CN103193738B

CN103193738B - 炎琥宁结晶及其用途

Info

Publication number: CN103193738B
Application number: CN201310130425.XA
Authority: CN
Inventors: 赵东明; 方专; 王敬; 江威; 张莲莲; 董国明
Original assignee: CHENGDU TIANTAISHAN PHARMACEUTICAL Co Ltd
Current assignee: CHENGDU TIANTAISHAN PHARMACEUTICAL CO LTD
Priority date: 2013-04-16
Filing date: 2013-04-16
Publication date: 2014-08-20
Anticipated expiration: 2033-04-16
Also published as: CN103193738A

Abstract

本发明涉及炎琥宁结晶及其用途。具体地说，本发明涉及下式化合物：其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约10.60°、约12.76°、约14.58°、约15.66°处有衍射峰。本发明化合物具有良好的药学性能。

Description

炎琥宁结晶及其用途

技术领域

本发明属医药技术领域，涉及一种炎琥宁的结晶，该炎琥宁结晶的制法以及它的医药用途。

背景技术

穿心莲为爵床科植物穿心莲(Andrographispaniculata(Burm.F.)Nees)的干燥地上部分，秋初茎叶茂盛时采割，晒干。穿心莲又名春莲秋柳，一见喜，榄核莲、苦胆草、金香草、金耳钩、印度草，苦草等。有清热解毒、消炎、消肿止痛作用。主治细菌性痢疾、尿路感染、急性扁桃体炎、肠炎、咽喉炎、肺炎和流行性感冒等，外用可治疗疮疖肿毒、外伤感染等。主产于广东、福建等省，华中、华北、西北等地也有引种。该品种己收载于中华人民共和国2010版药典一部。

已知穿心莲中包含以下化学组成：穿心莲内酯(又名穿心莲乙素，Andrographolide)、脱氧穿心莲内酯(又名穿心莲甲素，deoxyandrographolide)、新穿心莲内酯(又名穿心莲丙素，Neoandrographolide)、脱水穿心莲内酯(又名穿心莲丁素，deoxydidehydroandrographolide)。此外人们还将这些化合物经结构改造制备成它们的衍生物，例如：

穿心莲内酯—(脱羟、脱氢)—>脱水穿心莲内酯—(双琥珀酸酯化、成碱金属盐)—>穿琥宁(半K盐)或炎琥宁(K-Na盐)，它们的化学结构区别如下：

以穿心莲内酯(Andrographolide)及其衍生物例如穿琥宁或炎琥宁为代表药物具有清热解毒、凉血消肿等功能。是治疗上呼吸道感染、急性菌痢、病毒性感冒等常用穿心莲制剂的主要有效成分。20世纪70年代初，国内开始将穿心莲的茎叶或全草提取后，制成了穿心莲片等普通口服制剂。普通制剂对细菌、病毒虽然县有一定的抑制作用，但因其主要有效成分不溶于水而威力不足。

由于穿心莲内酯是从穿心莲中提取的有效成分，单体纯度高，产品质量和药理作用较穿心莲更具有优势。目前SFDA己批准生产穿心莲内酯片剂、胶囊、软胶囊、滴丸等口服剂型。其缺点是穿心莲内酯为二萜类内酯化合物，难溶于水，通常仅能口服给药。针对临床上病毒感染急症的需求，将其结构中引入不同的亲水基团，增强其水溶性制备成注射剂，提高疗效。在我国，自七十年代开始对穿心莲内酯水溶性衍生物进行研究，开发了一系列注射剂，其中最主要产品为穿琥宁和炎琥宁。

穿琥宁是穿心莲内酯经酯化、脱水、成盐而制成的脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯单钾盐；炎琥宁则是由穿琥宁与氢氧化钠或碳酸（氢）钠的反应而得的脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯钠钾盐，或者由脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯与碳酸（氢）钾和碳酸（氢）钠共同反应而得；临床上广泛用于治疗高热、呼吸道感染、儿童秋季腹泻、流行性腮腺炎等病毒性疾病，为中医院急诊科（室）必备纯中药制剂之一，打破了中药只能用来治疗慢性病的传统说法。

