CN102872002B

CN102872002B - 羟基红花黄色素a油溶液及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN102872002B
Application number: CN201210379837.2A
Authority: CN
Inventors: 韩旻; 刘惠娜; 高建青; 吕良忠; 童陈琦; 吕清; 唐鑫江; 李黎明
Original assignee: Zhejiang University ZJU
Current assignee: Zhejiang University ZJU
Priority date: 2012-10-08
Filing date: 2012-10-08
Publication date: 2014-09-24
Anticipated expiration: 2032-10-08
Also published as: CN102872002A

Abstract

本发明公开了一种羟基红花黄色素A油溶液，以重量百分比计，组成为0.2％～5％羟基红花黄色素A、84％～95.3％中碳链甘三酯和4％～15％大豆磷脂，该羟基红花黄色素A油溶液具有载药量大、局部刺激性小、生物利用度高的优点。本发明同时公开了羟基红花黄色素A油溶液的制备方法，该制备方法简单，重现性好，便于控制，可实现量产。本发明还公开了羟基红花黄色素A油溶液在制备羟基红花黄色素A软胶囊剂的应用。

Description

羟基红花黄色素A油溶液及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及药物制剂领域，特别是涉及可用于填充软胶囊的羟基红花黄色素A油溶液及其制备方法和应用。

背景技术

红花为菊科红花属植物红花的干燥花，可以作为传统活血化瘀中药。临床可用于活血、化瘀、通脉，在现代医学中是防治冠心病、心肌梗死和脑血栓等疾病的重要中药。研究表明，红花中的主要有效成分是红花黄色素，其主要成分羟基红花黄色素A属于单查尔酮苷类的化合物，是红花有效组分的水溶性组分，具有抗凝、活血通径、改善心脑血管供血不足等作用。羟基红花黄色素A的主要结构如下：

羟基红花黄色素A(HSYA)的水溶性很大，目前临床上使用的为其注射剂，口服制剂主要以其复方形式入药。然而羟基红花黄色素A水溶性好，脂溶性差，细胞膜透过率低，因此其口服生物利用度低。

公开号为CN101181282A的中国专利公开了一种高生物利用度的羟基红花黄色素A软胶囊及其制备方法。羟基红花黄色素A软胶囊由羟基红花黄色素A磷脂复合物、油性介质和表面活性剂组成。该专利发明内容旨在提高药物的口服吸收生物利用度，但是该载药制剂进入体内后血药浓度有双峰现象，血药浓度的双峰现象的产生原因比较复杂，会给患者的用药安全和疗效带来不确定性，是需要极力避免的一种现象。

此外公开号为CN102114003A的中国专利公开了羟基红花黄色素A缓释微丸及其制备方法和应用。羟基红花黄色素A缓释微丸释药稳定，口服生物利用度高，但其制备工艺复杂，该制剂的影响因素较多。

发明内容

本发明提供了一种羟基红花黄色素A油溶液及其制备方法和应用，该油溶液经口服后在胃肠道中容易吸收，血药浓度稳定，并且制备容易。

一种羟基红花黄色素A油溶液，以重量百分比计，组成为：

羟基红花黄色素A 0.2％～5％；

中碳链甘三酯 84％～95.3％；

大豆磷脂 4％～15％。

所述的中碳链甘三酯一般选用C₆～C₁₂脂肪酸甘油三酯，优选为C₈～C₁₀脂肪酸甘油三酯。

所述的羟基红花黄色素A油溶液实则为粒径50nm左右的羟基红花黄色素A的纳米粒子分散体系，所含的中碳链甘三酯和大豆磷脂都具有促进药物肠道吸收的作用，这使得所述的羟基红花黄色素A油溶液在胃肠道中容易吸收；经过动物体内药物动力学实验，发现血药浓度稳定，未出现双峰现象；同时，所含的组分比较简单，而且容易得到，因此制备起来比较方便。

