CN103054843B

CN103054843B - 细格菌素类化合物及其药学上可接受的盐在制备治疗fxr介导疾病药物中的应用

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Publication number: CN103054843B
Application number: CN201210482982.3A
Authority: CN
Inventors: 郑智慧; 段宝玲; 路新华; 林洁; 石英; 郑海洲; 可爱兵; 李业英; 朱京童; 崔晓兰; 任晓; 栗若兰; 徐岩; 张雪莲; 范玉玲; 丁彦博; 蔡超静; 穆云龙; 霍培元; 赵峰
Original assignee: NCPC New Drug Research and Development Co Ltd
Current assignee: NCPC New Drug Research and Development Co Ltd
Priority date: 2012-11-23
Filing date: 2012-11-23
Publication date: 2015-04-22
Anticipated expiration: 2032-11-23
Also published as: CN103054843A

Abstract

本发明涉及化合物的医药用途，具体地说是细格菌素类化合物及其药学上可接受的盐的医药用途。其结构如式（1）所示。本发明提供了该化合物及其药学上可接受的盐在制备预防或治疗FXR介导的相关疾病药物中的应用。尤其是在制备治疗肥胖、糖尿病、代谢综合征、胆汁郁积性肝病、器官纤维变性、非酒精性肝硬化、胆固醇性胆结石、炎症等疾病的药物中的应用。它为临床用药提供了更多的选择。

Description

细格菌素类化合物及其药学上可接受的盐在制备治疗FXR介导疾病药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种细格菌素类化合物及其药学上可接受的盐的医药用途。

背景技术

类法尼醇X受体（Farnesoid X receptor,FXR，NR1H4）属于核受体超家族NR1的一员，由NR1H4基因编码。胆固醇代谢的最终产物胆汁酸是FXR的天然配体。胆汁酸在肝内合成，以胆汁的形式进入肠内并在肠内促进食物脂肪和脂溶性维生素的吸收。大部分胆汁酸回到肝内完成肝肠循环。胆汁酸具有多种生理功能，不仅在脂肪和脂溶性维生素的吸收、转运和分配中发挥重要的作用，生理条件下的胆汁酸可以作为配体激活FXR，可通过调节FXR的功能，从而调节胆汁酸和胆固醇的代谢。[Rizzo G.,et al.,Curr Drug Targets Immune Endocr.Metabol.Disord.5(3):289-303,2005]。

FXR在十二指肠、空肠、回肠、结肠和肝脏中均有表达。FXR的主要靶基因包括调节胆固醇向胆汁酸转化的限速酶胆固醇7α羟化酶(cholesteral7α-hydroxylase,CYP7A1)，以及在肝细胞内控制胆汁酸浓度的转运蛋白NTCP(sodium taurocholate contransport peptide)和胆汁酸微管运输相关蛋白BSEP(bile salt export Pump)、磷脂转移蛋白(phospholipidt ransfer protein,PLTP)、载脂蛋白C2Ⅱ(apoCⅡ)和小异源二聚体伴侣受体(small heterodimer partner,SHP)等。此外，FXR还激活与肝内胆汁酸循环相关的回肠胆汁酸结合蛋白IBABP(ileum bile acid binding protein)，FXR通过和这些基因启动子上的FXR反应元件结合，从而调控这些基因的表达。所以，受FXR调节剂影响的优先疾病（或症状）是预防和治疗高LDL胆固醇水平，高甘油三酯水平、异常脂肪血症、代谢综合症等。[Rizzo G.,et al.,Curr Drug Targets Immune Endocr.Metabol.Disord.5(3):289-303,2005;Yu J,et al.J Biol Chem,277:31441-31447,2002;Jean-Franc oisLandrier,et al.FEBS Letters 553:299-303,2003]。