目前炎琥宁己广泛应用于临床，与此同时其不良反应时有发生。据国家药品不良反应监测中心近几年通报，有关穿琥宁或炎琥宁注射剂的主要不良反应为过敏性反应和血小板减少。具体分析不良反应产生的主原因有(1)个体差异（过敏性体质）造成；(2)穿心莲内酯稳定性差，容易发生内酯的水解、开环、异构化以及不饱和键的氧化。(3)初始原料（穿心莲内酯）的纯度不高，主要杂质为高分子植物蛋白、穿心莲内酯水解、氧化产物以及色素等，文献报道用活性炭脱色、用分子截流量5000的超滤膜进行超滤后可将小鼠单次静脉给药的LD50从757mg/kg提高到910mg/kg；(4)穿心莲内酯在酯化、脱水的过程中因生产工艺不稳定而造成产品质量不稳定。综上所述，虽然中药注射剂这一特性决定了穿琥宁或炎琥宁等品种或多或少的不良反应是不可避免，但提高产品质量纯度即可大幅度提高产品临床安全性也是一个不争的事实。

因此，本领域技术人员期待有新的方法为临床提供良好性能的穿心莲内酯衍生产品例如炎琥宁。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的方法为临床提供良好性能的穿心莲内酯衍生产品例如炎琥宁。

具有良好性能的炎琥宁新晶型以便有利于制剂的制备，使所得制剂更有益的应用于临床，本发明是通过以下方式实现的。

本发明第一方面提供了下式化合物：

其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约10.60°、约12.76°、约14.58°、约15.66°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，该化合物为炎琥宁，其分子式C₂₈H₃₄KNaO₁₀，分子量592.7，化学名为：14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯-3,19-二琥珀酸半酯钾钠盐，例如其已由国家食品药品监督管理局批准上市，例如其已由国家食品药品监督管理局批准成都天台山制药有限公司生产其原料药(国药准字H20046002)和粉针剂(例如国药准字H20046005)。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约10.60°、约12.76°、约14.58°、约15.66°、约25.24°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约10.60°、约12.76°、约14.58°、约15.66°、约18.70°、约20.34°、约25.24°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在10.60°、12.76°、14.58°、15.66°各角度处的±0.1°、±0.05°、±0.025°、或±0.02°的范围有衍射峰。在一个实施方案中，所述化合物使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在10.60°±0.1°、12.76°±0.1°、14.58°±0.1°、15.66°±0.1°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在10.60°、12.76°、14.58°、15.66°、25.24°各角度处的±0.1°、±0.05°、±0.025°、或±0.02°的范围有衍射峰。在一个实施方案中，所述化合物使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在10.60°±0.1°、12.76°±0.1°、14.58°±0.1°、15.66°±0.1°、25.24°±0.1°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在10.60°、12.76°、14.58°、15.66°、18.70°、20.34°、25.24°各角度处的±0.1°、±0.05°、±0.025°、或±0.02°的范围有衍射峰。在一个实施方案中，所述化合物使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在10.60°±0.1°、12.76°±0.1°、14.58°±0.1°、15.66°±0.1°、18.70°±0.1°、20.34°±0.1°、25.24°±0.1°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，具有基本上如图1所示的粉末X-射线衍射图谱。

根据本发明第一方面的化合物，其基本上是具有本发明所述衍射特征的炎琥宁结晶。

根据本发明第一方面的化合物，其为分子式C₂₈H₃₄KNaO₁₀表示的炎琥宁即14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯-3,19-二琥珀酸半酯钾钠盐或者是炎琥宁无水物。

根据本发明第一方面的化合物，其经60°C干燥至恒重后，经容量滴定法测定的水分含量低于1.5%、特别是低于1.2%、特别是低于1.0%。

根据本发明第一方面的化合物，其钠钾离子比例在0.95～1.25范围内，特别是在0.95～1.15范围内。

进一步地，本发明第二方面提供了制备本发明第一方面任一项所述化合物即炎琥宁结晶的方法，其包括如下步骤：(a)将穿琥宁用3～5倍量的40～60%乙醇溶解；(b)加入碳酸氢钠溶液搅拌使反应；(c)将反应完全后的溶液在70～90°C喷雾干燥，即得。

根据本发明第二方面的方法，其中步骤(a)中乙醇是45～55%乙醇，例如50%乙醇。

根据本发明第二方面的方法，其中步骤(a)中将穿琥宁用3.5～4.5倍量的乙醇溶解。在此处，乙醇量以体积升表示的量，穿琥宁量用kg表示的量；或者乙醇量以体积ml表示的量，穿琥宁量用克表示的量，例如穿琥宁为1kg，而乙醇用量为4升，则乙醇量是穿琥宁量的4倍。

