CN103211756A - 一种兽用长效盐酸多西环素注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种兽用长效盐酸多西环素注射液及其制备方法，由主药盐酸多西环素，复方溶剂甘油甲缩醛、α-吡咯烷酮、丙二醇，缓释剂聚乙烯吡咯烷酮K₃₀~K₁₇，pH值调节剂乙醇胺或苯甲醇组成；具体是将甘油甲缩醛、α-吡咯烷酮和一部分丙二醇投入配料罐中，加热至40~60℃，边搅拌边加入聚乙烯吡咯烷酮，然后在搅拌中加入盐酸多西环素，充分搅拌均匀后通水冷却至30~40℃；用乙醇胺或苯甲醇调节pH值至3.0~5.0；用丙二醇补充至全量，拌均，经过滤、充氮气灌封于棕色玻璃瓶内，100℃流通蒸汽灭菌，灯检、印包即得；该注射液含量为1%~40.0%，具有缓释和长效作用，二日打一次针，不但会省人工省费用，也会减少捉猪打针增多的应激，有利病猪康复。

Description

一种兽用长效盐酸多西环素注射液及其制备方法

技术领域

    本发明涉及一种兽用四环素类注射剂及其制备方法，具体涉及一种兽用长效盐酸多西环素注射液及其制备方法，属于兽药制剂技术领域。

背景技术

盐酸多西环素（Doxycycline Hyclate），又名盐酸脱氧土霉素，是土霉素6位上脱氧而制成的半合成四环素类抗生素，主要用于治疗禽畜的支原体病、大肠杆菌病、沙门氏菌病、巴氏杆菌病、附红细胞体病等。目前上市的注射液有2.5%（pH4.0~6.0）和5%、10%（pH2.5~4.5）共3个含量规格，均为水溶液制剂，肌内注射，一次量，每1kg体重，猪5~10mg，一日1次，连用2~3日（中华人民共和国农业部兽药评审中心2012年7月印发的《兽药国家标准汇编》第三册）。此外，CN101062014A公开了一种兽用复方盐酸多西环素注射液及其制备工艺，为复方制剂，目的是扩大抗菌谱；CN 101301268A公开了一种兽用盐酸多西环素注射液的组成及其制备工艺，目的是解决制剂的稳定性问题，均未涉及缓释、长效问题。

     我国养猪场普遍流行猪支原体肺炎（喘气病），盐酸多西环素注射液适合用来治疗此病。但是，猪支原体肺炎是一种慢性病，需连续用药5~7日，上述盐酸多西环素注射液每日注射一次，则需连续打针5~7次。如果能研制出一种长效盐酸多西环素注射液延长多西环素在猪体内的半衰期，使之长效，比如二日打一次针，会省人工省费用，也会减少捉猪打针增多的应激。

针对以上现象，发明人反复探索，研究开发一种兽用长效盐酸多西环素注射液组成及其制备方法，该注射液具有缓释作用。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术中的不足，提供一种新的兽用长效盐酸多西环素注射液组成及其制备方法，含量为1%~40.0%，具有缓释和长效作用。经过用FDA方法做60日的热稳定、光稳定加速破坏试验，结果表明：含量、色级均符合规定，产品质量稳定。产品经用猪做药动学试验，证实其肌内注射在猪体内的有效药峰浓度维持时间达42h，比按中华人民共和国农业部兽药评审中心2012年7月印发的《兽药国家标准汇编》第三册所载的质量标准制备的盐酸多西环素注射液（下称国标盐酸多西环素注射液）的22h，长近1倍；加上抗菌药有10%~20%时间的抗菌后效应，两者可以分别为2日注射1次和1日注射1次。

按本发明制备的长效盐酸多西环素注射液2日注射1次，每1kg体重20mg，与按国标制备的盐酸多西环素注射液1日注射1次，每1kg体重10mg，经4日治疗猪支原体肺炎对比试验结果：4日内用药总量相等，两者对猪支原体肺炎的疗效同样好，但前者能省工和减少捉猪打针带来的应激，有利病猪康复。

