CN103083658A - 一种用于治疗或预防猪感染性疾病的疫苗佐剂组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种用于治疗或预防猪感染性疾病的疫苗佐剂组合物，含有以下组分：黄芪提取物、聚合物和抗原成分；或含有黄芪提取物、聚合物、环糊精和抗原成分。本发明的所述疫苗佐剂可以与猪圆环病毒抗原或猪肺炎支原体抗原联合使用，可以大幅度提高疫苗的免疫效力，如至少可以降低到原抗原一般的用量即可达到原有免疫效力；另一方面，通过多种剂量的疫苗佐剂的试验证明，本发明的疫苗佐剂没有明显的副作用，特别是相对于常用的油相佐剂，副作用明显减少。

Description

一种用于治疗或预防猪感染性疾病的疫苗佐剂组合物

技术领域

本发明涉及一种疫苗佐剂，特别是指一种含有黄芪多糖及其聚合物的用于治疗或预防猪感染性疾病的疫苗佐剂组合物。

背景技术

疫苗佐剂被用于达成二个目的：其减缓抗原从注射部位释出，且其刺激免疫系统。传统疫苗通常由灭活或被杀死或经修饰的活致病微生物的粗制备物组成。与这些致病微生物的培养物相关的杂质可作为增强免疫应答的佐剂。然而加入佐剂可容许使用较小剂量的抗原来刺激类似的免疫应答，从而减少疫苗的制造成本。因此，当将疫苗与佐剂组合时可显著增加某些可注射疫苗的效力。

在选择疫苗佐剂时必须考虑许多因素。疫苗佐剂应该以有效方式使抗原的释出和吸收速率缓慢，且对宿主的毒性、变应原性、刺激及其它不想要的作用最小。为了使人满意，佐剂应为非杀病毒性、可生物降解、可持续产生高水平的免疫力、能刺激交叉保护作用、可与多种抗原兼容、在多种物种中有效、对宿主无毒且安全(如：无注射部位反应)。其它期望的佐剂特征为可微量给药、剂量节省、具有优良的货架稳定性、可承受干燥、可制成不含油、可作为固体或液体存在、为等张性、容易制造且其制造并不昂贵。最后，高度期望能够根据疫苗接种方案的需要而将佐剂配置成诱导体液或细胞免疫应答或二者兼有。然而，可符合上述条件的佐剂的数量有限。

发明内容

有鉴于此，本发明的主要目的在于提供一种用于治疗或预防猪感染性疾病的疫苗佐剂组合物，其特征在于，含有以下组分：黄芪提取物、聚合物和抗原成分。

优选地，本发明所述黄芪提取物含有大于70％wt的黄芪多糖；更优选地，含有大于90％wt的黄芪多糖

优选地，本发明所述黄芪提取物中黄芪多糖量为0.1～100mg/ml；更优选地，所述黄芪提取物中黄芪多糖量为1～10mg/ml；最优选地，所述黄芪提取物中黄芪多糖量为3～4mg/ml。

优选地，本发明所述聚合物为聚丙烯酸；更优选地，所述聚合物为商品名为卡波姆(Carbomer)的聚丙烯酸；更优选为Carbomer940、Carbomer974P、Carbomer934P和Carbomer971P，最优选为Carbomer934P。

本发明所述聚合物的量通常为0.001mg/ml～50mg/ml，优选0.1～10mg/ml，更优选0.1～5mg/ml，最优选1mg/ml～3mg/ml。

本发明的所述疫苗佐剂与以下疫苗抗原配合使用：细菌性抗原或病毒性抗原；优选抗原猪细菌性抗原和病毒性抗原；最优选猪圆环病毒抗原或支原体抗原。

本发明的另一方面为提供上述疫苗佐剂组合物的制备方法，包括如下步骤：

A)在缓冲液中制备抗原成分的组合物；

B)将所述的黄芪多糖黄芪提取物加入步骤A的组合物中；

C)将所述的聚合物加入步骤B的组合物中。

本发明的另一目的在于提供一种疫苗佐剂组合物，其特征在于，还包括环糊精衍生物。

优选地，本发明所述的环糊精衍生物为公开于CN 1175264A的环糊精衍生物SL-CD，其含量为0.1～10mg/ml，更优选0.1～5mg/ml，最优选2mg/ml。