根据本发明第二方面的方法，其中步骤(b)中穿琥宁与碳酸氢钠的摩尔比为1：(1.0～1.2)，例如二者的摩尔比为1：(1.0～1.1)。

根据本发明第二方面的方法，其中步骤(b)中碳酸氢钠溶液中的碳酸氢钠浓度为5～15%，例如8～12%。

根据本发明第二方面的方法，其中步骤(b)中碳酸氢钠溶液系用40～60%乙醇为溶剂配制，例如用45～55%乙醇，例如50%乙醇配制。

根据本发明第二方面的方法，其中步骤(b)反应完毕后，还向反应液中添加乙酸，所述穿琥宁与乙酸的摩尔比为100：(0.2～1)。

在本发明中提及乙醇时，如未特别说明其浓度，是指98%的乙醇。

进一步地，本发明第三方面提供了一种药物组合物，其中包含本发明第一方面的具有特定晶性的化合物和药学可接受的载体。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是口服制剂或者注射制剂。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂(包括注射液和冷冻干燥粉针剂)、混悬剂、丸剂。

本发明第四方面提供了本发明第一方面的具有特定晶性的化合物炎琥宁在制备用于治疗或预防病毒性肺炎、病毒性上呼吸道感染的药物中的用途。

本发明的任一方面的任一实施方案，可以与其它实施方案进行组合，只要它们不会出现矛盾。此外，在本发明任一方面的任一实施方案中，任一技术特征可以适用于其它实施方案中的该技术特征，只要它们不会出现矛盾。

下面对本发明作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

在本发明中，“%”的含义可根据具体使用环境而定，特别是其具有如2010年版中国药典二部凡例中“计量”项下第二十八条(4)款所述含义。

在本发明中，如未另外说明，确定各种物料中炎琥宁的含量时，采用以下【HPLC法A】进行测定；在确定各种物料中有关物质含量时，以及确定这些物料中的色谱纯度时，采用以下【HPLC法B】进行测定。

【HPLC法A】：

照中国药典2010年版二部附录VD高效液相色谱法测定；

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05%磷酸二氢钾溶液(磷酸调pH2.5±0.05)-甲醇(40:60)为流动相，检测波长为251nm，理论板数按脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯计算不低于3000；

测定法：取供试品(例如炎琥宁或者相关物料例如包含炎琥宁的药物组合物)适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含炎琥宁0.1mg的溶液，摇匀，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品，同时测定，按外标法以峰面积计算供试品中脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯(C₂₈H₃₆O₁₀)的含量，与1.1128相乘，即得供试品中炎琥宁的含量。

【HPLC法B】：

照中国药典2010年版二部附录VD高效液相色谱法测定；

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.1%磷酸二氢钾溶液(磷酸调pH2.5±0.05)为流动相A，乙腈为流动相B，流速为1.0ml/min，柱温35°C，检测波长为251nm，按下表进行线性梯度洗脱：

时间(分钟)	流动相A(%)	流动相B(%)
			0	65	35
10	65	35
			40	50	50
52	23	77
			53	65	35
62	65	35

供试品溶液的配制：取供试品(例如炎琥宁或者相关物料例如包含炎琥宁的药物组合物)适量，精密称定，加混合溶剂(流动相A:流动相B=60:40)溶解并稀释制成每1ml中含炎琥宁0.4mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，用稀释剂制成每1ml中含炎琥宁4μg的溶液，作为对照溶液；

取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高约为满量程的20%；

再精密量取供试品溶液与对照溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；

读取对照溶液色谱图中主成分峰的峰面积，以及供试品溶液色谱图中主成分峰和各杂质峰的峰面积；

计算单一杂质相对于主成分的含量以及总杂质相对于主成分的含量，各单一杂质相对于主成分的含量的和为总杂质含量，并用面积归一化法计算供试品的色谱纯度，其中用下式计算某一杂质相对于主成分的含量：

一般而言，作为制药原料用的炎琥宁，其中炎琥宁的含量通常应在98%以上，而其中单个杂质的含量应小于1.0%，总杂质的含量应小于2.0%。

一般而言，作为一种临床使用的药品，炎琥宁药物组合物例如其冷冻干燥粉针剂，其中炎琥宁的含量通常应在标示量的90～110%范围内，而其中单个杂质的含量应小于2.0%，总杂质的含量应小于4.0%(均相对于其中的炎琥宁的含量而言)。

