CN103173359B - 一株能促进木麻黄根系生长作用的内生真菌 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一株能促进木麻黄根系生长作用的内生真菌。所述内生真菌为叶点霉（Phyllostictasp.）木麻黄根际真菌15，已于2012年6月28日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心登记保藏，保藏编号为CGMCCNo.6307。经接种于木麻黄水培苗，根据根系生长的各项指标综合评判，进一步证实木麻黄根际真菌15对生根作用具有促进作用以及实际对木麻黄的干物质的增效作用，寻找到对促进生根作用有益的功能内生真菌可应用于生产。
Description
技术领域
本发明涉及一株能促进木麻黄根系生长作用的内生真菌。
背景技术
植物内生菌的研究始于19世纪末，Vogl从黑麦草Lolium temulentum L.种子中分离出第一株内生菌[1]。但真正开始大量研究植株中的内生菌起始于上世纪八十年代，主要是在温带地区、亚热带地区和热带地区的植被中开展研究。
前人从大部分植物中都能分离出内生菌，因此可以推测内生菌在植株中是普遍存在的。在全世界范围内至少在80多个属290多种的禾本科农作物中发现了内生菌[2]。目前从植物中分离的内生菌根据其具有的独特功能可以分为：固氮菌、固钾菌、固磷菌等植物促生菌[3~4]、具有抗病虫害的生防菌[5~8]和具有促进植物对不良环境的修复能力的抗性菌。在促进光合作用方面的内生菌报道极少，仅有在水稻上发现一种具有光合作用能力的内生菌，它也被证明是豆荚Aeschynomene[9]茎瘤中固氮菌Bredyrhizobium的一个株系。
木麻黄科植物是兼有弗兰克氏菌菌（Frankia）、内生菌根菌和外生菌根菌的共生营养型植物，因此，关于木麻黄真菌学方面的研究方向目前较多涉及弗兰克氏菌（Frankia）、青枯菌（Solanasearum）、青枯假单胞杆菌(Pseudomonas soIanacearum Smith)等，虽然木麻黄人工接种菌根菌后的促生效果已毋庸置疑，但是仅停滞于根瘤菌根菌的研究，木麻黄内生真菌方面的研究尚未见报道[10-11]。前人的研究中应用菌株，多为外生真菌，同时也没有从促进根系生长作用的根本因素去寻找内生真菌，提高其科学性和可靠性[12]。证实能促进根系生长作用的内生菌方面尚未见报道。
根系是所有植株体的重要组成部分，植物地下部分根群对水分、养分的吸收能力同地上部分的光合作用效率一样，对植物的正常生长发育起到了至关重要的作用，植株对水分和养分获取的能力取决于根系的形态，其中重要的根系形态指标有根系长度、根系表面积和根系生物量等，因此，植物根系的研究已作为生态学研究的重要内容[13~14]。
发明内容
本发明的目的在于提供一株能促进木麻黄根系生长作用的内生真菌。
本发明提供的一株能促进木麻黄根系生长作用的内生真菌，所述功能内生真菌为叶点霉（Phyllosticta sp.）木麻黄根际真菌15，已于2012年6月28日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心登记保藏，保藏编号为CGMCC No. 6307。
该菌的分离、纯化包括：
A、材料：将采集得到不同年份的根、枝条、鳞状叶小枝分成三个部分，用自来水清洗干净，分装到自封袋内，于4℃冰箱保存；
B、消毒：70%酒精浸泡30s——无菌水浸洗一次——10%次氯酸钠浸泡7min——无菌水浸洗一次。当样品最后一次浸洗后的水盛于灭菌的小烧杯中，在平板上划线作为对照，以检验样品的消毒是否彻底，若干天后如有菌落生成，则表明样品表面消毒不彻底，需继续调整消毒方法[15-17]；
