CN103053787A - 一种微生物固态发酵花生粕制备花生肽的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于花生蛋白加工技术领域，具体涉及一种微生物固态发酵花生粕制备花生肽的方法。该方法通过菌种选择、活化；制备混合发酵菌；制备固态发酵培养基；固态发酵、粗制品、分离、真空浓缩、冷冻干燥的步骤得到花生肽成品。本发明的微生物固态发酵花生粕制备花生肽的方法，解决了传统液态发酵法发酵液产品提取后产生大量废液，污染严重的难题，具有节水、节能的独特优势，且没有废液产生，属于清洁生产技术，而且其投资规模和生产成本要比液态法低，具有显著的经济效益和社会效益。
Description
技术领域
本发明属于花生蛋白加工技术领域，具体涉及一种微生物固态发酵花生粕制备花生肽的方法。
背景技术
花生是我国重要的油料作物和食用作物, 产量和出口量高居世界首位。目前，中国对花生的利用多在食用油脂的提取一面，对花生蛋白的利用较少。花生蛋白是花生在提取油脂、脂肪后的剩余物质，也称之为花生粕。花生的蛋白质含量为25%～30%，花生蛋白含有人体必需的八种氨基酸，精氨酸含量高于其它坚果，生物学效价高于大豆。目前国内市场上的花生蛋白产品主要是花生蛋白粉, 一般是作为食品加工中的基础原料。花生蛋白粉存在着不易吸收、生理活性较差等缺点， 所以在花生蛋白粉的基础上，进一步开发和利用这一巨大的潜在蛋白资源生产高附加值产品成了当务之急。
研究表明，花生蛋白活性肽是有3～6个氨基酸组成的，分子量在130～5000 Dalton，主要在500～2000 Dalton间呈正态分布的低聚肽，其呈粉末状，无结块现象，无杂质，无异味，且有花生原有的淡淡的清香气味，具有良好的水溶性，持水性，能在PH2～10的条件下完全溶解。花生蛋白活性肽能与其他食品配料完全融合，并保持各有的物化营养特性。花生蛋白活性肽氨基酸组成均衡，全面，含人体必需的8种氨基酸，特别是谷氨酸和天门冬氨酸的含量较高，对促进人体脑细胞发育和增加记忆力都有良好的作用。花生氨基酸与人体氨基酸的组成非常相近，极易被人体吸收利用，而且不含胆固醇。具有易于消化吸收、恢复体力、增强免疫力、降低血压、促进脂肪代谢、保健养生等功效。花生作为优质食品来源，花生肽具有它特有的优势。
当前常见的花生肽的制备方法有酶解法和微生物发酵法。酶解法具有产品安全性高、生产条件温和、水解易控制、可定位生产特定的花生肽等优点，其缺点是花生蛋白利用率不高。酶解法仅限于少数几种微生物蛋白酶、动物蛋白酶和植物蛋白酶，酶解产肽率相对较低且成本高，肽酶价格和脱苦成本也都相应增加。微生物发酵法因其把蛋白酶的发酵生产和花生肽的酶解生产结合在一起，降低了花生肽的生产成本。微生物发酵法生产花生肽主要利用的是发酵菌株的产酶及酶解能力，目前应用较广的微生物主要是枯草杆菌1389、放线菌166、栖土曲霉3942、黑曲霉3350 和地衣型芽抱杆菌2709 等。应用于微生物发酵生产花生肽的技术方法，当前主要是液态发酵技术。液态发酵液产品提取后产生大量废液, 生产规模越大，废液越多，污染越重。
发明内容
为了解决现有的液态发酵技术存在的问题，本发明提供一种微生物固态发酵花生粕制备花生肽的方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种微生物固态发酵花生粕制备花生肽的方法，包括以下步骤：
1、制备混合发酵菌：枯草芽孢杆菌、热带假丝酵母、黑曲霉和乳酸链球菌分别活化培养；将花生粕粉、淀粉、NaCl和水按照50︰10︰1︰150的重量比混合，调节pH值为7.0～7.5，121℃灭菌30min，将四种活化菌种以1:1:1:1的重量比接入，摇瓶培养48h得混合发酵菌种；
2、将花生粕粉碎，过筛，加入麸皮、水，接种混合发酵菌种，制成固态发酵培养基；
3、将步骤2的固态发酵培养基于40～42℃振摇发酵72～80h，得发酵物料，发酵物料经90～95℃热风烘10～12h至干燥，得到干燥发酵物料粗制品；
4、将上述发酵物料粗制品经膜分离、真空浓缩、冷冻干燥即得到花生肽成品。
