CN102973541A - 一种l-瓜氨酸在制备抗胃溃疡药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种L-瓜氨酸的新用途，尤其是涉及一种L-瓜氨酸在制备抗胃溃疡药物中的应用，属药物学技术领域。本发明通过建立大鼠实验性胃溃疡模型，分别研究L-瓜氨酸对由无水乙醇、冰醋酸及阿司匹林所致大鼠胃溃疡的保护作用。将L-瓜氨酸分别与有效量的常规抗胃溃疡药物西咪替丁、雷尼替丁、硫糖铝组成药物组合物，研究对上述三种模型所致大鼠胃溃疡的保护作用，发现其效果更加显著。另外将L-瓜氨酸与有效量的常规抗胃溃疡药物组成的药物组合物为活性成分，加入适当的辅料，制成药学上可接受的剂型，包括片剂、颗粒剂、胶囊、口服液、缓释制剂和纳米制剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种L-瓜氨酸的新用途，尤其是涉及一种L-瓜氨酸在制备抗胃溃疡药物中的应用，属药物学技术领域。
背景技术
胃溃疡是一种常见病，约有10％的人口在其一生中患过此病。胃溃疡是一种多因素疾病，病因复杂，生活中造成胃溃疡的真正原因尚未明确。随着我国人民生活水平的提高和人均寿命的延长，人们对胃溃疡的预防及治疗意识不断增强。因此，胃溃疡正在成为当今全世界医药界的重要研究课题之一。胃溃疡的西医治疗，主要为对症治疗为主，多采用胃肠解痉药物，其效果虽然迅速和确实，但也给患者带来较多的不良反应和副作用，同时也只能治标不治本，因此，选择更为有效的抗胃溃疡药物显得尤为重要。在日常生活中导致胃溃疡发生的因素多种多样，常见的因素有过度饮酒，胃酸分泌过多以及非甾体类抗炎药的服用等。导致胃溃疡发生的机制多重而复杂，其中氧自由基引起的氧化损伤以及白细胞的浸润是导致胃溃疡发生的两个主要机制[Dilek B，Süleyman H，
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L-瓜氨酸最早是从西瓜中提取而来的，具有提高人体免疫力，维护关节运动的机能，维持正常的血糖、胆固醇水平，清除氧自由基等作用。近年来的研究显示，L-瓜氨酸具有保护心肌细胞、降血脂、降血压、抗脂质过氧化等多种药理作用。但有关L-瓜氨酸的抗胃溃疡作用以及L-瓜氨酸与常规抗胃溃疡药物组成药物组合物尚未见报道。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处，提供一种L-瓜氨酸的新用途，即L-瓜氨酸作为制备抗胃溃疡药物中的应用。本发明通过建立大鼠实验性胃溃疡模型，分别研究L-瓜氨酸对由无水乙醇、冰醋酸及阿司匹林所致大鼠胃溃疡的保护作用。将大鼠处死取胃计数胃黏膜的损伤指数；生物化学法检测胃黏膜的生化指标。另外将L-瓜氨酸分别与有效量的常规抗胃溃疡药物西咪替丁、雷尼替丁、硫糖铝组成药物组合物，研究对上述三种模型所致大鼠胃溃疡的保护作用是否更加显著，计算胃粘膜损伤指数。
L-瓜氨酸的结构如下：
根据本发明可以将治疗有效量的L-瓜氨酸和药学上允许的任意一种辅料制成药物制剂，或以L-瓜氨酸与有效量的常规抗胃溃疡药物组成的药物组合物为活性成分，加入适当的辅料，制成药学上可接受的剂型，包括片剂、颗粒剂、胶囊、口服液、缓释制剂和纳米制剂。