C、接种部位的选择：鳞状叶小枝：分取植株的上、中、下三个部分的鳞状叶小枝，每个鳞状叶小枝又分为枝尖部、枝中部和枝基部3个处理；枝条：上中下分为3部位，其中第3部位为枝茎交接处；根部：分为根尖和根基2个部分；
D 、接种：将消毒后的外植体用接种刀切开，铺放在培养基表面，于28℃恒温培养箱内培养5—7天后观察菌落生长状况。有的菌株繁殖迅速，可先将其产生的菌株进行分离纯化；生长缓慢且数量较少的菌株可延长观察时间，直到其生长稳定后纯化。
固体培养：使用改良马丁固体培养基，配方为蛋白胨 5.0g/L、酵母浸出粉2.0g/L、葡萄糖20.0g/L、磷酸氢二钾1.0g/L、硫酸镁0.5g/L、琼脂14.0g/L、其它为无菌水，pH值6.4±0.2，培养温度为28℃，培养方式为平板培养，培养时间为48h；
E、将分离繁殖出的不同种类的内生真菌接入平板培养基进行纯化，经过2-3次点接纯化、转接后得到单一菌种的上述的Phyllostic-ta sp.功能菌株；
其在平面培养基上，菌落呈圆形，淡黄色菌丝，中部隆起黄色绒毛，基质呈酒红色；背部中心黑红色，生长较慢。分生孢子器暗色，有孔，两面凸到球形；分生抱子梗短；分生孢子小，单孢，无色，卵圆形到长；参照真菌鉴定手册将其鉴定为叶点霉属（Phyllosticta sp.），保存在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.6307。
上述的一种能促进木麻黄根系生长作用的内生真菌应用菌液的制备方法，是将上述的菌株接入液体培养基，摇床振荡培养，培养温度为28℃，培养时间48～72h，利用血球计数板计算菌液浓度，将菌液用超纯水稀释成1.0-9.0×106cfu/ml即为成品备用；液体培养基：为改良马丁培养基,其中蛋白胨 5.0g/L、酵母浸出粉2.0g/L、葡萄糖20.0g/L、磷酸氢二钾1.0g/L、硫酸镁0.5g/L、其它为无菌水、pH值6.4±0.2。
上述的一种能促进木麻黄根系生长作用的内生真菌应用菌液的应用方法，是应用该菌株的菌液，苗木栽植前期蘸根和用于林地浇根。
上述的一种能促进木麻黄根系生长作用的内生真菌应用菌液的应用方法，是用9.0×105cfu/ml菌液，按每株100ml在林地浇于每株木麻黄的根际。
上述的一种能促进木麻黄根系生长作用的内生真菌应用菌液的应用方法，是应用该菌株的菌液5.0×105cfu/ml在水培苗栽植前将苗蘸根10min。
本发明涉及的菌株是从木麻黄植株中分离纯化得到的，目标菌株为叶点霉（Phyllosticta sp.）木麻黄根际真菌15，已于2012年6月28日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心登记保藏，简称CGMCC，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No. 6307。
经接种于木麻黄水培苗，根据根系生长的各项指标综合评判，进一步证实木麻黄根际真菌15对生根作用具有促进作用以及实际对木麻黄的干物质的增效作用，寻找到对促进生根作用有益的功能内生真菌可应用于生产。
与对照相比，木麻黄根际真菌15处理植株为对照苗木根系总表面积的4.72倍，苗木根系总长为对照苗木的3.73倍，植物0.25mm径级以下的细根为对照苗木的3.36倍，0.25~0.5mm径级下根长为对照苗木的3.68倍；0.5~0.75 mm、0.75~1 mm和≥1mm根系径级下，其中木麻黄根际真菌15处理下苗木的根长增幅均为最大。因此，木麻黄根际真菌15处理下的木麻黄苗木较对照苗木所有径级下的根长增幅均达到最大。表明其对于促进植株的根系生长具有极显著效果。
附图说明
图1为不同处理对木麻黄苗木根系总表面积的影响。
图2为不同处理对木麻黄苗木根系总长的影响。
图3为不同处理对木麻黄苗木根系各径级根系长度的影响。
具体实施方式
1、水培繁殖中的应用
