CN102964378A

CN102964378A - 一种磷脂酰乙醇胺的制备

Info

Publication number: CN102964378A
Application number: CN2012104306498A
Authority: CN
Inventors: 曹亮
Original assignee: Avt(liyang) Medical Science & Technology Co Ltd
Current assignee: Avt(liyang) Medical Science & Technology Co Ltd
Priority date: 2012-11-02
Filing date: 2012-11-02
Publication date: 2013-03-13
Anticipated expiration: 2032-11-02
Also published as: CN102964378B

Abstract

一种脂质体技术中使用的辅料磷脂酰乙醇胺新的制备方法，该制备方法包括以下三个步骤：1)化合物I在三氯化磷/咪唑条件下得到化合物II；2)化合物II与特戊酰氯和乙醇胺反应得到化合物III；3)化合物III在10％过氧化氢条件下得到磷脂酰乙醇胺。该工艺路线简单，所用试剂廉价易得，收率高，操作简单，绿色环保，适合工业化生产。其反应式如下：

，其中，R＝CH₃(CH₂)_n，n＝3-20。

Description

一种磷脂酰乙醇胺的制备

技术领域

本发明涉及化合物制备技术领域，更具体地是指一种磷脂酰乙醇胺新的制备方法。

背景技术

脂质体最初是由英国学者Bangham将磷脂分散在水中进行电镜观察时发现的。磷脂分散在水中形成多层囊泡，每层均为脂质的双分子层，后来将这种具有类似生物膜结构的双分子小囊称为脂质体。1971年英国莱门等人开始将脂质体用于药物载体。从此脂质体作为一种靶向给药系统新剂型，开始引起全世界的关注。

磷脂酰乙醇胺(PE)是一类重要的磷脂类化合物，其应用相对较早的是在食品加工及保健品研究等领域，随着研究的不断进步，特别是高纯度的磷脂酰乙醇胺(PE)的制备方法的完善，磷脂酰乙醇胺(PE)逐渐地被人们应用到药物制剂领域，在如今最活跃的脂质体技术领域，高纯度磷脂酰乙醇胺(PE)不仅是脂质体技术的重要原料之一，而且其衍生物也正在显现出越来越大的学术价值和应用价值。

在(Proc.Natl.Acad.Sci.USA.vol.75.1978.4074-4077)文献中，一种方法是采用三步反应，化合物I先与三氯氧磷反应生成磷酰二氯，然后与乙醇胺反应生成环状物，最后水解开环得到磷脂酰乙醇胺。另一种方法是采用四步反应，也是首先与三氯氧磷反应生成磷酰二氯，随后与乙二醇反应，得到的化合物再与溴化锂反应，生成磷脂酸溴化酯，最后与氨水反应得到磷脂酰乙醇胺。

专利CN101805367中，公开的磷脂酰乙醇胺制备方法中，通过叠氮钠，然后在高压条件下Pd催化还原得到磷脂酰乙醇胺。

上述现有技术都存在以下缺陷：1.使用三氯氧磷，叠氮钠等剧毒品或危险品试剂，原料不容易得到，对环境污染大；2.成本高昂，使用Pd等贵金属做催化剂；3.操作繁琐，副产物多，不利于工业化大生产。

为了克服上述现有技术的缺陷，本发明中提供一种合成磷脂酰乙醇胺的方法，该方法具有该工艺路线简单，所用试剂廉价易得，收率高，操作简单，绿色环保，适合工业化生产等优点。

