CN103163228A

CN103163228A - 盐酸法舒地尔及其制剂的一种高效液相分析方法

Info

Publication number: CN103163228A
Application number: CN 201110419439
Authority: CN
Inventors: 王成; 刘跃跃; 乔德水; 高雪芹
Original assignee: Jiangsu Wanbang Biological Pharmaceutical Co Ltd; Shanghai Fosun Pharmaceutical Group Co Ltd
Current assignee: Jiangsu Wanbang Biological Pharmaceutical Co Ltd; Shanghai Fosun Pharmaceutical Group Co Ltd
Priority date: 2011-12-15
Filing date: 2011-12-15
Publication date: 2013-06-19

Abstract

盐酸法舒地尔及其制剂的一种高效液相分析方法其特征在于采用紫外检测器，对盐酸法舒地尔及其制剂的有关物质和含量进行测定。应用本方法进行测定，方法简单，精密度高，稳定性好，重现性好。

Description

盐酸法舒地尔及其制剂的一种高效液相分析方法

技术领域

本发明属于药物新技术领域，涉及一种用于改善及预防蛛网膜下腔出血术后的脑血管痉挛及其引起的脑缺血症状的药物盐酸法舒地尔及其制剂分析测定方法，具体的说是一种高效液相色谱法，采用紫外检测器，利用特征峰吸收，选用适当的流动相，对盐酸法舒地尔及其制剂进行有关物质分析和含量测定。

背景技术

根据文献报道及国家药品标准，测定盐酸法舒地尔及其制剂采用高效液相分析方法有：

国家进口注册标准收载的制剂含量方法

照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录v D)。

色谱条件与系统适应性试验：用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱；以0.05mol/L磷酸二氢铵-乙腈(65∶10)为流动相；检测波长为280nm，理论塔板数按盐酸法舒地尔峰计算应不低于3000，盐酸法舒地尔峰与内标物峰的分离度应大于5。

内标溶液的制备：取无水咖啡因，加水溶解成每1ml中含3mg咖啡因的溶液，即得。

测定法：精密量取本品与内标物溶液各5ml，至同一100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取盐酸法舒地尔对照品适量，精密称定，加水溶解并稀释成每1ml含15mg的溶液；精密量取该溶液与内标物溶液各5ml，至同一100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；精密量取供试品溶液与对照品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按内标法以峰面积计算，即得。

国家药品标准收载的原料有关物质的方法

取本品，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含0.3mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照液。照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录v D)测定。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以1.0％三乙胺水溶液(用磷酸调PH至7.0)-甲醇(15∶15)为流动相；检测波长为275nm。理论板数按盐酸法舒地尔峰计算一般不低于6600，盐酸法舒地尔峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10％～20％。再精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的3倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰的峰面积不得大于对照溶液主峰面积的3/10，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液的主峰面积。

国家药品标准收载的制剂含量测定方法

取本品，加水制成每1ml中约含盐酸法舒地尔30μg的溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版二部附录IV A)，在275nm的波长处测定吸光度；另取盐酸法舒地尔对照品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释成每1ml中约含盐酸法舒地尔30μg的溶液，同法测定，计算，即得。

国家药品标准收载的原料含量测定方法

取本品约0.13g，精密称定，加无水甲酸8ml，冰醋酸30ml与醋酸汞试液5ml溶解后，照电位滴定法(《中国药典》2010年版二部附录VII A)，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于16.39mg的C14H17N3O2S·HCl。

以上有关物质分析方法，色谱图谱峰形较差，拖尾严重，拖尾因子超过了2.0，且色谱图出峰时间早，主峰保留时间4～5分钟，不利于有关物质检测；以上含量测定的方法精密度不高，且国家进口注册标准收载制剂含量方法中用到了咖啡因，国家药品标准收载的原料含量测定方法中用到了醋酸汞。

为严格控制药物的质量，提高药物的安全性，减少对人体和环境造成的危害，最后摸索出一套适合盐酸法舒地尔及制剂有关物质和含量测定的分析方法。该方法色谱图谱以盐酸法舒地尔峰计算理论塔板数超过10000，拖尾因子约为1.2。且方法快速简便，精密度高，稳定性好，结果准确，重复性试验及含量回收率试验RSD均小于2.0％，最低检出量(s/n＝3)为0.00005μg/ml。

发明内容

本发明目的在于提供一种稳定性好、重现性好、操作简单、理论塔板数高、拖尾因子适中，用于盐酸法舒地尔及其制剂的分析测定方法。应用该方法测定治疗改善及预防蛛网膜下腔出血术后的脑血管痉挛及其引起的脑缺血症状的药物盐酸法舒地尔及其制剂，方便可行，准确度高，对人体和环境造成的危害小。