取配制好的上述内生真菌应用菌液，制成5.0×105cfu/ml菌液，在水培苗栽植前蘸根10min。可提高植苗成活率10%以上。
2、根际土壤浇施应用
试验材料为惠安一号水培苗，苗木于2011年7月盆栽于福建农林大学森林生态研究所田间试验地。
水培苗根系长齐后，将其移入黄心壤土和沙以3:1的比例混合的土壤，并分装于约500个直径22cm，高15cm的花盆中。每盆放入相等质量的3.36KG混合土壤，为了保证后期苗木接菌的准确性，往每盆土壤中滴入10~15滴甲醛(福尔马林)消毒液，并用塑料薄膜封盖盆口，消毒时间为24h。待土壤内甲醛渗透消毒完全，除去塑料薄膜，将剩余的甲醛蒸发，以免影响幼苗的移植成活率。经过一个月的恢复性生长，在木麻黄根际施入菌株浓度为9.0×105cfu/ml的菌液100ml，重复3次，用蒸馏水溶液处理作为空白对照。
菌液的制备：将木麻黄根际真菌15（以下简称菌株15号）接入液体培养基，培养基为改良马丁培养基，每L含蛋白胨 5.0g、酵母浸出粉2.0g、葡萄糖20.0g、磷酸氢二钾1.0g、硫酸镁0.5g，其它为无菌水，pH值6.4±0.2。经过24h的培养，利用血球计数板计算菌液浓度，将菌液用超纯水稀释成1.0×106cfu/ml至9.0×106cfu/ml备用。接种后30天后进行各指标的测定,检测方法和结果如下：
2.1菌株浸泡后木麻黄根系生长状况分析
为了研究内生真菌接种对木麻黄苗木根系的效应，试验将栽有木麻黄苗木的花盆倾倒，取出带有土壤和沙砾的整株苗木，用清水反复冲洗后晾干，剪下地下部分，分别装入信封袋中备用，每个处理采3株苗木。应用爱普生(10000XL,Epson Inc.,北京)根系扫描仪，将完整的根系图像扫描存入计算机，应用(WinRHIZOTM2009)专业根系形态和结构分析系统软件(Regent Instruments Canada Inc.)对根系总表面积、根系总长以及根系径级(根系平均直径分级)进行定量分析[18]，取3个重复值的平均值作为该处理苗木的根系特征值。同一接菌方式下，接菌苗木和未接菌苗木之间的比较采用ANOVA分析，不同处理之间采用Duncan多重比较，并用字母标记法表示。
4结果分析
4.1菌株15处理对苗木根系总表面积的影响
根系表面积的大小影响着植株根系与土壤间营养物质的交换，其与植物水分吸收能力紧密联系，能够大致反映苗木对土壤环境的利用现状，若根系表面积越大，则根系分布就越广，植物能更好地吸收利用土壤中的养分，同时，根系的大小和深浅也决定着植物根系的发达程度，与植物的抗风性能、耐旱性和生活力密切相关，特别对沿海或水土保持防风固沙植物也有重要的影响[19-22]。通过根系分析软件对样品的分析和SPSS软件对数据的多重比较得到图1。
通过单因素方差分析和邓肯多重比较，菌株15处理与对照处理有显著的差异(S：sig=0.000；P：sig=0.000)，由图1也可看出，与对照相比，菌株15号为对照苗木根系总表面积的4.72倍；
4.2菌株15处理对苗木根系总长的影响
植株根系的总长度同样作为描述根系特征的重要参数，其值的大小还决定着根系表面积的大小和根系遍布的深浅。图2反映了内生真菌对木麻黄苗木根系总长的影响。
单因素方差分析表明，菌株15处理与对照处理相比有显著差异(S：sig=0.000；P：sig=0.000)，菌株15号为对照苗木根系总长的3.73倍。
4.3菌株15处理对苗木根系径级的影响
试验通过WinRHIZO根系分析软件按直径分级(最小分辨单位0.01mm)对每株植物的根系进行细致统计，由于本试验中，木麻黄幼苗均为无性系水培苗木，其根系均为直径＜2mm的细根，因此将木麻黄水培幼苗的根系划分为五个径级区间：≤0.25、0.25~0.5、0.5~0.75、0.75~1、≥1(单位：mm)。
