CN103054890A

CN103054890A - 山茱萸裂苷在制备治疗糖尿病肾病药物中的应用

Info

Publication number: CN103054890A
Application number: CN2012105324239A
Authority: CN
Inventors: 曹岗; 蔡宝昌; 杜伟锋; 岳显可
Original assignee: Zhejiang Chinese Medicine University ZCMU
Current assignee: Zhejiang Chinese Medicine University ZCMU
Priority date: 2012-12-12
Filing date: 2012-12-12
Publication date: 2013-04-24

Abstract

本发明涉及山茱萸裂苷在制备治疗糖尿病肾病药物中的应用。本发明提出了山茱萸裂苷在制备治疗糖尿病肾病药物中的新用途，为治疗糖尿病肾病提供了新的药物选择。经实验验证，给药量达0.1g-5.5g/kg的山茱萸裂苷，对糖尿病肾病的治疗具有显著疗效。山茱萸苷对糖尿病状态下肾组织具有满意的抗炎症损伤、改肾功能的效应，是治疗糖尿病肾病的有效药物。

Description

山茱萸裂苷在制备治疗糖尿病肾病药物中的应用

技术领域

本发明涉及山茱萸裂苷在制备治疗糖尿病肾病药物中的应用。

背景技术

糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)，又称糖尿病肾小球硬化症，是糖尿病常见的慢性微血管并发症，通常指由于糖尿病引起的肾小球基底膜增厚，系膜扩张以及胞外基质增生，导致肾小球的高滤过和蛋白尿，其特点以肾小球血管受损、硬化为主，形成结节性病变，进而出现肾功能的异常，最终形成终末期肾衰(ESRD)，终末期肾衰是DN 病人的主要死亡原因之一。据世界卫生组织统计，2011年全球有3.36亿人患有糖尿病，糖尿病已经成为全球第三号杀手，仅次于心脑血管疾病。糖尿病的病程长，若失治、误治，则极易出现血管、肾脏、视网膜及神经系统慢性并发疾病。其中有1/3的患者转化为糖尿病肾病，糖尿病肾病是糖尿病最常见的并发症，也是糖尿病患者的主要死亡原因之一。我国糖尿病的最新流行病学调查报告显示，20岁以上人群糖尿病患病率达9.7%，而糖尿病前期的患病率高达15.5%，估计目前我国约有九千二百万糖尿病患者，一亿四千八百万糖尿病前期患者。可见,中国已成为糖尿病大国，而糖尿病已成为威胁我国公众健康的重大疾病之一。在终末期肾功能衰竭患者中，糖尿病肾病占16％。肾功能的损害，使肾脏不能保留对人体有用的蛋白质，不能排泄废物而引起浮肿(下肢、脸部明显)，容易发展成为尿毒症。鉴于此，DN应得到早期的诊断与治疗。然而早期DN发病较隐匿，临床诊断较困难。

自主开发创新药物是我国目前的一项紧迫任务，从中药中寻找治疗糖尿病肾病的活性成分是一条途径，是我国治疗糖尿病肾病创新药物研制的优势所在，也将极大地提高产品的市场竞争力，填补市场空白，产生良好的社会效益、获得可观的经济效益。

