物肉桂CinnamomumcassiaPresl的干燥树皮。味辛、甘，性大热，归肾、脾、心、肝经。具有补火助阳，散寒止痛，温经通脉，引火归元的功效。主要用于治疗阳痿，宫冷，腰膝冷痛，肾虚作喘，阳虚眩晕，目赤咽痛，心腹冷痛，虚寒吐泻，寒疝，奔豚，闭经，痛经等。

肉桂皮含有挥发油(桂皮油)1.98％-2.06％，其主要成分为桂皮醛，占52.92％-61.20％，还有乙酸桂皮酯，桂皮酸乙酯，苯甲酸苄酯，苯甲醛，香豆精，β-荜澄茄烯，菖蒲烯，β-榄香烯，原儿茶酸，反式桂皮酸等。现代药理研究表明：肉桂具有1)抑菌作用肉桂对体内和体外的细菌有抑制作用，被抑制的微生物中既有细菌又有真菌，既有革兰氏阳性菌又有革兰氏阴性菌。其中真菌对肉桂油最敏感，又以青霉的表现最为突出。2)对血液、心血管系统的影响肉桂有温通心阳的功效，作用于心血管系统具有扩张血管作用，尤其是改善血管末梢循环作用，可对末梢血管持续性扩张。肉桂中的主要成分桂皮醛对平滑肌有罂粟样作用，可扩张外周血管、降低血压。肉桂有引火归元的功效，从现代药理学来解析，肉桂能扩张毛细血管而使血压下降。除此之外，桂皮醛还有良好的体外抗血小板聚集和体内抗血栓形成的作用。桂皮油中的桂皮酸还有升高白细胞的作用。3)降血糖作用肉桂提取物能降血糖，其机制大概有以下几方面：通过保护、刺激胰岛β细胞，维持胰岛素分泌量以及胰岛β细胞活性；改善胰岛素抵抗，肉桂提取物可预防胰岛素抵抗发生，肉桂提取物能激活胰岛素受体激酶抑制胰岛素受体脱磷酸作用，提高胰岛素敏感性；清除自由基，抗脂质过氧化，肉桂能提高机体血清及组织器官中超氧化物歧化酶(SOD)活性。MDA含量降低，提示肉桂及其提取物具有显著的清除氧自由基能力，降低因自由基增多加重糖尿病并发症发生、发展的有害因素；促进胰岛素分泌，增加血清胰岛素含量。4)抗氧化作用桂皮中强天然抗氧化组分属亲脂性的萜烯类化合物。肉桂的化学成分中80％左右是醛类。由于醛类物质中与羰基直接相连的ɑ-碳原子上具有较活泼的氢，极易氧化，甚至在空气中也可以使其氧化，所以还原性强。5)肉桂的其他作用肉桂还有很好的治疗消化道溃疡、镇静、解痉、解热、抗肿瘤及壮阳作用。

本发明另一方面提供一种具有抗抑郁作用的中药组合物的制备方法，包括如下顺序进行的步骤：

1)按照如下重量份配比备料

黄连200肉桂10-40

2)制备黄连药液

将黄连与水混合后，加热，进行回流提取2-3次，过滤、合并回流提取液，制得黄连药液；

3)制备肉桂药液、肉桂挥发油

将肉桂与水混合后，加热，进行回流提取2-3次，收集挥发油；以及过滤热回流提取液并合并回流提取液，制得肉桂药液和肉桂挥发油；

4)将黄连药液、肉桂药液、肉桂挥发油混合均匀后，依次进行浓缩处理、干燥处理，即得。

其中，步骤1)中所述原料的重量分配比为：黄连200肉桂20。

特别是，步骤1)中所述黄连与肉桂的重量之比为5-20:1，优选为10:1。

尤其是，还包括将原料黄连、肉桂进行粉碎处理，制成黄连粉、肉桂粉。

特别是，所述黄连粉、肉桂粉的粒径≥20目，优选为20-45目。

其中，步骤2)中所述原料黄连回流提取次数优选为3次。

特别是，步骤2)中所述第一次回流提取过程中水的重量与黄连的重量之比为8-12:1，优选为10:1；第二次回流提取过程中水的重量与黄连的重量之比为6-10:1，优选为8:1；第三次回流提取过程中水的重量与黄连的重量之比为6-10:1，优选为8:1。