肝脏的重要功能之一是胆汁分泌，当胆酸代谢，转运和排泄障碍时引起胆汁淤积.而胆汁淤积会导致肝损伤，如胆汁性肝硬化和硬化性胆管炎。FXR通过作用于在胆汁酸代谢、胆固醇逆转运中起重要作用的靶基因，从而调节胆汁酸的合成和转运并防止肝细胞内胆汁酸过度堆积。[Makishima M.,et al.,Science284:1362-1365,1999]。研究报道FXR激动剂在胆汁淤积型肝病的啮齿动物模型中起到了保护肝脏的作用。[liu Y.,et al.,J.Clin.Invest.112:1679-1687,2003;Fiorucci S.et al.,J.Pharmacol.Exp.Ther.313:604-612,2005;Pellicciari R.,et al.,J.Med.Chem.45:3569-3572,2002]

另外，研究表明，在饲喂鼠促结石形成的饮食时，FXR激动剂GW4064可以预防胆汁中胆固醇晶体的形成。而FXR敲除小鼠中，该激动剂失去了这种效应[Moschetta A.,et al.,Nat.Med.10:1352-1358,2004]。

肝星形细胞在器官，包括肝脏的纤维变性过程期间胞外基质沉积中起作用。FXR在肝星型细胞也有表达，其激动剂6-乙基鹅去氧胆酸处理肝星型细胞能导致纤维变性标记如a-平滑肌肌动蛋白和a1胶原蛋白表达的降低，从而具有预防肝纤维变性的发展，并促进溶解的作用。[Fiorucci S.,et al.,Gastroenterology127:1497-1512，2006;Fiorucci S.,et al.,J.Pharmacol.Exp.Ther.314:584-595,2005]。

研究还表明FXR激动剂能够在啮齿动物糖尿病和胰岛素抵抗模型中改善脂和葡萄糖内环境稳定和胰岛素敏感性。Chen和他的同事的研究结果证明，在给小鼠高脂肪饮食时，FXR激动剂GW4064降低体重和身体脂肪量、降低血清中葡萄糖、胰岛素、甘油三脂和总胆固醇的水平[diabetes 55,A200,2006]。GW4064降低糖尿病小鼠的血清胰岛素浓度，改善了糖耐受量，并提高了胰岛素敏感性[Gariou B.,et al.,J.Boil.Chem.281:11039-11049,2006].其他的研究也报道了GW4064显著地改善糖尿病鼠的高血糖和高血脂症[Zheng Y.,et al.,Proc.Nat.Acad.Sci.,U.S.A.103:1006-1011,2006].

另外，研究已证明FXR激动剂可以通过抑制如肿瘤坏死因子TNFa等多种炎症因子的产生，从而抑制炎症的发生和发展。[Gadaleta R.M.,et al.,Gut.60(4):463-72,2011]。Xu等人的研究证明FXR激动剂可以通过诱导细胞因子信号通路抑制因子SOCS3基因的表达，抑制肝炎的发生和发展[Xu Z.Z.,et al.,CellularSignalling 24:1658-1664,2012]。

细格菌素(Altenusin)是一种微生物次生代谢产物[Nakanishi S,BiosciBiotechnol Biochem.59(7):1333-1335,1995;Uchida R,et al.,J Antibiot,52:572-574,1999]，该化合物已先后被报道具有抑制锥虫硫酮还原酶trypanothionereductase[Betania Barros Cota,et al.,FEMS Microbiol Lett,285:177-182,2008]、抑制肌球蛋白轻链激酶MLCK[Nakanishi S,et al.,Biosci.Biotech.Biochem.59(7):1333-1335,1995]、抑制鞘磷脂酶抑制活性[Uchida R,et al.,JAntibiot,52:572-574,1999]、抗菌[Julia Kjer,et al.,J Nat Prod,72:2053–2057,2009;Xu XL,Chemistry of Natural Compounds,47(6):893-895,2012]、抑制HIV整合酶[Singh SB,J Ind Microbiol Biotechnol.30(12):721-31,2003]、自由基清除[WangQX et al.,Fitoterapia,83:209–214,2012]以及细胞毒活性[Amal H.Aly，et al.,J.Nat.Prod.71:972–980,2008]等生理活性，所以在抗寄生虫如锥虫和利什曼原虫、抗菌、抗HIV、作为血管扩张剂、抗癌等方面具有一定的应用潜能。细该化合物的制备方法和作为活性氧除去剂已申请了日本专利[JP1304890A]和[JP2003494A]。

