CN103160484A - 麸皮液体发酵制备米黑毛霉凝乳酶的方法 - Google Patents

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张卫兵
艾对元
赵炜
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Abstract

本发明公开了一种麸皮液体发酵制备米黑毛霉凝乳酶方法。本发明制备米黑毛霉凝乳酶的步骤包括菌种活化、孢子悬浮液的制备、液体发酵培养基的制备、接种、发酵培养、酶液制备。本发明的制备方法原料价格低廉，操作工艺简单，发酵周期短，降低了生产成本，适合生产推广。

Description

麸皮液体发酵制备米黑毛霉凝乳酶的方法
技术领域
本发明属于生物工程技术领域，涉及一种以麸皮为原料液体发酵制备米黑毛霉凝乳酶的方法。
背景技术
麦麸俗称麸皮、小麦麸，是以小麦籽实为原料加工面粉后得到的副产品，主要为小麦的种皮，占小麦籽粒质量的20％左右。我国有着巨大的麦麸资源，年产量约7000～8000万t左右。麦麸质地疏松、比重小、表面积大，其中含粗蛋白9.4～17.5％，粗脂肪1.7～5.6％，另外还含有丰富的膳食纤维、维生素、矿物质以及低聚糖和酚类化合物等成分。目前麦麸大多经简单加工后作为饲料配料或食醋、酱油酿造的原料，利用率较低。
凝乳酶是干酪和干酪素生产过程中的关键性酶，其主要作用是专一性的剪切酪蛋白Phe105-Met106的肽键，从而使酪蛋白胶粒发生沉淀。凝乳酶主要有三种来源，分别为动物凝乳酶，植物凝乳酶和微生物凝乳酶。微生物具有生长周期短，生长速度快，生长条件易于控制，生产成本低等特点，目前各国的发酵工业都比较发达，发酵产物的提取工艺比较完善。因此，对由微生物所分泌的凝乳酶的研究和开发有广阔的前景。国内微生物凝乳酶菌种的产酶活力偏低，工艺复杂，导致生产成本过高，不易工业化大规模生产。本发明引进的米黑毛霉菌株，具有营养要求低、繁殖快、发酵产物易于提取分离、发酵周期短和凝乳酶产生能力强等优点，且其发酵生产的凝乳酶适合于干酪和干酪素生产。
发明内容
本发明的目的是提供一种以麸皮为原料制备凝乳酶的方法。本发明从国外引进优良菌种资源，采用液体制种固体发酵的方法，有效缩短了发酵周期。另外本发明以麸皮为原料进行液体发酵，有效解决了麸皮的利用问题，实现了农副产品的综合利用，同时有效缓解了凝乳酶市场供应不足的问题，工艺简单，便于进行工业化推广。本发明的目的是按如下技术方案实现的，其特征是它包括以下步骤：
(1)菌种活化
将保藏的米黑毛霉菌种(ATCC编号26282)接种于制备好的PDA斜面上，30℃培养72～96h，待孢子成熟即可使用；
(2)孢子悬浮液的制备
向培养成熟的试管斜面中注入5mL无菌生理盐水，用接种环或无菌玻棒搅动，刮下米黑毛霉孢子，振荡均匀并稀释至106个/mL，得到孢子悬液；
(3)液体发酵培养基的制备
将麸皮按10％(W/V)加入自来水，121℃灭菌10min，四层纱布过滤，得到液体发酵培养基；
(4)接种培养
将孢子悬液按5％(V/V)接入液体发酵培养基中，30℃、180～220r/min摇瓶培养96～120h，得到发酵液；
(5)酶液制备
将发酵液于5000r/min、4℃低温离心15min，取上清液过0.45um微孔滤膜，得到酶液。本发明的有益效果
(1)工艺简单，发酵周期短，适于工业化推广。
(2)以麸皮为原料液体发酵生产凝乳酶，生产成本较低。
(3)采用优良菌种进行发酵，得到液体凝乳酶活力高。
具体实施方式
下面的实施例可以进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1
将保藏的米黑毛霉菌种接种于制备好的PDA斜面上，30℃培养72h，待孢子成熟即可使用；向培养成熟的试管斜面中注入5mL无菌生理盐水，用接种环或无菌玻棒搅动，刮下米黑毛霉孢子，振荡均匀并稀释至106个/mL，得到孢子悬液；将麸皮按10％(W/V)加入自来水，121℃灭菌10min，四层纱布过滤，得到液体发酵培养基；将孢子悬液按5％(V/V)接入液体发酵培养基中，30℃、180r/min摇瓶培养96h，得到发酵液；将发酵液于5000r/min、4℃低温离心15min，取上清液过0.45um微孔滤膜，得到酶液。
实施例2
将保藏的米黑毛霉菌种接种于制备好的PDA斜面上，30℃培养84h，待孢子成熟即可使用；向培养成熟的试管斜面中注入5mL无菌生理盐水，用接种环或无菌玻棒搅动，刮下米黑毛霉孢子，振荡均匀并稀释至106个/mL，得到孢子悬液；将麸皮按10％(W/V)加入自来水，121℃灭菌10min，四层纱布过滤，得到液体发酵培养基；将孢子悬液按5％(V/V)接入液体发酵培养基中，30℃、200r/min摇瓶培养108h，得到发酵液；将发酵液于5000r/min、4℃低温离心15min，取上清液过0.45um微孔滤膜，得到酶液。
实施例3
将保藏的米黑毛霉菌种接种于制备好的PDA斜面上，30℃培养96h，待孢子成熟即可使用；向培养成熟的试管斜面中注入5mL无菌生理盐水，用接种环或无菌玻棒搅动，刮下米黑毛霉孢子，振荡均匀并稀释至106个/mL，得到孢子悬液；将麸皮按10％(W/V)加入自来水，121℃灭菌10min，四层纱布过滤，得到液体发酵培养基；将孢子悬液按5％(V/V)接入液体发酵培养基中，30℃、220r/min摇瓶培养120h，得到发酵液；将发酵液于5000r/min、4℃低温离心15min，取上清液过0.45um微孔滤膜，得到酶液。

