CN103145706B

CN103145706B - 一类具有抗炎作用的咪唑并吡啶类化合物及其在制备抗炎药物中的应用

Info

Publication number: CN103145706B
Application number: CN201210484704.1A
Authority: CN
Inventors: 梁广; 陈高帜; 刘志国; 张亚利; 胡杰
Original assignee: WENZHOU GUANGCHENG BIOTECHNOLOGY CO Ltd; Wenzhou Medical College
Current assignee: WENZHOU GUANGCHENG BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd.
Priority date: 2012-11-16
Filing date: 2012-11-16
Publication date: 2015-11-25
Anticipated expiration: 2032-11-16
Also published as: CN103145706A

Abstract

本发明提供了具有抗炎作用的咪唑并吡啶类化合物。另外，本发明还提供了这些化合物的药物组合物以及抗炎用途等。

Description

一类具有抗炎作用的咪唑并吡啶类化合物及其在制备抗炎药物中的应用

技术领域

本发明属于药物化学领域，具体而言，本发明涉及具有抗炎作用的咪唑并吡啶类化合物。另外，本发明还涉及这些化合物的药物组合物以及抗炎用途等。

背景技术

炎症做为一种重要的病理过程在人体中十分常见，它本身是作为机体对于外来的或者异体的刺激的一种自身免疫应答。而当这种应答失调或者过分应答导致机体的自损伤时，就演变成了炎症。所以大多数的疾病都伴随着炎症的介导和发生，而炎症的介导和发生又使得疾病对于机体的损伤加重，如风湿性关节炎、糖尿病合并症、癌症、动脉粥样硬化、炎性肠病等。在这些过程中，促炎因子如TNF-α、IL-6、IL-1β等都起到了重要的作用。

本发明人经过长期和艰苦的研究实验，并且凭借一些运气，获得了一系列咪唑[4，5-b]并吡啶类化合物，发现它们具有抗炎活性，尤其是能用于治疗由TNF-α和/或IL-6超出正常量表达和释放而导致的疾病。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供新的抗炎化合物及其药物。

具体而言，本发明提供了式(I)所示的化合物或者其药学上可接受的盐：

(I)

其中：

R¹选自可以被1至3个相同或不同的取代基任选取代的芳基、杂环基或杂芳基，所述取代基选自烷基、卤素、烷氧基、-R⁴-N(R⁶)R⁷和-R⁴-O-R⁵-N(R⁶)R⁷；

R²选自氢、烷基、-R⁴-N(R⁶)R⁷；

R³选自

其中，R⁴独立地为化学键或直链的亚烷基链；

R⁵独立地为直链的亚烷基链；

R⁶或R⁷独立地选自氢和烷基，或者R⁶和R⁷独立地成环从而使得-N(R⁶)R⁷形成杂环基或杂芳基。

在本发明中，我们首先用化合物对LPS刺激RAW264.7巨噬细胞释放炎症因子(TNF-α和IL-6)抑制的模型进行了化合物体外抗炎活性的初筛(详情见实施例2)，本发明的有效咪唑[4，5-b]吡啶类似物都具有较好的抗炎活性，以化合物4、10、14、17、20和44六个化合物尤为明显。因此，我们选择这六个化合物进一步进行了抑制LPS刺激巨噬细胞释放炎症因子的量效关系(详情见实施例3)研究，发现它们对TNF-α和IL-6的抑制基本都具有较好的量效关系，对两种因子抑制活性的IC50基本都达到了小于5μM的较好水平。在研究化合物对炎症因子作用的同时，我们也在正常细胞上表征了化合的毒性(详情见实施例4)，发现除了14外其他的化合物对正常细胞均没有毒性表现。最后综合以上的实验结果，我们选取了化合物10作为探针化合物从动物体内表征了它的抗炎活性，研究了化合物对LPS致小鼠死亡的生存率的影响，发现LPS组小鼠在5天之内全部死亡，加药组小鼠致死率明显降低(详情见实施例5)。

当使用于本专利的说明书与所附的权利要求中时，除非有相反的指定，否则下列术语具有所指示的意义：

“烷基”是指直链或支链的烃链基团，仅由碳与氢原子组成，不含有不饱和性，具有一至十二个碳原子，优选为一至八个碳原子或一至六个碳原子，且其通过单键连接至分子的其余部份，例如甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(异丙基)、正丁基、正戊基、1，1-二甲基乙基(叔丁基)、3-甲基己基、2-甲基己基等。

“亚烷基链”是指直链或支链的二价烃链，连结分子的其余部份与基团，仅由碳与氢组成，不含有不饱和性，且具有一至十二个碳原子。亚烷基链对分子其余部份及对该基团的连接点可通过链内的一个碳或任两个碳。

