CN102871008A - 一种芽孢杆菌菌粉简易制备方法 - Google Patents

一种芽孢杆菌菌粉简易制备方法 Download PDF

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汪攀
张军
孙晓雯
闫轶洁
王安如
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Hu'nan Dabeinong Agricultural Technology Co Ltd
Zhangzhou Dabeinong Agriculture & Pasture Technology Co Ltd
Beijing Dabeinong Technology Group Co Ltd
Original Assignee
Hu'nan Dabeinong Agricultural Technology Co Ltd
Zhangzhou Dabeinong Agriculture & Pasture Technology Co Ltd
Beijing Dabeinong Technology Group Co Ltd
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Abstract

本发明公开了一种芽孢杆菌菌粉简易制备方法。该方法包括如下步骤：1）将发酵结束后的芽孢杆菌发酵液和菌液吸附剂按重量比1.0：1.0～1.5混合，搅拌混匀；2）把混合均匀的发酵液和菌液吸附剂的混合物分摊成2cm～3cm，置于通风处自然晾干至含水量降至20%以下时，菌粉制备完成。本发明采用菌液吸附剂吸附发酵液中的活菌及其代谢产物，经干燥后直接制成微生态制剂，工艺简单，技术难度低。省去发酵结束后菌体分离程序，最大限度的利用了发酵液中益生菌的有益代谢产物。

