CN103134868A

CN103134868A - 一种高效液相色谱测定环境样品中抗倒酯残留量的检测方法

Info

Publication number: CN103134868A
Application number: CN2013100118583A
Authority: CN
Inventors: 宋薇
Original assignee: XIAMEN PONY TEST CO Ltd
Current assignee: XIAMEN PONY TEST CO Ltd
Priority date: 2013-01-14
Filing date: 2013-01-14
Publication date: 2013-06-05

Abstract

本发明公开了一种高效液相色谱测定环境样品中抗倒酯残留量的检测方法：(1)水样用HLB固相萃取柱富集，甲醇洗脱，浓缩定容后，采用高效液相色谱系统分离检测；(2)土壤样品用水润湿后，乙腈震荡提取，盐析分层，有机相浓缩定容后，采用高效液相色谱系统分离检测。采用的以碳十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱，检测器为二极管阵列紫外检测器，流动相为甲醇、0.1％磷酸水溶液的混合溶剂，比例为甲醇50％-70％(体积比)、0.1％磷酸水溶液50％-30％(体积比)，检测波长280nm，柱温25-40℃，进样体积10-20μL。本发明经过系统的比较研究，建立了测定环境样品中抗倒酯残留量的高效液相色谱方法，具有分离效果好、测定准确、灵敏度高、专属性强，分析简便快速等技术特点。

Description

一种高效液相色谱测定环境样品中抗倒酯残留量的检测方法

技术领域

本发明涉及一种农药残留量的分析方法，具体涉及一种高效液相色谱测定环境样品中抗倒酯残留量的方法。

背景技术

抗倒酯英文通用名称trinexapac-ethyl，cas号95266-40-3，分子式C₁₃H₁₆O₅，分子式化学名称：4-环丙基(羟基)亚甲基-3，5-二酮环己烷羧酸乙酯，属环己烷羧酸类植物生长调节剂，为赤霉素生物合成抑制剂，通过降低赤霉素的含量控制植物生长。

中国、欧盟暂未制定抗倒酯的最大残留限量(MRL)，日本规定抗倒酯在各种水果、蔬菜中的MRL值为0.02mg/kg。

《农药科学与管理2010，31，(8)》公开了用甲醇∶0.1％磷酸溶液＝70∶30为流动相分离，在280nm波长下对抗倒酯乳油进行分离和定量分析。

目前，国内外鲜有对抗倒酯在水质、土壤、蔬菜、水果等基质中残留量的研究。为寻求一种环境样品中抗倒酯残留量的检测方法，本发明人经过系统的对比研究，提供了一种高效液相色谱测定环境样品中抗倒酯残留量的方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于，提供一种准确、快速的测定环境样品中抗倒酯残留量的高效液相色谱方法。

本发明为实现上述目的，所采用的技术方案是：

本发明的一种高效液相色谱测定环境样品中抗倒酯残留量的检测方法，包括以下步骤：

1.水样前处理

预先依次用5-15mL甲醇，5-15mL水活化HLB固相萃取柱，将50-100mL水样逐步移入固相萃取柱中，用5-10mL超纯水淋洗固相萃取柱，控制流速为2滴/秒。用10-15mL甲醇洗脱，并收集洗脱液于鸡心瓶或离心管中。洗脱液在40℃水浴中旋转蒸发或40℃氮吹至近干，用1.00mL甲醇溶解，过0.22μm有机系滤膜，待测。

2.土壤样品前处理

称取样品5-15g于50mL离心管中，加水湿润后，加入10-30mL乙腈，涡旋混匀，震荡提取30min。提取完毕后，加入3-10g氯化钠涡旋混匀，3000-8000rpm下离心5-15min，取有机层溶液至鸡心瓶中，旋转蒸发至近干，加入1.00mL甲醇溶解，过0.22μm有机系滤膜，待测。