“烷氧基”是指式-ORa。基团，其中Ra为如上文定义的烷基，含有一至十二个碳原子。

“芳基”是指芳族单环或多环烃环系统，仅由氢与碳组成，且含有6至19个碳原子，其中所述环系统可为部份饱和。芳基基团包括但不限于如芴基、苯基及萘基的基团。

“卤素”是指溴、氯、氟或碘。

“杂环基”是指稳定的3-至18-元非芳香环基团，其包含二至十七个碳原子与一至十个选自氮、氧及硫的杂原子。除非本说明书中另外明确述及，杂环基可为单环、双环、三环或四环的环系统，其可包含稠合的或桥接的环系统；且在杂环基中的氮、碳或硫原子可任选地被氧化；氮原子可任选地被季胺化；且杂环基可为部份或完全饱和。

“杂芳基”是指5-至18-元芳香族环基团，其包含三至十七个碳原子与一至十个选自氮、氧及硫的杂原子。对于本发明的目的，杂芳基可为单环、双环、三环或四环的环系统，其可包含稠合的或桥接的环系统；且在杂芳基中的氮、碳或硫原子可任选地被氧化；氮原子可任选地被季铵化。

“独立地”指的是其限定的取代基(如，R⁴、R⁵、R⁶或R⁷)或取代基的组合，如果在式(I)所示的化合物出现两次或两次以上，它们可以是相同的，也可以是不同的。

根据本发明的其他的实施方案，本发明涉及一种抗炎药物及与炎症相关疾病的治疗药物，所述疾病的病因至少部分地是由炎症引起，所述疾病包括但不限于以下疾病：缓解类风湿关节炎、骨关节炎、脊柱关节病、痛风性关节炎、风湿性关节炎、各种慢性关节炎的急性发作期或持续性的关节肿痛症状；治疗非关节性的各种软组织风湿性疼痛，如肩痛、腱鞘炎、滑囊炎、肌痛及运动后损伤性疼痛；急性的轻、中度疼痛，如，手术后、创伤后、劳损后、原发性痛经、牙痛、头痛；缺血性再灌注，如，脑缺血再灌注、心肌缺血再灌注；动脉粥样硬化；肝炎；淋巴炎；肺炎；痢疾；阑尾炎。

根据本发明的其他的实施方案，本发明涉及一种用于治疗炎性疾病的药物组合物，其含有治疗有效量的作为活性成分的以上所述的式(I)化合物的任何一种或多种或其可药用盐及其药用辅料；“药物组合物”指本发明所述式(I)化合物中的任何一种或多种或其可药用盐与现已上市的抗炎药物联合使用，制备得到的防治炎症疾病类药物的组合物，已上市的抗炎药物包括各种甾体类抗炎药物和非甾体类抗炎药物；药学上可接受的盐是这样一些盐，它们保持母体化合物的理想的生物活性，并且没有给予不希望的毒理学作用，这样的盐的例子包括与无机酸形成的盐，如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸等；与有机酸形成的盐，如乙酸、草酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、抗坏血酸等；以及由元素阴离子形成的盐，如氯、溴和碘；“药用辅料”指药学领域常规的药物载体，包括但不限于任何被美国食品药物管理局批准为可接受用于人或家畜的佐剂、载体、赋形剂、助流剂、甜味剂、稀释剂、防腐剂、染料/着色剂、增味剂、表面活性剂、润湿剂、分散剂、悬浮剂、稳定剂、等张剂、溶剂或乳化剂。。

本发明的制剂包括那些适于口服、直肠、局部、口腔、舌下、肠胃外(例如，皮下、肌肉、静脉内)以及经皮给药的制剂，尽管在任何给定的情况下，最适宜的路线将取决于所治疗的病症的性质和严重性以及取决于所使用的特定活性化合物的性质。

为了便于理解，本发明引用了公开文献，这些文献是为了更清楚地描述本发明，其全文内容均纳入本文进行参考。以下将通过具体的实施例和附图对本发明进行详细地描述。需要特别指出的是，这些描述仅仅是示例性的描述，并不构成对本发明范围的限制。依据本说明书的论述，本发明的许多变化、改变对所属领域技术人员来说都是显而易见了。

附图说明：

这里所列举的化合物只是为了更好地说明本发明的化合物类别和结构形式，并非限制本发明。

图1说明合成的咪唑[4，5-b]吡啶类化合物的结构；

图2说明咪唑[4，5-b]吡啶类化合物对LPS刺激RAW264.7巨噬细胞释放IL-6和TNF-α的抑制的活性；

图3说明五个活性化合物抑制LPS刺激RAW264.7巨噬细胞释放IL-6和TNF-α的量效关系；

图4说明化合物10对人正常肝细胞HL-7702的毒性；

图5说明化合物10从预防和治疗两个方面提高小鼠对LPS致死的生存率；

具体实施方式

在下面的非限制性实施例中，对本发明进行更详细的说明。

实施例1化合物的合成

中间体12-正丙氨基-3硝基-6-氯吡啶的制备：将9.6g(50mmol)的2，6-二氯-3-硝基吡啶、2.95g(50mmol)的正丙胺和9.68g(75mmol)的N，N-二异丙基乙胺溶于二氯甲烷中，冰浴下搅拌3-5小时。反应结束后用饱和食盐水和二氯甲烷萃取，有机层用无水硫酸镁干燥，减压蒸馏后得到粉末状产物，经硅胶柱纯化后得9.68g黄色固体粉末状中间体1。

