CN102985411A - 用于检测神经障碍的成像剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及式(I)-(V)的成像剂以及神经障碍的检测方法，所述方法包括向有需要的患者给药能够结合至tau蛋白和β-淀粉状蛋白肽的式(I)-(V)化合物。本发明还涉及Aβ和tau聚集体的成像方法，该方法包括引入可检测量的包含放射性标记的式(I)-(V)化合物的药物制剂，并检测与患者中淀粉样沉着物和/或tau蛋白相关的标记化合物。这些方法和组合物实现了临床前诊断并监控AD和其它神经障碍的进展。式(V)化合物或其药用盐及其立体异构体，其中：X25-X28各自独立地为CH、CR11或N；X29为CH、N、O或S；X30为CH、C或N；X31-34各自独立地为CH、CR12、CR13或N；R11-R13各自独立地为H、卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、烷基、烷基芳基、烷基氨基、烷基胺、芳基胺、芳基氨基、烷氧基、-(O-CH2-CH2)n-、烯基、炔基、芳基氧基、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、环烷基、环烷基氨基、环烷基胺、双环的饱和杂环和不饱和杂环，其中R11-R13中至少一个碳任选被N、O、S、三唑或卤素所取代，和其中至少一个氢任选被卤素、胺、氨基、烷氧基、硝基、烷基、烯基、炔基、芳基氧基、烷基芳基、烷基氨基、烷基胺、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、环烷基、环烷基氨基、环烷基胺、双环的饱和杂环和不饱和杂环、离去基团、CN、OH或放射性同位素所取代。
Description
相关专利申请
本发明是USSN 12/661,777(2010年3月23日提交)的部分继续申请，将其整体引入本文作为参考。USSN 12/661,777基于美国临时申请61/162,421(2009年3月23日提交)并要求其优先权，将其整体引入本文作为参考。
上述申请和在其中或它们的审查期间引用的所有文献(“申请引用的文献”)和在所述申请引用的文献中引用或参考的所有文献以及在其中引用或参考的所有文献(“在其中引用的文献”)以及于所述在其中引用的文献中引用或参考的所有文献，与在其中或引入本文作为参考的任何文献中所提及的任何产品的制造商指示、说明、产品介绍和产品册一起，都引入本文作为参考，并且可以用于实践本发明。
技术领域
一般地，本发明涉及检测神经障碍的成像剂。更具体地，本发明涉及发现新的靶向老年斑(SPs)和/或神经原纤维缠结(NFTs)的诊断成像剂用于检测、临床前诊断和用于追踪阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)的进展。
背景技术
目前，阿尔茨海默病(AD)，作为痴呆的主要成因，在65至69年龄段的人口中发病率为1%，并在95岁以上的人口中增加到40-50%。AD患者显示出警告性的临床症状，包括认知缺损和记忆功能缺陷。在当前的工作模型(working model)中，有三个“阶段”与AD相关。第一，神经元细胞由于会导致神经元缺乏的突触/代谢功能障碍而染病。第二，在组织学阶段，神经原纤维缠结和β-淀粉状蛋白斑(plaque)开始积聚，导致不溶性蛋白质在脑中的最终聚集。最终，AD最终导致神经元死亡以及脑体积收缩。AD患者一般在大脑皮质中具有严重的老年斑(SP)负担，这得到了死后组织病理学检查的证实。SP是含有β-淀粉状蛋白肽的细胞外沉积物，所述β-淀粉状蛋白肽从较长淀粉状蛋白前体蛋白切开以产生40-43氨基酸肽。脑中的淀粉状蛋白聚集体在导致AD的级联事件中起关键作用。有趣的是，尽管老年斑在认知功能正常的年长者中发展和存在，NFT和老年斑沉积的严重性据称与认知功能和神经元回路衰退相关。
死后检查AD脑的主要神经病理学观察通过检测细胞外β-淀粉状蛋白肽和细胞内神经原纤维缠结(NFT)证实了AD的存在。NFT衍生自高度磷酸化tau蛋白的细丝。NTF的存在和严重性与痴呆和认知缺损的严重性相关(Dickinson,D.W.,Neurobiol.Aging 1997,18[4suppl]:S21-S26)。AD的病理学过程一定在痴呆的临床症状呈现之前就开始。
尽管阿尔茨海默病在美国是死亡的第四大成因，但是药物干预还没有实现治愈性治疗的商业化。近年来，Marwan N.Sabbagh发表了一篇AD药物疗法临床进展的当前状态的综述(The American Journal of GeriatricPharmacotherapy,2009,7(3),p.167)。在ICAD 2008报道了Dimebon、石杉碱甲(hupcrzine A)、静脉内免疫球蛋白和亚甲蓝(methylthioninium chloride)的完成的第II阶段实验的令人鼓舞的结果。当前在第II阶段实验中有19个化合物，并且3个化合物(AN1792、Lecozotan SR和SGS742)在这个发展阶段失败。
除了抑制AD作用的药物方法之外，研究者还尝试通过其它手段检测AD，包括建立用于早期检测的技术。当前，存在多种策略尝试鉴定AD相关的病理学，通过靶向细胞疾病或疾病的组织学阶段。存在可以证实AD良好建立现象的AD成像剂阵列，但是该晚期阶段诊断针对36个月后的疾病进一步进展提供了很少的防御。令人感兴趣的是，老年斑和缠结在脑中的检测不一定就能证实患者患上了AD。
如2006年12月5日的最近的讨论小组(Biochemical PharmacologyDiscussion Group，由American Chemical Society′s New York section赞助)所总结的，研究者现在关注通过阻断β-淀粉状蛋白(BAP)生成或通过控制突变tau蛋白形成靶向AD前体的方法。明确的是，这些受关注的研究工作目的在于控制可能导致AD的AD前体的形成，该新策略可以比目前的治疗更有效地延迟完全发作AD。同时，神经学成像必须通过鉴别AD前体反映治疗趋势，加倍努力地关注AD治疗发展并且，此外，鉴别出症状发生前的处于风险中的AD患者。近年来的药物开发已经防止SP和NFT在症状发生前AD患者中的积聚。因此，期望在活的人脑中测量这些损伤水平的能力，用于症状发生前诊断AD，并用于监控该疾病的发展。
不幸的是，由于在实行组织学检查之前都不能在患者中确认AD，多年以来仍旧没有解决理解这些示踪剂吸收与相关生物化学过程之间的联系。
因此，可以证实体内成像NFT结合成像SP有效用于早期和精确的诊断AD。定量评估tau病理学还可以用来追踪痴呆的严重性，这是因为神经炎病理学的形成与痴呆的临床严重性高度相关(Dickson,1997)。在非常早期的AD患者中，NFT在内嗅皮质中的沉积与神经元损失密切相关(Gomez-Isla et al.,1996)。如果防止神经原纤维缠结病理学形成的新型治疗可以转化成临床应用，那么该成像技术将可应用于评估治疗功效。
目前，神经学成像AD已经看到了成像示踪剂的出现，成像示踪剂似乎基于斑块和原纤维介导的示踪剂吸收证实了AD的存在，并且，接着，目前正经历多方面的临床检查。许多这种示踪剂含有衍生自荧光染料的化学型。
用于在活脑中检测Aβ聚集体的潜在配体必须跨越未受损的血-脑屏障。因此，脑吸收可以通过使用分子尺寸相对较小和亲脂性增加的配体而得到改善。
先前的神经病理学研究建议NFT的沉积在AD的临床症状呈现之前发生。即使在AD非常早期的阶段中，患者也在内嗅皮质和海马体中显示出相当大量的NFT，足够用于神经病理学诊断AD。因此，体内成像NFT结合成像SP可被证实为有用于早期并精确的诊断AD，用于监控该疾病的发展以及用于评估治疗功效。
特异性结合tau和Aβ聚集体的当前候选者的优化以及新化合物的发现受到高度关注以开发体内tau-和Aβ成像剂，用于检测神经障碍，特别用于成像并检测患者中的AD。
发明内容
本发明披露了一系列的式(I)化合物，其对SPs和NFTs具有提高的结合性。本发明还提供了一种诊断用药物组合物，其包含放射性标记的式(I)化合物和药用载体或稀释剂。本发明进一步涉及淀粉样沉着物和/或tau聚集体的成像和检测方法，该方法包括向有此需要的受试者给药可检测量的标记的式(I)化合物或其药用盐并检测与淀粉样沉着物或tau聚集体相关的标记化合物。
本发明的一个实施方案涉及式(I)的联芳或二芳族化合物或其药用盐。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中所述芳基组成部分中至少一个被具有放射性标记的侧链所替换。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中所述放射性标记为18F。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中所述芳基组成部分中至少一个为未经取代的或者为经取代的苯基、吡啶、嘧啶或吡嗪。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中所述芳基组成部分中至少一个为未经取代的或者为经取代的稠合杂芳基。
本发明的再一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中至少一个稠合杂芳基为双环。
本发明的再一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中至少一个稠合杂芳基为三环。
本发明的再一实施方案涉及诊断用药物组合物，其包含放射性标记的如上所述的式(I)化合物或其药用盐、药用载体或稀释剂。
本发明的再一实施方案涉及与淀粉样蛋白斑和/或tau蛋白聚集相关的神经障碍的成像和检测方法，包括向有此需要的受试者给药可检测量的标记的如上所述的式(I)化合物或其药用盐并检测与淀粉样沉着物和/或tau聚集体相关的标记化合物。
本发明的再一实施方案涉及与淀粉样蛋白斑聚集相关的神经障碍的成像和检测方法，包括向有此需要的受试者给药可检测量的标记的如上所述的式(I)化合物或其药用盐并检测与淀粉样沉积物相关的标记化合物。
本发明的再一实施方案涉及与tau蛋白聚集相关的神经障碍的成像和检测方法，包括向有此需要的受试者给药可检测量的标记的如上所述的式(I)化合物或其药用盐并检测与tau聚集体的标记化合物。
本发明的再一实施方案涉及与淀粉样蛋白斑和/或tau蛋白聚集相关的阿尔茨海默病的成像和检测方法，包括向有此需要的受试者给药可检测量的标记的如上所述的式(I)化合物或其药用盐并检测与淀粉样沉着物和/或tau聚集体相关的标记化合物。
本发明的再一实施方案涉及与淀粉样蛋白斑聚集相关的阿尔茨海默病的成像和检测方法，包括向有此需要的受试者给药可检测量的标记的如上所述的式(I)化合物或其药用盐并检测与淀粉样沉着物相关的标记化合物。
本发明的再一实施方案涉及与tau蛋白聚集相关的阿尔茨海默病的成像和检测方法，包括向有此需要的受试者给药可检测量的标记的如上所述的式(I)化合物或其药用盐并检测与tau聚集体相关的标记化合物。
本发明的再一实施方案涉及式(IV)化合物。
本发明的再一实施方案涉及式(V)化合物。
本发明的再一实施方案涉及使用式(IV)化合物的方法。
本发明的再一实施方案涉及使用式(V)化合物的方法。
本发明的再一实施方案涉及合成式(IV)化合物的方法。
本发明的再一实施方案涉及合成式(V)化合物的方法。
注意到，在本公开和特别是在权利要求书和/或段落中，术语诸如“包括(comprises)”、“包含(comprised)”、“含有(comprising)”等可以具有在美国专利法中归属其的含义；例如，它们可以表示“包括(includes)”、“包含(included)”、“含有(including)”等；和术语诸如“基本由……组成(consisting essentially of)”和“基本由……组成(consists essentially of)”具有在美国专利法中归属其的含义，例如，它们允许没有明确指出要素，但是排除在现有技术中存在的或者影响本发明的基本性质或新颖性的要素。
这些和其它实施方案通过下文参考附图的发明详述将会更加显而易见，并且包括其中。在本申请全文中引用的所有专利和参考的整体公开都以其整体引入本文作为参考。
附图说明
本申请文件包含至少一个以彩色完成的图像。该包括彩色图像的专利申请的复制件将在提出要求并支付必要费用后由专利局提供。
下文通过举例方式给出但是并不仅以所述具体实施方案限制本发明的发明详述可以参考附图得到更好的理解，在所述附图中：
图1a显示用来确定W366和相关化合物的IC50值的脑切片测定的一个实例。
图1b显示用来确定W366和相关化合物的IC50值的脑切片测定的一个实例。
图2显示通过用tau或Aβ抗体免疫染色(在100uM双标记T482)证实的荧光化合物T482完全tau结合至AD脑切片。
图3显示优选化合物T482的离体放射自显影照片。
图4a和4b显示荧光化合物T540结合至AD脑切片，该AD脑切片通过用Aβ或tau抗体免疫染色(在100uM双标记T540)证实含有Aβ斑和tau聚集体。
图5显示优选化合物T540在三个不同类型的脑切片中的离体放射自显影照片：Aβ+/tau-脑，含有Aβ斑但是不含有tau聚集体(通过脑库(brain bank)诊断为非AD供体)；Aβ+/tau+脑，含有Aβ斑和tau聚集体(通过脑库诊断为AD患者)和正常(对照)脑。Aβ和/或tau的存在或不存在通过免疫染色证实。
图6a、6b和6c显示通过用tau或Aβ抗体免疫染色证实的荧光化合物T542结合至AD脑切片。
图7显示通过用tau或Aβ抗体免疫染色证实的荧光化合物T544结合至AD脑切片。
图8a和8b显示通过用tau或Aβ抗体免疫染色证实的荧光化合物T520结合至AD脑切片。
图9a和9b显示通过用tau或Aβ抗体免疫染色证实的荧光化合物T522完全结合至AD脑切片。
图10a和10b显示通过用tau或Aβ抗体免疫染色证实的荧光化合物T541结合至AD脑切片。
图11显示通过用tau或Aβ抗体免疫染色证实的荧光化合物T527结合至AD脑切片。
图12显示通过用tau或Aβ抗体免疫染色证实的荧光化合物T539结合至AD脑切片。
图13a和13b显示通过用tau或Aβ抗体免疫染色证实的荧光化合物T499结合至AD脑切片。
图14显示通过用tau或Aβ抗体免疫染色证实的荧光化合物T525结合至AD脑切片。
图15显示优选化合物T525的离体放射自显影照片。
图16显示通过用tau或Aβ抗体免疫染色证实的荧光化合物T543结合至AD脑切片。
图17显示示踪剂T114的脑图像(脑吸收)。
图18显示示踪剂T442的脑图像(脑吸收)。
图19显示示踪剂T549的脑图像(脑吸收)。
图20显示示踪剂T525的脑图像(脑吸收)。
图21显示示踪剂T482的脑图像(脑吸收)。
图22显示示踪剂T510的脑图像(脑吸收)。
图23显示18F-T777的放射自显影。
图24显示与tau和淀粉状蛋白荷载相关的18F-T777。
图25显示小鼠中的18F-T777 PK。
图26显示18F-T808放射自显影。
图27显示与tau和淀粉状蛋白荷载相关的18F-T808。
图28显示示踪剂T557的脑图像(脑吸收)。
图29显示示踪剂T620的脑图像(脑吸收)。
图30显示示踪剂T684的脑图像(脑吸收)。
图31显示示踪剂T704的脑图像(脑吸收)。
图32显示示踪剂T713的脑图像(脑吸收)。
图33显示示踪剂T721的脑图像(脑吸收)。
图34显示示踪剂T730的脑图像(脑吸收)。
具体实施方式
以下说明将描述本发明及其有利的实施方案。本发明不以任何方式局限于这些有利的实施方案，因为后者的记载仅为了给本发明举例，本发明意在包括可能的变化和改变，正如本领域技术人员在不偏离本发明范围的条件下所能理解的。
本发明的一个实施方案涉及通式(I)化合物
其中
A为键、(C1-C4)烷基、(C3-C6)环烷基、(C2-C4)烯或(C1-C4)炔；
Z为选自以下的芳基：
其中
X1和X13各自独立地为C、CH、N、O或S；
X2–X12和X14-X18各自独立地为C、CH或N；
Y1为N、O或S；
R1-R2各自独立地为H、卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、烷基、烷氧基、-(O-CH2-CH2)n-、单烷基氨基、二烷基氨基、单芳基氨基、二芳基氨基、伯胺、仲胺、叔胺、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、饱和杂环基，
其中最后十七个基团为未经取代的或经卤素、离去基团或一个或多个选自以下的基团所取代：卤素、烷基、卤代烷基、氰基、羟基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷氧基、R10、放射性标记或放射性标记取代的烷基；或
R1和R2一起形成五元或六元饱和或不饱和环，其在环中任选含有额外的选自N、O和S的杂原子，所述环为未经取代的或经卤素或一个或多个选自以下的基团所取代：卤素、烷基、卤代烷基、氰基、羟基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷氧基、R10、放射性标记或放射性标记取代的烷基；
R3–R9各自独立地为H、卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、烷基、烷氧基、-(O-CH2-CH2)n-、单烷基氨基、二烷基氨基、单芳基氨基、二芳基氨基、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、杂环基，
其中最后十七个基团为未经取代的或经卤素、离去基团或一个或多个选自以下的基团所取代：卤素、烷基、卤代烷基、氰基、羟基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷氧基、R10、放射性标记或放射性标记取代的烷基；
R10为H、烷基、烯、芳基，其为未经取代的或经卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、-OSO2烷基、-OSO2芳基、-OSi(烷基)3、-OTHP或放射性标记所取代；
n为1、2或3；
m为0或1，
及其药用盐。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中Z为
X9-X13中至少一个为氮，m为1。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中R1-R6中至少一个为-(O-CH2-CH2)2-。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中Z为
X9-X16中至少一个为氮，m为1。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中Z为
且X9-X18中至少一个为氮，m为1。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中Z为
其中X9-X12中至少一个为氮，m为1。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中Z为
A为乙炔，X9-X16中至少一个为氮。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中A为键，Z为喹啉。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中R1-R9中至少一个为饱和杂环。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中m为1，R1为饱和杂环。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中Z为
其中X9-X16中至少两个为氮。
本发明的再一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中A为键，Z为
其中X1-X16中至少三个为氮。
本发明的又另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中A为键，Z为
其中X9-X18中至少两个为氮。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中A为C2炔或乙炔，Z为
其中X9-X13中至少两个或Y1为氮。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中R1-R2中至少一个包含杂环。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中R1-R2中至少一个包含饱和杂环。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中R1-R9中至少一个包含-(O-CH2-CH2)2-或-(O-CH2-CH2)3-。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中R1-R9中至少一个包含选自以下的放射性标记：11C、13N、15O、18F、123I、124I、125I、131I、76Br和77Br。
在另一实施方案中，本发明提供了如上所述的式(I)化合物，其中该化合物可以表现为式(II)。式(II)表示W366和在该分子的左手部分含有标记元素的相关化合物：
其中
X为N或C；
Y为S或O；
Z为键、S、O、烷基、-(OCH2CH2)n-、芳基或杂芳基；
L*为放射性标记；
Ar为芳基、杂芳基，其任选被O、S、卤素、烷基或-(OCH2CH2)n-取代；
G为H、S、O、卤素、烷基、-(OCH2CH2)n-或芳基；和
n为1、2或3。
在另一实施方案中，本发明提供了如上所述的式(I)化合物，其中该化合物可以表现为式(III)，其表示W366和在该分子的右手部分含有标记元素的相关化合物：
其中
X为N或C；
Y为S或O；
Z为S、O、烷基、-(OCH2CH2)n-、芳基或杂芳基，其任选被O、S、卤素、烷基、芳基或-(OCH2CH2)n-取代；
L*为放射性标记；
J为键、S、O、烷基、-(OCH2CH2)n-、芳基或杂芳基；
Ar为芳基、杂芳基，其任选被O、S、卤素、烷基或-(OCH2CH2)n-取代；
G为H、S、O、卤素、烷基、-(OCH2CH2)n-或芳基；和
n为1、2或3。
在另一实施方案中，本发明提供了W366和含有标记元素和取代的吡啶基部分的相关化合物：
在另一实施方案中，本发明提供了以下的含标记元素(11C-NHMe或18F)的式(II)和式(III)化合物：
方案1，式(II)和式(III)的Aβ成像剂的代表性实例。
本发明还包括式(I)化合物的立体异构体。这类立体异构体包括但不限于：对映异构体和非对映异构体的混合物，以及单独的对映异构体和非对映异构体。
当任何变量在式(I)的任何构成中发生多于一次时，其定义在各情况中均独立于其它任何情况中的定义。此外，只要各取代基和/或变量的组合产生了稳定的化合物，该组合就是可允许的。
式(I)化合物也可以为溶剂化物、特别是水合物。水合可以在制备化合物或包含式(I)化合物的组合物期间发生，或者水合也可以由于化合物的吸湿性随时间发生。
式(I)化合物可以通过应用或调节已知方法(即，到目前为止使用的方法(如在实验实施例部分详细表述的方法A-S))或化学文献中记载的文献中进行制备。
本发明的另一实施方案涉及淀粉样沉着物和/或tau聚集体的成像方法。当式(I)化合物用作成像剂时，它们用合适的放射性同位素进行标记，例如，放射性卤素，诸如18F，放射性金属和其它可检测的放射性原子诸如11C。
在另一实施方案中，本发明涉及作为成像剂的式(II)和(III)的放射性标记化合物。这些成像剂是独特的，因为它们含有通过炔连接基紧密连接在一起的新结合部分。这些结合基序(motif)可以同时与正交结合位点(orthogonalbinding site)相互作用，从而提供与AD患者相关的生物化学现象的更完整的概览。
本发明的另一实施方案涉及同时含有苯并噻唑和乙炔结合基序的化合物，诸如W366和相关化合物，其设计来与老年斑的正交结合位点和潜在的NFT相互反应。就此而言，这些成像剂提供了可能性，由此提供了更完整的生化信息的数据组。图1a和1b显示了脑切片测定的实施例，用来确定W366和相关化合物的IC50值。
本发明的另一实施方案涉及作为tau聚集体的成像剂的式(I)化合物。
已经显示，本发明化合物的技术方案在静脉内注射至普通小鼠中时，显示出出色的脑吸收。这些化合物还显示出对tau原纤维的高度结合亲和性。使用本发明化合物的放射自显影显示在AD脑切片中的NFTs的标记。荧光测定数据显示这些数据对聚集体和Aβ原纤维的结合能力。在神经病理性染色中，本发明的化合物染色淀粉样蛋白斑和/或tau聚集体。
本文所示结果基于脑切片染色研究和示踪剂在三种不同类型的脑切片(Tau+/Aβ+,Tau-/Aβ+和Tau-/Aβ-)中的放射自显影。这些结果示出在图2-16和表1-3中。
本发明的另一实施方案涉及式(I)喹啉化合物，其具有含放射性标记的延长侧链，如方案2所示。如方案2和表1所示，这一类化合物结合至tau蛋白。这些化合物结合延长侧链，特别是含有哌啶或吗啉和/或聚醚诸如聚乙二醇(PEG或-(OCH2CH2)n-，其中n可以为1-10，优选1-3)的延长侧链。这些结构特征在这些化合物结合至tau聚集体的结合亲和性中可能有重要作用。荧光测定数据显示这些试剂至tau聚集体的结合能力。
图12、13a-13b和14显示优选的化合物T539、T499和T525至AD脑切片的结合，由使用tau或Aβ抗体的免疫染色所证实。图15显示T525在三种不同类型的脑切片中的离体放射自显影：Aβ+/tau-脑，含Aβ蛋白斑，但不含tau聚集体(通过脑库诊断为非-AD供体)；Aβ+/tau+脑，含Aβ蛋白斑和tau聚集体(通过脑库诊断为AD患者)，和正常(对照)脑。Aβ和/或tau的存在或不存在通过免疫染色证实。
方案2：荧光化合物在脑切片中的Tau/Aβ(在本文中也用作Ab)结合的定量结果(4+为最强，1+为最弱)
表1：本发明的喹啉化合物的代表性实例
本发明的另一实施方案涉及式(I)乙炔化合物，其具有双环杂芳基部分和含放射性标记的延长侧链，如方案3所示。如方案3和表2所示，这类化合物具有对tau蛋白的高度亲和性。这些化合物结合联芳炔核结构中的延长侧链，特别是含有聚醚诸如PEG的延长侧链，其中芳基构成中的一种为经取代的苯并咪唑。这种结构调节导致这些化合物的选择性增加。
方案3：荧光化合物在脑切片中的Tau/Aβ结合的定量结果(4+为最强，1+为最弱)
表2：本发明乙炔化合物的代表性实例
图2和4a-4b显示通过用tau或Aβ抗体免疫染色证实的荧光化合物T482和T540结合至AD脑切片。图3和5显示优选化合物T482和T540在三种不同类型的脑切片中的离体自显影照片：Aβ+/tau-脑，含有Aβ斑但不含tau聚集体(通过脑库诊断为非AD供体)；Aβ+/tau+脑，含有Aβ斑和tau聚集体两者(通过脑库诊断为AD患者)，和正常(对照)脑。Aβ和/或tau的存在或不存在通过免疫染色证实。
本发明的另一实施方案涉及包含三环芳基部分的式(I)化合物。例如，方案4中显示的苯并咪唑嘧啶显示出对tau蛋白的高度亲和性。图6a-6c、7、8a-8b、9a-9b、10a-10b和11显示荧光化合物T542、T544、T520、T522、T541和T527结合至AD脑切片，经使用tau或Aβ抗体的免疫染色证实。
方案4：荧光化合物在脑切片中的Tau/Aβ结合的定量结果(4+为最强，1+为最弱)
表3：本发明苯并咪唑和三环苯并咪唑化合物的代表性实例
本发明的另一实施方案涉及另外的包含三环芳基部分的式(I)化合物。例如，方案5中显示的苯并咪唑嘧啶，显示出对tau蛋白的高度结合亲和性。
其中荧光可以经放射性同位素诸如18F置换。
方案5：荧光化合物在脑切片中的Tau/Aβ结合的定量结果(4+为最强，1+为最弱)
在上述化合物中，R1和/或R2可以为伯胺或仲胺。例如，R1和/或R2可以为-NH-(CnH2n)n-。
应当理解“F”可以经18F或其它放射性标记置换。
在另一实施方案中，本发明为通式(IV)化合物：
其中
A为键、(C1-C4)烷基、(C3-C6)环烷基、(C2-C4)烯或(C1-C4)炔；
Z为选自以下的芳基：
其中
X19–X24各自独立地为CH2、N、NH、O、NH、S、SH.
X13各自独立地为C、N、O或S；
X5-X12和X14-X18各自独立地为C和N；
Y1为N、O或S；
R1-R2各自独立地为H、卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、烷基、烷氧基、-(O-CH2-CH2)n-、单烷基氨基、二烷基氨基、单芳基氨基、二芳基氨基、伯胺、仲胺、叔胺、杂环、多环杂环、C1-C6-OH、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、饱和杂环基，
其中最后十七个基团为未经取代的或经卤素、离去基团或一个或多个选自以下的基团取代：卤素、烷基、卤代烷基、氰基、羟基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷氧基、R10、放射性标记或放射性标记取代的烷基；或
R1和R2一起形成五元或六元饱和或不饱和环，其在环中任选含有选自N、O和S的额外杂原子，所述环为未经取代的或被一个或多个卤素或选自以下的基团所取代：卤素、烷基、卤代烷基、氰基、羟基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷氧基、R10、放射性标记或放射性标记取代的烷基；
R3-R9各自独立地为H、卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、烷基、烷氧基、-(O-CH2-CH2)n-、单烷基氨基、二烷基氨基、单芳基氨基、二芳基氨基、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、杂环基、杂环、多环杂环，
其中最后十七个基团为未经取代的或经卤素、离去基团或一个或多个选自以下的基团所取代：卤素、烷基、卤代烷基、氰基、羟基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、烷氧基、R10、放射性标记或放射性标记取代的烷基；
R10为H、烷基、烯、芳基，其为未经取代的或经卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、-OSO2烷基、-OSO2芳基、-OSi(烷基)3、-OTHP或放射性标记所取代；
n为1、2或3；
m为0或1，或
其药用盐。
例如，方案6中显示的苯并咪唑嘧啶展现出对tau蛋白对高结合亲和性。
应当理解“F”可以被18F或其它放射性标记置换。
本发明的化合物还可以具有式(V)的通式结构及其药用盐或其立体异构体：
其中：
X25-X28各自独立地为CH、CR11或N；
X29为CH、N、O或S；
X30为CH、C或N；
X31-34各自独立地为CH、CR12、CR13或N；
R11-R13各自独立地为H、卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、烷基、烷基芳基、烷基氨基、烷基胺、芳基胺、芳基氨基、烷氧基、-(O-CH2-CH2)n-、烯基、炔基、芳基氧基、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、环烷基、环烷基氨基、环烷基胺、双环的饱和杂环和不饱和杂环，
其中至少一个碳任选被N、O、S、三唑或卤素替换，和
其中至少一个氢任选被卤素、胺、氨基、烷氧基、硝基、烷基、烯基、炔基、芳基氧基、烷基芳基、烷基氨基、烷基胺、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、环烷基、环烷基氨基、环烷基胺、双环的饱和杂环和不饱和杂环、离去基团、CN、OH或放射性同位素替换。
本发明的化合物还可以具有式(Va)的通式结构或其药用盐或其立体异构体：
其中：
X29为CH、N、O或S；
X30为CH、C或N；
X31-34各自独立地为CH、CR12、CR13或N；
R11-R13各自独立地为H、卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、烷基、烷基芳基、烷基氨基、环烷基氨基、烷基胺、芳基胺、芳基氨基、烷氧基、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、环烷基、饱和杂环和不饱和杂环，
其中至少一个碳任选被N、O、S或卤素替换，和
其中至少一个氢任选被卤素、氨基、烷氧基或放射性同位素替换。
本发明的化合物还可以具有式(Vb)的通式结构或其药用盐或其立体异构体：
其中：
X31-34各自独立地为CH、CR12、CR13、N、O或S
R11-R13各自独立地为H、卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、烷基、烷基芳基、烷基氨基、烷基胺、芳基胺、芳基氨基、烷氧基、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、环烷基、饱和杂环和不饱和杂环，
其中至少一个碳任选被N、O、S或卤素替换，和
其中至少一个氢任选被卤素、氨基、烷氧基或放射性同位素替换。
本发明的化合物还可以具有以下通式结构：
其中R14为烷基、烷基芳基、卤素或放射性同位素。
本领域技术人员应当理解可以对上述通式结构进行调节。例如，下列结构显示出有利的性质：
此外，应当理解放射性标记(如，18F)可以被荧光标记置换。这种标记可以包括溴乙锭(Ethidium bromide)、荧光素(Fluorescein)、绿色荧光蛋白，等。
本发明还涉及式IV和V化合物的使用方法。
在一个实施方案中，本发明为脑组织中的老年斑和/或神经原纤维缠结的成像和检测方法，该方法包括使用用于检测神经障碍的式(IV)–(V)中任一种化合物处理所述组织。
在一个实施方案中，本发明为上述方法，其中所述神经障碍通过测量式(IV)-(V)中任一种化合物对老年斑的亲和性来检测。
在一个实施方案中，本发明为上述方法，其中所述神经障碍通过测量式(IV)–(V)中任一种化合物对tau聚集体的亲和性来检测。
在一个实施方案中，本发明为离体或体外检测脑组织中的淀粉样沉积物的方法，该方法包括使用式(IV)-(V)中任一种化合物处理该组织用于检测淀粉样沉着物。
在一个实施方案中，本发明为体内检测患者中的淀粉样沉着物的方法，该方法包括向患者给药有效量的放射性标记的式(IV)-(V)中任一种化合物，并检测该化合物对患者中淀粉样沉着物的结合水平。
在一个实施方案中，本发明为离体或体外检测脑组织中的tau蛋白的方法，该方法包括使用式(IV)-(V)中任一种化合物处理该组织用于检测神经原纤维缠结。
在一个实施方案中，本发明为体内检测患者中的神经原纤维缠结的方法，该方法包括向患者给药有效量的式(IV)–(V)中任一种化合物的放射性标记化合物，并检测该化合物对tau蛋白的结合水平。
在一个实施方案中，本发明为上述方法，其中所述病症为阿尔茨海默病(AD)。
在一个实施方案中，本发明为上述方法，其中所述检测使用γ成像、磁共振成像、磁共振波谱或荧光光谱进行。
在一个实施方案中，本发明为上述方法，其中所述通过γ成像的检测为PET或SPECT。
在另一实施方案中，本发明涉及化合物和包含本文公开的通式化合物的组合物，其中所述化合物为淀粉状蛋白和/或tau蛋白结合化合物。本发明的淀粉状蛋白和/或tau蛋白结合化合物可以适于体内成像淀粉样沉着物和/或NTF的量给予患者，并且区分具有淀粉样沉着物和/或NTF的神经组织与正常组织。
Aβ化合物一般在使用合成Aβ1-42原纤维的竞争性结合测定中进行评估(IC50s)。情况对于tau而言更加复杂，因为在AD脑中可能存在6个异型的tau作为交替拼接单个tau基因的产物。因此，文献中大多数报道只依赖于一种重组异型，Tau-441。各种tau异型在体内还高度磷酸化，其中一些在体外难以模仿，这增加了更多的复杂性。此外，缺乏这些tau原纤维的结构信息，造成解释化合物的结合很困难。
天然形式的tau(各种异型，高度磷酸化)和淀粉状蛋白聚集体存在于脑切片中，因此对于化合物测试是优选的。使用测试化合物的自身荧光可以给出指示表示该化合物是否结合至tau缠结/PHF和/或淀粉状蛋白斑。这进一步通过使用Aβ和tau抗体的免疫染色以及叠加图像来证实。缺点是荧光信号不能用来定量，因为一些化合物会显示出并另一些更强烈的荧光信号，并且Aβ斑和tau缠结共同存于AD脑中。然而，可以定量地给信号强度“评分”，并且区别出显示结合至这些聚集体的化合物。
此外，可以在仅含有Aβ斑/无tau聚集体、Aβ斑/和tau聚集体的脑中以及对照脑中评估选择性。遗憾的是，不存在仅含tau并且无Aβ的AD脑。通过测试在这些脑切片中的放射性标记的示踪剂，人们可以更加定量地评估各种测试化合物的相对结合强度(信号强度)和选择性，因为它们均含有相同的放射性示踪剂。例如，如果测试示踪剂仅结合tau，并且不结合淀粉状蛋白，其在仅含Aβ斑的脑切片中不应当显示信号。如果化合物仅结合至淀粉状蛋白，其应当在这两种类型的脑中均显示吸收。鉴定和进一步定量测定选择性化合物的困难在于相对丰富的淀粉状蛋白与tau的比较，这难以测量。
在本发明的一个实施方案中，式(I)化合物的自身荧光用来确定该化合物是否结合脑切片中的tau/淀粉状蛋白，并且给出其定量评分。下一步使用不同类型的脑进行放射自显影用于进一步评估和定量。
本发明的淀粉状蛋白和/或tau蛋白探针可以用来检测和量化在以下疾病中的淀粉样沉着物和/或NTFs，所述疾病包括但不限于：地中海热、穆-韦综合征、自发性骨髓瘤、淀粉状蛋白多神经病、淀粉状蛋白心肌病、全身性老年淀粉样变性、淀粉状蛋白多神经病、具有淀粉样变性的遗传性脑出血、唐氏综合征、绵羊瘙痒症(Scrapie)、克-雅综合征、库鲁病(Kuru)、格-施-沙综合征、甲状腺的髓样癌、隔离动脉(Isolated atrial)淀粉状蛋白、透析患者中的β2-微球蛋白淀粉状蛋白、包含体肌炎、肌肉萎缩疾病中的β2-淀粉状蛋白沉着物、慢性损伤性脑病(CTE)，和朗格汉岛II型糖尿病、胰岛素瘤。
本发明的化合物和探针优选在成像(包括诊断、检测、定性和评估)淀粉状蛋白和/或相关痛苦(affliction)的有效剂量显示出低毒性。
在一个实施方案中，本发明涉及药物诊断制剂，其含有在合适媒介物或稀释剂中的放射性标记的式(I)化合物或其药用盐，用于成像并检测神经障碍。
在另一实施方案中，本发明涉及药物诊断制剂，其用于检测淀粉状蛋白肽。
在另一实施方案中，本发明涉及药物诊断制剂，其用于检测神经原纤维缠结的tau蛋白。
在另一实施方案中，本发明涉及药物诊断制剂，其用于检测神经障碍。
在另一实施方案中，本发明涉及药物诊断制剂，其用于检测阿尔茨海默病。
在本发明的另一实施方案中，放射性诊断剂组合物可以含有任何添加剂，诸如pH控制剂(如酸、碱、缓冲剂)、稳定剂(如抗坏血酸)或等渗剂(如，氯化钠)。
在另一实施方案中，本发明还涉及脑组织中的老年斑和/或神经原纤维缠结的成像和检测方法，该方法包括使用式(V)化合物处理该组织。
在另一实施方案中，本发明还涉及脑组织中的淀粉样沉着物的离体或体外检测方法，该方法包括使用式(V)化合物处理该组织用于检测淀粉样沉着物。
在另一实施方案中，本发明还涉及患者中的淀粉样沉着物的体内检测方法，该方法包括向患者给药有效量的式(V)化合物，并检测该化合物结合患者中的淀粉样沉着物的结合水平。
在另一实施方案中，本发明还涉及脑组织中的tau蛋白的离体和体外检测方法，该方法包括使用式(V)化合物处理该组织用于检测神经原纤维缠结。
在另一实施方案中，本发明还涉及患者中的神经原纤维缠结的体内检测方法，该方法包括向患者给药有效量的式(V)化合物，并检测化合物至tau蛋白的结合水平。
在另一实施方案中，本发明还涉及神经障碍的SPs和NTFs特性的检测方法。
在另一实施方案中，本发明还涉及阿尔茨海默病(AD)的检测方法。
在另一实施方案中，本发明还涉及使用γ成像、磁共振成像、磁共振波谱或荧光光谱进行的神经障碍的成像和检测方法。
在另一实施方案中，本发明还涉及SPs和NTFs的成像和检测方法，其中所述检测通过PET或SPECT进行。
根据本发明一个具体的实施方案，本发明的化合物和方法用于成像，特别是医学成像。
核医学中的诊断技术使用放射性示踪剂，后者从体内释放出γ射线。这些示踪剂一般为连接至化合物的寿命短的放射性同位素，这允许彻底检查特定的生理过程。它们可以通过注射、吸入或口服给予。第一种类型是通过γ相机检测的单个光子，其中γ相机可以从许多不同的角度观察器官。该相机从发出辐射的各点形成图像；该图像通过电脑增强，并且由医师在监控器上观察异常状况的指示。
正电子发射断层照相术(PET)是使用回旋加速器中产生同位素的精确和成熟的技术。
发射正电子的放射性核素通常通过注射引入，并且在目标组织中积累。放射性核素随着衰变发射出正电子，其立即结合附近的电子，导致同时在两个相反方向上发射两个可鉴别的γ射线。这些通过PET相机检测，并且非常精确地指示它们的器官。PET最重要的临床应用在肿瘤学中，使用氟-18作为示踪剂，这是由于PET已经被证实为最精确的检测和评估大多数癌症的非侵袭性方法。其也可以用于心脏成像和脑成像。
在本领域中公知大量的医疗诊断方法，包括使用放射性标记化合物的PET和SPECT。PET和SPECT为非常灵敏的技术，并且要求小量的放射性标记化合物，称为示踪剂。所述标记化合物在体内以与相应的非反射性化合物完全相同的方式输送、累积并转化。示踪剂或探针可以使用用于PET成像的放射性核素进行放射性标记，诸如11C、13N、15O、18F、64Cu和124I，或经用于SPECT成像的放射性核素进行放射性标记，诸如99Tc、77Br、61Cu、153Gd、123I、125I、131I和32P。
PET基于携带发射正电子的同位素的分子成像示踪剂在患者组织中的分布生成图像。PET方法具有在分子水平上检测研究组织或器官中的功能异常的能力。PET已经用于临床肿瘤学，诸如用于成像肿瘤和转移，并且已经用于诊断某些脑疾病，并且已经对脑和新功能作图。类似地，SPECT可以用来补充任何γ成像研究，其中真实的3D代表是有帮助的，例如，成像肿瘤、感染(白细胞)、甲状腺或骨。
根据另一实施方案，本发明还涉及淀粉样沉着物和NTFs的成像方法。当该发明的化合物用作成像剂时，它们由合适的放射性同位素或放射性标记的放射性标签进行标记，例如，放射性卤素诸如18F，或放射性金属，或其它可检测的放射性原子诸如11C。
关于放射性卤素，125I同位素有用于实验室测试，但是它们一般不用于诊断目的，因为125I的半衰期相对较长(60天)且较低的γ发射(30-65Kev)。同位素123I具有13个小时的半衰期，γ能量为159Kev，并且因此期望对要用于诊断目的的配体进行标记将可以使用这种同位素或使用18F(半衰期为2小时)。其它可以使用的同位素包括131I、77Br和76Br。
在另一实施方案中，本发明的化合物还含盐有碳的放射性同位素作为放射性标记。这涉及的化合物包括一种或多种放射性碳原子，优选11C，该原子具有高于背景水平的特定活性。已知天然存在的元素以多种同位素的形式存在，其中一些为放射性的。天然存在的元素的放射性是这些同为素的天然分布或丰度的结果，并且因此通常称为背景水平。碳标记的本发明化合物具有特定的活性，其高于天然丰度，并且因此高于背景水平。碳标记的本发明组合物可以用于示踪、成像、放射性治疗等。
本领域技术人员熟知各种方式检测标记化合物用于成像目的。例如，正电子发射断层照相术(PET)或单光子发射计算断层照相术(SPECT)可以用来检测放射性标记化合物。引入化合物的标记可以取决于所需的检测方法。本领域技术人员熟悉正电子发射原子诸如18F的PET检测。本发明也涉及本文所述的具体化合物，其中18F原子被非放射性标记的氟原子替换。本领域技术人员熟知SPECT检测光子放射原子，诸如123I或99mTc。
放射性诊断试剂应当具有足够的放射性和放射性浓度，这可以确保可靠的诊断。所需水平的放射性可以通过本发明提供的制备式I化合物的方法所实现。淀粉样沉着物和NTF的成像还可以定量的实施，使得可以确定淀粉样沉着物和NTF的量。
脑的体内成像剂的关键先决条件之一为在推注静脉内注射后穿过血-脑屏障的能力。在本发明方法成像的第一步骤中，将式I的标记化合物以可检测量引入组织或患者中。该化合物通常为药物组合物的一部分，并且通过本领域技术人员已知的方法施用至组织或患者。例如，化合物可以口服、直肠、肠胃外(静脉内、通过肌内或皮下)、脑池内、阴道内、腹膜内、膀胱内、局部(locally)(粉剂、软膏剂、滴剂)或作为含服或鼻腔喷雾给药。
在本发明的其它实施方案中，将标记化合物以可检测量引入患者中，并且在经过足够化合物已经与淀粉样沉着物和/或tau蛋白相关联的时间后，非侵袭性地检测标记化合物。在本发明的另一实施方案中，将式I的标记化合物引入患者中，需要足够的时间使化合物变得与淀粉样沉着物相关联，然后从患者移除组织样品，并且与患者相分离地检测组织中的标记化合物。在本发明的另一实施方案中，将组织样品从患者中除去，并且将式I的标记化合物引入组织样品中。在足够化合物结合至淀粉样沉着物和/或tau蛋白的时间后，检测化合物。
可检测量为被所选检测方法检测到所需的标记化合物的数量。引入患者中为检测所提供的标记化合物量可以由本领域技术人员方便地确定。例如，可以增加向患者给予的标记化合物的量直到由所选检测方法检测到化合物为止。将标记引入化合物中用于检测化合物。
所需的时间量可以由以下容易地确定：通过将可检测量的式I标记化合物引入患者中，并且然后在给予后的不同时间检测标记化合物。
可以通过一般或局部途径向患者给药标记化合物。例如，标记化合物可以向患者给予使其递送到身体各处。或者，标记化合物可以递送到感兴趣的特定器官或组织。例如，有利的是在脑中定位并定量淀粉样沉着物，以诊断或追踪患者中的阿尔茨海默病进展。
本文使用的术语"药用盐"涉及本发明化合物的那些羧酸盐或酸加成盐，其在合理药用判断的范围内适于用来与患者组织接触而无不当的毒性、刺激、过敏性响应等，补偿以合理的益处/风险比率，有效于它们的目的用途，以及涉及本发明化合物的两性离子形式。术语"盐"涉及本发明化合物的相对无毒的、无机的和有机的酸加成盐。也包括那些衍生自无毒有机酸诸如脂族一元羧酸或二元羧酸、芳族酸以及脂族和芳族磺酸的盐，所述脂族一元羧酸或二元羧酸酸例如乙酸、苯基-取代的链烷酸、羟基链烷酸和烷烃二酸。这些盐可以在最终分离和纯化化合物期间原位制备，或者通过单独地使游离碱形式的纯化化合物与合适的有机酸或无机酸反应并分离这样形成的盐而制备。此外，代表性盐包括，但不限于：氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、草酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、硼酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、萘酸盐(naphthylate)、甲磺酸盐、葡庚糖酸盐、乳糖酸盐(lactiobionate)和月桂基磺酸盐、丙酸盐、特戊酸盐、环己氨基磺酸盐(cyclamate)、羟乙基磺酸盐，等。这些可以包括基于碱金属和碱土金属的阳离子，如钠、锂、钾、钙、镁、等，以及基于无毒性铵、季铵和胺阳离子的阳离子，包括单不限于：铵、四甲基铵、四乙基铵、甲基胺、二甲基胺、三甲基胺、三乙基胺、乙基胺，等(参见，例如，Berge S.M.,et al.,Pharmaceutical salts,J.Pharm.Sci.66:1-19(1977)，将其引入本文作为参考)。
本文所使用的术语"烷基"其本身或作为另一基团的一部分涉及最多6个碳、优选最多4个碳的直链和支链基团。
本文所使用的术语"烯"其本身或作为另一基团的一部分涉及在任两个碳原子之间具有双键的最多6个碳、优选最多4个碳的直链和支链基团。
本文所使用的术语"炔"其本身或作为另一基团的一部分涉及在任两个碳原子之间具有三键的最多6个碳、优选最多4个碳的直链和支链基团。炔通常已知为乙炔，尽管名称乙炔特别表示C2H2。
本文所使用的术语"烷氧基"表示连接到氧原子的直链或支链烷基基团，如上述定义，除非链长受到限制，包括但不限于：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基，等。优选地，烷氧基链长为1至4个碳原子，更优选链长为1或2个碳原子。
本文所使用的术语"卤代"或"卤素"其本身或作为另一基团的一部分涉及氯、溴、氟或碘，除非在本文和/或权利要求书中另有定义。
本文所使用的术语"放射性卤素"其本身或作为另一基团的一部分涉及18F、123I、125I、131I、76Br和77Br。
本文所使用的术语"卤代烷基"涉及被一个或多个氯、溴、氟或碘(其中优选氟)取代的任何上述烷基。更优选地，烷基被单个卤素诸如氟在烷基的远端所取代。
术语"放射性卤代烷基"涉及含有卤素放射性同位素的如上定义的卤代烷基。这种类型的基团的一个实例为18F-(C1-4)烷基-。
本文所使用的术语"羟基烷基"其本身或作为另一基团的一部分涉及含有-OH取代基的直链或支链烷基。
本文所使用的术语"芳基"其本身或作为另一基团的一部分涉及在环部分含有5至14个原子的单环、双环、三环或多环芳族基团。本发明的化合物中的芳基包括但不限于无取代的或进一步被取代的苯基、萘基、四氢萘基，等。芳基还可以含有至少一个杂原子，诸如N、S或O，以形成"杂芳基"。杂芳基的实例包括但不限于：无取代或进一步被取代的噻吩基、苯并[b]噻吩基、苯并噻唑基、呋喃基、吡喃基、异苯并呋喃基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、2H-吡咯基、吡咯基、咪唑基、苯并吡唑基、苯并咪唑基、苯并咪唑嘧啶、咪唑并咪唑吡啶、苯并呋喃并吡啶、苯并呋喃并嘧啶、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲嗪基、异吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、吲唑基、4H-喹嗪基、异喹啉基、喹啉基、喹唑啉基、异噻唑基、吩噻嗪基、异噁唑基、呋咱基、吩噁嗪基，等。
本发明所使用的术语"芳基氧基"涉及连接至氧原子的"芳基"，并且包括苄基氧基和苯氧基，其可以进一步被取代，等。
术语"组织"表示患者身体的一部分。其为一起实施特定功能的细胞的总体，这些细胞没有必要是相同的，但是是同一来源。组织的实例包括但是不限于脑、心、肝、血管和动脉。
术语"患者"或“受试者”表示人和其它动物。
本领域技术人员还熟悉足够化合物变成与淀粉样沉着物关联用于成像目的的时间的量。
术语"关联(associated)"表示标记化合物和淀粉样沉着物之间的化学相互作用。关联的实例包括共价键、离子键、疏水-亲水相互作用、疏水-疏水相互作用和复合。
下列实施例示意而非限制本发明的方法和组合物。本领域技术人员通常会遇到各种条件和参数的其它适合的改变和调适，并且这是显然的，且在本发明的范围内。
实验实施例：
注意：当量是指摩尔当量。实际体积是通过将摩尔当量乘以升计算的。因此，1mmol乘以5体积等于5mmol。
1.制备公开化合物的一般方法：
方法A：Suzuki偶联反应的一般方法：
芳基卤/卤代杂环(1.0当量)、硼酸或硼酸酯(1.1-1.5当量)、K2CO3(3.0当量)和Pd[PPh3]4(0.01-0.05当量)在DMF(30mL)中的混合物在Biotage EmrysInitiator微波反应器(250W)中于100°C受照射30分钟。在冷却至室温后，真空除去溶剂。剩余物在快速柱色谱经硅胶(使用EtOAc:己烷或EtOAc:DCM或MeOH:DCM作为洗脱剂)进行纯化，从而得到所期望的联芳产物。
方法B：Sonogashira偶联反应的一般方法：
卤化物(1.0当量)、乙炔(1.1-1.5当量)、CuI(0.05当量)、Pd[PPh3]4或PdCl2(PPh3)2(0.01-0.05当量)和DIPEA(3.0当量)在ACN(30mL)中的混合物在Biotage Emrys Initiator微波反应器(250W)于100°C受照射30分钟。在冷却至室温后，真空除去溶剂。剩余物使用快速柱色谱法经硅胶(使用EtOAc:己烷或EtOAc:DCM或MeOH:DCM作为洗脱剂)进行纯化，从而得到二取代的乙炔衍生物。
方法C：酚的烷基化的一般方法：
在氩气下将酚衍生物(1.0当量)、烷化剂(1.1当量)和Cs2CO3(3.0当量)在DMF(10mL)中的混合物于60℃加热1-3小时。在反应完成后，真空除去溶剂。剩余物使用快速柱色谱法经硅胶(使用EtOAc:己烷或EtOAc:DCM或MeOH:DCM作为洗脱剂)进行纯化，从而得到烷基化的产物。
方法D：使用NaH作为碱进行N-烷基化的一般方法：
