CN103122314B

CN103122314B - 玫烟色棒孢霉菌株及其在防治烟粉虱方面的应用

Info

Publication number: CN103122314B
Application number: CN201210449949.0A
Authority: CN
Inventors: 胡琼波; 邹春华
Original assignee: South China Agricultural University
Current assignee: South China Agricultural University
Priority date: 2012-11-12
Filing date: 2012-11-12
Publication date: 2014-09-24
Anticipated expiration: 2032-11-12
Also published as: CN103122314A

Abstract

本发明公开了一种玫烟色棒孢霉菌株(Isariafumosoroseus)及其在防治烟粉虱方面的应用。所述菌株在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏日期2012年10月12日，保藏号CCTCC NO：M2012400，分类地位属于真菌门(Eumycota)、有丝分裂孢子真菌类(Mitosporicfungi)、丝孢纲(Hyphomycetes)、丝孢目(Hyphomycetales)、丝孢科(Hyphomycetaceae)、棒孢霉属(Isaria)。本发明所述的玫烟色棒孢霉菌株对B型烟粉虱高度致病，其对2龄若虫的半致死浓度(LC₅₀)为7.5×10⁵分生孢子/mL(接种后第4天)，对B型烟粉虱的田间防治效果达到90%以上，与化学杀虫剂螺虫乙酯相当。该菌株作为一种活体生物杀虫剂，对环境无污染、对人畜无毒性，适用于有机农产品生产。

Description

玫烟色棒孢霉菌株及其在防治烟粉虱方面的应用

技术领域

本发明属于生物农药技术领域，具体涉及一种高效棒孢霉菌种及其在防治烟粉虱方面的应用。

背景技术

烟粉虱Bemisia tabaci (Gennadius)是一种世界性的重要农林业害虫，其为害造成严重经济损失。烟粉虱的生物型有几十种，其中B型与Q型是最危险的害虫。B型烟粉虱大约在上世纪90年代侵入我国，接着Q型烟粉虱也侵入我国，这两种生物型目前已经广泛为害我国大部分地区的主要农林作物，已经造成数以百亿元的经济损失。烟粉虱的寄主范围极广，生物型很多，年发生世代多，易形成抗药性，因此极难防治。

烟粉虱是多食性害虫，寄主范围广泛，估计其寄主植物达200种以上，葫芦科、茄科、十字花科蔬菜及棉花、烟草等重要经济作物都是烟粉虱的主要为害对象。烟粉虱对寄主作物的危害主要表现在3个方面：一是直接刺吸植物汁液，造成植物衰弱、最后干枯死亡；二是若虫和成虫吸食植物汁液的同时，还能分泌大量的蜜露，诱发煤污病，严重时叶片呈黑色，影响植物的光合作用，导致植物生长不良，大大降低了蔬菜作物的经济价值和观赏植物的观赏价值；三是传播病毒病，烟粉虱能够传播100种以上的病毒，如番茄黄化曲叶病毒等双生病毒科的病毒，该类病毒对作物生产造成毁灭性影响。

化学防治是目前防治烟粉虱的最主要方法，然而，大量的化学药剂的使用，不但费用投入较高，且对环境造成严重污染，同时由于用药次数的增多，使用量的增大，致使烟粉虱对药剂产生抗性。为此，国内外对烟粉虱的生物防治进行了大量的研究。烟粉虱的天敌资源丰富，其寄生性天敌有膜翅目昆虫，捕食性天敌有鞘翅目、脉翅目、半翅目昆虫和捕食螨类等。据不完全统计，在世界范围内，烟粉虱有45种寄生性天敌，如恩蚜小蜂属(Encarsia)和浆角蚜小蜂属(Eretmocerus)等的一些种类，62种捕食性天敌，如瓢虫、草蛉和花蝽等。然后由于来源及成本限制，天敌昆虫尚未能够规模化用于田间烟粉虱的防治。

利用昆虫病原真菌防治烟粉虱因此受到关注。目前发现，烟粉虱的病原真菌主要有玫烟色棒孢霉Paecilomyces fumosorosea、球孢白僵菌Beauveria bassiana、绿僵菌Metarhizium anisopliae、蜡蚧轮枝菌Verticillium lecanii、粉虱座壳孢Acshersonia aleyrodis等。但是，因为现有昆虫病原真菌防治烟粉虱的防治效果不稳定等原因限制了真菌杀虫剂的大规模应用，本技术领域需要新的防治效果稳定、高效的昆虫病原真菌技术。