中间体22-氨基-6-(4-甲基-1-哌嗪基)-3-硝基吡啶的制备：将8.65g(50mmol)的2-氨基-3-硝基-6-氯吡啶、5g(50mmol)的N-甲基哌嗪和20.73g(150mmol)碳酸钾溶于乙腈中，80℃回流3-5小时。反应结束后冷却，用饱和食盐水和二氯甲烷萃取，有机层用无水硫酸镁干燥，减压蒸馏后得到粉末状产物，经硅胶柱纯化后得10.2g黄色固体粉末状中间体2。

中间体32-正丙氨基-6-(4-甲基-1-哌嗪基)-3-硝基吡啶的制备：将3.23g(15mmol)的中间体1、1.5g(15mmol)的N-甲基哌嗪和6.22g(45mmol)碳酸钾溶于乙腈中，80℃回流3-5小时。反应结束后冷却，用饱和食盐水和二氯甲烷萃取，有机层用无水硫酸镁干燥，减压蒸馏后得到粉末状产物，经硅胶柱纯化后得3.85g黄色固体粉末状中间体3。

中间体42-正丙氨基-6-吗啉基-3-硝基吡啶的制备：中间体4的制备依照中间体3的制备方法，不同之处在于用吗啡啉代替N-甲基哌嗪为原料，最终得到3.64g黄色固体粉末状中间体4。

化合物的制备：将0.4mmol中间体2、中间体3或者中间体4与0.52mmol相应的醛混合溶于乙醇∶水＝5∶1的溶液体系中，然后向体系中加入1.2mmol的连二亚硫酸钠，90℃回流5小时。冷却到室温，水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗，减压蒸馏并真空干燥，得到的粗产物用硅胶柱纯化。

化合物43-丙基-2-[3’-(1’-氢)吲哚基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色粉末，75.0％yield，mp：109.9-111.4℃.¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.85(3H，t，J＝7.2Hz，C-CH₃)，1.79-1.83(2H，m，-C-CH₂-C)，2.51(3H，s，N-CH₃)，2.78(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.76(4H，s，piperazin-H^2，6)；4.24(2H，t，J＝7.2Hz，N-CH₂-)，6.69(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)，7.15-7.48(4H，m，indol-H^{4，5，6，7})，7.91(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷)；8.05(1H，s，indol-H²)，10.03(1H，s，N-H).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝155.62，146.97，146.80，136.00，127.85，127.48，126.32，125.31，122.20，121.59，120.02，111.65，105.57，102.72，54.39x2，52.00，45.75x2，43.66，22.20，11.18ppm.ESI-MSm/z：375.0(M)⁺.

化合物53-丙基-2-[3’-(1’-甲基)吲哚基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色粉末，69.4％yield，mp：99.8-101.9℃.¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.2Hz，C-CH₃)；1.85-1.89(2H，m，-C-CH₂-C)；2.44(3H，s，N-CH₃)；2.69(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.70(4H，s，piperazin-H^2，6)；3.89(3H，s，indiol-N-CH₃)，4.30(2H，t，J＝7.2Hz，N-CH₂-)；6.65(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)，7.25(1H，s，imidazo[4，5-b]pyridine-H²)；7.31-7.42(4H，m，indol-H^{4，5，6，7})，7.88(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，CDCl₃)：δ＝156.23，147.57，147.46，137.04，128.96，128.83，128.22，127.27，122.85，121.65，120.99，109.52，106.15，103.19，54.99x2，50.78，46.28x2，44.84，33.35，22.99，11.53ppm.ESI-MSm/z：389.3(M+H)⁺.

化合物103-丙基-2-[3’-(1’-氢-吡咯[2，3-b]并吡啶)基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色粉末，49.5％yield，mp：205.1-207.0℃.¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.96(3H，t，J＝7.2Hz，C-CH₃)；1.91-1.93(2H，m，-C-CH₂-C)；2.44(3H，s，N-CH₃)；2.67(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.70(4H，s，piperazin-H^2，6)；4.35(2H，t，J＝7.2Hz，N-CH₂-)；6.68(1H，s，indol-H²)；7.26(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)；7.75(1H，m，indol-H⁵)；7.90(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷)；8.45(1H，d，J＝4.8Hz，indol-H⁴)；8.70(1H，d，J＝8.4Hz，indol-H⁶).¹³CNMR(600MHz，CDCl₃)：δ＝156.45，147.37，146.59，143.90，131.25，131.12，128.74，128.36，124.59，119.90，117.32，106.29，103.46，55.01x2，50.81，46.23x2，44.72，23.13，11.61ppm.ESI-MSm/z：376.1(M+H)⁺.

