CN102898505A - Arpak/咪唑啉/rgd三元缀合物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物及其制备方法和用途。本发明以L-Lys作为连接臂，将1，3-二氧基-2-[(4-氧乙酸)苯基]-4，4，5，5-四甲基咪唑啉、具有溶血栓作用的ARPAK五肽和具有抗血栓作用的RGD四肽连接在一起得到式I所示的集跨血脑屏障、溶血栓和清除NO三种作用于一体的ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物。本发明ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物具有较高的清除NO自由基活性、优异的溶血栓活性和抗血栓活性。体内抗中风活性证明，本发明ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物可以有效保护中风大鼠的神经功能，降低中风大鼠大脑梗死体积，具抗中风活性，可作为治疗脑梗塞的临床药物。
Description
技术领域
本发明涉及三元缀合物，尤其涉及由1-(4-氧乙酰基-苯基)-3，3，4，4-四甲基-咪唑啉、ARPAK五肽和RGD四肽通过L-Lys连接在一起得到的三元缀合物，本发明还涉及该三元缀合物的制备方法，本发明进一步涉及该三元缀合物在清除NO、抗血栓、溶血栓和脑梗塞治疗中的医药用途，属于ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物及其医药用途领域。
背景技术
在全球范围内，血栓性疾病的发病率和死亡率都居首位。冠状动脉血栓，导致心梗。脑血管栓塞，导致脑梗。心梗患者既可以静脉注射溶栓药物，也可以施以搭桥手术。必须指出，给心梗患者静脉注射溶栓药物的正面结果是缺血再灌注。由于缺血再灌注过程中产生大量NO自由基，所以溶栓过程与心肌损伤及患者死亡相联系。这是目前溶栓治疗心梗的严重问题。目前，脑梗治疗面临的问题更复杂。例如现有溶栓药物都不能有效地跨过血脑屏障，以至于静脉注射溶栓药物对脑梗患者的疗效极其有限。又例如目前还没有适宜的手术可以救治脑梗患者。同样，给脑梗患者静脉注射溶栓药物即使有正面结果，缺血再灌注过程中也会产生大量NO自由基，使溶栓过程与脑组织损伤及患者死亡相联系。这是目前溶栓治疗脑梗的严重问题。因此，发明即可有效地跨过血脑屏障，又可有效溶栓，还可有效清除缺血再灌注过程中产生的NO自由基的药物对脑梗治疗至关重要。
发明内容
本发明目的之一是提供ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物；
本发明目的之二是提供一种ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物的制备方法；
本发明目的之三是提供ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物的医药用途。
本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：
一种ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物，其结构式为式I所示：
其中，aa选自丝氨酸、缬氨酸或苯丙氨酸；
R代表精氨酸；G代表甘氨酸；D代表天冬氨酸；K代表赖氨酸；A代表丙氨酸；P代表脯氨酸。
长期的溶栓研究使发明人认识到，1，3-二氧基-2-[(4-氧乙酸)苯基]-4，4，5，5-四甲基咪唑啉不仅可有效地清除缺血再灌注过程中产生的NO自由基，而且有适宜的脂溶性。长期的溶栓研究使发明人进一步认识到，将具有溶栓作用的ARPAK五肽和具有抗栓作用的RGD四肽与1，3-二氧基-2-[(4-氧乙酸)苯基]-4，4，5，5-四甲基咪唑啉组合，可获得集跨血脑屏障、溶栓和清除NO三种作用于一体的脑梗治疗剂。为了实现这种组合，需要一个适宜的连接臂。本发明尝试了数十种连接臂之后，最终发现L-Lys是最好的连接臂。使用L-Lys作为连接臂，可使跨过血脑屏障、溶栓和清除缺血再灌注过程中产生的NO自由基的作用最大化。由此，本发明以L-Lys作为连接臂，将1，3-二氧基-2-[(4-氧乙酸)苯基]-4，4，5，5-四甲基咪唑啉、ARPAK五肽和具有抗栓作用的RGD四肽连接在一起得到式I所示的ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物。
本发明的目的之二是提供一种式I所示的ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物的制备方法，该方法包括：
(1)制备1，3-二氧基-2-(4-氧乙酸基-苯基)-4，4，5，5-四甲基咪唑啉；
(2)制备1，3-二氧基-2-[(4-氧乙酰基-Nω-Boc-Lys)苯基]-4，4，5，5-四甲基咪唑啉；
(3)制备HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl，HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-Obzl或HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-Obzl；
(4)制备Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)；
(5)将Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)连接到1，3-二氧基-2-[(4-氧乙酰基-Nω-Boc-Lys)苯基]-4，4，5，5-四甲基咪唑啉的赖氨酸上得到1，3-二氧基-2-{4-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉；
(6)将HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl，HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-Obzl或HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-Obzl分别与1，3-二氧基-2-{4-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉相缀合分别得到1，3-二氧基-2-{4-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉，1，3-二氧基-2-{4-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys-Arg-(NO2)-Gly-Asp-(OBzl)-Val-OBzl}苯基}-4，4，5，5-四甲基-咪唑啉或1，3-二氧基-2-{4-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉；
(7)将步骤(6)所制备的化合物脱去保护基，制备得到1，3-二氧基-2-{4-氧乙酰基-{Nω-[Ala-Arg-Pro-Ala-Lys]-Lys-Arg-Gly-Asp-Ser}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉，1，3-二氧基-2-{4-氧乙酰基-{Nω-[Ala-Arg-Pro-Ala-Lys]-Lys-Arg-Gly-Asp-Val}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉和1，3-二氧基-2-{4-氧乙酰基-{Nω-[Ala-Arg-Pro-Ala-Lys]-Lys-Arg-Gly-Asp-Phe}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉。