发明内容

本发明中提供一种合成磷脂酰乙醇胺的方法，其特点是，包括下列步骤：

a)在三氯化磷/咪唑的有机溶剂条件下，在一定反应温度下搅拌，然后加入适量的碱，缓慢滴加化合物I反应，得到化合物II；

b)在反应溶剂中加入化合物II，缓慢加入耦合试剂和乙醇胺反应得到化合物III；

c)将化合物III溶于溶剂中，加入有机酸和低浓度过氧化氢，常温下搅拌，氧化得到目的产物IV；

其反应式如下：

其中，R＝CH₃(CH₂)_n，n＝3-20。

在步骤a中，有机溶剂为甲苯、苯、氯苯、二氯甲烷、DMF、THF、二氧六环、乙腈、丙酮、二甲基乙酰胺、DMSO，其中最优选为甲苯；

反应温度为-30-80℃，其中优选为-5-25℃；

碱为三乙胺、碳酸钾、DIEA、氢氧化钠、碳酸钠、氢氧化钾等有机和无机碱，其中优选为三乙胺、碳酸钾、碳酸钠，最优选为三乙胺；

化合物I、三氯化磷、咪唑用量的摩尔比为1∶0.5-20∶0.5-50，其中优选的化合物I∶三氯化磷∶咪唑用量的摩尔比为1∶2-5∶5-15。

在步骤b中，反应溶剂选自吡啶、NMP、DMF、三乙胺、DMSO、二氯甲烷、氯仿、甲苯、苯、乙腈或乙酸乙酯及其它们的混合物，其中最优选为无水吡啶、DMF、NMP、二氯甲烷及它们的混合物；

反应温度为0-100℃，其中优选为0-30℃；

耦合试剂为EDC.HCl，DCC，DIC，特戊酰氯，化合物V，化合物VI，草酰氯，其中优选为特戊酰氯，化合物V，化合物VI，草酰氯，最为优选为草酰氯；

化合物II、耦合剂、乙醇胺比例为1∶0.5-20∶0.5-20，其中优选为，化合物II∶耦合剂∶乙醇胺为1∶1.5-5∶1.5-5。

在步骤c中，溶剂选自吡啶、NMP、DMF、三乙胺、DMSO、二氯甲烷、THF、氯仿、甲苯、苯、乙腈或乙酸乙酯，其中最优选为二氯甲烷、THF；

低浓度双氧水浓度为1％-30％，优选为5％-15％；

酸选自乙酸，甲酸，丙酸，三氟乙酸，柠檬酸，马来酸，盐酸，硫酸或硝酸，其中优选为三氟乙酸。

本发明与现有技术的区别在于：

1.第一步，采用三氯化磷替代剧毒品三氯氧磷，原料廉价易得；

2.第二步，首次在磷脂合成中，草酰氯作为酰化试剂，DMF/CH₂Cl₂作为溶剂，直接和过量的乙醇胺反应，无需保护，反应彻底，原料无其他副产物，后处理简单；

3.第三步，首次使用双氧水作为磷脂氧化剂替代危险品高氯酸，反应彻底，副产物少，绿色环保。

4.首次使用双氧水为低浓度的双氧水，氧化反应温和，其氧化效果也非常好。本发明的有益效果如下：

(1)、本发明采用化合物I为原料，经过含三步反应得到磷脂酰乙醇胺，合成路线简短，收率高；

(2)、本发明不涉及昂贵试剂、剧毒品、危险品试剂的使用，降低了成本和安全风险；

(3)、本发明的合成方法涉及的操作简便、条件温和，无高温高压条件，易于工业化生产。

(4)、几乎无副产物，绿色环保。

具体实施方式

为了能够更清楚地理解本发明的技术内容，现结合实施例进一步说明如下：

实施例1

二棕榈酰磷脂酰乙醇胺DPPE[R＝CH₃(CH₂)₁₄]的制备

0℃下向122.06g咪唑(1.79mol)的2000ml甲苯溶液中加入PCl₃(0.448mol)的甲苯溶液(61.6g PCl₃，300mL甲苯)，然后加入三乙胺甲苯溶液(200ml三乙胺，500mL甲苯)，反应10分钟。用1小时，缓慢滴加化合物I[R＝CH₃(CH₂)₁₄]85g，TLC检测反应完成，加入水/吡啶淬灭反应，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干母液，干燥得黄色固体90g，直接投下一步。

上步产物溶解于1000ml DMF/CH₂Cl₂(1：1v/v)中，0℃下缓慢滴加55g草酰氯(0.423mol)，反应30min，室温反应4hr。然后加入26.1g乙醇胺(0.423mol)，反应1.5小时，TLC检测反应完成，二氯甲烷萃取，得粗品83g.

上述反应产物，投到200ml的10％双氧水溶液中，20ml三氟乙酸溶液，200ml二氯甲烷的混合溶液中，常温下搅拌反应30分钟。二氯甲烷萃取，硅胶柱层析得产品白色粉末75.0g DPPE。

总收率为71％，HPLC：99.3％，[M+H]+：693.