向胺(1.0当量)在DMF(10mL)中的溶液中加入NaH(1.5-6当量)，接着加入烷化剂(1.1-2当量)。室温搅拌反应混合物1-15小时，并通过LCMS监控。然后将反应混合物倒入水(50mL)中，并用EtOAc(4x20mL)萃取。合并的有机层用H2O(3x20mL)、盐水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。剩余物在快速柱色谱上经硅胶(使用EtOAc:己烷或EtOAc:DCM或MeOH:DCM作为洗脱剂)进行纯化，得到N-烷基化的产物。
方法E：使用Cs2CO3作为碱进行N-烷基化的一般方法：
向胺(1.0当量)在DMF(10mL)中的溶液中加入烷化剂(1.1-2当量)和Cs2CO3(2-3当量)。在60℃搅拌反应混合物1-15小时。在反应完成后，真空除去溶剂。将水(30mL)加入剩余物中。如果所期望的产物沉淀为固体，则将其过滤，用水洗涤并干燥得到纯产物。如果所期望的产物没有沉淀出来，则用EtOAc(4x40mL)萃取混合物。合并的有机层用H2O(3x40mL)、盐水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。剩余物在快速柱色谱上经硅胶(使用EtOAc:己烷或EtOAc:DCM或MeOH:DCM作为洗脱剂)进行纯化，从而得到N-烷基化的产物。
方法F：醇的甲苯磺酰化的一般方法：
ROH+Ts2O→ROTs
向醇(1.0当量)在DCM(20mL)中的冷却溶液中加入Ts2O(1.5当量)和Et3N(3.0当量)。在0℃搅拌反应混合物，然后逐渐温热至室温，并在室温搅拌1-5小时。在反应完成后，真空除去DCM。剩余物使用快速柱色谱法经硅胶(使用EtOAc:己烷作为洗脱剂)进行纯化，从而得到最终的甲苯磺酸酯。
方法G：芳基甲基醚的脱甲基化的一般方法：
ArOMe→ArOH
向芳基甲基醚(1.0当量)在DCM(10mL)中的冷却溶液中缓慢加入BBr3(5.0当量)。在0℃搅拌所得混合物，然后逐渐温热至室温，并在室温搅拌15小时。在反应完成后，反应使用NaHCO3溶液(50mL)淬灭，并且用DCM(4x10mL)萃取。合并的有机层用H2O(3x10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，并真空浓缩，从而得到所期望的酚。
方法H：使用CuI和DIPEA在叠氮化合物和乙炔之间的Click反应的一般方法：
向叠氮化合物衍生物(1.0当量)在THF(29mL)中的溶液中加入乙炔衍生物(1.0当量)、CuI(0.2当量)、DIPEA(0.4当量)。在室温在氩气下搅拌反应混合物，直到通过LCMS认为反应完成。然后真空浓缩反应混合物。剩余物在快速柱色谱上经硅胶(使用EtOAc:己烷作为洗脱剂)进行纯化，从而得到最终的三唑。
方法I：使用K2CO3进行甲硅烷基脱保护的一般方法：
向甲硅烷基保护的化合物(1.0当量)在MeOH(20mL)中的溶液中加入K2CO3(1.2当量)。室温搅拌反应混合物1小时。在反应完成后，真空除去溶剂。剩余物在快速柱色谱上经硅胶(使用EtOAc:己烷作为洗脱剂)进行纯化，从而得到脱保护的产物。
方法J：使用TBAF进行甲硅烷基脱保护的一般方法：
向甲硅烷基保护的化合物(1.0当量)在THF(20mL)中的溶液中加入TBAF在THF(1.0M,1.0当量)中的溶液中。室温搅拌反应混合物10分钟。在反应完成后，真空除去溶剂。剩余物在快速柱色谱上经硅胶(使用EtOAc:己烷作为洗脱剂)进行纯化，从而得到脱保护的产物。
方法K：Boc、THP和缩酮衍生物的脱保护的一般方法：
向脱保护的衍生物(1.0当量)在1,4-二噁烷(20mL)中的溶液中加入HCl在1,4-二噁烷(4.0M,3.8mL)中的溶液。在室温搅拌反应混合物，并通过LCMS监控。在反应完成后，真空除去溶剂，从而得到所期望的脱保护产物。
方法L：从硝基吡啶基化合物转化成氟代吡啶基化合物的一般方法：
向硝基吡啶基衍生物(1.0当量)在DMSO(10mL)中的溶液中加入KF(5当量)。在140℃搅拌反应混合物1.5小时。在反应完成后，反应用水(10mL)淬灭，并用DCM(4x10mL)萃取。合并的有机层用H2O(3x10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。剩余物在快速柱色谱上经硅胶(使用EtOAc:己烷或EtOAc:DCM或MeOH:DCM作为洗脱剂)进行纯化，从而得到F-吡啶基化合物。
方法M：氟代吡啶基化合物转化成氨基吡啶基化合物的一般方法：
氟代吡啶基衍生物(1.0当量)和胺衍生物(过量)的混悬液在BiotageEmrys Initiator微波反应器(250W)中于120℃受照射10分钟。在反应完成后，反应用水(10mL)淬灭，并用DCM(4x10mL)萃取。合并的有机层用H2O(3x10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。剩余物在快速柱色谱上经硅胶(使用EtOAC:DCM作为洗脱剂)进行纯化，从而得到氨基吡啶基化合物。
方法N：使用CuSO4.H2O和抗坏血酸钠在叠氮化合物和乙炔之间进行Click反应的一般方法：
向叠氮化合物衍生物(1.0当量)在t-BuOH:H2O(1:1,100mL)混合物中的溶液中加入乙炔(0.9-1.2当量)、CuSO4.5H2O(0.2当量)和L-抗坏血酸钠(0.4当量)。在氩气下在室温搅拌所得反应混合物，直到通过LCMS认为反应完成。在反应完成后，真空除去溶剂。剩余物与水(100mL)混合，冷却至0℃，并且过滤。收集的固体用乙醚(5x10mL)洗涤，并真空干燥，从而得到最终的三唑。
方法O：氟化的一般方法：
X＝OTs或Br
向前体(甲苯磺酸烷基酯/烷基溴，1.0当量)在乙腈(1.0mL)中的溶液中加入Bu4NF在THF(4M,1.0当量)中的溶液。在90°C搅拌反应混合物30分钟，并冷却。反应混合物用水/乙腈(1mL)稀释，通过0.45μm滤器过滤，然后通过HPLC(使用均含有0.05%TFA的ACN:水)进行纯化，从而得到氟化产物。
方法P：使用TFA进行Boc和缩酮脱保护的一般方法：
向受保护的化合物(1.0当量)在DCM(100mL)中的溶液中加入TFA(10mL)。所得反应混合物室温搅拌15小时，然后倒入水(200mL)。混合物用DCM(2x100mL)萃取。合并的有机层用饱和NaHCO3溶液(50mL)、盐水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。剩余物在快速柱色谱上经硅胶(使用EtOAc:己烷作为洗脱剂)进行纯化，从而得到脱保护的产物。
方法Q：从醇对苯胺进行一锅法(one-pot)还原胺化的一般方法。
向醇(0.2mmol)在DCE(1mL)中的溶液中加入戴斯-马丁试剂(Dess-martin reagent)(0.2mmol)。室温搅拌混合物15分钟，并使用注射器式滤器滤出固体。将滤液加入至取代苯胺(0.1mmol)和NaBH(OAc)3(0.3mmol)在DCE(1mL)中的溶液中。室温搅拌混合物5至10分钟，并用1N NaOH溶液(1mL)快速淬灭。分离DCE层并真空浓缩。剩余物通过快速色谱法(硅胶，0-20%EtOAc/DCM)进行纯化，从而得到所期望的单烷基化苯胺。
方法R：使用低聚甲醛对苯胺进行还原二甲基化的一般方法。
向低聚甲醛(1.0mmol)在THF(5mL)的混悬液中加入浓硫酸(98%,0.1mL,1.9mmol)。室温搅拌混合物，同时将苯胺(0.1mmol)和NaBH4(1.0mmol)在THF(5mL)中的溶液加入至上述低聚甲醛混悬液中。室温搅拌混合物30分钟，并通过加入1N NaOH溶液(1mL)淬灭。浓缩混合物，并且剩余物在DCM和水之间分配。分离DCM层，并真空浓缩。剩余物通过快速色谱法(硅胶，0-10%EtOAc/DCM)纯化，得到所期望的N,N-二甲基苯胺。
方法S：制备苯并咪唑衍生物的一般方法：
将2-氨基苯胺(1.0当量)、苯甲醛/醛衍生物(1.0当量)和1,4-苯醌(1.0当量)在EtOH(10mL)中的溶液在95℃加热4-6小时，然后冷却，并真空浓缩。剩余物在快速柱色谱(硅胶，0-5%EtOAc/DCM)上纯化，得到所期望产物。
2.根据上述一般方法制备要求保护的化合物：
制备W366
制备2-碘-6-甲氧基苯并[d]噻唑(2)。
于0°C向100mL配有磁力搅拌棒的圆底烧瓶中加入ACN(33.0mL)和PTSA(6.3g,33.33mmol)、1(2.0g,11.11mmol)并搅拌15分钟。向其中加入NaNO2(1.5g,22.22mmol)和KI(4.6g,27.78mmol)在H2O(7mL)中的溶液并室温搅拌4小时。向反应混合物中加入H2O(175mL)，然后用饱和NaHCO3调节成碱性(pH＝9)并加入Na2S2O3(2M,23mL)。所得反应混合物用EtOAc(3x50mL)萃取。合并的有机萃取物用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经MgSO4干燥并真空浓缩。剩余物经硅胶(使用EtOAc:己烷(0.5:9.5)作为洗脱剂)纯化，得到2(1.62g,50%)，为白色结晶固体。1H NMR(400MHz,CDCl3),δ：3.85(s,3H),7.00 7.04(m,1H),7.24-7.27(m,1H),7.89(d,J＝9.19Hz,1H)；MS(ESI)291.9(M+H+)。
制备4-溴-2-氟-N-甲基苯胺(4)。
在室温向100mL配有磁力搅拌棒的圆底烧瓶中加入MeOH(26.0mL)、3(0.5g,2.63mmol)、NaOMe(0.71g,13.16mmol)和低聚甲醛(0.394g,13.16mmol)。反应混合物回流2小时。然后将反应混合物冷却至0℃，并分份加入NaHB4(0.5g,13.16mmol)。添加后，反应混合物再次回流1小时。反应完成后，除去MeOH，加入水(50mL)，并用EtOAc(3x30mL)萃取。合并的有机萃取物用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经MgSO4干燥并真空浓缩。剩余物经硅胶(使用EtOAc:己烷(0.5:9.5)作为洗脱剂)进行纯化，得到4(0.5g,93%)，为棕色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3),δ：2.86(s,3H),6.64 6.68(m,1H),7.11-7.15(m,2H)；MS(ESI)：203.9(M+H+)。
制备2-氟-N-甲基-4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯胺(6)。
5mL微波管中装有在DMF(2.5mL)中的4(0.5g,2.45mmol)、5(0.7mL,4.9mmol)、[Pd(PPh3)4](0.3g,0.245mmol)、CuI(0.07g,0.37mmol)和NH(C2H5)2(0.8mL,7.35mmol)。混悬液在Biotage Emrys Optimizer微波反应器(250W)中于100℃受照射15分钟。冷却至室温后，加入水(50mL)，然后用EtOAc(3x30mL)萃取。合并的有机萃取物用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经MgSO4干燥，粗混合物用于下一步。MS(ESI)：222.1(M+H+)。
制备4-乙炔基-2-氟-N-甲基苯胺(7)。
向配有磁力搅拌棒的25mL圆底烧瓶中加入6(粗制0.4g)、MeOH(9mL)和K2CO3(0.5g,3.62mmol)。反应混合物在RT搅拌30分钟。向反应混合物中，加入硅胶(约10g)并真空浓缩。剩余经硅胶(使用EtOAc:己烷(1:3)作为洗脱剂)进行纯化，得到7(0.26g,96%)，为棕色油状物。MS(ESI)：150.1(M+H+)。
制备2-氟-4-{(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基)乙炔基)-N-甲基苯胺(8)。
5mL微波管中装有在ACN(2.0mL)中的2(0.2g,0.68mmol)、7(0.1g,0.68mmol)、[Pd(PPh3)4](0.08g,0.034mmol)、CuI(0.02g,0.05mmol)和TEA(0.28mL,2.04mmol)。混悬液在Biotage Emrys Optimizer微波反应器(250W)中于100℃受照射5分钟。冷却至室温后，真空蒸发溶剂。剩余物经硅胶(使用己烷:二氯甲烷(DCM)(0-100%)作为洗脱剂)进行纯化，得到偶联产物8(0.084g,39%)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3),δ：2.92(s,3H),3.87(s,3H),6.64(t,J＝8.4Hz,1H),7.11(dd,J＝12.0,4.0Hz,1H),7.22(dd,J＝10.4,2Hz,1H),7.27(d,J＝2.4,1H),7.33-7.35(m,1H),7.96(d,J＝12Hz,1H)；MS(ESI)：313.0(M+H+)。
制备2-((3-氟-4-(甲基氨基)苯基)乙炔基)苯并[d]噻唑-6-醇(W366)。
含有DCM(5.2mL)的25mL配有磁力搅拌棒的圆底烧瓶置有8(0.08g,0.26mmol)。反应混合物冷却至0℃，并滴加BBr3(0.75mL，1M的DCM溶液)加入。反应混合物在RT搅拌8小时。然后使用饱和NaHCO3中和反应混合物并在DCM(2x10mL)中萃取。合并的有机萃取物用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经MgSO4干燥并真空浓缩。剩余物经硅胶(使用EtOAc:己烷(1:3)作为洗脱剂)进行纯化，得到W366(0.02g,26%)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6),δ：2.5(d,J＝10.4Hz,3H),6.06-6.08(m,1H),6.42(t,J＝8.8Hz,1H),6.74(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.05-7.14(m,2H),7.54(d,J＝8.8,1H),9.76(宽单峰,1H)；MS(ESI)：299.0(M+H+)。
制备W378标准：
制备2-碘-5-甲氧基噻唑并[5,4-b]吡啶(10)。
于0℃向配有磁力搅拌棒的25mL圆底烧瓶中加入ACN(4.0mL)、PTSA(0.79g,4.14mmol)和9(0.25g,1.38mmol)，并搅拌15分钟。向其中加入NaNO2(0.19g,2.76mmol)和KI(0.57g,3.45mmol)在H2O(0.9mL)中的溶液，并室温搅拌4小时。反应混合物然后加至H2O(15mL)中，用饱和NaHCO3调节成碱性(pH＝9)，并加入Na2S2O3(2M,3mL)。所得反应混合物用EtOAc(3x20mL)萃取。合并的有机萃取物用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经MgSO4干燥并真空浓缩。剩余物经硅胶(使用EtOAc:己烷(1:4)作为洗脱剂)进一步纯化，得到10(0.12g,30%)，为白色结晶固体。1H NMR(400MHz,CDCl3),δ：3.97(s,3H),6.77(d,J＝8.8Hz,1H),8.08(d,J＝8.8Hz,1H)；MS(ESI)：292.9(M+H+)。
制备2-氟-4-((5-甲氧基噻唑并[5,4-b]吡啶-2-基)乙炔基)-N-甲基苯胺(W378)。
5mL微波管中装有在ACN(2.0mL)中的10(0.12g,0041mmol)、7(0.06g,0041mmol)、[Pd(PPh3)4](0.05g,0.004mmol)、CuI(0.012g,0.06mmol)和TEA(0.2mL,1.23mmol)。混悬液在Biotage Emrys Optimizer微波反应器(250W)中于100℃受照射5分钟。冷却至室温后，真空蒸发溶剂。剩余物经硅胶(使用己烷:DCM(0-100%)作为洗脱剂)进行纯化，得到偶联产物W378(0.04g,31%)，为黄色固体。MS(ESI)：314.0(M+H+)。
制备W366标记前体：
制备4-((6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基)乙炔基)-N-甲基-2-硝基苯胺.
5mL微波管装有在ACN(5体积)中的2(l当量)、4-乙炔基-N-甲基-2-硝基苯胺(l当量)、[Pd(PPh3)4](0.05当量)、CuI(0.05当量)和TEA(5当量)。混悬液在Biotage Emrys Optimizer微波反应器(250W)中于100℃受照射5分钟。在冷却至室温后，真空蒸发溶剂。剩余物经硅胶(使用己烷:DCM(0-100%)作为洗脱剂)进行纯化，得到偶联产物。
制备2-((4-(甲基氨基)-3-硝基苯基)乙炔基)苯并[d]噻唑-6-醇.
向含DCM(5体积)的配有磁力搅拌棒的圆底烧瓶置入4-((6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基)乙炔基)-N-甲基-2-硝基苯胺(l当量)。反应混合物冷却至0℃，滴加BBr3(5当量的1M DCM溶液)，室温搅拌反应混合物8小时。反应混合物用饱和NaHCO3中和，在DCM(2x5体积)中萃取。合并的有机萃取物用水(5体积)、盐水(5体积)洗涤，经MgSO4干燥并真空浓缩。经硅胶(使用EtOAc:己烷(1:3)作为洗脱剂)纯化剩余物，得到所需产物。
制备4-((6-(乙氧基甲氧基)苯并[d]噻唑-2-基)乙炔基)-N-甲基-2-硝基苯胺.
在氩气下向含2-((4-(甲基氨基)-3-硝基苯基)乙炔基)苯并[d]噻唑-6-醇(1当量)的圆底烧瓶中加入THF(5体积)。向该溶液中加入NaH(1.3当量)。室温搅拌该溶液30分钟。向该溶液中加入MOM-Cl(1.5当量)。室温搅拌反应混合物过夜。将反应混合物倒入水(10体积)中，并在DCM(10体积)中萃取。有机层用水洗涤(10体积)，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩至干燥。经硅胶(使用EtOAc:己烷作为洗脱剂)纯化该物质，得到最终产物。
制备N-(4-((6-(乙氧基甲氧基)苯并[d]噻唑-2-基)乙炔基)-2-硝基苯基)-N-甲基甲酰胺(W366标记前体)。
向含4-((6-(乙氧基甲氧基)苯并[d]噻唑-2-基)乙炔基)N-甲基-2-硝基苯胺(1当量)的圆底烧瓶中加入甲酸(5当量)、乙酸酐(5当量)和DCM(5体积)。将反应混合物加热至60℃保持7天。反应混合物然后真空浓缩，并经硅胶(使用EtOAc:己烷作为洗脱剂)纯化该物质，得到最终产物。
制备2-(吡啶-4-基)喹啉(T123)
2-(吡啶-4-基)喹啉T123使用一般方法A从2-氯喹啉(82mg,0.5mmol)和吡啶-4-基硼酸(61.5mg,0.5mmol)制备。所得产物为灰白色固体(100mg,97%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.75(dd,J＝5.0,1.6Hz,2H),8.26(d,J＝8.8Hz,1H),8.16(d.J＝8.4Hz,1H),8.04(m,2H),7.87(d,J＝8.4Hz,1H),7.83(d,J＝8.0Hz,1H),7.74(m,1H),7.55(m,J＝1H)；MS(ESI)：207(M+H+)。
制备5-(喹啉-2-基)吡啶甲腈(T124)
5-(喹啉-2-基)吡啶甲腈T124使用一般方法A从2-氯喹啉(82mg,0.5mmol)和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶甲腈(115mg,0.5mmol)制备。所得产物为黄色固体(3mg,3%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.48(dd,J＝2.4,0.8Hz,1H),8.69(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),8.33(d,J＝8.8Hz,1H),8.19(d,J＝8.4Hz,1H),7.93(d,J＝8.4Hz,1H),7.90(dd,J＝8.4,1.2Hz,1H),7.87(dd,J＝8.4,0.8Hz,1H),7.81(m,1H),7.63(m,1H)；MS(ESI):232(M+H+)。
制备N，N-二甲基-5-(喹啉-2-基)吡啶-2-胺(T125)
N，N-二甲基-5-(喹啉-2-基)吡啶-2-胺T125使用一般方法A从2-氯喹啉(82mg,0.5mmol)和(6-(二甲基氨基)-吡啶-3-基)硼酸(83mg,0.5mmol)制备。所得产物为黄色固体(90mg,72%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.93(dd,J＝2.4,1H),8.40(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),8.15(d,J＝8.4Hz,1H),8.09(d,J＝8.6Hz,1H),7.78(d,J＝7.2Hz,1H),7.70(m,1H),7.47(m,1H),6.65(dd,J＝8.8,0.8Hz,1H),3.18(s,6H)；MS(ESI)：250(M+H+)。
制备2-(4-氟吡啶-3-基)喹啉(T126)
2-(4-氟吡啶-3-基)喹啉T126使用一般方法A从2-氯喹啉(82mg,0.5mmol)和(5-氟吡啶-3-基)硼酸(70mg,0.5mmol)制备。所得产物为白色固体(80mg,71%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.93(m,1H),8.63(m,1H),8.24(d,J＝8.8Hz,1H),8.13(dd,J＝8.8,0.8Hz,1H),7.82(m,2H),7.74(m,1H),7.06(m,1H)；MS(ESI)：225(M+H+)。
制备2-(6-氟吡啶-3-基)喹喔啉(T127)
2-(6-氟吡啶-3-基)喹喔啉T127使用一般方法A从2-(6-氟吡啶-3-基)喹喔啉(82mg,0.5mmol)和2-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(111mg,0.5mmol)制备。所得产物为白色固体(93mg,82%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.32(s,1H),9.00(m,1H),8.66(m,1H),8.15(m,2H),7.82(m,2H),7.15(m,1H)；MS(ESI)：226(M+H+)。
制备2-(吡啶-3-基)喹喔啉(T128)
2-(吡啶-3-基)喹喔啉T128使用一般方法A从2-氯喹啉(82mg,0.5mmol)和(5-氟吡啶-3-基)硼酸(70mg,0.5mmol)制备。所得产物为白色固体(80mg,71%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.40(d,J＝2.0Hz,1H),9.33(s,1H),8.75(dd,J＝4.8Hz,1Hz,8.51(m,1H),8.15(m,2H),7.79(m,2H),7.49(m,1H)；MS(ESI)：208(M+H+)。
制备
2-(6-氟吡啶-3-基)-6-甲氧基喹啉T138使用一般方法A从2-氯-6-甲氧基喹啉(65mg,0.33mmol)和2-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(75mg,0.33mmol)制备。所得产物为黄色固体(30mg,35%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.91(m,1H),8.63(m,1H),8.16(d,J＝8.4Hz,1H),8.05(d,J＝9.2Hz,1H),7.80(d,J＝8.8Hz,1H),7.41(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.11(d,J＝2.8Hz,1H),7.08(m,1H)；3.96(s,3H)；MS(ESI)：255(M+H+)。
制备
4-(6-甲氧基喹啉-2-基)-N，N-二甲基苯胺T139使用一般方法A从2-氯-6-甲氧基喹啉(65mg,0.33mmol)和(4-(二甲基氨基)苯基)硼酸(55mg,0.33mmol)制备。所得产物为黄色固体(30mg,33%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.06(d,J＝8.8Hz,2H),8.02(dd,J＝8.4,6.4Hz,2H),7.78(d,J＝8.8Hz,1H),7.33(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.06(d,J＝2.8Hz,1H),6.83(m,2H),3.93(s,3H),3.03(s,6H)；MS(ESI)：279(M+H+)。
制备
5-(喹啉-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁酯T432使用一般方法A从2-氯喹喔啉(24mg,0.145mmol)和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯(50mg,0.145mmol)制备。所得产物为白色蜡状物(30mg,60%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.55(dd,J＝1.6,0.8Hz,1H),8.41(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),8.32(d,J＝8.8Hz,1H),8.29(s,1H),8.26(d,J＝8.4Hz,1H),8.18(d,J＝8.4Hz,1H),7.95(d,J＝8.8Hz,1H),7.75(m,1H),7.55(m,1H),1.76(s,9H)；MS(ESI)：346(M+H+)。
制备
2-(1H-吲哚-5-基)喹啉T433使用一般方法P制备。该反应在10mg规模的T432上进行。T433分离为黄色固体(5mg,35%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.83(t,1H),8.70-8.51(m,4H),8.24-8.22(m,1H),8.14-8.08(m,3H),8.00(d,J＝8.8Hz,0.5H),7.88(m,1H),7.68(d,J＝8.4Hz,0.5H)；MS(ESI)：246(M+H+)。
制备
2-(1-甲基-1H-吲哚-5-基)喹啉T453使用一般方法A从2-氯喹啉(32mg,0.2mmol)和1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吲哚(51mg,0.2mmol)制备。所得产物为灰白色固体(22mg,42%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.43(dd,J＝2.0,0.8Hz,1H),8.17(d,J＝8.8Hz,2H),8.12(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.95(d,J＝8.8Hz,1H),7.80(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.70(m,1H),7.48(m,1H),7.44(d,J＝8.8Hz,1H),7.09(d,J＝3.2Hz,1H),6.60(dd,J＝3.2,0.8Hz,1H),3.82(s,3H)；MS(ESI)：259(M+H+)。
制备2-(1-(3-氟丙基)-1H-吲哚-5-基)喹啉(T461)
2-(1H-吲哚-5-基)喹啉使用一般方法A从2-氯喹啉(32mg,0.2mmol)和1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吲哚(51mg,0.2mmol)制备。所得产物为灰白色固体(22mg,42%)。MS(ESI)：245(M+H+)。
2-(1-(3-氟丙基)-1H-吲哚-5-基)喹啉T461使用一般方法E制备。该反应在24mg规模的2-(1H-吲哚-5-基)喹啉上进行。T461分离为黄色蜡状物(0.8mg,2.6%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.70(d,J＝8.4Hz,1H),8.67(d,J＝8.8Hz,1H),8.44(d,J＝1.2Hz,1H),8.10(d,J＝9.2Hz,1H),8.03-7.98(m,3H),7.78(t,J＝7.2Hz,1H),7.56(d,J＝8.8Hz,1H),7.24(d,J＝3.2Hz,1H),6.71(d,J＝3.2Hz,1H),4.47(t,J＝5.2Hz,1H),4.36(m,3H),2.29-2.16(m,2H)；MS(ESI)：305(M+H+)。
制备4-(4-氟喹啉-2-基)-N-甲基苯胺(T466)
甲基(4-(4-硝基喹啉-2-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯
在氯仿(12mL)中的4-硝基喹啉1-氧化物(940mg,4.9mmol)冷却至0℃。分小份向该溶液中加入POBr3(1.77g,6.2mmol)。0℃搅拌混合物2小时，并用DCM(50mL)稀释，并倒在冰(50g)上。向该混悬液中，加入1M NaOH将pH调节成约9。分离各层，有机层用水(2x50mL)洗涤，经MgSO4干燥并浓缩。通过硅胶色谱法纯化粗产物，得到2-溴-4-硝基喹啉，为黄色固体(620mg,50%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.63-7.94(m,2H),8.06(s,1H),8.17(t,J＝7.16,6.84Hz,1H),8.38(d,J＝8.76Hz,1H)。
2-溴-4-硝基喹啉(50mg,0.2mmol)和甲基(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(66mg,0.2mmol)反应，使用一般方法(A)，得到甲基(4-(4-硝基喹啉-2-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯，为黄色油状物(52mg,68%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.43-8.40(m,2H),8.28(m,1H),8.19(m,2H),7.87(m,1H),7.73(m,1H),7.46(m,2H),3.35(s,3H),1.59(s,3H),1.50(s,9H)；MS(ESI)：380(M+H+)。
4-(4-氟喹啉-2-基)-N-甲基苯胺T466
甲基(4-(4-氟喹啉-2-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯使用一般方法M从甲基(4-(4-硝基喹啉-2-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(10mg,0.026mmol)和KF(60mg,1mmol)制备。(4-(4-氟喹啉-2-基)苯基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯分离为澄清油状物(4.5mg,49%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.16(m,1H),8.12-8.07(m,3H),7.78(m,1H),7.59-7.54(m,2H),7.41(m,1H),3.32(s,3H),1.48(s,9H)；MS(ESI)：353(M+H+)。
(4-(4-氟喹啉-2-基)苯基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(4.5mg,0.013mmol)使用TFA处理，通过使用一般方法P。通过HPLC纯化粗产物得到T466，为橙色固体(1.8mg,55%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.57(d,J＝8.4Hz,1H),8.02-7.97(m,3H),7.75(t,J＝7.6Hz,1H),7.56(d,J＝10.0Hz,1H),6.72(d,J＝8.4Hz,2H),2.95(s,3H)；MS(ESI)：253(M+H+)。
制备N-甲基-4-(喹啉-3-基)苯胺(T477)
3-溴喹啉(42mg,0.2mmol)和甲基(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(66mg,0.2mmol)反应，使用一般方法(A)，得到甲基(4-(喹啉-3-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯，为澄清蜡状物(44mg,66%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.18(d,J＝2.4Hz,1H),8.31(d,J＝2.0Hz,1H),8.15(m,1H),7.89(m,1H),7.73(m,1H),7.68(m,2H),7.59(m,1H),7.42(m,2H),3.3(s,3H),1.50(s,9H)；MS(ESI)：335(M+H+)。
甲基(4-(喹啉-3-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(44mg,0.13mmol)然后用TFA处理，通过使用一般方法P。通过HPLC纯化粗产物得到T477，为橙色蜡状物(13mg,29%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.46(d,J＝2.0Hz,1H),8.79(d,J＝1.6Hz,1H),8.47(d,J＝8.4Hz,1H),8.08(d,J＝8.4Hz,1H),7.95(m,1H),7.83(m,1H),7.62(m,2H),6.82(m,2H),2.94(s,3H)；MS(ESI)：235(M+H+)。
制备
5-(4-氟喹啉-2-基)-N，N-二甲基吡啶-2-胺T480使用一般方法M从N，N-二甲基-5-(4-硝基喹啉-2-基)吡啶-2-胺(4mg,0.014mmol)和KF(16mg,0.28mmol)制备。通过硅胶色谱法纯化粗产物，得到5-(4-氟喹啉-2-基)-N，N-二甲基吡啶-2-胺，为浅棕色固体(1.4mg,37%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.89(d,J＝2.8Hz,1H),8.36(dd,J＝11.6Hz,1H),8.09(m,1H),8.04(m,1H),7.73(m,1H),7.51(m,1H),7.47(d,J＝11.6Hz,1H),6.64(d,J＝9.2Hz,1H),3.19(s,6H)；MS(ESI)：268(M+H+)。
制备
4-(4-氟喹啉-2-基)苯胺T492使用一般方法M从4-(4-硝基喹啉-2-基)苯胺(6mg,0.02mmol)和KF(26mg,0.45mmol)制备，通过硅胶色谱法纯化粗产物得到4-(4-氟喹啉-2-基)苯胺，为黄色固体(2mg,42%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.11(m,1H),8.03(m,1H),8.00(m,2H),7.72(m,1H),7.51(m,1H),7.48(d,J＝11.6Hz,1H),6.80(m,2H),3.93(宽单峰,2H)；MS(ESI)：239(M+H+)。
制备
4-(异喹啉-3-基)-N，N-二甲基苯胺T500使用一般方法A从3-氯异喹啉(41mg,0.25mmol)和(4-(二甲基氨基)苯基)硼酸(41mg,0.25mmol)制备。所得产物T500为白色固体(11mg,17%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.27(s,1H),8.05(m,2H),7.94(s,1H),7.93(d,J＝6.8Hz,1H),7.81(d,J＝8.4Hz,1H),7.63(m,1H),7.49(m,1H),6.84(m,2H),3.03(s,6H)；MS(ESI)：249(M+H+)。
制备
3-氯异喹啉(33mg,0.2mmol)和甲基(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(66mg,0.2mmol)反应，使用一般方法A得到(4-(异喹啉-3-基)苯基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯，为澄清油状物(12mg,18%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.33(s,1H),8.09(m,2H),8.05(s,1H),7.99(m,1H),7.87(m,1H),7.69(m,1H),7.58(m,1H),7.38(m,2H),3.32(s,3H),1.48(s,9H)；MS(ESI)：335(M+H+)。
4-(异喹啉-3-基)-N-甲基苯胺T501使用一般方法K制备。该反应在12mg规模的(4-(异喹啉-3-基)苯基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯上进行。T501分离为灰白色固体(7mg,72%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.71(s,1H),8.68(s,1H),8.47(d,J＝8.4Hz,1H),8.29 9d,J＝8.0Hz,1H),8.19(m,1H),8.01-7.95(m,3H),7.34 9d,J＝8.8Hz,2H),3.02(s,3H)；MS(ESI)：235(M+H+)。
制备
N，N-二甲基-4-(喹啉-7-基)苯胺T504使用一般方法A从7-溴喹啉(52mg,0.25mmol)和(4-(二甲基氨基)苯基)硼酸(41mg,0.25mmol)制备。所得产物T504为黄色固体(52mg,83%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.89(dd,J＝4.4,1.6Hz,1H),8.28(m,1H),8.12(dq,J＝8.4,0.8Hz,1H),7.81(d,J＝1.2Hz,2H),7.68(m,2H),7.33(dd,J＝8.4,4.4Hz,1H),6.84(m,2H),3.00(s,3H)；MS(ESI)：249(M+H+)。
制备
N，N-二甲基-4-(喹啉-6-基)苯胺T505使用一般方法A从6-溴喹啉(52mg,0.25mmol)和(4-(二甲基氨基)苯基)硼酸(41mg,0.25mmol)制备。所得产物T505为黄色固体(42mg,67%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.85(dd,J＝4.4,1.6Hz,1H),8.15(m.2H),7.97(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.92(d,J＝2.0Hz,1H),7.63(m,2H),7.38(dd,J＝8.4,4.4Hz,1H),6.84(m,2H),3.01(s,6H)；MS(ESI)：249(M+H+)。
制备
N-甲基-4-(喹啉-6-基)苯胺T514使用一般方法A从6-溴喹啉(41mg,0.2mmol)和N-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(46mg,0.2mmol)制备。所得产物T514为黑色固体(20mg,43%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.86(dd,J＝4.4,1.6Hz,1H),8.189m,1H),8.13(d,J＝9.2Hz,1H),7.96(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.92(d,J＝2.0Hz,1H),7.59(m,2H),7.40(dd,J＝8.4,4.4Hz,1H),6.74(m,2H),2.91(s,3H)；MS(ESI)：235(M+H+)。
制备
N-甲基-4-(喹啉-7-基)苯胺T515使用一般方法A从7-溴喹啉(41mg,0.2mmol)和N-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(46mg,0.2mmol)制备。所得T515为黄色蜡状物(18mg,38%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.90(dd,J＝4.0,1.2Hz,1H),8.26(m,1H),8.13(m,1H),7.82-7.81(m,2H),7.64(m,2H),7.34(dd,J＝8.4,4.4Hz,1H),6.73(m,2H),2.90(s,3H)；MS(ESI)：235(M+H+)。
制备
4-(6-甲氧基喹啉-2-基)-N-甲基苯胺T523使用一般方法A从2-氯-6-甲氧基喹啉(39mg,0.2mmol)和N-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(46mg,0.2mmol)制备。所得T523为棕色固体(27mg,51%)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ8.03-7.99(m,4H),7.75(d,J＝8.4Hz,1H),7.33(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.04(d,J＝2.8Hz,1H),6.71(m,2H),3.92(s,3H),2.89(s,3H)；MS(ESI)：235(M+H+)。
制备
1-(4-(6-氟吡啶-3-基)苯基)乙酮T405使用一般方法A从1-(4-溴苯基)乙酮(117mg,0.5mmol)和2-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(100mg,0.5mmol)制备。T405得到为黄色固体(64mg,59%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.47(m,1H),8.069m,2H),8.04-7.99(m,1H),7.65(m,2H),7.05(ddd,J＝8.4,3.2,0.8Hz,1H),2.65(s,3H)；MS(ESI)：216(M+H+)。
制备5-((1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)吡啶-2-胺(T568)
(5-乙炔基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯使用一般方法J从(5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(200mg,0.69mmol)制备。得到的产物为白色固体(98mg,65%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)：δ8.44(dd,J＝2.0,0.8Hz,1H),7.69(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.33(dd,J＝8.4,0.8Hz,1H),6.09(s,1H),3.17(s,1H),1.26(s,9H)。
(5-乙炔基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(22mg,0.1mmol)和2-溴-1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑(24.3mg,0.1mmol)使用一般方法B反应得到(5-((1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(12mg,31%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)：8.51(d,J＝1.6Hz,1H),8.47(m,1H),7.88(dd,J＝8.8,2.4Hz,7.40-7.34(m,3H),7.31(d,J＝12.8Hz,6.22(s,1H),4.80(t,J＝4.8Hz,1H),4.68(t,J＝4.8Hz,1H),4.53(m,1H),4.47(m,1H),1.55(s,9H)。
5-((1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)吡啶-2-胺使用一般方法P从(5-((1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(10mg,0.026mmol)制备。产物T568得到为黄色固体(0.5mg,5%)。1H NMR(300MHz,MeOH-d4)：δ8.32(宽单峰,1H),8.01(dd,J＝9.2,1.6Hz,1H),7.71-7.66(m,2H),7.45(t,J＝7.2Hz,1H),7.412(m,1H),6.98(d,J＝9.2Hz,1H),4.89-4.76(m,4H)；MS(ESI)：281(M+H+)。
制备
4-(6-甲氧基喹啉-2-基)苯基)(N-甲基)氨基甲酸叔丁酯T406使用一般方法A制备。反应在0.1g规模上进行。T406分离为灰白色固体(0.118g,62%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.10-8.07(m,4H),7.80(d,J＝8.4Hz,1H),7.36(dt,J＝8.4,2.0Hz,3H),7.07(d,J＝2.8Hz,1H),3.93(s,3H),3.30(s,3H),1.46(s,9H),2.56(宽单峰,2H)；MS(ESI)：365.2(M+H+)。
制备
4-(6-甲氧基喹啉-2-基)-N-甲基苯胺二TFA盐T407使用一般方法P制备。反应在0.045g规模上进行。该粗混合物通过HPLC纯化(乙腈：H2O：0.05%TFA体系)。T407分离为橙色固体(0.018g,33%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ8.72(d,J＝9.2Hz,1H),8.17(d,J＝9.2Hz,1H),8.10(d,J＝9.2Hz,1H),7.95(dt,J＝9.2,2.8Hz,2H),7.64(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.56(d,J＝2.8Hz,1H),6.81(dt,J＝9.2,2.8Hz,2H),3.98(s,3H),2.89(s,3H)；MS(ESI)：265.1(M+H+)。
制备
4-(6-氟乙氧基)喹啉-2-基)-N-甲基苯胺氨基甲酸叔丁酯T408顺序使用一般方法A和一般方法C制备。反应在0.042g规模上进行。T408分离为灰白色固体(0.070g,76%，在两个步骤中)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.10-8.08(m,4H),7.80(d,J＝8.8Hz,1H),7.40(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.37(br d,J＝8.8Hz,2H),7.08(d,J＝2.4Hz,1H),4.88(t,J＝4.0Hz,1H),4.76(t,J＝4.0Hz,1H),4.37(t,J＝4.4Hz,1H),4.30(t,J＝4.4Hz,1H),3.30(s,3H),1.46(s,9H)；MS(ESI)：397.2(M+H+)。
制备
4-(6-氟乙氧基)喹啉-2-基)-N-甲基苯胺二盐酸盐T409使用一般方法K制备。反应在0.045g规模上进行。T409分离为橙色固体(0.035g,83%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ8.74(d,J＝8.4Hz,1H),8.18(dd,J＝15.2,9.2Hz,2H),7.98(d,J＝7.2Hz,2H),7.71(宽二重峰,J＝9.2Hz,1H),7.61(宽单峰,1H),6.88(dt,J＝9.2,2.8Hz,2H),4.84(t,J＝4.0Hz,1H),4.74(t,J＝4.0Hz,1H),4.46和4.39(t,J＝4.0Hz,1H),2.91(s,3H)；MS(ESI)：297.1(M+H+)。
制备
(4-(喹啉-2-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯T410使用一般方法A制备。反应在0.164g规模上进行。T410分离为灰白色固体(0.203g,64%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.16(t,J＝8.0Hz,2H),8.12(dt,J＝8.8,2.4Hz,2H),7.83(d,J＝8.4Hz,1H),7.79(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.69(ddd,J＝8.4,7.2,1.6Hz,1H),7.55-7.47(m,3H),6.63(宽单峰,1H),1.53(s,9H)；MS(ESI)：321.1(M+H+)。
制备
N-(2-氟乙基)-4-(喹啉-2-基)苯胺二盐酸盐T411顺序使用一般方法A和一般方法D制备。反应在0.036g规模上进行。T411分离为橙色固体(0.018g,48%，在两个步骤中)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ9.11(宽单峰,1H),8.72(d,J＝8.8Hz,1H),8.38(dt,J＝9.2,2.8Hz,1H),8.10(d,J＝8.8Hz,2H),8.007(td,J＝8.8,1.6Hz,1H),7.78(td,J＝8.8,1.6Hz,1H),6.83(dt,J＝9.2,2.8Hz,2H),4.68(t,J＝4.8Hz,1H),4.56(t,J＝4.8Hz,1H),3.57(q,J＝4.8Hz,1H),3.51(q,J＝4.8Hz,1H)；MS(ESI)：267.1(M+H+)。
制备
(2-(2-(2-叠氮基乙氧基)乙氧基)乙基)(4-(喹啉-2-基)苯基-氨基甲酸叔丁酯(AS-5306-190Boc)使用一般方法D制备。反应在0.020g规模上进行。AS-5332-190Boc分离为灰白色半固体(0.020,70%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.21(宽二重峰,J＝8.8Hz,2H),8.11(dt,J＝8.8,2.0Hz,2H),7.85(d,J＝8.4Hz,1H),7.81(dd,J＝9.2,1.6Hz,1H),7.71(ddd,J＝8.4,7.2,1.2Hz,1H),7.51(ddd,J＝8.4,7.2,1.2Hz,1H),7.40(宽二重峰,J＝8.4Hz,2H),3.86(t,J＝6.0Hz,2H),3.65(t,J＝6.0Hz,2H),3.62-3.59(m,6H),3.34(t,J＝5.2Hz,2H),1.44(s,9H)；MS(ESI)：478.1(M+H+)。
制备
N-(2-(2-(2-叠氮基乙氧基)乙氧基)乙基)(4-(喹啉-2-基)苯胺T412使用一般方法K制备。反应在0.020g规模上进行。粗产物使用NaHCO3中和并纯化。T412分离为黄色油状物(0.010g,63%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.26-8.14(m,4H),7.88-7.72(m,3H),7.57-7.48(m,1H),7.45(d,J＝8.0Hz,1H),6.75(d,J＝8.8Hz,2H),3.74(t,J＝4.8Hz,2H),3.70-3.60(m,6H),3.39(t,J＝5.2Hz,4H)；MS(ESI)：378.1(M+H+)。