本发明是以如下技术方案实现的：一种L-瓜氨酸在制备抗胃溃疡药物中的应用，其特征是：L-瓜氨酸或L-瓜氨酸与常规抗胃溃疡药物组成的药物组合物在抗胃溃疡中的应用，该应用既包含预防作用，也包含治疗作用。
所述的L-瓜氨酸与常规抗胃溃疡药物组成的药物组合物，其中常规抗胃溃疡药物包括但不限于西咪替丁、雷尼替丁、硫糖铝。
所述的常规抗胃溃疡的药物是指西咪替丁，在其与L-瓜氨酸组成的药物组合物中L-瓜氨酸与西咪替丁的重量比为0.1～5∶1。
所述的常规抗胃溃疡的药物是指雷尼替丁，在其与L-瓜氨酸组成的药物组合物中L-瓜氨酸与雷尼替丁的重量比为0.1～5∶1。
所述的常规抗胃溃疡的药物是指硫糖铝，在其与L-瓜氨酸组成的药物组合物中L-瓜氨酸与硫糖铝的重量比为0.1～2∶1。
以L-瓜氨酸或L-瓜氨酸与常规抗胃溃疡药物组成的药物组合物为活性成分，加入辅料，制成药学上可接受的剂型，包括片剂、颗粒剂、胶囊、口服液、缓释制剂和纳米制剂。
本发明的有益效果是：
(1)本发明对已知L-瓜氨酸发现了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域；
(2)本发明L-瓜氨酸的药理作用好，治疗效果强，预示着有良好的药用前景；
(3)本发明的L-瓜氨酸对无水乙醇型胃溃疡、冰醋酸型胃溃疡及阿司匹林型胃溃疡均具有显著的抗胃溃疡的作用；
(4)L-瓜氨酸具有显著减轻胃粘膜损伤面积的作用，且具有明显的剂量相关性；
(5)L-瓜氨酸具有维持胃溃疡发生期胃粘膜组织中SOD和GPX的活力，显著升高GSH含量，减少MDA含量，具有显著的抗氧化作用；
(6)L-瓜氨酸可显著降低溃疡发生期胃粘膜组织中MPO的活性，具有显著的抑制白细胞浸润的作用；
(7)L-瓜氨酸分别与有效量的常规抗胃溃疡药物西咪替丁、雷尼替丁、硫糖铝组成的药物组合物，其药理作用更加突出，治疗效果更加明显。
具体实施方式
实施例1、L-瓜氨酸对大鼠无水乙醇型胃溃疡的预防作用
1材料和方法
1.1实验动物SD品系大鼠8周龄，雄性，体重180～200g，由徐州医学院实验动物中心提供。合格证号：SCXK(苏)2003-0003。实验前24h禁食，自由饮水，室温(23±2)℃。
1.2药品与试剂L-瓜氨酸购自宁波市镇海海德生化科技有限公司，西咪替丁为山东方明药业股份有限公司生产，生化试剂盒购自南京建成生物工程有限公司。
1.3方法
1.3.1造模与实验治疗
将48只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、西咪替丁组(240mg/kg)、L-瓜氨酸低、中、高剂量(100，300，600mg/kg)组，每组随机选取8只。正常对照组与模型组给予生理盐水，其余各组连续灌胃给药，均灌胃5天，每日一次，第四次给药后禁食24h，自由饮水，末次给药1h后除正常对照组外其余各组均灌胃给予无水乙醇，0.8ml/只，1h后将其处死，剖腹取胃，肉眼观察胃粘膜的损伤程度，计算溃疡指数并计算溃疡抑制率。
计算溃疡指数和溃疡抑制率(愈合率)，参照文献[Zhang JF，Zhang YM，YanCD，et al.Neuroregulative mechanism of hypothalamic nucleus on gastricischemia-reperfusion injury in rats[J].Life Science 2002；71(13)：1501-1510.]。胃上皮的点状糜烂、溃疡和出血灶的长度累积计分：正常为0分；损伤≤1mm计1分；＞1mm并≤2mm计2分，＞2mm并≤3mm计3分，余类推。损伤宽度超过1mm时分数加倍。每组大鼠损伤分数的平均值为溃疡指数。溃疡抑制率＝(平均模型组溃疡指数-平均实验组溃疡指数)/平均模型组溃疡指数。