Description

一种芽孢杆菌菌粉简易制备方法
技术领域
本发明属于微生态制剂技术领域，涉及一种饲用芽孢杆菌菌粉简易制备方法。
背景技术
微生态制剂是指根据微生态理论，将从动物体内外分离的对动物有益的微生物，经特殊工艺制成的只含有活菌或包含细菌菌体及其代谢产物的主要用于动物的活菌制剂。
目前用于微生态活菌制剂的加工方法主要有喷雾干燥法、真空冷冻干燥法和微囊包被法。市场现有的微生态产品，大部分采用大部分是喷雾干燥法，干燥法优点是处理量大，所得微胶囊粉末流散性好，加工过程易于控制。真空冷冻干燥法也是微生物制品应用中最为广泛的方法之一，通过真空冷冻干燥法，也可以得到活菌率较高的微生态产品，但是真空冷冻干燥法存在着以下问题：应用成本较高（喷雾干燥的5-8倍）、时间成本比较高（48h/批次）、设备损耗较迅速、制得的产品集结在一起，需要进一步的进行破碎，制粉，流散性差。微囊包被是保护益生菌活力最为直接有效的方法，壁材在加工过程中，在菌体细胞外形成玻璃化状态，更好的保护菌体细胞膜和胞内蛋白质，使产品中活菌数大大提高。这三种加工方法虽然被广泛使用，但都需要额外添加价格较高的干燥保护剂或载体、需要专业的干燥设备，生产工艺比较复杂，必须由专业的人员来生产操作。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供一种芽孢杆菌菌粉简易制备方法。
本发明提供的制备方法，包括如下步骤：1）将发酵结束后的芽孢杆菌发酵液和菌液吸附剂按重量比1.0：1.0～1.5混合，搅拌混匀；2）把混合均匀的发酵液和菌液吸附剂的混合物分摊成2cm～3cm，置于通风处自然晾干至含水量降至20%以下时，菌粉制备完成。
在本发明具体的实施方案中，步骤2）中发酵液和菌液吸附剂的混合物自然晾干至含水量为5%～15%。
其中，所述的菌液吸附剂选自玉米芯粉、淀粉、碳酸钙中的一种或几种。
其中，所述的芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和/或短小芽孢杆菌。
其中，所述的发酵液和菌液吸附剂的混合物自然晾干时避免阳光直射。
本发明中，枯草芽孢杆菌CGMCC No.4628已于CN200810106520.5中公布；地衣芽孢杆菌CGMCC NO.5094已在专利CN201110384444.6中公布；短小芽孢杆菌CGMCC No.4756已于CN201110140925.2中公布。
本发明采用菌液吸附剂吸附发酵液中的活菌及其代谢产物，经干燥后直接制成微生态制剂，省去了发酵结束后复杂的后处理及制剂过程，工艺简单，技术难度低，降低了产品制造的成本。与现有方法制备的或市售的芽孢杆菌菌粉相比，菌粉中活菌数含量相近，且均能满足饲用微生态制剂中对活菌数和芽孢率的要求。本发明省去发酵结束后菌体分离程序，最大限度的利用了发酵液中益生菌的有益代谢产物，特别适用于现场发酵直接饲喂的养殖模式，促进芽孢杆菌在微生态制剂中的应用。
具体实施方式
通过下列实施例将更具体的说明本发明，但是应理解所述实施例仅是为了说明本发明，而不是以任何方式限制本发明的范围。
本发明下列实施例所用的仪器型号、试剂及其来源如下：
发酵罐：NewBrunswick公司BioFlo/Celligen 115型；
循环水机：北京长流科学仪器公司DX-208型；
空气压缩机：北京豪福机电技术开发应用有限公司HF-6100C型；
分光光度计：上海精密科学仪器有限公司721N型；
显微镜：OLYMPUS CX31型；
超净台：苏净安泰SW-CJ-2FD型；
生化培养箱：上海博讯实业有限公司医疗设备厂SPX-250B-Z型
玉米芯粉购自山东宏达玉米芯颗粒有限公司，酵母膏、牛肉粉、胰蛋白胨购自北京奥博星生物技术责任有限公司，其他试剂均购自北京化学试剂公司。
实施例1枯草芽孢杆菌菌粉简易制备方法
利用如下培养基对枯草芽孢杆菌CGMCC No.4628进行发酵：葡萄糖10g、豆饼粉10g、氯化钠5g，硫酸锰0.6g，通过稀盐酸和氢氧化钠调节pH发酵过程中pH稳定在7.0，28℃发酵72小时。
发酵结束后将发酵液与玉米芯粉按重量比1:1混合，搅拌均匀后，在曲盘上摊成薄饼，厚度2cm，放在盘架上自然风干。当含水量降至10%时，即得到枯草芽孢杆菌CGMCC No.4628菌粉。经检测该菌粉含枯草芽孢杆菌CGMCC No.4628活菌数为2.7×109cfu/g，芽孢率82.3%。
实施例2地衣芽孢杆菌菌粉简易制备方法
利用如下培养基对地衣芽孢杆菌CGMCC No.5094进行发酵：葡萄糖12g、豆饼粉11g、氯化钠4g，硫酸锰0.5g，通过稀盐酸和氢氧化钠调节pH发酵过程中pH稳定在7.0，28℃发酵72小时。
发酵结束后将发酵液与玉米芯粉按重量比1:1.2混合，搅拌均匀后，在曲盘上摊成薄饼，厚度2.5cm，放在盘架上自然风干。当含水量降至15%时，即得到地衣芽孢杆菌CGMCC 5094菌粉。经检测该菌粉含地衣芽孢杆菌CGMCC 5094活菌数为3.2×109cfu/g，芽孢率79.6%。
实施例3短小芽孢杆菌菌粉简易制备方法
利用如下培养基对短小芽孢杆菌CGMCC No.4756进行发酵：葡萄糖10g、豆饼粉11g、氯化钠5g，硫酸锰0.5g，通过稀盐酸和氢氧化钠调节pH发酵过程中pH稳定在7.0，28℃发酵72小时。
发酵结束后将发酵液与玉米芯粉按重量比1:1.5混合，搅拌均匀后，在曲盘上摊成薄饼，厚度3cm，放在盘架上自然风干。当含水量降至5%时，即得到短小芽孢杆菌CGMCC No.4756菌粉。经检测该菌粉含短小芽孢杆菌CGMCC No.4756活菌数为2.4×109cfu/g，芽孢率84.6%。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (5)

1.一种芽孢杆菌菌粉简易制备方法，其包括如下步骤：
1）将发酵结束后的芽孢杆菌发酵液和菌液吸附剂按重量比1.0：1.0～1.5混合，搅拌混匀；
2）把混合均匀的发酵液和菌液吸附剂的混合物分摊成2cm～3cm，置于通风处自然晾干至含水量降至20%以下时，菌粉制备完成。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2）中发酵液和菌液吸附剂的混合物自然晾干至含水量为5%～15%。
3.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的菌液吸附剂选自玉米芯粉、淀粉、米糠中的一种或几种。
4.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和/或短小芽孢杆菌。
5.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的发酵液和菌液吸附剂的混合物自然晾干时避免阳光直射。
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