NO清除活性试验表明，本发明ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物具有较高的清除NO自由基活性；体内外溶血栓活性表明，本发明ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物具有优异的溶血栓活性。体内抗血栓活性评价试验说明本发明ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物具有优异的抗血栓活性。体内抗中风活性证明本发明ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物可以有效地保护中风大鼠的神经功能，具有优异的抗中风活性。中风大鼠大脑梗死体积试验表明，本发明ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物可以有效地可以降低中风大鼠大脑梗死体积。
由此，本发明提供了ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物在以下几方面的医药用途：
1、将本发明ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物制备成抗血栓药物；
2、将本发明ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物制备成溶血栓药物；
3、将本发明ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物制备成治疗中风或脑梗的药物；
进一步的，本发明提供了抗血栓药物组合物、溶血栓药物组合物或治疗中风或脑梗的药物组合物，所述药物组合物由有效量的本发明式I化合物与药学上可接受的载体或辅料组成；将有效量的本发明式I化合物与药学上可接受的载体或辅料组合在一起后可得到所述的抗血栓、溶血栓或治疗中风或脑梗的药物组合物。
将本发明式I化合物中加入制备不同剂型时所需的各种辅料和药学上可接受的辅料或载体后，以常规的药物制剂方法将其制备成任何一种临床可接受的适宜制剂，例如，可以是注射制剂(粉针、冻干粉针、水针、输液等)、片剂、口服液、颗粒剂、胶囊剂、软胶囊或滴丸等；其中，所述的辅料可以是抗氧络合剂、填充剂、骨架材料等；所述的药学上可接受的载体是木糖醇、甘露醇、乳糖、果糖、葡聚糖、葡萄糖、聚乙烯吡咯烷酮、低分子右旋糖酐、氯化钠、葡萄糖酸钙或磷酸钙中的一种或几种。
本发明所涉及到的缩略术语：
DCC：1，3-二环己基碳二亚胺
DMF：二甲基甲酰胺
HOBt：1-羟基苯并三唑
TLC∶薄层色谱法
附图说明
图1ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物的结构式。
图2ARPAK/咪唑啉/RGD三元缀合物的合成路线图；(i)Br2，NaOH(6M)；(ii)Zn，NH4Cl；(iii)HOC6H4CHO；(iv)PbO2；(v)BrCH2CO2C2H5，NaH，THF；(vi)NaOH(2M).Ia中aa＝Ser，Ib中aa＝Val，Ic中aa＝Phe。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
实施例1制备2，3-二甲基-2，3-二硝基丁烷
69g(0.78mol)2-硝基丙烷加入130ml NaOH(6N)水溶液中，在冰盐浴搅拌下滴加20ml(0.38mol)Br2，1h内滴加完，然后加入240ml乙醇，90℃回流3h，将反应液乘热倒入800ml冰水中，滤得55g(81％)标题化合物，为无色片状结晶，Mp110-l12℃。
实施例2制备2，3-二甲基-2，3-二羟胺基丁烷
将7g(40mmol)2，3-二甲基-2，3-二硝基丁烷和4g NH4Cl混悬于80ml乙醇水溶液(50％)中，冰浴下搅拌，在3h内加入16g锌粉。锌粉加完后，撤去冰浴，继续室温搅拌反应3h，然后将反应液抽滤。滤饼用乙醇水溶液(50％)反复洗涤，合并滤液及洗涤液，用浓盐酸调节pH＝2，减压蒸至泥浆状。加入适量碳酸钾，拌匀后，使用索氏提取器，氯仿为提取剂，抽提6h，提取液减压浓缩至少量，加入石油醚后析出2.60g(44％)标题化合物，为无色晶体。Mp157-159℃。
实施例3制备1，3-二羟基-2-(4’-羟基苯基)-4，4，5，5-四甲基咪唑烷
1.22g(10mmol)对羟基苯甲醛与1.48g(10mmol)2，3-二甲基-2，3-二羟胺基丁烷溶于10ml甲醇中，室温搅拌8h后，TLC显示原料点消失。抽滤得到1.29g(51％)标题化合物，为无色晶体。EI-MS(m/z)252[M]+.1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)＝1.03(s，6H)，1.05(s，6H)，4.39(s，1H)，6.70(d，J＝6.9Hz，2H)，7.23(d，J＝6.9Hz，2H)，7.63(s，1H)，7.85(s，2H)。
实施例4制备1，3-二羟基-2-(4’-羟基苯基)-4，4，5，5-四甲基咪唑啉
将504mg(2mmol)1，3-二羟基-2-(4’-羟基苯基)-4，4，5，5-四甲基咪唑烷溶解于30ml甲醇中，加入3g PbO2，室温搅拌40min，TLC显示原料点消失。抽滤除去固体，滤液室温下减压蒸干，残留物柱层析纯化(氯仿洗脱)，260mg(52％)标题化合物，为兰色固体。Mp134-135℃，EI-MS(m/z)249[M]+.IR(KBr)3250，1610，1500，1490，840。实施例5制备1，3-二氧基-2-(4’-氧基乙酸乙酯-苯基)-4，4，5，5-四甲基咪唑啉
将250mg(1mmol)1，3-二羟基-2-(4’-羟基苯基)-4，4，5，5-四甲基咪唑啉、0.32ml溴代乙酸乙酯及32mg氢化钠溶于5ml无水THF中，混合物60℃搅拌5小时，TLC显示原料点消失。室温下减压过滤，滤液减压浓缩至干，残留物柱层析(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶5)纯化，得到300mg(90％)目标化合物.Mp107-109℃。
实施例6制备1，3-二氧基-2-(4’-氧乙酸-苯基)-4，4，5，5-四甲基咪唑啉(II)
向33mg(0.1mmol)1，3-二氧基-2-(4’-氧基乙酸乙酯-苯基)-4，4，5，5-四甲基咪唑啉与3ml甲醇的溶液中加7滴NaOH(2N)水溶液，室温搅拌30min，TLC显示原料点消失。将反应液减压浓缩，残留物先加2m1饱和食盐水稀释，再用2N HCl调pH6，然后用乙酸乙酯萃取3次(3ml×3)，合并的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液室温下减压浓缩至干，得30mg(99％)标题化合物，为蓝色晶体。Mp155-157℃.EI-MS(m/z)307[M]+。
实施例7制备1，3-二氧基-2-[(4’-氧乙酰-Nω-Boc-Lys-OMe)苯基]-4，4，5，5-四甲基咪唑啉
将307mg(1mmol)1，3-二氧基-2-(4’-氧乙酸-苯基)-4，4，5，5-四甲基咪唑啉与30ml无水THF的溶液在冰浴下搅拌。向溶液加250mg(1.2mmol)DCC及135mg(1mmol)HOBt，冰浴下搅拌10min。向该溶液加由300mg(1mmol)HCL·Lys(Boc)-OMe，122mg(1mmol)N-甲基吗啉及6ml无水THF配制的溶液。得到的反应混合物室温反应24小时。TLC(乙酸乙酯∶石油醚＝2∶1)显示HCL·Lys(Boc)-OMe消失。反应混合物减压浓缩至干，残留物用乙酸乙酯溶解，滤除不溶物。滤液依次用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和氯化钠水溶液洗。分出的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液37℃减压浓缩(这些操作在下文中统称常规处理)，残留物柱层析纯化(乙酸乙酯∶石油醚＝2∶1)，得433mg(65％)标题化合物，为蓝色固体。ESI-MS(m/z)550[M+H]+。
实施例8制备1，3-二氧基-2-[(4’-氧乙酰-Nω-Boc-Lys)苯基]-4，4，5，5-四甲基咪唑啉