作为优选，所述的羟基红花黄色素A油溶液，以重量百分比计，组成为：

羟基红花黄色素A 0.2％～1％；

中碳链甘三酯 84％～95.3％；

大豆磷脂 4％～15％。

本发明还提供了所述的羟基红花黄色素A油溶液的制备方法，包括以下步骤：

(1)将所述的大豆磷脂总重量的1/3～2/3与羟基红花黄色素A溶解于有机溶剂中，得到混合液a；

(2)将剩余的大豆磷脂溶解于有机溶剂中，再加入所述的中碳链甘三酯得到混合液b；

(3)将上述步骤得到的混合液a和混合液b混合、分散，除去有机溶剂，得到所述的羟基红花黄色素A油溶液；

步骤(1)和(2)中所述的有机溶剂选自C₁～C₅烷基醇中的至少一种，可以相同也可以不同。

本发明中，所述的大豆磷脂分两次加入，更有利于促进药物溶于中碳链甘三酯中，以及提高制剂的稳定性。

所述的C₁～C₅烷基醇对本发明中的对羟基红花黄色素A油溶液的各个组分都具有较好的溶解度，这是对羟基红花黄色素A能够较好地分散的关键。作为优选，所述的有机溶剂为甲醇和乙醇中的至少一种，这两者的沸点较低，容易除去。作为进一步的优选，步骤(1)中所述的有机溶剂为甲醇、步骤(2)中所述的有机溶剂为乙醇，这样有利于促进药物分散于油溶剂中，并且提高制剂的稳定性。

步骤(1)中所述的有机溶剂主要起溶解的作用，能将所述的羟基红花黄色素A和大豆磷脂完全溶解即可，用量不需要过大，所述的羟基红花黄色素A与有机溶剂的用量比优选为50mg∶1～10mL。

步骤(2)中的有机溶剂可以促进大豆磷脂溶解于中碳链甘三酯中，用量不易过大，步骤(2)中的所述的有机溶剂与中碳链甘三酯的用量比优选为0.2～1mL∶10g。

步骤(3)中所述的分散方法为高速搅拌，较高的搅拌速率可以使得所述的羟基红花黄色素A充分分散于中碳链甘三酯，以形成合适的分散体系，所述的搅拌速度优选为5000～10000rpm。

本发明还提供了一种羟基红花黄色素A油溶液制备的羟基红花黄色素A软胶囊剂。将所述的羟基红花黄色素A油溶液按照本领域技术人员熟知的方法，制备得到羟基红花黄色素A软胶囊剂。

同现有技术相比，本发明的有益效果体现在：

(1)本发明羟基红花黄色素A油溶液实则为是粒径50nm左右的纳米粒分散在油溶液中形成的，具有载药量大、安全无毒的优点；

(2)该羟基红花黄色素A油溶液经口服吸收后，能显著地提高羟基红花黄色素A的生物利用度；

(3)制备工艺简单，易大规模生产，具有较好的应用前景。

附图说明

图1为实施例1制备的HSYA油溶液的冷冻蚀刻电镜图；

图2为实施例1制备的HSYA油溶液的累积释放百分率的溶出曲线；

图3为SD大鼠口服HSYA水溶液及实施例1制备的油溶液的体内药物动力学曲线；

图4为实施例2制备的HSYA油溶液的透射电镜图；

图5为实施例3制备的HSYA油溶液在Caco-2细胞上的转运结果图；

图6为实施例4制备的HSYA油溶液的透射电镜图；

图7为实施例5制备的HSYA油溶液的透射电镜图。

具体实施方式

实施例1

先称取500mg大豆磷脂溶于2ml甲醇中，然后再加入羟基红花黄色素A50mg，超声溶解得到混合液a。另称取500mg大豆磷脂溶于0.5ml乙醇中，超声溶解后再加入9.5g中碳链甘三酯(品牌：日清；型号：60∶40；有效物质含量：辛酸(C₈)，60％：癸酸(C₁₀)40％)得到混合液b。将a和b混合后用FJ-200高速分散均质机处理(9500rpm，2min)，然后用旋转蒸发器(40℃，3min)除去有机溶剂，即得到HSYA油溶液。