实施例2

二硬脂酰磷脂酰乙醇胺DSPE(R＝CH₃(CH₂)₁₆)的制备

在15℃下向61.0g咪唑(0.90mol)的1000ml二氯甲烷溶液中加入PCl₃(0.25mol)的二氯甲烷溶液(31.1g PCl₃，150mL二氯甲烷)，然后加入三乙胺的二氯甲烷溶液(100ml三乙胺，250mL甲苯)，反应15分钟。用1小时，缓慢滴加化合物I[R＝R＝CH₃(CH₂)₁₆]44g，TLC检测反应完成，加入水/吡啶淬灭反应，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干母液，干燥得黄色固体47g，直接投下一步。

上步产物溶解于500ml DMF/CH₂Cl₂(1∶1v/v)中，0℃下缓慢滴加30g特戊酰氯(0.21mol)，反应30min，室温反应4hr。然后加入13g乙醇胺(0.21mol)，反应2小时，TLC检测反应完成，二氯甲烷萃取，得粗品45g。

上述反应产物，投到200ml的5％双氧水溶液中，15ml乙酸溶液，100ml二氯甲烷的混合溶液中，常温下搅拌反应40分钟。二氯甲烷萃取，硅胶柱层析得产品白色粉末41.0g。

总收率为77％，HPLC：98％.[M+H]+：749.

实施例3

二油酰磷脂酰乙醇胺DOPE(R＝CH₃(CH)₂(CH₂)₁₃)的制备

制备方法参照【实施例1】，总收率为68％，HPLC：98.9％.[M+H]+：745.2.

实施例4

二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺DMPE(R＝CH₃(CH₂)₁₁)的制备

制备方法参照【实施例1】，总收率为69％，HPLC：99％.[M+H]+：636.7

实施例5

二芥酰磷脂酰乙醇胺DMPE(R＝CH₃(CH₂)₁₂)的制备

制备方法参照【实施例1】，总收率为73％，HPLC：99.1％.[M+H]+：857.3.

实施例6

棕榈酰油酰磷脂酰乙醇胺POPE(R＝CH₃(CH₂)₁₅)的制备

制备方法参照【实施例1】，总收率为71％，HPLC：98.2％.[M+H]+：719.1

需要说明的是，在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，以上所述的是本发明的具体实施例及所运用的技术手段，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改而不背离本发明的精神与范围，这些等价形式同样落在本发明的范围内。

Claims

1.一种合成磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于包括下列步骤：

c)将化合物III溶于溶剂中，加入酸和低浓度过氧化氢，常温下搅拌，氧化得到目的产物IV；

其反应式如下：

，其中，R＝CH₃(CH₂)_n，n＝3-20。

2.如权利要求1所述合成磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于在步骤a中，有机溶剂为甲苯、苯、氯苯、二氯甲烷、DMF、THF、二氧六环、乙腈、丙酮、二甲基乙酰胺、DMSO，其中最优选为甲苯。

3.如权利要求1所述合成磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于在步骤a中，所述低温为-30-80℃，其中优选为-5-25℃。

4.如权利要求1所述合成磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于在步骤a中，所述碱为三乙胺、碳酸钾、DIEA、氢氧化钠、碳酸钠、氢氧化钾等有机和无机碱，其中优选为三乙胺、碳酸钾、碳酸钠，最优选为三乙胺。

5.如权利要求1所述合成磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于在步骤b中，反应溶剂选自吡啶、NMP、DMF、三乙胺、DMSO、二氯甲烷、氯仿、甲苯、苯、乙腈或乙酸乙酯及其它们的混合物，其中最优选为无水吡啶、DMF、NMP、二氯甲烷及它们的混合物。

6.如权利要求1所述合成磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于在步骤b中，所述温度为0-100℃，其中优选为0-30℃。

7.如权利要求1所述合成磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于在步骤b中，耦合试剂为EDC.HCl，DCC，DIC，特戊酰氯，化合物V，化合物VI，草酰氯，其中优选为特戊酰氯，化合物V，化合物VI，草酰氯，最优选为草酰氯，其中所述化合物V和化合物VI分别为

8.如权利要求1所述合成磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于在步骤c中，所述溶剂选自吡啶、NMP、DMF、三乙胺、DMSO、二氯甲烷、THF、氯仿、甲苯、苯、乙腈或乙酸乙酯，其中最优选为二氯甲烷、THF。

9.如权利要求1所述合成磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于在步骤c中，所述低浓度双氧水浓度为1％-30％，优选为5％-15％。

10.如权利要求1所述合成磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于在步骤c中，所述酸选自乙酸，甲酸，丙酸，三氟乙酸，柠檬酸，马来酸，盐酸，硫酸或硝酸，其中优选为三氟乙酸。