CN102884983B - 一种促进地枫皮组培苗快速生根的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种促进地枫皮组培苗快速生根的方法，包括以下步骤：将地枫皮增殖培养得到2～3cm高的无菌芽，切分成单芽，基部浸泡于灭菌过的生根剂中20～90min；取出单芽晾放于无菌盘中15～30min，再接种于固态培养基中，30～50d幼苗基部长出不定根；将生长达3～7cm以上的生根组培苗移出培养室，室内炼苗3d，假植于温度为22～28℃，湿度为75～80%的温室大棚内，消毒过的沙子中30～60d，之后移栽于腐殖土中，成活率可达83.5%～94.6%。本方法操作简单，生产成本低，可工厂化生产地枫皮种苗，为地枫皮可持续利用和保护生态环境多样性奠定基础。
Description
技术领域
本发明涉及植物无性繁殖技术领域，具体是一种促进地枫皮组培苗快速生根的方法。
背景技术
地枫皮（Illicium difengpi K.I.B.et K.I.M.）又名枫榔、高山龙，是广西岩溶石山上的一种特产中药材，具有祛风除湿, 行气止痛等功效，临床常用于风湿关节痛、腰肌劳损和跌打损伤等症状的治疗，疗效好，药用价值高，还是多种中成药产品的主要原材料。
地枫皮分布于广西壮族自治区都安、马山、大化、龙州、大新等石灰岩地区的山顶或石山疏林下，分布区狭窄，其茎皮为药用，市场上大量收购，产区群众滥采滥伐，加上石灰岩地区生态环境持续恶化等外界因素影响，以及自身自然繁殖能力低弱、致使地枫皮野生自然资源逐年减少，已列入《中国植物红皮书》渐危种。
随着地枫皮的市场需求量越来越大，苗木供应紧张，采用种子繁殖，因种皮薄，在干燥时油脂变质，过湿时又易腐烂，极易丧失发芽力，故宜随采随播。而采用植物组织培养方法可在短期内快速繁殖大量的地枫皮种苗，由于植物组织培养属于无性繁殖，可以保持原繁殖母株的优良性状，而且还具有繁殖系数高的优点。但在地枫皮组培苗快速繁殖的生根阶段，该组培苗生根难，或是伴随着根部大量愈伤组织的根系，使得组培苗的移栽成活率低，严重阻碍了组培苗快速繁殖技术在地枫皮种苗繁育上的应用。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足，而提供一种促进地枫皮组培苗快速生根的方法，该方法操作简单、生产成本低、稳定高效，并能大大缩短育苗周期。
实现本发明目的的技术方案是：
一种促进地枫皮组培苗快速生根的方法，包括以下步骤：
（1)在超净工作台上，将地枫皮增殖培养得到2～3 cm高的无菌芽，切分成单芽，基部浸泡于灭菌过的生根剂中20 min～90 min；所述生根剂为：NAA 100～1000 mg/L+IAA 100～2000 mg/L+CPPU 0.001～0.01 mg/L +Vc 2.0～10.0 mg/L，pH值为5.5；
（2）取出步骤（1）的单芽晾放于无菌盘中15～30 min，再接种于固态培养基中，30～50 d幼苗基部长出不定根；所述固态培养基为：1/2MS+活性炭1g/L+蔗糖20 g/L+琼脂5 g/L，pH值为7.0；
（3）将步骤（2）中生长达3～7 cm以上的生根组培苗移出培养室，室内炼苗3 d，取苗时小心地将根部附着的培养基洗净，假植于温度为22～28℃，湿度为75～80%的温室大棚内，消毒过的沙子中30～60 d，之后移栽于腐殖土中，成活率可达83.5%～94.6%。
所述生根剂优选为：NAA 500 mg/L+IAA 1500 mg/L+CPPU 0.004 mg/L +Vc 8.0 mg/L，pH值为5.5。
所述生根培养阶段的培养条件是：培养温度为25±3℃, 光照时间为12 h/d, 光照强度为2000 lx。
所述生根剂中，NAA为a-萘乙酸，IAA为吲哚-3-乙酸，CPPU为氯吡苯脲，Vc为维生素c，试剂均为分析纯，水为超纯水。
采用本方法，地枫皮组培苗20d左右幼苗基部可长出不定根，45d左右不定根的生长量比较稳定，根的数量达到最大，每株根数可达18条以上。
本发明的优点：采用本方法可以缩短地枫皮组培苗的生根时间，组培苗健壮，根系发达，根的质量好，可大大提高组培苗移栽成活率，成活率可达83.5%～94.6%。而且本方法操作简单，生产成本低，可工厂化生产地枫皮种苗，为地枫皮可持续利用和保护生态环境多样性奠定基础。
具体实施方式
实施例1：
一种促进地枫皮组培苗快速生根的方法，包括以下步骤：
（1)在超净工作台上，将地枫皮增殖培养得到2～3 cm高的无菌芽，切分成单芽，基部浸泡于灭菌过的生根剂中60 min；所述生根剂为：NAA 100 mg/L+IAA 500 mg/L+CPPU 0.001 mg/L +Vc 5.0 mg/L，pH值为5.5；
