CN102863497B - 一种猪去氧胆酸的精制方法 - Google Patents
一种猪去氧胆酸的精制方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102863497B CN102863497B CN201210375134.2A CN201210375134A CN102863497B CN 102863497 B CN102863497 B CN 102863497B CN 201210375134 A CN201210375134 A CN 201210375134A CN 102863497 B CN102863497 B CN 102863497B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hyodeoxycholic acid
- crude product
- weight
- water
- tankage
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
本发明提供了一种猪去氧胆酸的精制方法，包括溶解猪胆汁提取胆红素后的下脚料，脱色，过滤，皂化成盐，调pH值3~4，析晶得到猪去氧胆酸粗品，将粗品进行纯化，获得猪去氧胆酸纯品。整套方法具有安全无毒，操作简便，成本低，周期短，产品纯度高，易于大规模生产等优点，具有广阔的市场前景。
Description
技术领域
本发明属于生物化工领域，具体地说，涉及一种猪去氧胆酸的精制方法。
背景技术
猪去氧胆酸又称异去氧胆酸，α-猪去氧胆酸，分子量为392.58,可以从猪胆汁中提取得到。猪去氧胆酸为降血脂药，能抑制胆酸的形成及溶解脂肪，降低血中胆固醇和甘油三酯，适用于Ia或Ib型高血脂症、动脉粥样硬化症。对百日咳杆菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌等有一定的抑菌作用。它能刺激胆汁分泌，使胆汁稀释而不增加固含量，适用于胆道炎、胆囊炎、胆石症和其它非阻塞性胆汁郁积,尚能促进肠道脂肪分解和脂溶性维生素吸收，可用于肝胆疾患引起的消化不良。临床上还作为中药清开灵注射剂、清开灵滴丸的有效成分，是人工牛黄配方的重要原料。
目前，猪去氧胆酸主要从猪胆汁中提取，猪胆汁中猪去氧胆酸的含量约为40%，鹅去氧胆酸约为25%，其次是猪胆酸和3α-醛基-6-酮基-胆烷酸，是猪去氧胆酸的主要原料来源。现有的生产猪去氧胆酸的方法主要包括两种，一种是经皂化、脱色、脱脂后的粗品用乙酸乙酯结晶，该工艺使用大量的乙酸乙酯，得到的猪去氧胆酸纯度不高，收率低；另一种是甲酯化法，CN101037463A中公开了一种从猪胆汁中制备高纯度猪去氧胆酸的方法，该方法利用不同胆汁酸甲酯与苯加成物在苯中的不同溶解度分离得到猪去氧胆酸，该法工艺复杂，为获得高纯度产品，使用了苯、乙醚、硫酸等有害化学品，对环境不友好，且不利于大规模生产。
发明内容
本发明的目的是提供一种工艺简单，生产周期短，产品纯度高且对环境友好的猪去氧胆酸的精制方法。
为了实现本发明目的，本发明的一种猪去氧胆酸的精制方法，包括溶解猪胆汁提取胆红素后的下脚料，脱色，过滤，皂化成盐，调pH值3~4，析晶得到猪去氧胆酸粗品，将粗品进行纯化，获得猪去氧胆酸纯品。
具体地，前述的精制方法包括以下步骤：
1）溶解脱色，用5~10倍重量的有机溶剂回流1~2小时溶解猪胆汁提取胆红素后的下脚料，加入下脚料重量5%~10%的活性炭继续回流30分钟；
2）过滤后降至40~50℃，加入碱性物质皂化成盐，降至15~25℃，保温1~2小时，过滤得到猪去氧胆酸盐沉淀；
3）向猪去氧胆酸盐中加入10~20倍重量的水，加热至45~60℃溶解，用稀盐酸调节pH3~4，析晶得到猪去氧胆酸粗品I，过滤干燥；
4）向猪去氧胆酸粗品I中加入5~10倍重量的水溶性有机溶剂，加热回流1~2小时，待其全部溶解后降至15~25℃，向其中滴加水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌1小时，过滤得猪去氧胆酸粗品II；
5）向猪去氧胆酸粗品II中加入5~10倍重量的水溶性有机溶剂，加热回流1~2小时，待其全部溶解后降至15~25℃，向其中滴加水，直至出现混浊物，立即停止滴加，继续搅拌1小时，过滤干燥即得猪去氧胆酸纯品。
