CN103040723A - 一种喜炎平脂质体注射剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种喜炎平脂质体注射剂及其制法，该脂质体注射剂由喜炎平、二硬脂酸磷脂酰胆碱、大豆磷脂酰肌醇、大豆甾醇、去氧胆酸钠、海藻糖和聚维酮制成。本发明的脂质体注射剂具有粒径小且分布均匀、良好的稳定性、良好的包封率和较低的渗漏率；本发明改善了喜炎平的溶出度，提高了药物的生物利用度和疗效；且制备方法重现性好，适合工业化大生产。

Description

一种喜炎平脂质体注射剂

技术领域

本发明涉及一种脂质体注射剂及其制法，具体涉及一种喜炎平脂质体注射剂及其制法，属于医药技术领域。

背景技术

喜炎平为穿心莲内酯的磺化产物，在水中易溶，在甲醇中溶解，乙醇中微溶。据国家药品标准WS-10862(ZD-0863)-2002中给出的配方和提取工艺制备而成的喜炎平注射液，是一种具有清热解毒，用于热毒内盛而致的上呼吸道感染、支气管肺炎、病毒性肺炎、化脓性疾病、妇科炎症与术后发热等症治疗的注射液类制剂，经多年临床验证，质量稳定，疗效确切，是临床和家庭用于治疗以上病症的常用药物制剂。詹惠中，HPLC法同时测定喜炎平注射液中4个有效成分的含量，《药物分析杂志》2012年01期，32（1）140-143页。

以下是国家药品标准WS-10862(ZD-0863)-2002中给出的喜炎平注射液的配方和工艺：

处方：穿心莲内酯磺化物（喜炎平）25g；

制法：取穿心莲内酯磺化物，用注射用水适量溶解，加0.1％活性炭搅拌10分钟，滤过，加注射用水至规定量，滤过，用10％氢氧化钠溶液调节pH值至4.5～6.5，灌封，灭菌，即得。照分光光度法(中国药典2000年版一部附录ⅤB)，在540nm的波长处分别测定吸收度。本品每支含穿心莲内酯磺化物以穿心连内酯磺酸钠(C₂₀H₂₉O₅SO₃Na)计，应为标量示量的90.0％～110.O％。

目前上市的喜炎平剂型主要为注射剂，其理化性质和稳定性差，长期存放药品质量会下降且会生成一些杂质，带来毒副作用，给临床使用留下了隐患，由于制备技术等原因，中药注射液的配伍研究远不如西药，中药注射剂的不良反应后果严重，而且容易导致过敏。

专利CN1660077A公开了一种具有清热解毒的喜炎平滴丸及其制备方法，由喜炎平与一定种类或比例的基质等组成。然而，滴丸的制备需要加入大量的基质和冷凝剂，冷凝剂一般选用油性物质，使产品的不良气味增加，且滴丸的生物利用度和效果也不如注射剂。

在药物载体输送系统中，微乳、微球、纳米粒、脂质体、药质体等亚微粒的研究已经成为药物新剂型研究中非常活跃的领域。将药物包封于这些亚微粒中可以改变药物在体内的分布，增加药物在靶器官的分布量，从而提高疗效，减轻毒副作用。CN1686108A公开了一种穿心莲内酯（与喜炎平类似的药理物质）脂微球制剂，其特征在于：它是以穿心莲内酯为活性成分，加上药学上常用的注射或口服用油、乳化剂、注射用水/制药用水制备而成的脂微球制剂，其中脂微球的粒径分布范围在0.05微米～1微米，平均粒径为0.05微米～0.4微米。其制备方法为：将穿心莲内酯溶于油相中，再将处方量的注射用豆磷脂或普罗尼克(F-68)一种或两种溶于水相中；将上述水相或油相转入组织捣碎机内，于高速搅拌条件下将油相滴加入水相或将水相滴加入油相中，均匀分散，得初乳；将初乳匀化至平均粒径达0.5微米以下，过滤，灌封于输液瓶或安瓿中，充氮气，热压灭菌，即得。