尤其是，步骤2)中所述第一次回流提取时间为150-200min，优选为170min；第二次回流提取时间为80-120min，优选为80min；第三次回流提取时间为40-60min，优选为40min。

特别是，还包括将黄连回流提取液合并后进行离心处理，取离心上清液，即得黄连药液。

尤其是，离心处理过程中离心速率为2000r/min，离心时间20min。

其中，步骤3)中所述原料肉桂回流提取次数优选为3次。

特别是，步骤3)中所述第一次回流提取过程中水的重量与肉桂的重量之比为8-12:1，优选为10:1；第二次回流提取过程中水的重量与肉桂的重量之比为6-10:1，优选为8:1；第三次回流提取过程中水的重量与肉桂的重量之比为6-10:1，优选为8:1。

尤其是，步骤3)中所述第一次回流提取时间为150-200min，优选为170min；第二次回流提取时间为80-120min，优选为80min；第三次回流提取时间为40-60min，优选为40min。

本发明中肉桂挥发油和肉桂药液的提取方法，采用《中国药典(2010年版)》附录XD挥发油测定法的方法进行提取，即水蒸馏法进行提取。

特别是，步骤3)中将肉桂与水置于挥发油测定仪提取装置内，对肉桂进行加热，回流提取，制得所述的肉桂药液和所述的肉桂挥发油。

特别是，还包括将肉桂回流提取液合并后进行离心处理，取离心上清液，即得肉桂药液，同时收集肉桂挥发油。

尤其是，离心处理过程中离心速率为2000r/min，离心时间20min

其中，步骤4)中所述浓缩处理的温度为≤95℃，优选为80-95℃；所述干燥处理的温度为≤75℃，优选为45-75℃，进一步优选为60℃。

特别是，步骤4)中所述干燥后的组合物的含水率≤5％，优选为2％-3％。

尤其是，浓缩处理后得到相对密度为1.07-1.12的浸膏后，再进行所述的干燥处理。

本发明再一方面提供一种按照上述方法制备而成的具有抗抑郁作用的中药组合物。

本发明方法的中药组合物活性成分可以加入制备不同剂型时所需的各种常规辅料或已知的药学上可接受的辅料，如崩解剂、润滑剂、粘合剂等；以常规的中药直接方法制备成任何一种常用的口服剂型，如丸剂、散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液等。

本发明方法制备的中药组合物具有交通心肾，调神定志之功效，用于预防、缓解或治疗抑郁症。

本发明方法制备的抗抑郁中药组合物使用时，每天口服2-3次，每次15-30克(生药)，连续使用，可以达到治疗抑郁症的目的。

本发明具有如下显著优势

1.本发明对已知中药名方“交泰丸”研究其新的药用价值，对其采用新的制备方法获得的组合物用于抗抑郁作用，其对缩短小鼠悬尾实验中的不动时间、强迫游泳实验中的不动时间均具有显著性，其抗抑郁的功效增强，并可制备成预防、调理和/或治疗抑郁症的药物或保健食品。

2.本发明方法制备的中药组合物在治疗、缓解及预防抑郁症方面效果明显，安全性高、不良反应少使其在抗抑郁领域具有独到优势，且可常服，并与现代抗抑郁作用机理竞相呼应。

3.本发明的中药组合物的制备方法工艺精当，质量可控，产品质量高，品质稳定，无效成分少，方便患者服用。

4.本发明产品原料充足、价廉、安全性高，制备工艺简单，可操作性强，方便制成各类剂型，实用价值高，有着较好的市场前景。

5、本发明方法对原料药肉桂采用水蒸馏法同时进行加热回流，制备肉桂水提取液并收集肉桂挥发油，肉桂挥发油和黄连、肉桂水提取液相互促进，协同增加抗抑郁功效，抗抑郁效果显著，显著缩短小鼠悬尾实验中的不动时间、强迫游泳实验中的不动时间。