将625mg(1mmol)1，3-二氧基-2-[(4’-氧乙酰-Nω-Boc-Lys-OMe)苯基]-4，4，5，5-四甲基咪唑啉溶于3ml甲醇，冰浴下加入NaOH水溶液(2N)，室温下搅拌30min。保持pH12，冰浴下搅拌10min，TLC显示原料点消失。反应化合物用2N HCl调pH7。将反应液减压浓缩，残留物用2ml饱和食盐水稀释，用2N HCl调pH2，用乙酸乙酯萃取3次(5ml×3)。合并的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，过滤、滤液室温下减压浓缩，得490mg(92％)标题化合物，为蓝色晶体。EI-MS(m/z)534[M-H]-。
实施例9制备Boc-Ala-Lys(Z)-OBzl
将473mg(2.5mmol)Boc-Ala溶于10ml无水THF。冰浴下往里加由338mg(2.5mmol)HOBt，619mg(3mmol)DCC及10ml无水THF配制的溶液。反应混合物冰浴下搅拌20分钟。向该溶液中加由936mg(2.3mmol)HCl·Lys(Z)-OBzl，232mg(2.3mmol)N-甲基吗啉先及6ml无水THF配制的溶液。得到的反应混合物室温反应24小时，TLC(CHCl3∶MeOH＝30∶1)显示HCl·Lys(Z)-OBzl消失。反应混合物按常规处理得1.204g(97％)标题化合物，为无色固体。Mp88-90℃.ESI-MS(m/z)565[M+Na]+。
实施例10制备HCl-Ala-Lys(Z)-OBzl：
将1.354g(2.5mmol)Boc-Ala-Lys(Z)-OBzl溶于约10ml无水氯化氢-乙酸乙酯溶液(4N)，室温搅拌3小时，TLC(CHCl3∶MeOH，30∶1)显示原料点消失。反应混合液在室温下减压浓缩，残留物再用乙酸乙酯溶解并室温下浓缩，如此反复数次，直至除净游离的氯化氢(这些操作在下文中统称“常规处理”)。残留物用无水乙醚析晶，得标题化合物，直接用于下步反应。
实施例11制备Boc-Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl
将538mg(2.5mmol)Boc-Pro溶于适量无水THF，冰浴下加入338mg(2.5mmol)HOBt，619mg(3mmol)DCC的无水THF溶液，反应20分钟。向该溶液加由1.099g(2.3mmol)HCl·Ala-Lys(Z)-OBzl，232mg(2.3mmol)N-甲基吗啉及10ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应化合物按常规处理，得2.847g(98％)标题化合物.Mp82-83℃.
ESI-MS(m/z)661[M+Na]+。
实施例12制备HCl·Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl
将1.596g(2.5mmol)Boc-Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl溶于15ml无水氯化氢-乙酸乙酯液(4N)，室温搅拌3小时，TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规方法处理，残留物用无水乙醚析晶，得标题化合物，直接用于下步反应。
实施例13制备Boc-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl
冰浴下将798mg(2.5mmol)Boc-Arg(NO2)，338mg(2.5mmol)HOBt，619mg(3mmol)DCC和10ml无水THF的溶液搅拌20分钟。向该溶液中加由1.322g(2.3mmol)HCl·Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl，232mg(2.3mmol)N-甲基吗啉与5ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。按常规处理，得1.642g(85％)标题化合物.Mp84-85℃.
ESI-MS(m/z)864[M+Na]+。
实施例14制备HCl·Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl
将2.099g(2.5mmol)Boc-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl溶于20ml无水氯化氢-乙酸乙酯液(4N)，室温搅拌3小时，TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规方法处理，残留物用无水乙醚析晶，得标题化合物，直接用于下步反应。
实施例15制备Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl
冰浴下将473mg(2.5mmol)Boc-Ala，338mg(2.5mmol)HOBt，619mg(3mmol)DCC和10ml无水THF的溶液搅拌20分钟。向该溶液中加由1.785g(2.3mmol)HCl·Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)-Obzl，232mg(2.3mmol)N-甲基吗啉与5ml无水THF配制的溶液，反应24小时，得1.802g(86％)标题化合物.Mp87-89℃. 
ESI-MS(m/e)934[M+Na]+。
实施例16制备Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)
将921mg(1mmol)Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl溶于3ml甲醇中，冰浴下加入NaOH水溶液(2N)，室温下搅拌30min，保持pH12，冰浴下搅拌10min，TLC显示原料点消失。用2N HCl调pH7，将反应液减压浓缩，残留物加2ml饱和食盐水稀释，用2N HCl调pH2，用乙酸乙酯萃取3次(5ml×3)，合并的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，室温下减压浓缩得767mg(80％)标题化合物，为无色固体.EI-MS(m/z)830[M-H]-。
实施例17制备Boc-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl
冰浴下将808mg(2.5mmol)Boc-Asp(OBzl)，338mg(2.5mmol)HOBt，619mg(3mmol)DCC和10ml无水THF的溶液搅拌反应20分钟。向该溶液加由740mg(2.3mmol)HCl·Ser(Bzl)-OBzl，232mg(2.3mmol)N-甲基吗啉与5ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应化合物按常规处理，得1.29g(95％)标题化合物，为无色油状物。ESI-MS(m/z)591[M+H]+。
实施例18制备HCl·Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl
将1.477g(2.5mmol)Boc-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl溶于15ml无水氯化氢-乙酸乙酯液(4N)并室温搅拌3小时，TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规方法处理，残留物用无水乙醚析晶，得标题化合物，直接用于下步反应。实施例19制备Boc-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl
冰浴下将438mg(2.5mmol)Boc-Gly，338mg(2.5mmol)HOBt，619mg(3mmol)DCC和10ml无水THF的溶液搅拌20分钟。向该溶液中加由1.212g(2.3mmol)HCl·Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl，232mg(2.3mmol)N-甲基吗啉与5ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规处理，得1.461g(98％)标题化合物，为无色固体。Mp53-55C.
