CN103099853B - 肾康注射液在制备防治深静脉栓塞药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了肾康注射液或肾康注射液与抗凝剂在制备防治骨科大手术引起的深静脉栓塞药物中的应用。动物实验证实，肾康注射液可显著降低下肢深静脉大鼠和家兔全血粘度、血浆粘度和红细胞压积；明显延长凝血酶时间、凝血酶原时间和部分凝血酶时间；增加血液中SOD的含量，降低MDA含量，从而改善血液的高凝状态，减小炎性介质浸润。另外，能显著降低骨科大手术引起下肢深静脉栓塞的机率，增强手术后的免疫力。

Description

肾康注射液在制备防治深静脉栓塞药物中的应用

技术领域

本发明涉及药物的新用途，具体涉及肾康注射液或肾康注射液和抗凝剂联合预防和治疗由骨科大手术导致的下肢深静脉栓塞症中的应用。属于医药领域。

背景技术

深静脉栓塞(Deep Venous Thrombosis，DVT)是指血液在深静脉内不正常地凝结，属静脉回流障碍性疾病，多发生在下肢深静脉，且引起肺部血栓的机率比较高。本病在中医上认为属于“肿胀”、“瘀症”、“血瘤”、“筋瘤”、“恶脉”、“淤血流注”、“脉痹”等范畴。现代医学认为主要有三大因素引起DVT，包括静脉血流缓慢、血液的高凝状态和静脉壁损伤。

(一)静脉血流缓慢手术或由于重病长时间的卧床、下肢静脉曲张等，均易引起静脉血流缓慢而导致深静脉血栓。深静脉血流缓慢可导致细胞代谢障碍，在局部积聚大量凝血酶；破坏的细胞可释放出血清素和组胺，使内皮细胞收缩及其下方的基底膜裸露，引起凝血物质的释放和激活。此外，血流缓慢使静脉瓣窦底部氧分压降低，从而导致内皮细胞破坏，在内膜上形成许多微小的裂伤，更易引起静脉栓塞。

(二)血液的高凝状态在施行大手术后数天内，患者体内抗凝物质明显减少，血液处于高凝状态。其他如创伤、烧伤、分娩或严重脱水所致的血液浓缩；脾切除后血小板的急剧升高和红细胞增多症使血液黏稠度增高；内脏癌肿浸润组织及其破坏所释出的一些物质，促进血凝；大型手术时对血小板的刺激，使血小板聚集；某些药物的反应，以上均可使血液处于高凝状态造成静脉血栓形成。特别是人工关节置换后，深静脉血栓形成是由内皮细胞损伤、血小板激活和凝血瀑布反应与抗凝、纤溶等机制共同作用的结果。

(三)静脉壁损伤静脉内壁是由一层扁平的内皮细胞构成，其表面被含蛋白聚糖的多糖-蛋白质复合物所覆盖，该内皮细胞表面的覆盖物中含有大量的肝素，具有良好的抗凝作用，能较好地防止血小板的黏附和聚集，内皮细胞本身还能与某些重要的抑制血栓形成的物质相结合，从而达到抗血小板黏附和扩张血管的作用。病理结果证实，在静脉入口和汇合处，管壁的结构最为薄弱，淤血可使静脉管腔扩大，会使薄弱的内膜上发生极为微小的裂伤，从而使血小板黏附，出现纤维蛋白沉积导致血栓的形成。

特别在骨科大手术后出现DVT的机率很高。据国外文献报道，在三种常做的骨科大手术中DVT总发生率分别是：全髋关节置换手术42％-57％；全膝关节置换手术41％-85％；髋部骨折手术46％-60％，并且DVT继发的肺栓塞发生率在4.6％-19.7％。因此，在骨科大手术前后采用抗凝药，预防下肢DVT具有重大的临床意义。

目前，预防骨科大手术DVT的措施主要有：手术过程中的基本预防，物理预防措施和药物预防措施，一般情况下，采用三种方法结合预防。对于药物的预防治疗，目前主要为肝素制剂，低分子肝素被国内外学者公认为是剂量单一、使用方便且疗效肯定的首选药物，但它对有血小板减少史，有各种原因的出血或出血倾向、肝肾功能障碍、高血压病史患者禁用，并且它尚存在一定的毒副作用。因此使用低分子肝素有一定的局限性。维生素K也是常用的预防药物，但要服用足够的天数，且剂量较难把握。

