CN106360613A - 一种利用草菇深层发酵菌丝体制备草菇精粉的方法 - Google Patents

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张伟伟
李秉业
李洪久
刘杨
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Abstract

本发明涉及一种利用草菇深层发酵菌丝体制备草菇精粉的方法，步骤如下：⑴深层发酵菌丝体；⑵菌丝体破碎；⑶酶解；⑷浓缩；⑸喷雾干燥，即得草菇精粉。本发明方法利用深层发酵技术结合定向生物酶解技术，以深层发酵菌丝体为原料制得草菇精粉，突破了传统以子实体进行草菇深加工的方法，得到的草菇精粉的肽基氮达到80‑90％，小肽(相对分子质量在1000D以下)含量丰富，在85％以上，该草菇精粉鲜味饱满、醇厚。

Description

一种利用草菇深层发酵菌丝体制备草菇精粉的方法
技术领域
本发明属于食品加工技术领域，尤其是一种利用草菇深层发酵菌丝体制备草菇精粉的方法。
背景技术
草菇，别名美味草菇、美味苞脚菇等，不仅具有肉质脆嫩，味道鲜美，营养丰富的特点，而且具有较高的食疗价值，经常食用既可以补充人体所需的营养物质，又可以强身健体，我国草菇的年生产量占全世界总产量的70％以上，居世界之首。但是对于草菇的利用主要以直接食用为主，利用方式简单，附加值低。因此，开展草菇深加工，提高草菇的附加值有重要的意义。
目前对于草菇的深加工主要是以子实体为原料，不仅生产成本高，而且易受季节限制，生产过程中产生的菌糠对周围农业生态环境造成的污染。并且子实体的细胞壁由蛋白质、几丁质、葡聚糖、纤维素等成分组成，结构坚固、致密，营养成分及风味物质难以释放，不易进行酶解等工艺。
深层发酵技术属于现代生物技术之一，具有生产周期短、生长条件易控制、产量高、可以实现大规模产业化等优点，而且不会对农业生态环境造成的污染。而深层发酵菌丝体与子实体相比粗蛋白含量较高，粗纤维含量较低，更利于酶解等工艺的实施。
通过检索，尚未发现与本发明专利申请相关的专利公开文献。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种利用草菇深层发酵菌丝体制备草菇精粉的方法，该方法利用深层发酵技术培养菌丝体，以深层发酵菌丝体为原料制得草菇精粉，突破了传统以子实体进行草菇深加工的方法，结合定向生物酶解技术，得到肽基氮达到80-90％，小肽(相对分子质量在1000D以下)含量丰富，在85％以上，鲜味饱满、醇厚。
本发明解决其技术问题是采取以下技术方案实现的：
一种利用草菇深层发酵菌丝体制备草菇精粉的方法，步骤如下：
⑴深层发酵菌丝体：以草菇为菌种，进行深层发酵，得包含菌丝体的发酵液；
⑵菌丝体破碎：利用高速组织捣碎机将包含菌丝体的发酵液打碎，转速8000～12000rpm，时间5～20min，再过胶体磨，进行匀浆；
⑶酶解：使用1mol/L食品级盐酸溶液调节pH至4.5～6.5，加入菌丝体重量0.01～0.1％的β-葡聚糖酶，45～65℃酶解1～3h，再用1mol/L食品级氢氧化钠溶液调节pH至6.0～8.0，加入菌丝体重量0.01～0.1％的蛋白酶，45～65℃酶解1～3h，升温至85～100℃，保持5～15min，即得酶解液；
⑷浓缩：将步骤⑶得到的酶解液过滤，然后采用低温真空浓缩法浓缩滤液，浓缩液质量为浓缩前的1/2，浓缩温度为40～70℃，得浓缩后酶解液；
⑸喷雾干燥：将浓缩后酶解液进行喷雾干燥，工艺参数为进风温度190℃，出风温度85℃，料液流量为30ml/min，即得草菇精粉。
