CN103169843A - 一种具有抗辐射保护作用的复方药物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于核辐射损伤保护的药物，制得的该药物由以下原料按重量份组成：西洋参：5～40份，当归：2～25份，南沙参：3～35份，仙鹤草：5～40份，重楼：3～30份；申请人以对⁶⁰Co射线辐射所致血虚模型小鼠的影响证实了该用于核辐射损伤保护的药物，能有效保护核辐射造成的造血系统和生殖系统损伤，提高免疫力，防治效果显著，是一种有潜力的抗辐射保护药物。

Description

一种具有抗辐射保护作用的复方药物

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种具有抗辐射保护作用的复方药物，该药物能有效保护核辐射造成的造血系统和生殖系统损伤。

背景技术

随着核能及其放射技术在各个领域的广泛应用，核辐射造成的损伤已成为人们日益关注的重要问题。放疗一般是用各种不同能量的射线照射肿瘤，以抑制和杀灭癌细胞的一种治疗方法，是癌症三大治疗手段之一，由于选择性低，放疗在杀灭癌细胞的同时对患者的正常细胞也产生消极影响。临床上进行放疗后容易引起骨髓抑制，进而引起造血功能的破坏。骨髓抑制在早期可表现为白细胞减少，严重时血小板、红细胞、血红蛋白均可降低，病人常常因骨髓抑制血象低而无法继续治疗。

随着世界科技及军事的发展，核武器爆炸造成的环境污染，核能源利用如铀矿开采、放射性物质的贮存和运输等环节造成的环境污染，都呈增长趋势^[1-4]。尤其是2011年3月日本福岛核电站的泄漏事件，让人们再次认识到核辐射危害的严重性和抗辐射保护的重要性。研究发现：辐射早期，细胞变性、凋亡和坏死，血小板减少和出血，致死性和继发性感染^[5]；辐射晚期，造血功能障碍，免疫功能低下，恶性肿瘤发生，顽固性皮肤溃疡，以及多种器官纤维化^[6]。

此外，核辐射损伤人类生殖细胞。男性的睾丸对核辐射高度敏感，引起精子缺乏的核辐射剂量不到1Sv，单次照射0.1～0.15Sv可使精子数量减少。单次照射3.5～6Sv，将产生不可逆无精子症，导致永久性不育。核辐射可引起阳痿和精子变性，导致子代发育畸形^[7]。

近年来，人们发现中草药具有良好的抗辐射保护作用，然而，目前中草药的治疗多局限在单味中药的有效成分研究上，而复方中药制剂充分发挥中医药治疗特点，针对辐射损伤辨证施治的研究报道较少。因此，针对医疗照射、职业照射、核泄漏和核武器所致的照射、重大事故诱发的公众照射所致的辐射损伤，机体造血机能产生障碍、全血细胞减少、生殖系统损伤、免疫力下降，研制出一种抵抗辐射对机体特别是造血系统和生殖系统的损伤、促进外周血象恢复、促进造血系统和生殖系统功能、提高免疫力的中药治疗药物，为军事、医疗等方面开发一种新的复方中药抗辐射剂，一直是申请人研究的课题之一。

以下是申请人给出的参考文献：

【1】郭勇，核辐射与人类生活[M].北京:原子能出版社，1999:42。

【2】曹中申，孙继良，医用诊断X射线工作人员健康动态观察[J].中国辐射卫生，2001，10(1):48。

【3】丁凤仙，冯会民，段栓紧等，放射工作人员外周血象及细胞遗传学5年检查结果分析[J].中国辐射卫生，2001，10(1):50。

【4】徐侠，张方清，姜文等，滨州市放射工作者健康状况调查[J].中国辐射卫生，2001，10(1):46。

【5】Hosseinimehr S J.Trends in the Development of RadioprotectiveAgents.Drug DiscovToday，2007，12(19-20):794。

【6】Zhao W，Robbins M E.Inflammation and Chronic Oxidative Stress inRadiation-induced Late Normal Tissue Injury:Therapeutic Implications.Curr.Med.Chem.，2009，16(2):130。