为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案是：

一种兽用长效盐酸多西环素注射液，由以下组分组成：

主药：盐酸多西环素（按有效成分计）             1%~40%

缓释剂：聚乙烯吡咯烷酮（K₃₀~K₁₇）（按重量计）    1%~10% 

复方溶剂：（按容积计）甘油甲缩醛                 20%~40%

α-吡咯烷酮                            10%~30%

丙二醇                                20%~40%

pH值调节剂乙醇胺或苯甲醇，将注射液pH值调节至3.0~5.0；

一种用于制备上述的兽用长效盐酸多西环素注射液的方法，包括如下步骤：

（1）将甘油甲缩醛、α-吡咯烷酮和一部分丙二醇投入配料罐中，加热至40~60℃，边搅拌边加入聚乙烯吡咯烷酮（K₃₀~K₁₇），然后在搅拌中加入盐酸多西环素，继续搅拌20~30分钟，充分搅拌均匀后通水冷却至30~40℃；

（2）用乙醇胺或苯甲醇调节pH值至3.0~5.0；用丙二醇补充至全量，拌均。

（3）经过滤、充氮气灌封于棕色玻璃瓶内，100℃流通蒸汽灭菌，灯检、印包即得；

所述的灌封于棕色玻璃瓶内，也可以选用白色玻璃瓶用黑色纸包裹，避光保存。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

（1）通过添加聚乙烯吡咯烷酮使制备的长效盐酸多西环素注射液，含量为1%~40.0%，有缓释作用；

（2）不同于以前的盐酸多西环素注射液，用本方法得到的长效盐酸多西环素注射液能延长多西环素在猪体内的半衰期，使之长效；治疗猪支原体肺炎等疾病，猪用进行深肌肉注射时，这种长效盐酸多西环素注射液的有效药峰浓度比此前的盐酸多西环素注射液有效药峰浓度保留时间长1倍左右，2日注射一次与用现有技术制备的盐酸多西环素注射液一日注射1次有相同疗效；

（3）因该药物具有长效作用，如二日打一次针，不但会省人工省费用，也会减少捉猪打针增多的应激，有利病猪康复。

对于上述发明的组成及制备方法，我们进行了生产实践，结果如下：

2012年11月，我们在广东省的湛江市保生皇药业有限公司的兽用水针剂车间按配方先后生产三个批次的长效盐酸多西环素注射液，每个批次20000ml，用棕色玻璃安瓿充氮气灌封，每支10ml，标示含量为10%，含量为标示含量的96.6%、98.5%、98.3%；pH值分别为3.9、3.9、4.0，每个批号得1800多支；

1、配方

2、制备方法

（1）将甘油甲缩醛8000ml、α-吡咯烷酮6000ml、丙二醇4000ml投入配料罐中，加热至50℃，边搅拌边加入聚乙烯吡咯烷酮，然后在搅拌中加入盐酸多西环素，继续搅拌20~30分钟，使搅拌均匀，通水冷却至35℃；

（2）用乙醇胺调节pH值至3.0~5.0；用丙二醇补充至全量，拌均。

（3）经过滤、充氮气灌封于棕色玻璃安瓿中，100℃流通蒸汽灭菌，灯检、印包，即得。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围。

实施例1

（1）将甘油甲缩醛400ml、α-吡咯烷酮300ml、丙二醇100ml投入玻璃配料容器中，加热至50℃，边搅拌边加入聚乙烯吡咯烷酮50g，然后在搅拌中加入效价为94.36 iu /mg的盐酸多西环素53g，继续搅拌20分钟，使搅拌均匀；

（2）通水冷却至35℃；用乙醇胺调节pH值至3.0；再用丙二醇补充至全量1000ml。

（3）经过滤、充氮气灌封于棕色玻璃安瓿中，100℃流通蒸汽灭菌，灯检，印包，即得含量为5%的长效盐酸多西环素注射液。

实施例2

（1）将甘油甲缩醛300ml、α-吡咯烷酮200ml、丙二醇100ml投入玻璃配料容器中，加热至50℃，边搅拌边加入聚乙烯吡咯烷酮100g，然后在搅拌中加入效价为94.36 iu /mg的盐酸多西环素106g，继续搅拌30分钟，使搅拌均匀；