山茱萸为山茱萸科植物山茱萸（Cornus officinalis Sieb.et Zucc.）的干燥成熟果肉，主要产地为豫西、浙江，味酸、涩，微温，归肝、肾经。其功效为补益肝肾，涩精固脱。临床用于内热消渴，眩晕耳鸣，腰膝酸痛，阳痿遗精，遗尿、尿频，崩漏带下，大汗虚脱等。目前已有研究发现，山茱萸对糖尿病肾病具有确切的疗效。环烯醚萜总苷能显著降低糖尿病血管并发症模型大鼠血清可溶性细胞间黏附分子（sICAM-1），肿瘤坏死因子（TNF-α）水平，部分恢复一氧化氮（NO）和内皮素（ET）的动态平衡，保护血管内皮细胞，有利于控制糖尿病血管并发症的发生发展。山茱萸环烯醚萜总苷能抑制糖尿病大鼠肾皮质糖化终产物（AGEs）的形成，使其受体mRNA 表达水平下降，具有减轻糖尿病肾病变的作用。山茱萸环烯醚萜总苷可改善糖尿病大鼠肾组织形态学病变及修复Na⁺, K⁺-ATP 酶活性，对DN 所引起的结构和功能改变都具有一定的防治作用。糖尿病患者由于高糖时葡萄糖的自动氧化增多及非酶糖化反应过程中非酶糖基化终产物的形成需通过氧化反应，会引起大量的自由基蓄积，同时由于醛糖还原酶通路活性增强的含量降低，导致还原型谷胱甘肽过氧化物酶含量降低，机体抗氧化能力降低，引起广泛的自由基损伤。环烯醚萜总苷及氨基胍均能显著增加SOD 的含量。山茱萸环烯醚萜总苷对糖尿病血管并发症引起的氧化应激损伤具有保护作用。由此可见，山茱萸是对糖尿病微血管病变具有确切的疗效，其中环烯醚萜苷类成分是主要的有效部位。尽管目前对环烯醚萜苷类成分治疗糖尿病肾病的作用机理进行了较为深入的研究，但是见局限于某类化学成分治疗糖尿病肾病机制的研究，并没有从整体上研究山茱萸治疗糖尿病肾病作用机制。生物代谢研究表明，山茱萸中环烯醚萜苷类成分经过肾脏作用后的代谢产物是体内产生抗肾损伤的物质基础，而且代谢产物体内外降糖强肾作用均强于环烯醚萜苷，此研究表明肾脏代谢在山茱萸环烯醚萜苷类成分的降糖强肾作用中起到了重要的作用。

山茱萸裂苷，(cornuside) 是从山茱萸科植物山茱萸（Cornus officinalis Sieb.et Zucc.）的干燥成熟果肉中提取的单体,分子结构式见图1。文献研究表明，山茱萸裂苷具有良好的抗炎、抗病毒、肝保护和心脏保护效果，但这种效应对于糖尿病状态下引起的并发症肾损伤的保护作用尚未见相关研究报道。

发明内容

本发明提供一种山茱萸裂苷在制备治疗糖尿病肾病药物中的应用。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种山茱萸裂苷在制备治疗糖尿病肾病药物中的应用。

作为优选，将山茱萸裂苷加工成口服剂型药物中的应用，包括颗粒剂、片剂、胶囊剂和口服液体剂。另一种方案是，将山茱萸裂苷加工成注射剂型药物中的应用。将山茱萸裂苷初产品，加入适量辅料，制成相关剂型，包括口服剂型与注射剂型，口服剂型包括颗粒剂( 冲服剂)、片剂( 素片、包衣片、分散片、速崩片、泡腾片等)、胶囊剂( 硬胶囊、软胶囊)、口服液体剂。该药物可用于治疗糖尿病肾病。作为优选，山茱萸裂苷的有效治疗量为0.1g-5.5g/kg。经实验验证，给药量达0.1g-5.5g/kg的山茱萸裂苷，对糖尿病肾病的治疗具有显著疗效。

一种治疗糖尿病肾病的含山茱萸裂苷的胶囊或片剂，制备方法如下：制剂处方：山茱萸裂苷 120g、微晶纤维 120g、淀粉 30g、乳糖 28g、糊精 3g；根据处方按照配比将各组分混合均匀，之后加入体积分数80％的乙醇溶液制粒，整粒；制成胶囊或者压制成片剂。

一种治疗糖尿病肾病的含山茱萸裂苷的颗粒剂，制备方法如下：颗粒剂处方：山茱萸裂苷 120g、乳糖 1015g；将山茱萸裂苷与乳糖混合均匀，用体积分数70％的乙醇溶液制软材，制粒、干燥、整粒、分装即得。

一种治疗糖尿病肾病的含山茱萸裂苷的注射液，制备方法如下：取20g山茱萸裂苷加适量注射用水，加热溶解，调pH 值至7.0，加入活性炭0.2g，加热至80-85℃保温，过滤后，加注射用水至2000ml，0.2μm 微孔滤膜过滤，灌封，即得。