化合物143-丙基-2-[3’-(5’-溴-1’-氢)吲哚基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色粉末，40.9％yield，mp：113.0-114.5℃.¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.86(3H，t，J＝7.2Hz，C-CH₃)；1.82-1.84(2H，m，-C-CH₂-C)；2.40(3H，s，N-CH₃)；2.64(4H，s，piperazin-H^3.5)；3.67(4H，s，piperazin-H^2，6)；4.24(2H，t，J＝7.2Hz，N-CH₂-)；6.68(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)；7.21(1H，d，J＝8.4Hz，indol-H⁶)；7.30(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷)；7.37(1H，s，indol-H⁴)；7.88(1H，d，J＝8.4Hz，indol-H⁷)；8.29(1H，s，indol-H²).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝155.75，146.71，146.24，134.75，128.06，127.65，127.63，126.57，124.81，123.91，113.74，112.81，105.25，102.88，54.43x2，51.67，45.82x2，43.57，22.21，11.18ppm.ESI-MSm/z：452.9(M)⁺.

化合物17N，N-二甲基-1-氨基-3-{4’-[2”-[3”-丙基-5”-(1”’-(4”’-甲基)哌嗪基)-咪唑[4，5-b]并吡啶]基]苯氧基}丙烷：黄色油状物，55.9％yield.¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.86(3H，t，J＝7.2Hz，C-CH₃)；1.82-1.84(2H，m，-C-CH₂-C)；2.04(2H，m，-C-CH₂-C-)；2.34(6H，s，N-CH₃×2)；2.38(3H，s，N-CH₃)；2.56(2H，t，J＝7.2Hz，-C-CH₂-N)；2.59(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.63(4H，s，piperazin-H^2，6)；4.09(2H，t，J＝7.2Hz，O-CH₂-)；4.22(2H，t，J＝7.2Hz，N-CH₂-)；6.66(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)；7.01(2H，d，J＝8.4Hz，2，6-H)；7.63(2H，d，J＝8.4Hz，3，5-H)；7.83(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝159.43，155.95，154.88，147.08，130.04x2，129.99，128.29，127.34，114.61x2，103.41，65.92，56.45，55.57x2，54.40，45.81x2，45.45x2，44.15，26.77，22.23，11.03ppm.ESI-MSm/z：437.3(M+H)⁺.

化合物203-丙基-2-[2’-(5’-甲基)噻吩基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色油状物，60.6％yield.¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.98(3H，t，J＝7.2Hz，C-CH₃)，1.64-1.67(2H，m，-C-CH₂-C)，2.43(3H，s，N-CH₃)，2.66(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.65(4H，s，piperazin-H^2，6)；3.69(3H，s，thiophen-CH₃)，4.15(2H，t，J＝7.2Hz，N-CH₂-)，6.68(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)，6.86(1H，d，J＝4.8Hz，thiophen-H⁴)，7.39(1H，d，J＝4.8Hz，thiophen-H³)；7.85(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝156.10，147.05，144.20，141.95，130.80，128.11，127.09，126.77，126.53，103.81，54.35x2，45.76，45.30x2，43.75，22.40，14.89，11.11ppm.ESI-MSm/z：356.1(M+H)⁺.

化合物213-丙基-2-[4’-(1’-哌啶基)苯基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：紫红色粉末，71.2％yield，mp：55.7-57.6℃.¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.2Hz，C-CH₃)，1.61-1.72(6H，m，piperidin-H^3，4，5)，1.84-1.87(2H，m，-C-CH₂-C)，2.44(3H，s，N-CH₃)，2.69(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.28(4H，s，piperidin-H^2，6)；3.69(4H，t，piperazin-H^2，6)；4.23(2H，t，J＝7.8Hz，N-CH₂-)，6.64(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)，6.99(2H，d，J＝8.4Hz，Ar-H^3，5)，7.61(2H，d，J＝8.4Hz，Ar-H^2，6)；7.83(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝155.78，155.73，151.59，147.18，140.43，129.33，127.97x2，119.77，114.63x2，103.18，54.42x2，48.49x2，45.83.45.50x2，44.21，25.02x2，23.90，22.28，11.07ppm.ESI-MSm/z：419.1(M+H)⁺.

化合物243-丙基-2-(2’-甲氧基苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色油状物，73.2％yield.¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.74(3H，t，J＝7.2Hz，C-CH₃)；1.72-1.74(2H，m，-C-CH₂-C)；2.46(3H，s，N-CH₃)；2.71(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.71(4H，s，piperazin-H^2，6)；3.79(3H，s，O-CH₃)；4.01(2H，t，J＝7.2Hz，N-CH₂-)；6.66(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)；7.00-7.47(4H，m，Ar-H^{3，4，5，6})；7.86(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝157.02，155.77，148.81，146.43，131.71，131.43，128.51，127.65，120.58，120.02，111.49，103.24，55.42x2，53.97，45.19，45.08x2，44.06，21.86，11.04ppm.ESI-MSm/z：366.1(M+H)⁺.

化合物293-丙基-2-(2’-氟苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色粉末，70.0％yield，mp：56.3-57.3℃.¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.76(3H，t，J＝7.2Hz，C-CH₃)；1.74-1.76(2H，m，-C-CH₂-C)；2.49(3H，s，N-CH₃)；2.75(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.73(4H，s，piperazin-H^2，6)；4.11(2H，t，J＝7.2Hz，N-CH₂-)；6.69(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)；7.21-7.61(4H，m，Ar-H^{3，4，5，6})；7.88(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝158.69，156.19，146.44，145.34，132.21，132.11，128.89，127.48，124.92，119.00，115.96，103.80，54.22x2，45.58，45.22x2，44.09，21.92，10.91ppm.ESI-MSm/z：354.1(M+H)⁺.