发明内容

本发明的目的就是要提供一种细格菌素类化合物及其药学上可接受的盐的新的医药用途。

本发明人经研究发现，结构如式（1），其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅰ、ⅱ、ⅲ或ⅳ所示

式（1）的细格菌素类化合物，具有良好的FXR激动效应，因此，其可作为FXR激动剂用于治疗预防或治疗FXR介导的相关疾病，特别是肥胖、糖尿病、代谢综合征、胆汁郁积性肝病、器官纤维变性、非酒精性肝硬化、胆固醇性胆结石、炎症等疾病。

为此，本发明完成了结构如式（1），其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅰ、ⅱ、ⅲ或ⅳ所示

式（1）的细格菌素类化合物在制备预防或治疗FXR介导疾病药物制剂中的应用。

以及

所述细格菌素类化合物在制备治疗肥胖药物中的应用；

所述细格菌素类化合物在制备治疗糖尿病药物中的应用。

所述细格菌素类化合物在制备治疗代谢综合征药物中的应用。

所述细格菌素类化合物在制备治疗胆汁郁积性肝病药物中的应用。

所述细格菌素类化合物在制备治疗器官纤维变性药物中的应用。

所述细格菌素类化合物在制备治疗非酒精性肝硬化药物中的应用。

所述细格菌素类化合物在制备治疗胆固醇性胆结石药物中的应用。

所述细格菌素类化合物在制备抗炎药物中的应用。

同时提供了一种药物组合物，即以结构如式（1），其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅰ、ⅱ、ⅲ或ⅳ所示

中的一种细格菌素类化合物及其药学上可接受的盐为活性成分，与药学上可接受的载体、辅料或赋形剂组成的药物组合物。

本发明中结构如式（1），其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅰ所示，简称为化合物ⅰ；结构如式（1），其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅱ所示，简称为化合物ⅱ；结构如式（1），其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅲ所示，简称为化合物ⅲ；结构如式（1），其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅳ所示，简称为化合物ⅳ。

化合物ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ的可按照现有技术所公开的制备方法进行制备。

本发明所述化合物可作为活性成分与直接与药学上可接受的载体、辅料或赋形剂按照常规制剂工艺制备成各种形式的药物制剂，也可生理学上可接受的酸如苯磺酸、硫酸等形成复合盐，再与一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂混合制备成各种形式的药物制剂。

本发明的所述化合物及其药学上可接受的盐或药物组合物还可以选择性地与已知的抗高血糖剂、抗高血脂剂、胰岛素抵抗改善剂、糖尿病治疗药、糖尿病并发症、抗动脉粥样硬化剂、抗炎症剂、代谢综合症以及LXR介导的其他疾病的预防和治疗药物联合给药。当它与已知药物联合给药时，可以同时、分别或顺序给药。

本发明中所述的“药学上可接受的载体或辅料”是指可以与本发明化合物一起施用给患者的任何载体或辅料，它们不破坏本发明化合物的药理活性。

应用本发明药物组合物中的可药用载体、辅料和载体包括但不限于离子交换剂，矾土，硬脂酸铝，卵磷脂，半乳化药物递送系统(SEDDS)例如dα一生育酚聚乙二醇1000琥珀酸盐，在药物剂型中使用的表面活性剂例如吐温或其它类似聚合递送基质，血清蛋白例如人血清白蛋白，缓冲物质例如磷酸盐，甘氨酸，山梨酸，山梨酸钟，饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，盐或电解质例如硫酸钾、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐，胶态二氧化硅，三硅酸镁，聚乙烯吡咯烷酮，基于纤维素的物质，聚乙二醇，羧甲基纤维素钠，聚丙烯酸酯，蜡，聚乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物，聚乙二醇和羊毛脂。也可以使用环糊精例如α-环糊精、β-环糊精、和γ-环糊精，或化学修饰的衍生物例如是羟基烷基环糊精，包括2-和3-羟基丙基-β-环糊精、或其它增溶衍生物来促进本发明化合物的递送。