本发明提出了山茱萸裂苷在制备治疗糖尿病肾病药物中的新用途，为治疗糖尿病肾病提供了新的药物选择。

附图说明

图1是山茱萸裂苷的分子结构式。

图2是未知化合物1的液相色谱图。

图3是未知化合物1的LC-MS负离子模式图。

图4是未知化合物1的LC-MS正离子模式图。

图5是未知化合物鉴定的紫外光谱图。

图6是山茱萸裂苷对STZ 诱导的糖尿病肾损伤大鼠体重的影响数据图，其中：与正常组相比^*P＜0.05 ；与模型组相比^#P＜0.05。

图7是山茱萸裂苷对STZ 诱导的糖尿病肾损伤大鼠肾重的影响数据图，其中：与正常组相比^**P＜0.01；与模型组相比^##P＜0.01。

图8是 western blot 蛋白印迹表达图。

图 9是山茱萸裂苷对糖尿病肾病大鼠肾组织相关蛋白表达效果图。

具体实施方式

下面通过具体实施例，对本发明的技术方案作进一步的具体说明。应当理解，本发明的实施并不局限于下面的实施例，对本发明所做的任何形式上的变通和/或改变都将落入本发明保护范围。

在本发明中，若非特指，所有的份、百分比均为重量单位，所有的设备和原料等均可从市场购得或是本行业常用的。

实施例1 山茱萸裂苷的制备

1. 实验材料

仪器：山茱萸生品，Agilent LC /MSD TOF（USA）； Agilent 1100二元泵（USA）； Agilent 1100标准自动进样器（USA）；Milli-Q 超纯水机 (Millipore, Bedford, MA, USA)

试剂：甲酸（分析纯，上海凌峰化学试剂有限公司）；乙腈（色谱纯，Fisher Science）；水为超纯水。

甲醇提取样品的制备

称取山茱萸生、制品粉末各1 g，精密称定，分别置25 mL容量瓶中，加80%甲醇定容到刻度，密塞，称重，超声提取45 min，再次称重，用甲醇补充丢失的重量。

2. 实验方法的确立

液相色谱条件：色谱柱为Agilent Zorbax C₁₈（250mm × 4. 6 mm, 5.0 μm）柱，柱温30 ℃。流动相A为0.1%的甲酸溶液；B为乙腈，梯度洗脱，洗脱程序如下：梯度洗脱：0～10 min，2% B；10～15 min，2%～5% B；15～20 min，5%～10% B；20～30 min，10%～15% B；30～40 min，15%～20% B；40～50 min，20%～25% B；50～60 min，25%～50% B。进样量为10 μL，流速为1 mL/min，柱后分流，分流比约为1:1。DAD检测器记录190～400 nm的光谱数据，结果见图2，图中色谱峰1是我们需要制备的化合物。

质谱条件：LC-MS系统使用ESI离子源，在正离子模式与负离子模式下分别采集数据。数据采集范围：m/z550～1100。离子源参数：干燥气（N₂），流速：8 mL/min；雾化压力：35 psi；干燥气温度：320 ℃。LC-MS分析结果见图3和图4。

3. 电离方式的确定　

在电喷雾过程中，由于样品中各组分带上正电和负电的难易程度不同，有必要进行正离子和负离子电离方法的比较，以选择一种适合这两个成分的电离方法。实验过程中发现在ESI正负两种离子化方式下都能带上电荷，本实验采用两种电离方法来检测这未知成分（见图3和图4）。