而且，所述步骤⑴的具体操作步骤为：
①接种：从试管斜面上挑取草菇菌丝，接种到种子培养基中，20～40℃培养，转速50～200r/min，培养时间3～10天，得到液体种子；
②发酵培养：将液体种子倒入发酵培养基，发酵条件为：接种量4～14％，初始pH值6.0～8.5，装液量20～70％，装液量是指占容器的体积比，培养温度20～40℃，转速50～200r/min，培养时间3～10天，即得包含菌丝体的发酵液。
而且，所述种子培养基为：马铃薯200g，麸皮80g，葡萄糖10g，蛋白胨4g，硫酸镁1.5g，磷酸二氢钾2g，水1000ml，pH自然；
所述发酵培养基为：葡萄糖20g，蛋白胨4g，硫酸镁1.5g，磷酸二氢钾2g，水1000ml。
而且，所述步骤⑷过滤时使用200目的滤布过滤。
而且，所述步骤⑶中蛋白酶为风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶的复配酶，复配质量比例为1：1：2。
本发明的优点和积极效果是：
1、本发明方法利用深层发酵技术结合定向生物酶解技术，以深层发酵菌丝体为原料制得草菇精粉，突破了传统以子实体进行草菇深加工的方法，得到的草菇精粉的肽基氮达到80-90％，小肽(相对分子质量在1000D以下)含量丰富，在85％以上，该草菇精粉鲜味饱满、醇厚。
2、本发明方法采用深层发酵技术获得菌丝体，具有生产周期短、生长条件易控制、产量高、可以实现大规模产业化等优点，可以解决以子实体为原料进行产品开发，由于子实体栽培周期长，出菇期短、产量低，造成的生产成本高，而且易受季节限制的缺点，缩短了草菇精粉的生产周期，而且不会产生菌糠对周围农业生态环境造成污染，保护环境，提高了草菇的附加值。
3、本发明方法使用的深层发酵菌丝体与子实体相比，蛋白质提高了30％以上，而粗纤维降低了50％，更有利于蛋白质的酶解，减少了酶制剂的使用量，并缩短了酶解时间，大大降低能耗，减少了成本。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明进一步说明；下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
本发明中所使用的原料，如无特殊说明，均为常规的市售产品；本发明中所使用的方法，如无特殊说明，均为本领域的常规方法。
实施例1：
一种利用草菇深层发酵菌丝体制备草菇精粉的方法，步骤如下：
(1)深层发酵菌丝体：以草菇为菌种，进行深层发酵，得包含菌丝体的发酵液。
(2)菌丝体破碎：利用高速组织捣碎机将包含菌丝体的发酵液打碎，转速8000～12000rpm，时间5～20min，再过胶体磨，进行匀浆。
(3)酶解：使用1mol/L食品级盐酸溶液调节pH至4.5～6.5，加入菌丝体重量0.01～0.1％的β-葡聚糖酶，45～65℃酶解1～3h，再用1mol/L食品级氢氧化钠溶液调pH至6.0～8.0，加入菌丝体重量0.01～0.1％的蛋白酶，45～65℃酶解1～3h，升温至85～100℃，保持5～15min，即得酶解液。
(4)浓缩：将步骤(3)得到的酶解液过滤，然后采用低温真空浓缩法浓缩滤液，浓缩液质量为浓缩前的1/2，浓缩温度为40～70℃，得浓缩后酶解液。
(5)喷雾干燥：将酶解液进行喷雾干燥，工艺参数为进风温度190℃，出风温度85℃，料液流量为30ml/min，即得草菇精粉。
其中，所述步骤(1)的具体操作步骤为：
①接种：从试管斜面上挑取草菇菌丝，接种到种子培养基(马铃薯200g，麸皮80g，葡萄糖10g，蛋白胨4g，硫酸镁1.5g，磷酸二氢钾2g，水1000ml，pH自然)中，20～40℃培养，转速50～200r/min，培养时间3～10天，得到液体种子。