制备
4-(异喹啉-1-基)-N,N-二甲基苯胺T420使用一般方法A制备。反应在0.105g规模上进行。T420分离为灰白色固体(0.115g,72%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.55(d,J＝5.6Hz,1H),8.25(d,J＝8.8Hz,1H),7.85(d,J＝7.6Hz,1H),7.69(t,J＝7.6Hz,1H),7.66(dt,J＝8.8,2.0Hz,2H),7.53(d,J＝6.0Hz,1H),7.54(t,J＝7.6Hz,1H),6.86(dt,J＝8.8,2.0Hz,2H),3.05(s,6H)；MS(ESI)：249.1(M+H+)。
制备
(4-(异喹啉-1-基)苯基)-N-甲基)氨基甲酸叔丁酯T426使用一般方法A制备。反应在0.082g规模上进行。T426分离为无色油状物(0.0.78g,46%)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ8.56(dd,J＝6.8,0.8Hz,1H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.84(d,J＝8.4Hz,1H),7.67-7.64(m,3H),7.60(d,J＝5.6Hz,1H),7.50(td,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.39(宽二重峰,J＝8.8Hz,2H),3.31(s,3H),1.47(s,9H)；MS(ESI)：335.1(M+H+)。
制备
4-(异喹啉-1-基)苯基)-N-甲基苯胺二盐酸盐T427使用一般方法K制备。反应在0.048g规模上进行。T427分离为黄色固体(0.038g,72%)。1H NMR(400MHz,CD3CN)：δ8.42(d,J＝7.6Hz,1H),8.35(d,J＝6.4Hz,1H),8.24(d,J＝8.0Hz,1H),8.18(d,J＝7.2Hz,1H),8.14(ddd,J＝8.4,7.2,1.2Hz,1H),7.94(ddd,J＝8.4,7.2,1.2Hz,1H),7.72(dt,J＝8.8,2.0Hz,2H),7.08(d,J＝8.8Hz,2H),2.93(s,3H)；MS(ESI)：235.1(M+H+)。
制备
在使用NaH作为碱对T-410进行N-烷基化期间，3(4-(喹啉-2-基)苯基)噁唑烷-2-酮T428分离为副产物(0.010g,33%)；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.20(dt,J＝9.2,2.4Hz,2H),8.15(d,J＝8.4Hz,2H),7.86(d,J＝8.4Hz,1H),7.81(dd,J＝9.2,1.2Hz,1H),7.71(ddd,J＝8.4,7.2,1.2Hz,1H),7.70(dt,J＝9.2,2.4Hz,2H),7.51(ddd,J＝8.4,7.2,1.2Hz,1H),4.52(t,J＝8.0Hz,2H),4.14(t,J＝8.0Hz,2H)；MS(ESI)：291.1(M+H+)。
制备
N-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基-4-(喹啉-2-基)苯胺T442使用一般方法D制备。反应在0.031g规模上进行。T442分离为黄色油状物(0.015g,42%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.12(d,J＝8.0Hz,2H),8.05(dd,J＝8.0Hz,2H),7.79(d,J＝8.0Hz,1H),7.76(d,J＝8.0Hz,1H),7.66(dt,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.45(dt,J＝8.4,1.6Hz,1H),6.75-6.72(m,3H),4.64(m,1H),4.52(m,1H),4.38(宽单峰,1H),3.80-3.67(m,8H),3.38(m,2H),MS(ESI)：355.2(M+H+)。
制备
2-氟-4-(喹啉-2-基)苯胺T445使用一般方法A制备。反应在0.090g规模上进行。T445分离为白色固体(0.120g,91%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.17(d,J＝8.8Hz,2H),7.92(dd,J＝12.8,2.0Hz,1H),7.82-7.62(m,3H),7.70(t,J＝8.0Hz,1H),7.49(t,J＝8.0Hz,1H),6.88(t.J＝8.0Hz,1H),3.95(宽单峰,2H)；MS(ESI)：239.1(M+H+)。
制备
室温搅拌T445(0.024g,0.95mmol)和低聚甲醛(0.06g,2.0当量)在DCE-AcOH(10:1,5ml)中的混合物2小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.061g,3.0当量)。所得混合物搅拌过夜。反应完成后，真空除去溶剂，产物在Combiflash纯化体系(硅胶，0-10%EtOAc:DCM)纯化。T458分离为灰白色半固体(0.005g,20%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.14(dt,J＝8.4,5.6Hz,2H),7.93(dd,J＝13.6,2.0Hz,1H),7.87(d,J＝8.0Hz,1H),7.78(d,J＝8.4Hz,1H),7.77(ddd,J＝8.4,6.8,1.2Hz,1H),7.68(ddd,J＝8.4,6.8,1.2Hz,1H),6.77(t,J＝8.8Hz,1H),2.95(s,3H)；MS(ESI)：253.1[M+H+]。
制备
N-甲基-2-硝基-4-(喹啉-2-基)苯胺T463使用一般方法A制备。反应在0.045g规模上进行。T463分离为黄色固体(0.068g,88%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.97(d,J＝2.4Hz,1H),8.49(dd,J＝9.2,2.0Hz,1H),8.25(宽单峰,1H),8.19(d,J＝8.4Hz,1H),8.12(d,J＝8.0Hz,1H),7.86(d,J＝8.8Hz,2H),7.80(dd,J＝9.6,1.2Hz,1H),7.71(ddd,J＝8.8,6.8,1.6Hz,1H),7.50(ddd,J＝8.8,6.8,1.6Hz,1H),7.00(d,J＝9.2Hz,1H),3.10(d,J＝5.2Hz,3H)；MS(ESI)：280.1(M+H+)。
制备
2-氟-4-(6-甲氧基喹啉-2-基)苯胺T467使用一般方法A制备。反应在0.1g规模上进行。T467分离为灰白色固体(0.112g,81%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.08(宽二重峰,J＝8.8Hz,2H),7.87(dd,J＝12.4,2.0Hz,1H),7.77(宽二重峰,J＝7.6Hz,1H),7.73(d,J＝8.8Hz,1H),7.36(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.06(d,J＝2.4Hz,1H),6.87(t,J＝8.4Hz,1H),3.32(s,3H)；MS(ESI)：269.0(M+H+)。
制备
N-N-二甲基-4-(喹啉-2-基)苯胺T476使用一般方法A制备。反应在0.092g规模上进行。T-467分离为黄色固体(0.120g,86%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.11(宽三重峰,J＝7.6Hz,4H),7.81(d,J＝8.8Hz,1H),7.75(dd,J＝9.6,1.6Hz,1H),7.66(ddd,J＝9.2,6.8,1.6Hz,1H),7.44(ddd,J＝9.2,6.8,1.6Hz,1H),6.82(dt,J＝9.2,2.8Hz,1H),3.94(s,6H)；MS(ESI)：249.1(M+H+)。
制备
2-氟-4-(6-甲氧基喹啉-2-基)-N-甲基苯胺二盐酸盐T483顺序使用一般方法D和一般方法K制备。反应在0.030g规模上进行。T483分离为橙色固体(0.025g,在两步中86%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.07(d,J＝9.2Hz,1H),8.65(d,J＝8.8Hz,1H),8.21(dd,J＝13.6,2.4Hz,1H),8.09(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),8.05(d,J＝9.2Hz,1H),7.64(dd,J＝9.6,2.8Hz,1H),7.49(d,J＝2.8Hz,1H),6.85(t,J＝8.8Hz,1H),3.98(s,3H),2.91(s,3H)；MS(ESI)：283.1(M+H+)。
制备
4-(4-氟喹啉-2-基)-N-N-二甲基苯胺T484使用一般方法L制备。反应在0.030g规模上进行。T484分离为浅黄色固体(0.012g,44%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.11(d,J＝8.4Hz,1H),8.04(dt,J＝9.2,2.8Hz,2H),8.01(dd,J＝8.8,0.8Hz,1H),7.70(td,J＝8.4,1.2Hz,1H),7.50-7.46(m,2H),6.80(dt,J＝9.2,2.8Hz,2H),3.04(s,6H)；MS(ESI)：267.1(M+H+)。
制备
4-(4-(6-甲氧基喹啉-2-基)苯基)哌嗪-1-氨基甲酸3-氟丙酯T498使用一般方法E制备。反应在0.032g规模上进行。T498分离为灰白色固体(0.030g,70%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.07(宽三重峰,J＝8.0Hz,4H),7.78(d,J＝8.8Hz,1H),7.35(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.06(d,J＝2.8Hz,1H),7.02(dt,J＝9.2,2.8Hz,2H),4.61(t,J＝6.0Hz,1H),4.49(t,J＝6.0Hz,1H),4.26(t,J＝6.0Hz,2H),3.93(s,3H),3.65(t,J＝4.8Hz,4H),2.57(t,J＝4.8Hz,4H),2.09(五重峰,J＝6.0Hz,1H),2.02(五重峰,J＝6.0Hz,1H)；MS(ESI)：224.1(M+H+)。
制备
2-(4-(4-(3-氟丙基)哌嗪-1-基)苯基)-6-甲氧基喹啉T499使用一般方法E制备。反应在0.032g规模上进行。T499分离为灰白色固体(0.005g,13%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.05(dt,J＝9.2,2.8Hz,2H),8.03和8.00(d,J＝7.6和9.2Hz,2H),7.77(d,J＝8.8Hz,1H),7.54(dd,J＝9.2,3.2Hz,1H),7.05(d,J＝2.8Hz,1H),7.02(dt,J＝9.2,2.8Hz,2H),4.60(t,J＝6.0Hz,1H),4.48(t,J＝6.0Hz,1H),3.92(s,3H),3.34(宽单峰,4H),2.68(宽单峰,4H),2.56(宽单峰,2H),1.97(宽二重峰,J＝24.8Hz,2H)；MS(ESI)：380.2(M+H+)。
制备
(4-(6-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)喹啉-2-基)-苯基)-氨基甲酸叔丁酯T509顺序使用一般方法C和一般方法A制备。反应在0.045g规模上进行。T509分离为灰白色固体(0.010g,8.4%，在两步中)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.05(dt,J＝8.0,2.0Hz,2H),8.04(t,J＝10.4Hz,2H),7.78(d,J＝8.8Hz,1H),7.49(d,J＝8.4Hz,1H),7.38(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.07(d,J＝2.8Hz,1H),6,59(s,1H),4.61(td,J＝4.4,0.4Hz,1H),4.49(td,J＝4.4,0.4Hz,1H),4.26(t,J＝4.8Hz,2H),3.93(t,J＝4.8Hz,2H),3.80-3.76(m,3H),3.74-3.70(m,3H),1.53(s,9H)；MS(ESI)：471..2(M+H+)。
制备
4-(6-(2-(2-(氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)喹啉-2-基)-N-N-二甲基苯胺T510顺序使用一般方法C和一般方法A制备。反应在0.037g规模上进行。T510分离为浅黄色固体(0.006g,7.2%，在两步中)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.05(d,J＝8.0Hz,2H),8.0(d,J＝8.0Hz,2H),7.76(d,J＝8.8Hz,1H),7.34(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.05(d,J＝2.4Hz,1H),6.81(m,1H),4.61(m,1H),4.49(m,1H),4.25(t,J＝4.4Hz,2H),3.93(t,J＝4.4Hz,2H),3.80-3.70(m,5H),3.02(s,6H)；MS(ESI)：399.2(M+H+)。
制备
2-(6-氟吡啶-3-基)-N-N-二甲基喹啉-6-胺T513使用一般方法A制备。反应在0.0.036g规模上进行。T513分离为黄色固体(0.015g,54%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.86(m,1H),8.57(td,J＝10.0,2.4Hz,1H),8.02(d,J＝8.8Hz,1H),7.97(d,J＝9.6Hz,1H),7.69(d,J＝8.8Hz,1H),7.38(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.02(dd,J＝8.4,0.8Hz,1H),6.80(d,J＝2.8Hz,1H),3.09(s,6H)；MS(ESI)：268.1[M+H+]。
制备
2-(4-(4-(2-氟乙基)哌嗪-1-基)-6-甲氧基喹啉T519使用一般方法E制备。反应在0.050g规模上进行。T519分离为灰白色固体(0.010g,17.5%)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ8.01(dt,J＝6.8,2.0Hz,2H),7.95(d,J＝10.4Hz,2H),7.71(d,J＝8.4Hz,1H),7.27(dd,J＝9.2,2.4Hz,1H),6.99(d,J＝2.4Hz,1H),6.96(dt,J＝6.8,2.0Hz,2H),4.62(t,J＝4.0Hz,1H),4.50(t,J＝4.0Hz,1H),3.86(s,3H),3.27(t,J＝5.2Hz,4H),2.75(t,J＝5.2Hz,1H),2.69-2.66(m,5H)；MS(ESI)：366.1(M+H+)。
制备
2-(4-(4-(2-(2-氟乙氧基乙氧基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-6-甲氧基喹啉T530使用一般方法D制备。反应在0.032g规模上进行。T530分离为灰白色半固体(0.004g,9%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.04(dt,J＝8.0,1.2Hz,2H),8.01(dd,J＝10.4,7.6Hz,2H),7.77(d,J＝8.0Hz,1H),7.32(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.05(d,J＝2.8Hz,1H),7.01(dt,J＝8.0,1.2Hz,2H),4.62(t,J＝4.4Hz,1H),4.50(t,J＝4.4Hz,1H),3.92(s,3H),3.78(t,J＝4.4Hz,1H),3.72-3.64(m,4H),3.19(t,J＝4.8Hz,2H),2.70(m,3H)；MS(ESI)：454.1(M+H+)。
制备
2-(4-二甲基氨基)苯基)喹啉-6-醇T531使用一般方法A制备。反应在0.0.236g规模上进行。T531分离为黄色固体(0.218g,53%)。1H NMR(400MHz,CD3CN)：δ8.08(td,J＝8.4,2.0Hz,3H),7.86(dd,J＝8.8,5.2Hz,1H),7.28(ddd,J＝8.8,5.6,2.8Hz,1H),7.14(d,J＝2.8Hz,1H),6.86(dt,J＝8.8,2.0Hz,2H),3.03(s,6H)；MS(ESI)：365.1(M+H+)。
制备
4-氟-2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基喹啉T559使用一般方法L制备。反应在0.005g规模上进行。T559分离为浅黄色固体(0.004g,89%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.06-7.96(m,4H),7.66(td,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.44(td,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.43(d,J＝11.2Hz,1H),6.96(dt,J＝9.2,2.4Hz,2H),3.28(t,J＝4.8Hz,4H),2.54(t,J＝4.8Hz,4H),2.31(s,3H)；MS(ESI)：322.1(M+H+)。
制备
6-甲氧基-2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)喹啉AS-5332-52使用一般方法A制备。反应在0.194g规模上进行。AS-5332-52分离为灰白色固体(0.269g,84%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.01(dt,J＝8.0,4.0Hz,2H),7.98(d,J＝9.2Hz,1H),7.95(d,J＝9.2Hz,1H),7.72(d,J＝8.8Hz,1H),7.27(dd,J＝8.0,4.0Hz,1H),7.01-6.96(m,3H),3.87(s,2H),3.24(td,J＝5.2,2.8Hz,4H),3.06(td,J＝5.2,2.8Hz,4H)；MS(ESI)：320.1(M+H+)。
制备
2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-4-硝基喹啉AS-5332-80使用一般方法A制备。反应在0.06g规模上进行。AS-5332-80分离为红色固体(0.062g,75%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.35(dd,J＝9.2,0.4Hz,2H),8.25(dd,J＝9.2,0.4Hz,1H),8.13(dt,J＝9.2,2.0Hz,2H),7.80(td,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.64(td,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.03(dt,J＝8.8,2.0Hz,2H),3.36(t,J＝6.4Hz,4H),2.59(t,J＝6.4Hz,4H),2.36(s,3H)；MS(ESI)：349(M+H+)。
制备
N-甲基-N-(2-硝基-4-(喹啉-2-基)苯基)甲酰胺AS-5332-30。在60℃加热乙酸酐(0.600g,22当量)和HCO2H(0.252g,22当量)的混合物15分钟。向该混合物中加入T463(0.078g)在DCM(5mL)中的溶液。在80℃加热混合物2天。真空除去挥发物。在Combiflash纯化体系(硅胶，0-20%EtOAc:DCM)上纯化粗产物，AS-5332-30分离为黄色固体(0.054g,70%)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：8.84和8.82(d,J＝2.0Hz,分别为1H),8.52-8.49(m,1H),8.29和8.27(d,J＝8.8Hz,分别为1H),8.26(s,1H),8.18和8.15(d,J＝8.8Hz,分别为1H),7.89(d,J＝8.4Hz,1H),7.88-7.84(m,2H),7.79-7.75(m,1H),7.61-7.57(m,1H),7.47(d,J＝8.4Hz,1H),3.7和3.28(s,各为3H)；MS(ESI)：308.1(M+H+)。
制备
2-氟-4-(6-甲氧基喹啉-2-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯AS-5332-32)：向T467(0.050g,0.186mmol)在THF(3.0mL)中的溶液中加入Boc酐(0.82g,0.373mmol)。所得反应混合物在100℃加热过夜。真空除去挥发物，剩余物在Combiflash纯化体系(硅胶，0-20%EtOAc:DCM)纯化。AS-5332-32分离为灰白色固体(0.040g,58%)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.22(br,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),8.12(d,J＝9.2Hz 1H),7.98(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.83(d,J＝8.8Hz,1H),7.77(d,J＝8.8Hz,1H),7.35(dd,J＝9.2Hz,2.8Hz,1H),7.06(d,J＝2.8Hz 1H),6.83(br,1H),3.93(s,3H),1.54(s,9H)；MS(ESI)：369.2(M+H+)。
制备
N-N-二甲基-4-(4-硝基喹啉-2-基)苯胺AS-5332-36使用一般方法A制备。反应在0.126g规模上进行。AS-5332-36分离为黄色固体(0.103g,70%)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ8.34-8.32(m,2H),8.20(d,J＝8.8Hz,1H),8.13(dt,J＝9.2,2.8Hz,2H),7.78(ddd,J＝8.4,7.2,1.2Hz,1H),7.62(ddd,J＝8.4,7.6,1.2Hz,1H),6.82(宽二重峰,J＝9.2Hz,2H),3.07(s,6H)；MS(ESI)：294.1(M+H+)。
制备
4-(6-甲氧基喹啉-2-基)-N-甲基-2-硝基苯胺AS-5332-42使用一般方法A制备。反应在0.050g规模上进行。AS-5332-42分离为黄色固体(0.080g,100%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.92(d,J＝2.0Hz 1H),8.50(br,1H),8.23(br,1H),8.12(d,J＝8.4Hz,1H),7.83(d,J＝8.8Hz,1H),7.37(dd,J＝9.2Hz,2.8Hz,1H),7.08(d,J＝2.8Hz,1H),7.00(d,J＝8.8Hz 1H),3.94(s,3H),3.11(d,J＝4.8Hz,3H)；MS(ESI)：310.1(M+H+)。
制备
N-(4-(6-甲氧基喹啉-2-基)-2-硝基苯基)-N-甲基甲酰胺AS-5332-43：在60℃加热乙酸酐(0.305g,22当量)和HCO2H(0.137g,22当量)的混合物15分钟。向该混合物中加入AS-5332-42(0.042g)在DCM(5mL)中的溶液。在80℃加热所得混合物3天。真空除去挥发物。剩余物在Combiflash纯化体系(硅胶，0-20%EtOAc:DCM)上纯化，得到AS-5332-43，为黄色固体(0.034g,74%)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：8.80和8.76(d,J＝2.0Hz,1H),8.47-8.46(m,1H),8.25和8.24(s,各为1H),8.17(t,J＝8.4Hz,1H),8.05(d,J＝9.2Hz,1H),7.85和7.83(d,J＝5.2Hz,各为1H),7.45(d,J＝8.4Hz,1H),7.44-7.40(m,1H),7.11和7.10(d,J＝0.8Hz,各为1H),3.96和3.95(s,各为3H),3.46和3.27(s,各为3H)；MS(ESI)：338.1(M+H+)。
制备
4-(6-甲氧基喹啉-2-基)-2-硝基苯基(甲基)氨基甲酸叔丁酯AS-5332-46：向AS-5332-42(0.030g,0.186mmol)在THF(3.0mL)中的溶液中加入Boc酐(0.063g,0.0.291mmol)和DMAP(0.012g,0.097mmol)。在100℃加热所得反应混合物30分钟。真空除去挥发物并且残余物在Combiflash纯化体系(硅胶，0-7%EtOAc:DCM)上纯化，得到AS-5332-43，为灰白色固体(0.040g,100%)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：8.69(d,J＝2.0Hz,1H),8.40(d,J＝8.0Hz,1H),8.16(d,J＝8.8Hz,1H),8.07(d,J＝9.2Hz,1H),7.85(d,J＝8.8Hz,1H),7.44(d,J＝8.0Hz,1H),7.41(dd,J＝9.2,2.81H),7.10(d,J＝2.8Hz,1H),3.95(s,3H),3.34(s,3H),1.32(s,9H)；MS(ESI)：410.1(M+H+)。
制备
N,N-二甲基-5-(6-硝基喹啉-2-基)吡啶-2-胺AS-5332-49使用Suzuki偶联的一般方法A(方法A)制备。反应在0.104g规模上进行。AS-5332-49分离为橙红色固体(0.1g,68%)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：8.99(d,J＝2.4Hz,1H),8.72(d,J＝2.4Hz,1H),8.44-8.41(m,2H),8.27(d,J＝8.8Hz,1H),8.14(d,J＝8.8Hz,1H),7.93(d,J＝8.8Hz,1H),6.66(d,J＝8.8Hz,1H),3.21(s,6H)；MS(ESI)：295.1(M+H+)。
制备
2-(4-叠氮基苯基)喹啉*TFA：T446。于0℃向4-(喹啉-2-基)苯胺二盐酸盐(29.0mg,0.1mmol)在1N HCl(1mL)中的溶液中加入NaNO2溶液(7.0mg在0.3mL水中,0.1mmol)。在0℃搅拌混合物2小时，然后于0℃加入NaN3(7.8mg在1.0mL水中，0.12mmol)。于0℃搅拌混合物1小时并浓缩。剩余物通过HPLC(乙腈/水)纯化，得到T446，为浅黄色固体(23.0mg,64%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ8.31(d,J＝8.8Hz,1H),8.10(m,2H),8.00(m,1H),7.90(d,J＝8.8Hz,1H),7.85(dd,J＝8.2,1.4Hz,1H),7.69(m,1H),7.50(m,1H),7.16(m,2H)；MS(ESI)：247(M+H+)。
制备
2-(4-(4-(3-氟丙基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯基)喹啉*TFA：T443使用一般方法N制备。反应在4.0mg规模的T446上进行。T443分离为棕色固体(2.7mg,39%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ8.72(d,J＝8.8Hz,1H),8.50(s,1H),8.34-8.38(m,2H),8.19-8.24(m,2H),8.09-8.14(m,3H),7.94(m,1H),7.74(m,1H),4.59(t,J＝6.0Hz,1H),4.47(t,J＝6.0Hz,1H),2.94(t,J＝7.6Hz,1H),2.14(m,2H)；MS(ESI)：333(M+H+)。
制备
4-(喹啉-2-基乙炔基)苯胺：T444使用一般方法B制备。反应在16.0mg规模的2-氯喹啉上进行。T444分离为浅黄色固体(6.0mg,25%)。1H NMR(400HMz,CDCl3)：δ8.11(d,J＝8.4Hz,2H),7.79(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),7.72(m,1H),7.57(d,J＝8.4Hz,1H),7.53(m,1H),7.48(m,2H),6.66(m,2H),3.91(宽单峰,2H)；MS(ESI)：245(M+H+)。
制备
N-(4-(喹啉-2-基)苯基)苯-1,4-二胺*3TFA：T447。向4-(喹啉-2-基)苯胺二盐酸盐(7.6mg,0.026mmol)在DCM(1.0mL)中的溶液中加入4-(叔丁氧基羰基氨基)苯基硼酸(12.4mg,0.052mmol)、Cu(OAc)2(4.8mg,0.026mmol)和三乙胺(0.036mL,0.26mmol)。室温搅拌混合物3小时。LCMS显示形成所期望的产物。向该混合物中加入4N HCl的二噁烷(1.0mL)溶液，并再搅拌一小时。真空浓缩混合物，并通过HPLC(乙腈/水)纯化得到T447，为棕色固体(4.3mg,25%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ8.77(d,J＝8.8Hz,1H),8.16(m,2H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),8.01(m,2H),7.96(m,1H),7.73(m,1H),7.21-729(m,6H)；MS(ESI)：312(M+H+)。
制备
N-(3-氟丙基)-4-(喹啉-2-基乙炔基)苯胺：T454使用一般方法Q制备。反应在4.0mg规模的T444上进行。T454分离为浅黄色固体(2.3mg,46%)。1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ8.11(d,J＝8.4Hz,2H),7.79(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),7.26-7.58(m,4H),6.59(m,2H),4.66(t,J＝5.6Hz,1),4.54(t,J＝5.6Hz,1H),4.05(m,1H),3.36(m,2H),2.05(m,2H)；MS(ESI)：305(M+H+)。
制备
4-((1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)苯胺：T464使用一般方法B制备。反应在60.0mg规模的2-溴-1H-苯并[d]咪唑上进行。T464分离为浅黄色固体(35.9mg,51%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ7.50(宽单峰,2H),7.31(m,2H),7.24(m,2H),6.64(m,2H)；MS(ESI)：234(M+H+)。
制备
4-((1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)-N-(3-氟丙基)苯胺：T465使用一般方法Q制备。反应在33.3mg规模的T464上进行。T465分离为白色固体(8.9mg,21%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ7.50(m,2H),7.35(m,2H),7.26(m,2H),6.61(m,2H),4.58(t,J＝5.6Hz,1H),4.46(t,J＝5.6Hz,1H),3.27(m,2H),1.95(m,2H)；MS(ESI)：294(M+H+)。
制备
2-(6-(苄基氧基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑：T469使用一般方法A制备。反应在100mg规模的2-溴-1H-苯并[d]咪唑上进行。T469分离为白色固体(75.0mg,42%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ12.95(s,1H),8.63(d,J＝1.2Hz,1H),8.22(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.93(t,J＝9.2Hz,2H),7.64(m,1H),7.50(m,4H),7.40(m,2H),7.34(m,1H),7.29(m,1H),7.17(m,2H),5.24(s,2H)；MS(ESI)：351(M+H+)。
制备
6-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)萘-2-醇*甲酸盐：T470。向2-(6-(苄基氧基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(73mg,0.21mmol)在THF(2mL)中的溶液中加入MeOH(2mL)、Pd-C(10%,30mg)和甲酸(0.30mL)。混合物用氩气冲洗，并密封在微波小瓶中。在微波合成器中于100℃加热混合物5分钟。混合物经Pd-C过滤，滤液浓缩得到T470，为白色固体(60mg,94%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ8.46(t,J＝1.0Hz,1H),8.12(s,1H),8.05(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.85(d,J＝9.6Hz,1H),7.79(d,J＝8.8Hz,1H),7.62(m,2H),7.29(m,2H),7.16(m,2H)；MS(ESI)：261(M+H+)。
制备
2-(6-(2-氟乙氧基)萘-2-基)-1H-苯并[d]咪唑*TFA：T473使用一般方法制备。反应在16mg规模的T470上进行。T473分离为浅黄色固体(1.9mg,8.6%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ8.63(d,J＝1.6Hz,1H),8.01-8.11(m,3H),7.82(m,2H),7.62(m,2H),7.45(m,1H),7.38(dd,J＝9.0,2.6Hz,1H),4.87(t,J＝4.0Hz,1H),4.75(t,J＝4.0Hz,1H),4.44(t,J＝4.0Hz,1H),4.37(t,J＝4.0Hz,1H)；MS(ESI)：307(M+H+)。
制备
2-(6-(2-氟乙氧基)萘-2-基)-1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑*TFA：T474使用一般方法C制备。反应在16mg规模的T470上进行。T474分离为浅黄色固体(9.4mg,39%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ8.41(d,J＝1.6Hz,1H),8.12(d,J＝8.4Hz,1H),8.02(m,2H),7.82-7.89(m,2H),7.71(m,2H),7.47(d,J＝2.4Hz,1H),7.38(dd,J＝9.0,2.6Hz,1H),4.95-5.00(m,2H),4.86-4.92(m,3H),4.75(m,1H),4.44(m,1H),4.37(m,1H)；MS(ESI)：353(M+H+)。
制备
4-((1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)-N,N-二甲基苯胺：T481使用一般方法R制备。反应在26.0mg规模的T464上进行。T481分离为浅黄色固体(11.2mg,39%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ7.51(m,2H),7.44(m,2H),7.25(m,2H),6.73(m,2H),3.00(s,6H)；MS(ESI)：262(M+H+)。
制备
4-((1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)-N,N-二甲基苯胺：T482使用一般方法E制备。反应在10.1mg规模的T481上进行。T482分离为浅黄色固体(9.6mg,81%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.76(m,1H),7.48(m,2H),7.37(m,1H),7.28(m,2H),4.87(t,J＝5.2Hz,1H),4.76(t,J＝5.2Hz,1H),4.66(t,J＝5.2Hz,1H),4.60(t,J＝5.2Hz,1H),3.02(s,6H)；MS(ESI)：308(M+H+)。
制备
5-(喹啉-2-基)吡啶-2-胺：T490使用一般方法A制备。反应在106mg规模的2-氯喹啉上进行。T490分离为白色固体(135mg,94%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.85(d,J＝2.4Hz,1H),8.37(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),8.18(d,J＝8.8Hz,1H),8.11(d,J＝8.8Hz,1H),7.79(m,2H),7.71(m,1H),7.50(m,1H),6.65(dd,J＝8.4,0.8Hz,1H),4.66(宽单峰,2H)；MS(ESI)：222(M+H+)。
制备
N-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)-N-甲基-5-(喹啉-2-基)吡啶-2-胺：T502使用一般方法S制备。反应在7.4mg规模的T502-前体上进行。T502为浅黄色油状物(3.8mg,73%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.92(dd,J＝2.4,0.8Hz,1H),8.38(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),8.15(d,J＝8.4Hz,1H),8.09(dd,J＝8.4,1.2Hz,1H),7.79(m,2H),7.69(m,1H),7.47(m,1H),6.67(dd,J＝8.8,0.8Hz,1H),4.61(t,J＝4.2Hz,1H),4.49(t,J＝4.2Hz,1H),3.86(t,J＝5.8Hz,2H),3.65-3.78(m,8H),3.19(s,3H)；MS(ESI)：370(M+H+)。
制备
5-(喹啉-2-基)吡啶-2-基-氨基甲酸叔丁酯T503：
向5-(喹啉-2-基)吡啶-2-胺(130mg,0.59mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入Boc2O(154mg,0.71mmol)、DIEA(76mg,0.59mmol)和DMAP(14mg,0.11mmol)。室温搅拌混合物24小时。LCMS显示存在单Boc、二Boc产物和原料。除去溶剂，将剩余物溶解在乙酸乙酯和DCM的混合物中。蒸发DCM，形成针状结晶。过滤收集结晶，用乙酸乙酯洗涤，干燥得到T503，为白色针状物(67mg,35%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ10.03(s,1H),9.11(dd,J＝2.4,0.8Hz,1H),8.60(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),8.43(d,J＝8.8Hz,1H),8.15(d,J＝8.8Hz,1H),8.04(dd,J＝8.2,1.0Hz,1H),7.96(m,2H),7.76(m,1H),7.57(m,1H),1.47(s,9H)；MS(ESI)：322(M+H+)。
制备
4-((6-氟吡啶-3-基)乙炔基)-N,N-二甲基苯胺：T516使用一般方法B制备。反应在90mg规模的5-溴-2-氟吡啶上进行。T516分离为浅黄色固体(50mg,41%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.34(m,1H),7.85(m,1H),7.39(m,2H),6.90(m,1H),6.66(m,2H),3.00(s,6H)；MS(ESI)：241(M+H+)。
制备
N-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)-5-(喹啉-2-基)吡啶-2-胺：T525使用一般方法D制备。反应在22.0mg规模的T490上进行。T525分离为浅黄色油状物(3.3mg,9.3%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.86(d,J＝2.4Hz,1H),8.35(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),8.15(d,J＝8.8Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.79(d,J＝8.4Hz,2H),7.69(m,1H),7.48(m,1H),6.57(dd,J＝8.8,0.8Hz,1H),5.15(m,1H),4.65(t,J＝4.0Hz,1H),4.53(t,J＝4.0Hz,1H),3.81(t,J＝4.0Hz,1H),3.68-3.77(m,7H),6.63(dd,J＝10.6,5.0Hz,2H)；MS(ESI)：356(M+H+)。
制备
2-((5-((4-(二甲基氨基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)(甲基)氨基)乙醇：T526使用一般方法M从2-氟吡啶衍生物和2-(甲基氨基)乙醇制备。反应在45mg规模的T516上进行。T526分离为浅黄色固体(40mg,72%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.22(dd,J＝2.4,0.8Hz,1H),7.57(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.37(m,2H),6.65(m,2H),6.90(d,J＝8.8,0.8Hz,1H),4.58(宽单峰,1H),3.85(t,J＝4.8Hz,2H),3.74(t,J＝4.8Hz,2H),3.09(s,3H),2.98(s,6H)；MS(ESI)：296(M+H+)。
制备
2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)喹啉*3TFA：T535使用一般方法A制备。反应在17.0mg规模的2-氯喹啉上进行。T535分离为浅黄色固体(10.0mg,42%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ8.74(d,J＝8.8Hz,1H),8.11-8.21(m,5H),7.96(t,J＝7.2Hz,1H),7.75(t,J＝7.2Hz,1H),7.26(m,2H),3.66(宽三重峰,J＝5.4Hz,4H),3.40(宽三重峰,J＝5.4Hz,4H)；MS(ESI)：290(M+H+)。
制备
2-溴-1-(4-(4-(喹啉-2-基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮T536：向2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)喹啉*3TFA(8.6mg,0.014mmol)在DCM(2mL)中的溶液中加入TEA(9.0mg,0.089mmol)，接着加入2-溴乙酰基溴(12.0mg,0.059mmol)。室温搅拌混合物1小时，并通过添加NaHCO3溶液淬灭。分离DCM层，并浓缩。剩余物通过快速色谱法(硅胶，0-30%乙酸乙酯/DCM)纯化，得到T536，为白色固体(3.7mg,66%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.11-8.18(m,4H),7.84(d,J＝8.8Hz,1H),7.80(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.72(m,1H),7.49(m,1H),7.05(m,2H),3.91(s,2H),3.83(宽三重峰,J＝5.2Hz,2H),3.72(宽三重峰,J＝5.2Hz,2H),3.39(宽三重峰,J＝5.2Hz,2H),3.32(宽三重峰,J＝5.2Hz,2H)；MS(ESI)：410(M+H+)。
制备
2-氟-1-(4-(4-(喹啉-2-基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮：T537使用一般方法O制备。反应在2.8mg规模的T536上进行。T537分离为白色固体(1.9mg,80%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.11-8.18(m,4H),7.84(d,J＝8.8Hz,1H),7.80(d,J＝8.4Hz,1H),7.70(m,1H),7.49(m,1H),7.05(m,2H),5.11(s,1H),4.99(s,1H),3.84(宽单峰,2H),3.67(宽单峰,2H),3.33(宽三重峰,J＝5.0Hz,2H)；MS(ESI)：350(M+H+)。
制备
N-(3-氟丙基)-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)苯胺：T540使用一般方法E制备。反应在6.7mg规模的T465上进行。T540分离为白色固体(5.9mg,84%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.74(m,1H),7.46(m,2H),7.27-7.32(m,3H),6.59(m,2H),4.66(t,J＝5.6Hz,1H),4.54(t,J＝5.6Hz,1H),4.15(宽单峰,1H),3.91(s,3H),3.36(m,2H),2.02(m,2H)；MS(ESI)：308(M+H+)。
制备
5-((4-(二甲基氨基)苯基)乙炔基)-N-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺：T546使用一般方法O制备。反应在30.2mg规模的T546-前体上进行。T546分离为浅黄色胶状物(11.6mg,53%)。1H NMR(400Hz,CDCl3)：δ8.27(d,J＝2.4Hz,1H),7.52(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.36(m,2H),6.64(宽二重峰,J＝8.8Hz,2H),6.47(d,J＝8.8Hz,1H),4.59(t,J＝4.2Hz,1H),4.47(t,J＝4.2Hz,1H),3.60-3.79(m,10H),3.11(s,3H),2.97(宽单峰,6H)；MS(ESI)：386(M+H+)。
制备
6-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)喹啉：T550使用一般方法A制备。反应在38.6mg规模的2-氯-6-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)喹啉上进行。T550分离为白色结晶(7.2mg,13%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.99-8.08(m,4H),7.77(d,J＝9.2Hz,1H),7.37(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.07(d,J＝2.8Hz,1H),7.02(m,2H),4.62(t,J＝4.4Hz,1H),4.50(t,J＝4.4Hz,1H),4.26(t,J＝5.0Hz,2H),3.94(t,J＝5.0Hz,2H),3.70-3.81(m,6H),3.43(宽单峰,4H),2.78(宽单峰,4H),2.50(宽单峰,3H)；MS(ESI)：454(M+H+)。
制备
2-(4-(6-氟吡啶-3-基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑：T468使用一般方法S制备。反应在0.029g规模的2-氨基苯胺上进行。所期望的产物T468分离为黄色固体(0.043g,55%)。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)：δ8.61(d,J＝2.8Hz,1H),8.33(dd,J＝8.4,2.8Hz,1H),8.24(d,J＝8.8Hz,2H),8.03(d J＝8.8Hz,2H),7.82(dd,J＝8.8,2.4Hz,2H),7.61(dd,J＝8.8,2.4Hz,2H),7.22(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H)；MS(ESI)：290(M+H+)。
制备
2-(4-(2-氟吡啶-4-基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑：T460使用一般方法S制备。反应在0.027g规模的2-氨基苯胺上进行。所期望的产物T460，为黄色固体(0.010g,14%)。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)：δ8.25(d,J＝5.2Hz,1H),8.19(d,J＝8.8Hz,2H),8.04(d,J＝8.8Hz,2H),8.03(d,J＝8.8Hz,2H),7.72(q,J＝3.2Hz,2H),7.64(dt,J＝5.2,1.6Hz,1H),7.49(q,J＝3.2Hz,2H),7.42(s,1H)；MS(ESI)：290(M+H+)。
制备
4′-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-N,N-二甲基-[1,1′-联苯]-4-胺：EW5338-028使用一般方法S制备。反应在0.052g规模的2-氨基苯胺上进行。EW5338-028分离为黄色固体(0.076g,50%)。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)：δ8.08(d,J＝8.8Hz,2H),7.72(d,J＝8.8Hz,2H),7.51-7.62(m,4H),7.23(dd,J＝8.8,2.8Hz,2H),6.84(d,J＝8.8Hz,2H),2.97(s,6H)；MS(ESI)：314(M+H+)。