6、本发明方法制备的抗抑郁的中药组合物既可以单独用于治疗抑郁症，也可以与其他药物共同组分，制成多种抗抑郁的药物。

附图说明

图1为本发明肉桂提取的挥发油测定仪提取装置示意图。

附图标记说明：

1、圆底烧瓶；2、挥发油提取器；3、回流冷凝管。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。但这些实施例仅限于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体实验条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照厂商所建议的条件。

以下通过实验例来进一步阐述本发明所述中药组合物的抗抑郁药理作用及其制备方法，这些实验例包括了本发明药物的药效学实验。

本发明采用小鼠行为绝望实验、小鼠开放场实验来验证本发明方法制备的中药组合物的抗抑郁作用。

本发明实施例中使用的黄连、肉桂饮片均购自安徽省亳州市药材总公司中西药公司。

实施例1

1、按照如下重量配比准备原料(g)

黄连200

肉桂20

其中，将黄连、肉桂分别粉碎，并分别过20目筛，备用；

2、制备黄连药液

2A)将粉碎并过筛后的200g黄连粉末置于圆底烧瓶(5L)内，将圆底烧瓶安装于电热套上，加入水，并在圆底烧瓶的上方组装冷凝管，加热，进行黄连第一次回流提取，其中加入的水的重量与黄连的重量(干重)之比为10:1；回流提取170min后过滤，得到黄连第一次提取液；

2B)向滤渣中加水，水的重量与黄连的重量(干重)之比为8:1，加热，进行黄连第二次回流提取，提取80min后过滤，得到黄连第二次提取液；

2C)向滤渣中加水，水的重量与黄连的重量(干重)之比为8:1，加热，进行黄连第三次回流提取，提取40min后过滤，得到黄连第三次提取液；

2D)将黄连第一、第二、第三次提取液合并后，过滤，再进行离心处理，获得上清液为黄连药液，备用，其中离心的速率为2000r/min，离心时间20min。

3、制备肉桂药液、肉桂挥发油

3A)将粉碎并过筛后的20g肉桂粉末置于挥发油测定仪提取装置(如图1)的圆底烧瓶1(500mL)内，将圆底烧瓶安装于电热套上，加入水，并在圆底烧瓶上方从下至上依次组装挥发油提取器2和回流冷凝管3，加热，进行肉桂第一次回流提取，其中加入的水的重量与肉桂的重量(干重)之比为10:1；回流提取170min后过滤，得到肉桂第一次提取液，并从挥发油提取器中取出第一肉桂挥发油；

3B)向滤渣中加水，水的重量与肉桂的重量(干重)之比为8:1，加热，进行肉桂第二次回流提取，提取80min后过滤，得到肉桂第二次提取液，从挥发油提取器中取出第二肉桂挥发油；

3C)向滤渣中加水，水的重量与肉桂的重量(干重)之比为8:1，加热，进行肉桂第三次回流提取，提取40min后过滤，得到肉桂第三次提取液，从挥发油提取器中取出第三肉桂挥发油；

3D)将肉桂第一、第二、第三次提取液合并后，过滤，再进行离心处理，获得上清液为肉桂药液，备用，其中离心的速率为2000r/min，离心时间20min；将第一、第二、第三肉桂挥发油合并得到肉桂挥发油。

4、制备中药组合物

将黄连药液、肉桂药液、肉桂挥发油混合均匀后，置于水浴锅上，进行水浴浓缩处理，其中，浓缩处理过程中，水浴温度为90℃(80-95℃均适用于本发明)，浓缩为相对密度1.10的浸膏后，再置于真空干燥箱中进行干燥处理，制得中药组合物干粉，其中干燥温度为≤75℃，优选为60℃，组合物干粉的含水率≤5％(优选为2-3％)，重量为56.3g；本发明方法出膏率为25.59％。