同样地，上述含环糊精衍生物的疫苗佐剂可以与以下疫苗抗原配合使用：细菌性抗原或病毒性抗原；优选抗原猪细菌性抗原和病毒性抗原，最优选猪圆环病毒抗原或支原体抗原。

本发明的另一方面为提供上述环糊精衍生物如SL-CD的疫苗佐剂组合物的制备方法，包括如下步骤：

A)在缓冲液中制备抗原成分的组合物；

B)将所述的黄芪提取物加入步骤A的组合物中；

C)将所述聚合物加入步骤B的组合物中；

D)将所述的环糊精衍生物加入步骤C的组合物中。

由上可以看出，本发明的用于治疗或预防猪感染性疾病的疫苗佐剂组合物至少有以下优点：

1.可以提高疫苗免疫保护力，没有副作用：通过本发明后续实施例可以看出，本发明的疫苗佐剂可以大幅度提高疫苗的免疫效力，如至少可以降低到原抗原一般的用量即可达到原有免疫效力；另一方面，通过多种剂量的疫苗佐剂的试验证明，本发明的疫苗佐剂没有明显的副作用，特别是相对于常用的油相佐剂，副作用明显减少。

2.本发明的疫苗佐剂配制简单，直接混匀即可；

3.通过使用本发明的疫苗佐剂，可以大大降低疫苗中抗原的使用量，从而降低成本。

具体实施方式

术语：

黄芪提取物：豆科植物蒙古黄芪或荚膜黄芪的提取物，主要成分为黄芪甲苷和黄芪多糖。

SL-CD：按照中国专利公开号CN1175264A实施例6制备的环糊精衍生物，被至少一个但不多于N-l个至少有8个碳原子的线性烃链基团和至少一个但不多于N-l个硫酸盐基团所取代，其中所述的线性烃链基团选自烷基酰基和烯基酰基，其中所述的线性烃链基团和硫酸盐基团的合并总数不超过N，进一步的是其中N是从中得到环糊精衍生物的环糊精的羟基数。

“抗原”或“免疫原”是指任何刺激免疫应答的物质。此名词包括被杀死的、灭活的、减毒的或经修饰的活细菌、病毒或寄生虫。术语抗原亦包括个别的或其任何组合的多核苷酸、多肽、重组蛋白质、合成的肽、蛋白质提取物、细胞(包括肿瘤细胞)、组织、多糖、或脂质、或其片段。术语抗原亦包括抗体，诸如抗受试者遗传型抗体或其片段，以及可模拟抗原或抗原决定簇(表位)的合成肽模拟位

“菌苗”是指可作为疫苗或免疫原性组合物的组分使用的一种或多种被杀死的细菌的悬浮液。

佐剂通常被用于达到两种目的：减缓抗原从注射部位的释放以及刺激免疫系统。

“缓冲液”是指防止另一种化学物质的浓度变化的化学系统是指防止另一种化学物质的浓度变化的化学系统，如：质子供体及受体系统可作为防止氢离子浓度(pH)明显改变的缓冲液。另一缓冲液例子为含有弱酸及其盐(共轭碱)或弱碱及其盐(共轭酸)的混合物的溶液

“抗体”是指可因为对抗原的免疫应答而与特异抗原结合的免疫球蛋白分子。免疫球蛋白是由具有“恒定”及“可变”区的“轻”及“重”多肽链所组成的血清蛋白质，且根据该恒定区的组成而区分为数类(如：IgA、IgD、IgE、IgG及IgM)

“TCID50”是指“组织培养感染剂量”且定义为感染50％指定批次的经接种的细胞培养物时所需要的病毒稀释量。可使用多种方法来计算TCID50，包括本说明书全文中所使用的斯皮尔曼一卡伯法(Spearman-Karber method)。

本发明实施例中所选用的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2，PCV2)毒株为PCV2b毒株SH株，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心进行保藏，保藏日期：2008年3月4日，保藏号为CGMCC No.23890。此毒株在中国专利公开CN101240264公开。

本发明的灭活剂为甲醛溶液，其使用的终浓度为0.1～0.3％(v/v)，灭活时间为24～48h。优选地，本发明实施例中使用了终浓度0.2％体积的甲醛灭活PCV2 SH株，灭活时间为18小时。

本发明实施例中使用了密理博(Millipore公司)膜包(分子截留量为300Kda)作3倍浓缩，如后续实施例证明，该方法和浓度可以使最后获得二联疫苗获得较佳的疫苗效果；本发明还可以使用其他的超滤方法，如纤维素超滤法和多次超滤等方法。

为使本发明更加容易理解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，下列实施例中未提及的具体实验方法，通常按照常规实验方法进行。