制备
4′-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-[1,1′-联苯]-4-腈：EW5338-043使用一般方法S制备。反应在0.052g规模的2-氨基苯胺上进行。EW5338-043分离为黄色固体(0.076g,50%)。1H NMR(DMSO-d6)：δ8.66(s,2H),8.28(d,J＝8.4Hz,2H),7.92-8.02(m,6H),7.16-7.22(m,2H)；MS(ESI)：296(M+H+)。
制备
4′-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-N,N-二甲基-[1,1′-联苯]-3-胺：EW5338-036使用一般方法S制备。反应在0.052g规模的2-氨基苯胺上进行。EW5338-036分离为黄色固体(0.076g,50%)。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)：δ8.08(d,J＝8.8Hz,2H),7.56-7.62(m,3H),7.20-7.51(m,4H),6.99(s,1H),6.84-6.91(m,2H),3.02(s,6H)；MS(ESI)：314(M+H+)。
制备
2-(苯并呋喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑：T488使用一般方法S制备。反应在0.34g规模的2-氨基苯胺上进行。T488分离为黄色固体(0.1g,14%)。1HNMR(400MHz,MeOH-d4)：δ7.54-7.74(m,5H),7.36-7.44(m,1H),7.26-7.34(m,3H)；MS(ESI)：235(M+H+)。
制备
2-(苯并[b]噻吩-2-基)-1H-苯并[d]咪唑：T493使用一般方法S制备。反应在0.4g规模的2-氨基苯胺上进行。T493分离为黄色固体(0.7g,76%)。1HNMR(400MHz,MeOH-d4)：δ8.25(d,J＝0.8Hz,1H),7.98-8.06(m,2H),7.73(dd,J＝8.8,2.4Hz,2H),7.48-7.56(m,4H)；MS(ESI)：251(M+H+)。
制备
2-(苯并呋喃-2-基)-4-氟-1H-苯并[d]咪唑：T495使用一般方法S制备。反应在0.34g规模的2-氨基苯胺上进行。T495分离为固体(0.3g,50%)。1HNMR(400MHz,MeOH-d4)：δ7.72-7.78(m,1H),7.71(d,J＝1.2Hz,1H),7,62-7.68(m,1H),7.43-7.49(m,2H),7.30-7.38(m,2H),7.09(dd,J＝8.0,0.8Hz,1H)；MS(ESI)：253(M+H+)。
制备
1-(2-氟乙基)-2-(4-(6-氟吡啶-3-基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑：T538使用一般方法E制备。反应在0.01g规模的T468上进行。T538分离为白色固体(0.012g,100%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.49(dt,J＝2.4,0.8Hz,1H),8.30(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.93-7.97(m,1H),7.90(d,J＝8.8Hz,2H),7.72(d,J＝8.8Hz,2H),7.38-7.51(m,3H),7.05(dd,J＝8.8,0.4Hz,1H),4.84(dt,J＝46.4,5.2Hz,2H),4.61(dt,J＝24,4.8Hz,2H)；MS(ESI)：336(M+H+)。
制备
4′-(1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-N,N-二甲基-[1,1′-联苯]-4-胺：T543使用一般方法E制备。反应在0.030g规模的EW5338-028上进行。T543分离为黄色固体(0.007g,20%)。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)：δ7.83-8.20(m,6H),7.67-7.73(m,4H),6.97(d,J＝8.8Hz,2H),4.96(dt,J＝46.4,5.2Hz,2H),4.61(dt,J＝24,4.8Hz,2H),3.05(s,6H)；MS(ESI)：360(M+H+)。
制备
4′-(1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-[1,1′-联苯]-4-腈：T556使用一般方法E制备。反应在0.036g规模的EW5338-043上进行。T556分离为黄色固体(0.009g,22%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.89(d,J＝8.0Hz,3H),7.72-7.79(m,6H),7.42-7.48(m,1H),7.34-7.41(m,2H),4.83(dt,J＝46,4.8Hz,2H),4.59(dt,J＝24,5.2Hz,2H)；MS(ESI)：342(M+H+)。
制备
4′-(1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-N,N-二甲基-[1,1′-联苯]-3-胺：T548使用一般方法E制备。反应在0.036g规模的EW5338-036上进行。T548分离为黄色固体(0.014g,33%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.85-7.89(m,1H),7.79(d,J＝8.4Hz,2H),7.75(d,J＝8.4Hz,2H),7.42-7.47(m,1H),7.31-7.37(m,3H),6.95-7.02(m,2H),6,78(dd,J＝8.4,0.8Hz,1H),3.02(s,6H)；MS(ESI)：360(M+H+)。
制备
2-(苯并呋喃-2-基)-1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑：T489使用一般方法E制备。反应在0.052g规模的T488上进行。T489分离为黄色固体(0.076g,50%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.81-7.88(m,1H),7.69-7.74(m,1H),7.55-7.63(m,2H),7.45-7.51(m,1H),7.30-7.44(m,4H),4.92-5.03(m,2H),4.85-4.95(m,2H)；MS(ESI)：281(M+H+)。
制备
2-(苯并[b]噻吩-2-基)-1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑：T494使用一般方法E制备。反应在0.052g规模的T493上进行。T494分离为黄色固体(0.076g,50%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.85-7.92(m,3H),7.77(s,1H),7.81-7.95(m,3H),7.60-7.75(m,2H),4.91(dt,J＝46.4,4.8Hz,2H),4.75(dt,J＝24,4.8Hz,2H)；MS(ESI)：297(M+H+)。
制备
6-(6-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑：T532使用一般方法A制备。反应在0.08g规模的6-溴苯并咪唑上进行。T532分离为黄色固体(0.025g,29%)。1HNMR(400MHz,MeOH-d4)：δ9.16(s,1H),8.15(d,J＝2.8Hz,1H),8.26(dd,J＝10,2.4Hz,1H),8.0-8.04(m,1H),7.90(d,J＝8.8Hz,1H),7.83(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.19(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H)；MS(ESI)：214(M+H+)。
制备
4-(1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-N,N-二甲基苯胺：T533使用一般方法A制备。反应在0.08g规模的6-溴-N-2-氟乙基苯并咪唑上进行。T533分离为黄色固体(0.025g,29%)。1H NMR(400MHz,D2O)：δ9.23(s,1H),8.05(d,J＝1.2Hz,1H),7.81-7.89(m,4H),7.64(d,J＝8.8Hz,2H),4.90(dt,J＝27.2,5.2Hz,2H),4.78-4.83(m,2H),3.25(s,6H)；MS(ESI)：284(M+H+)。
制备
2-(6-氟吡啶-3-基)喹啉：T455使用一般方法A制备。反应在0.1g规模上进行。T455分离为白色固体(0.14g,100%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.94(d,J＝2.4Hz,1H),8.66(ddd,J＝10.4,7.6,2.4Hz,1H),8.27(d,J＝8.0Hz,1H),8.14(dd,J＝8.4,1.2Hz,1H),7.75(ddd,J＝8.4,6.8,1.6Hz,1H),7.85(d,J＝8.8Hz,2H),7.56(ddd,J＝8.0,6.3,1.2Hz,1H),7.09(ddd,J＝8.8,3.2,0.2Hz,1H)；MS(ESI)：225.0(M+H+)。
制备
4-氟-2-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)喹啉2,2,2-三氟乙酸盐：T485使用一般方法L制备。反应在0.017g规模上进行。产物通过HPLC(使用ACN(0.05%TFA)/H2O(0.05%TFA))纯化。T485分离为白色固体(0.09g,58%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ9.24(s,1H),8.65-8.64(m,1H),8.44(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),8.13-8.07(m,2H),7.95(d,J＝11.6Hz,1H),7.90-7.88(m,1H),7.81(ddd,J＝8.4,6.8,1.6Hz,1H),7.62(ddd,J＝8.0,6.8,0.8Hz,1H),4.14(s,3H)；MS(ESI)：278.1(M+H+)。
制备
5-(1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-N,N-二甲基吡啶-2-胺2,2,2-三氟乙酸盐：T487使用一般方法A制备。反应在0.02g规模上进行。产物通过HPLC(使用ACN(0.05%TFA)/H2O(0.05%TFA))纯化。T487分离为白色固体(0.018g,77%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ8.55(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(ddd,J＝9.2,2.4,0.4Hz,1H),7.93-7.91(m,1H),7.81-7.78(m,1H),7.63(ddd,J＝5.6,2.4,1.2Hz,1H),6.93(dd,J＝9.2,0.8Hz,1H),5.00(t,J＝4.4Hz,1H),4.89(m,1H),4.83(s,6H),4.84(m,1H),4.79(t,J＝4.4Hz,1H)；MS(ESI)：285.1(M+H+)。
制备
N,N-二甲基-4-(喹啉-6-基乙炔基)苯胺：T517使用一般方法B制备。反应在0.1g规模上进行。T517分离为黄色固体(0.1g,76%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.87(dd,J＝4.4,2.0Hz,1H),8.09(d,J＝8.0Hz,1H),8.03(d,J＝8.8Hz,1H),7.95(d,J＝1.6Hz,1H),7.78(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.44(d,J＝8.8Hz,2H),7.39(dd,J＝8.4,4.4Hz,1H),6.67(d,J＝9.2Hz,2H),3.00(s,6H)；MS(ESI)：273.1(M+H+)。
制备
2-氟-4-(1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯胺：T524使用一般方法A制备。反应在0.1g规模上进行。T524分离为白色固体(0.09g,76%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.81-7.78(m,1H),7.43-7.37(m,2H),7.33-7.29(m,3H),6.87(dd,J＝8.8,8.4Hz,1H),4.84(t,J＝4.8Hz,1H),4.72(t,J＝5.2Hz,1H),4.54(t,J＝4.8Hz,1H),4.48(t,J＝5.2Hz,1H)；MS(ESI)：274.1(M+H+)。
制备
4-(5-(6-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)喹啉-2-基)吡啶-2-基)吗啉：T539使用一般方法A制备。反应在0.037g规模上进行。T539分离为白色固体(0.04g,77%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.99(d,J＝2.0Hz,1H),8.41(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),8.25(d,J＝8.8Hz,1H),8.03(d,J＝8.8Hz,1H),7.91(d,J＝8.8Hz,1H),7.41-7.37(m,2H),6.98(d,J＝9.6Hz,1H),4.58(t,J＝4.0Hz,1H),4.46(t,J＝4.0Hz,1H),4.25(t,J＝4.4Hz,2H),3.84(t,J＝4.8Hz,2H),3.74-3.69(m,6H),3.66-3.56(m,4H),3.58-3.56(m,4H)；MS(ESI)：442.1(M+H+)。
制备
6-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-2-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)喹啉：T545使用一般方法A制备。反应在0.039g规模上进行。T545分离为白色固体(0.035g,66%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.86(d,J＝2.4Hz,1H),8.34(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),8.01(d,J＝8.4Hz,1H),7.97(d,J＝9.2Hz,1H),7.73(d,J＝8.8Hz,1H),7.36(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.06(d,J＝2.04Hz,1H),6.49(d,J＝8.8Hz,1H),4.62(t,J＝4.0Hz,1H),4.50(t,J＝4.0Hz,1H),4.26(t,J＝4.8Hz,2H),3.94(t,J＝4.0Hz,2H),3.80-3.71(m,6H),3.55-3.52(m,4H),2.05-2.02(m,4H)；MS(ESI)：426.1(M+H+)。
制备
4-(异喹啉-1-基乙炔基)-N,N-二甲基苯胺：T547使用一般方法B制备。反应在0.064g规模上进行。T547分离为黄色固体(0.1g,76%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.52(d,J＝7.2Hz,1H),8.49(d,J＝6.0Hz,1H),7.82(d,J＝8.0Hz,1H),7.73-7.65(m,2H),7.622-7.56(m,3H),6.70(d,J＝9.2Hz,2H),3.03(s,6H)；MS(ESI)：273.1(M+H+)。
制备
4-(4-(6-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)喹啉-2-基)苯基)吗啉：T549使用一般方法A制备。反应在0.033g规模上进行。T549分离为白色固体(0.035g,76%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.02(d,J＝8.8Hz,2H),7.96(dd,J＝9.6,8.8Hz,2H),7.72(d,J＝8.4Hz,1H),7.31(dd,J＝9.2,3.2Hz,1H),7.01(d,J＝2.4Hz,1H),6.96(d,J＝9.2Hz,2H),4.56(t,J＝4.0Hz,1H),4.44(t,J＝4.4Hz,1H),4.20(t,J＝4.8Hz,2H),3.88(t,J＝4.8Hz,2H),3.83(t,J＝4.8Hz,4H),3.75-3.65(m,6H),3.19(t,J＝4.8Hz,4H),；MS(ESI)：441.1(M+H+)。
制备
T450：在微波中于200°C加热1,2-亚苯基二胺(80mg,0.740mmol)和4-二甲基氨基-苯甲酰氯(80mg,0.436mmol)在DMF(1.0mL)中的混合物15分钟。通过制备性HPLC纯化粗产物，并用NaHCO3中和得到T450(20mg,19.35%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.03-8.01(d,2H),7.72-7.69(m,2H),7.47-7.45(m,2H),6.95-6.93(m,2H),3.06(s,6H)；MS(ESI)：238.1(M+H+)。
制备
T452于150°C加热2-溴苯并咪唑(0.05g,0.254mmol)、2-氟吡啶-5-硼酸(0.036g,0.254mmol)、碳酸钾(0.190ml,0.381mmol)和PdCl2(dppf)2DCM(10.36mg,0.013mmol)在DMF(1.0mL)中的混合物15分钟。通过制备性HPLC纯化粗产物，得到T452(6mg,11.09%)。1H NMR(400MHz,CD3CN)δ9.01(s,1H),8.70-8.65(m,1H),7.81-7.79(m,2H),7.45-7.43(m,2H),7.29-7.26(m,1H)；MS(ESI)：214.0(M+H+)。
制备
T497使用一般方法D制备。该反应在20mg规模的T450上进行。分离出T497TFA盐(6mg,25.1%)。1H NMR(400MHz,CD3CN)δ7.96-7.93(m,1H),7.77-7.75(m,1H),7.70-7.67(m,2H),7.56-7.53(m,2H),6.94-6.90(m,2H),4.94-4.92(m,1H),4.83-4.80(m,2H),4.76-4.74(m,1H),3.04(s,6H)；MS(ESI)：284.10(M+H+)。
制备
T555：向5-溴-7-氮杂吲哚(0.1g,0.508mmol)、4-二甲基氨基苯基硼酸(0.084g,0.508mmol)、碘化亚铜(I)(9.67mg,0.051mmol)和碳酸钾(0.508ml,1.015mmol)在DMF(2.0mL)的溶液中加入[1,1′-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(0.021g,0.025mmol)在DCM(2.0mL)中的溶液。在微波中于120℃加热所得混合物30分钟，然后冷却至室温。通过制备性HPLC纯化粗产物，得到T555TFA盐(0.010g,5.61%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.48-8.47(m,1H),8.22-8.21(m,1H),7.61-7.58(m,2H),7.51-7.50(m,1H),6.98-6.96(m,2H),6.51-6.50(m,1H),2.97(s,6H)；MS(ESI)：238.7(M+H+)。
制备
T558：向6-溴咪唑并[1,2-a]嘧啶(0.08g,0.404mmol)、4-二甲基氨基苯基硼酸(0.087g,0.525mmol)、碘化亚铜(I)(7.69mg,0.040mmol)和碳酸钾(0.404ml,0.808mmol)在DMF(2.0mL)中的溶液中加入[1,1′-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(0.016g,0.020mmol)在DCM(2.0mL)中的溶液中。所得混合物在120℃微波加热30分钟，冷却并过滤。滤液真空浓缩。剩余物在制备性HPLC上纯化，得到T558TFA盐(0.008g,0.023mmol,5.62%产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(m,1H),9.26(m,1H),8.14-8.11(m,2H),7.69-7.66(m,2H),6.90-6.88(m,2H),2.99(s,3H)；MS(ESI)：239.1(M+H+)。
制备
T496使用一般方法B制备。反应在50mg规模上进行。在制备性HPLC上过滤并纯化，得到T496TFA盐(0.02g,30.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.52-8.50(m,1H),8.07-8.04(m,2H),7.90-7.82(m,2H),7.74-7.69(m,3H),7.40-7.37(m,1H),7.34-7.32(m,1H),4.92-4.90(m,1H),4.87-4.86(m,1H),4.80(m,2H)；MS(ESI)：316.1(M+H+)。
制备
T508使用一般方法D从T481和4-甲基苯磺酸2-(2-(2-氟乙氧基)-乙氧基)乙酯制备。该反应在60mg规模的T481上进行。通过制备性HPLC纯化粗产物，得到T508(5mg,5.51%)。1H NMR(400MHz,CD3CN)
7.83-7.77(m,2H),7.59-7.52(m,4H),6.79-6.77(m,2H),4.66-4.63(m,2H),4.43-4.41(m,1H),4.31-4.29(m,1H),3.96-3.94(m,2H),3.57-3.52(m,3H),3.48-3.44(m,3H),3.05(s,6H)；MS(ESI)：396.20(M+H+)。
制备
T527使用一般方法B从2-溴-1-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑和5-乙炔基-7-氮杂吲哚制备。该反应在105mg规模的2-溴-1-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑上进行。通过制备性HPLC纯化粗产物，得到T527TFA盐(0.01g,6.24%)。1H NMR(400MHz,CD3CN)
10.14(s,1H),8.59-8.58(m,1H),8.32(m,1H),7.82-7.80(m,1H),7.73-7.71(m,1H),7.52-7.45(m,3H),6.61-6.59(m,1H),4.69-4.67(m,2H),4.42-4.40(m,1H),4.30-4.28(m,1H),3.98-3.95(m,2H),3.58-3.52(m,3H),3.49-3.44(m,3H)；MS(ESI)：393.10(M+H+)。
制备
T528使用一般方法B制备。反应在63mg规模上进行。通过制备性HPLC纯化粗产物，得到T528TFA盐(0.005g,4.21%)。1H NMR(400MHz,CD3CN)
8.28(m,1H),7.98(m,1H),7.33-7.28(m,3H),6.66-6.64(m,2H),6.42-6.41(m,1H),2.88(s,6H)；MS(ESI)：261.1(M+H+)。
制备
T534使用一般方法B从2-溴-1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑和甲基-4-(乙炔基)苯基氨基甲酸叔丁酯制备。反应在53mg规模的2-溴-1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑上进行。通过ISCO柱纯化粗产物，得到4-((1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)苯基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.03g,35.3%)。将其溶解于乙腈(0.5mL)中。向该溶液中加入20%硫酸(1.5mL,5.63mmol)的溶液。在室温搅拌所得混合物20分钟，用水(2.0mL)稀释，并通过制备性HPLC纯化，得到T534，为TFA盐(0.004g,12.88%)。1H NMR(400MHz,CD3CN)7.81-7.79(m,1H),7.67-7.65(m,1H),7.52-7.48(m,4H),6.66-6.64(m,2H),4.95-4.93(m,1H),4.83-4.478(m,2H),4.74-4.73(m,1H),2.82(s,3H)；MS(ESI)：294.1(M+H+)。
制备
T541使用一般方法B从2-溴-1-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑和甲基-4-(乙炔基)苯基氨基甲酸叔丁酯制备。反应在72mg规模的2-溴-1-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑上进行。通过ISCO柱纯化粗产物，得到4-((1-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)苯基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.02g,19.21%)。然后将其溶解于乙腈(1.0mL)中。向该溶液中加入20%硫酸(1.0mL,3.75mmol)。在室温搅拌反应混合物30分钟。通过制备性HPLC纯化粗产物，得到T541 TFA盐(0.004g,19.44%)。1H NMR(400MHz,CD3CN)7.78-7.76(m,1H),7.70-7.68(m,1H),7.51-7.45(m,4H),6.66-6.64(m,2H),4.63-4.60(m,2H),4.44-4.42(m,1H),4.32-4.30(m,1H),3.95-3.92(m,2H),3.57-3.53(m,3H),3.48-3.45(m,3H),2.82(m,3H)。MS(ESI)：382.1(M+H+)。
制备
T551使用一般方法B从2-乙炔基-1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑和3-溴吡啶制备。反应在40mg规模的2-乙炔基-1-(2-氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑上进行。通过制备性HPLC纯化粗产物，得到T551TFA盐(0.006g,7.44%)。1HNMR(400MHz,CD3CN)：
8.92-8.91(m,1H),8.70-8.69(m,1H),8.14-8.11(m,1H),7.79-7.77(m,1H),7.64-7.62(m,1H),7.55-7.40(m,3H),4.94-4.92(m,1H),4.82-4.80(m,2H),4.76-4.73(m,1H)；MS(ESI)：266.1(M+H+)。
制备
2-(2-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-1-(4-(二乙基氨基)苯基)乙酮：室温搅拌2-氨基苯并咪唑(197mg,1.5mmol)和2-溴-4’-(二乙基氨基)苯乙酮(402mg,1.5mmol)在MeOH(7mL)中的溶液18小时。真空除去挥发物，并加入NaHCO3(饱和水溶液，30mL)。水性混合物用EtOAc(3X30mL)萃取。合并的EtOAc萃取物用MgSO4干燥并真空浓缩。剩余物在硅胶上(用直到5:95(MeOH:DCM)的梯度洗脱)纯化，由此分离出2-(2-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-1-(4-(二乙基氨基)苯基)乙酮(176mg,36%)，为米色固体。
制备
4-(1H-苯并[d]咪唑并[1,2-a]咪唑-2-基)-N,N-二乙基苯胺三氟乙酸盐T506：将2-(2-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-1-(4-(二乙基氨基)苯基)乙酮(50mg,0.155mmol)在AcOH(2mL)中的溶液加热至回流数小时。真空除去挥发物。剩余物溶解在ACN中，并通过半制备性HPLC纯化分离出T506(15mg,24%)，为米色固体。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ1.19(t,6H),3.48(q,4H),6.92(m,2H),7.42-7.51(m,2H),7.62(m,3H),7.91(m,1H),8.06(s,1H)；MS(ESI)：305.1(M+H+)。
制备
T552使用一般方法B制备。反应在40mg规模上进行。通过制备性HPLC纯化粗产物，得到T552TFA盐(0.006g,6.98%)。1H NMR(400MHz,CD3CN)9.08-9.07(m,1H),8.42-8.40(m,1H),8.19-8.16(m,1H),7.71-7.67(m,2H),7.40-7.29(m,2H),4.86(m,2H),4.79-4.74(m,2H)；MS(ESI)：291.0(M+H+)。
制备
T553使用一般方法B制备。反应在40mg规模上进行。通过制备性HPLC纯化粗产物，得到T553TFA盐(0.006g,7.42%)。1H NMR(400MHz,CD3CN)
9.23(s,1H),9.05(s,2H),7.82-7.79(m,1H),7.67-7.65(m,1H),7.52-7.43(m,2H),4.94-4.92(m,1H),4.84-4.80(m,2H),4.78-4.75(m,1H)；MS(ESI)：267.1(M+H+)。
制备
T554使用一般方法B制备。反应在40mg规模上进行。通过制备性HPLC纯化粗产物，得到T554TFA盐(0.006g,6.85%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)
11.63-11.61(m,1H),11.56(s,1H),8.17-8.16(m,1H),7.64-7.59(m,2H),7.33-7.23(m,2H),4.84-4.83(m,1H),4.76-4.68(m,3H)；MS(ESI)：299.6(M+H+)。
制备
T564使用一般方法B从5-溴-1-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶和5-乙炔基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸叔丁酯制备，接着用NaOH水解。该反应在85mg规模的5-溴-1-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶上进行。分离出T564TFA盐(0.007g,5.40%)。1HNMR(400MHz,CD3CN)
11.53(s,1H),8.50-8.49(m,2H),8.41-8.4(m,2H),8.17(m,2H),7.59-7.58(m,1H),7.53-7.52(m,1H),6.69-6.68(m,1H),6.54-6.53(m,1H),4.53-4.51(m,1H),4.48-4.46(m,2H),4.41-4.39(m,1H),3.86-3.84(m,2H),3.64-3.62(m,1H),3.59-3.53(m,5H)；MS(ESI)：393.5(M+H+)。
制备
4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N-甲基苯胺二-三氟乙酸盐T522：于室温向4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-苯胺(25mg,0.10mmol)在MeOH(3mL)的混悬液中加入低聚甲醛(110mg,3.7mmol)，接着加入NaCNBH3(40mg,0.63mmol)。在微波反应器于100℃加热该混合物20分钟。真空除去挥发物。剩余物溶解在EtOAc(15mL)中，并用NaHCO3(2X15mL)和盐水(15mL)洗涤。EtOAc层用MgSO4干燥，过滤并蒸发得到油状物，用半制备性HPLC纯化。得到4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N,N-二甲基苯胺二三氟乙酸盐(2.0mg,4%)，为橙色固体。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ3.17(s,6H),6.91(m,2H),7.64(m,1H),7.73-7.80(m,2H),8.07(d,J＝7.6Hz,1H),8.26(m,1H),8.34(m,2H),9.33(d,J＝7.6Hz,1H)。MS(ESI)：275.1(M+H+)。
制备
从前述反应还得到了4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N,N-二甲基苯胺二三氟乙酸盐T521(1mg,2%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ2.92(s,3H),6.75(m,2H),7.63(m,1H),7.71-7.79(m,2H),8.02(d,J＝7.6Hz,1H),8.24-8.30(m,3H),9.30(d,J＝7.6Hz,1H)。MS(ESI)：289.1(M+H+)
制备
4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯胺T520：向4-(4-硝基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(35mg,0.12mmol)在MeOH:THF:H2O(1:1:3,2mL)中的溶液中加入大量过量的Na2S2O4。该反应用NaHCO3(饱和水溶液)淬灭，并用EtOAc萃取。EtOAc层用H2O洗涤，然后用盐水洗涤。EtOAc层用MgSO4干燥。剩余物通过半制备性HPLC纯化，得到T520，为TFA盐(3mg,7%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.81(m,2H),7.27(m,1H),7.36(m,2H),7.45(m,2H),7.67(m,1H),7.88(m,1H),9.01(d,J＝4.8Hz,1H)。MS(ESI)：261.1(M+H+)。
制备
4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺T518：向2-(4-硝基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(58mg,0.20mmol)在乙醇(3mL)中的混悬液中加入SnCl2·2H2O(361mg,1.6mmol)。回流该溶液1.5小时，然后真空除去挥发物。剩余物溶解在DCM中，用1N NaOH洗涤，然后用H2O洗涤。DCM层用MgSO4干燥。在快速色谱法上纯化粗产物(硅胶，5%MeOH/DCM)，提供T518，为黄色固体(35mg,67%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ5.94(s,2H),6.70(m,2H),7.34(m,1H),7.47(m,1H),7.61(d,J＝7.6Hz,1H),7.75(m,1H),8.08(m,2H),8.21(m,1H),9.34(d,J＝7.6Hz,1H)。MS(ESI)：261.1(M+H+)。
制备
2-(4-硝基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶T511：将(E)-3-(二甲基氨基)-1-(4-硝基苯基)丙-2-烯-1-酮(410mg,1.9mmol)和1H-苯并[d]咪唑-2-胺(248mg,1.9mmol)在AcOH(10ml)中的溶液加热至回流过夜。旋转蒸发除去溶剂，剩余物在DCM和NaHCO3水溶液之间分配。过滤混合物得到纯的2-(4-硝基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(85mg,15%)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.47(m 1H),7.59(m,1H),7.90(d,J＝7.2Hz,1H),7.96(m,1H),8.38(m,1H),8.44(m,2H),8.61(m,2H),9.72(d,J＝7.2Hz,1H)。MS(ESI)：291.0(M+H+)
制备
4-(4-硝基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶T512：来自前述反应的DCM层用H2O洗涤，并干燥(MgSO4)。剩余物通过快速色谱法(硅胶，100%EtOAc)纯化，得到4-(4-硝基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(120mg,22%)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.65(m 1H),7.09-7.14(m,2H),7.47-7.52(m,1H),7.90(m,1H),8.08(m,2H),8.54(m,2H),8.91(d,J＝4.0Hz,1H)。MS(ESI)：291.1(M+H+)
制备
4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N-(3-氟丙基)苯胺T542：向在0.5mL DCM中的3-氟丙-1-醇(4mg,0.05mmol)加入戴斯-马丁试剂(42mg,0.1mmol)。室温搅拌混合物1小时，在搅拌的同时直接过滤成4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺(4mg,0.015mmol)和NaBH(OAc)3(43mg,0.2mmol)的混合物。剧烈搅拌5分钟后，通过添加0.5M NaOH(2mL)淬灭反应。混合物用EtOAc(3x10mL)萃取，有机相经MgSO4干燥并浓缩。通过HPLC纯化粗产物得到4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N-(3-氟丙基)苯胺，为黄色固体(2.7mg,33%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.76(d,J＝7.2Hz,1H),7.88(m,4H),7.55(d,J＝7.2Hz,1H),7.53(m,1H),7.40(m,1H),6.47(d,J＝9.2Hz,1H),4.68(t,J＝5.2Hz,1H),4.56(t,J＝5.2Hz,1H),3.34(t,J＝6.8Hz,2H),2.09(m,1H),2.02(m,1H)；MS(ESI)：321(M+H+)。
制备
4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)-N-(3-氟丙基)苯胺T544使用制备4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N-(3-氟丙基)苯胺的方法从4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺(10mg,0.038mmol)和3-氟丙-1-醇(8mg,0.1mmol)制备。得到产物T544，为黄色固体(7mg,33%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.93(d,J＝4.4Hz,1H),8.19(d,J＝8.4Hz,1H),7.65(m,1H),7.45(m,2H),7.35(d,J＝8.0Hz,1H),7.29(m,1H),7.17(d,J＝4.4Hz,1H),6.83(m,2H),4.73(t,J＝5.2Hz,1H),4.61(t,J＝5.2Hz,1H),3.47(t,J＝6.8Hz,2H),2.16(m,1H),2.08(m,1H)；MS(ESI)：321(M+H+)。
制备
4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)-苯胺T557：4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)苯胺使用制备4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N-(3-氟丙基)苯胺的方法从4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺(10mg,0.038mmol)和4-甲基苯磺酸2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙酯(23mg,0.075mmol)制备。得到的产物T557为黄色固体(1.2mg,5.1%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.31(d,J＝7.6Hz,1H),8.25(m,2H),8.02(d,J＝7.2Hz,1H),7.78-7.75(m,1H),7.72(m,1H),7.61(m,1H),6.80(d,J＝9.2Hz,2H),4.56(m,1H),4.45(m,1H),3.75(m,1H),3.71(t,J＝5.2Hz,2H),3.69-3.65(m,H),3,47-3,43(m,H)；MS(ESI)：395(M+H+)。
制备
合成GC-5333-63：将4-溴苯胺(10g,58mmol)溶解在MeOH(20ml)中。向反应混合物中加入低聚甲醛(5.18ml,174mmol)和25%的甲醇钠溶液(48.3ml,291mmol)。在65℃加热混合物1小时，并且冷却至室温。分份将硼氢化钠(6.17ml,174mmol)加入反应混合物中。再加热该反应混合物2小时。浓缩混合物，用水(50mL)稀释，用EtOAc(3x50mL)萃取。合并有机层，干燥并真空浓缩。剩余物在快速柱色谱(硅胶,10%EtOAc/DCM)纯化，得到GC-5333-63(7.5g,69%)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.27-7.25(m,2H),6.50-6.48(m,2H),3.80.(br,1H),2.81(s,3H)；MS(ESI)：186.1(M+H+)。
GC-5333-65使用一般方法D制备。反应在4g规模上进行。GC-5333-65在20%EtOAc:己烷混合物中在Biotage纯化体系(500mg,10%)上以梯度洗脱而洗脱出来，为无色油状物。1H-NMR (400MHz,CDCl3)：δ7.31-7.29(m,2H),6.59-5.58(m,2H),4.59(dt,J＝47.2,5.2Hz,2H),3.62(dt,J＝24.8,5.2Hz,2H),2.99(s,3H)；MS(ESI)：232.1(M+H+)。
T478使用一般方法A制备。反应在30mg规模上进行。T78分离为固体(8mg,23%)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.75-7.72(m,2H),7.57-7.52(m,2H),7.24-7.19(m,2H),6.81-6.76(m,3H),4.63(dt,J＝47.2,5.2Hz,2H),3.70(dt,J＝24.8,5.2Hz,2H),3.01(s,3H)；MS(ESI)：270.1(M+H+)。
3.放射性标记前体的制备：
制备
4-甲基-苯磺酸2-((叔丁氧基羰基)(4-(喹啉-2-基)苯基)氨基)乙酯T411P使用一般方法D制备。反应在0.187g规模上进行。T411P分离为油状物(0.014g,6%)；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.28-8.19(m,2H),8.09(dt,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.88-7.82(m,2H),7.76-7.70(m,3H),7.54(ddd,J＝8.0,6.8,0.8Hz,1H),7.30-7.24(m,4H),4.21(t,J＝5.6Hz,2H),3.90(t,J＝5.6Hz,2H),2.34(s,3H),1.40(s,9H)；MS(ESI)：519.1[M+H+],541.1(M+Na+)。
制备
4-甲基苯磺酸2,2-二甲基-4-氧代-5-(4-(喹啉-2-基)苯基)-3,8,11-三氧杂-氮杂十三烷-13-基酯T442P使用一般方法D制备。反应在0.032g规模上进行。T442P分离为浅黄色油状物(0.028g,46%)；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.21(d,J＝8.4Hz,2H),8.11(d,J＝8.8Hz,2H),7.86(d,J＝8.8Hz,1H),7.82(d,J＝8.0Hz,1H),7.75(dt,J＝8.0,2.0Hz,2H),7.70(d,J＝6.8Hz,1H),7.52(t,J＝8.0Hz,1H),7.38(d,J＝8.4Hz,1H),7.27(d,J＝8.0Hz,1H),4.12(t,J＝4.8Hz,2H),3.83(t,J＝4.8Hz,2H),3.64-3.59(m,4H),3.52(s,4H),2.38(s,3H),1.43(s,9H)；MS(ESI)：607.2M+H+)。
制备
4-(4-(6-甲氧基喹啉-2-基)苯基)哌嗪-1-羧酸3-(甲苯磺酰基氧基)丙酯T498P使用用于N-烷基化的一般实验方法E用Cs2CO3作为碱(方法E)制备。反应在0.032g规模上进行。产物在20%EtOAc:DCM混合物中在Combiflash纯化体系上以梯度洗脱而洗脱出来。T498P分离为浅黄色固体(0.010g,18%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.06(宽三重峰,J＝8.8Hz,4H),7.79(dt,J＝8.4和1.6Hz,2H),7.77(d,J＝8.4Hz,1H),7.36-7.32(m,3H),7.06(d,J＝2.4Hz,1H),7.00(dt,J＝8.8和1.6Hz,2H),4.14(q,J＝7.2Hz,4H),3.93(s,3H),3.60(宽单峰,4H),3.22(宽单峰,4H),2.43(s,3H),2.01(q,J＝8.0Hz,2H)；LC-MS(ESI)：(M+H+)。
制备
4-甲基苯磺酸2-(2-(2-((2-(4-(二甲基氨基)苯基)喹啉-6-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯T510P使用一般方法E制备。反应在0.050g规模上进行。T510P分离为黄色固体(0.030g,29%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.05(dt,J＝8.0,2.0Hz,2H),7.98(d,J＝8.8Hz,2H),7.77(dt,J＝8.8,2.0Hz,2H),7.76(d,J＝8.8Hz,1H),7.33(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.28(dd,J＝8.4,0.4Hz,2H),7.04(d,J＝2.8Hz,1H),6.81(dt,J＝8.8,2.0Hz),4.21(t,J＝4.8Hz,2H),4.15(t,J＝4.8Hz,2H),3.88(t,J＝4.8Hz,2H),3.70-3.66(m,3H),3.63-3.60(m,3H),3.01(s,3H),3.39(s,6H)；MS(ESI)：551.2(M+H+),324(M+Na+)。
制备
4-甲基苯磺酸2-(4-(4-(2-(6-甲氧基喹啉-2-基)苯基)哌嗪-1-基)乙氧基)乙氧基)乙酯T530P使用一般方法E制备。反应在0.1g规模上进行。T530P分离为灰白色油状物(0.046g,24%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.99(dt,J＝8.8,2.0Hz,2H),8.01(d,J＝8.4Hz,1H),7.97(d,J＝9.2Hz,1H),7.73(dt,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.71(d,J＝9.2Hz,1H),7.29-7.25(m,2H),6.99(d,J＝2.8Hz,1H),6.95(dt,J＝8.8,2.0Hz,2H),4.09(t,J＝4.8Hz,2H),3.86(s,3H),3.64(t,J＝4.8Hz,2H),3.61-3.52(m,6H),3.25(t,J＝4.8Hz,4H),2.64-2.60(m,6H)；MS(ESI)：606.1(M+H+)。
制备
4-甲基苯磺酸2-(2-((4-(二甲基氨基)苯基)乙炔基)-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙酯：T482P使用一般方法E制备。反应在140mg规模的T481上进行。T482P分离为白色固体(135mg,55%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.67(m,1H),7.44-7.48(m,4H),7.25-7.27(m,3H),7.05(d,J＝8.4Hz,2H),6.68(m,2H),4.57(t,J＝5.6Hz,2H),4.43(t,J＝5.6Hz,2H),3.04(s,6H),2.33(s,3H)；MS(ESI)：460(M+H+)。
制备
2-(甲基(5-(喹啉-2-基)吡啶-2-基)氨基)乙醇：T491使用一般方法M制备。反应在110mg规模的T455上进行。T491分离为浅黄色固体(120mg,88%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.86(dd,J＝2.4,0.8Hz,1H),8.41(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),8.15(d,J＝8.4Hz,1H),8.09(dd,J＝8.4,0.8Hz,1H),7.78(m,2H),7.69(m,1H),7.48(m,1H),6.69(dd,J＝8.8,0.8Hz,1H),4.92(宽单峰,1H),3.90(t,J＝4.6Hz,2H),3.81(t,J＝4.6Hz,2H),3.15(s,3H)；MS(ESI)：280(M+H+)。
制备