前述的精制方法，步骤1）中所述有机溶剂任选下组中的一种：乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙醇、丙酮、异丙醇、仲丁醇等，用量为下脚料重量的5~10倍。
前述的精制方法，步骤2）中使用的碱性物质为二水氯化钙等。
前述的精制方法，步骤2）具体为：过滤后降至50℃，加入碱性物质皂化成盐，降至15℃，保温2小时，过滤得到猪去氧胆酸盐沉淀。
前述的精制方法，步骤3）具体为：向猪去氧胆酸盐中加入10倍重量的水，加热至50℃溶解，用稀盐酸调节pH3~4，析晶得到猪去氧胆酸粗品I，过滤干燥，干燥温度为75℃。
前述的精制方法，步骤4）和5）中使用的水溶性有机溶剂任选下组中的一种：甲醇、乙醇、乙二醇、N,N-二甲基甲酰胺、冰醋酸、异丙醇等。
前述的精制方法，步骤4）具体为：向猪去氧胆酸粗品I中加入5倍重量的水溶性有机溶剂，加热回流1~2小时，待其全部溶解后降至25℃，向其中滴加水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌1小时，过滤得猪去氧胆酸粗品II。
前述的精制方法，步骤5）具体为：向猪去氧胆酸粗品II中加入5倍重量的水溶性有机溶剂，加热回流1~2小时，待其全部溶解后降至15℃，向其中滴加水，直至出现混浊物，立即停止滴加，继续搅拌1小时，过滤干燥即得猪去氧胆酸纯品。
本发明提供的猪去氧胆酸的精制方法，以提取胆红素后的下脚料为原料，从中分离纯化出猪去氧胆酸，经高效液相色谱检测分析，精制得到的纯品中猪去氧胆酸含量大于98%，杂质含量小，整套方法具有安全无毒，操作简便，成本低，周期短，产品纯度高，易于大规模生产等优点，具有广阔的市场前景。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。
本发明中涉及到的百分号“%”，若未特别说明，是指重量百分比；但溶液的百分比，除另有规定外，是指100ml溶液中含有溶质的克数。
实施例1猪胆汁提取胆红素后的下脚料的制备
取新鲜猪胆汁1000mL，用5%氢氧化钠溶液调节pH值至12，加热至沸腾保温2小时，在搅拌下加入10%氯化钙溶液100mL，加热至沸腾，冷却后倾去上清液，过滤，收集胆红素钙盐。将胆红素钙盐加入5倍重量的水溶解后，加入适量的偏重亚硫酸钠抗氧化，用稀盐酸酸化至pH值1.5，加入三氯甲烷提取得到胆红素结晶。在过滤胆红素钙盐后得到的上清液中，按100g/L加入固体氢氧化钠，加热煮沸24小时皂化，冷却静置分层，虹吸除去上层淡黄色液体，沉淀物加入适量的水使之溶解，用稀盐酸酸化至pH值2~3,过滤水洗至中性，得到黄色的固体，即为下脚料。
实施例2以猪胆汁提取胆红素后的下脚料为原料精制猪去氧胆酸
称取一定量实施例1中制备的下脚料，用5倍重量的异丙醇回流2小时，加入下脚料重量5%的活性炭继续回流30分钟，过滤后降至50℃，加入15%二水氯化钙溶液成盐，降至15℃，保温2小时，过滤得到白色的猪去氧胆酸盐沉淀。将猪去氧胆酸盐用10倍重量的饮用水，加热至50℃溶解，用稀盐酸缓慢调节pH值3，析出白色的猪去氧胆酸粗品I，过滤干燥（干燥温度为75℃）。称取一定量的猪去氧胆酸粗品I，加入5倍重量的乙二醇，加热回流2小时，待其全部溶解后降至25℃，向其中缓慢滴加纯化水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌1小时，过滤得猪去氧胆酸粗品II，称取一定量的猪去氧胆酸粗品II，加入5倍重量的乙二醇，加热回流，2小时，待其全部溶解后降至15℃，向其中缓慢滴加纯化水，直至出现混浊物，立即停止滴加，继续搅拌1小时，过滤干燥得到白色的猪去氧胆酸成品，经HPLC分析，成品中猪去氧胆酸含量为98.5%。
实施例3以猪胆汁提取胆红素后的下脚料为原料精制猪去氧胆酸