1.3.2指标测定
将取下的胃粘膜进行组织匀浆，离心取上清液，分别检测SOD和GPX的活力，检测GSH和MDA的含量，检测L-瓜氨酸的抗氧化性；取上清检测MPO的活性，检测L-瓜氨酸是否具有抗白细胞浸润的作用。
1.4统计学处理所测结果用
表示，组间采用单因素方差分析进行统计学分析。
2结果
2.1L-瓜氨酸对大鼠无水乙醇型胃溃疡的预防作用
模型组溃疡指数较正常对照组明显升高，且具有非常显著性差异(P＜0.01)，表明造模成功。L-瓜氨酸低、中、高剂量组与模型组相比溃疡指数都有较大幅度的降低，且均具有显著性差异(P＜0.01)。其中L-瓜氨酸高剂量组与阳性药对照组差别不大，两组间没有显著性差异(见表1)。
表1L-瓜氨酸对大鼠无水乙醇型胃溃疡的预防作用(
n＝8)
(＊和模型组相比，P＜0.01；▲与低剂量组相比，P＜0.01。)
2.2L-瓜氨酸对大鼠无水乙醇型胃溃疡生化指标的影响
对照组中SOD、GPX的活性下降，GSH的含量降低，MPO的活性升高，MDA的含量升高。而给予L-瓜氨酸可以减轻上述趋势，且L-瓜氨酸低、中、高剂量组与模型组相比均有统计学意义(P＜0.01)，中、高剂量组与低剂量组相比具有统计学意义(P＜0.01)，而L-瓜氨酸高剂量组与阳性药对照组相比没有统计学意义(见表2)。
表2L-瓜氨酸对大鼠无水乙醇型胃溃疡生化指标的影响(
n＝8)
(＊和模型组相比，P＜0.01。)
实施例2、L-瓜氨酸对大鼠冰醋酸型胃溃疡的治疗作用
1材料和方法
1.1实验动物、药品与试剂同实施例1。
1.2实验方法
1.2.1造模与实验治疗
取SD大鼠48只，雄性，体重180～200g，禁食24h，自由饮水，3％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，打开腹腔，将胃轻轻拉出，以内径为4mm的玻璃圆管按在胃前臂胃小弯角切迹下方约5mm处的浆膜面上，向玻璃管内注入100％冰醋酸0.1ml，持续1min，用细棉签将玻管内冰醋酸吸干，移开玻管，以0.9％氯化钠溶液棉签轻轻抹洗2次，然后以大网膜覆盖乙酸涂抹面，将胃放入腹内，缝合腹壁。假手术对照组开腹后仅将胃轻轻拉出1min。随机分为六组，分别为假手术组，模型组，L-瓜氨酸低、中、高剂量(100，300，600mg/kg)组，西咪替丁组(240mg/kg)。每组随机选取8只。假手术组和模型组给予生理盐水，其余各组连续灌胃给药7，于第7天给药后2h(禁食不禁水后12h)，腹主动脉取血后将大鼠处死，取出胃，沿胃大弯将胃剪开，用冰生理盐水冲洗干净，肉眼观察胃粘膜的损伤程度，计算溃疡指数并计算溃疡抑制率。计算溃疡指数和溃疡抑制率的方法同实施例1。
1.2.2生化指标的检测同实施例1
1.3统计学处理同实施例1
2结果
2.1L-瓜氨酸对大鼠冰醋酸型胃溃疡的治疗作用