实施例1、含猪圆环病毒抗原的疫苗佐剂组合物及其疫苗

1.猪圆环病毒抗原的制备

1.1 生产用菌(毒)种的制备

猪圆环病毒2型SH的制备：将毒种用MEM培养基(Invitrogen公司)作10倍稀释，按5％体积接种于PK15(ATCC，保藏号为CCL-33)细胞培养，37℃吸附30分钟，加入含4％犊牛血清和2mmol/L的D-氨基葡萄糖盐酸的MEM细胞维持液，37℃培养4日，冻融2～3次，收获病毒，病毒滴度为10^6.5TCID₅₀/ml。

1.2 病毒液或菌液的培养制备

猪圆环病毒2型SH株病毒液的制备：用转瓶细胞培养法。将长满单层的PK15细胞(购自ATCC)，倒去细胞培养液，将毒种液按0.1～0.2TCID₅₀/个细胞的接种量接种于PK15细胞上，轻轻旋转细胞瓶2周，37℃吸附30分钟，加入细胞维持液，置37℃旋转(10～12转/小时)培养。每日观察1～2次，细胞生长良好，37℃培养4日收获细胞和细胞液，冻融3次，置-20℃以下保存收获病毒，病毒滴度为10^6.5TCID₅₀/ml。

1.3 病毒液或菌液的处理

猪圆环病毒2型SH株病毒液的处理：将病毒液用中空纤维滤柱(孔径10μm与0.45μm)过滤，除去细胞碎片。

1.4 病毒液或菌液的灭活

猪圆环病毒2型SH株病毒液的灭活：将检验合格的步骤1.3处理的病毒液加入甲醛溶液。灭活，使甲醛溶液的终浓度为0.2％(V/V)，随即充分摇匀升温，当温度升至37℃时开始计时，保持18小时灭活完毕，加入0.2％(w/v)的焦亚硫酸钠终止灭活，置2～8℃保存

2.黄芪提取物的制备

将黄芪药材粉碎成最粗粉，加10倍量水浸泡1小时后，回流提取3次，加水量依次为10倍、8倍、6倍，提取时间依次为2小时、1.5小时、1.5小时，合并3次提取液，冷却至室温，高速离心机离心，8000转每分钟离心20分钟，上清液浓缩至相对密度为1.15～1.20，加无水乙醇至含醇量为70％，4℃静置12小时，弃去上清液，沉淀加水溶解，使浓度成1g生药/ml的溶液，加无水乙醇至含醇量为35％，高速离心机离心，8000转每分钟离心20分钟，取上清液，加无水乙醇至含醇量为70％，4℃静置12小时，弃去上清液，沉淀依次用80％、95％、无水乙醇洗涤脱水后，80℃真空干燥12小时，即得黄芪提取物，用硫酸-苯酚比色法测得黄芪多糖的含量以葡萄糖计为90％wt，用高效液相色谱法测定其含黄芪甲苷为0.01％wt。

3.免疫佐剂组合物的制备

3.1 配制储备液

3.1.1、PBS缓冲溶液的配制；0.01M pH＝7.2 PBS 2000ml

a：先配制甲液：0.2M的Na₂HPO₄缓冲溶液1000mlNa₂HPO₄.12H₂O 71.625g，注射用水1000ml，于1000ml容量瓶中定容

b：再配制乙液：0.2M的NaH₂PO₄缓冲溶液1000mlNaH₂PO₄.2H₂O 31.202g，注射用水1000ml，在1000ml容量瓶中定容

c：甲液∶乙液＝72∶28(体积)；

d：甲液和乙液混合，并用注射用水将其20倍体积稀释后，按终浓度0.85％加入NaCL即得0.01M pH＝7.2的PBS。分装后，121℃30min高压灭菌。室温放置。