本发明所述药物组合物可口服给药、非胃肠道给药、通过吸入喷雾给药、局部给药、直肠给药、鼻给药、颊给药、阴道给药或通过植入的贮药装置给药。优选口服给药或注射给药。本发明药物组合物可含有任何常用的无毒可药用载体、辅料或赋形剂。在某些情况下，药用酸、碱或缓冲剂可用来调节制剂的pH以提高所配制的化合物或其给药剂型的稳定性。本文所用术语非胃肠道包括皮下、皮内、静脉内、肌内、关节内、动脉内、滑膜内、胸骨内、鞠内、损伤部位内、和颅内注射或输注技术。

本发明药物组合物可呈无菌注射剂形式，例如无菌可注射水或油悬浮液。该悬浮液可依据本领域已知技术使用合适的分散剂或润湿剂(例如吐温80)和悬浮剂来配制。无菌注射剂还可以是在无毒可非胃肠道给药用稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。可使用的可接受的赋形剂和溶剂是甘露醇、水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。此外，无菌不挥发油通常用作溶剂或悬浮介质。如可使用温和的不挥发油，包括合成的甘油-酯或甘油二酯。脂肪酸例如油酸及其甘油酯衍生物可用于制备注射剂，也可以使用天然可药用油例如橄榄油或蓖麻油，尤其是其聚氧乙基化变型。这些油溶液或悬浮液也可以含有长链醇稀释剂或分散剂例如在Pharmacopeia Helvetica,Ph.Helv.，中描述的那些，或类似的醇，或羧甲基纤维素，或通常用于配制可药用剂型例如乳剂或悬浮剂的类似分散剂。其它常用表面活性剂例如吐温或司盘和/或其它常用于制备可药用固体、液体或其它剂型的类似乳化剂或生物利用度促进剂也可用于配制的目的。

本发明药物组合物可以以任何口服剂型的形式口服给药，包括但不限于胶囊、片剂、乳剂和水悬浮液、分散剂和溶液。对于口服片剂，常用载体包括乳糖和玉米淀粉。一般还加入润滑剂例如硬脂酸镁。为了以胶囊形式口服给药，适用的稀释剂包括乳糖和无水玉米淀粉。当口服施用水悬浮液和/或乳液时，可将活性组分悬浮或溶解在油相中，并与乳化剂和/或悬浮剂合并。如果需要的话，可加入一些甜味剂和/或矫味剂和/或着色剂。适当时，可将用于口服给药的剂量单位制剂包微囊。例如，通过在聚合物、蜡等中将颗粒物质包衣或包埋，也可制备所述制剂已延长或维持释放。

本发明所述化合物及其药学上可接受的盐及药物组合物也可以脂质体输送系统形式给药，如小单层囊泡、大单层囊泡和多层囊泡。脂质体可有多种磷脂形成，如胆甾醇、硬脂基胺或磷脂酰胆碱。

本发明药物组合物可以局部给药的药物组合物，可以配制成软膏、乳膏剂、混悬剂、洗剂、散剂、溶液剂、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂或油剂。

本发明所述化合物及药物组合物，可单一和/或联合用以预防和治疗FXR介导的疾病。其治疗量取决于多种因素，如预期用途、给药方式、接受者、所治疗病症或疾病的类型和严重性，并最终根据意思或兽医的判断。通常，治疗人FXR介导的疾病或病症所用剂量在0.01-400mg/kg体重/天的水平，优选约0.5–150mg/kg体重/天剂量。次剂量可作为单一单位剂量给予或作为数个单独单位剂量给予，或作为连续输注给予。

本发明所述化合物及其药学上可接受的盐或药物组合物一般每天给药约1-5次，或者连续输注。这样的给药可用作长期或急性治疗。可与载体合并以制得单个剂型的活性组分的量取决于治疗对象和特定给药方式。一般的制剂含有约5%-95%活性化合物(w/w)，优选含有约20%-约80%活性化合物制剂。