在靶向给药系统中，脂质体的研究较为广泛，脂质体在体内具有良好的靶向性和生物相容性。作为一种新型药物制剂，脂质体制剂具有以下优点：（1）具有缓释作用：活性成分缓慢释放，延缓肾排泄和代谢，从而延长作用时间，提高质量效果；（2）降低药物毒性；（3）增加药物的溶解性，提高制剂质量；（4）具有靶向性：脂质体所载的药物在肝、脾网状内皮系统脏器局部维持高浓度，从而起到药物器官靶向性作用；（5）具有对活性药物成分的保护作用。

随着生物技术的不断进展，脂质体制备工艺逐步完善，脂质体作用机制进一步阐明，加之脂质体适合体内降解、无毒性和无免疫原性，特别是大量试验数据证明脂质体作为药物载体可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用，并减少药物剂量等优点。

脂质体的稳定性是长期以来限制脂质体广泛应用的重要问题，脂质体普遍存在容易聚集、融合，导致包封药物泄漏，因此在工业上制备符合稳定性要求的药物脂质体实非易事，制药领域具有一般经验的技术人员清楚地知道在制备药物脂质体方面面临各种技术困难，所有这些绝非现有的理论可以预期解决的，需要克服许多难题。因此需要想方设法地寻找优化的脂质体处方，以获得稳定性优良的脂质体。

由于喜炎平注射剂的不足，目前对于喜炎平脂质体注射剂尤其稳定性优良的喜炎平脂质体注射剂依然存在需求。

发明内容

本发明人经过锐意研究发现，通过选用特定重量配比的喜炎平、二硬脂酸磷脂酰胆碱、大豆磷脂酰肌醇、大豆甾醇、去氧胆酸钠、海藻糖和聚维酮，可以形成品质优异的喜炎平脂质体注射剂，从而完成本发明。

本发明的目的是提供一种喜炎平脂质体注射剂，其由包括以下重量配比的药物和赋形剂成分制成：

优选地，根据本发明的喜炎平脂质体注射剂由包括以下重量配比的药物和赋形剂成分制成：

进一步优选地，根据本发明的喜炎平脂质体注射剂由包括以下重量配比的药物和赋形剂成分制成：

本发明的另一目的是提供上述喜炎平脂质体注射剂的制法，该方法包括以下步骤：

（1）在约55℃下缓慢磁力搅拌下将二硬脂酸磷脂酰胆碱、大豆磷脂酰肌醇、大豆甾醇和去氧胆酸钠溶于有机溶剂中，得到脂质溶液，将上述溶液冷冻干燥，直至干燥完全，得到形成疏松海绵状的干燥固体；

（2）将喜炎平溶于磷酸盐缓冲溶液中，加入聚维酮，搅拌均匀得水相；

（3）在约45℃下缓慢磁力搅拌下，将步骤1的固体加入步骤2的水相中，然后在500bar到700bar做梯度均质7～9遍，0.22μm微孔滤膜过滤，制得喜炎平脂质体；

（4）在氮气保护下，将步骤（3）制得的喜炎平脂质体，用pH调节剂调节pH值至5.0～6.0，在60℃水浴10～15分钟，然后将温度降至20～30℃在不断搅拌下加入海藻糖；经0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，即得喜炎平脂质体注射剂。

本发明的脂质体注射剂减少了毒副作用，提高了制剂产品质量，具有良好的制剂稳定性，制备过程中脂质体不会融合、破裂，长期储存后，脂质体同样保持良好的包封率和较低的渗漏率。

通过本发明方法制得的喜炎平脂质体注射剂，改善了喜炎平的溶解度，提高了制剂产品的质量，减少了毒副作用，增加了药物在体循环中的保留时间，提高了药物的生物利用度，疗效明显提高；并且制备方法重现性好，适合于工业化大生产。

附图说明

图1是喜炎平脂质体注射剂的血药浓度-时间曲线。实施例1-3及对比例1-3中制备的注射剂给药后于0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、10h、12h、16h和24h的平均血药浓度。