（2）通水冷却至35℃；用乙醇胺调节pH值至5.0；再用丙二醇补充至全量1000ml。

（3）经过滤、充氮气、灌封于棕色玻璃安瓿中，100℃流通蒸汽灭菌，灯检，印包，即得含量为10%的长效盐酸多西环素注射液。

实施例3

（1）将甘油甲缩醛200ml、α-吡咯烷酮100ml、丙二醇200ml投入配料罐中，加热至50℃，边搅拌边加入聚乙烯吡咯烷酮75g，然后在搅拌中加入效价为94.36 iu /mg的盐酸多西环素265g，继续搅拌25分钟，使搅拌均匀；

（2）通水冷却至35℃；用乙醇胺调节pH值至4.0；再用丙二醇补充至全量1000ml。

（3）经过滤、充氮气灌封于棕色玻璃安瓿中，100℃流通蒸汽灭菌，灯检，印包，即得含量为25%的长效盐酸多西环素注射液。

实施例4

长效盐酸多西环素注射液的稳定性试验

为验证长效盐酸多西环素注射液的稳定性，我们用按本发明组成及其制备方法制备的长效盐酸多西环素注射液和按国标制备的盐酸多西环素注射液的样品按FDA的方法做60日热稳定和光稳定试验。结果见下表：

结果表明：虽然盐酸多西环素对光敏感，但用棕色安瓿充氮灌封，含量较稳定；按国标生产的盐酸多西环素注射液含量下降是析出结晶所致。

实施例5

药动学试验

为了验证按上述配方和制备工艺制得的盐酸多西环素注射液肌内注射在猪体内是否长效，我们做了如下药动学试验：

1、试验材料

（1）长白三元杂交肉猪4头，体重41~45kg，雄性和雌性肉猪各2头，试验开始前统一喂养3日；

（2）按中华人民共和国农业部兽药评审中心2012年7月印发的《兽药质量标准汇编》（第三册）的质量标准自制10%盐酸多西环素注射液，检测含量为标示含量的97.6%（检测方法为《中国兽药典》2010年版一部的“微生物检定法” ）；

（3）按本发明组成及其制备方法自制10%长效盐酸多西环素注射液，含量为标示含量的96.6%（检测方法为《中国兽药典》2010年版一部的“微生物检定法”）；

（4）盐酸多西环素对照品为中国兽医药品监察所发放，批号K0131001；                          

（5）仪器为十万分之一分析天平、高效液相色谱仪等，均经本地质量监督部门捡定合格。

2、试验方法

为了准确判定上述两种制剂对在猪体内猪肺炎支原体的有效药峰浓度维持时间，本试验开始前，我们在实验室对按国标制造的盐酸多西环素注射液和按本发明组成及其制备方法制造的长效盐酸多西环素注射液分别做了体外MIC₉₀预试验，结果：

按国标制造的盐酸多西环素注射液对猪肺炎支原体的MIC₉₀浓度为0.22μg/ml；按本发明组成及制备工艺自制的长效盐酸多西环素注射液对同株猪肺炎支原体的MIC₉₀浓度为0.228μg/ml，

（1）试验分2组，随机选雌、雄性肉猪各1头为一个组。

①组肌肉注射按上述国标制造的盐酸多西环素注射液，为对照组。

②组肌肉注射按本发明组成及其制备方法制造的长效盐酸多西环素注射液，为试验组。

（2）称体重后，深肌肉注射（耳根后），一次量，每1kg体重（以多西环素计），均为20mg（20000Ui）。

（3）注射后第40分钟、第60分钟、第80分钟、第100分钟、第2小时、第12小时、第20小时、第22小时、第24小时和第32小时、第36小时、第38小时、第40小时、第42小时、第44小时、第46小时、第48小时、第60小时、第72小时、第84小时、第96小时、第108小时、第120小时、第132小时，分别抽血分离血清，高效液相法测定盐酸多西环素含量。