②发酵培养：将液体种子倒入发酵培养基(葡萄糖20g，蛋白胨4g，硫酸镁1.5g，磷酸二氢钾2g，水1000ml)，发酵条件为接种量4～14％，初始pH值6.0～8.5，装液量20～70％(占容器的体积比)，培养温度20～40℃，转速50～200r/min，培养时间3～10天，即得包含菌丝体的发酵液。
所述步骤(3)中蛋白酶为风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶的复配酶，复配质量比例为1:1:2。
实施例2：
一种利用草菇深层发酵菌丝体制备草菇精粉的方法，步骤如下：
(1)深层发酵菌丝体：以草菇为菌种，进行深层发酵，得包含菌丝体的发酵液。
(2)菌丝体破碎：利用高速组织捣碎机将包含菌丝体的发酵液打碎，转速8000rpm，时间20min，再过胶体磨，进行匀浆。
(3)酶解：用1mol/L食品级盐酸溶液调pH至4.5，加入菌丝体重量0.01％的β-葡聚糖酶，55℃酶解1h，再用1mol/L食品级氢氧化钠溶液调pH至6.0，加入菌丝体重量0.01％的蛋白酶，55℃酶解1h，升温至90℃，保持10min，即得酶解液。
(4)浓缩：将步骤(3)得到的酶解液过滤(滤布为200目，然后采用低温真空浓缩法浓缩滤液，浓缩液质量为浓缩前的1/2，浓缩温度为45℃，得浓缩后酶解液。
(5)喷雾干燥：将酶解液进行喷雾干燥，工艺参数为进风温度190℃，出风温度85℃，料液流量为30ml/min，即得草菇精粉。
其中，所述步骤(1)的具体操作步骤为：
①接种：从试管斜面上挑取草菇菌丝，接种到种子培养基(马铃薯200g，麸皮80g，葡萄糖10g，蛋白胨4g，硫酸镁1.5g，磷酸二氢钾2g，水1000ml，pH自然)中，30℃培养，转速100r/min，培养时间5天，得到液体种子。
②发酵培养：将液体种子倒入发酵培养基(葡萄糖20g，蛋白胨4g，硫酸镁1.5g，磷酸二氢钾2g，水1000ml)，发酵条件为接种量6％，初始pH值6.0，装液量30％(占容器的体积比)，培养温度30℃，转速100r/min，培养时间5天，即得包含菌丝体的发酵液。
所述步骤(3)中蛋白酶为风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶的复配酶，复配质量比例为1:1:2。
实施例3：
一种利用草菇深层发酵菌丝体制备草菇精粉的方法，步骤如下：
(1)深层发酵菌丝体：以草菇为菌种，进行深层发酵，获得包含菌丝体的发酵液。
(2)菌丝体破碎：利用高速组织捣碎机将包含菌丝体的发酵液打碎，转速:10000rpm，时间15min，再过胶体磨，进行匀浆。
(3)酶解：使用1mol/L食品级盐酸溶液调pH至5.5，加入菌丝体重量0.05％的β-葡聚糖酶，50℃酶解2h，再用1mol/L食品级氢氧化钠溶液调pH至6.5，加入菌丝体重量0.01％的蛋白酶，50℃酶解2h，升温至95℃，保持12min，即得酶解液。
(4)浓缩：将步骤(3)得到的酶解液过滤(滤布为200目)，然后采用低温真空浓缩法浓缩滤液，浓缩液质量为浓缩前的1/2，浓缩温度为50℃，得浓缩后酶解液。
(5)喷雾干燥：将酶解液进行喷雾干燥，工艺参数为进风温度190℃，出风温度85℃，料液流量为30ml/min，即得草菇精粉。
其中，所述步骤(1)的具体操作步骤为：
①接种：从试管斜面上挑取草菇菌丝，接种到种子培养基(马铃薯200g，麸皮80g，葡萄糖10g，蛋白胨4g，硫酸镁1.5g，磷酸二氢钾2g，水1000ml，pH自然)中，35℃培养，转速80r/min，培养时间7天，得到液体种子。