该HSYA油溶液的冷冻蚀刻电镜图如图1所示，呈颗粒状。

实施例2

先称取250mg大豆磷脂溶于2ml甲醇中，然后再加入羟基红花黄色素A50mg，超声溶解得到混合液a。另称取250mg大豆磷脂溶于0.5ml乙醇中，超声溶解后再加入9.5g中碳链甘三酯得到混合液b。将a和b混合后用FJ-200高速分散均质机处理(9500rpm，2min)，然后用旋转蒸发器(40℃，3min)除去有机溶剂，即得到HSYA油溶液，所得到的HSYA油溶液的透射电镜图如图4所示，呈现100nm左右、大致圆形的颗粒状。

实施例3

先称取750mg大豆磷脂溶于2ml甲醇中，然后再加入羟基红花黄色素A50mg，超声溶解得到混合液a。另称取750mg大豆磷脂溶于0.5ml乙醇中，超声溶解后再加入9.5g中碳链甘三酯得到混合液b。将a和b混合后用FJ-200高速分散均质机处理(9500rpm，2min)，然后用旋转蒸发器(40℃，3min)除去有机溶剂，即得到HSYA油溶液，该HSYA油溶液在Caco-2细胞上的转运结果图如图5所示。

转运方法：取跨膜电阻符合转运条件且细胞生长形态完好的transwell膜，用ph7.4HBSS冲洗3遍。Transwell膜的Apical侧(肠腔侧)加入0.5ml HSYA溶液或HSYA油溶液，并用HBSS稀释至所需浓度。同时Basolateral(基底侧)加入空白的ph7.4HBSS1.5ml作为接收池，然后将transwell板放入37℃细胞培养箱，分别于15/30/45/60/90/120min从Basolateral侧取200μl样品同时补充200μl空白HBSS.样品用高效液相色谱仪进行检测。

转运结果分析：从图5的转运结果图可以看到，制剂的转运低于溶液组，这可能与HSYA油溶液在体外水性介质中不易释放药物有关。

实施例4

先称取500mg大豆磷脂溶于2ml甲醇中，然后再加入羟基红花黄色素A25mg，超声溶解得到混合液a。另称取500mg大豆磷脂溶于0.5ml乙醇中，超声溶解后再加入9.5g中碳链甘三酯得到混合液b。将a和b混合后用FJ-200高速分散均质机处理(9500rpm，2min)，然后用旋转蒸发器(40℃，3min)除去有机溶剂，即得到HSYA油溶液，该HSYA油溶液的透射电镜图如图6所示，呈100nm左右、大致圆形的颗粒状。

实施例5

先称取500mg大豆磷脂溶于2ml甲醇中，然后再加入羟基红花黄色素A50mg，超声溶解得到混合液a。另称取500mg大豆磷脂溶于0.5ml乙醇中，超声溶解后再加入9.5g中碳链甘三酯得到混合液b。将a和b混合后用FJ-200高速分散均质机处理(9500rpm，2min)，然后用旋转蒸发器(40℃，3min)除去有机溶剂，得到的混合物中再加入同体积的中碳链甘三酯，水浴超声2min，即得到HSYA油溶液，该HSYA油溶液的电镜图如图7所示，为10nm左右的微小球状短子。

实施例6

软胶囊囊皮组成成分质量比为水-甘油-明胶(1∶0.5∶1)，先将适量的水加入明胶中，浸泡溶胀后搅拌升温至80℃使之溶解。把其余的水喝甘油混合均匀加入溶胶罐中，搅拌均匀后停止搅拌，保温减压脱气泡，浓缩至适宜的粘度，放料至保温桶中，静置过夜，即得囊皮。将保温的胶料桶与胶囊机连接，将制备好的HSYA油溶液置于装料斗中，按设定好的参数进行装囊，得到软胶囊后再用95％的乙醇进行洗丸，晒干后即得成品。