3.1.2 黄芪提取物溶液的制备

将步骤2制备黄芪提取物溶解在去离子水中，制成250mg/ml(质量/体积)的储备溶液112℃ 30min高压灭菌，4℃保存

3.1.3 卡波姆溶液的制备

将卡波姆Carbomer 934P(青岛天力源生物科技有限公司)溶解在去离子水中，制成25mg/ml的储备溶液12℃ 30min高压灭菌，4℃保存

3.1.4 SL-CD溶液的制备

按照中国专利公开号CN1175264实施例6制备SL-CD，用去离子水，制成浓度为0.75％的储备溶液12℃ 30min高压灭菌，4℃保存。

3.2 含本发明的疫苗佐剂的猪圆环病毒疫苗组合物的制备：

使用上述配制的黄芪提取物溶液、卡波姆溶液、SL-CD溶液，按照下面的方法配制猪圆环病毒疫苗组合物：

A)在10mlPBS液中加入上述猪圆环病毒抗原液；

B)将黄芪提取物溶液加入A步骤溶液中；

C)将卡波姆溶液加入B步骤溶液中；

D)将SL-CD溶液加入到C步骤溶液中；

E)补加PBS液至最终体积50ml。

其中，可按下表省略加入SL-CD溶液等步骤，即省略步骤D，按下述方法配置猪圆环病毒疫苗组合物：

A)在10mlPBS液中加入上述猪圆环病毒抗原液；

B)将黄芪提取物溶液加入A步骤溶液中；

C)将卡波姆溶液加入B步骤溶液中；

D)补加PBS液至最终体积50ml。

或按下表配方省略其他成分，配置猪圆环病毒疫苗组合物：

按下面表1的配方制备试验例1-9的含本发明疫苗佐剂的猪圆环病毒疫苗，其中含有上述实施例1中所述的疫苗佐剂组合物：

表1、猪圆环病毒疫苗组合物配方组成

3.3 试验例10(含油佐剂的猪圆环病毒疫苗)的制备

按照专利CN101549155A实施例3的方法制备的油佐剂，抗原量10.0ml(同试验例1)，油相40ml。方法为：将油相加入到200ml洁净烧杯中，打开乳化机开关，低速搅拌。将试验例1的抗原液10ml，缓慢加入油相中，缓慢加速到450r/min，充分乳化10min.

其中油相为白油98％(重量/体积)白油以及2％(重量/体积)的混合液中加入硬脂酸铝，其中硬脂酸铝的加入量为1g/100ml油佐剂混合溶液。

实施例2、试验例1-10的免疫效果对比

1.试验用动物及分组

用5-6周龄PCV2 ELISA抗体阴性健康雌性清洁级Balb/c小鼠(PCV2 ELISA抗体效价不高于1∶50)60只，分成12组，每组5只。按照表1进行免疫每只0.2ml，两周后按相同途径和剂量进行第2次接种；空白对照不免。各组小鼠均隔离饲养观察。二免免后3周采血，分离血清，测定血清中PCV2 ELISA抗体效价。5只小白鼠的血清样品混合后将其6400X，12800X稀释，每个稀释度重复2孔

表2 试验分组及处理情况表

2.小白鼠抗体检测

使用PCV2 ELISA抗体检测法：用大肠杆菌表达的PCV2重组Cap蛋白或纯化的PCV2作为抗原，用pH值9.6的碳酸盐缓冲液稀释至终浓度为5μg/ml，包被酶标板，每孔100μl，置37℃下作用2小时，置2-8℃下过夜：洗涤3次，每次3-5分钟；每孔加入200μl含0.15％BSA的封闭液封闭，置37℃下作用2小时；洗涤3次，每次3-5分钟；将待检血清用PBS做1∶50稀释，然后再做2倍系列稀释，每个样品一行，每孔100μl，置37℃下作用1小时；洗涤3次，每次3-5分钟；加入HRP标记的SPA(1∶10000稀释)或HRP标记的的羊抗鼠IgG(1∶5000倍稀释)，每孔100μl，置37℃下作用1小时；洗涤3次，每次3-5分钟；加底物液TMB显色，每孔100μl，室温下避光显色10-15分钟；加终止液(2mol/L H₂SO₄溶液)，每孔100μl，10分钟内在酶标仪上读取450mn波长处的OD值。结果判定：同稀释度待检血清OD450值/阴性血清OD450值(P/N值)不低于2.1时判为阳性。以P/N值不低于2.1时的血清最大稀释度作为该血清的ELISA抗体效价。将同一组的5只小白鼠的血清样品混合后将其6400X稀释，每个稀释度重复2孔，将样品在同一块酶标板上检测。

3.小白鼠抗体检测的试验结果

表3、实验组的抗体检测结果

试验结果：抗体的水平为(实验组)6＞5＞1＞4＞2＞3＞9＞7＞10＞8＞11。

数据采用卡方统计：试验结果：1～10实验组相对于空白对照组11差异显著，1～7以及9、10实验组相对于不加黄芪提取物或环糊精及聚合物的实验组8差异显著，1～6实验组相对于实验组9差异显著。因此，使用本发明的黄芪提取物及卡波姆溶液的免疫佐剂组合物和黄芪提取物、卡波姆溶液、SL-CD溶液的免疫佐剂组合物相对于对照组及仅含黄芪提取物的免疫佐剂组合物效果更佳，其中，含黄芪提取物、卡波姆溶液、SL-CD溶液的免疫佐剂组合物的效果最好。