具体实施方式

以下通过具体实施方式本发明进行进一步说明，本发明的特点和优点将随着这些说明而变得更为清楚。

为了形成品质优良的喜炎平脂质体注射剂，重要的是寻找能与喜炎平良好相容从而将其良好包封且不渗漏的成膜材料，以及寻找能使脂质体形成稳定注射剂的赋形剂成分。

为了实现上述目的，本发明人进行的大量研究和实验，意外发现特定重量配比的喜炎平、二硬脂酸磷脂酰胆碱、大豆磷脂酰肌醇、大豆甾醇、去氧胆酸钠、海藻糖和聚维酮能制成喜炎平脂质体注射剂，其中，作为药物活性成分的喜炎平的包封率高，脂质体粒径小且分布均匀，与现有技术中的喜炎平注射剂相比，本发明制剂的药物活性成分在体循环中的保留时间显著延长，药物的生物相容性高，生物利用度明显提高，疗效明显提高。

一方面，本发明提供一种喜炎平脂质体注射剂，其由包括以下重量配比的药物和赋形剂成分制成：

优选地，根据本发明的喜炎平脂质体注射剂由包括以下重量配比的药物和赋形剂成分制成：

进一步优选地，根据本发明的喜炎平脂质体注射剂由包括以下重量配比的药物和赋形剂成分制成：

作为用于形成脂质体的磷脂，可以使用天然磷脂和合成磷脂，包括磷脂酰乙醇胺、蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄磷脂、蛋黄磷脂酰甘油、蛋黄磷脂酰丝氨酸、大豆磷脂酰肌醇、大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂、大豆磷脂酰甘油、大豆磷脂酰丝氨酸、蛋黄磷脂酰肌醇、二油酰磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱（即二硬脂酰磷脂酰胆碱）、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油等。然而，本发明人通过研究意外发现一定比例的二硬脂酸磷脂酰胆碱（DSPC）、大豆磷脂酰肌醇和大豆甾醇特别适于作为基础磷脂成膜材料。当使用非二硬脂酸磷脂酰胆碱（DSPC）、大豆磷脂酰肌醇和大豆甾醇组合的其他磷脂和/或组合时，难以形成品质优良的脂质体，脂质体的包封率、稳定性和渗漏率等性质差。也就是说针对喜炎平的特点，二硬脂酸磷脂酰胆碱（DSPC）、大豆磷脂酰肌醇和大豆甾醇是最适合的组合膜材料。

二硬脂酸磷脂酰胆碱和大豆磷脂酰肌醇容易获得，价格低廉，相变温度较高，易于形成稳定的脂质体膜。为了改善脂质体的稳定性，所用二硬脂酸磷脂酰胆碱和大豆磷脂酰肌醇的纯度为98%以上，优选99%以上。

在本发明的喜炎平脂质体注射剂中，相对于1重量份的喜炎平而言，二硬脂酸磷脂酰胆碱的用量为5-20重量份、优选为8-15份、更优选为10-12份，大豆磷脂酰肌醇的用量为2-9重量份、优选为3-8份、更优选为4-6份，如果硬脂酸磷脂酰胆碱和大豆磷脂酰肌醇的用量过低，则无法形成稳定的脂质体；反之，如果用量过高，则作为药物活性成分的喜炎平的包封率下降，注射剂的品质以及疗效降低。

在本发明的脂质体中，大豆磷脂酰肌醇为本发明优选的负电荷磷脂，大豆磷脂酰肌醇有效地增大了脂质体表面的Zeta电位的绝对值，使脂质体表面的静电斥力增大，有效地抑制脂质体的聚集。在本发明的脂质体中，其Zeta电位为-10-60mV，优选为-20-40mV。

特别地，作为本发明的一个方面，本发明人意外发现，在喜炎平的水相中加入聚维酮，特别有利于喜炎平的分散和包封，从而提供优异的喜炎平脂质体注射剂。

聚维酮是高分子化合物，熔点高，在水和有机溶剂中的溶解性均良好，毒性低，生理相容性良好，具有分散药物的作用，由于它的存在可使水相粘稠度增加，包封在脂质体中间的水膜中使水溶性药物具有较高的包封率，并且能使药物在储存中稳定。聚维酮特别有利于喜炎平在水溶液中的分散，非常有利于喜炎平的稳定和包封，从而能提供优异的喜炎平脂质体注射剂。本实验证实聚维酮可显著提高喜炎平的包封率，降低杂质形成，延缓喜炎平的释放，因此与不含聚维酮的喜炎平脂质体的性质完全不同。