4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(甲基(5-(喹啉-2-基)吡啶-2-基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙酯：T502P使用一般方法D制备。反应在94mg规模的T491上进行。T502P分离为浅黄色油状物(86mg,49%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.92(dd,J＝2.4,0.8Hz,1H),8.37(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),8.15(d,J＝8.8Hz,1H),8.09(dd,J＝8.4,1.0Hz,1H),7.80(m,2H),7.69(m,1H),7.48(m,1H),6.65(dd,J＝8.4,0.8Hz,1H),4.15(m,2H),3.84(t,J＝6.2Hz,2H),3.66-3.72(m,4H),3.57(t,J＝1.4Hz,2H),3.17(s,3H),2.42(s,3H)；MS(ESI)：522(M+H+)。
制备
4-甲基苯磺酸2,2-二甲基-4-氧代-5-(5-(喹啉-2-基)吡啶-2-基)-3,8,11-三氧杂-5-氮杂十三烷-13-基酯：T525P使用一般方法D制备。反应在67.0mg规模的T503上进行。T525P分离为无色油状物(80.5mg,65%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.10(dd,J＝2.8,0.8Hz,1H),8.44(dd,J＝4.6,2.6Hz,1H),8.22(d,J＝8.4Hz,1H),8.14(d,J＝8.4Hz,1H),7.71-7.86(m,6H),7.54(m,1H),7.29(m,2H),4.22(t,J＝6.4Hz,2H),4.10(m,2H),3.70(t,J＝6.4Hz,2H),3.61(m,2H),3.53(m,2H),3.49(m,2H),2.40(s,3H)；MS(ESI)：608(M+H+)。
制备
4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)苯胺：T540P的CL-5311-144中间体使用一般方法E制备。反应在277mg规模的T464上进行。CL-5311-144分离为浅黄色固体(140mg,48%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ7.58(m,1H),7.47(m,1H),7.09-7.38(m,4H),6.66(m,2H),3.91(s,3H)；MS(ESI)：248(M+H+)。
制备
4-甲基苯磺酸3-(4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)苯基氨基)丙酯：T540P使用一般方法Q制备。反应在80.0mg规模的CL-5311-144上进行。T540P分离为浅黄色固体(83.0mg,56%)。1H NMR(400MHz,CD2Cl2)：δ7.77(m,2H),7.68(m,1H),7.44(m,2H),7.24-7.38(m,5H),6.53(m,2H),4.14(t,J＝6.0Hz,2H),4.09(宽三重峰,J＝6.0Hz,2H),3.89(s,3H),3.24(m,2H),2.44(s,3H),1.95(m,2H)；MS(ESI)：460(M+H+)。
制备
4-甲基苯磺酸2-(2-(2-((5-((4-(二甲基氨基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)(甲基)氨基)乙氧基)乙氧基)乙酯：T546P使用一般方法D制备。反应在35mg规模的T526上进行。T546P分离为无色胶状物(30.2mg,47%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.26(dd,J＝2.4,0.8Hz,1H),7.78(m,2H),7.50(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.35(m,2H),7.31(m,2H),6.64(m,2H),6.44(d,J＝8.8Hz,1H),4.12(t,J＝4.8Hz,2H),3.74(t,J＝5.6Hz,2H),3.61-3.64(m,4H),3.52-3.53(m,4H),3.07(s,3H),2.96(s,6H),2.42(s,3H)；MS(ESI)：538(M+H+)。
制备
2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)喹啉-6-醇：CL-5311-146
T550P的中间体使用一般方法A制备。反应在208mg规模的2-氯喹啉-6-醇上进行。CL-5311-146分离为灰色固体(214mg,58%)。1H NMR(400Hz,DMSO-d6)：δ9.88(s,1H),8.10(d,J＝8.8Hz,1H),8.06(m,2H),7.89(d,J＝8.8Hz,1H),7.81(d,J＝9.2Hz,1H),7.25(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.09(d,J＝2.8Hz,1H),7.02(m,2H),3.22(br,4H),2.45(宽单峰,4H),2.22(s,3H)；MS(ESI)：320(M+H+)。
制备
4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)喹啉-6-基氧基)乙氧基)-乙氧基)乙酯：T550P使用一般方法C制备。反应在101mg规模的CL-5311-146上进行。T550P分离为白色固体(90.0mg,47%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.97-8.08(m,4H),7.75-7.79(m,3H),7.35(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.29(m,2H),7.06(d,J＝2.8Hz,1H),7.02(m,2H),4.24(t,J＝4.6Hz,2H),4.15(t,J＝4.8Hz,2H),3.89(t,J＝4.8Hz,2H),3.67-3.70(m,4H),3.61-3.64(m,2H),3.35(宽单峰,4H),2.66(宽单峰,4H),2.40(s,3H),2.39(s,3H)；MS(ESI)：606(M+H+)。
制备
4-甲基苯磺酸2-(2-(4′-(二甲基氨基)-[1,1′-联苯]-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙酯T543P使用一般方法E制备。反应在0.082g规模上进行。T543P分离为黄色固体(0.050g,38%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.78(d,J＝7.6Hz,1H),7.62-7.71(m,4H),7.56(d,J＝8.4Hz,2H),7.39(d J＝8.4Hz,2H),7.22-7.34(m,3H),7.05(d,J＝8.8,Hz,2H),6.83(d,J＝8.8,Hz,2H),3.02(s,6H),2.32(s,3H)；MS(ESI)：512(M+H+)。
制备
2-氯喹啉-6-醇：DHK-6-71使用一般方法G制备。反应在2g规模上进行。DHK-6-71分离为黄色固体(1.72g,93%)。MS(ESI)：180.0(M+H+)。
2-(4-吗啉代苯基)喹啉-6-醇：DHK-6-77使用一般方法A制备。反应在0.2g规模上进行。DHK-6-77分离为黄色固体(0.31g,91%)。MS(ESI)：307.1(M+H+)。
4-甲基苯磺酸2-(2-(2-((2-(4-吗啉代苯基)喹啉-6-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯：T549P使用一般方法C制备。反应在0.19g规模上进行。T549P分离为白色固体(0.1g,27%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.07(d,J＝8.8Hz,2H),8.03(d,J＝8.8Hz,1H),8.00(d,J＝9.2Hz,1H),7.78(d,J＝8.0Hz,3H),7.35(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.30(d,J＝8.0Hz,2H),7.07(d,J＝3.2Hz,1H),7.01(d,J＝8.8Hz,2H),4.23(t,J＝4.8Hz,2H),4.15(t,J＝4.4Hz,H),3.89(t,J＝4.8Hz,3H),3.88(t,J＝4.8Hz,3H),3.71-3.62(m,4H),3.64-3.62(m,2H),3.25(t,J＝4.8Hz,4H),2.40(s,3H)；MS(ESI)：593.1(M+H+)。
制备
5-((6-硝基吡啶-3-基)乙炔基)苯并[d]噻唑：T114P使用一般方法A制备。反应在0.04g规模上进行。T114P分离为黄色固体(0.070g,99%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.53(s,1H),8.91(d,J＝1.6Hz,1H),8.46-8.39(m,3H),8.32(d,J＝8.0Hz,1H),7.68(dd,J＝8.4,1.2Hz,1H)；MS(ESI)：282.0(M+H+)。
制备
T508P使用一般方法D制备。该反应在0.2g规模上进行。T508P分离为固体(0.18g,42.9%)。1H NMR(400MHz,CD3CN)：δ7.74-7.72(m,2H),7.63-7.61(m,1H),7.51-7.48(m,3H),7.41-7.38(m,2H),7.29-7.24(m,2H),6.77-6.75(m,2H),4.52-4.49(m,2H),3.94-3.92(m,2H),3.86-3.83(m,2H),3.46-3.36(m,6H),3.01(s,6H),2.42(s,3H)；MS(ESI)：548.1(M+H+)。
制备
T527P使用一般方法D从5-((1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸丁酯和2,2′-(乙烷-1,2-二基双(氧基))双(乙烷-2,1-二基)双(4-甲基苯磺酸酯)制备。该反应在0.21g规模的5-((1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙炔基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-羧酸丁酯上进行。T527P分离为无色油状物(0.07g,18.53%)。1H NMR(400MHz,CD3CN)δ8.69(m,1H),8.27-8.26(m,1H),7.88-7.87(m,1H),7.72-7.66(m,3H),7.55-7.53(m,1H),7.38-7.28(m,4H),6.71-6.70(m,1H),4.59-4.56(m,2H),4.48-4.44(m,2H),3.93-3.86(m,4H),3.47-3.45(m,2H),3.41-3.36(m,4H),2.40(s,3H),1.83-1.79(m,2H),1.57-1.51(m,2H),1.02-1.00(m,3H)；MS(ESI)：645.0(M+H+)。
制备
(E)-3-(二甲基氨基)-1-(4-硝基苯基)丙-2-烯-1-酮：在密封试管中将1-(4-硝基苯基)乙酮(2.2g,13mmol)和N,N-二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛(25ml)的溶液加热至120℃过夜。除去挥发物。剩余物溶解在DCM中，并用H2O洗涤两次。DCM层用MgSO4干燥。通过快速色谱法(硅胶，100%EtOAc)纯化粗产物，分离出(E)-3-(二甲基氨基)-1-(4-硝基苯基)丙-2-烯-1-酮(2.2g)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.99(s,3H),3.23(s,3H),5.70(d,J＝12.4Hz,1H),7.94(d,J＝12.4Hz,1H),8.03(m,2H),8.26(m,2H)。MS(ESI)：221(M+H+)
制备
(4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯：在密封试管中于120°C将4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯胺(350mg,1.3mmol)在一缩二碳酸二叔丁酯(4mL)中的溶液加热15分钟。反应混合物用DCM稀释，并通过快速色谱法(硅胶，100%EtOAc)纯化，得到(4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(249mg,53%)，为橙色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.59(s,9H),6.89(m,2H),6.97(m,1H),7.16(m,1H),7.54-7.58(m,3H),8.11(m,1H),8.88(d,J＝4.4Hz,1H)。MS(ESI)：361(M+H+)。
制备
4-甲基苯磺酸3-((4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯基)(叔丁氧基羰基)氨基)丙酯T544P。标题化合物使用一般方法D从4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯胺和双(4-甲基苯磺酸丙烷-1,3-二酯)制备。T554P分离为固体(130mg,21%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.51(s,9H),2.09(m,2H),2.46(s,3H),3.87-3.90(m,2H),4.12-4.15(m,2H),6.94(m,1H),7.04(bs,1H),7.19(m,1H),7.35(m,1H),7.52-7.65(m,5H),7.77-7.79(m,2H),8.18(m,1H),8.97(d,J＝4.4Hz,1H)。MS(ESI)：573.1(M+H+)。
制备
N，N-二甲基-5-(4-硝基喹啉-2-基)吡啶-2-胺T480P使用一般方法A从2-溴-4-硝基喹啉(50mg,0.2mmol)和(6-(二甲基氨基)吡啶-3-基)硼酸(34mg,0.2mmol)制备。所得产物为黄色固体(40mg,68%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.99(d,J＝2.4Hz,1H),8.36-8.34(m,2H),8.30(s,1H),8.19(m,1H),7.81(m,1H),7.65(m,1H),6.66(d,J＝9.0Hz,1H),3.21(s,6H)；MS(ESI)：295(M+H+)。
制备
4-(4-硝基喹啉-2-基)苯胺T492P使用一般方法A从2-溴-4-硝基喹啉(50mg,0.2mmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(44mg,0.2mmol)制备。所得产物为深棕色固体(31mg,58%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.36(m,1H),8.32(s,1H),8.20(m,1H),8.06(m,2H),7.80(m,1H),7.65(m,1H),6.81(m,2H),3.99(宽单峰,2H)；MS(ESI)：266(M+H+)。
制备
N-甲基-4-(4-硝基喹啉-2-基)苯胺T466P使用一般方法A从2-溴-4-硝基喹啉(50mg,0.2mmol)和N-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(46mg,0.2mmol)制备。得到产物T466P，为棕色固体(37mg,66%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.34(m,1H),8.32(s,1H),8.19(m,1H),8.09(m,2H),7.79(m,1H),7.63(m,1H),6.72(m,2H),2.93(s,3H)；MS(ESI)：280(M+H+)。
制备
6-甲氧基-2-(4-(4-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙基)哌嗪-1-基)-苯基)喹啉AS-5332-79使用一般方法E制备。反应在0.032g规模上进行。AS-5332-79分离为灰白色固体(0.025g,54%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.05(dt,J＝8.8,2.8Hz,2H),8.00(d,J＝10.4Hz,2H),7.76(d,J＝8.8Hz,1H),7.32(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.04(d,J＝2.8Hz,1H),7.01(dt,J＝9.2,2.8Hz,2H),4.58(t,J＝4.4Hz,1H),3.92(s,3H),3.86-3.77(m,1H),3.51-3.45(m,2H),3.30(t,J＝4.8Hz,4H),2.63(t,J＝4.8Hz,4H),2.53-2.49(m,2H),1.88-1.80(m,4H),1.73-1.68(m,1H),1.59-1.49(m,4H)；MS(ESI)：462.4(M+H+)。
制备
2-(4-(4-(3-氯丙基)哌嗪-1-基)苯基)-6-甲氧基喹啉AS-5332-94，T499P(Cl)使用一般方法E制备。反应在0.025g规模上进行。T-99P(Cl)分离为灰白色固体(0.010g,32%)。1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.6-7.99(m,4H),7.77(d,J＝8.8Hz,1H),7.33(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.06-7.00(m,3H),3.92(s,3H),3.66(t,J＝6.4Hz,2H),3.29(t,J＝5.2Hz,4H),2.62(t,J＝4.8Hz,4H),2.55(t,J＝7.6Hz,2H),1.99(m,2H)；MS(ESI)：396.1(M+H+)。
4.放射性化学的一般方法
放射性标记制备工艺和工艺控制的描述
制备[F18]氟离子的一般工艺
18F-放射性标记：
在回旋加速器靶中生成的水性[F-18]氟离子经过阴离子交换树脂柱。[O-18]H2O容易经过阴离子交换树脂，而[F-18]氟化物被保留。[F-18]氟化物使用碳酸钾(3mg)在水(0.4mL)中的溶液从柱中洗脱，并且收集在反应容器中。将溶解在乙腈(1mL)中的
222(20mg)添加至反应容器中的水性[F-18]氟化物混合物。Kryptofix隔离钾离子，防止形成强的K+/F配对。这增加了[F-18]氟离子的化学反应性。混合物通过在70-115℃在惰性气体流和/或减压(250mbar)条件下加热而进行干燥，可以加入额外的等份的乙腈以确保氟化物混合物完全干燥。该蒸发步骤除去水，并将[F-18]转化成无水形式，其相比于水性[F-18]氟化物反应性更大。
氟-18[F-18]通过质子轰击水中的稳定同位素氧-18(O-18)而生成。为了进行轰击，富集的O-18的化学形式为[O-18]H2O。所生成的[F-18]氟为水性[F-18]氟离子。将目标水装入约1-2mL的靶中，并且加压至约350psi。钽靶体由高强度的耐用金属箔装配。该金属箔是称为
的合金。
的主要组分为钴、镍、铬和铁。该薄的
箔窗口允许质子的进入，但是也足够耐受抵挡加压水和质子辐射。该装置使用两个Siemens RDS-111 Eclipse回旋加速器，后者产生具有40-60微安束电流的11MeV质子。两个靶均由钽金属制成，并且仅用于生成F-18。在质子轰击后，含有[F-18]氟离子的[O-18]H2O转移至屏蔽的外壳("热室(hot cell)")中。水性[F-18]氟化物然后从[O-18]H2O分离。
提取[F-18]氟化物并转化成无水形式
在回旋加速器靶中生成的水性[F-18]氟离子，如前文段落所描述的，经过阴离子交换树脂柱。该[O-18]H2O易于经过阴离子交换树脂，而[F-18]氟化物被保留。[F-18]氟化物从柱使用碳酸钾(3mg)在水(0.4mL)中的溶液洗脱，并且收集在反应容器中。将溶解在乙腈(1mL)中的
222(20mg)添加至反应容器中的水性[F-18]氟化物混合物中。Kryptofix隔离了钾离子，从而防止形成强度K+/F离子对。这增加了[F-18]氟离子的化学反应性。
混合物通过在70-115℃在惰性气体流和/或减压(250mbar)条件下加热而干燥，可以加入额外的乙腈以确保氟化物混合物完全干燥。该蒸发步骤除去水，并且将[F-18]转化成无水形式，其相比于水性[F-18]氟化物的反应性大得多。
无水[F-18]氟化物与W366前体的反应
将硝基前体(1至20mg)溶解在无水DMSO(0.5-2.5mL)中的溶液添加至含无水[F-18]氟化物的反应容器中。将该容器加热至约150±10℃保持15±5分钟，从而诱导芳族硝基离去基团被[F-18]氟化物所取代，如以下方案所示。然后反应混合物用2N HCl(lmL)处理，并在105℃回流10分钟。
HPLC纯化[F-18]W366
含粗[F-18]W366的反应混合物冷却，并首次经过Al2O3柱，并接着加入MeCN(1±0.5mL)和H2O(2±1.0mL)的混合物。然后将最终的溶液转移到HPLC样品环管中，并使用半制备性HPLC柱经色谱法(ACE C18 Pyramid,7μ,250x10mm,Phenomenex Luna,C18,5μ,10X 250mm或Phenomenex SynergiHydro-RP C18,250x10mm,使用梯度体系，最大至5.5mL/min，但是也可以使用低速率，如果存在高的反压或者体系可以以较低的速率开始并且然后增加至最大流速)纯化。第一柱使用线性梯度，起始于5%MeCN(0.1%甲酸):95%H2O(0.1%甲酸)(含100mg/L的抗坏血酸)且在30分钟时到95:5混合的溶剂。柱洗脱液使用UV(220,254或280nm)和串联连接的放射度检测器进行监控。在与放射度检测器开始显示主峰的时间一致的针对W366参比标准所确定的保留时间窗口上从柱中收集纯化的[F-18]W366。在产物洗脱后，将其收集并装载到HPLC装载环管上，并再次纯化。(ACE C18 Pyramid,7μ,250x10mm,Phenomenex Luna,C18,5μ,10X250mm或PhenomenexSynergi Hydro-RP C18,250x10mm，使用适于纯化W366的等度溶剂体系，如40%MeCN:水(含0.1%甲酸和100mg/L的抗坏血酸)，最大至5.5mL/min，但是也可以使用低速率，如果存在高的反压或者体系可以以较低的速率开始并且然后增加至最大流速)。
纯化[F-18]W366的配制、无菌过滤和无菌填充
纯化的[F-18]W366馏分从第二HPLC纯化柱洗脱，并用水(40 100mL)(含5±5mg/mL抗坏血酸)稀释，然后捕获至C18 SepPak柱上。C18 SepPak柱用水(10mL)(含5±5mg/mL的抗坏血酸)洗涤，接着用0.5-0.9mL EtOH洗脱产物。然后样品用无菌水(4.5-9.0mL的水)(含25±25mg/mL的抗坏血酸)稀释，得到[F-18]W366在最大为10%EtOH:水中的最终制剂。然后，溶液经过0.45μm的无菌填料进入预先装载的收集小瓶中。
生物数据
所披露的化合物有利地与18F-PiB竞争结合，如下文所示。简言之，来自含有高的淀粉样蛋白斑和纤维原负担的脑区域的5微米厚人脑切片使用约20uCi的放射性标记的示踪剂在2.5%:2.5%:95%DMSO:EtOH:PBS中在阻断剂(2.5和0.25uM的总浓度)的存在下或不存在阻断剂(对照)时进行孵育。室温孵育该切片90分钟。然后该切片在PBS中快速洗涤，接着用70%EtOH:PBS洗涤2分钟，然后用30%EtOH:PBS洗涤2分钟，然后用PBS快速洗涤。切片干燥30分钟，然后暴露于放射自显影膜20分钟。然后从载玻片上移除脑切片，并且在γ计数器中对放射性进行计数。对计数进行归一化，确定阻断百分比(percent blocking)，从而确定IC50值。数值越低，化合物取代示踪剂越有效。
无水[F-18]氟化物与T114前体的反应
[F-18]氟化物使用K2CO3和Kryptofix-2.2.2根据上述一般方法制备。将T114P(10mg)溶解在无水DMSO(1.0mL)中的溶液添加至含无水[F-18]氟化物中的反应容器。将该容器加热至约150℃保持20分钟。将反应混合物装载至含水(4mL)的小瓶，然后将所得溶液转移至HPLC试样环管(5mL)中，并使用半制备性HPLC柱经色谱分离(Phenomenex Gemini C18,250x10mm)纯化。该柱使用5mL/min的流速和等度溶剂体系(40%MeCN：60%H2O，含0.85mL的12N HCl每1000mL水)。柱洗脱液使用UV(254nM)和串联连接的放射度检测器进行监控。在与放射度检测器开始显示主峰一致的为T114参考标准确定的保留时间窗口上从柱中收集纯化的[F-18]T114。[F-18]T114在该体系中的保留时间约为39分钟。
纯化[F-18]T114的配制
将从HPLC纯化柱中洗脱的纯化[F-18]T114馏分用水(50mL)稀释，并经过C18 SepPak柱过滤。C18 SepPak柱用水(10mL)洗涤，接着用0.5mL乙醇洗脱产物。然后样品用4.5mL的水稀释，得到[F-18]T114在最大10%乙醇水溶液中的最终制剂。
[F-18]标记脂族甲苯磺酸酯的一般方法
[F-18]氟化物使用K2CO3和Kryptofix-2.2.2根据上述的一般方法制备。冷却后，将甲苯磺酸酯前体(5mg至20mg)在无水DMSO或MeCN(1mL)中的溶液加入至在Explora RN合成模块的反应容器中的“无水”反应性[F-18]氟离子剩余物中，加热该反应混合物(80℃至110℃)10至15分钟。将反应混合物冷却至70℃。
如果前体含有酸不稳定的保护基团，则将1N HCl(1mL)加入至反应混合物中并加热至100℃。5分钟后，将反应混合物冷却至室温，并加入2M NaOAc(0.5mL)。将所得混合物加入至含有水(15mL)的单独小瓶中，并装载进入HPLC试样环管中以启动纯化。
如果前体含有碱不稳定的保护基团，则将1:1MeOH：1N NaOH(1mL)加入至反应混合物中，然后加热至100℃。5分钟后，将反应混合物加入至含有水(2mL)的单独小瓶中，并装载进入HPLC试样环管中以启动纯化。
如果前体不含保护基团，则将所得反应混合物加入至含水(3mL)的单独小瓶中，并装载进入HPLC试样环管中以启动纯化。
使用半制备性HPLC(Phenomenex Gemini C18,250x10mm，流速5mL/min)进行纯化。最终产物的洗脱在5%MeCN(0.05%TFA)(在H2O(0.05%TFA)中)开始，直到在15至20分钟内达到最终浓度的MeCN(0.05%TFA)。一旦达到最终浓度的MeCN(0.05%TFA)，则洗脱以等度方式运行，直到收集到[F-18]产物。收集后，依照上述的最终配制。
表4：脂族甲苯磺酸酯的放射性标记结果
制备公开化合物的一般实验方法：
一般实验方法A：Suzuki偶联
向配有磁力搅拌棒的微波小瓶中置入芳基卤/卤代杂环(1当量)、硼酸或硼酸酯(1.1当量)、K2CO3(3当量)、P[PPh3]4(0.05当量)和DMF(30体积)。混悬液在Biotage Emrys Initiator微波反应器(250W)中于100℃受照射30分钟。在冷却至室温后，真空除去溶剂。剩余物经硅胶(使用己烷:EtOAc或DCM:EtOAc或DCM:MeOH作为洗脱剂)纯化，得到联芳。
一般实验方法B：Sonogashira偶联
向配有磁力搅拌棒的微波小瓶中置入芳基卤/卤代杂环(1当量)、乙炔(1.1-1.5当量)、CuI(0.05当量)、P[PPh3]4或PdCl2(PPh3)2(0.01-0.05当量)、DIPEA(3当量)和ACN(30体积)。混悬液在Biotage Emrys Initiator微波反应器(250W)中于120℃受照射30分钟。在冷却至室温后，真空除去溶剂。剩余物经硅胶(使用己烷:EtOAc或DCM:EtOAc或DCM:MeOH作为洗脱剂)纯化，得到二取代的乙炔。
一般实验方法C：酚的烷基化
向配有磁力搅拌棒、橡胶隔膜和氩气入口并含DMF(10体积)的圆底烧瓶中置入苯酚(1当量)。向该溶液中加入烷化剂(1.1当量)、Cs2CO3(3当量)，反应混合物在60℃搅拌1-3小时。反应完成后，真空除去溶剂。剩余物经硅胶(使用己烷:EtOAc或DCM:EtOAc或DCM:MeOH作为洗脱剂)纯化，得到烷基化的产物。
一般实验方法D：使用NaH进行N-烷基化
向配有磁力搅拌棒、橡胶隔膜和氩气入口并含DMF(10体积)的圆底烧瓶中置入胺(1当量)。向该溶液中加入NaH(1.5-6当量),、烷化剂(1.1-2当量)，反应混合物在室温搅拌1-15小时。然后将反应混合物倒入水(50体积)中，并在EtOAc(4x40体积)中萃取。合并的有机萃取物用H2O(3x40体积)、盐水(50体积)洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。剩余物经硅胶(使用己烷:EtOAc或DCM:EtOAc或DCM:MeOH作为洗脱剂)纯化，得到N-烷基化的产物。
一般实验方法E：使用Cs2CO3进行N-烷基化
向配有磁力搅拌棒含DMF(10体积)的圆底烧瓶中置入胺(1当量)。向该溶液中加入烷化剂(1.1-2当量)、Cs2CO3(2-3当量)，反应混合物在60℃搅拌1-15小时。反应完成后，真空除去溶剂。然后将反应混合物倒入水(50体积)中。如果产物为固体，过滤，用水洗涤并干燥。
如果产物溶解于水中，则在EtOAc(4x40体积)中萃取。合并的有机萃取物用H2O(3x40体积)、盐水(50体积)洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。剩余物经硅胶(使用己烷:EtOAc或DCM:EtOAc或DCM:MeOH作为洗脱剂)纯化，得到N-烷基化的产物。
一般实验方法F：醇的甲苯磺酰化
向配有磁力搅拌棒并含DCM(17体积)的圆底烧瓶中置入冷却至0℃的乙醇(1当量)。向该溶液中加入Ts2O(1.5当量)、Et3N(3当量)，且反应混合物在室温搅拌1小时。反应完成后，真空除去DCM。剩余物经硅胶(使用己烷:EtOAC作为洗脱剂)纯化，得到最终的甲苯磺酸酯。
一般实验方法G：芳基甲基醚的去甲基化
向配有磁力搅拌棒、橡胶隔膜和氩气入口并含DCM(5体积)的圆底烧瓶置入冷却至0℃的甲醚(1当量)。向该溶液中缓慢加入BBr3(5当量)，反应混合物在室温搅拌15小时。反应完成后，反应以NaHCO3溶液(50体积)淬灭，并在DCM(4x10体积)中萃取。合并的有机萃取物用H2O(3x10体积)洗涤，干燥(Na2SO4)，并真空浓缩，得到苯酚。
一般实验方法H：叠氮化合物和乙炔之间使用CuI和DIPEA的“Click”反应
向配有磁力搅拌棒、橡胶隔膜和氩气入口并含THF(29体积)的圆底烧瓶中置入叠氮化合物(1当量)。向该溶液中加入乙炔(1当量)、CuI(0.2当量)、DIPEA(0.4当量)，反应混合物在室温搅拌直到LCMS认为完成。反应完成后，真空除去溶剂。剩余物经硅胶(使用己烷:EtOAC作为洗脱剂)纯化，得到最终的三唑。
一般实验方法I：使用K2CO3进行甲硅烷基脱保护
向配有磁力搅拌棒的圆底烧瓶中置入在MeOH(20体积)中的甲硅烷基保护的化合物(1当量)。向该化合物加入K2CO3(1.2当量)，反应混合物在室温搅拌1小时。反应完成后，真空除去溶剂。剩余物经硅胶(使用己烷:EtOAC作为洗脱剂)纯化，得到脱保护的产物。
一般实验方法J：使用TBAF进行甲硅烷基脱保护
向配有磁力搅拌棒的圆底烧瓶中置入甲硅烷基保护的化合物(1当量)。向该化合物中加入TBAF(1M溶液，在THF中)(1当量)，反应混合物在室温搅拌10分钟。反应完成后，真空除去溶剂。剩余物经硅胶(使用己烷:EtOAC作为洗脱剂)纯化，得到脱保护的产物。
一般实验方法K：Boc、THP和缩酮脱保护
向配有磁力搅拌棒的圆底烧瓶中置入受保护的物质(1当量)。向该化合物中加入HCl(4M的二噁烷溶液，3.8体积)，反应混合物在室温搅拌2小时。向该溶液中加入在MeOH(3.8体积)中的浓HCl(0.08体积)，反应混合物在室温搅拌2小时。反应完成后，真空除去溶剂，得到最终的化合物。
一般实验方法L：硝基吡啶基化合物转化成氟吡啶基化合物
向配有磁力搅拌棒并含DMSO(10体积)的圆底烧瓶中置入硝基化合物(1当量)。向该溶液中加入KF(5当量)，反应混合物在140℃搅拌1.5小时。反应完成后，反应以水(10体积)淬灭，并在DCM(4x10体积)中萃取。合并的有机萃取物用H2O(3x 10体积)洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。剩余物经硅胶(使用己烷:EtOAc或DCM:EtOAc或DCM:MeOH作为洗脱剂)纯化，得到F-吡啶基化合物。
一般实验方法M：氟吡啶基化合物转化成氨基吡啶基化合物
向配有磁力搅拌棒的微波小瓶置入氟吡啶基衍生物(1当量)、胺(过量)。混悬液在Biotage Emrys Initiator(250W)微波反应器中于120℃受照射10分钟。反应完成后，反应以水(10体积)淬灭并在DCM(4x10体积)中萃取。合并的有机萃取物用H2O(3x10体积)洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。剩余物经硅胶(使用EtOAC:DCM作为洗脱剂)纯化，得到氨基吡啶基化合物。
一般实验方法N：叠氮化合物和乙炔之间使用CuSO4·H2O和抗坏血酸钠的“Click”反应
向配有磁力搅拌棒、橡胶隔膜和氩气入口并含有t-BuOH：H2O(1：1,100体积)的圆底烧瓶中置入叠氮化合物(1当量)。向该溶液中加入乙炔(0.9–1.2当量)、CuSO4.5H2O(0.2当量)、L-抗坏血酸钠(0.4当量)，反应混合物在室温搅拌直到LCMS认为完成。反应完成后，真空除去溶剂。剩余物用水(100体积)洗涤，冷却至0℃，过滤，用乙醚(50体积)洗涤，真空干燥，得到最终的三唑。
一般实验方法O：使用TBAF进行氟化
向配备由磁力搅拌棒的圆底烧瓶或小瓶中置入前体(1当量)。向该化合物中加入Bu4NF(4M的THF溶液，20体积)，反应混合物在90℃搅拌30分钟。向该反应中加入HCl(1N,40体积)，反应混合物在65℃搅拌30分钟。反应混合物用水/乙腈(1mL)稀释，并经0.45μm滤器过滤，然后通过HPLC(使用ACN:水(均含有0.05%TFA))纯化，得到氟化的产物。
一般实验方法P：使用TFA进行Boc和缩酮脱保护
向配有磁力搅拌棒的圆底烧瓶中置入在DCM(200体积)中的受保护的物质(1当量)。向该化合物中加入TFA(10体积)，反应混合物在室温搅拌15小时。然后将反应混合物倒入水(200体积)中，并在DCM(2x100体积)中萃取。合并的有机萃取物用盐水(50体积)、NaHCO3溶液(50体积)洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。剩余物经硅胶(使用己烷:EtOAc作为洗脱剂)纯化，得到脱保护的物质。
一般实验方法Q：制备2-和4-芳基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶
在110℃加热2-溴-1-芳基乙酮(20mmol)在30mL的1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺中的溶液15小时，并冷却至室温。减压除去挥发物，剩余物通过硅胶色谱纯化，得到3-(二甲基氨基)-1-芳基丙-2-烯-1-酮。
回流加热3-(二甲基氨基)-1-芳基丙-2-烯-1-酮(10mmol)和1H-苯并[d]咪唑-2-胺(10mmol)在40mL乙酸中的混合物15小时，并冷却至室温。减压除去挥发物。将剩余物悬浮在EtOAc(50mL)中，并用饱和Na2CO3(2x50mL)洗涤。通过硅胶色谱或反相HPLC纯化粗产物，得到线型的(linear shaped)2-芳基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶和“L”型的4-芳基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶。
一般实验方法R：使用SnCl2将硝基苯还原成苯胺
将硝基苯(1mmol)和SnCl2.2H2O(5mmol)在30mL EtOH中的混悬液加热回流2小时，并冷却至室温。减压除去挥发物，剩余物吸收至1M NaOH(30mL)中。混合物用DCM(3x30mL)萃取，有机相经MgSO4干燥并浓缩。通过硅胶色谱法或反相HPLC纯化粗产物。
一般实验方法S：经还原胺化对苯胺进行烷基化
于室温向搅拌的乙醇(1mmol)在3mL DCM中的溶液中加入戴斯-马丁试剂(1.5mmol)。室温搅拌混合物1小时，加入3mL的DCE。经棉垫直接过滤进入搅拌的苯胺(0.5mmol)和NaBH(AcO)3(1.5mmol)在3mL的DCE中的混合物中。剧烈搅拌反应混合物5分钟，并通过添加Na2CO3(30mL,饱和)而淬灭。混合物用EtOAc(3x30mL)萃取，合并的有机相用水(2x50mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。通过硅胶色谱法或反相HPLC纯化粗产物。
根据上述一般方法制备所公开的化合物：
合成T698:
制备2-(4-甲氧基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：DHK-7-8:
向配有磁力搅拌棒并含有AcOH(2mL)的圆底烧瓶中置入1H-苯并咪唑-2-胺(0.13g,0.974mmol,1.0当量)。向该溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮(0.2g,0.974mmol,1当量)，并且在120℃搅拌反应混合物24小时。通过LCMS观察反应完成后，完全除去溶剂，并且反应混合物使用NaHCO3溶液中和，用DCM(3X)萃取，用水洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩。通过Combiflash纯化体系(使用60%EtOAc:己烷混合物的梯度洗脱)纯化粗产物，得到0.05g(20%)的甲氧基化合物DHK-7-8，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：276.1[M+H]+。
制备4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯酚氢溴酸盐：DHK-7-10:
向配有磁力搅拌棒并含有HBr(40%在H2O中)(10mL)的圆底烧瓶中置入DHK-7-8(0.02g,0.0727mmol,1.0当量)。反应混合物在135℃搅拌15小时。通过LCMS观察反应完成后，完全除去溶剂，得到0.023g(82%)的DHK-7-10，为棕色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：262.0[M+H]+在0.02g规模上实施。分离出0.015g(83%)的DHK-7-10。MS(ESI,Pos.)m/z 261.0(M+H)+
制备2-(4-(2-氟乙氧基)苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：T698:
进行酚烷基化的一般实验方法(C)。反应在0.01g规模上进行。分离出6mg(55%)的T698，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z 308.1(M+H)+
合成T705：
制备(E)-3-(二甲基氨基)-1-(3-硝基苯基)丙-2-烯-1-酮：DHK-7-12:
向配有磁力搅拌棒并含有1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺(50mL)的密封试管中置入1-(3-硝基苯基)乙酮(5g,30mmol,1.0当量)。在115℃搅拌反应混合物15小时。在通过LCMS显示反应完成后，滤出固体产物，并用乙醚洗涤，得到5.3g(80%)的DHK-7-12，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：221.1[M+H]+:。
制备2-(3-硝基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：DHK-7-16:
向配有磁力搅拌棒并含AcOH(20mL)的圆底烧瓶中置入1H-苯并咪唑-2-胺(1g,7.5mmol,1.0当量)。向该溶液中加入(E)-3-(二甲基氨基)-1-(3-硝基苯基)丙-2-烯-1-酮(1.7g,7.5mmol,1当量)，反应混合物在120℃搅拌24小时。通过LCMS观察反应完成后，完全除去溶剂，反应混合物使用NaHCO3溶液中和。滤出黄色固体，并用DCM洗涤，得到硝基化合物DHK-7-16 0.83g(39%)。MS(ESI,Pos.)m/z：291.1M+H]+。
制备3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺：T711:
向配有磁力搅拌棒并含有EtOH(50mL)的密封试管中置入DHK-7-16(0.825g,2.8mmol,1.0当量)。向该溶液中加入SnCl2.2H2O(0.87g,17mmol,6当量)，反应混合物在80℃搅拌2小时。通过LCMS观察反应完成后，完全除去溶剂，并加入1N NaOH。滤出黄色固体，并用水洗涤，得到氨基化合物T7110.74g(100%)。MS(ESI,Pos.)m/z：261.1[M+H]+。
制备3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N-(3-氟丙基)苯胺：T705:
进行还原氨化的一般实验方法(Q)。反应在0.023g规模上进行。分离出18mg(64%)的T705，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：321.1(M+H)+。
合成T721:
制备(E)-3-(二甲基氨基)-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮：DHK-7-15:
向配有磁力搅拌棒并含有1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺(50mL)的密封试管中置入1-(3-甲氧基苯基)乙酮(5g,30mmol,1.0当量)。反应混合物在115℃搅拌15小时。在通过LCMS显示反应完成后，蒸发溶剂。纯化粗产物，通过Combiflash纯化体系(使用70%EtOAc:己烷混合物以梯度洗脱)纯化，得到5.5g(81%)的甲氧基化合物DHK-7-15，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：206.1(M+H)+
制备4-(3-甲氧基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶T715和2-(3-甲氧基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：T716:
向配有磁力搅拌棒并含AcOH(20mL)的圆底烧瓶中置入1H-苯并咪唑-2-胺(1g,7.5mmol,1.0当量)。向该溶液中加入DHK-7-15(1.5g,7.5mmol,1当量)，反应混合物在135℃搅拌24小时。通过LCMS观察反应完成后，完全除去溶剂，反应混合物用NaHCO3溶液中和，并用DCM萃取，有机层用水洗涤，干燥并蒸发。通过Combiflash纯化体系(使用60-70%EtOAc:己烷混合物以梯度洗脱)纯化粗产物，得到0.42g(81%)的T716，为黄色固体。MS：[M+H]+：276.1。用100%EtOAc洗脱柱，得到0.58g(81%)的T715，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：276.1[M+H]+。
制备4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯酚氢溴酸盐：DHK-7-23:
向配有磁力搅拌棒并含HBr(40%在H2O(10mL)中)的圆底烧瓶中置入T716(0.34g,1.2mmol,1.0当量)。反应混合物在135℃搅拌2小时。通过LCMS观察反应完成后，完全除去溶剂，得到0.35g(83%)的DHK-7-23，为棕色固体。MS：[M+H]+：262.0。
制备2-(3-(2-氟乙氧基)苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：T721:
进行酚烷基化的一般实验方法(C)。反应在0.023g规模上进行。分离出15mg(75%)的T721，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z308.1(M+H)+
合成T727:
制备3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯酚氢溴酸盐：DHK-7-25:
向配有磁力搅拌棒并含HBr(40%在H2O(10mL)中)的圆底烧瓶中置入T715(0.55g,2.0mmol,1.0当量)。反应混合物在135℃搅拌15小时。通过LCMS观察反应完成后，完全除去溶剂，得到0.58g(85%)的DHK-7-25，为棕色固体。MS (ESI,Pos.)m/z 262.0(M+H)+
制备4-(3-(2-氟乙氧基)苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：T727:
进行酚烷基化的一般实验方法(C)。反应在0.03g规模上进行。分离出0.02mg(74%)的T727，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z 308.1(M+H)+
合成T745:
制备3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N-(3-氟丙基)-N-甲基苯胺T745：
向配有磁力搅拌棒并含MeOH(2mL)的圆底烧瓶中置入T705(0.003g,0.012mmol,1.0当量)。向该溶液中加入在水中的HCHO(0.007g,0.23mmol,20当量)和NaCNBH3(0.002mg.0.035mmol,3当量)，反应混合物在室温搅拌10分钟。通过LCMS观察反应完成后，完全除去溶剂，通过HPLC纯化，得到1.5mg(50%)的T745，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z 335.0(M+H)+
合成T746:
制备5-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟苯胺：DHK-7-62:
进行Suzuki偶联的一般实验方法(A)。反应在0.05g规模上进行。分离出0.015g(27%)的DHK-7-62，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z 279.1(M+H)+
制备5-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟-N-(3-氟丙基)苯胺：T746:
进行还原性氨化的一般实验方法(Q)。反应在0.014g规模上进行。分离出8mg(47%)的T746，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：339.1(M+H)+。
合成T752:
制备4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-甲氧基苯胺：DHK-7-64:
进行Suzuki偶联的一般实验方法(A)。反应在0.078g规模上进行。分离出0.09g(99%)的DHK-7-64，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z291.3(M+H)+
制备5-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟-N-(3-氟丙基)苯胺：T752:
进行还原性氨化的一般实验方法(Q)。反应在0.036g规模上进行。分离出2mg(4%)的T752，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：351.1(M+H)+。
合成T756:
制备2-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：T756:
进行Suzuki偶联的一般实验方法(A)。反应在0.078g规模上进行。分离出0.09g(95%)的T756，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z294.1(M+H)+
合成T760:
制备2-氨基-5-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯酚氢溴酸盐：DHK-7-65:
向配有磁力搅拌棒并含的圆底烧瓶HBr(40%在H2O中，10mL)的DHK-7-64(0.05g,0.17mmol,1.0当量)。反应混合物在130℃搅拌15小时。通过LCMS观察反应完成后，完全除去溶剂，得到0.06g(98%)得到DHK-7-65，为棕色固体。MS(ESI,Pos.)m/z277.1(M+H)+
制备4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-(2-氟乙氧基)苯胺：T760:
进行酚烷基化的一般实验方法(C)。反应在0.06g规模上进行。分离出0.004mg(7%)的T760，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z323.1(M+H)+
合成T770:
制备4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟苯酚：DHK-7-90:
进行去甲基化反应的一般实验方法(G)。反应在0.03g规模上进行。分离出0.028g(98%)的DHK-7-90.MS(ESI,Pos.)m/z：280.1(M+H)+。
制备2-(3-氟-4-(2-氟乙氧基)苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：T770:
进行酚烷基化的一般实验方法(C)。反应在0.04g规模上进行。分离出0.010mg(28%)的T770，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：326.1(M+H)+。
合成T777:
制备2-(4-氟哌啶-1-基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：T777:
向配有磁力搅拌棒并含有DMF(1mL)的微波小瓶中置入2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(0.02g,0.089mmol,1.0当量)、4-氟哌啶盐酸盐(0.019g,0.133mmol,1.5当量)和三乙胺(0.037ml,0.266mmol,3.0当量)。混悬液在Biotage Initiator微波反应器(250W)中于100℃受照射15分钟。在冷却至室温后，通过HPLC纯化粗产物得到0.015g(63%)的T777为灰白色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：271.1(M+H)+.