出膏率＝中药组合物干粉质量÷(黄连质量+肉桂质量)×100％

烘干后的干粉置于4℃冰箱保存备用。

5、将中药组合物干粉与辅料炼蜜混合，搅拌均匀后置于制丸机中进行制丸，制好的药丸于真空干燥箱中干燥至抗抑郁组合物药丸。

实施例2

1、按照如下重量配比准备原料(g)

黄连200

肉桂10

其中，将黄连、肉桂分别粉碎，并分别过20目筛，备用；

2、制备黄连药液

2A)将粉碎并过筛后的200g黄连粉末置于圆底烧瓶(5L)内，将圆底烧瓶安装于电热套上，加入水，并在圆底烧瓶的上方组装冷凝管，加热，进行黄连第一次回流提取，其中加入的水的重量与黄连的重量(干重)之比为12:1；回流提取200min后过滤，得到黄连第一次提取液；

2B)向滤渣中加水，水的重量与黄连的重量(干重)之比为10:1，加热，进行黄连第二次回流提取，提取120min后过滤，得到黄连第二次提取液；

2C)将黄连第一、第二次提取液合并后，过滤，再进行离心处理，获得上清液为黄连药液，备用，其中离心的速率为2000r/min，离心时间20min。

3、制备肉桂药液、肉桂挥发油

3A)将粉碎并过筛后的20g肉桂粉末置于挥发油测定仪提取装置(如图1)的圆底烧瓶1(500mL)内，将圆底烧瓶安装于电热套上，加入水，并在圆底烧瓶上方从下至上依次组装挥发油提取器2和回流冷凝管3，加热，进行肉桂第一次回流提取，其中加入的水的重量与肉桂的重量(干重)之比为12:1；回流提取200min后过滤，得到肉桂第一次提取液，并从挥发油提取器中取出第一肉桂挥发油；

3B)向滤渣中加水，水的重量与肉桂的重量(干重)之比为10:1，加热，进行肉桂第二次回流提取，提取120min后过滤，得到肉桂第二次提取液，从挥发油提取器中取出第二肉桂挥发油；

3C)将肉桂第一、第二次提取液合并后，过滤，再进行离心处理，获得上清液为肉桂药液，备用，其中离心的速率为2000r/min，离心时间20min；将第一、第二肉桂挥发油合并得到肉桂挥发油。

4、制备中药组合物

将黄连药液、肉桂药液、肉桂挥发油混合均匀后，置于水浴锅上，进行水浴浓缩处理，其中，浓缩处理过程中，水浴温度为80℃，浓缩为相对密度为1.12的浸膏后，再置于真空干燥箱中进行干燥处理，制得中药组合物干粉，其中干燥温度为60℃，组合物干粉的含水率≤5％(优选为2-3％)，重量为40.6g；本发明方法出膏率为18.45％。

烘干后的干粉置于4℃冰箱保存备用。

5、将中药组合物干粉粉碎成细粉，加入辅料制成颗粒，并干燥，压制成片。

实施例3

1、按照如下重量配比准备原料(g)

黄连200

肉桂40

其中，将黄连、肉桂分别粉碎，并分别过20目筛，备用；

2、制备黄连药液

2A)将粉碎并过筛后的200g黄连粉末置于圆底烧瓶(5L)内，将圆底烧瓶安装于电热套上，加入水，并在圆底烧瓶的上方组装冷凝管，加热，进行黄连第一次回流提取，其中加入的水的重量与黄连的重量(干重)之比为8:1；回流提取150min后过滤，得到黄连第一次提取液；