称取一定量实施例1中制备的下脚料，用5倍重量的乙酸乙酯回流2小时溶解下脚料，加入下脚料重量5%的活性炭继续回流30分钟，过滤后降至50℃，加入20%二水氯化钙溶液成盐，降至15℃，保温2小时，过滤得到白色的猪去氧胆酸盐沉淀。将猪去氧胆酸盐用10倍重量的饮用水，加热至50℃溶解，用稀盐酸缓慢调节pH值3.5，析出白色的猪去氧胆酸粗品I，过滤干燥（干燥温度为75℃）。称取一定量的猪去氧胆酸粗品I，加入5重量的冰醋酸，加热回流2小时，待其全部溶解后降至25℃，向其中缓慢滴加纯化水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌1小时，过滤得猪去氧胆酸粗品II，称取一定量的猪去氧胆酸粗品II，加入5倍重量的冰醋酸加热回流2小时，待其全部溶解后降至15℃，向其中缓慢滴加纯化水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌1小时，过滤得到白色的猪去氧胆酸成品，经HPLC分析，成品中猪去氧胆酸含量为98.8%。
实施例4以猪胆汁提取胆红素后的下脚料为原料精制猪去氧胆酸
称取一定量实施例1中制备的下脚料，用10倍重量的乙酸乙酯回流2小时溶解下脚料，加入下脚料重量5%的活性炭继续回流30分钟，过滤后降至50℃，加入30%二水氯化钙溶液成盐，降至15℃，保温2小时，过滤得到白色的猪去氧胆酸盐沉淀。将猪去氧胆酸盐用10倍重量的饮用水，加热至50℃溶解，用稀盐酸缓慢调节pH3.5,析出白色的猪去氧胆酸粗品I，过滤干燥（干燥温度为75℃）。称取一定量的猪去氧胆酸粗品I，加入5重量的冰醋酸，加热回流2小时，待其全部溶解后降至25℃，向其中缓慢滴加纯化水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌1小时，过滤得猪去氧胆酸粗品II，称取一定量的猪去氧胆酸粗品II，加入5倍重量的冰醋酸加热回流2小时，待其全部溶解后降至15℃，向其中缓慢滴加纯化水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌1小时，过滤得到白色的猪去氧胆酸成品，经HPLC分析，成品中猪去氧胆酸含量为99.2%。
实施例5以猪胆汁提取胆红素后的下脚料为原料精制猪去氧胆酸
称取一定量实施例1中制备的下脚料，用5倍重量的丙酮回流2小时溶解下脚料，加入下脚料重量5%的活性炭继续回流30分钟，过滤后降至50℃，加入30%二水氯化钙溶液成盐，降至15℃，保温2小时，过滤得到白色的猪去氧胆酸盐沉淀。将猪去氧胆酸盐用10倍重量的饮用水，加热至50℃溶解，用稀盐酸缓慢调节pH3,析出白色的猪去氧胆酸粗品I，过滤干燥（干燥温度为75℃），称取一定量的猪去氧胆酸粗品I，加入5倍重量的乙醇，加热回流2小时，待其全部溶解后降至25℃，向其中缓慢滴加纯化水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌1小时，过滤得猪去氧胆酸粗品II，称取一定量的猪去氧胆酸粗品II，加入5倍重量的乙醇，加热回流2小时，待其全部溶解后降至15℃，向其中缓慢地滴加纯化水，直至出现混浊物后，立即停止滴加，继续搅拌1小时，过滤干燥得到白色的猪去氧胆酸成品，经HPLC分析，成品中猪去氧胆酸含量为99.5%。
实施例6以猪胆汁提取胆红素后的下脚料为原料精制猪去氧胆酸
称取一定量实施例1中制备的下脚料，用10倍重量的丙酮回流2小时溶解下脚料，加入下脚料重量5%的活性炭继续回流30分钟，过滤后降至50℃，加入30%二水氯化钙溶液成盐，降至15℃，保温2小时，过滤得到白色的猪去氧胆酸盐沉淀。将猪去氧胆酸盐用10倍重量的饮用水，加热至50℃溶解，用稀盐酸缓慢调节pH3.5,析出白色的猪去氧胆酸粗品I，过滤干燥（干燥温度为75℃），称取一定量的猪去氧胆酸粗品I，加入5倍重量的异丙醇，加热回流2小时，待其全部溶解后降至25℃，向其中缓慢滴加纯化水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌1小时，过滤得猪去氧胆酸粗品II，称取一定量的猪去氧胆酸粗品II，加入5倍重量的异丙醇，加热回流2小时，待其全部溶解后降至15℃，向其中缓慢滴加纯化水，直至出现混浊物，立即停止滴加，继续搅拌1小时，过滤干燥得到白色的猪去氧胆酸成品，经HPLC分析，成品中猪去氧胆酸含量为99%。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (3)
1.一种猪去氧胆酸的精制方法，其特征在于，所述方法包括溶解猪胆汁提取胆红素后的下脚料，脱色，过滤，皂化成盐，调pH值3～4，析晶得到猪去氧胆酸粗品，将粗品进行纯化，获得猪去氧胆酸纯品；