在本发明的脂质体注射剂中，相对于1重量份的喜炎平而言，聚维酮的用量为1-5份、优选2-4份、最优选2-3份，如果用量过低导致对喜炎平的包封率不高，如果用量过高而导致喜炎平释放过慢。

在本发明的喜炎平脂质体注射剂中，大豆甾醇以及去氧胆酸钠用于调节脂质体的膜稳定性，并可改变的喜炎平的释药行为，有利于获得适当缓释的作用脂质体，例如一日一次给药，并提高喜炎平的生物利用度。

大豆甾醇（soybean st ero l,SS）是大豆甾醇葡萄糖苷去葡萄糖残基的水解产物，所述大豆甾醇葡萄糖苷是从经提炼豆油的大豆残渣中分离出来的甾醇葡萄糖苷的混合物。作为一种天然产物，大豆甾醇来源丰富，价格便宜。大豆甾醇为一种双亲性分子，与二硬脂酸磷脂酰胆碱和大豆磷脂酰肌醇相结合，阻止其凝聚成晶体结构。大豆甾醇掺入二硬脂酸磷脂酰胆碱和大豆磷脂酰肌醇双层，类似于“缓冲剂”一样起到调节膜结构“流动性”的作用。当低于相变温度时，大豆甾醇可以使膜减少有序排列，增加流动性；当高于相变温度时，大豆甾醇可以增加膜的有序排列，从而降低膜的流动性。二大豆甾醇能使脂质体双分子层膜固化，从而减少自由基的生成，降低氧化水平，使脂质体稳定性显著增强。

本发明人经过研究发现，大豆甾醇能调节二硬脂酸磷脂酰胆碱和大豆磷脂酰肌醇膜的稳定性，且其对稳定性的调节作用效果优于胆固醇。

本发明人经过研究发现，大豆甾醇采用本发明优选的范围是能形成稳定的毒性低喜炎平脂质体。

研究表明，脂质体的稳定性与生物利用度有密切的对应关系。稳定性越高，生物利用度越高。因此，本发明的喜炎平脂质体注射剂的稳定性高，是导致药物生物利用度高的因素之一。

优选的一方面，本发明人研究发现，在本发明的喜炎平脂质体注射剂中，相对于1重量份的喜炎平而言，大豆磷脂酰肌醇的用量为4-6重量份，二硬脂酸磷脂酰胆碱为10-12重量份，大豆甾醇为3-4重量份，所形成的喜炎平脂质体注射剂稳定性好且包封率最高。

在本发明的喜炎平脂质体注射剂中，使用去氧胆酸钠来进一步改进脂质体膜的稳定性。在本发明的喜炎平脂质体注射剂中，相对于1重量份的喜炎平而言，去氧胆酸钠的用量为1-6重量份。如果去氧胆酸钠的用量低于1重量份，则由于其用量过低导致对喜炎平脂质体注射剂的稳定性改进不够，反之，如果去氧胆酸钠的用量高于6重量份，则用于其用量过高而导致脂质体膜易于泄露。

研究发现，当使用上述特定量的喜炎平、大豆磷脂酰肌醇、二硬脂酸磷脂酰胆碱、大豆甾醇和去氧胆酸钠时，可以得到品质优良的喜炎平脂质体，其包封率和稳定性都很高，毒性低，生物利用度高。

在本发明的喜炎平脂质体注射剂中，使用海藻糖赋形剂，用于形成稳定的注射剂。海藻糖是由两个葡萄糖分子以α,α,1,1-糖苷键构成的非还原性糖，自身性质非常稳定，它最明显的性质是在无水的条件下有保护生物膜的能力，使脂质体即使在脱水的情况下也保持形态完整。在本发明的喜炎平脂质体注射剂中，海藻糖能有效保护脂质体颗粒的形态和稳定性，进一步提高脂质体注射剂的稳定性。

本发明的喜炎平脂质体注射剂，其喜炎平的规格可以为50mg、125mg和250mg。

另一方面，本发明还提供一种喜炎平脂质体注射剂的制备方法，具体包括如下制备步骤：

（1）在约55℃下缓慢磁力搅拌下将二硬脂酸磷脂酰胆碱、大豆磷脂酰肌醇、大豆甾醇和去氧胆酸钠溶于有机溶剂中，得到脂质溶液，将上述溶液冷冻干燥，直至干燥完全，得到形成疏松海绵状的干燥固体；