模型组，L-瓜氨酸低、中、高剂量组以及西咪替丁阳性药对照组的溃疡指数较假手术组均明显升高，且皆具有非常显著性差异(P＜0.01)，表明造模成功。与模型组相比L-瓜氨酸低、中、高剂量组的溃疡指数都有较大幅度的降低，且皆具有非常显著性差异(P＜0.01)。L-瓜氨酸中、高剂量组较低剂量组均有较大幅度的降低，统计学意义显著。L-瓜氨酸高剂量组与阳性药对照组差别不大，两组间没有显著性差异(见表3)。
表3L-瓜氨酸对大鼠冰醋酸型胃溃疡的治疗作用(
n＝8)
(＊和模型组相比，P＜0.01▲与低剂量组相比，P＜0.01。)
2.2L-瓜氨酸对大鼠冰醋酸型胃溃疡生化指标的影响
对照组中SOD，GPX的活性下降，GSH的含量降低，MPO的活性升高，MDA的含量升高。给予L-瓜氨酸可以减轻上述趋势，L-瓜氨酸低剂量组与模型组相比无统计学意义，L-瓜氨酸中、高剂量组与模型组相比有统计学意义(P＜0.01)，而L-瓜氨酸高剂量组与阳性药对照组相比没有统计学意义。(见表4)
表4L-瓜氨酸对大鼠冰醋酸型胃溃疡生化指标的影响(
n＝8)
(＊与模型组比较，P＜0.01。)
实施例3、L-瓜氨酸对大鼠阿司匹林型胃溃疡的治疗作用
1材料和方法
1.1实验动物、药品与试剂同实施例1
1.2实验方法
1.2.1造模与实验治疗
取健康SD大鼠48只，雄性，随机均分为正常对照组、模型组、西咪替丁组(240mg/kg)、L-瓜氨酸低、中、高剂量(100，300，600mg/kg)组，每组随机选取8只。正常对照组只给予生理盐水不手术，其余各组灌胃给予阿司匹林(300mg/kg)一次，而后分别给予药物治疗，模型组给予生理盐水，连续灌胃给药5d，每日一次，给药完成后的第一天，腹主动脉取血后将大鼠处死，取出胃，沿胃大弯将胃剪开，用冰生理盐水冲洗干净，肉眼观察胃部胃粘膜的损伤程度，计算溃疡指数并计算溃疡抑制率。计算溃疡指数和溃疡抑制率的方法同实施例1。
1.2.2生化指标的检测同实施例1
1.2.3统计学处理同实施例1
2结果
2.1L-瓜氨酸对大鼠阿司匹林型胃溃疡的治疗作用
模型组，L-瓜氨酸低、中、高剂量组以及西咪替丁阳性药对照组的溃疡指数较正常对照组均明显升高，且皆具有非常显著性差异(P＜0.01)，表明造模成功。L-瓜氨酸低剂量组与模型组相比基本相近；而中、高剂量组的溃疡指数较模型组都有较大幅度的降低，在两组之间有非常显著性差异(P＜0.01)。其中L-瓜氨酸高剂量组与阳性药对照组差别不大，两组间没有显著性差异(见表5)。
表5L-瓜氨酸对大鼠阿斯匹林型胃溃疡的治疗作用(x±s，n＝8)
(＊和模型组相比，P＜0.01；▲与低剂量组相比，P＜0.01。)
2.2L-瓜氨酸对大鼠阿司匹林型胃溃疡生化指标的影响
对照组中SOD，GPX的活性下降，GSH的含量降低，MPO的活性升高，MDA的含量升高。而给予L-瓜氨酸可以减轻上述趋势，且随着L-瓜氨酸剂量的增加保护作用愈加明显。L-瓜氨酸低、中、高剂量组与模型组相比有统计学意义(P＜0.01)，而L-瓜氨酸高剂量组与阳性药对照组相比没有统计学意义。(见表6)
表6L-瓜氨酸对大鼠阿司匹林型胃溃疡生化指标的影响(
n＝8)
(＊和模型组相比，P＜0.01；▲与低剂量组相比，P＜0.01。)
实施例4、L-瓜氨酸与抗胃溃疡药物的药物组合物对大鼠无水乙醇型胃溃疡的预防作用
1材料和方法
1.1实验动物同实施例1
1.2药品与试剂L-瓜氨酸购自宁波市镇海海德生化科技有限公司，西咪替丁为山东方明药业股份有限公司生产，雷尼替丁为广州白云山制药厂生产，硫糖铝为南京制药厂生产。
1.3方法
1.3.1造模与实验治疗