此外，在本发明中，如未另外说明，采用中国药典2010年版二部附录VIIIM水分测定法中的第一法A所述容量滴定法，测定炎琥宁原料中的水分含量。该方法系费休氏法，其可以测得样品中的结晶水和非结晶水。已有文献报道炎琥宁中含有一个结晶水，即分子式为C₂₈H₃₄KNaO₁₀·H₂O，结晶水的理论含量为2.95%。通常而言，在经60°C干燥至恒重的样品中，如果经上述容量滴定法测定的水分含量为在2.5～4%范围内时，通常而言认为其为一个结晶水的炎琥宁，即分子式为C₂₈H₃₄KNaO₁₀·H₂O；而如果水分含量低于理论结晶水含量的约50%以下，例如低于1.5%、例如低于1.2%、低于1.0%时，通常而言认为其为无结晶水的炎琥宁，即分子式为C₂₈H₃₄KNaO₁₀。已经发现，本发明的炎琥宁系无水物，其经60°C干燥至恒重后，经上述容量滴定法测定的水分含量低于1.5%、特别是低于1.2%、特别是低于1.0%。因此，在本发明的任一实施方案中，本发明的化合物为分子式C₂₈H₃₄KNaO₁₀表示的炎琥宁即14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯-3,19-二琥珀酸半酯钾钠盐。另外，在本发明的任一实施方案中，本发明的化合物经60°C干燥至恒重后，经容量滴定法测定的水分含量低于1.5%、特别是低于1.2%、特别是低于1.0%。

此外，在本发明中，如未另外说明，采用以下方法测定供试品(例如炎琥宁原料或其它物料例如药物组合物)中的钠钾离子比例：

对照品溶液的配制：取经105°C干燥至恒重的氯化钾，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中含氯化钾18μg的溶液，作为对照品溶液I；另取经105°C干燥至恒重的氯化钠，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中含氯化钠20μg的溶液，作为对照品溶液II；

供试品溶液的配制：取供试品约25mg，精密称定，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取3ml，置25ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

测定法：分别精密量取15ml、20ml、25ml的对照品溶液I，分别置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，将此溶液与供试品溶液照原子吸收分光光度法(中国药典2010年版二部附录IV D第一法)，在767nm波长处测定；另分别精密量取10ml、15ml、20ml的对照品溶液II，分别置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，将此溶液与供试品溶液照原子吸收分光光度法(中国药典2010年版二部附录IV D第一法)，在589nm波长处测定，计算供试品中钠、钾离子的比例。

在本发明中，已经发现，本发明获得的炎琥宁其钠钾离子比例在0.95～1.25范围内，特别是在0.95～1.15范围内。因此，在本发明的任一实施方案中，本发明的化合物中其钠钾离子比例在0.95～1.25范围内，特别是在0.95～1.15范围内。

本发明药物组合物中使用的“药学可接受的载体”可以是药物制剂领域中任何常规的载体。特定载体的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如，可以作为药学可接受的载体包括药学领域常规的稀释剂、载体、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体和润滑剂等。必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。

本发明的药物组合物可以制成片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂、注射乳剂(注射用无菌粉针)等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。

现已上市销售的穿心莲内酯药剂(例如，水针剂、粉针剂等)，其具有抗病毒性肺炎、病毒性上呼吸道感染的效果，可用于治疗或预防病毒性肺炎、病毒性上呼吸道感染。本发明提供一种新的炎琥宁结晶，其中杂质含量低，而且出人意料的是其中的杂质在样品长期保存过程中增加缓慢，显示该结晶作为药物原料具有良好的稳定性。

本文所用的术语“基峰”是指某一X射线衍射图中强度最大的峰，其峰强度可以用Io表示，其它峰相对于该基峰的相对强度(%)可用I/Io表示。

本文所用的术语“约”，例如在用于修饰某一数值或数值范围时，是指包括该数值或数值范围以及该数值或数值范围的本领域技术人员可接受的误差范围，例如该误差范围为±10%、±5%、±2%、±1%、±0.5%等。例如在提及本发明化合物的结晶型具有2θ角“约10.60°”的衍射峰时，是指该衍射峰可以在该10.60°的本领域技术人员可接受的误差范围，例如±1%的范围内，即该“10.60°”的衍射峰”可以在10.60°-0.1060°至10.60°+0.1060°的范围内。

附图说明

图1：本发明实施例制备的炎琥宁结晶的粉末X射线衍射图，图中横坐标为2θ，以度(°)为单位，纵坐标为峰的强度(cps)，图中各峰标示的是其d值，例如d值为5.654的峰为最强峰(可称为基峰)。需要说明的是，为与横坐标轴2θ角一致，在本发明说明书中，提及各峰时通常可以用2θ表示。

图2是制备本发明炎琥宁中使用到的喷雾干燥过程的程序性描述

具体实施方式

通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述,然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解,在不背离本发明的精神和范围的前提下,可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。