【7】李青花，环境因素导致男性不育症的机理探讨[J].中国计划生育学杂志，2004，103:319-320。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种具有抗辐射保护作用的复方药物，该复方药物以中医药理论为基础，其作用确切，尤其适用于核辐射导致的造血系统和生殖系统的保护，主要促使提高造血能力、生殖机能和免疫水平。

为了实现上述任务，本发明采取如下的技术方案：

一种具有抗辐射保护作用的复方药物，其特征在于，制得的该药物由以下重量份数的原料组成：西洋参：5～40份，当归：2～25份，南沙参：3～35份，仙鹤草：5～40份，重楼：3～30份。

本发明的具有抗辐射保护作用的复方药物，立足于祖国传统的中医学，结合对核辐射损伤的认识，以及药理作用的实验研究，按照中医基础理论进行组方，使气血贯通。

申请人的课题研究组以对⁶⁰Co射线辐射所致血虚模型小鼠的影响证实了该具有抗辐射保护作用的复方药物，能有效保护核辐射造成的造血系统和生殖系统损伤，提高免疫力，防治效果显著，是一种有潜力的抗辐射保护药物。

附图说明

图1是⁶⁰Co射线照射小鼠的脾脏切片观察图片，其中（1）为正常组，（2）为模型组，（3）为皂矾丸组，（4）为药物高剂量组，（5）为药物中剂量组，（6）为药物低剂量组；

图2是⁶⁰Co射线照射小鼠的睾丸切片观察图片，其中（1）为正常组，（2）为模型组，（3）为皂矾丸组，（4）为药物高剂量组，（5）为药物中剂量组，（6）为药物低剂量组；

下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。

具体实施方式

由于射线具有高能、快速、穿透力强、热源性等特点,可以归结为“热毒过盛”，病机为热毒蕴结阴分，脾肾造化不及，气血受损。所采用的治法多为清热解毒，扶正固本、活血化瘀等法，与之相应使用的药物也大致为清热解毒药，补益药和活血化瘀药三类。

按照本发明的技术方案，一种具有抗辐射保护作用的复方药物，制得的该药物由以下重量份数的原料组成：西洋参：5～40份，当归：2～25份，南沙参：3～35份，仙鹤草：5～40份，重楼：3～30份。

一个优选的具有抗辐射保护作用的复方药物，其重量份数的组方是：西洋参：25份，当归：8份，南沙参：12份，仙鹤草：25份，重楼：10份。

上述具有抗辐射保护作用的复方药物的制备方法是，将处方量的各原料，加入36倍量水，提取3次，其中第1次提取2小时，后两次各提取1小时，共4小时，过滤、蒸发、浓缩成0.6g生药/ml的浸膏。

本实施例的用于核辐射损伤保护的药物，组方中的西洋参大补气阴，当归补血活血，仙鹤草止血生血，沙参养阴润燥，重楼解毒止痛，各司其工，各奏其效。补气与补血养阴同用，止血与生血兼顾，润肠与解毒并行是本组方的基本特点。方用西洋参因其性凉可以常服，为主药。该类患者显著表现为白细胞及血小板下降，故宜用止血生血之药为辅，以助正气恢复，故仙鹤草为辅药。方用仙鹤草重在用其止血及升血小板之功，以防止因放、化疗可能引起的内出血、紫斑等。方用重楼意在解毒，同时也有防止补益过多之义。而攻伐肿瘤的放化疗除了伤气，更会伤及阴血，故用当归、沙参以增加主药扶正之力，故此二药为佐药。同时，治疗肿瘤，清毒为先，故重楼有使药之效。诸药合用，共奏补气血、养阴液，又解血中之毒之扶正解毒、止血生血之功效。