将64只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、西咪替丁组(240mg/kg)、L-瓜氨酸(300mg/kg)+西咪替丁(240mg/kg)组、雷尼替丁组(300mg/kg)、L-瓜氨酸(300mg/kg)+雷尼替丁组(300mg/kg)、硫糖铝组(600mg/kg)、L-瓜氨酸(300mg/kg)+硫糖铝组(300mg/kg)，每组随机选取8只。其余操作步骤同实施例1。
1.4统计学处理所测结果用表示，组间采用单因素方差分析进行统计学分析。
2结果
2.1L-瓜氨酸与抗胃溃疡药物的药物组合物对大鼠无水乙醇型胃溃疡的预防作用
在无水乙醇型胃溃疡模型中，模型组、西咪替丁组、L-瓜氨酸+西咪替丁组、雷尼替丁组、L-瓜氨酸+雷尼替丁组、硫糖铝组、L-瓜氨酸+硫糖铝组较正常对照组溃疡指数都有明显的升高。单独使用西咪替丁、雷尼替丁、硫糖铝时，与模型组相比溃疡指数都有较大幅度的降低。当西咪替丁、雷尼替丁、硫糖铝分别与L-瓜氨酸联合使用时，较其单独使用时溃疡指数都有显著降低。这表明L-瓜氨酸与有效量的常规抗胃溃疡药物组成的药物组合物，对胃溃疡的治疗效果更加明显(见表7)。
表7L-瓜氨酸与抗胃溃疡药物的组合物对大鼠无水乙醇型胃溃疡的预防作用(
n＝8)
(＊和模型组相比，P＜0.01；▲分别与各药物组合物中的常规抗胃溃疡药物组相比，P＜0.01。)
实施例5、L-瓜氨酸与抗胃溃疡药物的药物组合物对大鼠冰醋酸型胃溃疡的治疗作用
1材料和方法
1.1实验动物、药品与试剂同实施例4。
1.2方法
1.2.1造模与实验治疗
实验分组同实施例4。其余操作步骤同实施例2。
1.3统计学处理所测结果用
表示，组间采用单因素方差分析进行统计学分析。
2结果
2.1L-瓜氨酸与抗胃溃疡药物的药物组合物对大鼠冰醋酸型胃溃疡的治疗作用
在冰醋酸型胃溃疡模型中，模型组、西咪替丁组、L-瓜氨酸+西咪替丁组、雷尼替丁组、L-瓜氨酸+雷尼替丁组、硫糖铝组、L-瓜氨酸+硫糖铝组与正常对照组相比溃疡指数都有明显的升高。单独使用西咪替丁、雷尼替丁、硫糖铝时，与模型组相比溃疡指数都有较大幅度的降低。当西咪替丁、雷尼替丁、硫糖铝分别与L-瓜氨酸组成药物组合物时，较其单独使用时溃疡指数都显著降低。这表明L-瓜氨酸与有效量的常规抗胃溃疡药物组成的药物组合物，对胃溃疡的治疗效果更加明显(见表8)。
表8L-瓜氨酸与抗胃溃疡药物的组合物对大鼠冰醋酸型胃溃疡的治疗作用(
n＝8)
(＊和模型组相比，P＜0.01；▲分别与各药物组合物中的常规抗胃溃疡药物组相比，P＜0.01。)
实施例6、L-瓜氨酸与抗胃溃疡药物的药物组合物对大鼠阿司匹林型胃溃疡的治疗作用
1材料和方法
1.1实验动物、药品与试剂同实施例4。
1.2方法
1.2.1造模与实验治疗
实验分组同实施例4。其余操作步骤同实施例3。
1.3统计学处理所测结果用
表示，组间采用单因素方差分析进行统计学分析。
2结果
2.1L-瓜氨酸与抗胃溃疡药物的药物组合物对大鼠阿司匹林型胃溃疡的治疗作用
在阿司匹林型胃溃疡模型中，各实验组与正常对照组相比溃疡指数都有明显的升高。单独使用西咪替丁、雷尼替丁、硫糖铝时，与模型组相比溃疡指数都有较大幅度的降低。而当西咪替丁、雷尼替丁、硫糖铝分别与L-瓜氨酸组成药物组合物时，较其单独使用时溃疡指数都显著降低。这表明L-瓜氨酸与有效量的常规抗胃溃疡药物组成的药物组合物，对胃溃疡的治疗效果更加明显(见表9)。