当本发明组合物包含本发明所述化合物及其药学上可接受的盐和一种或多种其他的治疗剂或预防剂时，本发明所述化合物剂量应为约10-95%，优选约10%-80%的给药的剂量。其他的活性剂可以作为多剂量方案的一部分与本发明化合物分开给药，或者，是与本发明化合物在单一组合物中混合在一起的单一剂型的一部分。

本发明药物制剂的给药剂量优选对患者是无毒的恰当剂量，但也不排除在某些情况下依据疾病的严重程度被迫给予可能导致毒性迹象的较大剂量。

为了改善患者的状况，如果需要的话，可施用维持剂量的本发明所述化合物或药物组合物。然后可根据症状，将给药剂量或频率或二者降低至保持改善状况的水平，当症状已减轻至所需水平时，停止治疗。然而，由于疾病症状的复发，患者可能需要长期的间歇性治疗。

本领域技术人员能够理解，可能需要比上述剂量更低或更高的剂量。对于任何特定患者，具体剂量和治疗方案将取决于多种因素，包括所用具体化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药时间、分泌速度、药物组合、疾病严重程度和病程、患者对该疾病的素因以及治疗医师的判断。

本发明为临床预防或治疗FXR介导的相关疾病，特别是肥胖、糖尿病、代谢综合征、胆汁郁积性肝病、器官纤维变性、非酒精性肝硬化、胆固醇性胆结石、炎症等疾病提供了更多的用药选择。

具体实施方式

实施例1本发明所述细格菌素类化合物的制备

将真菌F01-2076接种于种子培养基（各成分的质量分数分别为：淀粉2%，葡萄糖1%，黄豆饼粉0.2%，麦芽粉0.6%，酵母粉0.5%，CaCO₃ 0.2%，MgSO₄·7H₂O 0.2%，NaCl 0.2%，pH为7.0）于27℃、220rpm摇瓶培养72h后，接种于装量为150g大米培养基的1000mL三角瓶中（含2.5%的热榨黄豆饼粉）27℃静置培养14d。

F01-2076固体培养物4.0kg，每瓶米中加入300mL 75%的丙酮水浸泡2h，提取液减压浓缩蒸去丙酮，剩余液用等体积乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液、无水Na₂SO₄脱水干燥，浓缩抽干后，得到4.5g深褐色粗提物。

将粗提物用少量氯仿溶解后拌样，使用硅胶柱(φ26×460mm)层析分离，洗脱系统为氯仿-甲醇，收集合并活性组分，浓缩抽干后得深黄色物质480mg。将所得活性物质使用ODS反相柱(Phenomenexφ21.2mm×250mm)在制备型HPLC上进行单组分的制备[流动相为MeOH-H₂O(体积比为55∶45)，pH3.5，流速：6mL/min，检测波长292nm]，得到淡黄色粉状物质3个，经过MS和NMR数据分析将其鉴定为去甲基细格菌素（CAS No.1030376-88-5,化合物ⅰ）、细格菌素（CAS No.31186-12-6，化合物ⅱ）和methyl 3,5'-dihydroxy-4',5-dimethoxy-2'-methyl-[1,1'-biphenyl]-2-carboxylate（CAS No.1084895-15-7，化合物ⅲ），化合物ⅰ、ⅱ、ⅲ的保留时间分别为8.5min、11.3min、13.2min。其MS和NMR数据如下：

化合物ⅰ（去甲基细格菌素）：

ESIMS negative m/z:275[M-H]^-;¹H NMR(500MHz MeOH-d₄)δ(ppm):6.25(1H,d,J＝2.4Hz,H-4),6.03(1H,d,J＝2.4Hz,H-6),6.55(1H,s,H-3’),6.46(1H,s,H-6’),1.90(3H,s,H-7’);¹³C NMR(125MHz MeOH-d₄)δ(ppm):148.3(C-1),106.5(C-2),163.0(C-3),102.3(C-4),165.7(C-5),112.1(C-6),174.3(C-7),135.8(C-1’),127.3(C-2’),117.2(C-3’),144.7(C-4’),143.2(C-5’),116.6(C-6’),19.3(C-7’)