现代药理学研究表明，西洋参有良好的抗缺氧及抗疲劳作用，西洋参茎叶皂苷可对抗环磷酰胺引起的小鼠白细胞减少，有明显的抗环磷酰胺致突变作用，西洋参蜂皇浆对小鼠四氯化碳肝毒及环磷酰胺的骨髓抑制有明显的保护作用。当归水浸液给小鼠口服能明显促进血红蛋白及红细胞的生成，当归多糖有防止强的松引起小鼠外周血白细胞减少的作用。当归还有明显的抗辐射损伤作用。沙参提取物有升高白细胞作用。仙鹤草则能使血小板数量增加，血清钙含量增加及凝血时间缩短。仙鹤草水浸膏在体外对人癌细胞JTC-26有强烈的抑制作用，其抗肿瘤作用可能是由于药物通过对肿瘤细胞以及某些免疫细胞的作用而增强宿主的免疫反应所致。重楼除了有广谱抗菌作用，还有抗蛇毒及对肉瘤180、肉瘤37、实体型肝癌的抑制作用。

以下是发明人给出的实施例。

实施例1：

为了最大限度提高得率，同时尽可能节能并减少浪费，本实施例对药物进行了水提取工艺的优化研究。

考虑到西洋参为该药物中君药，在方中起主要药效作用。皂苷是西洋参增强人体正气、免疫力的有效性成分。所以将皂苷的提取转移率定为评价指标；同时在制剂工艺研究中，浸膏量是一个重要影响指标，因此将干膏得率定为另一评价指标。通过单因素实验研究，确定了正交试验中各因素的水平如下：

表1：实验因素水平表

综合单因素实验所筛选出的因素和水平，结合文献资料和工业生产情况，采用L₉（3⁴）正交实验法，以人参皂苷Rg₁、R_e、Rb₁的含量及干膏得率为考察指标对其进行评价优选。

其中，人参皂苷Rg₁、R_e、Rb₁的含量测定方法按照2010年版《中国药典》中“人参”条目下的含量测定方法进行；干膏得率计算方法为：取10ml清膏转移到已恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，置烘箱中（105℃）干燥其恒重，通过公式“干膏得率=（已恒重的装有样品的蒸发皿重量-恒重的蒸发皿重量）×10/生药重量×100%”，计算干膏得率。

对各指标分以权重，人参皂苷3种指标各占30分，干膏得率占10分，对1～9号正交试验样品实验结果进行打分，每组求得总分进行分析，结果见表2。

表2：L₉（3⁴）正交实验结果

上述结果直观分析可知，各因素对总皂苷得率和干膏得率的影响大小顺序为B>C>A，即提取时间>提取次数>加水量，最佳提取工艺为A₃B₃C₃。

将正交实验结果进行方差分析，结果见表3。

表3：方差分析表

方差来源	SSj	f	MS	F	P
						A	13.8797	2	6.9398	3.2283
B	82.0790	2	41.0395	19.0909	<0.05
						C	29.5963	2	14.7982	6.8839
误差(D)	4.2994	2	2.1497

F_0.05(2,2)=19；F_0.01(2,2)=99

由方差分析可知，提取时间（B）对提取结果影响最大，提取次数（C）影响次之，加水量（A）影响最小；且提取时间对提取结果有显著性影响，为了节约成本，综合考虑，将最佳工艺确定为A₃B₃C₃，即36倍量水，提取3次，提取时间共4小时。

实施例2：

取西洋参25g，当归8g，南沙参12g，仙鹤草25g，重楼10g，按照实施例1中的水提方法进行提取，将提取液浓缩成0.6g生药/ml的浸膏。

分别将浸膏稀释成三个浓度梯度的药物组，即药物高剂量组（12.00g/kg）、药物中剂量组（6.00g/kg）和药物低剂量组（3.00g/kg），用于以下实施例3的实验中。

实施例3：

取昆明种雄性小鼠72只，随机分为正常组、模型组、皂矾丸组（药物阳性对照组）、药物高剂量组、药物中剂量组、药物低剂量组，每组12只。正常组和模型组每日用0.9%生理盐水灌胃，皂矾丸组用皂矾丸灌胃，给药组分别用药物高、中、低剂量组药物提取液灌胃，以上各组均连续干预10天。于第10天灌胃后1h除正常对照组外其余组小鼠均接受5.5GY⁶⁰Co射线全身照射。以上各组照射后继续灌胃给药，各组均于照射后第3天、第9天、第17天和第23天眼眶取血，测血常规，并于照射后第23天，称体重，然后处死解剖取其脏器（心、肝、脾、肺、肾、睾丸和精囊前列腺），计算脏器指数；其中脾脏、睾丸做病理切片进行HE染色镜检。