2B)向滤渣中加水，水的重量与黄连的重量(干重)之比为6:1，加热，进行黄连第二次回流提取，提取100min后过滤，得到黄连第二次提取液；

2C)向滤渣中加水，水的重量与黄连的重量(干重)之比为6:1，加热，进行黄连第三次回流提取，提取50min后过滤，得到黄连第三次提取液；

2D)将黄连第一、第二、第三次提取液合并后，过滤，再进行离心处理，获得上清液为黄连药液，备用，其中离心的速率为2000r/min，离心时间20min。

3、制备肉桂药液、肉桂挥发油

3A)将粉碎并过筛后的20g肉桂粉末置于挥发油测定仪提取装置(如图1)的圆底烧瓶1(500mL)内，将圆底烧瓶安装于电热套上，加入水，并在圆底烧瓶上方从下至上依次组装挥发油提取器2和冷凝管3，加热，进行肉桂第一次回流提取，其中加入的水的重量与肉桂的重量(干重)之比为8:1；回流提取150min后过滤，得到肉桂第一次提取液，并从挥发油提取器中取出第一肉桂挥发油；

3B)向滤渣中加水，水的重量与肉桂的重量(干重)之比为6:1，加热，进行肉桂第二次回流提取，提取100min后过滤，得到肉桂第二次提取液，从挥发油提取器中取出第二肉桂挥发油；

3C)向滤渣中加水，水的重量与肉桂的重量(干重)之比为6:1，加热，进行肉桂第三次回流提取，提取50min后过滤，得到肉桂第三次提取液，从挥发油提取器中取出第三肉桂挥发油；

3D)将肉桂第一、第二、第三次提取液合并后，过滤，再进行离心处理，获得上清液为肉桂药液，备用，其中离心的速率为2000r/min，离心时间20min；将第一、第二、第三肉桂挥发油合并得到肉桂挥发油。

4、制备中药组合物

将黄连药液、肉桂药液、肉桂挥发油混合均匀后，置于水浴锅上，进行水浴浓缩处理，其中，浓缩处理过程中，水浴温度为95℃，浓缩为相对密度为1.07的浸膏后，再置于真空干燥箱中进行干燥处理，制得中药组合物干粉，其中干燥温度为≤75℃(优选为60℃)，组合物干粉的含水率≤5％(优选为2-3％)，重量为49.2g；本发明方法出膏率为22.36％。

烘干后的干粉置于4℃冰箱保存备用。

5、将中药组合物干粉粉碎成细粉，装入明胶硬胶囊中，制成胶囊剂。

对照例1

1、按照如下重量配比准备原料(g)

黄连200

肉桂20

2、制备交泰丸药液

2A)将称量好的200g黄连、20g肉桂生药材置于砂锅内，加水2200mL，水的重量与黄连和肉桂的总重量(干重)之比为10:1，并浸泡2h，使用电子万用炉加热至完全沸腾后开始计时，60min后过滤，得到第一次提取液；

2B)向滤渣中加水1760mL，水的重量与黄连和肉桂的总重量(干重)之比为8:1，进行黄连、肉桂第二次提取，使用电子万用炉加热至完全沸腾后开始计时，60min后过滤，得到第二次提取液；

2C)向滤渣中加水1760mL，水的重量与黄连和肉桂的总重量(干重)之比为8:1，进行黄连、肉桂第三次提取，使用电子万用炉加热至完全沸腾后开始计时，60min后过滤，得到第三次提取液；

2D)将第一、第二、第三次提取液合并后，过滤，再进行离心处理，获得上清液为黄连-肉桂药液，备用，其中离心的速率为2000r/min，离心时间20min。

3、制备交泰丸

将交泰丸药液置于水浴锅上，进行水浴浓缩处理，其中，浓缩处理过程中，水浴温度为80-95℃，浓缩为相对密度为1.08的浸膏后，再置于真空干燥箱中进行干燥处理，制得中药组合物干粉，其中干燥温度为≤75℃，优选为60℃，组合物干粉的含水率≤5％(优选为2-3％)，重量为29.2g；本发明方法出膏率为13.27％。