合成T780:
制备2-(6-氟吡啶-3-基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：DHK-7-100:
进行Suzuki偶联的一般实验方法(A)。反应在0.058g规模上进行。分离出0.06g(97%)的DHK-7-100，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：265.1(M+H)+。
制备2-(6-(4-氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：T780:
向配有磁力搅拌棒并含有DMF(1mL)的微波小瓶中加入DHK-7-100(0.025g,0.095mmol,1.0当量)、4-氟哌啶盐酸盐(0.020g,0.142mmol,1.5当量)和三乙胺(0.040ml,0.284mmol,3.0当量)。混悬液在Biotage Initiator微波反应器(250W)中于100℃受照射15分钟。在冷却至室温后，通过HPLC纯化粗产物得到0.025g(76%)的T780，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：348.1(M+H)+。
合成T802:
制备N-(2-氟乙基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-胺：T802:
向配有磁力搅拌棒并含有DMF(1mL)的微波小瓶中加入2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(0.02g,0.081mmol,1.0当量)、2-氟乙基胺盐酸盐(0.012g,0.121mmol,1.5当量)和三乙胺(0.034ml,0.242mmol,3.0当量)。混悬液在Biotage Initiator微波反应器(250W)中于100℃受照射10分钟。在冷却至室温后，通过HPLC纯化粗产物得到0.015g(81%)的T802为灰白色固体MS(ESI,Pos.)m/z：331.1(M+H)+。
合成T808:
制备2-(1-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙醇：DHK-7-140:
向配有磁力搅拌棒并含有DMF(1mL)的微波小瓶中加入2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(0.108g,0.435mmol,1.0当量)和2-(哌啶-4-基)乙醇)(0.067g,0.522mmol,1.2当量)。混悬液在Biotage Initiator微波反应器(250W)中于100℃受照射10分钟。在冷却至室温后，加入水，过滤收集产物，得到0.07g(54%)的DHK-7-140，为棕色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：297.1(M+H)+。
制备：2-(4-(2-氟乙基)哌啶-1-基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：T808:
向配有磁力搅拌棒和含DCM(1mL)的圆底烧瓶中置入DHK-7-140(0.01g,0.034mmol,1.0当量)，将混合物冷却至0℃。向该溶液中加入DAST(0.041mL,0.34mmol,10当量)，反应在室温搅拌10分钟。通过LCMS观察反应完成后，完全除去溶剂，通过HPLC纯化，得到5mg (50%)的T808，为白色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：299.0(M+H)+。
合成T809:
制备1-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)哌啶-4-醇：DHK-7-107:
向配有磁力搅拌棒并含有DMF(1mL)的微波小瓶中加入2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(0.15g,0.604mmol,1.0当量)和哌啶-4-醇(0.092g,0.906mmol,1.5当量)。混悬液在Biotage Initiator微波反应器(250W)中于100℃受照射15分钟。在冷却至室温后，加入水，过滤收集产物，得到0.095g(59%)的DHK-7-107，为棕色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：269.1(M+H)+。
制备2-(4-(3-氟丙氧基)哌啶-1-基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：T809:
在氩气下向配有磁力搅拌棒并含DMF(1mL)的圆底烧瓶中置入DHK-7-107(0.017g,0.063mmol,1.0当量)，并且将混合物冷却至0℃。向该溶液中加入NaH(60%)(0.003g,0.127mmol,2当量)、甲磺酸3-氟丙酯(0.02g,0.127mmol,2当量)，反应混合物在室温搅拌15小时。通过LCMS观察反应完成后，完全除去溶剂，通过HPLC纯化，得到5mg(24%)的T809，为白色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：329.1(M+H)+。
合成T819:
制备2-(4-(2-(2-氟乙氧基)乙基)哌啶-1-基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：T819:
在氩气下向配有磁力搅拌棒并含DMF(1mL)的圆底烧瓶中置入DHK-7-140(0.02g,0.066mmol,1.0当量)，并将混合物冷却至0℃。向该溶液中加入NaH(60%)(0.016g,0.675mmol,10当量)和1-溴-2-氟乙烷(0.086g,0.675mmol,10当量)，反应混合物在室温搅拌1小时。通过LCMS观察反应完成后，完全除去溶剂，通过HPLC纯化，得到3mg(13%)的T819，为白色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：343.1(M+H)+
合成前体：
合成T698前体:
制备2-(4-(2-溴乙氧基)苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶：T698P:
进行酚烷基化的一般实验方法(C)。反应在0.2g规模上进行。分离出0.030mg(14%)的T698P，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：368.1(M+H)+。
合成T705前体:
制备4-甲基苯磺酸3-((3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯基)氨基)丙酯：T705P:
进行还原氨化的一般实验方法(Q)。反应在0.12g规模上进行。分离出30mg(14%)的T705P，为黄色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：473.1(M+H)+
合成T777前体1:
制备甲磺酸1-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)哌啶-4-酯：T777P1:
向配有磁力搅拌棒并含DCM(1mL)的圆底烧瓶中置入DHK-7-107(0.03g,0.112mmol,1.0当量)。向该溶液中加入甲磺酰氯(0.064g,0.559mmol,5当量)和Et3N(0.113g,1.11mmol,10当量)，反应混合物在室温搅拌10分钟。通过LCMS观察反应完成后，完全除去溶剂，通过HPLC纯化，得到30mg(77%)的T777P1，为白色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：347.1(M+H)+
合成T777前体2:
制备2-(1-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙醇：T777P2:
向配有磁力搅拌棒并含有DMF(1mL)的微波小瓶中加入2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(0.067g,0.27mmol,1.0当量),4-溴哌啶盐酸盐(0.099g,0.405mmol,1.5当量)和三乙胺(0.113ml,0.810mmol,3.0当量)。混悬液在Biotage Initiator微波反应器(250W)中于100℃受照射10分钟。在冷却至室温后，通过HPLC纯化粗产物得到0.06g(67%)的T777P2，为白色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：332.1(M+H)+
合成T808前体:
制备甲磺酸2-(1-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酯：T808P:
向配有磁力搅拌棒含DCM(1mL)的圆底烧瓶中置入DHK-7-140(0.06g,0.202mmol,1.0当量)。向该溶液中加入甲磺酰氯(0.158mL,2.02mmol,10当量)和Et3N(0.564mL,4.05mmol,20当量)，反应混合物在室温搅拌10分钟。通过LCMS观察反应完成后，完全除去溶剂，通过HPLC纯化，得到35mg(46%)的T808P，为白色固体。MS(ESI,Pos.)m/z：375.1(M+H)+
5-(2-氟乙基)-3-(4-甲氧基苯基)-1-氧代-1H,5H-吡啶并[1,2-a]苯并咪唑：T626
使用1-溴-2-氟乙烷进行N-烷基化的一般实验方法(E)。反应在10.0mg规模的3-(4-甲氧基苯基)-1-氧代-1H,5H-吡啶并[1,2-a]苯并咪唑上进行。分离出3.8mg(33%)的T626，为白色固体。1H NMR(CDCl3)：δ8.84(1H,d,J＝8.0Hz),7.62(2H,m),7.45(1H,m),7.31(2H,m),6.97(2H,m),6.54(1H,s),6.28(1H,s),4.90(1H,t,J＝4.8Hz),4.79(1H,t,J＝4.8Hz),4.52(1H,t,J＝4.8Hz),4.46(1H,t,J＝4.8Hz),3.84(3H,s)；MS：337(M+H+)。
1-氯-3-(4-甲氧基苯基)-吡啶并[1,2-a]苯并咪唑：T639
于100℃加热T628(108mg,0.37mmol)在POCl3(1ml)中的混悬液3小时。将混合物倒入水中，并用碳酸氢钠固体碱化成pH～8。混合物用DCM萃取3次。合并的DCM层浓缩，剩余物经快速色谱法(EtOAc/DCM,0至20%)纯化，得到37.0mg(32%)的T639，为橙色固体。1H NMR(CDCl3)：δ8.57(1H,d,J＝8.4Hz),7.92(1H,d,J＝8.4Hz),7.79(1H,s),7.63(2H,m),7.55(1H,m),7.35(1H,m),7.15(1H,s),7.01(2H,m),3.86(3H,s)；MS：309(M+H+)。
2-(1H-苯并咪唑-2-基)-吡啶并[1,2-a]苯并咪唑：T640
向微波小瓶中加入2-乙炔基-1H-苯并咪唑(10mg,0.070mmol)和乙酸(2mL)。在微波合成器中于120℃加热混合物10分钟。除去乙酸，剩余物用NaHCO3溶液中和。浓缩混合物，并且通过快速色谱法(MeOH/DCM,0至10%)纯化，得到5.0mg(50%)的T640，为白色固体。1H NMR(CD3OD)：δ9.56(1H,s),8.20(2H,m),7.83(1H,d,J＝8.4Hz),7.77(1H,d,J＝9.6Hz),7.56-7.63(3H,m,重叠),7.27(2H,m)；MS：285(M+H+)。
2-[1-(2-氟乙基)-1H-苯并咪唑-2-基]-吡啶并[1,2-a]苯并咪唑：T644
使用1-溴-2-氟乙烷进行N-烷基化的一般实验方法(E)。反应在3.2mg规模的T640上进行。分离出2.5mg(68%)的T644，为白色固体。1H NMR(CDCl3)：δ9.10(1H,s),7.98(2H,m),7.86-7.92(3H,m，重叠),7.60(1H,m),7.36-7.47(4H,m，重叠),5.00(1H,t,J＝4.0Hz),4.89(1H,t,J＝4.0Hz),4.64(1H,t,J＝4.0Hz),4.58(1H,t,J＝4.0Hz)；MS：331(M+H+)。
1-氨基-3-(4-甲氧基苯基)-吡啶并[1,2-a]苯并咪唑：T662
向1-叠氮基-3-(4-甲氧基苯基)-吡啶并[1,2-a]苯并咪唑(12.0mg,0.038mmol)在苯(2mL)中的溶液中加入三苯基膦(15.0mg,0.057mmol)。室温搅拌混合物3小时，并浓缩成剩余物。将甲醇(2mL)加入上述剩余物中，接着加入HCl(浓，1mL)。于60℃加热反应混合物2小时，并浓缩。剩余物通过HPLC(乙腈/水)纯化，得到4.6mg(42%)的T662，为浅黄色固体。1H NMR(CD3OD)：δ8.50(1H,d,J＝8.8Hz),7.80(2H,m),7.72(2H,m),7.54(1H,m),7.27(1H,s),7.10(2H,m),6.99(1H,s)；MS：290(M+H+)。
1-羟基-3-(4-羟基苯基)-吡啶并[1,2-a]苯并咪唑*HBr：T664
在密封管中于140℃加热T628(60mg,0.21mmol)在48%HBr/H2O(1.0mL)和48%HBr/HOAc(1.0mL)中的混悬液1小时。冷却混合物，并且所得固体沉淀物通过过滤收集。固体使用乙醚洗涤，并且在高真空干燥，得到35mg(47%)的T664，为灰色固体。1H NMR(CD3OD)：δ8.59(1H,d,J＝8.4Hz),7.70-7.74(4H,m，重叠),7.53(1H,m),7.40(1H,s),6.95(2H,m),6.88(1H,s)；MS：277(M+H+)。
1-羟基-3-(4-(2-氟乙基)苯基)-吡啶并[1,2-a]苯并咪唑*TFA：T665
使用1-溴-2-氟乙烷进行酚烷基化的一般实验方法(C)。反应在40mg规模的T664上进行。分离出10.8mg(22%)的T665，为浅黄色固体。1H NMR(DMSO-d6)：δ12.53(1H,s),8.63(1H,d,J＝8.4Hz),7.70(2H,d,J＝8.0Hz),7.44(2H,m),7.24(1H,m),7.05(2H,d,J＝8.0Hz),6.40(1H,s),6.13(1H,s),4.80(1H,t,J＝3.4Hz),4.68(1H,t,J＝3.4Hz),4.31(1H,t,J＝3.4Hz),4.24(1H,t,J＝3.4Hz)；MS：323(M+H+)。
3-(4-(2-氟乙基)苯基)-吡啶并[1,2-a]苯并咪唑*TFA：T666
在密封管中于140℃加热3-(4-甲氧基苯基)-吡啶并[1,2-a]苯并咪唑*TFA(4.6mg,0.012mmol)在48%HBr/H2O(1.0mL)和48%HBr/HOAc(1.0mL)中的混悬液1小时。浓缩混合物至干燥，得到中间体苯酚。然后使用1-溴-2-氟乙烷进行酚烷基化的一般实验方法(C)。剩余物通过HPLC(乙腈/水)纯化，得到1.5mg(30%)的T666，为白色固体。1H NMR(CD3OD)：δ9.23(1H,d,J＝7.2Hz),8.35(1H,d,J＝8.4Hz),8.06(1H,s),7.86-7.90(3H,m，重叠),7.80(1H,m),7.74(1H,m),7.61(1H,m),7.11(2H,m),4.74(1H,t,J＝3.4Hz),4.62(1H,t,J＝3.4Hz),4.28(1H,t,J＝3.4Hz),4.21(1H,t,J＝3.4Hz)；MS：307(M+H+)。
1-(4-氨基苯基)-3-甲基吡啶并[1,2-a]苯并咪唑-4-腈*TFA：T672
用4-氨基苯基硼酸进行Suzuki偶联反应的一般实验方法(A)。反应在241mg规模的1-氯-3-甲基吡啶并[1,2-a]苯并咪唑-4-腈上进行。分离出100mg(34%)的T672，为黄色固体。1H NMR(CD3OD)：δ7.85(1H,d,J＝8.4Hz),7.66(1H,m),7.43(2H,m),7.26-7.30(2H,m，重叠),7.07(1H,d,J＝8.4Hz),7.38(1H,dd,J＝9.0,2.6Hz),6.97(2H,m),2.80(3H,s)；MS：299(M+H+)。
1-(4-(3-氟丙基氨基)苯基)-3-甲基吡啶并[1,2-a]苯并咪唑-4-腈*TFA：T679
使用3-氟丙醇进行一锅法还原氨化的一般实验方法(Q)。反应在3.2mg规模的T672上进行。分离出2.4mg(65%)的T679，作为黄色固体。1H NMR(CD3OD)：δ7.85(1H,d,J＝8.0Hz),7.63(1H,m),7.41(2H,m),7.26(1H,m),7.20(1H,s),7.13(1H,d,J＝8.8Hz),6.85(2H,m),4.64(1H,t,J＝6.6Hz),4.53(1H,t,J＝6.6Hz),3.36(2H,m),2.78(3H,s)2.08(1H,m),2.01(1H,m)；MS：359(M+H+)。
1-(4-(3-(4-甲基苯基磺酰基氧基)丙基氨基)苯基)-3-甲基吡啶并[1,2-a]苯并咪唑-4-腈：T679-前体
使用4-甲基苯磺酸3-羟基丙酯进行一锅法还原氨化的一般实验方法(Q)。反应在100mg规模的T672上进行。分离出40mg(23%)的T679-前体，为黄色固体。1H NMR(CD2Cl2)：δ7.90(1H,d,J＝8.4Hz),7.80(2H,m),7.45(1H,m),7.38(2H,m),7.33(2H,m),7.05(1H,m),6.94(1H,d,J＝8.4Hz),6.72(2H,m),6.57(1H,s),4.19(2H,t,J＝6.0Hz),3.33(2H,m),2.67(3H,s),2.43(3H,s),2.01(2H,m)；MS：511(M+H+)。
5-((2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基))-3-(4-羟基苯基)-1-氧代-1H,5H-吡啶并[1,2-a]苯并咪唑*TFA：T682
使用甲苯磺酸2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙酯进行N-烷基化的一般实验方法(E)。反应在40mg规模的T664上进行。分离出7.9mg(13%)的T682，为白色固体。1H NMR(CD3OD)：δ8.70(1H,d,J＝8.0Hz),7.62-7.66(3H,m，重叠),7.55(1H,m),7.36(1H,m),6.88-6.91(3H,m，重叠),6.43(1H,s),4.57(2H,t,J＝4.8Hz),4.30(1H,m),4.18(1H,m),3.93(2H,t,J＝4.8Hz),3.53(2H,m),3.43-3.46(3H,m，重叠),3.35-3.38(1H,m)；MS：411(M+H+)。
7-氨基-2-(4-甲氧基苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑：T696
向2-(4-甲氧基苯基)-7/8-硝基-嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑(40mg,0.125mmol)在EtOH(6mL)中的混悬液中加入SnCl22H2O(169mg,0.75mmol)。在95℃加热混合物2小时，并浓缩。剩余物用3N NaOH溶液处理，然后用DCM(3x10mL)萃取。合并各DCM层，并蒸发成剩余物，其经HPLC(乙腈/水)纯化，得到18.0mg(36%)的T696，为橙色固体。1H NMR(CD3OD)：δ9.30(1H,d,J＝7.2Hz),8.35(2H,m),8.07(1H,d,J＝7.2Hz),7.57(1H,d,J＝8.8Hz),7.47(1H,s),7.20(1H,m),7.10(2H,m),3.89(3H,s)；MS：291(M+H+)。
8-氨基-2-(4-甲氧基苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑：T697
向2-(4-甲氧基苯基)-7/8-硝基-嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑(40mg,0.125mmol)在EtOH(6mL)中的混悬液中加入SnCl2·2H2O(169mg,0.75mmol)。在95℃加热该混合物2小时，并浓缩。剩余物用3N NaOH溶液处理，并且然后用DCM(3x10mL)萃取。合并各DCM层，并蒸发成剩余物，其经HPLC(乙腈/水)纯化，得到10.0mg(20%)的T697，为黄色固体。1H NMR(CD3OD)：δ9.30(1H,d,J＝7.2Hz),8.35(2H,m),8.07(1H,d,J＝7.2Hz),7.57(1H,d,J＝8.8Hz),7.47(1H,s),7.20(1H,m),7.10(2H,m),3.89(3H,s)；MS：291(M+H+)。
7-(3-氟丙基氨基)-2-(4-甲氧基苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑：T699
使用3-氟丙醇的一锅法还原氨化的一般实验方法(Q)。反应在5.5mg规模的T696上进行，在HPLC纯化前加入1N HCl。分离出1.3mg(22%)的T699，为黄色固体。1H NMR(CD3OD)：δ9.41(1H,d,J＝7.8Hz),8.38(2H,m),8.10(1H,d,J＝7.8Hz),7.55(1H,d,J＝8.8Hz),7.35(1H,s),7.13-7.16(3H,m，重叠),4.65(1H,t,J＝5.6Hz),4.54(1H,t,J＝5.6Hz),3.91(3H,s),3.36(2H,t,J＝6.8Hz),2.01-2.12(2H,m)；MS：351(M+H+)。
6-氯-7-(3-氟丙基氨基)-2-(4-甲氧基苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑：T700
使用3-氟丙醇的一锅法还原氨化的一般实验方法(Q)。反应在5.5mg规模的T696上进行，在HPLC纯化前加入1N HCl。分离出2.0mg(33%)的T699，为黄色固体。1H NMR(CD3OD)：δ9.81(1H,d,J＝7.8Hz),8.33(2H,m),7.96(1H,d,J＝7.8Hz),7.63(1H,d,J＝8.8Hz),7.25(1H,d,J＝8.8Hz),7.11(2H,m),4.64(1H,t,J＝5.6Hz),4.52(1H,t,J＝5.6Hz),3.90(3H,s),3.47(2H,t,J＝6.8Hz),1.99-2.12(2H,m)；MS：385(M+H+)。
2-(4-氰基苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑：T709
于120℃加热(E)-4-(3-(二甲基氨基)丙烯酰基)苄腈(2.0g,10.0mmol)和2-氨基苯并咪唑(1.33g,10mmol)在乙酸(15mL)中的溶液16小时。将混合物浓缩成剩余物，并用碳酸氢钠处理，中和剩余的乙酸。向所得混悬液中加入EtOAc，超声并过滤。收集的固体用水、乙醚洗涤，高真空干燥得到630mg(23%)的T709，为黄色固体。将少量通过HPLC(乙腈/H2O)纯化用于NMR和生物测定。1H NMR(CD3OD)：δ9.83(1H,d,J＝8.4Hz),8.59(2H,m),8.46(1H,d,J＝8.4Hz),8.36(1H,d,J＝6.8Hz),8.01(2H,m),7.93(1H,m),7.87(1H,m),7.74(1H,m)；MS：271(M+H+)。
8-(3-氟丙基氨基)-2-(4-甲氧基苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑：T723
使用3-氟丙醇的一锅法还原氨化的一般实验方法(Q)。反应在2.0mg规模的T697上进行。分离出0.6mg(25%)的T699，为黄色固体。1H NMR(CD3OD)：δ9.35(1H,d,J＝7.2Hz),8.36(2H,m),8.09(1H,d,J＝7.2Hz),8.00(1H,d,J＝9.2Hz),7.14(2H,m),6.96(1H,dd,J＝9.2,2.0Hz),6.75(1H,d,J＝2.0Hz),4.63(1H,t,J＝5.6Hz),4.52(1H,t,J＝5.6Hz),3.91(3H,s),3.35(2H,t,J＝7.0Hz),2.00-2.09(2H,m)；MS：351(M+H+)。
7-氨基-2-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑：T729
在密封管中于140℃加热T696(10.0mg,0.034mmol)在48%HBr/H2O(1.0mL)和48%HBr/HOAc(1.0mL)中的混悬液1小时。浓缩混合物至干燥，得到中间体苯酚。使用1-溴-2-氟乙烷进行酚烷基化的一般实验方法(C)。剩余物通过HPLC(乙腈/水)纯化，得到2.8mg(25%)的T729，为黄色固体。1HNMR(CD3OD)：δ9.33(1H,d,J＝7.2Hz),8.39(2H,m),8.10(1H,d,J＝7.2Hz),7.58(1H,d,J＝8.8Hz),7.47(1H,d,J＝2.0Hz),7.16-7.22(3H,m，重叠),4.82(1H,t,J＝4.0Hz),4.70(1H,t,J＝4.0Hz),4.38(1H,t,J＝4.0Hz),4.31(1H,t,J＝4.0Hz)；MS：323(M+H+)。
8-氨基-2-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑：T730
于140℃在密封管中加热T697(6.1mg,0.021mmol)在48%HBr/H2O(1.0mL)和48%HBr/HOAc(1.0mL)中的混悬液1小时。浓缩混合物至干燥，得到中间体苯酚。使用1-溴-2-氟乙烷进行酚烷基化的一般实验方法(C)。剩余物通过HPLC(乙腈/水)纯化，得到1.9mg(28%)的T730，为黄色固体。1HNMR(CD3OD)：δ9.36(1H,d,J＝7.2Hz),8.36(2H,m),8.09(1H,d,J＝7.2Hz),7.98(1H,d,J＝8.8Hz),7.16(2H,m),6.96(1H,dd,J＝8.8,2.0Hz),6.87(1H,d,J＝2.0Hz),4.82(1H,t,J＝4.0Hz),4.70(1H,t,J＝4.0Hz),4.37(1H,t,J＝4.0Hz),4.30(1H,t,J＝4.0Hz)；MS：323(M+H+)。
8-Boc-氨基-2-(4-(2-(4-甲基磺酰基氧基)乙氧基)苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑：T730-前体
向8-氨基-2-(4-(2-(4-甲基磺酰基氧基)乙氧基)苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑*3TFA(80mg,0.098mmol)在THF(10mL)中的混悬液中加入Boc2O(367mg,1.68mmol)和TEA(85mg,0.841mmol)。于60℃加热混合物6小时。剩余物经快速色谱法(EtOAc/DCM,0至40%)纯化，得到21.2mg(38%)的T730-前体，为黄色固体。1H NMR(DMSO-d6)：δ9.52(1H,s),9.39(1H,d,J＝7.2Hz),8.24(2H,m),8.11(1H,d,J＝8.8Hz),7.93(1H,s),7.79(2H,m),7.70(1H,d,J＝7.2Hz),7.46(2H,m),7.41(1H,d,J＝8.8Hz),7.00(2H,m),4.36(2H,t,J＝4.0Hz),4.26(2H,t,J＝4.0Hz),2.38(3H,s)；MS：575(M+H+)。
2-(4-氨基甲基苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑：T732
使用4-(叔丁氧基羰基氨基)苯基硼酸的Suzuki偶联的一般实验方法(A)。反应在40mg规模的2-氯嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑上进行。在Suzuki反应后，混合物用4N HCl的二噁烷/DCM溶液处理以除去Boc基团。剩余物通过HPLC(乙腈/水)纯化，得到8.7mg(16%)的T732，为白色固体。1H NMR(CD3OD)：δ9.72(1H,d,J＝7.2Hz),8.51(2H,m),8.41(1H,d,J＝8.4Hz),8.28(1H,d,J＝7.2Hz),7.90(1H,d,J＝8.0Hz),7.82(1H,m),7.67-7.74(3H,m),4.26(2H,s)；MS：275(M+H+)。
2-(2-氟吡啶-4-基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑：T737
使用2-氟吡啶-4-基硼酸的Suzuki偶联的一般实验方法(A)。反应在40mg规模的2-氯嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑上进行。剩余物通过HPLC(乙腈/水)纯化，得到6.2mg(12%)的T732，为白色固体。1H NMR(CD3OD)：δ9.91(1H,d,J＝7.2Hz),8.47-8.53(2H,m，重叠),8.39(1H,d,J＝7.2Hz),8.25(1H,m),8.04(1H,m),7.95(1H,d,J＝8.4Hz),7.89(1H,m),7.76(1H,m)；MS：265(M+H+)。
7-N,N-二甲基氨基-2-(4-羟基苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑：T767
在密封管中于140℃加热T696(54.0mg,0.186mmol)在48%HBr/H2O(1.0mL)和48%HBr/HOAc(1.0mL)中的混悬液1小时。将混合物浓缩至干燥，得到苯酚-胺。剩余物溶解在甲醇(10mL)中，加入甲醛溶液(37%的水溶液，1mL)。将混合物加入NaBH3CN(60mg,0.955mmol)中，并在室温搅拌10分钟。剩余物通过HPLC(乙腈/水)纯化，得到36mg(64%)的T767，为红色固体。1H NMR(CD3OD)：δ9.43(1H,d,J＝7.2Hz),8.31(2H,m),8.08(1H,d,J＝8.8Hz),7.64(1H,d,J＝9.2Hz),7.52(1H,d,J＝2.4Hz),7.30(1H,dd,J＝9.2,2.4Hz),6.97(2H,m),3.11(6H,s)；MS：305(M+H+)。
7-N,N-二甲基氨基-2-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑：T769
使用1-溴-2-氟乙烷进行酚烷基化的一般实验方法(C)。反应在6.8mg规模的T767上进行。剩余物通过HPLC(乙腈/水)纯化，得到4.9mg(63%)的T769，为红色固体。1H NMR(CD3OD)：δ9.48(1H,d,J＝7.2Hz),8.40(2H,m),8.11(1H,d,J＝7.2Hz),7.66(1H,d,J＝9.2Hz),7.52(1H,d,J＝2.4Hz),7.31(1H,dd,J＝9.2,2.4Hz),7.18(2H,m),4.82(1H,t,J＝4.0Hz),4.70(1H,t,J＝4.0Hz),4.38(1H,t,J＝4.0Hz),4.31(1H,t,J＝4.0Hz),3.11(6H,s)；MS：351(M+H+)。
8-N,N-二甲基氨基-2-(4-(2-氟乙氧基)苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑：T772
将T730(6.0mg,0.0186mmol)在甲醇(2mL)中的溶液加入甲醛溶液(37%的水溶液,0.1mL)和NaBH3CN(6.0mg,0.0952mmol)。室温搅拌混合物10分钟。剩余物通过HPLC(乙腈/水)纯化，得到1.0mg(15%)的T772，为红色固体。1H NMR(CD3OD)：δ9.40(1H,d,J＝7.2Hz),8.38(2H,m),8.12(1H,d,J＝7.2Hz),8.11(1H,d,J＝9.2Hz),7.18(2H,m),7.12(1H,dd,J＝9.2,2.4Hz),6.84(1H,d,J＝2.4Hz),4.82(1H,t,J＝4.0Hz),4.70(1H,t,J＝4.0Hz),4.39(1H,t,J＝4.0Hz),4.31(1H,t,J＝4.0Hz),3.13(6H,s)；MS：351(M+H+)。
甲磺酸(8-甲氧基吡啶并[1,2-a]苯并咪唑-3-基)哌啶-4-酯：T798-前体1
向(8-甲氧基吡啶并[1,2-a]苯并咪唑-3-基)哌啶-4-醇(66.3mg,0.223mmol)在DCM(6.0mL)中的溶液中加入甲磺酰氯(51mg,0.445mmol)和TEA(45mg,0.446mmol)。搅拌混合物10分钟，然后加入碳酸氢钠溶液(饱和,6mL)。再在室温搅拌混合物30分钟。分离DCM层，并浓缩。剩余物通过HPLC(乙腈/水)纯化，然后用NaHCO3中和，得到65.6mg(52%)的T798-前体1，为白色固体。1H NMR(CDCl3)：δ8.09(1H,d,J＝7.6Hz),7.65(1H,d,J＝8.8Hz),7.18(1H,d,J＝2.4Hz),7.06(1H,dd,J＝8.8,2.4Hz),6.72(1H,d,J＝2.0Hz),6.56(1H,dd,J＝7.6,2.4Hz),4.96(1H,m),3.88(3H,s),3.57(2H,m),3.27(2H,m),3.05(3H,s),2.14(2H,m),2.02(2H,m)；MS：303(M+H+)。
2-(4-溴哌啶-1-基)-8-甲氧基吡啶并[1,2-a]苯并咪唑：T798-前体2
向T798-前体1(3.0mg,0.008mmol)在DMF(1.0mL)中的溶液中加入LiBr(14mg,0.163mmol)。于80℃加热混合物24小时。剩余物通过HPLC(乙腈/水)纯化，然后用NaHCO3中和，得到1.4mg(48%)的T798-前体2，为白色固体。1H NMR(CDCl3)：δ8.09(1H,d,J＝7.6Hz),7.66(1H,d,J＝8.8Hz),7.18(1H,d,J＝2.4Hz),7.06(1H,dd,J＝8.8,2.4Hz),6.72(1H,d,J＝2.0Hz),6.57(1H,dd,J＝7.6,2.4Hz),4.41(1H,m),3.89(3H,s),3.61(2H,m),3.28(2H,m),2.27(2H,m),2.14(2H,m)；MS：362(M+H+)。
合成T704:
将氰基硼氢化钠(15.93mg,0.254mmol)加入含T557(10mg,0.025mmol)的溶液，并加入甲醛在MeOH(2ml)中的溶液(0.041ml,0.507mmol)。搅拌20分钟。通过制备性HPLC纯化，得到T704(2mg,4.90μmol,19.31%产率)。MS(ESI,Pos.)m/z：409.1[M+H]+。
合成T717和T718
将2-氨基苯并咪唑(0.345g,2.59mmol)和(E)-1-(4-溴苯基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(0.5g,2.59mmol)合并在乙酸(体积：12ml)中。加热该反应混合物2小时。让反应混合物冷却至室温。浓缩并用水稀释。过滤并干燥固体。稀释并通过制备性HPLC纯化得到T717(0.1g,0.380mmol,14.68%产率)MS(ESI,Pos.)m/z：264.0[M+H]+。和T718(0.1g,0.380mmol,14.68%产率)MS(ESI,Pos.)m/z：264.0[M+H]+。
合成T720
将氰基硼氢化钠(19.62mg,0.312mmol)加入至含T542(10mg,0.031mmol)的溶液中，并加入甲醛在MeOH(1ml)中的溶液(0.019ml,0.624mmol)。在20分钟后，通过制备性HPLC纯化，得到T720(1.4mg,4.19μmol,13.41%产率)。MS(ESI,Pos.)m/z：335.1[M+H]+。
合成T768:
制备(2-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯。
将1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II),w/DCM(0.033g,0.040mmol)加入2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(0.2g,0.806mmol)、(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.386g,1.209mmol)、碘化亚铜(I)(0.015g,0.081mmol)和碳酸钾(0.806ml,1.612mmol)在DMF中的溶液中。在微波中于120℃加热溶液15分钟。反应混合物冷却至室温。用水稀释，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，干燥，过滤并浓缩。通过Combiflash柱(使用在己烷中的0%至80%乙酸乙酯)纯化，得到(2-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.13g,0.361mmol,44.7%产率)。
制备T768。将氢化钠60%(0.028g,0.721mmol)加入(2-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.13g,0.361mmol)在DMF(体积：2ml)中的溶液。5分钟后，1-溴-3-氟丙烷(0.102g,0.721mmol)加入该混合物中，并搅拌4小时。该反应混合物用水稀释，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，干燥，过滤并浓缩。TFA(三氟乙酸)(1ml,12.98mmol)加入到所得剩余物中。5分钟后，浓缩溶液，产物通过制备性HPLC纯化，得到T768(0.007g,0.022mmol,6.06%产率)MS(ESI,Pos.)m/z：321.0[M+H]+。
合成T776和T778：
制备2-(6-氟吡啶-3-基)-7-硝基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶。%90发红烟的硝酸(0.076ml,1.514mmol)滴加至在0℃预冷却的T695(0.2g,0.757mmol)在硫酸(0.5ml,9.38mmol)中的溶液中。搅拌反应混合物15分钟。用水稀释反应混合物，并真空过滤所得沉淀物，得到2-(6-氟吡啶-3-基)-7-硝基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(0.234g,0.757mmol,100%产率)。
制备T776。将氰基硼氢化钠(0.041g,0.647mmol)加入2-(6-氟吡啶-3-基)-7-硝基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(0.1g,0.323mmol)在THF(比例：10.00,体积：1ml)和MeOH(比例：1.000,体积：0.1ml)中的溶液中。搅拌反应混合物30分钟。用甲醇稀释，过滤，并通过制备性HPLC纯化，得到T776(0.007g,0.025mmol,7.75%产率)MS(ESI,Pos.)m/z：280.0[M+H]+。
制备T778。氰基硼氢化钠(0.023g,0.358mmol)加入甲醛溶液(0.029ml,0.358mmol)和T776(0.01g,0.036mmol)在MeOH(体积：2ml)中的溶液中。搅拌反应混合物10分钟。制备性HPLC纯化得到T778(0.002g,6.51μmol,18.17%产率)MS(ESI,Pos.)m/z：308.0[M+H]+。
合成T812
制备1-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-醇。在微波中将氮杂环丁烷-3-醇盐酸盐(0.022g,0.202mmol)、2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(0.05g,0.202mmol)和三乙胺(0.028ml,0.202mmol)加热至100℃保持10分钟。让反应混合物冷却至室温。用水稀释，并真空过滤沉淀物。用水洗涤，得到1-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-醇(0.048g,0.200mmol,99%产率)。
制备4-甲基苯磺酸1-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-酯。对甲苯磺酸酐(0.098g,0.300mmol)加至4-甲基苯磺酸1-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-酯(0.079g,0.200mmol,100%产率)和N,N-二异丙基乙基胺(0.070ml,0.400mmol)在DCM(体积：0.666ml)中的溶液中。搅拌反应混合物30分钟。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，干燥，过滤并浓缩，得到粗4-甲基苯磺酸1-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-酯(0.079g,0.200mmol,100%产率)。
制备T812。室温过夜搅拌TBAF(四丁基氟化铵1M THF)(1ml,1.000mmol)和4-甲基苯磺酸1-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-酯(0.035g,0.089mmol)。浓缩并通过制备性HPLC纯化得到T812(0.002g,8.26μmol,9.30%产率)MS(ESI,Pos.)m/z：243.0[M+H]+。
合成T814
制备T814。氢化钠60%(6.70mg,0.291mmol)加入1-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-醇(0.035g,0.146mmol)和1-溴-2-氟乙烷(0.037g,0.291mmol)在DMF(体积：0.486ml)中的溶液中。搅拌反应混合物过夜。制备性HPLC纯化得到T814(0.002g,6.99μmol,4.80%产率)MS(ESI,Pos.)m/z：287.0[M+H]+。
合成T815
制备3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基(甲基)氨基)丙-1-醇。在微波中将2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(0.2g,0.806mmol)、3-(甲基氨基)丙-1-醇(0.072g,0.806mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.141ml,0.806mmol)加热至100℃保持10分钟。让反应混合物冷却至室温。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，干燥，过滤并浓缩，得到粗3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基(甲基)氨基)丙-1-醇(0.207g,0.808mmol,100%产率)。
制备T815。氢化钠60%(3.59mg,0.156mmol)加入3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基(甲基)氨基)丙-1-醇(0.02g,0.078mmol)和1-溴-2-氟乙烷(0.020g,0.156mmol)在DMF(体积：0.390ml)中的溶液。搅拌反应混合物过夜。浓缩并通过制备性HPLC纯化得到T815(0.002g,6.61μmol,8.48%产率)MS(ESI,Pos.)m/z：303.0[M+H]+。
合成T816
制备4-甲基苯磺酸3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基(甲基)氨基)丙酯。对甲苯磺酸酐(0.382g,1.170mmol)加入3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基(甲基)氨基)丙-1-醇(0.2g,0.780mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.273ml,1.561mmol)在DCM(体积：1.951ml)中的溶液中。搅拌反应混合物30分钟。浓缩并通过制备性HPLC纯化得到4-甲基苯磺酸3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基(甲基)氨基)丙酯(0.02g,0.049mmol,6.24%产率)。
制备T816。在0℃DAST(0.206ml,1.561mmol)加入3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基(甲基)氨基)丙-1-醇(0.1g,0.390mmol)在DCM(体积：1.951ml)中的溶液中。搅拌反应混合物30分钟。使反应混合物温热至室温。用饱和NaHCO3稀释，用DCM萃取，合并有机层，干燥，过滤，浓缩并通过制备性HPLC纯化得到T816(0.003g,0.012mmol,2.98%产率)MS(ESI,Pos.)m/z：259.0[M+H]+。
合成T818
制备T818。氢化钠60%(9.27mg,0.403mmol)加入2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(0.05g,0.202mmol)、3-氟丙-1-醇(0.031g,0.403mmol)在DMF(体积：1.008ml)中的溶液中。搅拌反应混合物1小时。制备性HPLC纯化得到T818(0.003g,0.012mmol,6.07%产率)MS(ESI,Pos.)m/z：246.0[M+H]+。
合成2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶
制备2-(三氯甲基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶。将(E)-1,1,1-三氯-4-乙氧基丁-3-烯-2-酮(6.1g,28.0mmol)加入1H-苯并[d]咪唑-2-胺(3.73g,28.0mmol)和三乙胺(3.91mL,28.0mmol)在甲苯(体积：100mL)中的溶液中。将反应混合物加热至120℃且保持2小时。让反应混合物冷却至室温并真空浓缩。用水稀释并过滤。收集固体并真空干燥，得到粗2-(三氯甲基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(8.04g,28.1mmol,100%产率)。
制备苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-醇。将氢氧化钠(36.5ml,36.5mmol)加入2-(三氯甲基)-苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(8.04g,28.1mmol)在乙腈(体积：122ml)中的溶液中。将反应混合物加热至90C保持30分钟。将反应混合物冷却至室温并浓缩。将冰加入至所得剩余物中，接着加入35mL的1MHCl。过滤该固体，并真空干燥，得到粗苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-醇(5.2g,28.1mmol,100%产率)。
制备2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶。将三溴氧化磷(25g,87mmol)加入苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-醇(5.2g,28.1mmol)在DCE(比例：1.000,体积：93ml)和DMF(比例：0.01,体积：0.927ml)中的混悬液中。将反应混合物加热至100℃保持3小时。将反应混合物冷却至室温并浓缩。用冰水稀释，并用浓缩的氢氧化铵淬灭至pH～8。过滤所得剩余物，用水并接着用乙醚洗涤。真空干燥，得到粗2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(6.97g,28.1mmol,100%产率)。
5-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)戊-4-炔-1-醇。在微波反应器中于120℃加热2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(40mg,0.2mmol)、戊-4-炔-1-醇(22mg,0.26mmol)、四(三苯基膦)钯(23mg,0.02mmol)、DIPEA(50mg,0.4mmol)20分钟，然后冷却至室温。将其用EtOAc(20mL)稀释，并用盐水(30mL)和水(2x30mL)洗涤，并浓缩。剩余物通过硅胶色谱法(EtOAc在DCM中的溶液,10%至100%)纯化，得到5-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)戊-4-炔-1-醇，为黄色固体(28mg,56%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.68(d,J＝6.8,1H),8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.86(d,J＝8.4Hz,1H),7.57(m,1H),7.42(m,1H),6.95(d,J＝6.8Hz,1H),3.85(t,J＝6Hz,2H),2.82(t,J＝6.8Hz,2H),1.93(m,2H)；MS(ESI)m/z[M+H]+252。
2-(6-(3-氟丙氧基)吡啶-3-基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶。向5-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)吡啶-2-醇(8mg,0.03mmol)和4-甲基苯磺酸3-氟丙酯(21mg,0.09mmol)在0.3mL的NMP中的溶液加入Cs2CO3(15mg,0.045mmol)。反应混合物在室温搅拌4小时，并用EtOAc(10mL)稀释。混合物用水(3x10mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。剩余物通过反相HPLC(水/MeCN，含TFA缓冲液)纯化，得到2-(6-(3-氟丙氧基)吡啶-3-基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶为灰白色固体(3mg,31%)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)：δ9.79(d,J＝7.2Hz,1H),8.66(d,J＝2.8Hz,1H),8.69(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),8.40(d,J＝8.8Hz,1H),8.29(d,J＝7.2Hz,1H),7.90-7.82(m,2H),7.72(m,1H),7.04(d,J＝8.8Hz,1H),4.68(t,J＝5.6Hz,1H),4.57(t,J＝6.4Hz,2H),4.56(t,J＝5.6Hz,1H),2.30-2.16(m,2H)；MS(ESI)m/z[M+H]+323。
5-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-1-(3-氟丙基)吡啶-2(1H)-酮(T567)。标题化合物从上述纯化分离为副产物，为白色固体(2mg,20%)。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)：δ9.61(d,J＝7.2Hz,1H),9.01(d,J＝2.8Hz,1H),8.50(dd,J＝9.2,2.4Hz,1H),8.35(m,1H),8.12(d,J＝7.2Hz,1H),7.88-7.78(m,2H),7.69(t,J＝7.6Hz,1H),6.72(d,J＝9.6Hz,1H),4.62(t,J＝5.6Hz,1H),4.50(t,J＝5.6Hz,1H),4.30(t,J＝6.8Hz,2H),2.30-2.16(m,2H)；MS(ESI)m/z[M+H]+323。
2-(4-甲氧基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶。标题化合物使用一般方法Q从2-溴-1-(4-甲氧基苯基)乙酮在1mmol规模中制备。在用Na2CO3中和后，经过滤收集固体，并用EtOAc(3x10mL)洗涤，得到2-(4-甲氧基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶，为黄色固体(55mg,20%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.51(d,J＝7.2,1H),8.34(m,2H),8.29(d,J＝8.0Hz,1H),7.81(d,J＝8.0Hz,1H),7.78(d,J＝7.2Hz,1H),7.52(m,1H),7.39(m,1H),7.15(m,2H),3.88(s,3H)；MS(ESI)m/z[M+H]+276。
4-(4-甲氧基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(T572)。标题化合物使用一般方法Q从2-溴-1-(4-甲氧基苯基)乙酮在1mmol规模上制备。在用Na2CO3中和后，过滤该混悬液，并且浓缩滤液，通过硅胶色谱法(EtOAc在DCM中的溶液,5%至80%)纯化，得到4-(4-甲氧基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶，为黄色固体(42mg,15%)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)：δ9.15(d,J＝4.4,1H),7.91-7.88(m,1H),7.76(m,1H),7.72(m,2H),7.54(d,J＝4.4Hz,1H),7.38(m,1H),7.28(m,2H),7.09(d,J＝8.8Hz,1H),3.97(s,3H)；MS(ESI)m/z[M+H]+276。
4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯酚(T582)。向在0.5mL DCM中的4-(4-甲氧基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(12mg,0.043mmol)中加入1mL的BBr3溶液(1M的DCM溶液)。反应混合物在室温搅拌15小时，并且在冰上(10g)淬灭。混合物用饱和Na2PO4中和，并用EtOAc(3x10mL)萃取。有机相经MgSO4干燥并浓缩。纯化粗产物，通过反相HPLC(TFA缓冲的水/MeCN)纯化，得到4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯酚，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,MeCN-d3)：δ9.15(d,J＝7.2,1H),8.29(d,J＝9.2Hz,2H),8.21(d,J＝8.8Hz,1H),8.02(d,J＝7.2Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.79(t,J＝7.2Hz,1H),7.67(t,J＝7.2Hz,1H),7.06(d,J＝8.8Hz,2H)；MS(ESI)m/z[M+H]+262。
4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟苄腈(T747)。标题化合物使用一般实验方法A(Suzuki偶联反应)从2-溴苯并[4,5]咪唑并[1，2-a]嘧啶和(4-氰基-3-氟苯基)硼酸在0.1mmol规模上制备。剩余物用水(3x5mL)、EtOAc(3x2mL)和DCM(3x2mL)洗涤，并高真空干燥得到4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟苄腈(T747)为橙色固体(10mg,35%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.74(d,J＝6.8Hz,1H),8.46(d,J＝10.8Hz,1H),8.41-8.38(m,2H),8.19(t,J＝7.6Hz,1H),7.98(d,J＝6.8Hz,1H),7.90(d,J＝8.4Hz,1H),7.60(t,J＝7.2Hz,1H),7.45(t,J＝7.2Hz,1H)；MS(ESI)m/z[M+H]+289。