ESI-MS(m/z)649[M+H]+。
实施例20制备HCl·Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl
将1.619g(2.5mmol)Boc-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl溶于15ml无水氯化氢-乙酸乙酯液(4N)，室温搅拌3小时，TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规方法处理，残留物用无水乙醚析晶，得标题化合物，直接用于下步反应。实施例21制备Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl
冰浴下将798mg(2.5mmol)Boc-Arg(NO2)，338mg(2.5mmol)HOBt，619mg(3mmol)DCC及10ml无水THF的溶液搅拌20分钟。向该溶液加由1.343g(2.3mmol)HCl·Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl，232mg(2.3mmol)N-甲基吗啉与5ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。按常规处理，得标题化合物1.66g(85％)，为无色固体。Mp74-75℃.
ESI-MS(m/z)872[M+Na]+。
实施例22制备HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl
将2.122g(2.5mmol)Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl与20ml氯化氢-乙酸乙酯液(4N)的混合物室温搅拌3小时，TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规方法处理，残留物用无水乙醚析晶，得标题化合物，直接用于下步反应。
实施例23制备Boc-Asp(OBzl)-Val-OBzl
冰浴下将808mg(2.5mmol)Boc-Asp(OBzl)，338mg(2.5mmol)HOBt，619mg(3mmol)DCC及10ml无水THF的溶液搅拌20分钟。向该溶液加由558mg(2.3mmol)HCl·Val-OBzl，232mg(2.3mmol)N-甲基吗啉与5ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应化合物按常规处理，得1.129g(96％)标题化合物，为无色油状液体。ESI-MS(m/z)512[M+H]+。
实施例24制备HCl·Asp(OBzl)-Val-OBzl
将1.278g(2.5mmol)Boc-Asp(OBzl)-Val-OBzl溶于15ml无水氯化氢-乙酸乙酯液(4N)，室温搅拌3小时，TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规方法处理，残留物用无水乙醚析晶，得标题化合物，直接用于下步反应。
实施例25制备Boc-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl
冰浴下将438mg(2.5mmol)Boc-Gly，338mg(2.5mrnol)HOBt，619mg(3mmol)DCC和10ml无水THF的溶液搅拌20分钟。向该溶液加由1.03g(2.3mmol)HCl·Asp(OBzl)-Val-OBzl，232mg(2.3mmol)N-甲基吗啉与5ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应化合物按常规处理，得1.242g(95％)标题化合物，为无色固体。Mp66-68℃.
ESI-MS(m/z)592[M+Na]+。
实施例26制备HCl·Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl
将1.421g(2.5mmol)Boc-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl溶于15ml无水氯化氢-乙酸乙酯液(4N)，室温搅拌3小时，TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规方法处理，残留物用无水乙醚析晶，得标题化合物，直接用于下步反应。
实施例27制备Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl
冰浴下将798mg(2.5mmol)Boc-Arg(NO2)，338mg(2.5mmol)HOBt，619mg(3mmol)DCC和10ml无水THF的溶液搅拌20分钟。向该溶液加由1.162g(2.3mmol)HCl·Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl，232mg(2.3mmol)N-甲基吗啉与5ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应化合物按常规处理，得1.523g(86％)标题化合物，为无色固体。Mp107-109℃. 
ESI-MS(m/z)793[M+Na]+。
实施例28制备HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl
将1.925g(2.5mmol)Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl溶于20ml无水氯化氢-乙酸乙酯液(4N)，室温搅拌3小时，TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规方法处理，残留物用无水乙醚析晶，得标题化合物，直接用于下步反应。
实施例29制备Boc-Asp(OBzl)-Phe-OBzl
冰浴下将808mg(2.5mmol)Boc-Asp(OBzl)，338mg(2.5mmol)HOBt，619mg(3mmol)DCC和10ml无水THF的溶液搅拌20分钟。向该溶液加由668mg(2.3mmol)HCl·Phe-OBzl，232mg(2.3mmol)N-甲基吗啉与5ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。按常规处理，得标题化合物1.222g(95％)，为白色固体。Mp79-80℃.
ESI-MS(m/z)561[M+H]+。
实施例30制备HCl·Asp(OBzl)-Phe-OBzl
将1.398g(2.5mmol)Boc-Asp(OBzl)-Phe-OBzl溶于15ml无水氯化氢-乙酸乙酯溶液(4N)，室温搅拌3小时，TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规方法处理，残留物用无水乙醚析晶，得标题化合物，直接用于下步反应。
实施例31制备Boc-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl
冰浴下将438mg(2.5mmol)Boc-Gly，338mg(2.5mmol)HOBt，619mg(3mmol)DCC的无水THF溶液搅拌20分钟。向该溶液加由1.141g(2.3mmol)HCl·Asp(OBzl)-Phe-OBzl，232mg(2.3mmol)N-甲基吗啉与5ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规处理，得1.29g(91％)标题化合物，为无色固体。Mp70-71℃.
ESI-MS(m/z)640[M+Na]+。
实施例32制备HCl·Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl
将1.541g(2.5mmol)Boc-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl溶于15ml无水氯化氢-乙酸乙酯液(4N)，室温搅拌3小时，TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规方法处理，残留物用无水乙醚析晶，得标题化合物，直接用于下步反应。
实施例33制备Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl
冰浴下将798mg(2.5mmol)Boc-Arg(NO2)，338mg(2.5mmol)HOBt，619mg(3mmol)DCC和10ml无水THF的溶液搅拌20分钟。向该溶液加由1.272g(2.3mmol)HCl·Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl，232mg(2.3mmol)N-甲基吗啉与5ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规处理，得1.637g(87％)标题化合物，为无色固体。Mp77-79℃.