②发酵培养：将液体种子倒入发酵培养基(葡萄糖20g，蛋白胨4g，硫酸镁1.5g，磷酸二氢钾2g，水1000ml)，发酵条件为接种量10％，初始pH值6.5，装液量50％(占容器的体积比)，培养温度35℃，转速80r/min，培养时间7天，即得包含菌丝体的发酵液。
所述步骤(3)中蛋白酶为风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶的复配酶，复配质量比例为1:1:2。
本发明方法利用深层发酵技术结合定向生物酶解技术，以深层发酵菌丝体为原料制得草菇精粉，得到的草菇精粉的肽基氮达到80-90％，小肽(相对分子质量在1000D以下)含量丰富，在85％以上，该草菇精粉鲜味饱满、醇厚，提高了草菇的附加值。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明的技术方案作任何形式上的限制。凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明的技术方案的范围内。

Claims (5)

1.一种利用草菇深层发酵菌丝体制备草菇精粉的方法，其特征在于：步骤如下：
⑴深层发酵菌丝体：以草菇为菌种，进行深层发酵，得包含菌丝体的发酵液；
⑵菌丝体破碎：利用高速组织捣碎机将包含菌丝体的发酵液打碎，转速8000～12000rpm，时间5～20min，再过胶体磨，进行匀浆；
⑶酶解：使用1mol/L食品级盐酸溶液调节pH至4.5～6.5，加入菌丝体重量0.01～0.1％的β-葡聚糖酶，45～65℃酶解1～3h，再用1mol/L食品级氢氧化钠溶液调节pH至6.0～8.0，加入菌丝体重量0.01～0.1％的蛋白酶，45～65℃酶解1～3h，升温至85～100℃，保持5～15min，即得酶解液；
⑷浓缩：将步骤⑶得到的酶解液过滤，然后采用低温真空浓缩法浓缩滤液，浓缩液质量为浓缩前的1/2，浓缩温度为40～70℃，得浓缩后酶解液；
⑸喷雾干燥：将浓缩后酶解液进行喷雾干燥，工艺参数为进风温度190℃，出风温度85℃，料液流量为30ml/min，即得草菇精粉。
2.根据权利要求1所述的利用草菇深层发酵菌丝体制备草菇精粉的方法，其特征在于：所述步骤⑴的具体操作步骤为：
①接种：从试管斜面上挑取草菇菌丝，接种到种子培养基中，20～40℃培养，转速50～200r/min，培养时间3～10天，得到液体种子；
②发酵培养：将液体种子倒入发酵培养基，发酵条件为：接种量4～14％，初始pH值6.0～8.5，装液量20～70％，装液量是指占容器的体积比，培养温度20～40℃，转速50～200r/min，培养时间3～10天，即得包含菌丝体的发酵液。
3.根据权利要求2所述的利用草菇深层发酵菌丝体制备草菇精粉的方法，其特征在于：所述种子培养基为：马铃薯200g，麸皮80g，葡萄糖10g，蛋白胨4g，硫酸镁1.5g，磷酸二氢钾2g，水1000ml，pH自然；
所述发酵培养基为：葡萄糖20g，蛋白胨4g，硫酸镁1.5g，磷酸二氢钾2g，水1000ml。
4.根据权利要求1所述的利用草菇深层发酵菌丝体制备草菇精粉的方法，其特征在于：所述步骤⑷过滤时使用200目的滤布过滤。
5.根据权利要求1至4任一项所述的利用草菇深层发酵菌丝体制备草菇精粉的方法，其特征在于：所述步骤⑶中蛋白酶为风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶的复配酶，复配质量比例为1：1：2。
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