（2）将喜炎平溶于磷酸盐缓冲溶液中，加入聚维酮，搅拌均匀得水相；

（3）在约45℃下缓慢磁力搅拌下，将步骤1的固体加入步骤2的水相中，然后在500bar到700bar做梯度均质7～9遍，0.22μm微孔滤膜过滤，制得喜炎平脂质体；

（4）在氮气保护下，将步骤（3）制得的喜炎平脂质体，用pH调节剂调节pH值至5.0～6.0，在60℃水浴10～15分钟，然后将温度降至20～30℃在不断搅拌下加入海藻糖；经0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，即得喜炎平脂质体注射剂。

上述的制备方法，所述的有机溶剂选自乙醇、氯仿、二氯甲烷、甲醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、苯甲醇、叔丁醇、正己烷中的一种或几种，优选体积比为2：1的叔丁醇和甲醇的混合有机溶剂。

上述的制备方法，所述冷冻干燥的过程为：在-60～-70℃预冻2～4小时，接着在-40℃～-50℃冷冻16～18小时，再经12～14小时升华至20℃～25℃，最后在30℃～35℃干燥3～5小时。

上述的制备方法，所述的磷酸盐缓冲溶液是选自pH为7.0～9.8的磷酸盐缓冲溶液，优选为pH为7.8的磷酸盐缓冲溶液。

上述的制备方法，所述pH调节剂为盐酸、碳酸、乙酸、磷酸和硫酸中的一种，优选为盐酸。

优选地，本发明提供上述喜炎平脂质体注射剂的制法，该方法包括以下步骤：

（1）在约55℃下缓慢磁力搅拌下将二硬脂酸磷脂酰胆碱、大豆磷脂酰肌醇、大豆甾醇和去氧胆酸钠溶于体积比为2：1的叔丁醇和甲醇的混合有机溶剂中，得到脂质溶液，将上述溶液在-60～-70℃预冻2～4小时，接着在-40℃～-50℃冷冻16～18小时，再经12～14小时升华至20℃～25℃，最后在30℃～35℃干燥3～5小时，得到形成疏松海绵状的干燥固体；

（2）将喜炎平溶于pH为7.8的磷酸盐缓冲溶液中，加入聚维酮，搅拌均匀得水相；

（3）在约45℃下缓慢磁力搅拌下，将步骤1的固体加入步骤2的水相中，然后在500bar到700bar做梯度均质7～9遍，0.22μm微孔滤膜过滤，制得喜炎平脂质体；

（4）在氮气保护下，将步骤（3）制得的喜炎平脂质体，用盐酸调节pH值至5.0～6.0，在60℃水浴10～15分钟，然后将温度降至20～30℃在不断搅拌下加入海藻糖；经0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，即得喜炎平脂质体注射剂。

制备脂质体的挑战在于如何使脂质体膜形成适当大小、适当结构材料的包封率高的囊泡。而且这些材料在形成脂质体不漏出。

本发明人通过选择适当的材料成分、采用合适的制备工艺，获得了品质优良的喜炎平脂质体注射剂，脂质体粒径小，粒径分布均匀，包封率高，稳定性高。

研究发现，脂质体的大小是影响脂质体在体内分布和停留时间的主要因素，脂质体的粒径越小，体内停留时间越长。通过本发明方法制备的喜炎平脂质体颗粒小，粒径大小分布均匀，这是其在体内代谢率低、生物利用度高的因素之一。

实施例

以下通过具体优选的实施例对本发明进行进一步说明。这些实施例仅是说明性的，并不应理解为对本发明的限制。

实施例1喜炎平脂质体注射剂的制备

处方：（100支）

所用原辅料成分及其重量如下：

采用制备工艺制备喜炎平脂质体注射剂：

（1）在约55℃下缓慢磁力搅拌下将300g二硬脂酸磷脂酰胆碱、150g大豆磷脂酰肌醇、100g大豆甾醇和50g去氧胆酸钠溶于900mL体积比为2：1的叔丁醇和甲醇的混合有机溶剂中，得到脂质溶液，将上述溶液在-60℃预冻2小时，接着在-40℃冷冻16小时，再经12小时升华至20℃，最后在30℃干燥3小时，得到形成疏松海绵状的干燥固体；