结果表明：⁶⁰Co射线照射后各组小鼠的白细胞、血小板数量均明显下降，脾脏指数、睾丸指数和精囊前列腺指数也下降较多，脾脏的造血细胞和免疫组织受到抑制和破坏，睾丸的生殖细胞退化变性萎缩，但给药组小鼠白细胞和血小板数量下降幅度较小，脾脏、睾丸和精囊前列腺等指数下降较少，且回升趋势均较模型组好，促进了脾脏造血能力和免疫能力及睾丸生殖机能的提高。说明该复方药物对辐射损伤小鼠的造血系统、生殖系统和免疫系统具有一定程度的放射保护作用。

表4：药物对⁶⁰Co射线照射小鼠外周血白细胞计数的影响（

n=12）

注：组间进行t检验，与模型组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01；与皂矾丸组相比，^▲P＜0.05，^▲▲P＜0.01。

从表1可以看出，模型组小鼠在照射⁶⁰Co射线后的第3、9、17、23天，白细胞计数始终比正常组低，差异有非常显著性统计学意义（P<0.01），说明核辐射能造成小鼠白细胞计数显著降低。给药组小鼠（皂矾丸组和药物各剂量组）在照射⁶⁰Co射线后的第17、23天，与模型组比，各组白细胞计数上升，差异有非常显著性统计学意义（P<0.01），说明各给药组的核辐射小鼠白细胞计数逐渐恢复上升，而且药物低剂量组的白细胞上升最大，药物低剂量组白细胞计数与皂矾丸组比，差异无统计学意义（P>0.05），提示药物低剂量组在该指标疗效与阳性药皂矾丸无差异。

表5：药物对⁶⁰Co射线照射小鼠外周血血小板计数的影响（

n=12）

注：组间进行t检验，与模型组比较^*P<0.05，^**P＜0.01；与皂矾丸组相比，^▲P＜0.05，^▲▲P＜0.01。

从表2可以看出，模型组小鼠在照射⁶⁰Co射线后的第3、9、17、23天，血小板计数始终比正常组低，差异有显著性统计学意义（P<0.01，P<0.05），说明核辐射能造成小鼠血小板计数显著降低。皂矾丸组和药物低剂量组在小鼠照射⁶⁰Co射线后第9、17、23天，血小板计数逐渐上升，均高于模型组，差异有显著性统计学意义（P<0.01，P<0.05），说明皂矾丸组和药物低剂量组的核辐射小鼠白细胞计数逐渐恢复，其中，在药物低剂量组小鼠在辐射后第23天，药物低剂量组白细胞计数上升最高，且高于皂矾丸组，差异有非常显著性统计学意义（P<0.01），提示药物低剂量组能显著提高辐射小鼠的血小板数量，且该指标疗效优于阳性对照药皂矾丸。

表6:药物对⁶⁰Co射线照射小鼠心、肝、脾、肺、肾指数影响（n=12）

注：组间进行t检验，与模型组比较^*P<0.05，^**P<0.01。

从表3可以看出，除了脾脏指数，模型组和各给药组小鼠的心、肝、肺、肾脏器指数与正常对照组相比，差异无统计学意义，说明小鼠无论给药与否，在照射⁶⁰Co射线后的第23天，其心、肝、肺、肾脏并无实质变化；但模型组小鼠的脾脏指数低于正常组，差异有显著统计学意义，说明辐射能对小鼠脾脏造成损伤；相对模型组，各给药组小鼠的脾脏指数均升高，差异有显著统计学意义（P<0.01，P<0.05），其中，药物低剂量组小鼠的脾脏指数上升最大。提示药物低剂量组对小鼠的脾脏有显著保护作用。