表9L-瓜氨酸与抗胃溃疡药物的组合物对大鼠阿司匹林型胃溃疡的治疗作用(
n＝8)
(＊和模型组相比，P＜0.01；▲分别与各药物组合物中的常规抗胃溃疡药物组相比，P＜0.01。)
实施例7、L-瓜氨酸或L-瓜氨酸与抗胃溃疡药物的药物组合物的制剂实施例
1L-瓜氨酸的片剂制备
1.1片剂的原料配比
1.2制粒压片：西咪替丁，淀粉分别过80目筛后混匀，加入15％淀粉浆作粘合剂，搅拌成适度之软材，过18目筛，制成松紧适度的颗粒，60～70℃干燥后整粒，加入硬脂酸镁，经18目筛整粒后充分混匀。测定主药含量，拟定片重，压片即得。
2L-瓜氨酸与西咪替丁组成的药物组合物的片剂制备
2.1片剂的原料配比
2.2制粒压片：取西咪替丁，L-瓜氨酸和淀粉分别过80目筛后混匀，加入15％淀粉浆作粘合剂，搅拌成适度之软材，过18目筛，制成松紧适度的颗粒，60～70℃干燥后整粒，加入硬脂酸镁，经18目筛整粒后充分混匀。测定主药含量，拟定片重，压片即得。
3L-瓜氨酸与雷尼替丁组成的药物组合物的胶囊剂制备
3.1胶囊剂的原料配比
3.2制粒灌装：将150g雷尼替丁与100g L-瓜氨酸过80目筛后与32g淀粉混匀，加入适量的10％的淀粉浆，搅拌成适度之软材，过18目筛，制成松紧适度的颗粒，60～70℃干燥，干粒经20目筛整，填入空胶囊中即得，进行相应的质量检查。
4L-瓜氨酸与硫糖铝组成的药物组合物的颗粒剂制备
4.1颗粒剂的原料配比
4.2制粒灌装：将硫糖铝、L-瓜氨酸和糖粉过80目筛后充分混匀，加入10％的淀粉浆适量，制备软材，过14目尼龙筛制粒，湿颗粒于60℃干燥，干颗粒过14目筛整粒，再过4号筛去细粉，将制得的颗粒进行含量检查与粒度测定等，按剂量装入适宜袋中。
Claims (6)
1.一种L-瓜氨酸在制备抗胃溃疡药物中的应用，其特征是：L-瓜氨酸或L-瓜氨酸与常规抗胃溃疡药物组成的药物组合物在抗胃溃疡中的应用，该应用既包含预防作用，也包含治疗作用。
2.根据权利要求1所述的一种L-瓜氨酸在制备抗胃溃疡药物中的应用，其特征是：所述的L-瓜氨酸与常规抗胃溃疡药物组成的药物组合物，其中常规抗胃溃疡药物包括但不限于西咪替丁、雷尼替丁、硫糖铝。
3.根据权利要求2所述的L-瓜氨酸与常规抗胃溃疡药物组成的药物组合物，其特征是：所述的常规抗胃溃疡的药物是指西咪替丁，在其与L-瓜氨酸组成的药物组合物中L-瓜氨酸与西咪替丁的重量比为0.1～5∶1。
4.根据权利要求2所述的L-瓜氨酸与常规抗胃溃疡药物组成的药物组合物，其特征是：所述的常规抗胃溃疡的药物是指雷尼替丁，在其与L-瓜氨酸组成的药物组合物中L-瓜氨酸与雷尼替丁的重量比为0.1～5∶1。
5.根据权利要求2所述的L-瓜氨酸与常规抗胃溃疡药物组成的药物组合物，其特征是：所述的常规抗胃溃疡的药物是指硫糖铝，在其与L-瓜氨酸组成的药物组合物中L-瓜氨酸与硫糖铝的重量比为0.1～2∶1。
6.根据权利要求1所述的一种L-瓜氨酸在制备抗胃溃疡药物中的应用，其特征是：以L-瓜氨酸或L-瓜氨酸与常规抗胃溃疡药物组成的药物组合物为活性成分，加入辅料，制成药学上可接受的剂型，包括片剂、颗粒剂、胶囊、口服液、缓释制剂和纳米制剂。
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