负离子模式的结果：

化合物1的m/z= +541.1466, 可能分子式见表1。

表1 未知化合物1的可能分子式和分子量

	Formula	Calculated m/z (amu)	mDa Error	PPM Error	DBE
						1	(- H)C₂₉H₂₆O₉Na	540.1402	-0.8524	-1.5753	16.5
2	(- H)C₃₈H₂₁O₄	540.1367	2.6156	4.8334	28.5
						3	(- H)C₃₁H₂₅O₉	540.1426	-3.2577	-6.0201	19.5
4	(- H)C₃₆H₂₂O₄Na	540.1343	5.0228	9.2781	25.5
						5	(- H)C₂₀H₂₉O₁₇	540.1332	6.1249	11.3184	6.5
6	(- H)C₂₂H₃₀O₁₄Na	540.1460	-6.7258	-12.4289	7.5
						7	(- H)C₁₈H₃₀O₁₇Na	540.1308	8.5302	15.7632	3.5
8	(- H)C₂₄H₂₉O₁₄	540.1484	-9.1311	-16.8736	10.5
						9	(- H)C₄₀H₂₂ONa	540.1495	-10.2352	-18.9139	29.5

正离子模式的结果：

化合物1的m/z= +560.1960, 可能分子式见表2。

表2 化合物1的可能分子式和分子量

	Formula	Calculated m/z(amu)	mDa Error	PPM Error	DBE
						1	(+ H)C₂₂H₃₅NO₁₄Na	561.2027	0.4749	0.8477	5.5
2	(+ H)C₂₃H₃₁N₅O₁₀Na	561.2041	-0.8623	-1.5394	10.5
						3	(+ H)C₃₅H₂₇N₃O₃Na	561.2022	0.9882	1.7641	23.5
4	(+ H)C₃₇H₂₆N₃O₃	561.2046	-1.4169	-2.5294	26.5
						5	(+ H)C₂₄H₃₄NO₁₄	561.2051	-1.9303	-3.4458	8.5
6	(+ H)C₁₉H₃₄N₃O₁₆	561.2011	2.6057	4.6514	22.5
						7	(+ H)C₃₂H₂₆N₅O₅	561.2006	-4.5564	-8.7568	4.5
8	(+ H)C₄₀H₂₇NO	561.2062	-3.0344	-5.4167	27.5
						9	(+ H)C₂₅H₃₀N₅O₁₀	561.2065	-3.2676	-5.8330	13.5
10	(+ H)C₃₁H₃₀N₃O₉	561.1993	3.9430	7.0386	17.5
						11	(+ H)C₁₇H₃₅N₃O₁₆Na	561.1987	4.4976	8.0286	1.5
12	(+ H)C₂₈H₃₁N₃O₈Na	561.2081	-4.8850	-8.7203	14.5
						13	(+ H)C₃₀H₂₇N₅O₅Na	561.1982	5.0109	8.9450	19.5
14	(+ H)C₄₂H₂₆NO	561.2086	-5.4396	-9.7103	30.5
						15	(+ H)C₁₄H₃₄N₅O₁₈	561.1971	6.1150	10.9159	0.5
16	(+ H)C₂₉H₃₁NO₉Na	561.1969	6.3482	11.3322	14.5
						17	(+ H)C₁₆H₃₅N₅O₁₅Na	561.2099	-6.7357	-12.0328	1.5
18	(+ H)C₃₀H₃₀N₃O₈	561.2105	-7.2903	-13.0139	17.5
						19	(+ H)C₂₆H₃₀N₃O₁₁	561.1952	7.9657	14.2195	13.5
20	(+ H)C₃₉H₁₂N₅	561.1947	8.4790	15.1359	31.5
						21	(+ H)C₃₃H₃₁NO₆Na	561.2121	-8.9077	-15.9011	18.5
22	(+ H)C₁₈H₃₄N₅O₁₅	561.2123	-9.1409	-16.3175	4.5
						23	(+ H)C₃₈H₂₆NO₄	561.1934	9.8163	17.5231	26.5
24	(+ H)C₃₄H₂₇N₅O₂Na	561.2134	-10.2450	-18.2884	23.5
						25	(+ H)C₂₄H₃₁N₃O₁₁Na	561.1928	10.3709	18.5131	10.5
26	(+ H)C₂₁H₃₅N₃O₁₃Na	561.2140	-10.7584	-19.2047	5.5
						27	(+ H)C₃₇H₂₃N₅Na	561.1923	10.8843	19.4295	28.5