化合物313-丙基-2-(2’-氯苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色油状物，74.3％yield.¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.75(3H，t，J＝7.2Hz，C-CH₃)；1.71-1.73(2H，m，-C-CH₂-C)；2.50(3H，s，N-CH₃)；2.78(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.76(4H，s，piperazin-H^2，6)；4.03(2H，t，J＝7.2Hz，N-CH₂-)；6.69(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)；7.40-7.52(4H，m，Ar-H^3，4，56)；7.89(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝155.91，147.89，146.05，133.13，132.37，131.65，130.18，129.63，129.02，127.40，127.35，103.79，53.70x2，44.79，44.70x2，43.95，21.96，10.99ppm.ESI-MSm/z：370.1(M+H)⁺.

化合物363-丙基-2-(2’-溴苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色油状物，73.2％yield.¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.75(3H，t，J＝7.2Hz，C-CH₃)，1.68-1.72(2H，m，-C-CH₂-C)，2.35(3H，s，N-CH₃)，2.51(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.73(4H，s，piperazin-H^2，6)；4.03(2H，t，J＝7.2Hz，N-CH₂-)，6.69(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)，7.26-7.71(4H，m，Ar-H^{3，4，5，6})，7.89(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝156.12，149.04，145.99，132.69，132.41，132.28，131.73，128.95，127.80，127.11，123.28，103.69，54.09x2，45.35，44.08x2，43.98，21.99，11.06ppm.ESI-MSm/z：415.9(M+H)⁺.

化合物394-{5’-[3’-丙基-2’-[2”-(5”-甲基)噻吩基]-咪唑[4，5-b]并吡啶]基}-吗啡啉：褐色粉末，60.1％yield，mp：127.8-129.6℃.¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.99(3H，t，J＝7.2Hz，C-CH₃)，1.89-1.93(2H，m，-C-CH₂-C)，2.55(3H，s，thiophen-CH₃)，3.56(4H，t，morpholine-H^2，6)；3.87(4H，t，morpholine-H^3，5)；4.36(2H，t，J＝7.2Hz，N-CH₂-)，6.64(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)，6.82(1H，d，thiophen-H⁴)，7.40(1H，d，thiophen-H³)；7.86(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝156.18，147.01，144.39，142.05，130.71，128.14，127.43，126.77，126.63，103.63，65.93x2，45.82x2，43.79，22.38，14.87，11.09ppm.ESI-MSm/z：343.2(M+H)⁺.

化合物444-{5’-[3’-丙基-2’-[3”-(1”-甲基)吲哚基]-咪唑[4，5-b]并吡啶]基}-吗啡啉：黄色粉末，51.7％yield，mp：124.0-125.4℃.¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.87(3H，t，J＝7.2Hz，C-CH₃)，1.85-1.89(2H，m，-C-CH₂-C)，3.57(4H，t，morpholine-H^2，6)；3.87(4H，t，morpholine-H^3，5)；3.89(3H，s，N-CH₃)，4.31(2H，t，J＝7.2Hz，N-CH₂-)，6.65(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)，7.24-7.48(4H，m，indol-H^{4，5，6，7})，7.91(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝155.70，146.81，146.77，136.53，129.28，128.19，127.50，126.69，122.32，121.90，120.29，109.97，104.59，102.58，65.99x2，46.10x2，43.65，32.84，22.23，11.18ppm.ESI-MSm/z：376.2(M+H)⁺.

化合物484-{5’-[3’-丙基-2’-[2”-(1”-氢)咪唑基]-咪唑[4，5-b]并吡啶]基}-吗啡啉：黄色粉末，26.7％yield，mp：163.2-165.7℃.¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.96(3H，t，J＝7.2Hz，C-CH₃)，1.98-2.01(2H，m，-C-CH₂-C)，3.54(4H，t，morpholine-H^2，6)；3.87(4H，t，morpholine-H^3，5)；4.89(2H，t，J＝7.2Hz，N-CH₂-)，5.97(1H，d，J＝9.6Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)，6.66(1H，d，J＝9.0Hz，thiophen-H⁴)，7.76(1H，d，J＝9.0Hz，thiophen-H³)；8.21(1H，d，J＝9.6Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝156.42，146.74，141.29，138.70，129.52，128.26，127.19，118.57，103.80，65.95x2，45.81x2，44.12，22.52，11.06ppm.ESI-MSm/z：313.3(M+H)⁺.