3、结果

国标盐酸多西环素注射液和本发明工艺制备的长效盐酸多西环素注射液分别单次肌内注射后，其有效药峰浓度达峰时间、最高药峰浓度、有效药峰浓度（0.22μg/ml和0.228μg/ml）保留时间，药物清除时间，见下表：

上述试验结果表明：按本发明组份和工艺制备的长效盐酸多西环素注射液的有效药峰浓度达峰时间比国标盐酸多西环素注射液有效药峰浓度达峰时间迟20分钟；最高药峰浓度2.750μg/ml，比国标盐酸多西环素注射液的3.018μg/ml低些；但维持有效药峰浓度时间长约1倍，符合长效缓释制剂的特性；

长效盐酸多西环素注射液有效药峰浓度保留时间为42小时，而按国标制造的盐酸多西环素注射液，有效药峰浓度保留时间为22h，两者比较，前者比后者长达近1倍。按本发明组成及其制备工艺制造的长效盐酸多西环素注射液达到了长效的目的。加上其抗菌后效应时间，实现2日打1次针有效的研制目标。

实施例6

应用实践

为了进一步验证按本发明组成及其制备工艺制造的长效盐酸多西环素注射液在兽医临床应用的效果，我们于2012年11月13日至12月16日在广东省湛江市某猪场做了对自然发病的猪支原体肺炎的治疗试验，同猪场病猪81头，同栏有疑似临床症状的病猪随机分组，试验组41头，用按本发明组成及其制备工艺制造的长效盐酸多西环素注射液肌内注射，每1kg体重20mg，二日1次，连用2次；对照组40头，用按国标制造的盐酸多西环素注射液肌内注射，每1kg体重10mg，一日1次，连用4次，4日内两组每1kg体重的用药量相等。结果，试验组治愈39头，治愈率为95.2%；死亡1头，为2.4%；转为慢性（呼吸从每分钟85次降为41次）1头，为2.4%；对照组治愈37头，治愈率为92.5%；死亡2头，为5.0%；转为慢性1头，为2.5%；

结果表明，试验组和对照组总用药总量一致，试验组和对照组的治愈率在统计学上无显著差异，但详细分析试验组疗效好一些。

Claims (4)

1.一种兽用长效盐酸多西环素注射液，其特征在于：由以下组分组成：

主药：盐酸多西环素（按有效成份计）               1%~40%

缓释剂：聚乙烯吡咯烷酮（K₃₀~K₁₇）（按重量计）     1%~10% 

复方溶剂：（按容积计）甘油甲缩醛                  20%~40%

α-吡咯烷酮                             10%~30%

丙二醇                                 20%~40%

pH值调节剂，乙醇胺或苯甲醇适量，将注射液pH值调节至3.0~5.0。

2.根据权利要求1所述的一种兽用长效盐酸多西环素注射液，其特征在于：所述的pH值调节剂是指乙醇胺或苯甲醇。

3.一种用于制备权利要求1所述的兽用长效盐酸多西环素注射液的方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）将甘油甲缩醛、α-吡咯烷酮和一部分丙二醇投入配料罐中，加热至40~60℃，边搅拌边加入聚乙烯吡咯烷酮（K₃₀~K₁₇），然后在搅拌中加入盐酸多西环素，继续搅拌20~30分钟，充分搅拌均匀后通水冷却至30~40℃；

（2）用乙醇胺或苯甲醇调节pH值至3.0~5.0；用丙二醇补充至全量，拌均；

（3）经过滤、充氮气灌封于棕色玻璃瓶内，100℃流通蒸汽灭菌，灯检、印包即得。

4.根据权利要求2所述的一种兽用长效盐酸多西环素注射液的制备方法，其特征在于：步骤（3）所述的灌封于棕色玻璃瓶内，或选用白色玻璃瓶用黑色纸包裹，避光保存。