3.色谱测定

称取抗倒酯标准品，用甲醇溶解并定容后作为储备液，然后进一步用甲醇稀释为具有浓度梯度的标准使用液；

利用高效液相色谱仪对试样进行检测，外标法定量；

高效液相色谱分析条件为：

a)色谱柱：以碳十八烷基键合硅胶为填充剂，或等同性能色谱柱；

b)流动相：甲醇和0.1％磷酸水溶液，甲醇50％-70％(体积比)、0.1％磷酸水溶液50％-30％(体积比)；

c)柱温：25-40℃；

d)流速：0.8-1.2mL/min；

e)进样量：10-20μL；

f)波长：280nm；

由于采用上述技术方案，本发明的有益效果在于：

1、建立了环境样品中抗倒酯残留量的高效液相色谱测定方法，本方法成本低，仪器较普遍，利于推广应用。

2、水样品采用HLB固相萃取柱富集目标物，能够去除部分杂质干扰，并能达到较低的检出限要求。

3、土壤样品采用乙腈震荡提取，盐析分层，提取效率高，提取液中杂质溶出少。

4、本方法具有简单、快速、准确、高效等优点。

5、本发明可应用于环境样品中抗倒酯残留量的检测中，对保护环境、保障人类身体健康都具有十分重要的意义。

具体实施方式：

下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明并不局限于具体实施例。

实施例1地表水中抗倒酯残留量的测定

1、样品前处理

预先依次用10mL甲醇，10mL水活化HLB固相萃取柱，将50mL水样逐步移入固相萃取柱中，用5mL超纯水淋洗固相萃取柱，控制流速为2滴/秒。用10mL甲醇洗脱，并收集洗脱液于离心管中。洗脱液在40℃氮吹至近干，用1.00mL甲醇溶解，过0.22μm有机系滤膜，待测。

2、高效液相色谱仪测定

按照液相色谱条件测定样品和标准工作溶液，用标准曲线对样品溶液浓度进行校正，外标法定量。采用的液相色谱条件：

a)色谱柱：以碳十八烷基键合硅胶为填充剂；

b)流动相：甲醇+0.1％磷酸水溶液＝60+40(体积比)；

c)柱温：30℃；

d)流速：1.0mL/min；

e)进样量：20μL；

f)波长：280nm；

3、线性关系

用甲醇将标准溶液逐级稀释，制备浓度为0.1，0.2，0.5，1，2μg/mL五个不同浓度的系列标准溶液，按浓度从低到高顺序，依照上述色谱条件测定。每一浓度测定3次，按其标准溶液浓度C(μg/mL)与对应平均峰面积A作标准曲线图，计算回归方程为A＝57.67C-0.657，相关系数为0.9999。

4、回收率和精密度

采用阴性地表水样品进行加标测定其准确度，加标浓度分别为0.004mg/L和0.02mg/L，每个浓度平行测定三次，平均回收率分别为110.3％和106.0％，相对标准偏差分别为6.7％和2.5％。

5、检测低限

以阴性地表水样品进行添加试验，当取样量为50.0mL时，以3倍信噪比求得本方法中抗倒酯的检出限(LOD)。抗倒酯在水样中的检测低限为3μg/L。

实施例2土壤中抗倒酯残留量的测定

1、样品提取：称取已制备好的土壤样品10.00g于50mL离心管中，加水湿润，加入20mL乙腈，涡旋混匀，震荡提取30min后，加入5g氯化钠涡旋混匀，8000rpm离心10min，用移液管移取10mL有机层溶液至鸡心瓶中，40℃水浴中旋转蒸发至近干，用1.00mL甲醇溶解残渣，过0.22μm有机系滤膜，待测。

2、高效液相色谱仪测定：同实施例1。

3、回收率和精密度

采用阴性土壤样品进行加标测定其准确度，加标浓度分别为0.04mg/kg和0.2mg/kg，每个浓度平行测定三次，平均回收率分别为81.3％和81.9％，相对标准偏差分别为4.0％和2.1％。

5、检测低限

以阴性土壤样品进行添加试验，以3倍信噪比求得本方法中抗倒酯的检出限(LOD)。抗倒酯在土壤样品中的检测低限为0.02mg/kg。

上述实施例仅供说明本发明之用，而并非是对本发明的限制，有关技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明范围的情况下，还可以作出各种变化和变型，因此所有等同的技术方案也应属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由各权利要求限定。

Claims

1.高效液相色谱测定环境样品中抗倒酯残留量的检测方法，其特征在于：所述测定方法包括如下的步骤：

(1)水样经固相萃取柱浓缩富集，甲醇洗脱后，洗脱液氮吹或旋转蒸发至干，用甲醇溶解并定容后，高效液相色谱测定；

(2)土壤样品经有机溶剂振荡提取，提取液经旋转蒸发至近干，用甲醇溶解并定容后，高效液相色谱测定。

2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤(1)中所述固相萃取柱为HLB固相萃取柱，淋洗液为超纯水或二次蒸馏水，洗脱液为甲醇。

3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤(2)中所述有机溶剂为乙腈。

4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述的环境样品为环境水质和土壤。