化合物493-氢-2-[4’-(1’-哌啶基)苯基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色粉末，40.2％yield，mp：150.2-151.8℃.¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.61-1.69(6H，m，piperidin-H^3，4，5)；2.40(3H，s，N-CH₃)，2.63(4H，t，piperazin-H^3，5)；3.26(4H，s，piperidin-H^2，6)；3.63(4H，s，piperazin-H^2，6)；6.59(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)，6.93(2H，d，J＝9.0Hz，Ar-H^3，5)，7.78(2H，d，J＝9.0Hz，Ar-H^2，6)；7.87(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝156.01，151.84，159.58，147.83，128.79，127.35，126.97x2，119.54，114.73x2，103.02，54.48x2，48.57x2，45.83x2，44.34，24.97x2，23.95ppm.ESI-MSm/z：377.2(M+H)⁺.

化合物503-氢-2-(2’-溴苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色粉末，50.3％yield，mp：219.8-221.0℃.¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.39(3H，s，N-CH₃)；2.60(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.72(4H，s，piperazin-H^2，6)；6.71(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)；7.27-7.44(4H，m，Ar-H^{3，4，5，6})；7.67(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝156.57，147.88，147.11，133.42，132.41，131.93，130.96，128.60，128.01，127.68，121.56，103.69，54.42x2，45.76x2，45.59ppm.ESI-MSm/z：371.9(M+H)⁺.

化合物583-氢-2-[3’-(1’-氢)吲哚基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：褐色粉末，45.8％yield，mp：75.9-77.7℃.¹H-NMR(D-DMSO)δ：1.23(3H，s，N-CH₃)；2.84(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.62(4H，s，piperazin-H^2，6)；6.74(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)；7.17(2H，d，J＝7.2Hz，indol-H^5，6)；7.47(1H，d，J＝7.2Hz，indol-H⁷)；8.12(1H，d，J＝7.2Hz，indol-H⁴)；7.77(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷)；8.47(1H，s，indol-H²).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝156.62，146.77，146.40，138.43，137.04，124.11，123.43，122.10，120.79，118.16，112.42，111.88，106.63，102.71，51.17x2，45.32x2，42.88ppm.ESI-MSm/z：333.0(M+H)⁺.

化合物623-氢-2-(2’-甲氧基苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色粉末，55.6％yield，mp：115.6-117.1℃.¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.44(3H，s，N-CH₃)；2.69(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.71(4H，s，piperazin-H^2，6)；4.06(3H，s，O-CH₃)；6.68(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)；7.05(1H，d，J＝7.8Hz，Ar-H³)；7.13(1H，t，J＝7.8Hz，Ar-H⁵)；7.40(1H，t，J＝7.8Hz，Ar-H⁴)；7.87(1H，d，J＝7.8Hz，Ar-H⁶)；8.49(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝156.60，147.17，147.79，141.27，136.44，131.05，129.59，127.83，120.62，111.95，111.83，103.55，55.52，54.48x2，45.76x2，45.68ppm.ESI-MSm/z：323.9(M+H)⁺.

化合物673-氢-2-(2’-氯苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色油状物，53.6％yield.¹H-NMR(D-DMSO)δ：2.22(3H，s，N-CH₃)；2.43(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.51(4H，s，piperazin-H^2，6)；6.83(1H，d，J＝7.8Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)；7.49-7.78(4H，m，Ar-H^{3，4，5，6})；7.84(1H，d，J＝7.8Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝156.56，147.76，147.05，133.48，132.17，131.70，130.81，130.35，128.64，127.30，121.98，103.89，54.29x2，45.57x2，45.49ppm.ESI-MSm/z：328.0(M+H)⁺.

化合物713-氢-2-(2’-氟苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色粉末，52.4％yield，mp：143.1-144.7℃.¹H-NMR(D-DMSO)δ：2.23(3H，s，N-CH₃)；2.44(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.53(4H，s，piperazin-H^2，6)；6.82(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)；7.35(1H，d，J＝7.8Hz，Ar-H³)；7.38(1H，t，J＝7.8Hz，Ar-H⁵)；7.51(1H，t，J＝7.8Hz，Ar-H⁴)；7.85(1H，d，J＝7.8Hz，Ar-H⁶)；8.04(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝165.47，161.84，160.14，156.28，134.17，134.11，131.79，129.86，124.31，124.29，116.69，103.88，53.51x2，44.76x2，44.50ppm.ESI-MSm/z：312.0(M+H)⁺.

化合物733-氢-2-[3’-(1’-氢-吡咯[2，3-b]并吡啶)基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色粉末，38.9％yield，mp：297.6-299.2℃.¹H-NMR(D-DMSO)δ：2.23(3H，s，N-CH₃)；2.44(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.48(4H，s，piperazin-H^2，6)；6.71(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)；7.23(1H，s，indol-H²)；7.77(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷)；8.19(1H，s，indol-H⁵)；8.32(1H，d，J＝3.6Hz，indol-H⁶)；8.75(1H，d，J＝7.8Hz，indol-H⁴).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝156.04，148.80，147.11，146.56，143.74，129.66，128.75，127.16，125.68，117.35，116.68，105.76，102.59，54.40x2，45.83x2，45.57ppm.ESI-MSm/z：334.0(M+H)⁺.