4 、分离并鉴定未知化合物1

通过液质联用给出的可能分子量和分子式，另外参照文献，这未知化合物1还不能确定。因此利用制备液相分离出这两个成分，然后加以纯化，利用核磁共振来确定成分。

考虑到时间和试剂的损耗，需重新确定分离条件。最终确定的条件是：色谱柱为Hanbon Lichropher C₁₈柱（250 mm × 10 mm，5.0 μm），柱温30℃。流动相A为0. 1%的磷酸水溶液；B为乙腈，梯度洗脱，洗脱程序如下：梯度洗脱：0 min，20% B； 0～10 min，20%～25%B；进样量为500 μL，流速为5 mL/min，检测波长：240 nm。两个化合物的紫外光谱图见图5。

将收集的流份合并，浓缩，再用HPLC检测其纯度，若不纯，再继续分离制备，直到用HPLC检测其纯度达到98%以上，挥干溶剂，通过核磁共振对未知化合物1进行结构鉴定。具体信息如下：

无定型淡黄色粉末（乙腈﹕水）。

(1) ¹HNMR (DMSO-D₆) δppm：7.49 (1H, s, H-3), 5.76 (ddd, J = 8.5, 10.5, 17.5Hz, H-8), 5.52 (d, J =6.5Hz, H-l), 5.37 (br d, J= 17.5 Hz, H-10), 5.28 (br d, J=10.5 Hz, H-10), 4.15 (2H, t, H-7), 1.95 (q, J=6.5 Hz, H-5), 2.84 (dt, J=8.5, 6.5 Hz, H-9), 2.09 (dq, J=14, 7Hz, H-6) and 1.83 (dq, J=14, 6.5 Hz, H-6)], 3.57(3H, s), 5.24 (d, J=8 Hz, H-1’), 3.75 (dd, J=2, 12Hz, H-6), 3.57 (dd, J=6, 12Hz, H-6’), 3.17 (t, J=9 Hz, H-3^’)。

(2) ¹³CNMR (DMSO-D₆) δppm：166.74 (C₁₁)，165.87 (C_7”)，152.15 (C₃)，145.62 (C_3”, C_5”)，138.62 (C_4”)，134.59 (C₈)，119.55 (C_1”)，119.09 (C₁₀)，109.69 (C₄)，108.68（C_2”, C_6”），98.82 (C_1’)，77.37(C_5’)，76.78 (C_3’)，73.12 (C_2’)，70.16 (C_4’)，61.24 (C_6’)，51.07 (C₁₂)，43.26 (C₉)，30.05 (C₅)，29.06 (C₆)，62.63 (C₇)。

(3) MSm/e (%): 541.1466 (M⁺)。

以上数据与山茱萸裂苷 (cornuside) 结构一致，结构式同图1。

实施例2 药效

1、实验动物及模型

采用单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素(STZ) 致糖尿病肾病大鼠动物模型。选取成年雄性SD大鼠20只，体重约260g，随机分为正常组、模型组和给药组，每组10只。

采用单次腹腔注射链脲霉素（STZ，streptozotocin）8周，建立实验性糖尿病肾病大鼠，在前4周形成糖尿病（血糖浓度不低于16.7 mmol/L，最终达到25 mmol/L）；后四周形成糖尿病肾病模型。

2、给药方式

糖尿病模型复制成功后次日，山茱萸裂苷组大鼠灌胃超纯水溶液制成的山茱萸裂苷0.2g/kg。模型组和正常对照组给予等体积的超纯水。观察8周后，考察大鼠体重变化，收集标本，实验结束前一天用代谢笼准确收集24h尿液，进行24h 尿蛋白检测；大鼠空腹8小时后，摘眼球取血2ml，离心后留取血清，作生化肾功能检查；大鼠用脱臼法处死后取出肾脏，迅速用预冷生理盐水冲洗，除去被膜，游离肾脏，用滤纸吸干血迹后称双肾重并记录，观察肾脏大小、色泽、质地，使用刀片将左肾沿正中矢状面纵向剖开，将左肾一半放于包埋盒中做好标记再一起放入于4％甲醛液中固定后进行PAS 染色处理以及免疫组化检测；左肾另一半及右肾分离肾皮质，将所得的全部肾皮质迅速装入冻存管放入液氮中速冻，后转移到-80℃保存，供western blot 检测。