化合物ⅱ（细格菌素）：

ESIMS negative m/z:289[M-H]^-;¹H NMR(500MHz DMSO-d₆)δ(ppm):6.42(1H,d,J＝2.4Hz,H-4),6.09(1H,d,J＝2.4Hz,H-6),3.74(3H,s,5-OCH₃),6.52(1H,s,H-3’),6.41(1H,s,H-6’),1.84(3H,s,H-7’),3.35(1H,brs,3-OH),8.64(1H,brs,4’-OH),8.60(1H,s,5’-OH);¹³C NMR(125MHz DMSO-d₆)δ(ppm):144.6(C-1),108.6(C-2),161.1(C-3),99.3(C-4),161.7(C-5),108.6(C-6),171.1(C-7),55.1(C5-OCH₃),132.1(C-1’),124.7(C-2’),116.4(C-3’),143.7(C-4’),141.8(C-5’),115.7(C-6’),18.6(C-7’)

化合物ⅲ（Methyl 3,5'-dihydroxy-4',5-dimethoxy-2'-methyl-[1,1'-biphenyl]-2-carboxylate）：

ESIMS negative m/z:317[M-H]^-;¹H NMR(500MHz CDCl₃)δ(ppm):6.47(1H,d,J＝2.4Hz,H-4),6.22(1H,d,J＝2.4Hz,H-6),3.48(3H,s,7-OCH₃),3.82(3H,s,5-OCH₃),6.67(1H,s,H-3’),6.64(1H,s,H-6’),1.97(3H,s,H-7’),3.91(3H,s,4’-OCH₃),11.52(1H,s,3-OH),5.45(1H,s,5’-OH);¹³C NMR(125MHz CDCl₃)δ(ppm):145.7(C-1),105.3(C-2),164.4(C-3),100.1(C-4),163.7(C-5),110.7(C-6),171.3(C-7),51.7(7-OCH₃),55.4(5-OCH₃),135.4(C-1’),126.3(C-2’),111.6(C-3’),145.2(C-4’),142.7(C-5’),114.5(C-6’),19.4(C-7’),56.0(4’-OCH₃)

细格菌素（Altenusin）(50mg)溶解于尽量少的甲醇中，加入过量的叠氮甲烷的醚溶液，4℃反应48小时。反应液依次用1N NaOH和水洗涤、无水Na₂SO₄干燥，减压浓缩得到油状物，用甲醇重结晶得到四甲基细格菌素（CAS No.131035-54-6，化合物ⅳ）38mg，其MS和1H-NMR数据如下：

ESIMS positive m/z:347[M+H]⁺;¹H NMR(500MHz CDCl₃)δ(ppm):6.48(1H,d,J＝2.4Hz,H-4),6.35(1H,d,J＝2.4Hz,H-6),3.52(3H,s,Ar-OCH₃),3.82(6H,s,Ar-OCH₃),3.87(3H,s,Ar-OCH₃),(6.73(1H,s,H-3’),6.69(1H,s,H-6’),2.12(3H,s,H-7’),3.91(3H,s,7-OCH₃).

实施例2：本发明所述化合物活性测定

利用了FXR的结构中共有的两个主要结构域：配体结合结构域(LBD)和DNA结合结构域(DBD)功能的独立性特点，以及酵母细胞转录因子GAL4具有核受体的相似结构，将FXR的配体结合结构域(LBD)与酵母细胞转录因子GAL4的DNA结合结构域(DBD)融合表达成嵌合蛋白,与含有GAL4特异的反应元件的报道质粒共转染，通过测定报告基因的表达从而评价FXR配体的活性。表达质粒和报告质粒由本公司自己构建[Zheng ZH,et al.,Biomedical and EnvironmentalSciences 20:465-469,2007]。