化合物773-氢-2-[2’-(5’-甲基)噻吩基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：黄色粉末，39.0％yield，mp：208.7-210.1℃.¹H-NMR(D-DMSO)δ：2.22(3H，s，N-CH₃)，2.43(4H，s，piperazin-H^3，5)；2.44(3H，s，thiophen-CH₃)，3.49(4H，s，piperazin-H^2，6)；6.75(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)；6.86(1H，d，J＝3.6Hz，thiophen-H⁴)；7.56(1H，d，J＝3.6Hz，thiophen-H³)；7.73(1H，d，J＝9.0Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝156.41，147.51，144.80，141.62，131.70，128.34，127.72，126.53，126.13，103.46，54.42x2，45.79x2，45.63，15.10ppm.ESI-MSm/z：314.1(M+H)⁺.

化合物803-氢-2-[3’-(5’-溴-1’-氢)吲哚基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶：绿色粉末，26.6％yield，mp：92.5-93.8℃.¹H-NMR(D-DMSO)δ：2.29(3H，s，N-CH₃)；2.53(4H，s，piperazin-H^3，5)；3.51(4H，s，piperazin-H^2，6)；6.72(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁶)；7.32(1H，d，J＝8.4Hz，indol-H⁶)；7.46(1H，d，J＝8.4Hz，indol-H⁷)；7.81(1H，d，J＝8.4Hz，imidazo[4，5-b]pyridine-H⁷)；8.13(1H，s，indol-H⁴)；8.66(1H，s，indol-H²).¹³CNMR(600MHz，DMSO)：δ＝155.53，147.56，147.07，139.22，135.21，126.03，124.71，123.56，122.89，114.55，113.96，112.92，106.40，102.72，53.68x2，45.02x2，44.73ppm.ESI-MSm/z：410.9(M+H)⁺.

实施例2化合物对LPS刺激巨噬细胞释放炎症因子的抑制

采用化合物对LPS刺激RAW264.7巨噬细胞释放炎症因子(TNF-α和IL-6)抑制的方法测试了化合物的体外初步抗炎活性，具体方法如下：1.2×106个RAW264.7巨噬细胞用DMEM培养液培养于37℃，24小时后更新培养液，并加入受测化合物(终浓度为10μM)预处理2小时，再用0.5μg/mL的LPS继续处理22小时，收集培养液用ELISA法检测TNF-α和IL-6含量；收集细胞检测总蛋白浓度，ELISA结果用相应的总蛋白浓度相除较准，以LPS对照组的TNF-α和IL-6含量定标为100；每个化合物重复测试3次，计算平均值和误差值。测试时用阳性药物地塞米松(DEX)做对照。化合物对TNF-α和IL-6释放的抑制活性见图2。本发明的有效化合物都具有较好的抑制IL-6和TNF-a释放的活性；而对比化合物活性不佳，不具有药用前景。大部分有效化合物对LPS刺激的IL-6释放有减少作用，具体而言，活性明显远优于地塞米松的化合物：4、10、14、17、20；比地塞米松更好的化合物是：44、49、50、58、71；而对TNF-a的抑制明显更好的是：4、5、10、14、17、20、24、29、36、39、44、58、62。

实施例3活性化合物抑制LPS刺激巨噬细胞释放炎症因子的量效关系

进一步测试了活性化合物抑制LPS刺激RAW264.7巨噬细胞释放TNF-α和IL-6的量效关系，方法：同实施例2。实验数据见图3。化合物对TNF-α和IL-6的抑制活性均具有较好的量效关系，化合物4、10、14、17、20、44对TNF-α抑制活性的IC50分别为14.16、4.79、1.99、12.44、7.25、4.43μM，对IL-6抑制活性的IC50分别为4.30、1.62、1.21、3.28、2.81、1.24μM。

实施例4活性化合物对人正常肝细胞HL-7702的毒性

将HL7702细胞以每孔5000个细胞的密度铺到96-孔板中，用含有5％热灭活的血清、100U/ml的青霉素、100μg/ml链霉素的1640培养基在37℃的含5％CO₂的培养箱中培养24h。将用DMSO溶解的待测化合物加入到培养基中，终浓度为20μM，作用72h后进行MTT检测。每孔中加入用生理盐水溶解的MTT(5mg/ml)25μL培育3h。然后用100μLDMSO溶解细胞，在波长570nm下用酶标仪检测OD值。实验数据见图4。待测活性化合物4、10、14、17、20、44除14外均未对HL7702细胞表现出毒性。

实施例5活性化合物10对LPS致小鼠死亡的生存率的影响

雄性C57BL/6小鼠从温州医学院动物实验中心获得。小鼠用标准啮齿类动物食物和水饲养在恒温昼夜12-12h节律的动物房内。动物在实验开始前至少花一周时间进行环境适应性生长。涉及到动物使用的协议都获得温州医学院动物政策与福利委员会的批准(批准文件：2009/APWC/0031)。在实验中所用的都是10与盐酸形成的水溶液。溶液的pH值为7.36并经0.22的微孔滤膜过滤。体重为18-22g的小鼠在尾静脉注射LPS(20mg/kg)前或后各15min经尾静脉注射化合物10(200μL，10mg/kg)，对照组小鼠给同样体积的空白溶液。记录一周内小鼠的体重和死亡率。实验数据见图5。无论化合物10先于或后于LPS注射，均可以缓解50％的死亡率。