（2）将25g喜炎平溶于10000ml的pH为7.8的磷酸盐缓冲溶液中，加入75g聚维酮，搅拌均匀得水相；

（3）在约45℃下缓慢磁力搅拌下，将步骤1的固体加入步骤2的水相中，然后在500bar到700bar做梯度均质7遍，0.22μm微孔滤膜过滤，制得喜炎平脂质体；

（4）在氮气保护下，将步骤（3）制得的喜炎平脂质体，用盐酸调节pH值至5.0，在60℃水浴10分钟，然后将温度降至20℃在不断搅拌下加入200g海藻糖；经0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，即得喜炎平脂质体注射剂。

实施例2喜炎平脂质体注射剂的制备

处方：（100支）

所用原辅料成分及其重量如下：

采用制备工艺制备喜炎平脂质体注射剂：

（1）在约55℃下缓慢磁力搅拌下将125g二硬脂酸磷脂酰胆碱、50g大豆磷脂酰肌醇、37.5g大豆甾醇和12.5g去氧胆酸钠溶于300mL体积比为2：1的叔丁醇和甲醇的混合有机溶剂中，得到脂质溶液，将上述溶液在-70℃预冻4小时，接着在-50℃冷冻18小时，再经14小时升华至25℃，最后在35℃干燥5小时，得到形成疏松海绵状的干燥固体；

（2）将12.5g喜炎平溶于5000ml的pH为7.8的磷酸盐缓冲溶液中，加入25g聚维酮，搅拌均匀得水相；

（3）在约45℃下缓慢磁力搅拌下，将步骤1的固体加入步骤2的水相中，然后在500bar到700bar做梯度均质8遍，0.22μm微孔滤膜过滤，制得喜炎平脂质体；

（4）在氮气保护下，将步骤（3）制得的喜炎平脂质体，用盐酸调节pH值至6.0，在60℃水浴15分钟，然后将温度降至30℃在不断搅拌下加入50g海藻糖；经0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，即得喜炎平脂质体注射剂。

实施例3喜炎平脂质体注射剂的制备

处方：（100支）

所用原辅料成分及其重量如下：

采用制备工艺制备喜炎平脂质体注射剂：

（1）在约55℃下缓慢磁力搅拌下将55g二硬脂酸磷脂酰胆碱、25g大豆磷脂酰肌醇、17.5g大豆甾醇和7.5g去氧胆酸钠溶于100mL体积比为2：1的叔丁醇和甲醇的混合有机溶剂中，得到脂质溶液，将上述溶液在-65℃预冻3小时，接着在-45℃冷冻17小时，再经13小时升华至22℃，最后在33℃干燥4小时，得到形成疏松海绵状的干燥固体；

（2）将5g喜炎平溶于2000ml的pH为7.8的磷酸盐缓冲溶液中，加入12.5g聚维酮，搅拌均匀得水相；

（3）在约45℃下缓慢磁力搅拌下，将步骤1的固体加入步骤2的水相中，然后在500bar到700bar做梯度均质9遍，0.22μm微孔滤膜过滤，制得喜炎平脂质体；

（4）在氮气保护下，将步骤（3）制得的喜炎平脂质体，用盐酸调节pH值至5.5，在60℃水浴13分钟，然后将温度降至25℃在不断搅拌下加入30g海藻糖；经0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，即得喜炎平脂质体注射剂。

对比例1-3喜炎平脂质体注射剂的制备

采用分别与实施例1-3中相同的生产工艺，将如下表1中所示的对比例1-3中的原辅料成分分别制成喜炎平脂质体注射剂：

表1对比例1-3中所用原辅料成分

其中，“/”表示未使用。

具体而言，对比实施例1用二棕榈酰磷脂酰胆碱代替二硬脂酸磷脂酰胆碱，用胆固醇代替大豆甾醇；对比实施例2用蛋黄磷脂酰肌醇代替大豆磷脂酰肌醇，不用去氧胆酸钠和少用聚维酮（0.8份）；对比实施例3用胆固醇代替大豆甾醇，用甘露醇替代海藻糖，不用聚维酮。