4、疫苗副作用试验：

使用注射部位病理组织变化观察疫苗副作用，每组取3只小白鼠进行观察，具体步骤：

采样：组织离体后15min内投入10％的中性福尔马林内固定24h以上。

冲洗：将组织块放在脱水提篮内，流水自下而上过夜冲洗。

脱水透明：70％乙醇60min-80％乙醇60min-90％乙醇60min-95％乙醇I 45min-95％乙醇45min-无水乙醇30min-无水乙醇30min二甲苯I 20min-二甲苯II。

浸蜡：浸蜡的总时间2-h。

包埋：包埋时应将组织块的最大面或指定切面向下埋入熔蜡中。

切片：切片的厚度一般为3-5μm。

烤片：载玻片放在58-60℃的烤箱内烘烤1-2h。

HE染色：二甲苯I 15min-二甲苯II 5min-无水乙醇5min-无水乙醇5min-95％酒精5min-80％酒精5min-70％酒精5min-蒸馏水5min-苏木精5min-水洗-盐酸酒精分化10s-自来水兰化30min-伊红3min-70％酒精5min-80％酒精5min-95％酒精5min-无水乙醇5min-无水乙醇5min-二甲苯I 5min-二甲苯II 5min-中性树胶封固。

光学显微镜下观察组织的病理变化：炎症部位观察到炎性渗出物(炎性细胞，水肿液等)。

以皮肤组织细胞内无炎性反应和明显的病理变化记为“-”；

以皮肤组织细胞内有少量的炎性细胞和轻微的病理变化记为“+”；

以皮肤组织细胞内有较多的炎性细胞和明显可见的病理变化记为“++”；

以皮肤组织细胞内有大量的炎性细胞和严重的病理变化记为“+++”。

表5、注射部位病理组织变化观察结果

试验结果：试验结果表明，添加油佐剂组，有明显的副反应，其它组基本没有副反应。

实施例3、含猪支原体肺炎抗原的疫苗佐剂组合物及其疫苗

1.猪支原体肺炎抗原的制备

菌种：选用菌种猪支原体肺炎为MR48株，于2006年9月19日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位简称：CGMCC，保藏编号：CGMCCNo.1816，分类命名：猪肺炎支原体，英文名称为Mycoplasma hyopneumoniae，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院，中国科学院微生物研究所1.一级种子的繁殖：分别取猪肺炎支原体MR48株冻干菌种，用液体培养基稀释，接种于固体培养基平皿上，置37℃培养7-10d，选择生长良好的菌落，纯粹检验合格后，作为一级种子。

液体培养基的配方(按1065ml计)：牛心浸出液300ml，ddH₂O360ml，校正pH值到7.4，121℃灭菌15分钟。再加入下列过滤除菌的成份：Hank’s平衡盐溶液(10×)40ml，0.25％(W/V)酚红10ml马血清200ml，5％(W/V)水解乳蛋白100ml，25％(W/V)酵母浸出液20ml，10000IU/ml青霉素10ml，1％(W/V)醋酸铊溶液25ml

分别取一级种子接种于液体培养基上，37℃培养4-7d，经纯粹检验合格后，作为二级种子。

2 制苗用菌液的制备

分别将猪肺炎支原体MR48株和种子液以1∶10(体积比)接种于液体培养基中。存37℃下培养4-7日，培养物下降0.5个pH值以上，纯粹检验合格后，再以同样的方式扩大培养至200,000ml。

3.菌液的灭活、浓缩和配苗：

3.1.灭活及抗原的含量测定：

用PCR方法分别对培养物进行计数。10倍体积比稀释所检培养物，然后做PCR，PCR检出的最低限量为3×10^-3μg(相当于1000左右个菌体)，按稀释的倍数算出菌体数(沈青春，谭青松，王琴，等.PCR方法测定Mhp培养物菌数[J].中国预防兽医学报，2006，28(1)：55-57)。培养物含量为1×10⁹MHDCE/ml。(MHDCE＝猪肺炎支原体DNA细胞等同物，即1MHDCE相当于1个猪肺炎支原体)。