所述的固态发酵培养基各种成分按照重量份为：花生粕60～70份，水20～30份，麸皮6～10份，混合发酵菌种5～6份。
本发明的微生物固态发酵花生粕制备花生肽的方法，解决了传统液态发酵法发酵液产品提取后产生大量废液,污染严重的难题，具有节水、节能的独特优势，且没有废液产生，属于清洁生产技术，而且其投资规模和生产成本要比液态法低，具有显著的经济效益和社会效益。
具体实施方式
实施例1本实施例的微生物固态发酵花生粕制备花生肽的方法，具体步骤如下所述：
1、微生物菌种的选择、活化培养
选择产酶能力强，且有效互补的菌种枯草芽孢杆菌、热带假丝酵母、黑曲霉和乳酸链球菌，活化培养：
将枯草芽孢杆菌菌种接种于LB培养基于30℃，振荡培养48h，备用；
热带假丝酵母菌菌种接种于LB培养基摇瓶培养，培养温度35℃，振荡培养48h备用；
黑曲霉接种于PDA培养基于37℃静止培养36h，备用；
乳酸链球菌接种于MRS培养基于37℃静止厌氧培养72h，备用；
2、制备混合发酵菌种
将花生粕粉、淀粉、NaCl和水按照50︰10︰1：150的重量比混合，调节pH值为7.0～7.5，121℃灭菌30min，将步骤1中的四种活化菌种等重量比接入（四种菌的接种比例为重量比1:1:1:1），摇瓶培养48h得混合发酵菌种，备用；
3、将花生粕粉碎，过筛，加入麸皮、水，接种混合发酵菌种，制成固态发酵培养基；发酵体系各种成分按照重量份为：花生粕70份，30份，麸皮10份，混合发酵菌种6份；
4、将固态发酵培养基于42℃振摇发酵80h，得发酵物料，发酵物料经93℃热风烘10h至干燥，得到干燥发酵物料粗制品；
5、将上述粗制品经膜分离、真空浓缩、冷冻干燥即得到花生肽成品。
实施例2本实施例的微生物固态发酵花生粕制备花生肽的方法，具体步骤如下所述：
1、微生物菌种的选择、活化培养
选择产酶能力强，且有效互补的菌种枯草芽孢杆菌、热带假丝酵母、黑曲霉和乳酸链球菌，活化培养：
将枯草芽孢杆菌菌种接种于LB培养基于30℃，振荡培养48h，备用；
热带假丝酵母菌菌种接种于LB培养基摇瓶培养，培养温度35℃，振荡培养48h，备用；
黑曲霉接种于PDA培养基于37℃静止培养36h，备用；
乳酸链球菌接种于MRS培养基于37℃静止厌氧培养72h，备用；
2、制备混合发酵菌种
将花生粕粉、淀粉、NaCl和水按照50︰10︰1：150的重量比混合，调节pH值为7.0～7.5，121℃灭菌30min，将步骤1中的四种活化菌种等重量比接入（四种菌的接种比例为重量比1:1:1:1），摇瓶培养48h得混合发酵菌种，备用；
3、将花生粕粉碎，过筛，加入麸皮、水，接种混合发酵菌种，制成固态发酵培养基；发酵体系各种成分按照重量份为：花生粕60份，水20份，麸皮8份，混合发酵菌种5份；
4、将固态发酵培养基于40℃振摇发酵72h，得发酵物料，发酵物料经90℃热风烘10h至干燥，得到干燥发酵物料粗制品；
5、将上述粗制品经膜分离、真空浓缩、冷冻干燥即得到花生肽成品。
Claims (2)
1.一种微生物固态发酵花生粕制备花生肽的方法，包括以下步骤：
（1）、制备混合发酵菌：枯草芽孢杆菌、热带假丝酵母、黑曲霉和乳酸链球菌分别活化培养；将花生粕粉、淀粉、NaCl和水按照50︰10︰1︰150的重量比混合，调节pH值为7.0～7.5，121℃灭菌30min，将四种活化菌种以1:1:1:1的重量比接入，摇瓶培养48h得混合发酵菌种；
（2）、将花生粕粉碎，过筛，加入麸皮、水，接种混合发酵菌种，制成固态发酵培养基；
（3）、将步骤2的固态发酵培养基于40～42℃振摇发酵72～80h，得发酵物料，发酵物料经90～95℃热风烘10～12h至干燥，得到干燥发酵物料粗制品；
（4）、将上述发酵物料粗制品经膜分离、真空浓缩、冷冻干燥即得到花生肽成品。
2.根据权利要求1所述的微生物固态发酵花生粕制备花生肽的方法，其特征在于，所述的固态发酵培养基各种成分按照重量份为：花生粕60～70份，水20～30份，麸皮6～10份，混合发酵菌种5～6份。
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