实施例7

软胶囊囊皮组成成分质量比为水-甘油-明胶(1∶0.3∶1)，先将适量的水加入明胶中，浸泡溶胀后搅拌升温至80℃使之溶解。把其余的水喝甘油混合均匀加入溶胶罐中，搅拌均匀后停止搅拌，保温减压脱气泡，浓缩至适宜的粘度，放料至保温桶中，静置过夜，即得囊皮。将保温的胶料桶与胶囊机连接，将制备好的HSYA油溶液置于装料斗中，按设定好的参数进行装囊，得到软胶囊后再用95％的乙醇进行洗丸，晒干后即得成品。

药物累积释放度实验

将1ml羟基红花黄色素A油溶液加入到1ml释放介质(水)中，涡旋1min，然后再移至200ml释放介质中，透析袋(MW：8000-14000)内放10ml释放介质，转速为50转/分钟，介质温度4℃，定时从透析袋内取样1ml，并同时透析袋内补水1ml，样品溶液以微孔滤膜过滤，用高效液相(403nm)测HSYA浓度，计算药物累积释放百分率。最后，分别对数据进行总结、归纳、处理之后进行绘图，如图2所示。

图2所示，实施例1所制备羟基红花黄色素A油溶液的累积释放百分率，总体上呈现缓慢释放的曲线，因此，可以说明实施例1制备的羟基红花黄色素A油溶液体外具有较好地缓释作用。

动物体内药物动力学考察：

取SD大鼠共6只(200±20g)，随机平分为两组，一组为羟基红花黄色素A的水溶液组作为对照(25mg/kg)，另一组为实施例1制得的油溶液组(25mg/kg)。受试老鼠给药前自由饮水并禁食12h，次日清晨分别单次灌胃给药实验组制剂(实施例1制得的HSYA油溶液)和等剂量的对照组(HSYA水溶液)。服药时用约50ml水送服，同时在给药后5min、15min、30min、45min、1h、1.5h、2h、3h、4h、6h、8h和12h眼眶静脉取血2ml置肝素化离心管中，4000转/分钟离心10min，移取上层血浆，精密加入到6％高氯酸中(2∶1，v/v)涡旋2min后12000离心10min，吸取上清液，进行高效液相色谱分析(Agilent1200高效液相色谱仪，Agilent公司，美国)。表1是老鼠的药物动力学参数。最后，对数据进行总结、归纳、处理之后进行绘图，结果如图3所示。

表1.老鼠口服HSYA水溶液及油溶液后的体内药物动力学参数(n＝3)

注：Dose为给药剂量；AUC为血药浓度曲线下面积；MRT为平均滞留时间；T_max为达峰时间；C_max为达峰浓度；F_re为相对生物利用度。

图3表明，相比羟基红花黄色素A水溶液，实施例1制备的油溶液制剂能显著的提高羟基红花黄色素A的口服生物利用度。

Claims

1.一种羟基红花黄色素A油溶液的制备方法，其特征在于，所述的羟基红花黄色素A油溶液，以重量百分比计，组成为：

羟基红花黄色素A 0.2％～5％；

中碳链甘三酯 84％～95.3％；

大豆磷脂 4％～15％；

操作步骤包括：

步骤(1)和(2)中所述的有机溶剂为甲醇和乙醇中的至少一种；

步骤(1)中所述的羟基红花黄色素A与有机溶剂的用量比为50mg：1～10mL；

步骤(2)中的有机溶剂与中碳链甘三酯的用量比为0.2～1mL：10g；

步骤(3)中所述的分散的方法为高速搅拌，搅拌速率为5000～10000rpm；

所述的中碳链甘三酯为C₈～C₁₀脂肪酸甘油三酯。

2.根据权利要求1所述的羟基红花黄色素A油溶液的制备方法，其特征在于，以重量百分比计，所述的羟基红花黄色素A油溶液的组成为：

羟基红花黄色素A 0.2％～1％；

中碳链甘三酯 84％～95.3％；

大豆磷脂 4％～15％。

3.根据权利要求1或2所述的羟基红花黄色素A油溶液的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的有机溶剂为甲醇；

步骤(2)中所述的有机溶剂为乙醇。