烘干后的干粉置于4℃冰箱保存备用。

4、将黄连-肉桂干粉与辅料炼蜜混合，搅拌均匀后置于制丸机中进行制丸，制好的药丸于干燥箱中干燥制得交泰丸。

实验例1小鼠行为绝望实验

1.1实验材料

健康ICR小鼠，雄性，体重18-22g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，动物合格证编号：SCXK(京)2012-0001。饲养于天津中医药大学实验动物中心，实验期间保持自由饮水和进食，饲养环境温度为(24±1)℃，湿度为55％±5％，适应性喂养5-7天后进行实验，每只动物仅使用一次。

阳性对照药物：

阳性药物A：盐酸氟西汀(百优解)，美国礼来公司，批号：1798A；

阳性药物B：对照例1制备的交泰丸。

药物使用之前用超纯水配制成溶液或混悬液，超声助溶。

实验仪器：Digibehave双画面动物行为视频分析系统2.1版(上海吉量软件科技有限公司)、温度计、多道电子计时器、有机玻璃缸、悬挂钩、动物灌胃器(北京吉安得尔科技有限公司)、万能粉碎机(浙江屹立工贸有限公司，QE-100克)、冷凝管、KDM型电热套、挥发油提取器、圆底烧瓶、电子称等。

所有实验均于上午9时至下午3时之间进行。

1.2实验方法

1.2.1小鼠强迫游泳实验

将ICR小鼠随机分成6组，每组10只，即空白对照组、阳性药对照组(盐酸氟西汀，0.015g/kg)，实施例1制备的中药组合物干粉(即“双提法”制备交泰丸组方)低剂量(1.5g生药/kg)、中剂量(3g生药/kg)、高剂量(6g生药/kg)组；对照例1制备的交泰丸(12g生药/kg)组。药物使用前用超纯水配制成混悬液，超声助溶。

各组均按0.1mL/10g体重灌胃给药，空白对照组给予等量的超纯水，连续给药7天。给药第7天后分别进行行为绝望实验，所有实验均于上午9时至下午3时之间进行。

于末次给药1h后将各组小鼠分别置于高20cm，直径10cm的有机玻璃缸中，有机玻璃缸中放入(25±1)℃的水，高度15cm，每次操作一只，并且使用动物行为视频分析系统记录6min内小鼠的游泳行为，分析后4min内小鼠强迫游泳的累计不动时间(s)。不动时间判断为动物在水中停止挣扎，呈漂浮状态，只有细小的肢体运动以保持头部浮在水面上。

1.2.2小鼠悬尾实验

将ICR小鼠随机分成6组，每组10只，即空白对照组、阳性药对照组(盐酸氟西汀，0.015g/kg)，实施例1制备的中药组合物干粉(即“双提法”制备交泰丸组方)低剂量(1.5g生药/kg)、中剂量(3g生药/kg)、高剂量(6g生药/kg)组；对照例1制备的交泰丸(12g生药/kg)组。药物使用前用超纯水配制成混悬液，超声助溶。

各组均按0.1mL/10g体重灌胃给药，空白对照组给予等量的超纯水，连续给药7天。给药第7天后分别进行行为绝望实验，所有实验均于上午9时至下午3时之间进行。

于末次给药1h后将各组小鼠的尾尖lcm处用胶布固定在挂钩上，使其呈倒悬状态，头部离实验台约15cm，每次操作一只，使用动物行为视频分析系统记录6min内小鼠的绝望行为，分析后4min内的累计不动时间(s)。判断不动的标准为小鼠停止挣扎，呈倒悬垂状态，静止不动。

1.3实验结果

实验数据以平均值±标准偏差表示，使用SPSS18.5软件进行数据统计分析。组间比较使用单因素方差分析(One-WayANOVA)法，P<0.05表示有统计学意义。小鼠行为绝望实验结果如表1所示。