粉末X射线衍射分析方法：

仪器型号：粉末X衍射仪，Rigaku Dmax/2400

实验条件：CuKα辐射，石墨单色器，40KV，100MA，2θ扫描范围：3.0-40°，扫描速度4°/分，步长：0.01°

扫描方式：连续扫描

狭缝设置:出射slit DS：1/2°防散射slit：SS1/2°；RS:0.3mm。

穿琥宁的制备：

本发明制备炎琥宁所用的原料为穿琥宁，其可通过现有技术方法制备得到，例如：

穿琥宁制备例1：参照CN102617527A(中国专利申请号201210051312.6，湖北荷普)说明书[0048]至[0050]段的方法制备得到。

穿琥宁制备例2：参照CN102617527A(中国专利申请号201210051312.6，湖北荷普)说明书[0054]至[0056]段的方法制备得到。

此外，还可使用市售穿琥宁原料，例如在本发明的下面的一些实例中，使用到的市售穿琥宁为成都天台山制药有限公司生产的穿琥宁(国药准字H51023411)。

以下制备炎琥宁的实例中，每批次投料量为20mol穿琥宁的量。

实施例1：制备炎琥宁

制法：(a)将穿琥宁制备例1所得穿琥宁用4倍量的50%乙醇溶解；(b)加入用50%乙醇为溶剂配制的浓度为10%的碳酸氢钠溶液搅拌使反应(穿琥宁与碳酸氢钠的摩尔比为1：1.05)；(c)向反应完全后的溶液中添加乙酸(其摩尔量为穿琥宁摩尔量的0.5%)，再在80°C喷雾干燥至水分含量低于1.0，即得炎琥宁试样，记为Ex1。

该试样Ex1的粉末X射线衍射测试结果如图1。结果显示，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，该结晶在约10.60°、约12.76°、约14.58°、约15.66°处有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，该结晶在约10.60°、约12.76°、约14.58°、约15.66°、约25.24°处有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，该结晶在约10.60°、约12.76°、约14.58°、约15.66°、约18.70°、约20.34°、约25.24°处有衍射峰。包括这些特征峰的主要衍射峰的2θ值和d-值罗列如下：

No.	2θ(度)	d-值
			1	10.60	8.3390
2	12.76	6.9318
			3	14.58	6.0704
4	15.66	5.6541
			5	18.70	4.7412
6	20.34	4.3625
			7	25.24	3.5256

结合图2说明，以上喷雾干燥工艺描述如下：以正常的直流喷雾干燥模式使用工业规模喷雾干燥器(Niro制药喷雾干燥器FSD12.5CC)。使用压力喷嘴系统(SprayingSystems Maximum Free Passage SK-MFP系列种类，孔口54，中心21)。具有溶剂兼容的/抗性的垫圈的高性能压力泵将原料溶液通过雾化器泵入喷雾干燥罐。惯性旋风分离器将产物与过程气体和溶剂蒸汽分离开。过滤袋然后收集未被旋风分离器分离的细颗粒。冷凝得到的气体，以去除过程溶剂，并再循环回加热器和喷雾干燥器（封闭循环）。图2是喷雾干燥过程的概要图。将得到的产物转移至双圆锥真空干燥器(S901，60～65℃)，以干燥残余溶剂。将干燥的产物筛分进氮清扫手套箱(nitrogen sweptglovebox)，并包装。关键的过程控制和参数如下：

变量	设置/范围
		安装的雾化器	喷雾系统SK-MFP
溶液进料速率	100-140kg/小时
		进料压力	40-65bar
出口温度	22-29℃
		旋风分离器压力差	10.0-12.5cmH₂O

实施例2：制备炎琥宁结晶

制法：(a)将穿琥宁制备例1所得穿琥宁用3.5倍量的45%乙醇溶解；(b)加入用45%乙醇为溶剂配制的浓度为12%的碳酸氢钠溶液搅拌使反应，穿琥宁与碳酸氢钠的摩尔比为1：1.0；(c)向反应完全后的溶液中添加乙酸(其摩尔量为穿琥宁摩尔量的0.2%)，再在90°C喷雾干燥至水分含量低于1.0，即得炎琥宁试样，记为Ex2。

实施例3：制备炎琥宁结晶

制法：(a)将穿琥宁制备例1所得穿琥宁用4.5倍量的55%乙醇溶解；(b)加入用55%乙醇为溶剂配制的浓度为8%的碳酸氢钠溶液搅拌使反应，穿琥宁与碳酸氢钠的摩尔比为1：1.1)；(c)向反应完全后的溶液中添加乙酸(其摩尔量为穿琥宁摩尔量的0.1%)，再在70°C喷雾干燥至水分含量低于1.0，即得炎琥宁试样，记为Ex3。