3、westernblot 检测各组大鼠肾组织Bcl-2、FN、NF-kB 的蛋白表达

细胞凋亡参与糖尿病多种并发症的发生。Bcl-2是 Bcl -2 家族中最有代表性的抑制凋亡基因，核因子-kappa B(NF-kB)是一种广泛存在于各种细胞的核转录因子，它参与细胞内的信号传递,调控多种基因的表达，其激活可导致多种炎症介质的释放。FN 为反映肾脏纤维化变化的效应指标。每组取肾组织皮质20mg，加300ul 的蛋白裂解液并加入蛋白酶抑制(PI)，冰上进行匀浆，裂解后静止在冰浴上30 分钟，用移液器将裂解液移至1.5ml 离心管中，收集细胞裂解液至1.5ml EP 管中，BCA 蛋白定量法测定各组蛋白质含量，转膜、封闭。抗兔Bcl-2 一抗(1 ∶ 1000)，NF-kB及FN 一抗为抗鼠FN(1 ∶ 1000)，用5％脱脂奶进行稀释，二抗为辣根过氧化物酶标记的抗鼠二抗轻轻混匀，将膜平放至一个小盒子内，把稀释好的抗体溶液加到盒中并盖好盖子，放置4℃层析柜的摇床上孵育过夜。次日TBS-T 洗膜洗三次，每次5 分钟，辣根过氧化物酶标记的抗兔二抗( 稀释度1 ：2000) 室温孵育1h，TBS-T 洗膜后加入化学发光试剂，GE ImageQuant LAS4000mini 曝光。美国UVP 公司GDS8000 系统摄取图象，LABWORK4.0 凝胶蛋白分析软件对条带进行灰度分析。

4、结果

4.1 各组大鼠体重、肾重的变化

如图6和图7所示，糖尿病肾病组的体重较正常组明显的下降，山茱萸裂苷治疗组大鼠较模型组显著性上升，正常组与山茱萸裂苷组之间没有显著性差异。而对于肾重，模型组较正常组显著性升高，山茱萸裂苷治疗后，和模型组比较，肾重显著性下降。

4.2、各组大鼠肾功能的变化

从表3看出，实验8周后，糖尿病模型组较正常对照组血糖、血尿素氮、血肌酐、蛋白尿均明显升高，提示糖尿病大鼠肾功能损伤的形成。山茱萸裂苷组与模型组相比能一定程度的降低血糖，明显降低血尿素氮、血肌酐、24h 尿蛋白。上述结果表明山茱萸裂苷能有效改善糖尿病肾病大鼠的肾功能。

表3 山茱萸裂苷对STZ 诱导的糖尿病肾损伤大鼠肾功能的影响

	正常组	模型组	山茱萸裂苷组
				血糖(mmol/L)	5.14+0.42	40.78+4.77^**	13.97+2.16^##
血尿素氮(mmol/L)	5.32+0.73	19.24+2.81^**	6.15+0.93^##
				血肌酐(μmol/L)	22.33+1.52	50.79+6.11^*	27.61+2.90^#
蛋白尿24h(g/L)	10.92+0.91	118.63+10.24^**	47.18+3.69^##

与正常组相比^**P ＜ 0.01, ^*P ＜ 0.05 ；与模型组相比^##P ＜ 0.01, ^#P ＜ 0.05.