ESI-MS(m/z)841[M+Na]+。
实施例34制备HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl
将2.045g(2.5mmol)Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl溶于15ml无水氯化氢-乙酸乙酯液(4N)，室温搅拌3小时，TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规方法处理，残留物用无水乙醚析晶，得标题化合物，直接用于下步反应。实施例35制备1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys-OMe}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉
冰浴下将821mg(1mmol)Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)，135mg(1mmol)HOBt，250mg(1mmol)DCC和10ml无水THF的溶液搅拌20分钟。向该溶液加由480mg(1mmol)l，3-二氧基-2-[(4’-氧乙酰基-Lys-OMe)苯基]-4，4，5，5-四甲基咪唑啉和100mg(1mmol)N-甲基吗啉与5ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，40∶1)显示原料点消失。反应化合物按常规处理，得925mg(83％)标题化合物，为蓝色固体。Mp179-182℃.
ESI-MS(m/z)1275[M+Na]+。IR(KBr)3319，2935，1658，1531，1448，1363，1254，1168，1053，835，749，540em-1。
实施例36制备1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉
冰浴下下将1260mg(1mmol)1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys-OMe}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉溶于3ml甲醇中，加入NaOH水溶液(2N)，室温下搅拌30min。保持pH12，冰浴下搅拌10min，TLC显示原料点消失。用2N HCl调pH7，将反应液减压浓缩，残留物用2ml饱和食盐水稀释，用2N HCl调pH2，用乙酸乙酯萃取3次(5ml×3)。合并的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，过滤、滤液室温下减压浓缩，得945mg(82％)标题化合物，为蓝色固体。EI-MS(m/z)1238[M-H]+。
实施例37制备1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys-Arg-(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉
冰浴下将618mg(0.5mmol)1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉，69mg(0.5mmol)HOBt，126mg(0.6mmol)DCC和20ml无水THF的溶液搅拌20分钟。向该溶液加由442mg(0.5mmol)HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl，50mg(0.5mmol)N-甲基吗啉及5ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规处理，得300mg(31％)标题化合物，为蓝色固体。Mp138-140℃.
ESI-MS(m/z)1991[M+H]+.IR(KBr)3309，2936，1656，1531，1449，1363，1256，836，743，697，601cm-1。
实施例38制备1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys-Arg-(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉
冰浴下将618mg(0.5mmol)1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉，69mg(0.5mmol)HOBt，126mg(0.6mmol)DCC和20ml无水THF的溶液搅拌20分钟。向该溶液加由421mg(0.5mmol)HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl，50mg(0.5mmol)N-甲基吗啉及5ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规处理，得389mg(36％)标题化合物，为蓝色固体。Mp117-120℃.
ESI-MS(m/z)1913[M+H]+。IR(KBr)3312，2937，1655，1530，1448，1362，1257，835，744，697，592cm-1。
实施例39制备1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys-Arg-(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉
冰浴下将618mg(0.5mmol)1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉，69mg(0.5mmol)HOBt，126mg(0.6mmol)DCC和20ml无水THF的溶液搅拌20分钟。向该溶液加由445mg(0.5mmol)HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl，50mg(0.5mmol)N-甲基吗啉及5ml无水THF配制的溶液，室温反应24小时。TLC(CHCl3∶MeOH，20∶1)显示原料点消失。反应混合物按常规处理，得320mg(36％)标题化合物，为蓝色固体。Mp115-118℃.
ESI-MS(m/z)1961[M+H]+。IR(KBr)3316，2936，1654，1529，1448，1362，1256，1169，742，698，593cm-1。
实施例40制备1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-[Nω-(Ala-Arg-Pro-Ala-Lys)-Lys-Arg-Gly-Asp-Ser]苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉(Ia)
冰浴下将199mg(0.1mmol)1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys-Arg-(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉与6ml三氟乙酸和1.5ml三氟甲磺酸混合，搅拌1小时后TCL(CHCl3∶MeOH，1∶1)显示原料点消失。反应化合物减压浓缩，残留物用无水乙醚反复洗涤，减压浓缩，残留物用水溶解，用25％氨水调pH8，用Sephadex G10除盐，用C18柱纯化，收集的馏分冻干，得109mg(85％)标题化合物，为蓝色固体。Mp134-135℃.
ESI-MS(m/z)1375[M+H]+.g＝2.00779.IR(KBr)3346，3180，2920，1665，1537，1449，1252，1179，1030，837，801，720，639，518cm-1。
实施例41制备1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-[Nω-(Ala-Arg-Pro-Ala-Lys)-Lys-Arg-Gly-Asp-Val]苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉(Ib)
冰浴下将190mg(0.1mmol)1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys-Arg-(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉与6ml三氟乙酸和1.5ml三氟甲磺酸混合，搅拌1小时后TCL(CHCl3∶MeOH，1∶1)显示原料点消失。反应化合物减压浓缩，残留物用无水乙醚反复洗涤，减压浓缩，残留物用水溶解，用25％氨水调pH8，用Sephadex G10除盐，用C18柱纯化，收集的馏分冻干，得96mg(82％)标题化合物，为蓝色固体。Mp143-144℃. 
ESI-MS(m/z)1387[M+H]+.g＝2.00779.IR(KBr)3349，2942，1659，1539，1394，1250，1030，639cm-1。
实施例42制备1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-[Nω-(Ala-Arg-Pro-Ala-Lys)-Lys-Arg-Gly-Asp-Phe]苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉(Ic)
冰浴下将194mg(0.1mmol)1，3-二氧基-2-{4’-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys-Arg-(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉与6ml三氟乙酸和1.5ml三氟甲磺酸混合，搅拌1小时后TCL(CHCl3∶MeOH，1∶1)显示原料点消失。反应化合物减压浓缩，残留物用无水乙醚反复洗涤，减压浓缩，残留物用水溶解，用25％氨水调pH8，用Sephadex G10除盐，用C18柱纯化，收集的馏分冻干，得106mg(81％)标题化合物，为蓝色固体。Mp96-97℃.