试验例1脂质体粒径的测定

室温条件下，取实施例1-3和对比例1-3中的喜炎平脂质体注射剂，置于SubmicronParticle Sizer Model370粒径检测仪的样品管中，测定粒径大小分布及平均粒径；用投射电子显微镜观察粒子形态。结果示于下表2中。

表2脂质体粒径检测结果

从表2可知，实施例1-3制得的脂质体粒径均匀，显球形，大小均一；对比例1-3制得的脂质体粒径不均匀，或形状不定，大小不一。

具体而言，即使在采用同样的生产工艺时，实施例1-3中所得喜炎平脂质体的颗粒外观及其粒径分布范围小，明显优于对比例1-3中所得的喜炎平脂质体。说明当使用本发明所用成分以外的成分时，或者当成分用量在本发明限定的成分用量范围外时，所得喜炎平脂质体的外观劣于本发明，平均粒径明显大出很多，粒径分布不均匀，从而影响其释放均匀度。

进一步地，就粒径方面而论，在对比实施例1-3中，对比实施例3最好，说明二硬脂酸磷脂酰胆碱和大豆磷脂酰肌醇的组合对粒径影响最为显著，而加入聚维酮不能有效改变粒径分布，大豆甾醇和胆固醇在这方面的差异不明显。

试验例2包封率的测定

将实施例1-3和对比例1-3中制备的喜炎平脂质体注射剂以5000r/min的转速高速离心，离心20分钟，取上清液，用甲醇溶解，HPLC法测喜炎平含量，计算包封率，结果示于下表3中。

表3包封率测定结果

由表3可知，实施例1-3制备的脂质体制剂的包封率显著的高于对比例1-3的脂质体制剂的包封率。说明当使用本发明所用成分以外的成分时，或者当成分用量在本发明限定的成分用量范围外时，所得脂质体的脂质体包封率低于本发明。

进一步地，就包封率方面而论，在对比实施例1-3中，对比实施例2最好，说明聚维酮和大豆甾醇的组合对其影响最为显著，不加入聚维酮和大豆甾醇的比实施例3包封率最低。对比实施例也说明二硬脂酸磷脂酰胆碱和大豆磷脂酰肌醇两者的组合不能获得最佳包封率。

试验例3稳定性考察

将本发明实施例1-3和对比实施例1-3制备的样品和上市喜炎平注射剂（批号：20110464，江西青峰药业有限公司）分别置于高温40℃、相对湿度75%的条件下6个月，进行加速试验考察，实验结果示于下表4中。

表4加速试验结果

由表4可知，加速6月时，上市制剂含量降低，有关物质升高；而本发明的样品性状、含量和有关物质变化均不明显，说明本发明的产品稳定性好。

进一步地，在稳定性方面而论，在对比实施例1-3中，不加入聚维酮和大豆甾醇的比实施例3的稳定性最差，说明聚维酮和大豆甾醇的组合对其影响最为显著。

试验例4渗漏率试验

取试验例1-3和对比例1-3制备的样品，在室温条件下，分别于0天、30天、60天、90天和180天，定期检查，测定包封率，与0天包封的药量比较，计算渗漏率，结果示于下表5中。

表5渗漏率试验结果

由表5可知，长期储存时，本发明实施例1-3中制备的喜炎平脂质体注射剂渗漏率变化不大，而对比例1-3中制备的注射剂渗漏率逐渐增大，脂质体渗漏严重，这说明本发明制备的喜炎平脂质体注射剂具有更高的稳定性。在稳定性方面而论，在对比实施例1-3中，不加入聚维酮和大豆甾醇的比实施例3的渗漏率最大，比实施例3最低，说明聚维酮和大豆甾醇的组合对其影响最为显著。

试验例5血药浓度的测定

将56只大鼠随机分成7组，每组分别注射给药实施例1-3及对比例1-3中制备的注射剂，以及市售喜炎平注射剂（批号：H20110464，江西青峰药业有限公司），注射量为250mg喜炎平。给药后分别于0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、10h、12h、16h和24h，采血，血样经处理后，以HPLC-MS法测定血药浓度。绘制实施例1-3中制备的喜炎平脂质体注射剂、对比例1-3中制备的喜炎平脂质体注射剂的血药浓度与时间的关系曲线，示于附图1中，由于市售喜炎平注射剂代谢迅速，血药浓度有效时间短，没有缓释作用，故没有在图1中给出其常见的血药曲线。