众所周知，木麻黄生长在年降水量充沛的亚热带等地区，树种本身具有一定的抗涝性，Osundina研究发现，在淹水情况下，木麻黄能够通过增加暴露于水面之上的不定根数量，从而缓解木麻黄水涝时根系的缺氧状况，因此，植物的根系，特别是直径＜2mm的细根对所处土壤环境资源的状况有着敏感的响应[23-25]；通过植株根系总表面积和根系总长的大小可以直观地反映植物地下部分的生物量状况和所消耗的光合产物的多少，为了进一步研究接种内生真菌对木麻黄幼苗细根构型以及功能特征的影响，本试验通过根系分析软件统计了不同径级下各接菌处理苗木较对照的增长情况，以初步寻找接菌与苗木根系各径级产量变化的规律。不同接菌方式处理下苗木根系不同径级的特征值。
由表1的数据和图3可以看出，不同接菌处理对木麻黄苗木各径级的根长均有促进作用。植物的细根，特别是0.25mm径级以下的根系对植物吸收水分的能力起到重要作用，细根量越多，则植物对水分的吸收能力越强，其中菌株15号的增幅达到最大，为对照苗木的3.36倍；0.25~0.5mm径级下，菌株15号的增幅最大，为对照苗木该径级下根长的3.68倍；0.5~0.75 mm、0.75~1 mm和≥1mm根系径级下，其中菌株15号处理下苗木的根长增幅均为最大。因此， 15号内生真菌处理下的木麻黄苗木较对照苗木所有径级下的根长增幅均达到最大。
表 1不同菌株处理对木麻黄苗木根系各径级根系长度的影响
*在表中的同一列数值中，有不同小写字母者表示差异显著(P＜0.05)。
本发明发现一株能促进木麻黄生根作用的内生真菌，将该株木麻黄内生真菌菌株采用蘸根或菌液浇施的方法接种于木麻黄幼苗。通过接种后植株的根系检测，得出菌株的根系生长能力均较大程度高于对照，表明其对于促进植株的根系生长作用效能具有很大功用，从而进一步证实得到该株内生真菌能促进木麻黄根系生长。
参考文献
[1]郭良栋.内生真菌研究进展[J].菌物系统，2001, 20(1):148~152.
[2]于汉寿,纪燕玲,翁忠贺等. 禾本科植物内生真菌研究10--内生真菌共生体的苗期生物学特性[J].草业科学，2009,26(10):150-154.
[3]Lu H,Zou W X,Meng J C,Hu J,Tan R X.New bioactive metabolites produced by Colletotrichum sp.,an endophytic fungus in Artemisia annua [J].Plant Sci,2000,151:67-73.
[4]Reis V M,Baldani V L D,Dobereiner J.Biological dinitrogen fixation in Cramineae and palm trees[J]. Critical Rev Plant Sci,2000,19:227-247.
[5]Stone J K, Bacon C E, White J F Jr. An overview of endophytic microbes: endophytism defined Microbial Endophytes[J] . New York:Marcel Dekker，2000;3-29.
[6]冯永君，宋未.植物内生细菌[J].自然杂志，2001,23(5):249~252.
[7]刘云霞.植物内生细菌的研究与应用[J].植物保护，1994,20(5):30~32.
[8]杨海莲，孙晓璐，宋未.植物内生细菌的研究[J].微生物学通报，1998,25(4):224~227.
[9]Chaintreuil C,Giraud E,Prin Y,et al.Photosynthetic bradyrhizobia are natural endophytes of the African wild rice[J].（Oryza breviligulata）.Appl Environ Microbiol 2000 Dec;66(12):54 37－47.