5-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟苄腈(T748)。标题化合物使用一般实验方法A(Suzuki偶联反应)从2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶和(4-氰基-3-氟苯基)硼酸在0.1mmol规模上制备。剩余物用水(3x5mL)、EtOAc(3x2mL)和DCM(3x2mL)洗涤，并高真空干燥得到4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟苄腈(T747)，为橙色固体(12mg,41%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.67(d,J＝7.2Hz,1H),8.86(dd,J＝5.6,2.0Hz,1H),8.74(m,1H),8.33(d,J＝7.6Hz,1H),7.91(d,J＝7.2Hz,1H),7.84(d,J＝9.2Hz,1H),7.760(t,J＝8.8Hz,1H),7.54(t,J＝7.2Hz,1H),7.42(t,J＝7.6Hz,1H)；MS(ESI)m/z[M+H]+289。
I.制备3-芳基取代的嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑系列化合物(T590、T591、T592,、T600、T601、T602、T621、T622)
该化合物一般经由上述方案制备，使用标准的Suzuki和烷基化(或还原氨化)的方法。
3-(4-氟乙基氧基苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑；T590
1H-NMR(400MHz,CD3CN)δ：9.50(s,1H),9.36(s,1H),8.36-8.34(m,1H),8.10-8.08(m,1H),7.80-7.77(m,3H),7.69(m,1H)；7.20-7.17(m,1H)；LRMS：C18H14FN3O+H+,计算值：308.1,测量值：308.1(M+H+)。
3-(4-氨基苯基)嘧啶并[1，2-a]苯并咪唑,TFA盐；T591
1H-NMR(400MHz,CD3CN)δ：9.49(s,1H),9.40(s,1H),8.38-8.36(m,1H),8.02-8.00(m,1H),7.88-7.72(m,2H),7.60-7.58(m,2H),6.88-6.85(m,2H)；LRMS：C18H13F3N4O2+H+,计算值：375.1,测量值：261.1(M+H+-TFA)。
3-(4-2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑,TFA盐；T592
1H-NMR(400MHz,CD3CN)δ：9.38(s,1H),9.25(s,1H),8.29-8.27(m,1H),8.04-8.02,2H),7.76-7.58(m,4H),7.16-7.14(m,2H)；4.60-4.46(m,2H),4.21-4.19(m,2H)3.80-3.63(8H)；LRMS：C24H23F4N3O5+H+,计算值：509.2,测量值：396.2(M+H+-TFA)。
3-(4-羟基苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑,TFA盐；T600
1H-NMR(400MHz,CD3CN)δ：9.45(s,1H),9.32(s,1H),8.34-8.32(m,1H),8.07-8.05(m,1H),7.79-7.77(m,1H),7.69-7.66(m,3H),7.05-7.03(m,2H)；LRMS：C18H12F3N3O3+H+,计算值：376.1,测量值：262.1(M+H+-TFA)。
3-(4(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑,TFA盐；T601
1H-NMR(400MHz,CD3CN)δ：9.45(s,1H),9.31(m,1H),8.30-8.30(m,1H),8.07-8.05(m,1H),7.77-7.17(m,4H),7.17-7.14(m,2H),4.64-4.51(m,2H),4.23-4.20(m,2H),3.83-3.73(m,4h)；LRMS：C22H19F4N3O4+H+,计算值：466.1,测量值：352.1(M+H+-TFA)。
3-(3-(2-氟吡啶基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑,TFA盐；T602
1H-NMR(400MHz,CD3CN)δ：9.68(s,1H),9.40(s,1H),8.68(s,1H),8.38-8.32(m,2H),8.13(m,1H),7.88-7.72(m,2H),7.31-7.29(m,1H)；LRMS：C15H9F4N4O2+H+,计算值：379.1,测量值：265.1(M+H+-TFA)。
3-(4-氟乙基氨基苯基)嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑,TFA盐T621
1H-NMR(400MHz,CD3CN)δ：δ：9.44(s,1H),9.37(s,1H),8.36-8.33(m,1H),8.04-8.02(m,1H),7.81-7.63(m,4H),6.88(m,2H)；LRMS：C20H15F4N4O+H+,计算值：404.1,测量值：307.1(M+H+-TFA)。
3-(4-N-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)氨基苯基嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑,TFA盐；T622
1H-NMR(400MHz,CD3CN)δ：9.35(s,1H),9.28(s,1H),8.30-8.28(m,1H),7.74-7.60(m,4H),6.84-6.82(m,2H),4.61-4.46(m,2H),3.74-3.64(m,8H),3.35-3.32(m,2H)；LRMS：C24H23F4N4O3+H+,计算值：491.2,测量值：395.2(M+H+-TFA)。
4-(8-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺。标题化合物使用一般方法Q和R从2-溴-1-(4-硝基苯基)乙酮和5-甲氧基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺在0.1mmol规模上制备。得到的4-(8-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺(T581)为黄色固体(1.2mg,0.4%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.56(d,J＝7.6,1H),8.33(d,J＝10.0Hz,1H),8.19-8.12(m,3H),7.22(m,2H),6.74(d,J＝8.8Hz,2H),3.92(s,3H)；MS(ESI)m/z[M+H]+291。
N-二Boc 4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯胺。于120℃加热4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯胺(521mg,2mmol)在5mL的一缩二碳酸二-叔丁酯中的混悬液2小时，并冷却至室温。混合物经历硅胶色谱法，得到标题化合物，为黄色蜡状物(550mg,60%)。MS(ESI)m/z[M+H]+461。
(4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯。回流N-二Boc 4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯胺(532mg,1.15mmol)和K2CO3(828mg,6mmol)在6mL MeOH中的混合物1小时，并冷却至室温。减压除去挥发物，剩余物在DCM和水之间分配。有机相经MgSO4干燥并减压浓缩。通过硅胶色谱法纯化粗产物，得到标题化合物，为黄色固体(300mg,72%)。MS(ESI)m/z[M+H]+361。
4-甲基苯磺酸3-((4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯基)(叔丁氧基羰基)氨基)丙酯。于0℃向(4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(300mg,0.83mmol)在DMF(9mL)中的溶液中加入NaH(38mg,0.91mmol,60%分散在油中)。于0℃搅拌5分钟后，除去冰浴，并室温搅拌20分钟。再次将反应混合物冷却至0℃，分6份加入双(4-甲基苯磺酸丙烷-1,3-二酯)(653mg,1.7mmol)。于0℃搅拌5分钟，室温搅拌反应混合物2小时，并用饱和NH4Cl溶液(40mL)淬灭。混合物用DCM(3x30mL)萃取。合并的有机相用水(2x50mL)洗涤，并经MgSO4干燥并浓缩。剩余物首先通过硅胶色谱法(THF的DCM溶液，0%至18%)纯化，然后用反相HPLC(TFA缓冲的水/MeCN)纯化，得到标题化合物，为橙色固体(160mg,34%)。MS(ESI)m/z[M+H]+573。
(3-叠氮基丙基)(4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯。向4-甲基苯磺酸3-((4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯基)(叔丁氧基羰基)氨基)丙酯(130mg,0.23mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入NaN3(83mg,1.3mmol)。室温搅拌混合物2小时，并减压浓缩以除去挥发物。剩余物吸收至DCM(50mL)中，并用水(2x50mL)洗涤，经MgSO4干燥并浓缩，得到标题化合物，为黄色固体。产物不经进一步纯化直接用于后续反应。MS(ESI)m/z[M+H]+444。
N-(3-叠氮基丙基)-4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯胺。向(3-叠氮基丙基)(4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(上述物质)在3mL的DCM中的溶液中加入TFA(1mL)。室温搅拌混合物1.5小时，并减压浓缩。剩余物通过反相HPLC(TFA缓冲的水/MeCN)纯化，得到标题化合物，为橙色油状物(61mg,TFA盐)。MS(ESI)m/z[M+H]+344。
4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)-N-(3-(4-(3-氟丙基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)丙基)苯胺。室温向N-(3-叠氮基丙基)-4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯胺(9mg,0.026mmol)在THF(0.25mL)中的溶液中加入5-氟戊-1-炔(2滴)、CuI(1mg,0.005mmol)和DIPEA(10mg,0.08mmol)。室温搅拌混合物5小时，并减压浓缩。剩余物通过反相HPLC (TFA缓冲的水/MeCN)纯化，得到标题化合物，为橙色固体(5mg,44%)。MS(ESI)m/z[M+H]+430。
N-(3-氟丙基)-4-(7-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺(T620)。室温向3-氟丙-1-醇(5mg,0.05mmol)在0.3mL的DCM中的搅拌溶液中加入戴斯-马丁试剂(42mg,0.1mmol)。室温搅拌混合物1小时，并加入0.3mL的DCE。通过棉垫过滤成4-(7-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺(5mg,0.017mmol,根据一般实验方法Q和R制备)和NaBH(AcO)3(42mg,0.2mmol)在0.3mL的DCE中的搅拌混合物。剧烈搅拌反应5分钟，并通过添加Na2CO3(2mL,饱和)淬灭。混合物用EtOAc(3x5mL)萃取，合并的有机相用水(2x10mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。纯化粗产物，通过反相HPLC(TFA缓冲的水/MeCN)纯化，得到标题化合物，为橙色固体(5mg,53%,TFA盐)。MS(ESI)m/z[M+H]+351。
4-(7-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N,N-二甲基苯胺(T646)和4-(7-甲氧基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N,N-二甲基苯胺(T647)。向4-(7-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺(20mg,0.069mmol)在1mL DCE中的溶液中加入低聚甲醛(11mg,0.35mmol)，接着加入NaBH(AcO)3(102mg,0.48mmol)。反应混合物在RT搅拌60小时，并通过加入Na2CO3(5mL,饱和)而淬灭。混合物用EtOAc(2x10mL)萃取，合并的有机相用水(2x20mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。剩余物经历反相HPLC(TFA缓冲的水/MeCN)纯化，得到标题化合物，为TFA盐：4-(7-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N,N-二甲基苯胺(T646,1.5mg,7%)为橙色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.53(d,J＝7.6,1H),8.26(d,J＝9.2Hz,2H),8.15(m,1H),8.07(s,1H),7.66(d,J＝8.4Hz,1H),7.27(d,J＝8.8Hz,1H),6.87(d,J＝8.8Hz,2H),3.88(s,3H),3.08(s,6H)；MS(ESI)m/z[M+H]+319。4-(7-甲氧基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-N,N-二甲基苯胺(T647,7mg,27%)，黄色固体。MS(ESI)m/z[M+H]+323。
1-(1,1-二甲氧基乙基)-4-硝基苯。向1-(4-硝基苯基)乙酮(5g,30mmol)在MeOH中的溶液中加入三甲氧基甲烷(3.2g,30mmol)，接着加入4-甲基苯磺酸(29mg,0.15mmol)。搅拌混合物72小时，并通过加入固体Na2CO3(16mg,0.15mmol)淬灭。持续搅拌30分钟，通过中性氧化铝垫过滤混合物。浓缩滤出液，粗产物用MeOH重结晶，得到标题化合物，为白色固体(6.4g,100%)。MS(ESI)m/z[M+H]+212。
1,1,1-三氟-4-甲氧基-4-(4-硝基苯基)丁-3-烯-2-酮。在0℃向(1,1-二甲氧基乙基)-4-硝基苯(2.9g,14mmol)在CHCl3(70mL)的溶液中加入吡啶(2.2g,28mmol)，接着滴加2,2,2-三氟乙酸酐(5.9g,28mmol)。然后将该溶液转移至密封试管中，并加热至90℃保持4小时。冷却至室温后，用0.1N HCl(3x70mL)和水(70mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。通过硅胶色谱法纯化粗产物(EtOAc的己烷溶液，5%至20%)，得到标题化合物(1.7g,44%)。MS(ESI)m/z[M+H]+276。
2-(4-硝基苯基)-4-(三氟甲基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶和4-(4-硝基苯基)-2-(三氟甲基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶。向1H-苯并[d]咪唑-2-胺(479mg,3.6mmol)在甲苯(36mL)的溶液中加入TEA。室温搅拌15分钟，接着添加1,1,1-三氟-4-甲氧基-4-(4-硝基苯基)丁-3-烯-2-酮(1g,3.6mmol)。然后回流加热15小时，并冷却至室温。减压除去挥发物，剩余物在DCM和水之间分配。有机层经MgSO4干燥并减压浓缩。含两种异构体的粗产物不经进一步纯化直接用于后续反应。MS(ESI)m/z[M+H]+359。
4-(4-(三氟甲基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺和4-(2-(三氟甲基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯胺。上述物质用SnCl2处理，使用一般实验方法R。粗物质经历硅胶色谱(EtOAc的DCM溶液，5%至60%)，得到分离的标题化合物，为橙色固体：4-(4-(三氟甲基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺(236mg,20%),MS(ESI)m/z[M+H]+329；4-(2-(三氟甲基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯胺(940mg,80%),MS(ESI)m/z[M+H]+329。
N-(3-氟丙基)-4-(4-(三氟甲基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺(T693)。标题化合物使用一般方法S从4-(4-(三氟甲基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺和3-氟丙-1-醇以0.03mmol规模制备。得到的N-(3-氟丙基)-4-(4-(三氟甲基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺(T693)为橙色固体(3.9mg,33%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.25(d,J＝8.8,2H),8.07(s,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝8.0Hz,1H),7.57(t,J＝7.6Hz,1H),7.46(t,J＝7.6Hz,1H),6.81(t,J＝5.2Hz,1H),6.76(d,J＝8.8Hz,2H),4.64(t,J＝5.6Hz,1H),4.53(t,J＝5.6Hz,1H),3.28(m,2H),1.97(m,2H)；MS(ESI)m/z[M+H]+389。
N-(3-氟丙基)-4-(2-(三氟甲基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯胺。标题化合物使用一般方法S从-(三氟甲基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-4-基)苯胺和3-氟丙-1-醇以0.03mmol规模制备。得到的N-(3-氟丙基)-4-(4-(三氟甲基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺(T693)为橙色固体(5mg,43%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ7.95(d,J＝8.4Hz,1H),7.59-7.54(m,3H),7.30(d,J＝0.8Hz,1H),7.25(d,J＝4.0Hz,2H),6.83(t,J＝8.4Hz,2H),6.61(t,J＝5.2Hz,1H),4.67(t,J＝5.6Hz,1H),4.55(t,J＝5.6Hz,1H),3.28(m,2H),2.00(m,2H)；MS(ESI)m/z[M+H]+389。
4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟苯胺(T713)。标题化合物使用一般实验方法A(Suzuki偶联反应)从2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶和(4-氨基-3-氟苯基)硼酸以0.059mmol规模合成。得到的4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟苯胺为橙色固体(10mg,61%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.63(d,J＝7.2Hz,1H),8.45(d,J＝8.0Hz,1H),8.20(d,J＝7.2Hz,1H),8.12(dd,J＝23.2,2.0Hz,1H),8.11(s,1H),7.82(d,J＝8.4Hz,1H),7.72(t,J＝7.2Hz,1H),7.62(d,J＝7.6Hz,1H),6.94(t,J＝8.8Hz,1H)；MS(ESI)m/z[M+H]+279。
4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟-N-(3-氟丙基)苯胺(T725)。标题化合物首先使用一般实验方法A(Suzuki偶联反应)从2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶和(4-氨基-3-氟苯基)硼酸，然后使用一般实验方法S进行烷基化而制备。得到的4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟-N-(3-氟丙基)苯胺为橙色固体。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)：δ9.12(d,J＝7.6,1H),8.06(d,J＝8.0Hz,1H),8.04-7.98(m,2H),7.76(d,J＝8.0Hz,1H),7.57(d,J＝7.6Hz,1H),7.52(t,J＝8.0Hz,1H),7.38(t,J＝7.6Hz,1H),6.86(t,J＝8.4Hz,1H),4.62(t,J＝5.6Hz,1H),4.50(t,J＝5.6Hz,1H),3.41(t,J＝6.8Hz,1H),2.03(m,2H)；MS(ESI)m/z[M+H]+339。
5-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟苯胺(T736)。标题化合物使用一般实验方法A(Suzuki偶联反应)从2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶和(3-氨基-4-氟苯基)硼酸制备。得到的5-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟苯胺为橙色固体。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)：δ9.63(d,J＝7.2Hz,1H),8.38(d,J＝8.4Hz,1H),8.17(d,J＝7.2Hz,1H),7.92(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.88-7.80(m,2H),7.73-7.68(m,2H),7.19(dd,J＝10.8,8.4Hz,1H)；MS(ESI)m/z[M+H]+318。
2-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-4-氟苯胺(T739)。标题化合物使用一般实验方法A(Suzuki偶联反应)从2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶和(2-氨基-5-氟苯基)硼酸制备。得到的2-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-4-氟苯胺为橙色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.75(d,J＝7.6Hz,1H),8.49(d,J＝8.0Hz,1H),8.26(d,J＝7.6Hz,1H),7.99(dd,J＝11.2,3.2Hz,1H),7.92(d,J＝8.0Hz,1H),7.74(d,J＝7.2Hz,1H),7.64(d,J＝8.4Hz,1H),7.29(m,1H),6.95(dd,J＝9.2,5.2Hz,1H)；MS(ESI)m/z[M+H]+279。
4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟-N-甲基苯胺。向4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟苯胺(20mg,0.072mmol)在1mL DCE中的混悬液中加入低聚甲醛(4.5mg,0.14mmol)，接着加入NaBH(AcO)3(51mg,0.24mmol)。反应混合物在RT搅拌6小时，并通过添加Na2CO3(5mL,饱和)淬灭。混合物用EtOAc(2x10mL)萃取，合并的有机相用水洗涤(2x20mL)并减压浓缩。剩余物经历反相HPLC(TFA缓冲的水/MeCN)，得到4-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)-2-氟-N-甲基苯胺，为橙色固体(4.5mg,21%)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)：δ9.10(d,J＝7.2Hz,1H),8.05(d,J＝8.0Hz,1H),8.01(d,J＝11.2Hz,2H),7.75(d,J＝8.4Hz,1H),7.56(d,J＝7.6Hz,1H),7.51(t,J＝7.2Hz,1H),7.38(d,J＝7.2Hz,1H),6.94(t,J＝8.8Hz,1H),2.90(s,3H)；MS(ESI)m/z[M+H]+293。
2-(1H-吲哚-5-基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(T759)。标题化合物使用一般实验方法A(Suzuki偶联反应)从2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶和(1H-吲哚-5-基)硼酸以0.12mmol规模制备。粗产物经历反相HPLC(TFA缓冲的水/MeCN)，得到2-(1H-吲哚-5-基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(T759)为橙色固体(20mg,50%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.85(d,J＝7.2Hz,1H),8.80(s,1H),8.52(d,J＝8.0Hz,1H),8.46(d,J＝7.2Hz,1H),8.26(dd,J＝8.8,1.2Hz,1H),7.87(d,J＝7.6Hz,1H),7.77(t,J＝7.2Hz,1H),7.68-7.64(m,2H),7.55(t,J＝2.4Hz,1H),6.70(m,1H)；MS(ESI)m/z[M+H]+285。
8-甲氧基-2-(4-硝基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶。标题化合物使用一般实验方法Q从2-溴-1-(4-硝基苯基)乙酮和5-甲氧基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺以6mmol规模制备。得到的8-甲氧基-2-(4-硝基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶为橙色固体(50mg,2.6%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.64(d,J＝7.6,1H),8.59(m,2H),8.42(d,J＝9.2Hz,2H),8.26(d,J＝8.8Hz,1H),7.93(d,J＝7.2Hz,1H),7.35(d,J＝2.4Hz,1H),7.08(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),3.90(s,3H)；MS(ESI)m/z[M+H]+321。
4-(8-(2-氟乙氧基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺(T761)。于0℃向8-甲氧基-2-(4-硝基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(20mg,0.062mmol)的0.5mL DCM溶液中加入BBr3(0.31mL,0.31mmol,1.0M DCM溶液)。于0℃搅拌混合物1小时，并减压浓缩。粗产物经历反相HPLC(TFA缓冲的水/MeCN)，得到2-(4-硝基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-8-醇为橙色固体(5mg,21%,TFA盐)。MS(ESI)m/z[M+H]+307。
回流加热2-(4-硝基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-8-醇(2mg,0.007mmol)和SnCl2.2H2O(6mg,0.026mmol)在0.1mL EtOH中的混悬液2.5小时。进行一般实验方法R。粗产物，2-(4-氨基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-8-醇，不经进一步纯化直接用于后续反应。
向2-(4-氨基苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-8-醇(0.5mg,0.002mmol)在DMF(0.1mL)中的溶液中加入1-溴-2-氟乙烷(5mg,0.04mmol)和Cs2CO3(3.5mg,0.01mmol)。室温搅拌混合物30分钟。进行一般实验方法C。粗产物经历反相HPLC(TFA缓冲的水/MeCN)，得到4-(8-(2-氟乙氧基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)苯胺(T761)为橙色固体(0.6mg,100%)。1H NMR(400MHz,MeCN-d6)：δ9.00(d,J＝7.6,1H),8.15(m,2H),8.04(d,J＝9.2Hz,1H),7.85(d,J＝7.2Hz,1H),7.51(d,J＝2.4Hz,1H),7.20(dd,J＝9.2,2.4Hz,1H),6.81(d,J＝8.8Hz,2H),4.88(t,J＝4.0Hz,1H),4.75(t,J＝4.0Hz,1H),4.41(t,J＝4.0Hz,1H),4.34(t,J＝4.0Hz,1H)；MS(ESI)m/z[M+H]+323。
3-(4-(2-氟乙基)哌啶-1-基)-8-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶(AS-5357-59,T-821)
进行Buchwald反应(方法)的一般实验方法。反应以0.060g规模进行，加热反应混合物21/2小时。产物T-821通过Combifash纯化体系(DCM-MeOH)纯化，接着通过HPLC(乙腈：H2O：0.05TFA)纯化，得到固体0.008g(11%)，为浅黄色固体；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.15(dd,J＝8.0和4.41Hz,1H),7.66(d,J＝8.8Hz,1H)。7.24(m,1H),7.06(d,J＝6.8Hz,1H),6.91(宽单峰,1H),6.73(d,J＝7.2Hz,1H),4.56(tt,J＝7.6和2.0Hz,1H),4.48(t,J＝7.6Hz,1H),3.95(br d,J＝13.0Hz,1H),3.90(s,3H),2.99(t,J＝12.0Hz,2H),1.90(宽多重峰,2H),1.74-1.62(m,2H),1.40-1.30(m,2H)；MS(ESI)：328.1[M+H+,游离碱]。
3-(4-氟哌啶-1-基)-8-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶TFA盐(AS-5357-11,T-798)
采用使用Et3N作为碱和微波加热进行N-烷基化的一般实验方法(方法D)得到T798。反应在0.035g规模上进行。产物T-798通过HPLC(使用含0.05%TFA的ACN和H2O)进行纯化，为白色固体0.006g(12%)；1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ8.80(d,J＝8.0Hz,1H),7.32(d,J＝2.4Hz,1H),7.50(d,J＝8.8Hz,1H),7.28(dd,J＝8.0和2.8Hz,1H),7.19(dd,J＝9.2和2.4Hz,1H),6.82(d,J＝2.8Hz,1H),4.86-4.84(m,1H),3.92(s,3H),3.77-3.74(m,4H),2.14-1.92(m,4H)；MS(ESI)：300.10[M+H+,游离碱]。
3-(6-(4-氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶TFA盐(AS-5357-6,T-797)
使用Et3N作为碱和微波加热进行N-烷基化的一般实验方法(方法D)得到T-797。反应在0.127g规模上进行，产物T-797通过HPLC(使用含0.05%TFA的ACN和H2O)进行纯化，得到白色固体(0.006mg)；1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ9.21(dd,J＝7.2和0.81Hz,1H),8.71(d,J＝2.0Hz,1H),8.16(dd,J＝9.2和2.8Hz,1H),8.06(dd,J＝1.6和0.8Hz,1H),7.97(d,J＝2.0Hz,1H),7.89(dd,J＝7.6和2.0Hz,1H),7.58(d,J＝8.8Hz,1H),7.40(dd,J＝9.2和2.4Hz,1H),7.07(d,J＝9.2Hz,1H),4.98-4.93(m,1H),3.98(s,3H),3.91-3.74(m,4H),2.07-1.81(m,4H)；LC-MS(ESI)：377.2[M+H+,游离碱]。
8-(2-氟乙氧基)3-(2-甲氧基吡啶-3-基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶(AS-5332-187,T-774)
使用Suzuki偶联的一般实验方法(方法A)接着酚烷基化(方法C)以制备T-774。反应在0.036g规模上进行。产物在35%EtOAc:DCM混合物中在Combiflash纯化体系上以梯度洗脱而洗脱出来。分离出0.005g(10%，在两个步骤中)的T-774，为灰白色固体；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.36(dd,J＝7.6和0.8Hz,1H),8.24(dd,J＝5.2和2.0Hz,1H),7.94(宽单峰,1H),7.86(d,J＝9.2Hz,1H),7.76(dd,J＝7.2和1.6Hz,1H),7.38(d,J＝2.0Hz,1H),7.26-7.23(m,1H),7.20(宽二重峰,J＝8.0Hz,1H),7.03(dd,J＝8.0和5.2Hz,1H),4.89-4.87(m,1H),4.77-4.75(m,1H),4.39-4.37(m,1H),4.32-4.30(m,1H),4.01(s,3H)；LC-MS(ESI)：338.1[M+H+]。
3-(2-氟吡啶-4-基)-8-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶(AS-5332-183,T-771)
进行Suzuki偶联的一般实验方法(方法A)以制备T-771。反应在0.126g规模上进行。产物在40%EtOAc:DCM混合物中在Combiflash纯化体系上以梯度洗脱而洗脱出来。分离出0.0.25g(19%)的T-771，为黄色固体；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.13(dd,J＝7.6和0.8Hz,1H),8.34(d,J＝5.2Hz,1H),8.24(q,J＝2.8Hz,1H),7.95(d,J＝2.4Hz,1H),7.92(dt,J＝5.2和0.8Hz,1H),7.78(宽单峰,1H),7.72(d,J＝8.0Hz,1H),7.47(dd,J＝7.6和2.0Hz,1H),7.14(dd,J＝8.8和2.4Hz,1H),3.87(s,3H)；LC-MS(ESI)：294.1[M+H+]。
4-(8-(2-氟乙氧基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)-N-甲基苯胺(AS-5332-181,T-766)
使用Suzuki偶联的一般实验方法(方法A)合成T-766。反应在0.040g规模上进行。产物在45%EtOAc:DCM混合物中在Combiflash纯化体系上以梯度洗脱而洗脱出来。分离出0.0.25g(19%)的T-766，为黄色固体；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.88(dd,J＝7.6和0.8Hz,1H),8.90(d,J＝2.0Hz,1H),7.67-7.65(m,3H),7.61(d,J＝8.8Hz,1H),7.27(dd,J＝7.2和2.0Hz,1H),7.09(dd,J＝8.8和2.4Hz,1H),6.62(d,J＝8.8Hz,2H),7.08(q,J＝4.8Hz,2H),4.86-4.84(m,1H),4.75-4.72(m,1H),4.36-4.34(m,1H),4.28-4.26(m,1H),2.71(d,J＝3H)；LC-MS(ESI)：336.2[M+H+]。
3(6-氟吡啶-2-基)-8-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶(AS-5332-176,T-765
进行Suzuki偶联的一般实验方法(方法A)一合成T-765。反应在0.076g规模上进行。产物在30%EtOAc:DCM混合物中在Combiflash纯化体系上以梯度洗脱而洗脱出来。分离出0.025g(19%)的T-765，为黄色固体；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.45(d,J＝7.2Hz,1H),8.36(宽单峰,1H),7.94(q,J＝8.0Hz,1H),7.87(d,J＝8.8Hz,1H),7.83(宽二重峰,J＝6.4Hz,1H),7.74(宽单峰,1H),7.26-7.22(m,1H),6.97(dd,J＝8.0和2.8Hz,1H),3.96(s,3H)；LC-MS(ESI)：294.1[M+H]。
4-(8-(2-氟乙氧基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)苯胺(AS-5332-175,T-764)
进行Suzuki偶联的一般实验方法(方法A)以合成T-764。反应在0.042g规模上进行。产物在10%MeOH:DCM混合物中在Combiflash纯化体系上以梯度洗脱而洗脱出来。分离出0.032g(74%)的T-764，为黄色固体；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.72(dd,J＝7.2和0.8Hz,1H),7.69(d,J＝2.4Hz,1H),6.76-7.65(m,2H),7.59(dq J＝8.8和2.0Hz,2H),7.27(dd,J＝7.2和1.6Hz,1H),7.20(dd,J＝8.8和2.0Hz,1H),6.81(dq,J＝8.8和2.0Hz,2H),4.87-4.84(m,1H),4.75-4.73(m,1H),4.40-4.38(m,1H),4.33-4.31(m,1H)；LC-MS(ESI)：293.1[M+H+]。
2-氟-4-(8-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)苯胺(AS-5332-174,T-763)
进行Suzuki偶联的一般实验方法(方法A)以合成T-763。反应在0.100g规模上进行。产物在10%MeOH:DCM混合物中在Combiflash纯化体系上以梯度洗脱而洗脱出来。分离出0.006g(5.4%)的T-763，为浅黄色固体；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.94(d,J＝6.8Hz,1H),7.86(d,J＝2.4Hz,1H),7.73(宽单峰,1H),7.61(dq,J＝9.2和2.0Hz,2H),7.47(dd,J＝8.4和2.0Hz,1H),7.27(dd,J＝7.2和1.6Hz,1H),7.06(dd,J＝8.8和2.4Hz,1H),6.83(t,J＝8.8Hz,1H),3.85(s,3H)；LC-MS(ESI)：308.0[M+H+]。
N-(3-氟丙基)-3-(8-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)苯胺TFA盐(AS-5332-171,T-761)
使用NaH作为碱N-烷基化的一般实验方法(方法D)接着Boc脱保护(方法K)得到T-761。反应在0.039g规模上进行。后处理后，产物T-761通过HPLC(使用含0.05%TFA的ACN和H2O)纯化，为白色固体0.022mg(49%)；1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ9.28(d,J＝8.4Hz,1H),8.09(宽单峰,1H),8.02(d,J＝4.0Hz,1H),7.88(dd,J＝7.2和1.6Hz,1H),7.79(d,J＝8.8Hz,1H),7.43(dd,J＝8.8和2.4Hz,1H),7.34(t,J＝8.0Hz,1H),7.16-7.12(m,2H),6.85(dd,J＝7.6和1.6Hz,1H),4.65(t,J＝5.6Hz,1H),4.53(t,J＝5.6Hz,1H),4.01(s,3H),3.35(t,J＝5.6Hz,2H),2.05(m,2H)；LC-MS(ESI)：350.0[M+H+,游离碱]。
2-氟-4-(8-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)苄腈(AS-5332-167,T-751)
进行Suzuki偶联的一般实验方法(方法A)以合成T-751。反应在0.080g规模上进行。产物在24%EtOAc:DCM混合物中在Combiflash纯化体系上以梯度洗脱而洗脱出来。分离出0.018g(20%)的T-749，为浅黄色固体；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.51(宽二重峰,J＝7.2Hz,1H),8.08(宽单峰,1H),7.90(d,J＝8.8Hz,1H),7.77(t,J＝8.0Hz,1H),7.62(d,J＝8.0Hz,1H),7.56(d,J＝8.0Hz,1H),7.34(宽单峰,1H),7.28(dt,J＝8.8和1.2Hz,1H),7.17(d,J＝7.2Hz,1H),3.95(s,3H)；LC-MS(ESI)：318.0[M+H+]。
3-(3-氟-4-甲氧基苯基)8-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶(AS-5332-166,T-749)
进行Suzuki偶联的一般实验方法(方法A)以合成T-749。反应在0.085g规模上进行。产物在25%EtOAc:DCM混合物中在Combiflash纯化体系上以梯度洗脱而洗脱出来。分离出0.018g(18%)的T-749，为浅黄色固体；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.39(宽二重峰,J＝7.2Hz,1H),7.84(宽单峰,1H),7.83(d,J＝8.0Hz,1H),7.47-7.42(m,2H),7.30(t,J＝2.0Hz,1H),7.19(dt,J＝9.2和2.0Hz,1H),7.10-7.05(m,2H),3.95和3.94(s,各为3H)；LC-MS(ESI)：323.0[M+H+]。
2-氟-4-(8-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)N-甲基苯胺(AS-5332-159,T-708)
使用NaH作为碱进行N-烷基化的一般实验方法(方法D)接着对T-707进行Boc脱保护(方法K)得到T-708。反应在0.031g规模上进行。常规后处理后，产物使用MeOH研磨，过滤出固体0.003g(12%)；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.09(d,J＝7.2Hz,1H),7.95(宽单峰,1H),7.91(d,J＝2.4Hz,1H),7.80(dd,J＝7.6和1.6Hz,1H),7.71(d,J＝9.2Hz,1H),7.70-7.61(m,2H),7.34(dd,J＝9.2和2.4Hz,1H),6.83(t,J＝8.4Hz,1H),3.97和2.90(s,各为3H)；LC-MS(ESI)：322.1[M+H+]。
(2-氟-4-(8-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)-苯基)-氨基甲酸叔丁酯(AS-5332-158,T-707)
进行Suzuki偶联的一般实验方法(方法A)。反应在0.167g规模上进行。产物在8%MeOH:DCM混合物中在Combiflash纯化体系上以梯度洗脱而洗脱出来。分离出0.040g(16%)的T-707，为浅黄色固体；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.42(宽二重峰,J＝7.2Hz,1H),8.24(t,J＝7.2Hz,1H),7.94(宽单峰,1H),7.85(d,J＝8.8Hz,1H),7.46(tt,J＝11.6和2.0Hz,2H),7.32(宽单峰,J＝8.8Hz,2H),7.24-7.17(m,2H),6.92(br s,1H),3.95(s,3H),1.54(s,9H)；LC-MS(ESI)：408.0[M+H+]。
3-(6-氟吡啶-3-基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶氟丙基(AS-5332-137,T-671)
T-669使用一般实验方法(方法C)进行O-烷基化。反应在0.090g规模上进行。T-669-三氟甲磺酸酯在30%EtOAc:DCM混合物中在Combiflash纯化体系上以梯度洗脱而洗脱出来。分离出0.016g(12%)；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.57(宽单峰,1H),8.53(dd,J＝7.2和1.2Hz,1H),8.11(tt,J＝8.4和1.2Hz,1H),7.98(dd,J＝9.2和2.0Hz,1H),7.88(s,2H),7.45(dt,J＝9.2和2.0Hz,1H),7.23(d,J＝2.4Hz,1H),7.16(dt,J＝6.8和2.0Hz,1H),7.10(dt,J＝8.4和2.0Hz,1H)；LC-MS(ESI)：412.2[M+H+]。
向T-669三氟甲磺酸酯(0.016g,0.039mmol)在DMF(1mL)中的溶液中加入PPh3(0.005g,0.019mmol,0.5当量)、Et3N(0.016mL,0.117mmol,3.0当量)、Pd(OAc)2(0.005g,0.019mmol,0.5当量)，接着加入甲酸(0.0005mL,0.117mmol,3.0当量)。反应混合物在60℃搅拌1小时。反应完成后，剩余物用MeOH稀释，通过HPLC(使用含0.05%TFA体系的ACN-水)纯化，得到T-671固体0.005g(49%)；1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ9.43(d,J＝7.2Hz,1H),8.81(d,J＝2.0Hz,1H),8.50(td,J＝9.2和2.0Hz,1H),8.47(d,J＝8.4Hz,1H),8.29(s,1H),7.97(d,J＝7.2Hz,1H),7.92(d,J＝8.4Hz,1H),7.85(t,J＝6.8Hz,1H),7.72(t,J＝7.2Hz,1H),7.32(dd,J＝9.2和2.8Hz,1H)；LC-MS(ESI)：264.1[M+H+,游离碱]。
3-(6-氟吡啶-3-基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-8-醇TFA盐(AS-5332-131,T-669)
使用Suzuki偶联的一般实验方法(方法A)。反应在0.048g规模上进行。产物T-669通过HPLC(使用含0.05%TFA的ACN和H2O)纯化，为白色固体0.005mg(7%)；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.22(d,J＝7.2Hz,1H),8.78(d,J＝2.4Hz,1H),8.48(td,J＝7.2和2.4Hz,1H),8.20(s,1H),7.86(d,J＝6.8Hz,1H),7.74(dd,J＝4.0和3.6Hz,1H),7,32(td,J＝8.8和1.2Hz,1H)；LC-MS(ESI)：280.1[M+H+,游离碱]。
3-(6-氟吡啶-3-基)-8-甲氧基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶(AS-5332-125,T-663)
使用Suzuki偶联的一般实验方法(方法A)。反应在0.339g规模上进行。产物在10%MeOH:DCM混合物中在Combiflash纯化体系以梯度洗脱而洗脱出来。分离出0.035g(9%)的T-663，为灰黄色固体；1H NMR(400MHz,CDCl3 )：δ8.57(宽单峰,1H),8.51(宽二重峰,J＝6.8Hz,1H),8.14(t,J＝8.0Hz,1H),8.03(宽单峰,1H),7,87(dd,J＝8.8和1.2Hz,1H),7.35(宽单峰,1H),7.26-7.18(m,2H),7.09(dt,J＝8.4和2.8Hz,1H),3.95(s,3H)；LC-MS(ESI)：294.1[M+H+]。
8-甲氧基-3-(6-硝基吡啶-3-基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶(AS-5332-149,T-663P)
使用Suzuki偶联的一般实验方法(方法A)。反应在0.155g规模上进行。产物在10%MeOH:DCM混合物中在Combiflash纯化体系以梯度洗脱而洗脱出来。分离出0.015g(9%)的T-663P，为黄色固体；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.21(d,J＝2.0Hz,1H),9.15(d,J＝7.2Hz,1H),8.72(dd,J＝8.4和2.0Hz,1H),8.39(d,J＝8.4Hz,1H),8.24(宽单峰,1H),7.95(d,J＝2.0Hz,1H),7.72(d,J＝8.8Hz,1H),7.49(d,J＝7.2Hz,1H),7.14(dd,J＝8.8和2.4Hz,1H),3.88(s,3H)；LC-MS(ESI)：321.1[M+H+]。
8-甲氧基-3-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶(AS-5332-124,T-657)
使用Cs2CO3作为碱对T-656进行O-烷基化的一般实验方法(方法A)。反应在0.070g规模上进行。产物在12%MeOH:DCM混合物中在Combiflash纯化体系上梯度洗脱而洗脱出来。分离出0.005g(7%)的T-657，为灰白色固体；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.32(d,J＝7.6Hz,1H),7.79(dd,J＝8.8和1.2Hz,1H),7.76(d,J＝0.8Hz,1H),7.62(dd,J＝8.8和1.2Hz,2H),7.28(t,J＝2.0Hz,1H),7.16(dt,J＝8.0和4.0Hz,1H),7.06(dt,J＝7.2和4.0Hz,1H),7.01(dd,J＝8.0和1.2Hz,2H),3.93(s,3H),3.36(宽单峰,4H),2.69(宽单峰,4H),2.43(s,3H)；LC-MS(ESI)：373.2[M+H+]。
3-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-8-醇TFA盐(AS-5332-121,T-656)
使用Suzuki偶联(方法A)的一般实验方法。反应在0.130g规模上进行。产物T-656通过HPLC(使用含0.05%TFA的ACN和H2O)纯化，为白色固体0.012mg(14%)；1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ8.07(d,J＝7.2Hz,1H),8.02(宽单峰,1H),7.91(d,J＝7.2Hz,2H),7.82(d,J＝7.2Hz,1H),7.678-7.66(m,2H),7.27(dt,J＝8.8和1.2Hz,1H),7.21(d,J＝8.4Hz,2H),3.29-3.27(m,4H),2.97(s,3H)；LC-MS(ESI)：359.1[M+H+,游离碱]。
8-(2-氟乙氧基)-3-(4-(4-甲氧基哌嗪-1-基)苯基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶(AS-5332-118,T-643)
使用Suzuki偶联的一般实验方法(方法A)。反应在0.013g规模上进行。产物通过Combiflash纯化体系(使用11%MeOH:DCM混合物以梯度洗脱)纯化，得到0.006g(35%)的T-643，为灰白色固体；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.26(d,J＝7.6Hz,1H),7.75(dd,J＝8.8和0.8Hz,1H),7.72(宽单峰,1H),7.58(d,J＝8.0Hz,2H),7.30(t,J＝0.8Hz,1H),7.15(dq,J＝9.2和4.0Hz,1H),7.04(dq,J＝9.2和4.0Hz,1H),6.96(d,J＝7.6Hz,2H),4.83-4.81(m,1H),4.71-4.69(m,1H),4.33-4.31(m,1H),4.26-4.24(m,1H),3.34(宽单峰,4H),2.69(宽单峰,4H),2.41(s,3H)；LC-MS(ESI)：405.2[M+H+]。
3-溴-8-(2-氟乙氧基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶(AS-5332-117,T-635)
使用Cs2CO3作为碱进行酚烷基化(方法C)的一般实验方法。反应在0.104g规模上进行。产物通过Combiflash纯化体系(使用17%EtOAc:己烷混合物以梯度洗脱)纯化，得到0.015g(12%)的T-635，为浅黄色固体；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.21(d,J＝7.2Hz,1H),7.93(宽单峰,1H),7.83(d,J＝9.2Hz,1H),7.33(d,J＝2.4Hz,1H),7.26-7.23(m,1H),6.97(dd,J＝7.2和2.0Hz,1H),4.88-4.86(m,1H),4.76-4.74(m,1H),4.37-4.35(m,1H),4.30-4.28(m,1H)；LC-MS(ESI)：309.1和310.9[M+和M+2H+]。
1-(4-(2-氟乙氧基)苯基)-3-甲基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-4-腈(AS-5332-168,T-750)
使用NaH作为碱进行N-烷基化的一般实验方法制备T-750。反应在0.010g的规模上进行。产物在15%EtOAc:DCM混合物中在Combiflash纯化体系上梯度洗脱出来。分离出0.002g(17%)的T-750，为灰白色固体；1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.48-7.42(m,3H),7.15-7.13(m,2H),7.03(tt,J＝8.0和0.8Hz,1H),6.67(d,J＝8.4Hz,1H),6.58(s,1H),4.91-4.89(m,1H),4.80-4.78(m,1H),4.40-4.38(m,1H),4.33-4.31(m,1H),2.70(s,3H)；LC-MS(ESI)：346.1[M+H+]。
1-(二甲基氨基)-3-甲基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-4-腈(AS-5332-141,T-677)