实施例4：制备炎琥宁结晶

参照以上实施例1的方法，不同的是改用以上穿琥宁制备例2所得穿琥宁为原料进行操作，得炎琥宁试样，记为Ex4。

实施例5：制备炎琥宁结晶

参照以上实施例2的方法，不同的是改用以上穿琥宁制备例2所得穿琥宁为原料进行操作，得炎琥宁试样，记为Ex5。

实施例6：制备炎琥宁结晶

参照以上实施例3的方法，不同的是改用以上穿琥宁制备例2所得穿琥宁为原料进行操作，得炎琥宁试样，记为Ex6。

以上实施例2-6各试样，测定粉末X射线衍射，结果在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，这些结晶在2θ角度、d-值方面与图1基本相同。

具体地说，这些结晶在10.60°±0.1°、12.76°±0.1°、14.58°±0.1°、15.66°±0.1°处有衍射峰；特别地，这些结晶在10.60°±0.1°、12.76°±0.1°、14.58°±0.1°、15.66°±0.1°、25.24°±0.1°处有衍射峰；特别地，这些结晶在10.60°±0.1°、12.76°±0.1°、14.58°±0.1°、15.66°±0.1°、18.70°±0.1°、20.34°±0.1°、25.24°±0.1°处有衍射峰。

另外，分别照以上实施例1、2、3的方法，但是使用以上市售穿琥宁(国药准字H51023411)为原料进行操作，得到三种炎琥宁试样，分别记为Ex7、Ex8、Ex9。这三种结晶粉末X射线衍射，结果在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，这些结晶在2θ角度、d-值方面与图1基本相同；特别地，这些结晶在10.60°±0.1°、12.76°±0.1°、14.58°±0.1°、15.66°±0.1°、18.70°±0.1°、20.34°±0.1°、25.24°±0.1°处有衍射峰。

对照例1：制备炎琥宁

参考实施例1的方法，不同的是其中步骤(c)中不加乙酸，得炎琥宁试样，记为Co1。其无Ex1所述的典型X射线衍射图谱。

对照例2：制备炎琥宁

参考实施例2的方法，不同的是其中步骤(c)中不加乙酸，得炎琥宁试样，记为Co2。其无Ex1所述的典型X射线衍射图谱。

对照例3：制备炎琥宁

参考实施例3的方法，不同的是其中步骤(c)中不加乙酸，得炎琥宁试样，记为Co3。其无Ex3所述的典型X射线衍射图谱。

对照例4：制备炎琥宁

参考实施例1的方法，不同的是其中步骤(b)中碳酸氢钠换成等钠摩尔量的氢氧化钠，得炎琥宁试样，记为Co4。其无Ex1所述的典型X射线衍射图谱。

对照例5：制备炎琥宁

参考实施例1的方法，不同的是其中步骤(b)中碳酸氢钠换成等钠摩尔量的碳酸钠，得炎琥宁试样，记为Co5。其无Ex1所述的典型X射线衍射图谱。

对照例6：制备炎琥宁

参考实施例1的方法，不同的是其中步骤(a)和(b)中使用的乙醇是30%乙醇，得炎琥宁试样，记为Co6。其无Ex1所述的典型X射线衍射图谱。

对照例7：制备炎琥宁

参考实施例1的方法，不同的是其中步骤(a)和(b)中使用的乙醇是14%乙醇，得炎琥宁试样，记为Co7。其无Ex1所述的典型X射线衍射图谱。

对照例8：制备炎琥宁

参考实施例1的方法，不同的是其中步骤(a)和(b)中使用水而不是乙醇溶液，得炎琥宁试样，记为Co8。其无Ex1所述的典型X射线衍射图谱。

对照例9：制备炎琥宁

参照CN102382082A(中国专利申请号201110264481.3，周晓东)实施例1所述方法制备，得炎琥宁试样，记为Co9。其无Ex1所述的典型X射线衍射图谱。钠钾比为0.59。

对照例10：制备炎琥宁

参照CN102643255A(中国专利申请号201210085433.2，黄金秀)实施例1所述方法制备，得炎琥宁试样，记为Co10。其无Ex1所述的典型X射线衍射图谱。钠钾比为0.58。

对照例11：制备炎琥宁

参照CN102617527A(中国专利申请号201210051312.6，湖北荷普)说明书[0051]段的方法制备，得炎琥宁试样，记为Co11。其无Ex1所述的典型X射线衍射图谱。钠钾比为0.98。

对照例12：制备炎琥宁

参照CN102617527A(中国专利申请号201210051312.6，湖北荷普)说明书[0057]段的方法制备，得炎琥宁试样，记为Co12。其无Ex1所述的典型X射线衍射图谱。钠钾比为0.97。