4.3、各组大鼠肾组织Bcl-2、FN、NF-kB 的蛋白表达

Western blotting实验结果(图9)表明，糖尿病肾病模型组Bcl-2的表达被明显抑制。与模型组比较，山茱萸裂苷组可以明显提高Bcl-2蛋白表达（P< 0.01）；且随着山茱萸裂苷浓度增大，表达效果增强。以上结果表明糖尿病肾病氧化损伤抑制了Bcl-2蛋白表达，其原因可能是与其在糖尿病肾病氧化损伤过程中促使Bcl-2蛋白降解有关。糖尿病肾病模型组FN的表达上调；与模型组比较，山茱萸裂苷（0.2g/kg）组可以抑制FN蛋白表达上调（P< 0.05）；山茱萸裂苷（0.4 g/kg）组和山茱萸裂苷（0.8 g/kg）组可以显著抑制FN蛋白表达上调（P< 0.01），且高剂量组抑制效果比正常组好。以上结果表明糖尿病肾病诱导氧化损伤上调了Caspase-3蛋白表达，其原因可能是与其在H₂O₂诱导的氧化损伤过程中抑制Caspase-3蛋白降解有关。糖尿病肾病模型组NF-kB的表达上调，山茱萸裂苷组可以明显抑制NF-kB表达上调（P< 0.01），随着山茱萸裂苷浓度增大，抑制NF-kB表达效果增强。

与模型组比较，山茱萸裂苷组可以提高糖尿病肾病诱导的Bcl-2蛋白表达下调，抑制FN，NF-kB蛋白表达的上调。**P< 0.01，*P< 0.05。

5、结论

从上述实验结果证明，山茱萸苷对糖尿病状态下肾组织具有满意的抗炎症损伤、改肾功能的效应，是治疗糖尿病肾病的有效药物。

实施例3 含山茱萸裂苷的胶囊或片剂

制剂处方：山茱萸裂苷 120g、微晶纤维 120g、淀粉 30g、乳糖 28g、糊精 3g。

制法：根据处方按照配比将各组分混合均匀，之后加入体积分数80％的乙醇溶液制粒，整粒；取一半装胶囊，制成800 粒；另一半压制成片，制成800 片剂。

实施例4 含山茱萸裂苷的颗粒剂

颗粒剂处方：山茱萸裂苷 120g、乳糖 1015g。

制法：将山茱萸裂苷与乳糖混合均匀，用体积分数70％的乙醇溶液制软材，制粒、干燥、整粒、分装即得。

实施例5 含山茱萸裂苷的注射液

注射液处方：山茱萸裂苷 20g，注射用水加至 2000ml。

制法：山茱萸裂苷，加适量注射用水，加热溶解，调pH 值至7.0，加活性炭0.2g，加热至80℃保温，4 号垂熔玻璃滤器预滤，加注射用水至2000ml，0.2μm 微孔滤膜过滤，灌封，即得。

实施例3-5提供了几种治疗糖尿病肾病的含山茱萸裂苷的药物。以上所述的实施例只是本发明的一种较佳的方案，并非对本发明作任何形式上的限制，在不超出权利要求所记载的技术方案的前提下还有其它的变体及改型。

Claims

1.一种山茱萸裂苷在制备治疗糖尿病肾病药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：将山茱萸裂苷加工成口服剂型药物中的应用，包括颗粒剂、片剂、胶囊剂和口服液体剂。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：将山茱萸裂苷加工成注射剂型药物中的应用。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：山茱萸裂苷的有效治疗量为0.1g-5.5g/kg。

5.一种治疗糖尿病肾病的含山茱萸裂苷的胶囊或片剂，其特征在于：制剂处方：山茱萸裂苷 120g、微晶纤维 120g、淀粉 30g、乳糖 28g、糊精 3g；根据处方按照配比将各组分混合均匀，之后加入体积分数80％的乙醇溶液制粒，整粒；制成胶囊或者压制成片剂。

6.一种治疗糖尿病肾病的含山茱萸裂苷的颗粒剂，其特征在于：颗粒剂处方：山茱萸裂苷 120g、乳糖 1015g；将山茱萸裂苷与乳糖混合均匀，用体积分数70％的乙醇溶液制软材，制粒、干燥、整粒、分装即得。

7.一种治疗糖尿病肾病的含山茱萸裂苷的注射液，其特征在于：取20g山茱萸裂苷加适量注射用水，加热溶解，调pH 值至7.0，加入活性炭0.2g，加热至80-85℃保温，过滤后，加注射用水至2000ml，0.2μm 微孔滤膜过滤，灌封，即得。