本发明解决上述技术问题所采取的技术方案是：采用高效液相色谱法，将盐酸法舒地尔及其制剂用流动相溶解稀释成每1ml中含盐酸法舒地尔0.01mg～2mg的溶液作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，利用紫外检测器，检测波长270nm～290nm，乙腈-磷酸盐溶液作为流动相，磷酸盐溶液中加入拖尾剂，流动相流速为0.5～2.0ml/min，采用固定相烷基键合硅胶色谱柱，对盐酸法舒地尔及其制剂的有关物质和含量进行测定。其中所述的流动相中含乙腈的体积比例范围为5％～25％，含磷酸盐溶液的体积比例范围为75％～95％。

所述的拖尾剂为三乙胺，在磷酸盐溶液中所含体积比例范围为0.1％-1％。

在上述技术方案基础上，所述的固定相烷基键合硅胶为辛烷键合硅胶。

在上述技术方案基础上，所述的磷酸盐溶液为磷酸铵盐溶液。

在上述技术方案基础上，所述的磷酸铵盐溶液为磷酸二氢铵溶液，其中磷酸二氢铵质量体积浓度为0.5％～10％，最佳为5.75％。

在上述技术方案基础上，所述的检测波长为275nm，供试品溶液含盐酸法舒地尔为0.3mg/ml，进样体积为20μl，流动相流速为1ml/min，三乙胺在磷酸盐溶液中所含体积比例范围为0.5％。

本发明的有益效果是：

本发明利用方便快捷的高效液相色谱法，对盐酸法舒地尔及制剂有关物质进行检测，色谱图主峰理论塔板数高(大于10000)，拖尾因子好，重复性、准确度及稳定性均十分良好；对盐酸法舒地尔及制剂含量进行检测，实验过程中没有用到试剂醋酸汞和咖啡因，替代已有的检测方法，降低了实验成本，减少了实验时防护用品的使用，提高了工作效率，降低了试剂对人体和环境的危害。

附图说明

图1为色谱条件下样品的色谱图。

具体实施方式

仪器：一套简单高效液相色谱仪，包括液相泵、紫外检测器、进样器

试剂：磷酸二氢铵(分析纯)、乙腈(色谱纯)、三乙胺(分析纯)、

色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶柱色谱柱

检测波长：275nm

以下实施例说明本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1：有关物质

照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录V D)测定。

色谱条件与系统适应性试验用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L的磷酸二氢铵缓冲液(磷酸二氢铵5.75g，加水1000ml，加5ml三乙胺，混匀，即得)-乙腈(60∶10)为流动相；检测波长为275nm。理论板数按盐酸法舒地尔峰计算一般不低于6600，盐酸法舒地尔峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。

测定法取本品，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含盐酸法舒地尔0.3mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10％～20％。再精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的3.5倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰的峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1/10，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液的主峰面积。

实施例2：含量测定

照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录V D)测定。

测定法取本品，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含0.3mg的溶液，作为供试品溶液；另取盐酸法舒地尔对照品，加流动相溶解并稀释制成每1ml中盐酸法术地尔含0.3mg的溶液，作为对照溶液。取对照溶液及供试品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按面积以外标法计算，即得。

Claims

1.盐酸法舒地尔及其制剂的一种高效液相分析方法，特征在于：用高效液相色谱法，将盐酸法舒地尔及其制剂用流动相溶解稀释成每1ml中含盐酸法舒地尔0.01mg～2mg的溶液作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪，进样体积为5～100μl，利用紫外检测器，检测波长270nm～290nm，乙腈-磷酸盐溶液作为流动相，磷酸盐溶液中加入拖尾剂，流动相流速为0.5～2.0ml/min，采用固定相烷基键合硅胶色谱柱，对盐酸法舒地尔及其制剂的有关物质和含量进行测定。

其中所述的流动相中含乙腈的体积比例范围为5％～25％，含磷酸盐溶液的体积比例范围为75％～95％。

所述的拖尾剂为三乙胺，在磷酸盐溶液中所含体积比例范围为0.1％～1％。

2.根据权利要求1，盐酸法舒地尔及其制剂的一种高效液相分析方法，特征在于：用高效液相色谱法，所述的固定相烷基键合硅胶为辛烷键合硅胶。

3.根据权利要求1，盐酸法舒地尔及其制剂的一种高效液相分析方法，特征在于：乙腈-磷酸盐溶液作为流动相，所述的磷酸盐溶液为磷酸铵盐溶液。

4.根据权利要求4，盐酸法舒地尔及其制剂的一种高效液相分析方法，特征在于：腈-磷酸盐溶液作为流动相，所述的磷酸铵盐溶液为磷酸二氢铵溶液，其中磷酸二氢铵质量体积浓度为0.5％～10％，最佳为5.75％。

5.根据权利要求1，盐酸法舒地尔及其制剂的一种高效液相分析方法，其特征在于：用的检测波长为275nm，供试品溶液含盐酸法舒地尔为0.3mg/ml，进样体积为20μl，流动相流速为1ml/min，三乙胺在磷酸盐溶液中所含体积比例范围为0.5％。