ESI-MS(m/z)1436[M+H]+.g＝2.00789.IR(KBr)3363，1665，1538，1448，1256，1173，1031，640，577，518em-1。
试验例1 本发明缀合物NO清除活性试验
1、供试化合物：实施例40-42所制备的化合物，分别编号为Ia、Ib和Ic。
2、试验方法
体重250-300g雄性Wistar大鼠，术前禁食12小时，自由饮水，颈椎脱位致死，迅速开胸摘取胸主动脉，剥离附着的结缔组织，将血管剪成3-5mm长的动脉环置于灌流浴槽内。浴槽盛有15mlKrebs-Henseleit液，37℃恒温，通95％O2-5％CO2气体，固定动脉环的挂钩连接张力换能器，在二道记录仪上描记血管舒缩曲线，纸速为1mm/min。调整静止张力为1.0g，平衡30min后给予终浓度为10-8M去甲肾上腺素使动脉收缩以起预激作用。洗去去甲肾上腺素，平衡30min，浴槽加终浓度为10-8M去甲肾上腺素，待收缩张力持续稳定于平台水平后，浴槽加20μl生理盐水(空白)或加20μl供试化合物的生理盐水溶液(终浓度为5×10-6M)，或加20μl化合物II(1，3-二氧基-2-(4’-氧乙酸-苯基)-4，4，5，5-四甲基咪唑啉)的生理盐水溶液(终浓度为5×10-6M)，待平稳后，加入20μl乙酰胆碱的生理盐水溶液(终浓度为10-6M)。药物清除NO的能力以抑制乙酰胆碱舒张血管条的百分比来表示，
3、试验结果
试验结果见表1。试验结果表明，通过清除NO，供试化合物可抑制乙酰胆碱的血管条舒张作用。结果表明，通过Lys将溶栓寡肽APAK和抗栓寡肽RGDS，RGDV和RGDF连接到咪唑啉上，咪唑啉的清除NO自由基的活性增强。
表1供试化合物对乙酰胆碱舒张血管条的百分抑制率
n＝6
试验例2 本发明缀合物优球蛋白溶解活性试验
1、供试化合物：实施例40-42所制备的化合物，分别编号为Ia、Ib和Ic。
2、试验方法
取猪血与3.8％枸橼酸钠溶液鞍9∶1份混合，立即以3000r/min离心10min，分离出贫血小板的血浆。向50ml的离心管加2ml猪贫血小板的血浆和36ml超纯水。每管加0.4ml乙酸(1％)，充分混合，放入4℃冰箱冷冻10min，以3000r/min离心10min。倒置离心管，待液体流干后用滤纸吸干管内壁。将离心所得的优球蛋白沉淀冷冻干燥约40min，刮出。取约35mg优球蛋白溶于7ml硼砂缓冲液(pH9.28)。1小时后优球蛋白基本溶解，加入0.7ml CaCl2溶液(25mM)，立刻将其平铺于10×10cm的玻璃板上，厚约1mm。凝固后，用移液枪将10μl生理盐水或10μl供试化合物的生理盐水溶液(1×10-3M)或10μl尿激酶的生理盐水溶液(0.8mg/mL)滴加到凝固平板上，每两点之间的间隔大于1.5cm，每个样品点3次。4小时后量取溶圈的直径，读数列入表2。
3、试验结果
试验结果见表2。试验结果表明，本发明缀合物具有优球蛋白溶解活性。
表2供试化合物作用4h的优球蛋白溶解直径
n＝3；a)与生理盐水比p＜0.01.
试验例3 本发明缀合物体外溶栓活性评价试验
1、供试化合物：实施例40-42所制备的化合物，分别编号为Ia、Ib和Ic。
2、试验方法
SD大鼠(雄性，350-400g)按1200mg/kg剂量腹腔注射乌拉坦溶液进行麻醉。麻醉大鼠仰卧位固定，分离右颈总动脉，于近心端夹动脉夹，近心端和远心端分别穿入手术线，将远心端的手术线于皮毛用止血钳夹紧，在远心端插管，松开动脉夹，放出全部动脉血，装在50ml事先硅油化的容器中。往垂直固定的玻璃管(长20mm，内径4mm，外径5mm，管底用胶塞密封)中注入0.8ml大鼠动脉血液，往管内迅速插入一支不锈钢质料的血栓固定螺栓。该血栓固定螺旋用直径为0.2mm的不锈钢丝绕成，螺旋部分长18mm，含15个螺圈，螺圈的直径为1.8mm，托柄与螺旋相连，长7.0mm，呈问号型。血液凝固40min后，打开玻璃管底部的胶塞，用镊子固定血栓固定螺旋的托柄，从玻璃管中小心地取出被血栓包裹的血栓固定螺旋。将其悬浮浸泡于三蒸水中，以除去表面的浮血。1h后取出，精确称重。将血栓悬浮浸泡在8mL生理盐水中或供试化合物的生理盐水溶液(浓度为100nM)中或ARPAK的生理盐水溶液(浓度为100nM)中或尿激酶的生理盐水溶液(100IU/mL)中，于37℃恒温摇床中振摇(63r/min)，2h后取出，精确称量栓重。求出血栓在给药前后的质量差，统计各组的血栓质量差值(X±SD)，并做t检验。结果列入表3。
3、试验结果
结果表明，通过Lys将溶栓寡肽ARPAK连接到咪唑啉上，PAK的溶栓活性仍然存在。
表3Ia-c作用2h的体外溶栓活性
n＝6；a)与NS相比p＜0.0001.