测定方法：将L02细胞以3×10⁵个/mL细胞数接种细胞于96孔板，24h后，将培养液换成含10%胎牛血清的无双抗的PRMI 1640培养基，用lipofectamine2000将重组质粒的报告质粒p 5×UAS-luc和pGAL4-FXR-LBD嵌合表达质粒共转染入细胞中。6h后将1μl溶解于DMSO的不同浓度药物加入到96孔板转染培养的细胞中，DMSO作为空白对照。给药24h后，Victor2 1420 MultilabelCounter(Pekin Elmer公司)，利用Luciferase Assay System（Promega公司）检测细胞中荧光素酶的活性。

化合物药效用FXR转录活性最大上调倍增数和EC50值表示。FXR转录活性上调倍增数即药物处理孔的荧光素酶活性值与空白DMSO孔的荧光素酶活性值的比值。EC50值即为药物化合物达到药效最大效应一半时的化合物浓度。本发明所述细格菌素类化合物对FXR的激动活性见下表。

细格菌素类化合物ⅰ-ⅳ对FXR的激动活性

化合物编号	EC₅₀(μg/ml)
		ⅰ	1.7±0.4

ⅱ	1.1±0.3
		ⅲ	5.4±0.5
ⅳ	6.8±0.7

实验结果表明，本发明所述化合物可作为FXR激动剂，用于治疗预防或治疗FXR介导的相关疾病，特别是肥胖、糖尿病、代谢综合征、胆汁郁积性肝病、器官纤维变性、非酒精性肝硬化、胆固醇性胆结石、炎症等疾病。

实施例3

按照本领域已知的方法制备片剂，每片含有下述成分：

实施例4

按照本领域已知的方法制备胶囊剂，每个胶囊中含有下述成分：

化合物ⅱ 20mg

乳糖 188mg

硬脂酸镁 2mg

以本发明所述化合物为活性成分，按照本领域已知的方法制备，均可以制备成各种临床所需制剂，在此不再一一赘述。

Claims

1.一种结构如式(1)且其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅰ、ⅲ或ⅳ所示

细格菌素类化合物及其药学上可接受的盐在制备预防或治疗FXR介导疾病药物制剂中的应用，其中FXR介导疾病是FXR介导的肥胖病。

2.一种结构如式(1)且其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅰ、ⅲ或ⅳ所示

细格菌素类化合物及其药学上可接受的盐在制备预防或治疗FXR介导疾病药物制剂中的应用，其中FXR介导疾病是FXR介导的糖尿病。

3.一种结构如式(1)且其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅰ、ⅲ或ⅳ所示

细格菌素类化合物及其药学上可接受的盐在制备预防或治疗FXR介导疾病药物制剂中的应用，其中FXR介导疾病是FXR介导的代谢综合征。

4.一种结构如式(1)且其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅰ、ⅲ或ⅳ所示

细格菌素类化合物及其药学上可接受的盐在制备预防或治疗FXR介导疾病药物制剂中的应用，其中FXR介导疾病是FXR介导的胆汁郁积性肝病。

5.一种结构如式(1)且其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅰ、ⅲ或ⅳ所示

细格菌素类化合物及其药学上可接受的盐在制备预防或治疗FXR介导疾病药物制剂中的应用，其中FXR介导疾病是FXR介导的器官纤维变性。

6.一种结构如式(1)且其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅰ、ⅲ或ⅳ所示

细格菌素类化合物及其药学上可接受的盐在制备预防或治疗FXR介导疾病药物制剂中的应用，其中FXR介导疾病是FXR介导的非酒精性肝硬化。

7.一种结构如式(1)且其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅰ、ⅲ或ⅳ所示

细格菌素类化合物及其药学上可接受的盐在制备预防或治疗FXR介导疾病药物制剂中的应用，其中FXR介导疾病是FXR介导的胆固醇性胆结石。

8.一种结构如式(1)且其中R₁、R₂、R₃、R₄如编号ⅰ、ⅲ或ⅳ所示

细格菌素类化合物及其药学上可接受的盐在制备预防或治疗FXR介导疾病药物制剂中的应用，其中FXR介导疾病是FXR介导的炎症。