3.2 浓缩：

将灭活检验合格的猪肺炎支原体培养液和猪鼻支原体培养液分别用密理博(Millipore公司)膜包(分子截留量为300Kda道尔顿)作10倍浓缩。

3.3 配苗：

使用实施例1的黄芪提取物、卡波姆溶液及SL-CD，含本发明疫苗佐剂的猪支原体疫苗组合物的配制方法如下：

A)在10mlPBS液中加入抗原；

B)将黄芪提取物加入A步骤溶液中；

C)将卡波姆溶液加入B步骤溶液中；

D)将SL-CD溶液加入到C步骤中

E)补加PBS液至最终体积50ml

按下面表6的配方配制含本发明疫苗佐剂的猪支原体疫苗组合物，即试验例11-14。

表6、猪支原体疫苗组合物处方组成

4.试验例11-14效果试验：

选21～25日龄断奶仔猪40头，分为4组，每组10头(见下表)；第1、2、3、4组每头猪分别颈部肌肉注射猪肺炎支原体疫苗，每头2ml、第5组作为攻毒对照，不接种；，既不接种，也不攻毒，在单独房间饲养。第1、2、3、4组在接种后四个月用猪肺炎支原体强毒F65株(购自中国兽药监察所)攻毒。攻毒后(DPC)30天，无痛苦处死所有猪。取出肺，由不了解实验组的人员统计肺病变。在接种当天(0DPV)、接种后一个月(1MPV)、接种后四个月(4MPV)或攻毒当天(0DPC)、攻毒后30天(30DPC)，从所有猪收集血液样品，使用竞争性ELISA试剂盒(由DAKOCo制造)检测抗猪肺炎支原体的血清杭体。所述血清样品保存在-20℃直到测试。

表7、猪支原体疫苗组合物处方处理

5.肺病变评分及结果

评分结果见下：

表8、猪支原体疫苗组合物处方的肺病变计分结果

组	猪的数量	平均肺病变评分(％)
			1	10	3.6
2	10	4.2
			3	10	3.7
4	10	7.3
			5	10	15.2

对照组5的平均肺病变是15.2％，疫苗组1(试验例11)接种组的平均肺病变是3.6％，疫苗2组接种组(试验例12)的平均肺病变是4.2％。疫苗3组(试验例13)接种组的平均肺病变是3.7％，疫苗4组(试验例14)接种组的平均肺病变是7.3％.接种组和对照组之间差异显著。这表明：试验例11、12、13所述疫苗能有效刺激抵抗猪肺炎支原体的保护性免疫，且免疫效果相当。

试验结果表明：在抗原量将少一半的实验组，加入本发明的免疫佐剂组合物，依然能够达到原有的免疫效果。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (11)

1.一种用于治疗或预防猪感染性疾病的疫苗佐剂组合物，其特征在于，含有以下组分：黄芪提取物、聚合物和抗原成分。

2.根据权利要求1的疫苗佐剂组合物，其特征在于，所述黄芪提取物含有大于70％wt的黄芪多糖。

3.根据权利要求1的疫苗佐剂组合物，其特征在于，所述黄芪提取物含有大于90％wt的黄芪多糖。

4.根据权利要求1的疫苗佐剂组合物，其特征在于，所述黄芪多糖量为0.1～100mg/ml。

5.根据权利要求1的疫苗佐剂组合物，其特征在于，所述聚丙烯酸为Carbomer 934P。

6.根据权利要求1的疫苗佐剂组合物，其特征在于，所述聚合物的量为0.001mg/ml～50mg/ml。

7.根据权利要求1-6任意一项所述的的疫苗佐剂组合物，其特征在于，所述组合物还含有环糊精衍生物，所述环糊精为SL-CD，含量为0.1～10mg/ml。

8.一种如权利要求1-6任意一项所述的疫苗佐剂组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

A)在缓冲液中制备抗原成分的组合物；

B)将所述的黄芪提取物加入步骤A的组合物中；

C)将所述聚合物加入步骤B的组合物中。

9.一种如权利要求7所述的疫苗佐剂组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

A)在缓冲液中制备抗原成分的组合物；

B)将所述的黄芪提取物加入步骤A的组合物中；

C)将所述聚合物加入步骤B的组合物中；

D)将所述的环糊精衍生物加入步骤C的组合物中。

10.根据权利要求1-7任意一项的疫苗佐剂组合物，其特征在于，所述疫苗佐剂与以下疫苗抗原配合使用：细菌性抗原或病毒性抗原。

11.根据权利要求1-7任意一项的疫苗佐剂组合物，其特征在于，所述疫苗佐剂与以下疫苗抗原配合使用：猪圆环病毒抗原或猪肺炎支原体抗原。