发明内容

本发明的一个目的是克服现有技术的不足，提供一株新的高效玫烟色棒孢霉菌株。

本发明的另一个目的是提供所述高效玫烟色棒孢霉菌株在防治烟粉虱方面的应用。

本发明的目的通过下述技术方案来实现：

本发明提供了一株高效玫烟色棒孢霉 (Isaria fumosoroseus)IfB01 菌株，所述菌株已在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)保藏，保藏日期是2012年10月12日，保藏号是CCTCC M 2012400。所述中国典型培养物保藏中心的地址为湖北省武汉市武昌珞珈山。

本发明通过采集天然感病的烟粉虱虫尸、从中分离纯化菌株、测定致病性、比较生物学特性与生产性状及菌种鉴定等步骤，经过反复筛选，得到一株对烟粉虱高效的菌株，所述菌株分类地位属于真菌门(Eumycota)、有丝分裂孢子真菌类(Mitosporic fungi)、丝孢纲(Hyphomycetes)、丝孢目(Hyphomycetales)、丝孢科(Hyphomycetaceae)、棒孢霉属(Isaria)。未发现该菌株的有性世代。

所述玫烟色棒孢霉菌株的形态学特征：在察氏培养基上，起初菌落规则圆形，菌丝白色；延长培养，菌落呈不规则圆形，形成灰色孢子层；显微镜下观察，菌丝透明，无色，宽度3.30±0.52 μm；分生孢子梗长10.83±2.34 μm，宽2.94±0.37 μm，其上着生3～6个瓶梗组成的轮生体，瓶梗基部球形或椭圆形膨大，向上细颈，瓶梗长10.90±1.86 μm，宽3.36±0.32 μm；分生孢子透明，光滑，梭形至柱状，长5.61±0.76 μm，宽2.01±0.23 μm。

菌落生长：在PDA培养基上菌落初期白色毛绒状，26℃下培养7天菌落直径26.5±0.7mm，培养14天菌落直径达53.6±0.5mm，产孢时由里向外长出灰色孢子堆，呈层状。在察氏培养基上菌落初期白色毛绒状，26℃培养7天菌落直径为23.2±0.6mm，培养14天菌落直径达46.7±1.3mm；产孢时由里向外长出灰色孢子堆，成层状。

本发明同时提供了所述玫烟色棒孢霉菌株对烟粉虱的防治应用，应用于制备防治烟粉虱的药剂方面，具体是将玫烟色棒孢霉菌株的分生孢子和菌丝应用于制备防治烟粉虱的药剂方面。优选将收获的玫烟色棒孢霉菌株分生孢子，用0.05%（体积比百分比浓度）吐温-80的溶液配制成浓度为10⁷分生孢子/mL的悬浮液，于烟粉虱若虫发生高峰期采用叶面喷雾法将悬浮液施用于田间。

本菌株对烟粉虱的室内毒力：在实验室条件下，本菌株的分生孢子对盆栽芥兰苗上的烟粉虱若虫毒力很高，接种后4天的对2龄烟粉虱若虫的半致死浓度为7.5×10⁵个分生孢子/mL，对3龄烟粉虱若虫的为7.8×10⁵个分生孢子/mL。

本菌株对烟粉虱的田间防治效果：在田间条件下，本菌株的分生孢子对露地栽培番茄上的烟粉虱防治效果较好，用1×10⁷个分生孢子/mL的分生孢子悬浮液每亩喷雾30 L，施用后6天对烟粉虱防治效果（虫口减退率）为91.8%，显著高对照化学杀虫剂吡虫啉的防治效果，与螺虫乙酯的效果相当。

本发明具有以下优点和有益效果：

本发明提供了一株新的玫烟色棒孢霉 (Isaria fumosoroseus)IfB01 菌株，为对防治烟粉虱增加了一重要的新成员，该菌株对防治烟粉虱高效。本发明所述的菌株是一种新的昆虫病原真菌，成功应用作为一种生物活体农药，具有对环境无污染，对人畜无毒性的特征，适用于有机农产品生产需求。

附图说明

图1本发明菌株菌落形态（察氏培养基，25℃，14天）

图2 本发明菌株产孢结构

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例来进一步详细阐述本发明。如下实施例为本发明较佳的实施方式，本发明主要阐述所述菌株以及基于所述菌株的应用思想，实施方式中简单参数的替换不能一一在实施例中赘述，但并不因此限制本发明，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，应被视为等效的置换方式，包含在本发明内。