试验例1：性能测试

测定上述各实施例和对照例样品的钠钾比，结果Ex1至Ex9以及Co1至Co8均在0.95～1.15范围内，例如Ex1的钠钾比为1.03。

测试上述各实施例和对照例样品的水分含量，结果本发明Ex1至Ex9在较短的干燥操作下所得样品的水分含量均低于1.2%、特别是大多数低于1.0%，显示本发明化合物无结晶水，而且干燥较快；而各对照例样品在较长时间的干燥处理操作下水分含量均大于3.0%，显示它们为典型的一水合物。结果见表1。

含量测定：各实施例和对照例样品的经含量测定，均在98.85～99.75%范围内，例如Ex1的含量为99.45。

各实施例和对照例样品的经有关物质检查：最大单一杂质均在0.09～0.23%范围内，总杂质均在0.30～0.65%范围内，例如Ex1的最大单一杂质为0.12%，总杂质为0.37%。

试验例2、吸湿性测试

精密称取各样品约5克，平铺于表面皿中，厚度小于5mm，然后在室内环境(温度约22～25度，相对湿度约55～65%)下放置3天，测定各份样品的增重百分数，即增加的重量除以放样重量所得的百分数，结果见表1。从结果可见，出人意料的，本发明各试样增重百分数均在15%以下，而各对照例均在30～55%范围内，显示这些对照例试样的吸湿性不如本发明试样好，特别地，对照例9、10两种钠钾比低的试样其吸湿非常严重。

试验例3：稳定性试验

将以上各实施例和对照例所得炎琥宁原料用铝箔袋密封包装，置于40°C恒温箱中放置4月(可简称为“40°C-4月”或者“4月”)，照上文【HPLC法A】和【HPLC法B】的方法，测定各试样，计算各试样(40°C-4月)的含量、有关物质检查中测定到的最大单一杂质含量(最大单杂)、以及有关物质检查中算得的总杂质含量(总杂)。针对每一试样，按如下式计算其相对于试验例1所得结果(0月)的高温处置4月后的最大单杂增加百分数(%)以及总杂增加百分数(%)：

结果见表1。

表1

上表中，Ex1至Ex9是在双圆锥真空干燥器(S901，60～65℃)工艺中干燥3小时所得水分结果，而各对照例在双圆锥真空干燥器(S901，60～65℃)工艺中干燥6-8小时小时所得水分结果。

表中，“最大单杂”是指同一样品中在HPLC方法中显示的最大的单一杂质的含量，在本发明的这些实施例或者对照例的样品中以及这些样品经40°C-4月处理后的样品中，它们的最大单杂均为同一杂质(HPLC图中保留时间均在同一位置)。“Δ最大单杂”表示对于某一试样而言，其在经所述40°C-4月处置后的最大单杂含量与该样品0月时最大单杂含量的变化(增加)百分数，表示该最大单杂的增加程度，即上文计算式所得最大单杂增加百分数(%)和总杂增加百分数(%)。“Δ总杂”表示对于某一试样而言，其在经所述40°C-4月处置后的总杂质含量与该样品0月时总杂质含量的变化(增加)百分数，表示总杂质含量的增加程度。

结果显示，本发明方法获得的本发明结晶具有良好的化学稳定性，例如本发明实施例1的试样在经40°C-4月处置后的最大单杂含量和总杂质含量分别小于0.4%和小于1.2%，仍然符合药典规定，而例如对照例1的Co1试样的总杂质含量大于3.0%，已经远远超出通常可接受的2%以下的限度范围。

另外，各实施例样品在经40°C-4月处置后活性成分的含量仍然大于98.0%；Co1至Co12的含量均在92.0～94.5%之间。

此外，对经40°C-4月处置后的本发明Ex1至Ex9各样品测定其粉末X射线衍射，结果在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，这些结晶在2θ角度、d-值方面与图1基本相同，各典型衍射峰2θ值与Ex1典型衍射峰的各相应2θ值相差不超过±0.1°。显示本发明所得炎琥宁具有良好的物理稳定性。

制剂例部分

制剂例1：制备包含炎琥宁的药物制剂

配方：

实施例1所得炎琥宁	100g，
		甘露醇	100g，
注射用水(冻干后除去)	至2000ml。

制备方法：

(1)称取处方量的主药和甘露醇，置于不锈钢桶中，加入处方量约90%的注射用水，使溶解，再按溶液体积加入0.2%(w/v)的活性炭，搅拌30分钟，过滤脱炭，补加注射用水至接近处方全量。