表7：药物对⁶⁰Co射线照射小鼠睾丸、精囊前列腺指数影响（

n=12）

注：组间进行t检验，与模型组比较^*P<0.05，^**P<0.01。

从表5可以看出，模型组小鼠的睾丸指数和精囊前列腺指数低于正常组，差异有显著性统计学意义（P<0.01，P<0.05），说明辐射小鼠的生殖系统受损坏。而皂矾丸组的睾丸指数和精囊前列腺指数与模型组比，差异无统计学意义（P>0.05），说明皂矾丸组没有对辐射致生殖系统损坏的保护作用。与模型组比，药物低剂量组的睾丸指数和精囊前列腺指数都有显著上升，差异有显著性统计学意义（P<0.01，P<0.05），提示药物低剂量组对生殖系统损坏有显著保护作用。

表8：药物对⁶⁰Co射线照射小鼠始、末体重及变化的影响（

n=12）

组别	剂量g/kg	初始体重g	终末体重g	体重变化值g
					正常对照组	-	19.65±1.74	38.80±2.07	19.15±2.23**
模型组	-	20.13±1.40	31.92±3.58	11.78±4.53
					皂矾丸组	1.40	20.68±0.81	33.37±2.59	12.69±2.91
药物高剂量组	12.00	21.68±0.97	36.60±1.57	14.93±4.30
					药物中剂量组	6.00	21.02±1.33	33.41±2.55	12.39±2.92
药物低剂量组	3.00	20.91±1.11	37.02±2.20	16.11±2.45*

注：组间进行t检验，与模型组比较^*P<0.05，^**P<0.01。

从表5可以看出，正常对照组小鼠生长较快，体重增长最大，模型组小鼠体重增长值最小，且与正常对照组相比有显著性差异（P<0.01）。给药组中仅药物低剂量组的小鼠体重增长最大，与模型组比，差异有显著性统计学差异（P<0.01），提示药物低剂量组有促进辐射小鼠体重增长的作用。

从以上统计结果可以看出，3.00g/kg剂量的药物对⁶⁰Co射线照射小鼠造成的造血系统、生殖系统损伤有显著的保护作用，能明显提升辐射小鼠的血小板、白细胞数量，提高脾脏指数、睾丸指数和精囊前列腺指数，增强辐射小鼠的免疫力和生殖机能，促进了辐射小鼠体重增长。

从图1可以看到，正常小鼠脾脏组织切片H-E染色后在显微镜下可见少量造血细胞，辐射损伤小鼠由于造血组织在不同程度上受到破坏或抑制，脾脏内残存的部分造血干、祖细胞可出现代偿性增生；辐射小鼠脾脏中染成深蓝色的白髓细胞集团相对正常组破坏严重，说明淋巴组织受到损坏。药物各剂量给药组小鼠造血细胞增生活跃，各系统造血细胞比例及形态较模型组多且增殖活跃，特别是药物低剂量组，除了造血细胞的形态和数量已经接近正常组，其白髓细胞也基本恢复到正常组水平，说明药物低剂量组小鼠的造血功能和免疫能力受辐射损坏较少。

从图2可以看出，正常组小鼠睾丸，生精上皮（管壁）厚，细胞层次宽，各级生精细胞排列规则，基底面至腔面可见精原细胞、初级精母细胞、精子细胞等各个发育阶段的细胞，细胞增殖旺盛，可见到较多分裂期细胞，腔内可见成熟精子，间质稀少，血管丰富，间质细胞发育良好；模型组生精小管大部分退化变性，萎缩，生精上皮（管壁）明显变薄，细胞层次减少，各级生精细胞排列紊乱甚至缺失，数量明显减少，生精小管腔内空虚，少见甚至未见成熟的精子，间质成分增宽，并且出现较大空隙，血管稀少，间质细胞减少或消失；药物低剂量组小鼠睾丸的镜下表现与正常组基本相同，各级生精细胞排列较规则，细胞增殖旺盛，间质细胞发育良好。说明药物低剂量组小鼠的生殖功能受辐射影响不大。

Claims (2)

1.一种具有抗辐射保护作用的复方药物，其特征在于，制得的该药物由以下重量份数的原料组成：西洋参：5～40份，当归：2～25份，南沙参：3～35份，仙鹤草：5～40份，重楼：3～30份。

2.如权利要求1所述的具有抗辐射保护作用的复方药物，其特征在于，制得的该药物由以下重量份数的原料组成：西洋参：25份，当归：8份，南沙参：12份，仙鹤草：25份，重楼10份。

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