实施例1

本发明人于2012年8月在中国广东通过采集天然感病的烟粉虱虫尸、从中分离纯化菌株、测定致病性、细致地比较生物学特性与生产性状，经过菌种鉴定，反复筛选，得到了一株对烟粉虱高效的菌株，所述菌株分类地位属于真菌门(Eumycota)、有丝分裂孢子真菌类(Mitosporic fungi)、丝孢纲(Hyphomycetes)、丝孢目(Hyphomycetales)、丝孢科(Hyphomycetaceae)、棒孢霉属(Isaria)。未发现该菌株的有性世代。

所述菌株(Isaria fumosoroseus)IfB01已在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)保藏，保藏日期是2012年10月12日，保藏号是CCTCC M 2012400。

所述玫烟色棒孢霉菌株的形态学特征：在察氏培养基上，起初菌落规则圆形，菌丝白色；延长培养，菌落呈不规则圆形，形成灰色孢子层，见附图1所示；显微镜下观察，菌丝透明，无色，宽度3.30±0.52 μm；分生孢子梗长10.83±2.34 μm，宽2.94±0.37 μm，其上着生3-6个瓶梗组成的轮生体，瓶梗基部球形或椭圆形膨大，向上细颈，瓶梗长10.90±1.86 μm，宽3.36±0.32 μm；分生孢子透明，光滑，梭形至柱状，长5.61±0.76 μm，宽2.01±0.23 μm ，见附图2所示。

实施例2 分生孢子生产

孢子悬浮液配制：从斜面菌种上挑取分生孢子，接入已经灭菌的0.05%的吐温-80 溶液中，用血球计数板测量孢子浓度，并调整到10⁷个分生孢子/mL。备用。

种子培养：将2mL孢子悬浮液接种于98 mL种子培养基中，在180 r/m 和26℃条件下摇瓶培养2～3天即成种子液。种子培养基为0.5%蛋白胨的Czapek-Dox培养基，其成分为：蛋白陈5 g，NaN0₃3 g，K₂HP0₄ 1 g，MgS0₄ · 7H₂0 0.5 g，KCl 0.5 g，FeS0₄ · 7H₂0 0.01 g，茂糖30 g，琼脂15～20g，水1000 mL。

固体发酵：先将大米蒸熟，装入保鲜袋中，待其冷却至常温后，接种上述种子液，接种比例为5～15% (V/W，mL/g)，在25～28℃条件下培养2周左右，待米粒表面长满分生孢子是过筛分离分生孢子，封口包装，保温保藏备用。

实施例3 玫烟色棒孢霉菌防治烟粉虱

应用上述实施例2中所生产的分生孢子，在实验室内条件下，将孢子悬浮液接种于盆栽芥兰苗上的B型烟粉虱若虫，处理后不同时间调查烟粉虱的发病率，结果表明，本菌株对烟粉虱若虫的效果很好，接种后4天对2龄烟粉虱若虫的半致死浓度为7.5×10⁵个分生孢子/mL，对3龄烟粉虱若虫的为7.8×10⁵个分生孢子/mL，见表1所示。

应用上述实施例2中所生产的分生孢子防治田间烟粉虱，在烟粉虱若虫发生高峰期，将1×10⁷个分生孢子/mL的分生孢子悬浮液每亩30 L喷施于露地栽培番茄上的B型烟粉虱，施用后不同时间调查虫口减退率，结果表明，本菌株对烟粉虱的防治效果较好，施用后6天对烟粉虱防治效果（虫口减退率）为91.8%，显著高对照化学杀虫剂吡虫啉的防治效果，与螺虫乙酯的效果相当，见表2所示。

Claims

1.一种玫烟色棒孢霉 (Isaria fumosoroseus) 菌株，所述菌株在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏日期是2012年10月12日，保藏号是CCTCC M 2012400。

2.权利要求1所述玫烟色棒孢霉菌株的应用，其特征在于应用于制备防治烟粉虱的药剂方面。

3.根据权利要求2所述玫烟色棒孢霉菌株的应用，其特征在于将玫烟色棒孢霉菌株的分生孢子应用于制备防治烟粉虱的药剂方面。

4.根据权利要求2或3所述玫烟色棒孢霉菌株的应用，其特征在于是收获玫烟色棒孢霉菌株分生孢子，用0.05%吐温-80的溶液配制成浓度为10⁷分生孢子/mL的悬浮液，于烟粉虱若虫发生高峰期采用叶面喷雾法将悬浮液施用于田间。