(2)滤液取样，测定pH值(7.0)，必要时用pH调节剂(1M盐酸或者1M氢氧化钠)调节至规定值，再补加注射用水至处方全量。

(3)药液先用0.45um微孔滤膜过滤，再用0.22um微孔滤膜过滤2次。

(4)以每瓶灌装药液2ml灌装于7ml西林瓶中，半加胶塞。

(5)冷冻干燥至水分低于3%；冻干结束后，进行液压加塞；扎铝盖，得到呈粉针剂形式的药物组合物。

制剂例2：制备包含炎琥宁的药物制剂

参照制剂例1的方法，不同的是使用实施例2所得炎琥宁结晶为原料。

制剂例3：制备包含炎琥宁的药物制剂

参照制剂例1的方法，不同的是使用实施例3所得炎琥宁结晶为原料。

制剂例4：制备包含炎琥宁的药物制剂

参照制剂例1的方法，不同的是使用对照例12制备的炎琥宁结晶为原料。

测试以上各制剂例所得粉针剂的含量和杂质，结果显示含量均在标示量的98～102%范围内，总杂质相对于主成分量而言在0.40～0.60%范围内。

照上文试验例3的稳定性试验方法，考察4个制剂例的粉针剂在经40°C-4月处置后样品中活性成分的含量变化以及有关物质的变化。结果显示，在经40°C-4月处置后，制剂例1～3的含量仍然在标示量的95%以上，而制剂例4的含量为标示量的85%，已低于标准规定的水平。另外，在经40°C-4月处置后，制剂例1～3的总杂质在1.2～1.6%范围内，而制剂例4的总杂质为4.2%，已经超出了制药行业一般可接受的水平。

Claims

1.下式化合物的结晶：

其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约10.60°、约12.76°、约14.58°、约15.66°、约18.70°、约20.34°、约25.24°处有衍射峰。

2.根据权利要求1的结晶，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在10.60°±0.1°、12.76°±0.1°、14.58°±0.1°、15.66°±0.1°、18.70°±0.1°、20.34°±0.1°、25.24°±0.1°处有衍射峰。

3.根据权利要求1的结晶，其使用Cu-Kα辐射，具有如图1所示的粉末X-射线衍射图谱。

4.根据权利要求1的结晶，其经60°C干燥至恒重后，经容量滴定法测定的水分含量低于1.5%。

5.根据权利要求1的结晶，其经60°C干燥至恒重后，经容量滴定法测定的水分含量低于1.2%。

6.根据权利要求1的结晶，其经60°C干燥至恒重后，经容量滴定法测定的水分含量低于1.0%。

7.根据权利要求1的结晶，其钠钾离子比例在0.95~1.25范围内。

8.根据权利要求1的结晶，其钠钾离子比例在0.95~1.15范围内。

9.制备权利要求1-8任一项所述结晶的方法，其包括如下步骤：(a)将穿琥宁用3~5倍量的40~60%乙醇溶解；(b)加入碳酸氢钠溶液搅拌使反应；(c)将反应完全后的溶液在70~90°C喷雾干燥，即得。

10.根据权利要求9的方法，其中步骤(a)中乙醇是45~55%乙醇。

11.根据权利要求9的方法，其中步骤(a)中乙醇是50%乙醇。

12.根据权利要求9的方法，其中步骤(a)中将穿琥宁用3.5~4.5倍量的乙醇溶解。

13.根据权利要求9的方法，其中步骤(b)中穿琥宁与碳酸氢钠的摩尔比为1：(1.0~1.2)。

14.根据权利要求9的方法，其中步骤(b)中穿琥宁与碳酸氢钠的摩尔比为1：(1.0~1.1)。

15.根据权利要求9的方法，其中步骤(b)中碳酸氢钠溶液中的碳酸氢钠浓度为5~15%。

16.根据权利要求9的方法，其中步骤(b)中碳酸氢钠溶液中的碳酸氢钠浓度为8~12%。

17.根据权利要求9的方法，步骤(b)中碳酸氢钠溶液系用40~60%乙醇为溶剂配制。

18.根据权利要求9的方法，步骤(b)中碳酸氢钠溶液系用45~55%乙醇为溶剂配制。

19.根据权利要求9的方法，步骤(b)中碳酸氢钠溶液系用50%乙醇配制。

20.根据权利要求9的方法，步骤(b)反应完毕后，还向反应液中添加乙酸，所述穿琥宁与乙酸的摩尔比为100：(0.2~1)。

21.一种药物组合物，其中包含权利要求1-8任一项所述结晶和药学可接受的载体。

22.权利要求1-8任一项所述结晶在制备用于治疗或预防病毒性肺炎、病毒性上呼吸道感染的药物中的用途。