发明内容

本发明的目的在于提供肾康注射液的新用途，即提供肾康注射液在制备防治深静脉栓塞药物中的应用，尤其是骨科大手术引起的深静脉栓塞，或下肢静脉栓塞。

本发明肾康注射液可以单独使用，也可以是与常用抗凝剂联合使用，例如，低分子肝素钙。

肾康注射液是国家中药二类新药，临床主要用于治疗慢性肾功能衰竭。它是由下述重量配比的原料药制成：大黄、丹参、红花和黄芪(7-15∶6-15∶8-15∶15-45)。近年来在使用过程中，发现它对骨科大手术后深静脉栓塞有较好的预防和治疗作用，经过大量的动物实验，也证实了这一点。从肾康注射液的药物组成看，它可以防止血栓形成，扩张血管，增加血流量。

大黄主要含有蒽醌类衍生物、苷类化合物和挥发油等有效成分。经研究有以下药理作用：①泻下作用。②止血作用。可以促进血小板的粘附和聚集功能；增加血小板数和纤维蛋白原含量；降低抗凝血酶III活性；使受伤局部的血管收缩。③抗感染作用。

丹参的主要含有二萜醌类色素、丹参酮、隐丹参酮、异丹参酮等，研究结果显示它主要包括以下几个方面的药理作用：加强心肌收缩力、改善心脏功能，减少心肌耗氧量；扩张冠脉，增加心肌血流量；扩张外周血管，增加血流；抗血栓形成，提高纤溶酶活性，延长出、凝血时间，抑制血小板聚集；改善血液流变学特性和微循环；促进组织的修复与再生作用；改善肝脏微循环；抗菌作用。

红花主要含有红花醌苷、新红花苷、红花苷以及红花油等成分。目前研究证实它具有以下药理作用：可以增加冠脉流量和心肌营养性血流量；使全血凝固时间及血浆(缺血小板)复钙时间显著延长；从红花中分离出的有效成分红花黄色素，具有抑制血小板凝聚，增加纤维蛋白溶解酶活性，抑制体外血栓形成等作用。另外，它还可兴奋子宫，降低血脂。

黄芪主要含有黄酮类、苷类、黄芪多糖、氨基酸等成分。黄芪可以增强机体的非特异性和特异性免疫功能，增大抵抗力；增加红细胞数目，增强肾上腺皮质功能和抗疲劳的作用；还可以调血压，抗溃疡。

由此可见，方中丹参和红花起到扩张血管，抗血栓形成的作用；黄芪补中益气，增强机体免疫力，预防骨科大手术中感受风寒；大黄有止血的功效，防止大手术中大量出血和丹参、红花的作用过强。组方配比得当，可以较好的预防和治疗骨科大手术中下肢静脉栓塞。

实验例一肾康注射液对下肢深静脉栓塞大鼠血液流变学的影响

实验材料SD大鼠，清洁级，180-220g(第四军医大学实验动物中心)；肾康注射液，每毫升含原生药0.3g(西安世纪盛康药业有限公司)；凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、部分凝血酶原时间(APTT)测定试剂盒，由北京世帝科学仪器有限公司提供。

实验方法取55只SD大鼠常温饲养，雌雄各半。随机分为4组，正常组10只，模型组，肾康注射液预防组(SKYF组)和肾康注射液预防和治疗组(SKYZ组)各15只。正常组和模型组于造模前1周起，每天尾静脉注射1ml/kg生理盐水，直至实验结束；SKYF组于造模前1周起，每天尾静脉注射肾康注射液2g生药/kg，直至造模后；SKYZ组于造模前一周起，每天尾静脉注射肾康注射液2g生药/kg，造模后继续给予1周药物。模型组、SKYF组和SKYZ组复制大鼠下肢深静脉栓塞模型，正常组仅暴露腹腔髂静脉，取SD大鼠分别腹腔注射10％水合氯醛3ml/kg麻醉，固定大鼠，剪毛，消毒后，下腹部正中开腹，暴露左髂动、静脉，用手术线依次小心结扎左髂静脉近心端、沿途属支和远端后，缝合伤口，并消毒，造模后肌内注射青霉素预防感染。造模后1天，发现大鼠左后肢明显肿胀。造模后一周，麻醉大鼠，取空腹静脉血测定血液流变学和凝血功能，左右下肢静脉血管进行病理切片，HE染色，观察病理学指标。