[10]林燕青, 洪伟. 中国木麻黄研究文献的统计分析[J]. 防护林科技, 2011, (01): 46-50.
[11]张勇, 仲崇禄, 陈羽, et al. 木麻黄共生菌的研究进展[J]. 广东林业科技, 2006, 22(001): 70-75.
[12]Guérin P. Sur la présence d’un champignon dans l’ivraie[J]. Journal de Botanique, 1898, 12: 230-238.
[13]刘丽娜, 徐程扬, 段永宏, et al. 北京市 3 种针叶绿化树种根系结构分析[J]. 北京林业大学学报, 2008, 30(1): 34-39.
[14]金剑, 王光华, 刘晓冰, et al. 东北黑土区高产大豆 R5 期根系分布特征[J]. 中国油料作物学报, 2007, 29(3): 266-271.
[15]崔林, 孙振, 孙福在, et al. 马铃薯内生细菌的分离及环腐病拮抗菌的筛选鉴定[J]. 植物病理学报, 2003, 33(004): 353-358.
[16]何红, 蔡学清, 洪永聪, et al. 辣椒内生细菌的分离及拮抗菌的筛选[J]. 中国生物防治, 2002, 18(4): 171-175.
[17]袁军, 孙福在, 田宏先, et al. 防治马铃薯环腐病有益内生细菌的分离和筛选[J]. 微生物学报, 2002, 42(3): 270-274.
[18]L H M, W L, F K. Estimating length,average diameter and surface area of roots using two different image analyses systems[J]. Plant Soil, 2004, 260: 111-120.
[19]赵忠, 成向荣, 薛文鹏, et al. 黄土高原不同水分生态区刺槐细根垂直分布的差异[J]. 林业科学, 2006, 42(11): 1-7.
[20]Berntson G, Wayne P. Characterizing the size dependence of resource acquisition within crowded plant populations[J]. Ecology, 2000, 81(4): 1072-1085.
[21]杨国虎, 李建生, 罗湘宁, et al. 干旱条件下玉米叶面积变化及地上干物质积累与分配的研究[J]. 西北农林科技大学学报: 自然科学版, 2005, 33(5): 27-32.
[22]韩希英, 宋凤斌. 干旱胁迫对玉米根系生长及根际养分的影响[J]. 水土保持学报, 2006, 20(3): 170-172.
[23]陈彦, 王国明, 周坚. 木麻黄抗逆性研究进展[J]. 植物学通报, 2005, (6): 746-752.
[24]Osundina M. Nodulation and growth of mycorrhizal Casuarina equisetifolia JR and G. First in response to flooding[J]. Biology and fertility of soils, 1997, 26(2): 95-99.
[25]Hendrick R L, Pregitzer K S. The dynamics of fine root length, biomass, and nitrogen content in two northern hardwood ecosystems[J]. Canadian Journal of Forest Research, 1993, 23(12): 2507-2520.
Claims (2)
1.一株能促进木麻黄根系生长作用的内生真菌，其特征在于：所述内生真菌为叶点霉（Phyllosticta sp.）木麻黄根际真菌15，已于2012年6月28日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心登记保藏，保藏编号为CGMCC No. 6307。
2.一种包含权利要求1所述的内生真菌的应用菌液，其特征在于：所述应用菌液的制备方法，是将所述的叶点霉（Phyllosticta sp.）木麻黄根际真菌15接入液体培养基，摇床振荡培养，培养温度为28℃，培养时间48～72h，利用血球计数板计算菌液浓度，将菌液用超纯水稀释成1.0-9.0×106cfu/ml，备用；液体培养基为改良马丁培养基，其中蛋白胨 5.0g/L、酵母浸出粉2.0g/L、葡萄糖20.0g/L、磷酸氢二钾1.0g/L、硫酸镁0.5g/L、其它为无菌水、pH值6.4±0.2。
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