试验例4 本发明缀合物体内溶栓活性评价试验
1、供试化合物：实施例40-42所制备的化合物，分别编号为Ia、Ib和Ic。
2、试验方法
SD大鼠(雄性，220～230g)按1200mg/kg剂量腹腔注射乌拉坦溶液进行麻醉。麻醉大鼠仰卧位固定，分离右颈总动脉，于近心端夹动脉夹，近心端和远心端分别穿入手术线，将远心端的手术线于皮毛用止血钳夹紧，在远心端插管，松开动脉夹，放出约1ml动脉血，装在1ml子弹头中。往垂直固定的玻璃管(长15mm，内径2.5mm，外径5.0mm，管底用胶塞密封)中注入0.1ml大鼠动脉血液，往管内迅速插入一支不锈钢质料的血栓固定螺栓。该血栓固定螺旋用直径为0.2mm的不锈钢丝绕成，螺旋部分长12mm，含15个螺圈，螺圈的直径为1.0mm，托柄与螺旋相连，长7.0mm，呈问号型。血液凝固15min后，打开玻璃管底部的胶塞，用镊子固定血栓固定螺旋的托柄，从玻璃管中小心地取出被血栓包裹的血栓固定螺旋，精确称重。
旁路插管由3段构成，中段为聚乙烯胶管，长60.0mm，内径3.5mm；两端为相同的聚乙烯管，管长100.0mm，内径1.0mm，外径2.0mm该管的一端拉成尖管(用于插入大鼠颈动脉或静脉)，外径为1.0mm，另一端的外部套一段长7.0mm，外径为3.5mm的聚乙烯管(加粗，用于插入中段的聚乙烯胶管内)3段管的内壁均硅烷化(1％的硅油乙醚溶液)。将血栓包裹的血栓固定螺旋放入中段聚乙烯胶管内，胶管的两端分别与两根聚乙烯的加粗端相套。用注射器通过尖管端将管中注满肝素生理盐水溶液(50IU/kg)，备用。继续分离麻醉大鼠的气管，并做气管插管。分离大鼠的左颈外静脉，近心端和远心端分别穿入手术线，在暴露的左颈外静脉上小心地剪一斜口，将上面制备好的旁路管道的尖管由斜口插入左颈外静脉开口的近心端，同时远离旁路管中段(含精确称重的血栓固定螺旋)内血栓固定螺旋的托柄。用注射器通过另一端的尖管推入准确量的肝素生理盐水(50IU/kg)，此时注射器不要撤离聚乙烯管，用止血钳夹住注射器与聚乙烯管之间的软管。在右颈总动脉的近心端用动脉夹止血，在离动脉夹不远处将右颈总动脉小心地剪一斜口。从聚乙烯管的尖部拔出注射器，将聚乙烯管的尖部插入动脉斜口的近心端。旁路管道的两端都用4号手术缝线与动静脉固定。
用头皮针将生理盐水(3ml/kg)，尿激酶的生理盐水溶液(20000IU/kg)、ARPAK的生理盐水溶液(1μmol/kg)或供试化合物(Ia-c)的生理盐水溶液(0.1μmol/kg)分别通过旁路管的中段(含精确称重的血栓固定螺旋)，刺入远离血栓固定螺旋的近静脉处，打开动脉夹，使血流通过旁路管道从动脉流向静脉，此即大鼠动静脉旁路溶栓模型，缓慢将注射器中的液体注入到血液中，使生理盐水(空白对照)，尿激酶(阳性对照)或PAK(组分对照)或供试化合物(Ia-c)通过血液循环，按静脉一心脏一动脉的顺序作用到血栓上。从开始注射时计时，1h后从旁路管道中取出血栓固定螺旋，精确称重。求每只大鼠旁路管道中血栓固定螺旋给药前后的质量差，统计各组的血栓质量差值
并做t检验。结果列入表4。
3、试验结果
试验结果见表4。试验结果表明，通过Lys将溶栓寡肽ARPAK连接到咪唑啉上可使PAK的溶栓活性增强10倍。
表4本发明缀合物作用1h的体内溶栓活性
n＝10；a)与生理盐水比p＜0.01.
试验例5 本发明缀合物体内抗栓活性评价试验
1、供试化合物：实施例40-42所制备的化合物，分别编号为Ia、Ib和Ic。
2、试验方法
将大鼠(220-230g)，随机分组，每组11只，静悉饲养一天，停止喂养过夜。分别灌胃给供试化合物(Ia-c)的生理盐水溶液(剂量为100nmol/kg)、RGDS的生理盐水溶液(剂量为10μmol/kg)、RGDV的生理盐水溶液(剂量为10μmol/kg)或RGDF的生理盐水溶液(剂量为10μmol/kg)，30分钟后，大鼠用20％乌来糖溶液麻醉后分离右颈动脉和左颈静脉。将插管充满肝素钠的生理盐水溶液后，一端插入左侧静脉，另一端用注射器加入定量肝素钠抗凝后，然后插入右侧动脉。血流从右侧动脉流经聚乙烯管流入左侧静脉，15分钟后取出附有血栓的丝线并记录重量，总重量减去丝线重量即为血栓湿重，统计各组的血栓湿重的均值和标准差(Mean±SD mg)，并作t检验，以生理盐水(NS，3ml/kg)坐空白对照，以阿司匹林(33mg/kg)作阳性对照。
3、试验结果
试验结果见表5。试验结果表明，通过Lys将抗栓寡肽RGDS，RGDV，RGDF连接到咪唑啉上可使抗栓活性增强100倍。
表5本发明缀合物作用45min的体内抗栓活性
n＝11；a)与生理盐水比p＜0.01.
试验例6 本发明缀合物评价体内抗中风活性
1、供试化合物：实施例40-42所制备的化合物，分别编号为Ia、Ib和Ic。
2、试验方法
SD雄性大鼠(250-300g)用10％水合氯醛(400mg/kg)腹腔注射麻醉，从颈部正中略偏右部竖直开约2cm长切口，沿胸锁乳突肌内侧缘分离出右颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉。用无创动脉夹分别夹闭颈内动脉开口处和颈总动脉近心端，在颈外动脉剪一小口，结扎颈外动脉远心端，松开颈总动脉近心端的动脉夹，取10μl血，取血之后再用无创动脉夹夹闭颈总动脉近心端。将取得的l0μl血装入1ml EP管中，现在常温下放置30分钟使血液凝固，然后转移至-20℃冰箱中放置1小时，使血液凝块结实。1小时后取出血液凝块，加入1ml生理盐水用钢铲把血液凝块捣成大小比较均一的细小血栓，然后把细小血栓混悬液转移至1ml注射器内备用。松开大鼠颈内动脉夹的同时，将1ml注射器内的血栓混悬液缓慢从大鼠颈外动脉向近心端经过颈内动脉注入大鼠的大脑，然后结扎颈外动脉近心端，打开颈内动脉和颈总动脉处得动脉夹，恢复血流。分离大鼠颈总静脉，注入治疗药物，结扎静脉，伤口处滴加3滴青霉素，缝合伤口，等待动物苏醒。
实验动物随机分为假手术组，阳性对照组，生理盐水组、供试化合物(Ia-c)组，ARPAK组和II组(1，3-二氧基-2-(4’-氧乙酸-苯基)-4，4，5，5-四甲基咪唑啉)。空白对照为生理盐水(3ml/kg)，阳性对照尿激酶的剂量为20000IU/kg(溶于生理盐水)，供试化合物(Ia-c)的剂量为100nmol/kg(溶于生理盐水)，化合物II(1，3-二氧基-2-(4’-氧乙酸-苯基)-4，4，5，5-四甲基咪唑啉)的剂量为1μmol/kg(溶于生理盐水)，ARPAK的剂量为1μmol/kg(溶于生理盐水)。大鼠苏醒24小时后按Zealonga方法(Wen Wang，Jingdong Xu，Lei Li，Peichang Wang，Xunming Ji，Houxi Ai，Li Zhang，Lin Li，Neuroprotective effect ofmorroniside on focal cerebral ischemia in rats.Brain Research Bulletin，2010，83，196-201)评定神经功能缺损程度。0分表示无任何神经功能缺失体征，1分表示未损伤侧前肢不能伸展，2分表示向未损伤侧行走，3分表示向未损伤侧转圈成追尾状行走，4分表示意识障碍无自主行走，5分表示死亡。将以上各组评分结果进行统计学比较，并作t检验。
3、试验结果
试验结果见表6。试验结果表明，本发明缀合物可以有效地保护中风大鼠的神经功能，具有优异的抗中风活性。
表6本发明缀合物作用24h的体内抗中风活性
n＝10；a)与生理盐水，尿激酶及ARPAK相比p＜0.01；b)与生理盐水相比p＜0.01，与尿激酶及ARPAK相比p＜0.05.