实验结果

1、常规行为观察模型组和两个给药组造模后，左后肢均出现不同程度的肿胀，与临床的下肢深静脉栓塞形成的临床表现基本相符。造模一周后，模型组症状加重，左后肢有青肿出现，精神萎靡，有3只死亡；SKYF组肿胀有所消退，饮食正常，有1只死亡；SKYZ组状态明显由于模型组和SKYF组，肿胀基本消退，饮食正常，无死亡。

2、肾康注射液对下肢深静脉栓塞大鼠血液流变学的影响见表1。

表1肾康注射液对下肢深静脉栓塞大鼠血液流变学的影响

注：各组与模型组比较^*p＜0.05  ^**p＜0.01

实验结果表明：模型组大鼠全血粘度的高切、中切、低切值、血浆粘度和红细胞压积均高于空白组，说明血液处于高凝状态，静脉血流慢，表明模型复制成功；SKYF组和SKYZ组大鼠全血粘度、血浆粘度和红细胞压积与模型组比较显著降低，差异有显著性意义(P＜0.01或P＜0.05)。表明肾康注射液可以明显改善大鼠血液流变学各项指标，降低血液粘度。且SKYZ组的效果优于SKYF组。

3、肾康注射液对下肢深静脉栓塞大鼠凝血功能的影响见表2。

表2肾康注射液对下肢深静脉栓塞大鼠凝血功能的影响

注：各组与模型组比较^*p＜0.05  ^**p＜0.01

实验结果表明：模型组大鼠PT、APTT、TT与空白组比较明显缩短，说明模型组更易凝血，形成血栓，大鼠下肢深静脉血栓复制成功；SKYF组和SKYZ组大鼠APTT、TT与模型组比较显著延长(P＜0.01或P＜0.05)，PT有所延长，且SKYZ组的效果优于SKYF组。

4、病理学检查

正常组大鼠整个血管内膜表面平整，上皮细胞大小均匀，排列整齐，管腔中无血栓；模型组大鼠静脉管腔有血栓堵塞，多为混合血栓，且部分与血管壁粘连，大量内皮细胞脱落，血管壁炎性细胞浸润较为严重；SKZY组大鼠血管有血栓堵塞，但未出现粘连，血管内皮细胞有部分脱落；SKYZ组大鼠静脉血管部分栓塞，血栓明显少于、小于模型组，血管内膜基本规则，内皮细胞少有脱落。

实验例二肾康注射液对下肢深静脉栓塞家兔的影响

实验材料新西兰白兔，雌雄各半，西安斗门实验动物中心；SOD、MDA试剂盒，南京建成生物科技研究所。

实验方法取46只新西兰大白兔，雌雄各半，适应性喂养3天。随机分为4组，正常组10只，模型组，肾康注射液预防组(SKYF组)和肾康预防和治疗组(SKYZ组)各12只。模型组、SKYF组和SKYZ组复制家兔下肢深静脉栓塞模型，各组家兔用10％乌拉坦2ml/kg腹腔注射麻醉，将家兔背位固定于家兔固定器上，剪去左后肢附近兔毛，消毒，沿股静脉切开皮肤，镊子钝性分离组织和肌肉，游离出左侧股静脉长约4cm，用手术线分别结扎其远近段，缝合伤口，造模完成后，肌内注射青霉素预防感染。正常组仅暴露股静脉，缝合观察。正常组和模型组于造模前1周起，开始每天耳缘静脉注射1ml/kg生理盐水，直至实验结束；SKYF组造模前1周起，每天耳缘静脉注射肾康注射液1.5g生药/kg，直至造模后；SKYZ组造模前一周同样每天给药1.5g生药/kg，造模后继续给予1周药物。分别于造模后第3天和第7天心脏取血，测定血液流变学和血清中SOD和MDA的含量。