由图1可知，本发明具有缓释效果和生物利用度高，与对比例1-3中制备的喜炎平脂质体注射剂和相比，本发明实施例1-3中制备的喜炎平脂质体注射剂具有以下优点：在体内的消除速度减缓，在体循环中分布时间延长，达到了改进的缓释效果，生物利用度增加。

上述对比实施例从不同方面证实了本发明实施例1-3中制备的脂质体注射剂具有优异的制剂学特征，取得了意外的技术效果，解决了制剂学技术问题，揭示了本发明组分之间彼此具有协同作用。

工业实用性

由上述实施例以及实验例的结果可知，本发明的喜炎平脂质体具有良好的外观，颗粒小，粒径均匀，包封率高，稳定性高，渗漏率低，在体内的停留时间长，生物利用度高，本发明的制备方法重现性好，适合于工业化大生产，具有良好的工业应用价值。

以上通过具体实施方式和实施例对本发明进行了详细说明，不过应理解，这些说明并不对本发明的范围构成任何限制，在不偏离本发明的精神和保护范围的情况下，可以对本发明的技术方案及其实施方式进行多种修饰、改进和替换，这些均因落入本发明的保护范围内。

本申请中提及或引用的各个参考文献，在此全文引入作为参考。

Claims (10)

1.一种喜炎平脂质体注射剂，其由包括以下重量配比的药物和赋形剂成分制成：

2.根据权利要求1所述的喜炎平脂质体注射剂，其由包括以下重量配比的药物和赋形剂成分制成：

3.根据权利要求1所述的喜炎平脂质体注射剂，其由包括以下重量配比的药物和赋形剂成分制成：

4.根据权利要求1-3中任一项所述的喜炎平脂质体注射剂，其中喜炎平的规格为50mg、125mg或250mg。

5.一种制备权利要求1-4任一项所述的喜炎平脂质体注射剂的方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）在约55℃下缓慢磁力搅拌下将二硬脂酸磷脂酰胆碱、大豆磷脂酰肌醇、大豆甾醇和去氧胆酸钠溶于有机溶剂中，得到脂质溶液，将上述溶液冷冻干燥，直至干燥完全，得到形成疏松海绵状的干燥固体；

（2）将喜炎平溶于磷酸盐缓冲溶液中，加入聚维酮，搅拌均匀得水相；

（3）在约45℃下缓慢磁力搅拌下，将步骤1的固体加入步骤2的水相中，然后在500bar到700bar做梯度均质7～9遍，0.22μm微孔滤膜过滤，制得喜炎平脂质体；

（4）在氮气保护下，将步骤（3）制得的喜炎平脂质体，用pH调节剂调节pH值至5.0～6.0，在60℃水浴10～15分钟，然后将温度降至20～30℃在不断搅拌下加入海藻糖；经0.22μm微孔滤膜过滤，灌装，即得喜炎平脂质体注射剂。

6.根据权利要求5所述的制法，其特征在于步骤（1）中所述的有机溶剂选自乙醇、氯仿、二氯甲烷、甲醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、苯甲醇、叔丁醇、正己烷中的一种或几种，优选体积比为2：1的叔丁醇和甲醇的混合有机溶剂。

7.根据权利要求5所述的制法，其特征在于步骤（1）中所述冷冻干燥的过程为：在-60～-70℃预冻2～4小时，接着在-40℃～-50℃冷冻16～18小时，再经12～14小时升华至20℃～25℃，最后在30℃～35℃干燥3～5小时。

8.根据权利要求5所述的制法，其特征在于步骤（2）所述的磷酸盐缓冲溶液是选自pH为7.0～9.8的磷酸盐缓冲溶液，优选为pH为7.8的磷酸盐缓冲溶液。

9.根据权利要求5所述的方法，步骤（4）中所述pH调节剂为盐酸、碳酸、乙酸、磷酸和硫酸中的一种，优选为盐酸。

10.根据权利要求1-4任一项所述的喜炎平脂质体注射剂在制备抗病毒药物中的用途。

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