Claims

1.化合物或者其药学上可接受的盐，其选自下列化合物：

化合物4：3-丙基-2-[3’-(1’-氢)吲哚基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物5：3-丙基-2-[3’-(1’-甲基)吲哚基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物10：3-丙基-2-[3’-(1’-氢-吡咯[2，3-b]并吡啶)基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物14：3-丙基-2-[3’-(5’-溴-1’-氢)吲哚基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物17：N，N-二甲基-1-氨基-3-{4’-[2”-[3”-丙基-5”-(1”’-(4”’-甲基)哌嗪基)-咪唑[4，5-b]并吡啶]基]苯氧基}丙烷；

化合物20：3-丙基-2-[2’-(5’-甲基)噻吩基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物21：3-丙基-2-[4’-(1’-哌啶基)苯基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物24：3-丙基-2-(2’-甲氧基苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物29：3-丙基-2-(2’-氟苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物31：3-丙基-2-(2’-氯苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物36：3-丙基-2-(2’-溴苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物49：3-氢-2-[4’-(1’-哌啶基)苯基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物50：3-氢-2-(2’-溴苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物58：3-氢-2-[3’-(1’-氢)吲哚基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物62：3-氢-2-(2’-甲氧基苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物67：3-氢-2-(2’-氯苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物71：3-氢-2-(2’-氟苯基)-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物73：3-氢-2-[3’-(1’-氢-吡咯[2，3-b]并吡啶)基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物77：3-氢-2-[2’-(5’-甲基)噻吩基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物80：3-氢-2-[3’-(5’-溴-1’-氢)吲哚基]-5-[1”-(4”-甲基)哌嗪基]-咪唑[4，5-b]并吡啶；

化合物39：4-{5’-[3’-丙基-2’-[2”-(5”-甲基)噻吩基]-咪唑[4，5-b]并吡啶]基}-吗啡啉；

化合物44：4-{5’-[3’-丙基-2’-[3”-(1”-甲基)吲哚基]-咪唑[4，5-b]并吡啶]基}-吗啡啉；

化合物48：4-{5’-[3’-丙基-2’-[2”-(1”-氢)咪唑基]-咪唑[4，5-b]并吡啶]基}-吗啡啉。

2.权利要求1所述的化合物或者其药学上可接受的盐，其选自下列化合物：

。

3.用于治疗炎症或与炎症相关的疾病的药物组合物，其包括权利要求1-2之任一所述的化合物和药学上可接受的载体。

4.权利要求3所述的药物组合物，其中炎症是急性炎症或慢性炎症。

5.权利要求3所述的药物组合物，其中炎症或与炎症相关的疾病是由炎症细胞因子超出正常量表达和释放而导致的疾病。

6.权利要求5所述的药物组合物，其中炎症细胞因子是TNF-α和/或IL-6。

7.权利要求3所述的药物组合物，其中炎症或与炎症相关的疾病选自脓毒血症、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及相关综合征、骨关节炎、消化道炎症、多发性肌炎、皮肌炎、血管炎性综合征、痛风性关节炎、神经炎症、风湿性关节炎、化学性疼痛、炎性疼痛、肉芽肿、肉芽肿性血管炎、动脉炎、皮肤炎症、脂膜炎、腹膜后纤维化、肝炎、肺炎、胰腺炎、过敏性炎症、全身炎症反应综合症、败血症、感染性休克、与炎症相关的代谢性疾病及其并发症。

8.权利要求3所述的药物组合物，其中炎症或与炎症相关的疾病是自身免疫性疾病。

9.权利要求3所述的药物组合物，其被制成片剂、胶囊、口服液、注射剂、粉剂、膏剂或外用药液。

10.权利要求1-2之任一所述的化合物在制备用于治疗炎症或与炎症相关的疾病的药物中的应用。

11.权利要求10所述的应用，其中炎症是急性炎症或慢性炎症。

12.权利要求10所述的应用，其中炎症或与炎症相关的疾病是由炎症细胞因子超出正常量表达和释放而导致的疾病。

13.权利要求12所述的应用，其中炎症细胞因子是TNF-α和/或IL-6。

14.权利要求10所述的应用，其中炎症或与炎症相关的疾病选自脓毒血症、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及相关综合征、骨关节炎、消化道炎症、多发性肌炎、皮肌炎、血管炎性综合征、痛风性关节炎、神经炎症、风湿性关节炎、化学性疼痛、炎性疼痛、肉芽肿、肉芽肿性血管炎、动脉炎、皮肤炎症、脂膜炎、腹膜后纤维化、肝炎、肺炎、胰腺炎、过敏性炎症、全身炎症反应综合症、败血症、感染性休克、与炎症相关的代谢性疾病及其并发症。

15.权利要求10所述的应用，其中炎症或与炎症相关的疾病是自身免疫性疾病。