（2）取出步骤（1）的单芽晾放于无菌盘中30 min，接种于固态培养基1/2MS+活性炭1g/L+蔗糖20 g/L+琼脂5 g/L，pH值为7.0中，培养10 d后，基部向上1 cm的茎段稍稍膨大，25 d时膨大的茎段和基部开始长出不定根，45 d时不定根的生长量比较稳定，根的数量达到最大，每株根数约为18.2条，生根率为100%，根白色细长，但根尖较脆，清洗培养基时易碰断，不定根的数量较少且质量稍差；
（3）将步骤（2）中生长达3～7 cm以上的生根组培苗移出培养室，室内炼苗3 d，取苗，小心地将根部附着的培养基洗净，假植于温度为22～28℃，湿度为75～80%的温室大棚内，消毒过的沙子中30～60 d，之后移栽于腐殖土中，成活率为89.2%。
实施例2：
一种促进地枫皮组培苗快速生根的方法，包括有以下步骤：
（1)在超净工作台上，将地枫皮增殖培养得到2～3 cm高的无菌芽，切分成单芽，基部浸泡于灭菌过的生根剂中30 min；所述生根剂为：NAA 800 mg/L+IAA 2000 mg/L+CPPU 0.01mg/L +Vc 2.0mg/L，pH值为5.5；
（2）取出步骤（1）的单芽晾放于无菌盘中15 min，接种于固态培养基1/2MS+活性炭1g/L+蔗糖20g/L+琼脂5g/L，pH值为7.0中，培养5 d后，基部向上1 cm的茎段稍稍膨大，18 d时膨大的茎段和基部开始长出不定根，50 d时不定根的生长量比较稳定，根的数量达到最大，每株根数约为23.5条，生根率为100%，根为淡淡黄色，稍较粗硬，估计是根有一定程度木质化；
（3）将步骤（2）中生长达3～7 cm以上的生根组培苗移出培养室，室内炼苗3 d，取苗，小心地将根部附着的培养基洗净，假植于温度为22～28℃，湿度为75～80%的温室大棚内，消毒过的沙子中30～60 d，之后移栽于腐殖土中，成活率为83.5%。
实施例3：
一种促进地枫皮组培苗快速生根的方法，包括有以下步骤：
（1)在超净工作台上，将地枫皮增殖培养得到2～3 cm高的无菌芽，切分成单芽，基部浸泡于灭菌过的生根剂中45 min；所述生根剂为：NAA500 mg/L+IAA1500 mg/L+CPPU0.004 mg/L +Vc8.0 mg/L，pH值为5.5；
（2）取出步骤（1）的单芽晾放于无菌盘中20 min，接种于固态培养基1/2MS+活性炭1g/L+蔗糖20g/L+琼脂5g/L，pH值为7.0中，培养5d后，基部向上1cm的茎段稍稍膨大，20d时膨大的茎段和基部开始长出不定根，45d时不定根的生长量比较稳定，根的数量达到最大，每株根数约为31.3条，生根率为100%，根系白色细长且柔软，根数多，质量好；
（3）将步骤（2）中生长达3～7cm以上的生根组培苗移出培养室，室内炼苗3d，取苗，小心地将根部附着的培养基洗净，假植于温度为22～28℃，湿度为75～80%的温室大棚内，消毒过的沙子中30～60 d，之后移栽于腐殖土中，移栽于腐殖土中，成活率为94.6%。
Claims (3)
1.一种促进地枫皮组培苗快速生根的方法，其特征在于包括以下步骤：
（1)在超净工作台上，将地枫皮增殖培养得到2～3 cm高的无菌芽，切分成单芽，基部浸泡于灭菌过的生根剂中20～90 min；所述生根剂为：NAA 100～1000 mg/L+IAA 500～2000 mg/L+CPPU 0.001～0.01 mg/L +Vc 2.0～10.0 mg/L，pH值为5.5；
（2）取出步骤（1）的单芽晾放于无菌盘中15～30 min，再接种于固态培养基中，30～50 d幼苗基部长出不定根；所述固态培养基为：1/2MS+活性炭1g/L+蔗糖20g/L+琼脂5g/L，pH值为7.0；
（3）将步骤（2）中生长达3～7 cm的生根组培苗移出培养室，室内炼苗3 d，取苗时小心地将根部附着的培养基洗净，假植于温度为22～28℃，湿度为75～80%的温室大棚内，消毒过的沙子中30～60 d，之后移栽于腐殖土中。
2.根据权利要求1所述的促进地枫皮组培苗快速生根的方法，其特征在于：所述生根剂优选为：NAA 500 mg/L+IAA 1500 mg/L+CPPU 0.004 mg/L +Vc 8.0 mg/L，pH值为5.5。
3.根据权利要求1所述的促进地枫皮组培苗快速生根的方法，其特征在于：生根培养阶段的培养条件是：培养温度为25±3℃, 光照时间为12 h/d, 光照强度为2000 lx。
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