Claims (1)

1.一种麸皮液体发酵制备米黑毛霉凝乳酶的方法，其特征在于步骤如下：
(1)菌种活化
将保藏的米黑毛霉菌种(ATCC编号26282)接种于制备好的PDA斜面上，30℃培养72～96h，待孢子成熟即可使用；
(2)孢子悬浮液的制备
向培养成熟的试管斜面中注入5mL无菌生理盐水，用接种环或无菌玻棒搅动，刮下米黑毛霉孢子，振荡均匀并稀释至106个/mL，得到孢子悬液；
(3)液体发酵培养基的制备
将麸皮按10％(W/V)加入自来水，121℃灭菌10min，四层纱布过滤，得到液体发酵培养基；
(4)接种培养
将孢子悬液按5％(V/V)接入液体发酵培养基中，30℃、180～220r/min摇瓶培养96～120h，得到发酵液；
(5)酶液制备
将发酵液于5000r/min、4℃低温离心15min，取上清液过0.45um微孔滤膜，得到酶液。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103740685A (zh) * 2013-10-11 2014-04-23 孟乙 利用米黑毛霉生产凝乳酶的方法
CN104232609A (zh) * 2014-09-23 2014-12-24 甘肃农业大学 一种以麸皮为原料制备液体凝乳酶的方法
CN110157627A (zh) * 2019-06-04 2019-08-23 巢湖学院 一种小麦麸皮红曲霉发酵液的制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3912226A1 (de) * 1988-04-15 1989-11-09 Toyo Jozo Kk Reagens fuer die analyse von triglyceriden und analysenmethode fuer triglyceride
CN102382808A (zh) * 2011-11-27 2012-03-21 甘肃华羚生物技术研究中心 凝乳酶的制备方法
CN102703405A (zh) * 2012-06-28 2012-10-03 甘肃农业大学 一种以麸皮为原料制备乳糖酶的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3912226A1 (de) * 1988-04-15 1989-11-09 Toyo Jozo Kk Reagens fuer die analyse von triglyceriden und analysenmethode fuer triglyceride
CN102382808A (zh) * 2011-11-27 2012-03-21 甘肃华羚生物技术研究中心 凝乳酶的制备方法
CN102703405A (zh) * 2012-06-28 2012-10-03 甘肃农业大学 一种以麸皮为原料制备乳糖酶的方法

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
周俊清等: "产高效凝乳酶菌株获得方法的探讨", 《食品科学》 *
孙健: "总状毛霉凝乳酶的研制及初步应用", 《微生物学通报》 *
宋礼等: "米黑毛霉凝乳酶酶学性质研究", 《食品工业科技》 *
廖亮: "凝乳酶高产菌株的诱变选育及其发酵条件、产物酶学活性的相关研究", 《中国优秀硕士学问论文全文数据库》 *
张丽红: "微小毛霉凝乳酶及其重组酶的产酶条件和酶学特性的研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》 *
李方方等: "米曲霉基因表达研究进展及应用", 《中国酿造》 *
金娟男，张兰威: "微小毛霉与米黑毛霉凝乳酶的制备及其凝乳质构特性研究", 《中国酿造》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103740685A (zh) * 2013-10-11 2014-04-23 孟乙 利用米黑毛霉生产凝乳酶的方法
CN104232609A (zh) * 2014-09-23 2014-12-24 甘肃农业大学 一种以麸皮为原料制备液体凝乳酶的方法
CN110157627A (zh) * 2019-06-04 2019-08-23 巢湖学院 一种小麦麸皮红曲霉发酵液的制备方法

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