在5mL微波小瓶中装有1-氯-3-甲基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-4-腈(1,0.048g,0.200mmol)和40%N(Me)2的水(1ml)溶液，并在100℃加热1小时。冷却反应混合物，过滤出T-677固体，0.030g(60%)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.11(d,J＝8.4Hz,1H),7.30(d,J＝8.0Hz,1H),7.50(t,J＝6.8Hz,1H),7.34(t,J＝6.8Hz,1H),6.58(s,1H),2.89(s,6H),2.57(s,3H)；LC-MS(ESI)：223.1[M+H+]。
1-氨基-3-甲基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-4-腈(AS-5332-140,T-676)
在5mL微波小瓶中装有1-氯-3-甲基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-4-腈(1,0.048g,0.200mmol)和7%NH3的MeOH(1ml)溶液，并在100℃加热1小时。冷却反应混合物，并过滤出T-676固体，0.022g(49%)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.37(d,J＝8.8Hz,1H),7.78(s,2H),7.71(d,J＝7.6Hz,1H),7.47(t,J＝5.6Hz,1H),7.25(t,J＝5.6Hz,1H),6.02(s,1H),2.45(s,3H)；LC-MS(ESI)：223.1[M+H+]。
3-甲基-1-(甲基氨基)苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-4-腈(AS-5332-139,T-675)
5mL微波小瓶中装有1-氯-3-甲基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-4-腈(1,0.048g,0.200mmol)和40%甲基胺的水(1ml)溶液，并在100℃加热1小时。剩余物用MeOH稀释得到T-675，过滤收集为灰白色固体，0.022g(47%)；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.46(d,J＝8.0Hz,1H),7.77(d,J＝8.0Hz,1H),7.52(t,J＝7.6Hz,1H),7.46(宽多重峰,1H),7.32(d,J＝7.6Hz,1H),6.09(s,1H),3.08(s,3H),2.54(s,3H)；LC-MS(ESI)：237.1[M+H+]。
3-甲基-1-吗啉代苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-4-腈(AS-5332-138,T-674)
在5mL微波小瓶中装有1-氯-3-甲基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-4-腈(1,0.048g,0.200mmol)和吗啉(0.100mL,0.600mmol,3当量)的DMF(3mL)溶液。混悬液在Biotage Emrys Optimizer微波反应器(250W)中于100℃受照射15分钟。剩余物用MeOH稀释得到T-674，过滤收集为灰白色固体，0.040g(69%)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.29(d,J＝8.8Hz,1H),7.86(d,J＝8.4Hz,1H),7.56(t,J＝7.2Hz,1H),7.42(t,J＝7.2Hz,1H),6.71(s,1H),3.97(宽单峰,4H),3.37(m,1H),3.17(d,J＝5.2Hz,1H),3.01(宽多重峰,2H),2.62(s,3H)；LC-MS(ESI)：293.1[M+H+]。
1-(4-(2-(2-羟基乙氧基)乙基)哌嗪-1-基-3-甲基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-4-腈(AS-5332-133，T-670)
5mL微波管中装有1-氯-3-甲基苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡啶-4-腈(1,0.120g,0.5mmol)和2(2-哌嗪-1-基)乙氧基)乙醇(2,0.260g,1.5mmol)的DMF(3mL)溶液。混悬液在Biotage Emrys Optimizer微波反应器(250W)中于100℃受照射15分钟。剩余物用MeOH稀释得到T-670，过滤收集为棕色固体，0.145g(77%)；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.18(宽二重峰,J＝8.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4,1H),7.52(tt,J＝8.0和1.2Hz,1H),7.36-7.32(m,3H),7.06(d,J＝2.4Hz,1H),7.00(t,J＝8.8Hz,1H),7.34(t,J＝8.8Hz,1H),3.78(宽单峰,4H),3.72(m,1H),3.66(m,1H),3.46(宽二重峰,J＝11.6Hz,2H),3.21(br,3H),2.86(br,3H),2.63(s,3H)；LC-MS(ESI)：380.3[M+H+]。
合成T815
制备3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基(甲基)氨基)丙-1-醇。在微波中将2-溴苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶(0.2g,0.806mmol)、3-(甲基氨基)丙-1-醇(0.072g,0.806mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.141ml,0.806mmol)加热至100℃保持10分钟。让反应混合物冷却至室温。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯萃取，合并有机物，过滤并浓缩，得到粗制3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基(甲基)氨基)丙-1-醇(0.207g,0.808mmol,100%产率)。
制备T815。将氢化钠60%(3.59mg,0.156mmol)加入含3-(苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基(甲基)氨基)丙-1-醇(0.02g,0.078mmol)的溶液中，并加入1-溴-2-氟乙烷(0.020g,0.156mmol)的DMF(体积：0.390ml)溶液。反应混合物搅拌过夜。浓缩并通过PREP HPLC纯化，得到T815(0.002g,6.61μmol,8.48%产率MS(ESI,Pos.)m/z：303.0[M+H]+。
人AD脑切片放射自显影
5μm厚的人AD脑切片首先使用Aβ和Tau的抗体进行检查以确定所测试的人脑是否含有Aβ和Tau。因此，选择三种类型的人脑切片用于放射自显影：Aβ+/Tau+；Aβ+/Tau-；和Aβ-/Tau-(对照)。
实验方案如下：
针对每种类型选取一种脑切片，并在罩中风干。F-18标记的示踪剂(40Ci/mL,500μL)的稀溶液(其通过用1x PBS(含2.5%EtOH和2.5%DMSO)稀释F-18示踪剂得到)应用至各载玻片上以覆盖整个组织切片。室温孵育所得到的载玻片90分钟，排干，并置于载玻片支持台上。然后以如下顺序洗涤：1xPBS，1分钟；70%EtOH的1xPBS溶液，2分钟；30%EtOH的1xPBS溶液，2分钟；和1xPBS，1分钟。在罩中干燥30分钟，然后置于Fuji成像板上，并暴露过夜。然后扫描该成像板，信号使用Fuji软件测量以生成脑切片的放射自显影。(PBS-磷酸盐缓冲盐水)
合成β-淀粉状蛋白和Tau Kds的实验方案
F-18标记的及其母体冷化合物(cold compound)在1X PBS(含5%乙醇和5%DMSO)中的各种浓度的溶液(pH 7.4)使用合成β-淀粉状蛋白或合成tau在玻璃试管中室温孵育90分钟。各试管中的反应混合物通过微纤维滤器经减压过滤。各试管用20%的EtOH在PBS的溶液洗涤。PBS洗涤溶液通过滤器真空过滤。然后各滤器用20%EtOH在PBS中的溶液洗涤，然后置入γ计数器小瓶中用于CPM计数。对所得数据进行作图用于确定Kd。
在人脑切片上的Tau荧光化合物染色(用tau和β-淀粉状蛋白二重或三重标记的免疫组织化学(IHC))
使用取自额叶(front lobe)的埋植有OCT的冷冻块的系列切片(6μm厚)进行染色(OCT–最佳切割温度)。在固定和淬灭自荧光后，组织切片用100μM的在50%乙醇PBS中的tau化合物孵育60分钟。然后将切片快速浸入水中，用PBS淋洗，并用5%正常马血清在PBS中室温封闭1小时。封闭后，该组织用tau或β-淀粉状蛋白一抗于4℃在潮湿腔室中过夜孵育。次日，切片用PBS洗涤，然后与二抗孵育1小时。切片经洗涤并覆盖，用Nikon(东京，日本)Eclipse显微镜(配有紫色、蓝色、绿色滤器)观察。
小鼠和大鼠的微PET成像
对野生型小鼠和大鼠静脉内注射候选示踪剂。对小鼠(重量范围25-45g)注射的剂量在180～300μCi(在200uL的盐水溶液中)之间。对大鼠(重量范围300-400g)注射的剂量在300～500μCi的示踪剂(在400μL的盐水溶液中)之间。用异氟烷引起并保持麻醉。使用MM INVEON扫描仪(SIEMENSTM)实施CT和PET扫描。在PET扫描之前获取CT图像，并持续5分钟。在PET获取开始后仅数分钟，将放射性的剂量通过尾部静脉注入动物中。随着通常持续30分钟的动态扫描生成图像。初始的图像分析包括确定是否存在示踪剂在脑中的吸收，这将建立其穿过血脑屏障的能力。所有的测量在注射示踪剂5分钟后的时间点进行。在脑中吸收的程度相对在颈部肌肉区域中的示踪剂吸收进行估计。脑中的注射剂量(g)的百分比与肌颈区域的百分比的比例提供作为脑吸收估计值。式(I)的代表性示踪剂的脑图像显示在图17-22中。
***
因此详细地描述了本发明的有利实施方案，应当理解由上述段落限定的本发明并不局限于上述描述中给出的具体细节，许多明显的变化方案在不偏离本发明精神或范围的条件下也是可能的。
Claims (34)
1.式(V)化合物或其药用盐及其立体异构体：
其中：
X25-X28各自独立地为CH、CR11或N；
X29为CH、N、O或S；
X30为CH、C或N；
X31-34各自独立地为CH、CR12、CR13或N；
R11-R13各自独立地为H、卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、烷基、烷基芳基、烷基氨基、烷基胺、芳基胺、芳基氨基、烷氧基、—(O-CH2-CH2)n-、烯基、炔基、芳基氧基、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、环烷基、环烷基氨基、环烷基胺、双环的饱和杂环和不饱和杂环，其中R11-R13中至少一个碳任选被N、O、S、三唑或卤素所替换，和
其中至少一个氢任选被卤素、胺、氨基、烷氧基、硝基、烷基、烯基、炔基、芳基氧基、烷基芳基、烷基氨基、烷基胺、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、环烷基、环烷基氨基、环烷基胺、双环的饱和杂环和不饱和杂环、离去基团、CN、OH或放射性同位素所替换。
2.权利要求1的化合物，其中R12-R13中的至少一个H被放射性同位素所替换。
3.权利要求1的化合物，其中X29和X30分别为N。
4.权利要求1的化合物，其中X25-X28各自独立地为CH或CR11。
5.权利要求1的化合物，其中X31-34中至少一个为N。
6.权利要求1的化合物，其中R11为甲氧基或乙氧基。
7.权利要求1的化合物，其中R11为胺。
8.权利要求1的化合物，其中R12或R13为芳族的。
9.权利要求1的化合物，其中R12或R13为环烷基。
10.权利要求1的化合物，其中R12或R13为-芳基-NH-C1-C6-卤素-。
11.权利要求1的化合物，其中R12或R13为-芳基-O-C1-C6-。
12.权利要求8的化合物，其中R12或R13为C3-C8杂环。
13.权利要求9的化合物，其中R12或R13为C3-C8环烷基。
14.权利要求8的化合物，其中R12中至少一个H被卤素或放射性同位素替换。
15.权利要求8的化合物，其中R12中至少一个碳被N替换。
16.权利要求9的化合物，其中R12中至少一个碳被N替换。
17.权利要求14的化合物，其中R11为NH2。
18.式(Va)化合物或其药用盐及其立体异构体：
其中：
X29为CH、N、O或S；
X30为CH、C或N；
X31-34各自独立地为CH、CR12、CR13或N；
R11-R13各自独立地为H、卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、烷基、烷基芳基、烷基氨基、环烷基氨基、烷基胺、芳基胺、芳基氨基、烷氧基、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、环烷基、饱和杂环和不饱和杂环，其中R11-R13中至少一个碳任选被N、O、S或卤素替换，和
其中至少一个氢任选被卤素、氨基、烷氧基或放射性同位素替换。
19.权利要求18的化合物，其中R12-R13中至少一个H被放射性同位素替换。
20.权利要求18的化合物，其中X29和X30分别为N。
21.权利要求18的化合物，其中X31-34中至少一个为N。
22.权利要求18的化合物，其中R12和R13中至少一个为C3-8环烷基，其中至少一个C任选被N、S或O所替换。
23.权利要求21的化合物，其中X34为N，X32-34为CH。
24.式(Vb)的化合物或其药用盐及其立体异构体：
其中：
X31-34各自独立地为CH、CR12、CR13或N；
R11-R13各自独立地为H、卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、烷基、烷基芳基、烷基氨基、环烷基氨基、烷基胺、芳基胺、芳基氨基、烷氧基、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、环烷基、饱和杂环和不饱和杂环，其中R11-R13中至少一个碳任选被N、O、S或卤素替换，和
其中至少一个氢任选被卤素、氨基、烷氧基或放射性同位素替换。
25.权利要求24的化合物，其中X34为N，X32-34为CH。
26.权利要求24的化合物，其中R12中至少一个H被卤素或放射性同位素替换。
27.式Vb’化合物：
其中R15为H、硝基、氰基、氨基、烷基、烷基芳基、烷基氨基、环烷基氨基、烷基胺、芳基胺、芳基氨基、烷氧基、NR10COO烷基、NR10COO芳基、NR10CO烷基、NR10CO芳基、COO烷基、COO芳基、CO烷基、CO芳基、芳基、环烷基，
其中至少一个H任选被卤素或放射性同位素替换。
28.权利要求27的化合物，其中R15为C1-C6烷基，其中至少一个H被卤素替换。
29.权利要求27的化合物，其中R15为C1-C6烷基，其中至少一个H被放射性同位素替换。
30.权利要求27的化合物，其中R15为C2-C6烷基-18F。
31.权利要求27的化合物，其中R15为18F或11C。
32.脑组织中的神经原纤维缠结和/或老年斑的成像和检测方法，所述方法包括使用式(V)化合物处理所述组织并测量放射性信号或荧光强度。
33.患者中神经原纤维缠结的体内检测方法，所述方法包括向患者给予有效量的放射性标记的权利要求1的化合物，并测量该化合物的放射性信号。
34.权利要求33的方法，其中，所述检测通过γ成像，并且为PET或SPECT或荧光。
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Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103242229A (zh) * | 2013-04-10 | 2013-08-14 | 常熟华益化工有限公司 | 一种用于神经退行性疾病领域的pet显像剂thk523前体的合成方法 |
| TWI513698B (zh) * | 2013-10-08 | 2015-12-21 | Hoffmann La Roche | 做為ｔａｕ－ｐｅｔ－配位體之二氮雜咔唑衍生物 |
| CN105229009A (zh) * | 2013-05-23 | 2016-01-06 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 作为成像剂的2-苯基咪唑并[1,2-a]嘧啶 |
| CN106008374A (zh) * | 2016-06-07 | 2016-10-12 | 四川大学 | 吡嗪类化合物及其在医药上的用途 |
| CN107108616A (zh) * | 2015-08-19 | 2017-08-29 | 国立大学法人京都大学 | 经放射性卤素标记的吡啶并[1,2‑a]苯并咪唑衍生物化合物 |
| CN107207499A (zh) * | 2015-03-04 | 2017-09-26 | 国立大学法人京都大学 | 经放射性碘标记的吡啶并[1,2‑a]苯并咪唑衍生物化合物 |
| CN108047145A (zh) * | 2017-11-17 | 2018-05-18 | 北京师范大学 | 与Tau蛋白具有亲和力的2-芳基喹喔啉类化合物及其制备方法与应用 |
| CN108290883A (zh) * | 2015-11-13 | 2018-07-17 | 伊莱利利公司 | 用于tau成像的氮杂环丁烷衍生物 |
| CN112010846A (zh) * | 2019-05-30 | 2020-12-01 | 四川大学华西医院 | 一种吡啶衍生物及其制备方法和用途 |
| CN112525868A (zh) * | 2019-09-19 | 2021-03-19 | 吉林大学 | 喹哪啶红及其衍生物在制备检测淀粉样纤维的试剂盒中的应用 |
| CN114423763A (zh) * | 2019-05-09 | 2022-04-29 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 咪唑并[1,2-a]嘧啶的区域选择性合成 |
Families Citing this family (63)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8932557B2 (en) | 2008-02-14 | 2015-01-13 | Eli Lilly And Company | Imaging agents for detecting neurological dysfunction |
| KR101430422B1 (ko) | 2010-04-08 | 2014-08-14 | 지멘스 메디컬 솔루션즈 유에스에이, 인크. | 함수 유기 용매에서 18ｆ-표지된 트레이서의 합성 |
| US10639608B2 (en) | 2010-04-08 | 2020-05-05 | Siemens Medical Solutions Usa, Inc. | System, device and method for preparing tracers and transferring materials during radiosynthesis |
| CA2815960C (en) * | 2010-10-29 | 2019-01-22 | Clino Ltd. | Tau imaging probe |
| US20130230460A1 (en) * | 2010-11-19 | 2013-09-05 | Ge Healthcare Limited | Use of cyanine dyes for the detection of tau for diagnosis of early-stage tauopathies |
| WO2013176698A1 (en) * | 2012-05-22 | 2013-11-28 | Eli Lilly And Company | Carboline and carbazole based imaging agents for detecting neurological dysfunction |
| EP2855477A4 (en) * | 2012-05-29 | 2015-11-18 | Merck Sharp & Dohme | BARYARY COMPOUNDS, ISOTOPICALLY MARKED |
| KR102053484B1 (ko) | 2012-12-21 | 2019-12-06 | 국립연구개발법인 양자과학기술연구개발기구 | 뇌 안에 축적된 타우 단백질을 이미징하기 위한 신규한 화합물 |
| US9879004B2 (en) | 2013-02-07 | 2018-01-30 | Merck Patent Gmbh | Substituted acetylene derivatives and their use as positive allosteric modulators of mGluR4 |
| CN103172637B (zh) * | 2013-03-13 | 2015-05-27 | 上海大学 | 嘧啶并[1,2-a]苯并咪唑类化合物及其制备方法 |
| WO2014151630A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-25 | Irm Llc | Compounds and compositions for the treatment of parasitic diseases |
| US9296754B2 (en) | 2013-03-15 | 2016-03-29 | Novartis Ag | Compounds and compositions for the treatment of parasitic diseases |
| WO2014151729A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-25 | Irm Llc | Compounds and compositions for the treatment of parasitic diseases |
| GB201311891D0 (en) | 2013-07-03 | 2013-08-14 | Glaxosmithkline Ip Dev Ltd | Novel compound |
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| JP6182668B2 (ja) * | 2013-09-26 | 2017-08-16 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 画像化ツールとしてのイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−７−アミン |
| CN105814023A (zh) * | 2013-10-22 | 2016-07-27 | 克林诺株式会社 | tau成像探针 |
| CN103614135B (zh) * | 2013-11-29 | 2015-07-01 | 安徽大学 | 一种双光子荧光探针及其制备方法和用途 |
| LT3083627T (lt) | 2013-12-19 | 2018-12-27 | Novartis Ag | [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidino dariniai kaip protozoano proteasomos inhibitoriai, skirti parazitinių ligų tokių kaip leišmaniozė, gydymui |
| WO2015110263A1 (en) * | 2014-01-21 | 2015-07-30 | Ac Immune Sa | Carbazole and carboline compounds for use in the diagnosis, treatment, alleviation or prevention of disorders associated with amyloid or amyolid-like proteins |
| MX2020010847A (es) * | 2014-05-13 | 2021-07-16 | Hoffmann La Roche | Compuestos heterocíclicos deuterados y su uso como agentes formadores de imágenes. |
| AU2015308709B2 (en) * | 2014-08-29 | 2020-01-02 | Chdi Foundation, Inc. | Probes for imaging huntingtin protein |
| DK3186233T3 (da) | 2014-08-29 | 2021-11-22 | Chdi Foundation Inc | Prober til billeddannelse af huntingtin-protein |
| MX2017011434A (es) | 2015-03-18 | 2018-01-25 | Squibb Bristol Myers Co | Compuestos heterociclicos triciclicos sustituidos. |
| JP6793658B2 (ja) | 2015-03-18 | 2020-12-02 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ | Ｔｎｆ阻害剤として有用な三環式ヘテロ環式化合物 |
| CN107567450B (zh) | 2015-03-18 | 2020-03-13 | 百时美施贵宝公司 | 用作tnf抑制剂的杂环化合物 |
| WO2016168633A1 (en) | 2015-04-17 | 2016-10-20 | Abbvie Inc. | Indazolones as modulators of tnf signaling |
| WO2016168638A1 (en) | 2015-04-17 | 2016-10-20 | Abbvie Inc. | Indazolones as modulators of tnf signaling |
| AR104291A1 (es) | 2015-04-17 | 2017-07-12 | Abbvie Inc | Moduladores tricíclicos de la señalización por tnf |
| US20180264146A1 (en) * | 2015-07-15 | 2018-09-20 | Ac Immune S.A. | Novel imaging compounds |
| EP3118202A1 (en) | 2015-07-15 | 2017-01-18 | AC Immune S.A. | Dihydropyridopyrrole derivatives as tau-pet-ligands |
| EP3331889B1 (en) | 2015-08-03 | 2020-09-23 | Bristol-Myers Squibb Company | Cyclic compounds useful as modulators of tnf alpha |
| WO2018015546A1 (en) | 2016-07-22 | 2018-01-25 | Ac Immune S.A. | Compounds for imaging tau protein aggregates |
| SG11201811311VA (en) | 2016-07-22 | 2019-01-30 | Ac Immune Sa | Compounds for imaging tau protein aggregates |
| FR3054445B1 (fr) * | 2016-07-26 | 2019-07-05 | Laboratoires Cyclopharma | Synthese d'une composition d'agent radioactif |
| US10695450B2 (en) | 2016-07-26 | 2020-06-30 | Laboratoires Cyclopharma | Synthesis of a radioactive agent composition |
| CA3035624A1 (en) | 2016-09-09 | 2018-03-15 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Process for preparation of 2-(6-nitropyridin-3-yl)-9h-dipyrido[2,3-b;3',4'-d]pyrrole |
| US10906900B2 (en) | 2016-09-26 | 2021-02-02 | Centre National De La Recherche Scientifique | Compounds for using in imaging and particularly for the diagnosis of neurodegenerative diseases |
| FR3056592B1 (fr) * | 2016-09-26 | 2018-11-16 | Centre National De La Recherche Scientifique | Composes pour leur utilisation en imagerie et notamment pour le diagnostic de maladies neuro-degeneratives |
| IL304982A (en) * | 2016-11-01 | 2023-10-01 | Arvinas Operations Inc | PROTACS Targeted Tau-Protein and Related Methods of Use |
| JP6955347B2 (ja) * | 2017-02-28 | 2021-10-27 | 日本メジフィジックス株式会社 | フルテメタモルの製造方法 |
| JP7008299B2 (ja) * | 2017-03-10 | 2022-01-25 | 国立大学法人滋賀医科大学 | 神経難病の画像診断薬及び体外診断薬 |
| UY37866A (es) * | 2017-09-07 | 2019-03-29 | Glaxosmithkline Ip Dev Ltd | Nuevos compuestos derivados de benzoimidazol sustituidos que reducen la proteína myc (c-myc) en las células e inhiben la histona acetiltransferasa de p300/cbp. |
| WO2019105915A1 (en) | 2017-11-28 | 2019-06-06 | F. Hoffmann-La Roche Ag | New heterocyclic compounds |
| US11306089B2 (en) | 2018-01-24 | 2022-04-19 | Life Molecular Imaging Limited | Gamma-carboline compounds for the detection of Tau aggregates |
| US20210041447A1 (en) | 2018-01-24 | 2021-02-11 | Ac Immune Sa | Azacarboline compounds for the detection of tau aggregates |
| JP2021512153A (ja) | 2018-01-26 | 2021-05-13 | イエール ユニバーシティ | タンパク質分解のイミド系モジュレーターおよび使用方法 |
| EP3790883A4 (en) * | 2018-05-09 | 2022-08-24 | Aprinoia Therapeutics Limited | HETEROARYL COMPOUNDS AND USES THEREOF |
| EP3999182A1 (en) | 2019-07-17 | 2022-05-25 | Arvinas Operations, Inc. | Tau-protein targeting compounds and associated methods of use |
| WO2021048241A1 (en) | 2019-09-12 | 2021-03-18 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Radiolabeled compounds |
| JP2023502605A (ja) | 2019-11-13 | 2023-01-25 | アプリノイア セラピューティクス リミテッド | タウタンパク質凝集物を分解する化合物及びその使用 |
| KR20220119094A (ko) | 2019-12-19 | 2022-08-26 | 아비나스 오퍼레이션스, 인코포레이티드 | 안드로겐 수용체의 표적화된 분해를 위한 화합물 및 방법 |
| KR102369838B1 (ko) * | 2020-04-16 | 2022-03-04 | 연세대학교 산학협력단 | 퀴놀린 유도체를 유효성분으로 포함하는 성상교세포증 관련 질환의 병변 경계부 검출용 조영제 조성물 |
| TW202208355A (zh) | 2020-05-04 | 2022-03-01 | 美商安進公司 | 作為骨髓細胞觸發受體2促效劑之雜環化合物及使用方法 |
| CN116322696A (zh) | 2020-05-04 | 2023-06-23 | 安进公司 | 作为髓样细胞上表达的触发受体2激动剂的杂环化合物和使用方法 |
| US11753413B2 (en) | 2020-06-19 | 2023-09-12 | Incyte Corporation | Substituted pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazine compounds as JAK2 V617F inhibitors |
| WO2021257857A1 (en) | 2020-06-19 | 2021-12-23 | Incyte Corporation | Naphthyridinone compounds as jak2 v617f inhibitors |
| AU2021300429A1 (en) | 2020-07-02 | 2023-02-16 | Incyte Corporation | Tricyclic urea compounds as JAK2 V617F inhibitors |
| WO2022006456A1 (en) | 2020-07-02 | 2022-01-06 | Incyte Corporation | Tricyclic pyridone compounds as jak2 v617f inhibitors |
| US11661422B2 (en) | 2020-08-27 | 2023-05-30 | Incyte Corporation | Tricyclic urea compounds as JAK2 V617F inhibitors |
| US11919908B2 (en) | 2020-12-21 | 2024-03-05 | Incyte Corporation | Substituted pyrrolo[2,3-d]pyrimidine compounds as JAK2 V617F inhibitors |
| TW202302589A (zh) | 2021-02-25 | 2023-01-16 | 美商英塞特公司 | 作為ｊａｋ２ ｖ６１７ｆ抑制劑之螺環內醯胺 |
| WO2023078252A1 (en) | 2021-11-02 | 2023-05-11 | Flare Therapeutics Inc. | Pparg inverse agonists and uses thereof |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008132454A1 (en) * | 2007-04-26 | 2008-11-06 | Ge Healthcare Limited | Carbolines and their use as imaging agents |
| WO2009102498A1 (en) * | 2008-02-14 | 2009-08-20 | Siemens Medical Solutions Usa, Inc. | Novel imaging agents for detecting neurological dysfunction |
| WO2010011964A2 (en) * | 2008-07-24 | 2010-01-28 | Siemens Medical Solutions Usa, Inc. | Imaging agents useful for identifying ad pathology |
| WO2010111303A2 (en) * | 2009-03-23 | 2010-09-30 | Siemens Medical Solutions Usa, Inc. | Imaging agents for detecting neurological disorders |
Family Cites Families (34)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1994014477A1 (en) | 1992-12-21 | 1994-07-07 | Mallinckrodt Medical, Inc. | Polyhydric phenol compounds |
| ATE186551T1 (de) | 1993-09-17 | 1999-11-15 | Smithkline Beecham Corp | Medikamente bindendes protein |
| CA2234633A1 (en) | 1995-10-17 | 1997-04-24 | G.D. Searle & Co. | Method of detecting cyclooxygenase-2 |
| JPH09165378A (ja) | 1995-12-15 | 1997-06-24 | Seitai Kinou Kenkyusho:Kk | Ｎ１−［１８ｆ］フルオロベンジル複素環化合物およびそれらの製造法 |
| JP2001048786A (ja) | 1999-08-05 | 2001-02-20 | Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd | 三環式ヘテロアリール誘導体 |
| US6562319B2 (en) | 2001-03-12 | 2003-05-13 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem | Radiolabeled irreversible inhibitors of epidermal growth factor receptor tyrosine kinase and their use in radioimaging and radiotherapy |
| ES2274973T3 (es) | 2001-04-23 | 2007-06-01 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Inhibidores de la agregacion de placas amiloides y agentes de obtencion de imagenes diagnosticas. |
| AU2002323417B2 (en) | 2001-08-27 | 2008-05-15 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Stilbene derivatives and their use for binding and imaging amyloid plaques |
| WO2004038374A2 (en) | 2002-10-24 | 2004-05-06 | Merck & Co., Inc. | Alkyne derivatives as tracers for metabotropic glutamate receptor binding |
| AU2003285963A1 (en) | 2002-11-11 | 2004-06-03 | Austria Wirtschaftsservice Gesellschaft M.B.H. | Fluorquinolines labelled with fluorine-18 |
| GB0229686D0 (en) | 2002-12-20 | 2003-01-29 | Amersham Plc | Solid-phase fluorination of benzothiazoles |
| EP1610781A1 (en) | 2003-03-27 | 2006-01-04 | Boehringer Ingelheim International GmbH | Antiviral combination of tipranavir and a further antiretroviral compound |
| MXPA06001742A (es) | 2003-08-13 | 2006-08-11 | Bf Res Inst Inc | Sondas para enfermedades en las cuales se acumula amiloide, agentes para tincion del amiloide, farmacos para tratamiento y profilaxis de enfermedades con amiloide acumulado, y sondas para diagnostico de ovillos neurofibrilares y agentes para tincion |
| JP2006100537A (ja) | 2004-09-29 | 2006-04-13 | Konica Minolta Holdings Inc | 有機エレクトロルミネッセンス素子、照明装置及び表示装置 |
| US20060110787A1 (en) | 2004-11-19 | 2006-05-25 | The Board Trustees Of The University Of Arkansas | Use of fluorine-18-labeled fluoroquinolone antibiotics for diagnosing and monitoring bacterial infection |
| JP4000353B2 (ja) | 2004-11-26 | 2007-10-31 | 国立大学法人 長崎大学 | アミロイド関連疾患診断用組成物 |
| JP4790012B2 (ja) | 2005-04-27 | 2011-10-12 | シーメンス メディカル ソリューションズ ユーエスエー インコーポレイテッド | 高親和性の分子イメージングプローブをスクリーニングするためのインサイチュクリックケミストリー法 |
| US8597614B2 (en) | 2005-08-03 | 2013-12-03 | Centre For Addiction And Mental Health | Diagnosis and treatment of mood disorders |
| GB0523506D0 (en) | 2005-11-18 | 2005-12-28 | Hammersmith Imanet Ltd | Novel in vivo imaging compounds |
| JP4738419B2 (ja) | 2005-11-30 | 2011-08-03 | 富士フイルムＲｉファーマ株式会社 | アミロイドの凝集及び／又は沈着に起因する疾患の診断薬及び治療薬 |
| AR059356A1 (es) | 2006-02-14 | 2008-03-26 | Astrazeneca Ab | Nuevos radioligandos |
| JP2007223952A (ja) | 2006-02-23 | 2007-09-06 | Tohoku Univ | アミロイドβ蛋白が蓄積する疾患の画像診断プローブ |
| EP2023919A4 (en) | 2006-05-08 | 2010-12-22 | Molecular Neuroimaging Llc | COMPOUNDS AND AMYLOID PROBES FOR THERAPY AND IMAGING USES |
| WO2008027162A2 (en) | 2006-08-28 | 2008-03-06 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | 129xe biosensors and their use |
| US7678819B2 (en) | 2006-12-07 | 2010-03-16 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Acetylene derivatives and their use for binding and imaging amyloid plaques |
| EP1944281A1 (en) | 2007-01-09 | 2008-07-16 | Technische Universität München | 18F-labeled compounds, method for the preparation and use thereof |
| BRPI0702640A (pt) | 2007-01-10 | 2008-08-26 | Comissao Nac Energia Nuclear | processo de radiomarcação de flavonóides e sua aplicação em diagnóstico in vivo de disfunções cerebrais relacionadas aos sìtios receptores benzodiazepìnicos |
| US20100215579A1 (en) | 2007-04-10 | 2010-08-26 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Phen-naphthalene and phen-quinoline derivatives and their use for binding and imaging amyloid plaques |
| US20110158907A1 (en) | 2007-04-19 | 2011-06-30 | The Trustees Of The Univeristy Of Pennsylvania | Diphenyl-heteroaryl derivatives and their use for binding and imaging amyloid plaques |
| US8942164B2 (en) | 2007-10-22 | 2015-01-27 | Texas Instruments Incorporated | Differential CQI for OFDMA systems |
| US20100272642A1 (en) | 2007-07-04 | 2010-10-28 | Tohoku University | Pet probe having an alkoxy group substituted by fluorine and hydroxy group |
| WO2009045535A2 (en) | 2007-10-04 | 2009-04-09 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Fluorine-18 derivative of dasatinib and uses thereof |
| JP2012051804A (ja) | 2008-12-26 | 2012-03-15 | Kyoto Univ | Ｅｇ５阻害剤 |
| EP2218464A1 (en) | 2009-02-11 | 2010-08-18 | Technische Universität München | Compounds for non-invasive measurement of aggregates of amyloid peptides |
-
2011
- 2011-02-25 US US13/035,405 patent/US8691187B2/en active Active
- 2011-03-22 KR KR1020127027668A patent/KR101447795B1/ko active IP Right Grant
- 2011-03-22 CA CA2794004A patent/CA2794004C/en active Active
- 2011-03-22 JP JP2013501382A patent/JP5684893B2/ja active Active
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- 2011-03-22 WO PCT/US2011/029368 patent/WO2011119565A1/en active Application Filing
- 2011-03-22 CN CN201180025561.1A patent/CN102985411B/zh active Active
- 2011-03-22 EP EP11711420.7A patent/EP2550255B1/en active Active
-
2013
- 2013-09-04 HK HK13110300.9A patent/HK1183021A1/zh unknown
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008132454A1 (en) * | 2007-04-26 | 2008-11-06 | Ge Healthcare Limited | Carbolines and their use as imaging agents |
| WO2009102498A1 (en) * | 2008-02-14 | 2009-08-20 | Siemens Medical Solutions Usa, Inc. | Novel imaging agents for detecting neurological dysfunction |
| WO2010011964A2 (en) * | 2008-07-24 | 2010-01-28 | Siemens Medical Solutions Usa, Inc. | Imaging agents useful for identifying ad pathology |
| WO2010111303A2 (en) * | 2009-03-23 | 2010-09-30 | Siemens Medical Solutions Usa, Inc. | Imaging agents for detecting neurological disorders |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| RICHARD J. SUNDBERG等: "Synthesis of Pyrido[1,2-α]benzimidazoles by Cyclizative Condensation of 2-Halopyridines and 1,2-Benzenediamines. Scope and Mechanism of the Reaction", 《JOURNAL OF HETEROCYCLIC CHEMISTRY》 * |
Cited By (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103242229A (zh) * | 2013-04-10 | 2013-08-14 | 常熟华益化工有限公司 | 一种用于神经退行性疾病领域的pet显像剂thk523前体的合成方法 |
| CN105229009B (zh) * | 2013-05-23 | 2017-09-29 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 作为成像剂的2‑苯基咪唑并[1,2‑a]嘧啶 |
| CN105229009A (zh) * | 2013-05-23 | 2016-01-06 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 作为成像剂的2-苯基咪唑并[1,2-a]嘧啶 |
| TWI513698B (zh) * | 2013-10-08 | 2015-12-21 | Hoffmann La Roche | 做為ｔａｕ－ｐｅｔ－配位體之二氮雜咔唑衍生物 |
| CN105358558A (zh) * | 2013-10-08 | 2016-02-24 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 作为tau-pet-配体的二氮杂咔唑衍生物 |
| AU2014333996B2 (en) * | 2013-10-08 | 2018-03-15 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Diazacarbazole derivatives as tau-pet-ligands |
| CN105358558B (zh) * | 2013-10-08 | 2017-09-26 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 作为tau‑pet‑配体的二氮杂咔唑衍生物 |
| CN107207499A (zh) * | 2015-03-04 | 2017-09-26 | 国立大学法人京都大学 | 经放射性碘标记的吡啶并[1,2‑a]苯并咪唑衍生物化合物 |
| CN107108616A (zh) * | 2015-08-19 | 2017-08-29 | 国立大学法人京都大学 | 经放射性卤素标记的吡啶并[1,2‑a]苯并咪唑衍生物化合物 |
| CN108290883A (zh) * | 2015-11-13 | 2018-07-17 | 伊莱利利公司 | 用于tau成像的氮杂环丁烷衍生物 |
| CN108290883B (zh) * | 2015-11-13 | 2021-02-09 | 伊莱利利公司 | 用于tau成像的氮杂环丁烷衍生物 |
| WO2017211220A1 (zh) * | 2016-06-07 | 2017-12-14 | 四川大学 | 用于荧光标记β-淀粉样斑块和/或神经纤维缠结的化合物、制备方法和应用以及一种药物组合物 |
| CN106008374A (zh) * | 2016-06-07 | 2016-10-12 | 四川大学 | 吡嗪类化合物及其在医药上的用途 |
| CN108047145A (zh) * | 2017-11-17 | 2018-05-18 | 北京师范大学 | 与Tau蛋白具有亲和力的2-芳基喹喔啉类化合物及其制备方法与应用 |
| CN108047145B (zh) * | 2017-11-17 | 2020-12-15 | 北京师范大学 | 与Tau蛋白具有亲和力的2-芳基喹喔啉类化合物及其制备方法与应用 |
| CN114423763A (zh) * | 2019-05-09 | 2022-04-29 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 咪唑并[1,2-a]嘧啶的区域选择性合成 |
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| WO2020239046A1 (zh) * | 2019-05-30 | 2020-12-03 | 四川大学华西医院 | 一种喹喔啉衍生物及其制备方法和用途 |
| CN112525868A (zh) * | 2019-09-19 | 2021-03-19 | 吉林大学 | 喹哪啶红及其衍生物在制备检测淀粉样纤维的试剂盒中的应用 |
| CN112525868B (zh) * | 2019-09-19 | 2022-04-22 | 吉林大学 | 喹哪啶红及其衍生物在制备检测淀粉样纤维的试剂盒中的应用 |
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
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