表1行为绝望实验中小鼠的不动时间

注：与空白对照组比较，^*P<0.05，^**P<0.01。

动物在困境中挣扎，企图摆脱该困境，在经过努力仍无法摆脱后，出现间断性不动，显示“行为绝望”状态。动物在该环境中拼命挣扎试图逃跑又无法逃脱，从而提供了一个无可回避的压迫环境，一段时间的实验后，记录处于该环境的动物产生绝望的不动状态过程中的一系列参数，动物表现出的这种典型的“不动状态”，被称之为“行为绝望状态”，这种行为绝望模型与抑郁症类似，而且对绝大多数抗抑郁药物敏感，其药效与临床药效显著相关，所以被广泛用于抗抑郁药物的初选。

由表1的实验结果可知：

1、本发明的中药组合物的低、中、高剂量组与空白对照组比较，不动时间均明显减少，具有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。

2、本发明的中药组合物组与阳性药对照A组比较无明显差异，表明中药组合物在小鼠行为绝望实验中得到的抗抑郁结果与阳性对照药物氟西汀大抵相当，进一步证明了本发明的中药组合物的抗抑郁作用。

3、本发明的中药组合物的低、中、高剂量组与阳性药物对照B组相比较，表明本发明中药组合物与传统煎煮法得到的交泰丸比较，均可以明显缩短小鼠强迫游泳实验及悬尾实验不动时间，但经本发明方法(即“双提取法”)提取的中药组合物的抗抑郁效果更优。通过不同提取方法中药组合物的抗抑郁作用效果比较，传统煎煮法组(12g生药/kg)获得的交泰丸组方的实验结果与本发明方法的低剂量组相当，说明采用本发明方法制备获得的中药组合物在更低的给药剂量时具有更好的抗抑郁作用，本发明方法制备的抗抑郁组合物的抗抑郁效果显著增加，本发明方法中对肉桂挥发油的提取提高了组合物的抗抑郁疗效，肉桂挥发油与肉桂、黄连提取物组合，相互促进，协同增加了抗抑郁作用。分析主要原因是“双提取法”可以更加充分的收集肉桂挥发油，减少黄连、肉桂在提取制备过程中有效成分的损失。

实验例2小鼠开场实验

2.1实验材料

健康ICR小鼠，雄性，体重18-22g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，动物合格证编号：SCXK(京)2012-0001。饲养于天津中医药大学实验动物中心，实验期间保持自由饮水和进食，饲养环境温度为(24±1)℃，湿度为55％±5％，适应性喂养5-7天后进行实验，每只动物仅使用一次。

阳性对照药物：

阳性药物A：盐酸氟西汀(百优解)，美国礼来公司，批号：1798A；

阳性药物B：对照例1制备的交泰丸。

药物使用之前用超纯水配制成溶液或混悬液，超声助溶。

实验仪器：Digibehave双画面动物行为视频分析系统2.1版(上海吉量软件科技有限公司)、动物灌胃器(北京吉安得尔科技有限公司)、开场行为观察箱、万能粉碎机(浙江屹立工贸有限公司，QE-100克)、冷凝管、KDM型电热套、挥发油提取器、圆底烧瓶、电子称等。

2.2实验方法

2.2.1小鼠开放场实验

将ICR小鼠随机分成6组，每组10只，即空白对照组、阳性药对照组(盐酸氟西汀，0.015g/kg)，实施例1制备的中药组合物干粉(即“双提法”制备交泰丸组方)低剂量(1.5g生药/kg)、中剂量(3g生药/kg)、高剂量(6g生药/kg)组；对照例1制备的交泰丸(12g生药/kg)组。