试验例7 本发明缀合物降低中风大鼠大脑梗死体积试验
1、供试化合物：实施例40-42所制备的化合物，分别编号为Ia、Ib和Ic。
2、试验方法
大鼠苏醒24小时评定神经功能缺损程度后，用乌拉坦麻醉后迅速断头取脑，将脑组织置于-20℃冰箱2小时后，从前额极开始行约2mm冠状连续切片，共6片，然后置于2％TTC溶液中37℃避光孵育30min，并观察脑切片的颜色变化，正常脑组织被TTC染成红色，而缺血脑组织即梗死脑组织呈白色。然后用数码相机照相，经SPSS统计软件处理，计算冠状切片中梗死脑组织体积和正常脑组织体积，统计各组的梗死体积百分比值，并做t检验。尿激酶的静脉给药剂量为20000IU/kg(溶于生理盐水)，供试化合物(Ia-c)的静脉给药剂量为剂量为100nmol/kg(溶于生理盐水)，化合物II的静脉给药剂量为1μmol/kg(溶于生理盐水)。
3、试验结果
试验结果见表7。试验结果表明，本发明缀合物可以有效地可以降低中风大鼠大脑梗死体积。
表7本发明缀合物治疗大鼠的大脑梗死体积百分比
n＝10；a)与生理盐水相比p＜0.01；b)与生理盐水，尿激酶及RPAK，p＜0.01.
Claims (10)
1.式I所示的化合物：
其中，aa选自丝氨酸、缬氨酸或苯丙氨酸；
R代表精氨酸；G代表甘氨酸；D代表天冬氨酸；K代表赖氨酸；A代表丙氨酸；P代表脯氨酸。
2.一种制备权利要求1所述化合物的方法，包括以下步骤：
(1)制备1，3-二氧基-2-(4-氧乙酸基-苯基)-4，4，5，5-四甲基咪唑啉；
(2)制备1，3-二氧基-2-[(4-氧乙酰基-Nω-Boc-Lys)苯基]-4，4，5，5-四甲基咪唑啉；
(3)制备HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl，HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-Obzl或HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-Obzl；
(4)制备Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)；
(5)将Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)连接到1，3-二氧基-2-[(4-氧乙酰基-Nω-Boc-Lys)苯基]-4，4，5，5-四甲基咪唑啉的赖氨酸上得到1，3-二氧基-2-{4-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉；
(6)将HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl，HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-Obzl或HCl·Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-Obzl分别与l，3-二氧基-2-{4-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉相缀合分别得到1，3-二氧基-2-{4-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉，1，3-二氧基-2-{4-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys-Arg-(NO2)-Gly-Asp-(OBzl)-Val-OBzl}苯基}-4，4，5，5-四甲基-咪唑啉或1，3-二氧基-2-{4-氧乙酰基-{Nω-[Boc-Ala-Arg(NO2)-Pro-Ala-Lys(Z)]-Lys-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl}苯基}-4，4，5，5-四甲基咪唑啉；
(7)将步骤(6)所制备的化合物脱去保护基，得到式I所示的化合物。
3.权利要求1所述化合物在制备抗血栓药物中的用途。
4.权利要求1所述化合物在制备溶血栓药物中的用途。
5.权利要求1所述化合物在制备清除NO自由基药物中的用途。
6.权利要求1所述化合物在制备治疗中风或脑梗药物中的用途。
7.一种抗血栓药物组合物，其特征在于：由治疗上有效量的权利要求1所述化合物和药学上可接受的辅料组成。
8.一种溶血栓药物组合物，其特征在于：由治疗上有效量的权利要求1所述化合物和药学上可接受的辅料组成。
9.一种清除NO自由基的药物组合物，其特征在于：由治疗上有效量的权利要求1所述化合物和药学上可接受的辅料组成。
10.一种治疗中风或脑梗的药物组合物，其特征在于：由治疗上有效量的权利要求1所述化合物和药学上可接受的辅料组成。
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Cited By (11)
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|---|---|---|---|---|
| CN103396368A (zh) * | 2013-07-29 | 2013-11-20 | 中国人民解放军第四军医大学 | 氮氧自由基在治疗缺血再灌注损伤中的应用 |
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-
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Cited By (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US10806798B2 (en) | 2012-09-05 | 2020-10-20 | Shanghai Lumosa Therapeutics Co., Ltd. | Compound with effects of thrombolysis, free radical scavenging and thrombus-targeting |
| WO2014036821A1 (zh) * | 2012-09-05 | 2014-03-13 | 永光制药有限公司 | 同时具溶血栓、清除自由基和血栓靶向功能的新颖化合物及其制备方法和用途 |
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| TWI568747B (zh) * | 2012-09-05 | 2017-02-01 | 上海晟順生物科技有限公司 | 同時具溶血栓、清除自由基和血栓靶向功能的新穎化合物及其製備方法和用途 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20130130 |