具体包括以下步骤：
1)溶解脱色，用5～10倍重量的有机溶剂回流1～2小时溶解猪胆汁提取胆红素后的下脚料，加入下脚料重量5％～10％的活性炭继续回流30分钟；
2)过滤后降至50℃，加入二水氯化钙皂化成盐，降至15℃，保温2小时，过滤得到猪去氧胆酸盐沉淀；
3)向猪去氧胆酸盐中加入10倍重量的水，加热至50℃溶解，用稀盐酸调节pH3～4，析晶得到猪去氧胆酸粗品I，过滤干燥，干燥温度为75℃；
4)向猪去氧胆酸粗品I中加入5倍重量的水溶性有机溶剂，加热回流1～2小时，待其全部溶解后降至25℃，向其中滴加水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌1小时，过滤得猪去氧胆酸粗品II；
5)向猪去氧胆酸粗品II中加入5倍重量的水溶性有机溶剂，加热回流1～2小时，待其全部溶解后降至15℃，向其中滴加水，直至出现混浊物，立即停止滴加，继续搅拌1小时，过滤干燥即得猪去氧胆酸纯品；
其中，猪胆汁提取胆红素后的下脚料的制备方法为：
取新鲜猪胆汁1000mL，用5％氢氧化钠溶液调节pH值至12，加热至沸腾保温2小时，在搅拌下加入10％氯化钙溶液100mL，加热至沸腾，冷却后倾去上清液，过滤，收集胆红素钙盐；将胆红素钙盐加入5倍重量的水溶解后，加入适量的偏重亚硫酸钠抗氧化，用稀盐酸酸化至pH值1.5，加入三氯甲烷提取得到胆红素结晶；在过滤胆红素钙盐后得到的上清液中，按100g/L加入固体氢氧化钠，加热煮沸24小时皂化，冷却静置分层，虹吸除去上层淡黄色液体，沉淀物加入适量的水使之溶解，用稀盐酸酸化至pH值2～3,过滤水洗至中性，得到黄色的固体，即为下脚料。
2.根据权利要求1所述的精制方法，其特征在于，步骤1)中所述有机溶剂任选下组中的一种：乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙醇、丙酮、异丙醇、仲丁醇。
3.根据权利要求1所述的精制方法，其特征在于，步骤4)和5)中使用的水溶性有机溶剂任选下组中的一种：甲醇、乙醇、乙二醇、N,N-二甲基甲酰胺、冰醋酸、异丙醇。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210375134.2A CN102863497B (zh) | 2012-09-29 | 2012-09-29 | 一种猪去氧胆酸的精制方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210375134.2A CN102863497B (zh) | 2012-09-29 | 2012-09-29 | 一种猪去氧胆酸的精制方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102863497A CN102863497A (zh) | 2013-01-09 |
| CN102863497B true CN102863497B (zh) | 2014-09-10 |
Family
ID=47442654
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201210375134.2A Active CN102863497B (zh) | 2012-09-29 | 2012-09-29 | 一种猪去氧胆酸的精制方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102863497B (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103772465B (zh) * | 2014-01-16 | 2015-09-23 | 中山百灵生物技术有限公司 | 一种高纯度猪去氧胆酸的制备方法 |
| CN104370989A (zh) * | 2014-09-01 | 2015-02-25 | 安徽科宝生物工程有限公司 | 一种钙盐法制备猪胆膏中猪去氧胆酸的方法 |
| CN105622697A (zh) * | 2016-03-04 | 2016-06-01 | 成都译山生物科技有限公司 | 一种鹅去氧胆酸的重结晶纯化方法 |