实验结果

1、造模后第3天肾康注射液对家兔血液流变学的影响见表3。

表3造模后第3天肾康注射液对家兔血液流变学的影响

注：各组与模型组比较^*p＜0.05  ^**p＜0.01

实验结果表明：造模后第3天，模型组家兔全血粘度、血浆粘度和红细胞压积均高于空白组，说明血液处于高凝状态，静脉血流慢，模型复制成功；SKYZ组大鼠全血粘度、血浆粘度和红细胞压积与模型组比较显著降低，差异有显著性意义(P＜0.01或P＜0.05)；SKYF组在一定程度上也可改善血液流变学。

2、造模后第3天肾康注射液对深静脉血栓家兔SOD、MDA的影响见表4。

表4造模后第3天肾康注射液对深静脉血栓家兔SOD、MDA的影响

注：各组与模型组比较^*p＜0.05  ^**p＜0.01

实验结果表明：造模后第3天，模型组家兔血液中SOD的含量低于空白组，MDA含量高于空白组，且差异有显著性意义(P＜0.01)；SKYZ组SOD含量高于模型组，MDA含量低于模型组，有差异性(P＜0.05)，有一定治疗作用；SKYF组家兔血液中MDA含量低于模型组。

3、造模后第7天肾康注射液对家兔血液流变学的影响见表5。

表5造模后第7天肾康注射液对家兔血液流变学的影响

注：各组与模型组比较^*p＜0.05  ^**p＜0.01

实验结果表明：造模后第7天，模型组家兔全血粘度、血浆粘度和红细胞压积均显著高于空白组，说明模型组家兔血液流变学特征进一步恶化；SKYZ组大鼠全血粘度、血浆粘度和红细胞压积与模型组比较显著降低，差异有显著性意义(P＜0.01)；SKYF组在一定程度上也可改善全血粘度。

4、造模后第7天肾康注射液对深静脉血栓家兔SOD、MDA的影响见表6。

表6造模后第7天肾康注射液对深静脉血栓家兔SOD、MDA的影响

注：各组与模型组比较^*p＜0.05  ^**p＜0.01

实验结果表明；造模后第7天，SKYZ组SOD含量明显高于模型组，MDA含量明显低于模型组，有显著差异性(P＜0.01)；SKYF组家兔血液中SOD高于模型组，MDA含量低于模型组，表明有一定治疗作用。

实验例三肾康注射液在骨科大手术中对下肢深静脉栓塞的预防和治疗作用

将本院149例择期行下肢骨科手术患者，男115例，女34例，年龄32-75岁，平均年龄42±4岁；体重40-70kg。随机分成4组，对照组、肾康注射液(SK)组、肾康注射液联合低分子肝素钙组(组合组)和低分子肝素钙组。其中对照组股骨颈骨折10例，股骨转子骨折12例，股骨干骨折11例，股骨髁上骨折3例；SK组股骨颈骨折12例，股骨转子骨折10例，股骨干骨折13例，股骨髁上骨折4例；组合组股骨颈骨折9例，股骨转子骨折13例，股骨干骨折10例，股骨髁上骨折3例；低分子肝素钙组股骨颈骨折14例，股骨转子骨折12例，股骨干骨折10例，股骨髁上骨折3例。经分析4组患者性别、年龄、体重比较无显著性差异。

2治疗方法空白组采用常规手术方法，不进行特殊处理；SK组手术前2天，肾康注射液60-100ml加入10％葡萄糖注射液300ml中静脉滴注，每天一次；组合组再给予和SK组等量药物的同时，皮下注射低分子肝素钙0.3-0.4ml；低分子肝素钙组仅皮下注射低分子肝素钙0.3-0.4ml。手术后12-18h继续抗凝治疗，连续使用7天。

3结果三组患者7天后经Doppler超声检查DVT阳性情况见表7。

表7三组患者经骨科大手术后DVT情况

Claims (5)

1.肾康注射液在制备防治深静脉栓塞药物中的应用，肾康注射液是由下述重量配比的原料药制成：大黄7-15、丹参6-15、红花8-15和黄芪15-45。

2.按照权利要求1所述的应用，其特征在于：所述肾康注射液与抗凝剂合用。

3.按照权利要求2所述的应用，其特征在于：所述抗凝剂为低分子肝素钙。

4.按照权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的深静脉栓塞为下肢的深静脉栓塞。

5.按照权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的深静脉栓塞为骨科大手术引起的深静脉栓塞。