各组均按0.1mL/10g体重灌胃给药，空白对照组给予等量的超纯水，连续给药7天。给药第7天后分别进行小鼠开场实验，所有实验均于上午9时至下午3时之间进行。

于末次给药1h后将各组小鼠分别置于50cm×50cm×40cm敞口箱子(内壁为黑色，底部用白线平均分成25格)中央，使用动物行为视频分析系统记录4min内小鼠的自主活动行为，分析后3min内小鼠穿越横格数量和直立的次数，其中，穿越横格以至少3爪跨过边界计；直立次数以两前爪离开地面计。

每次测试后及时清理动物排泄物。

2.3实验结果与分析

实验数据以平均值±标准偏差表示，使用SPSS18.5软件进行数据统计分析。组间比较使用单因素方差分析(One-WayANOVA)法，P<0.05表示有统计学意义。小鼠开场实验结果如表2所示。

表2小鼠开场实验中穿越横格数和直立次数

表2的实验结果表明：

1、本发明中药组合物各剂量组与空白对照组相比较，小鼠开放场实验中穿越横格数、直立次数基本相同，说明本发明中药组合物不会使小鼠的自主行为活动增加，说明本发明中药组合物的抗抑郁作用不是由于兴奋中枢神经系统而发挥的。

2、本发明的中药组合物组与阳性药对照A组比较无明显差异，说明本发明中药组合物与阳性对照药物氟西汀一致，均不是由于兴奋中枢神经系统而发挥抗抑郁作用的。

3、本发明的中药组合物的低、中、高剂量组与阳性药物对照组B相比较，更加佐证了中药组合物交泰丸不是由于兴奋中枢神经系统而发挥抗抑郁作用的。

Claims (10)

1.一种具有抗抑郁作用的中药组合物的制备方法，其特征是，包括首先分别将黄连、肉桂与水混匀后，进行加热回流提取，获得黄连药液、肉桂药液；水蒸汽蒸馏获得肉桂挥发油；然后将黄连药液、肉桂药液、肉桂挥发油混匀后，依次进行浓缩处理、干燥处理，即得。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征是，所述黄连与肉桂的重量份配比为5-20:1。

3.一种具有抗抑郁作用的中药组合物的制备方法，其特征是，包括如下顺序进行的步骤：

1)按照如下重量份配比备料

黄连200肉桂10-40

2)制备黄连药液

将黄连与水混合后，加热，进行回流提取2-3次，过滤、合并回流提取液，制得黄连药液；

3)制备肉桂药液、肉桂挥发油

将肉桂与水混合后，加热，进行回流提取2-3次，收集挥发油；以及过滤热回流提取液并合并回流提取液，制得肉桂药液和肉桂挥发油；

4)将黄连药液、肉桂药液、肉桂挥发油混合均匀后，依次进行浓缩处理、干燥处理，即得。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征是，步骤1)中所述原料的重量分配比为：黄连200肉桂20。

5.如权利要求3或4所述的制备方法，其特征是，步骤2)中所述第一次回流提取过程中水的重量与黄连的重量之比为8-12:1；第二次回流提取过程中水的重量与黄连的重量之比为6-10:1；第三次回流提取过程中水的重量与黄连的重量之比为6-10:1。

6.如权利要求3或4所述的制备方法，其特征是，步骤3)中所述第一次回流提取过程中水的重量与肉桂的重量之比为8-12:1；第二次回流提取过程中水的重量与肉桂的重量之比为6-10:1；第三次回流提取过程中水的重量与肉桂的重量之比为6-10:1。

7.如权利要求3或4所述的制备方法，其特征是，步骤2)中所述第一次回流提取时间为150-200min；第二次回流提取时间为80-120min；第三次回流提取时间为40-60min。

8.如权利要求3或4所述的制备方法，其特征是，步骤3)中所述第一次回流提取时间为150-200min；第二次回流提取时间为80-120min；第三次回流提取时间为40-60min。

9.如权利要求3或4所述的制备方法，其特征是，步骤4)中所述浓缩处理的温度为≤95℃；所述干燥处理的温度为≤75℃。

10.一种具有抗抑郁作用的中药组合物，其特征是，按照如权利要求1-9任意所述方法制备而成。