| CN106866771A (zh) * | 2017-04-14 | 2017-06-20 | 赵厚发 | 一种胆汁酸的制备方法 |
-
2012
- 2012-09-29 CN CN201210375134.2A patent/CN102863497B/zh active Active
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| 猪去氧胆酸提取工艺研究;陆进等;《中国中药杂志》;20041231;第29卷(第5期);第415页右栏2.3.1 * |
| 猪去氧胆酸的纯化工艺;苏红等;《华西药学杂志》;20061231;第21卷(第4期);第361页左栏1.2.1-1.2.2 * |
| 猪去氧胆酸精品的生产工艺;赵松华等;《中国药业》;19961231(第10期);第27页右栏 * |
| 苏红等.猪去氧胆酸的纯化工艺.《华西药学杂志》.2006,第21卷(第4期),360-362. |
| 赵松华等.猪去氧胆酸精品的生产工艺.《中国药业》.1996,(第10期),第27页右栏. |
| 陆进等.猪去氧胆酸提取工艺研究.《中国中药杂志》.2004,第29卷(第5期),第414-419页. |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102863497A (zh) | 2013-01-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN100556914C (zh) | 一种从猪胆汁中制备高纯度猪去氧胆酸的方法 | |
| CN102863497B (zh) | 一种猪去氧胆酸的精制方法 | |
| CN102321122B (zh) | 一种从三氯蔗糖-6-酯制备三氯蔗糖的方法 | |
| CN102766185B (zh) | 一种从熊去氧胆酸废母液中分别回收熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的方法 | |
| CN103113447A (zh) | 钙盐法提取鸭胆汁中鹅去氧胆酸 | |
| JP2018158936A (ja) | β‐ヒドロキシ‐β‐メチル酪酸の精製方法 | |
| CN110790805B (zh) | 一种从猪胆膏中提取鹅去氧胆酸的方法 | |
| CN106928306A (zh) | 一种熊去氧胆酸的纯化方法 | |
| CN1830996A (zh) | 一种鹅去氧胆酸的制备方法 | |
| CN110256517A (zh) | 一种从猪胆汁或下脚料中生产高纯度鹅去氧胆酸的方法 | |
| CN102807547A (zh) | 一种从大豆油脱臭馏出物中提取维生素e和甾醇的新工艺 | |
| CN102453011A (zh) | 一种高纯度柚皮素的制备方法 | |
| CN101016228A (zh) | 一种从甘蔗表皮制备的普利醇及其制备方法 | |
| CN102838647A (zh) | 猪去氧胆酸 | |
| CN103044323A (zh) | 一种柳氮磺吡啶的纯化方法 | |
| CN103922925B (zh) | 一种非诺贝酸的生产工艺 | |
| CN103897004A (zh) | 一种卡培他滨的合成方法 | |
| CN105884848A (zh) | 一种猪去氧胆酸的提取方法 | |
| CN105481927A (zh) | 一种从鸭胆汁中提取鸭胆酸和鹅去氧胆酸的方法 | |
| CN105541951A (zh) | 一种奥贝胆酸的精制方法 | |
| CN102432645A (zh) | 一种硫酸依替米星的纯化方法 | |
| CN102180864B (zh) | 一种雷尼酸锶的制备方法 | |
| CN101781215A (zh) | 棓丙酯原料药化学半合成制备方法 | |
| CN103539828A (zh) | 从去除胆红素的猪胆汁下脚料中提取猪去氧胆酸的方法 | |
| CN109422794A (zh) | 一种从鸭胆汁中提取鹅去氧胆酸的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |