CN102838611A

CN102838611A - 一种从白亮独活中提取独活素的方法

Info

Publication number: CN102838611A
Application number: CN 201210350182
Authority: CN
Inventors: 刘东锋
Original assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2012-09-20
Filing date: 2012-09-20
Publication date: 2012-12-26

Abstract

本发明公开了一种从白亮独活中提取独活素的方法，方法步骤如下：a.取白亮独活药材粉碎，加甲醇超声提取，提取液浓缩得到浸膏，再通过乙酸乙酯-水双相分散萃取，取乙酸乙酯有机相浓缩，经高速逆流色谱和版制备液相色谱进行分离纯化，得到高纯度独活素。本发明方法具有产品损失少、纯度高、制备量大等优点。

Description

一种从白亮独活中提取独活素的方法

技术领域

本发明属于中药化学领域，涉及一种从白亮独活中提取独活素的方法。

背景技术

独活素是一种呋喃香豆素类化合物，为浅黄色细针晶，mp.108-109℃，分子式为C₁₆H₁₄O₅，分子量为286.28，广泛分布于芸香科和伞形科多种植物中。近代研究表明，独活素具有抗炎作用；大鼠给药1-2mg/kg时，有刺激呼吸的作用；具有增加动脉压和心肌收缩力的作用；另外，对大鼠离体肠有解痉活性。Appendino G等研究表明独活素还具有细胞毒性，且进队生长细胞有凋亡作用，独活素通过下调细胞周期进程，使细胞停于有丝分裂G₂/M期，致DNA片段化和凋亡。

目前从天然植物中提取独活素的方法报道较少，有报道通过半合成制备得到独活素，即由13-O-Glucosyl-heraclenol水解生成Heraclenol，再将其邻二醇脱水形成环氧丙烷得到独活素，或将异戊稀醇通过Sharpless不对称环氧化反应，合成支链结构，再与Imperatorin水解后得到的母核相接，得到独活素。所得独活素其生物活性受到限制，收率低、纯度低。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供一种从天然植物白亮独活中提取独活素的方法，该方法制备量大、样品损失少、产品纯度高，易于规模化。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种从白亮独活中提取独活素的方法，其特征在于包括以下步骤：

A.将白亮独活药材粉碎，用5-8倍体积量的甲醇作为提取溶媒进行超声提取，提取2-6次，提取液合并，旋转蒸发浓缩得到浸膏；

B.将上述浸膏通过乙酸乙酯-水双相分散，取乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯；

C.将上述所得萃取浓缩物采用高速逆流色谱法进行分离纯化，根据检测器谱图接收目标流分，并用制备液相色谱对流分进一步纯化，得到独活素。

所述步骤A中超声提取时间每次为20-40min。

所述步骤C中高速逆流色谱溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，体积比为（3-7）：（3-5）：（4-8）：（2-5）。

所述步骤C中制备液相色谱分离条件为：流动相为甲醇-水（90:10），流速为10-20ml/min。

本发明的有益效果在于：采用乙酸乙酯-水双相溶剂系统萃取，提高了白亮独活中香豆素的保留率，采用高速逆流色谱和制备液相色谱结合进行分离纯化，分离效果好，溶剂消耗少，可连续制备大量独活素单体产品，具有较高的经济价值。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

将白亮独活药材粉碎加5倍体积量的甲醇超声提取3次，每次30min，合并提取液，旋转蒸发浓缩得到棕褐色浸膏，用乙酸乙酯和水（1:1）双相萃取，取上层乙酸乙酯有机相，减压浓缩成浸膏。将体积比5:4:7:3的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水混合，振荡摇匀，使两相达到平衡，静置分层后分离，下相为流动相，上相为固定相，分别对其超声脱气40min后冷却备用；取乙酸乙酯萃取浸膏溶解于等体积的上相和下相溶剂中，过滤，得样品溶液；将配制好的固定相以4ml/min的流速充满高速逆流色谱仪的螺旋管中，开启制备型高速逆流色谱仪，调整主机转速为800rpm，以2ml/min的流速将流动相泵入柱内，待柱内溶剂体系建立动态平衡后，取样品溶液由进样阀进样，然后根据紫外检测谱图收集独活素流分，减压浓缩后再应用高效液相色谱分离纯化，流动相为甲醇-水（90:10），流速15ml/min，根据检测器谱图收集目标成分，减压浓缩得到纯度98.4%的独活素。

实施例2：

将白亮独活药材粉碎加7倍体积量的甲醇超声提取6次，每次20min，合并提取液，旋转蒸发浓缩得到棕褐色浸膏，用乙酸乙酯和水（1:1）双相萃取，取上层乙酸乙酯有机相，减压浓缩成浸膏。将体积比7:5:4:5的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水混合，振荡摇匀，使两相达到平衡，静置分层后分离，下相为流动相，上相为固定相，分别对其超声脱气40min后冷却备用；取乙酸乙酯萃取浸膏溶解于等体积的上相和下相溶剂中，过滤，得样品溶液；将配制好的固定相以5ml/min的流速充满高速逆流色谱仪的螺旋管中，开启制备型高速逆流色谱仪，调整主机转速为800rpm，以2ml/min的流速将流动相泵入柱内，待柱内溶剂体系建立动态平衡后，取样品溶液由进样阀进样，然后根据紫外检测谱图收集独活素流分，减压浓缩后再应用高效液相色谱分离纯化，流动相为甲醇-水（90:10），流速20ml/min，根据检测器谱图收集目标成分，减压浓缩得到纯度98.8%的独活素。

实施例3：

将白亮独活药材粉碎加8倍体积量的甲醇超声提取4次，每次35min，合并提取液，旋转蒸发浓缩得到棕褐色浸膏，用乙酸乙酯和水（1:1）双相萃取，取上层乙酸乙酯有机相，减压浓缩成浸膏。将体积比3:5:5:2的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水混合，振荡摇匀，使两相达到平衡，静置分层后分离，下相为流动相，上相为固定相，分别对其超声脱气40min后冷却备用；取乙酸乙酯萃取浸膏溶解于等体积的上相和下相溶剂中，过滤，得样品溶液；将配制好的固定相以5ml/min的流速充满高速逆流色谱仪的螺旋管中，开启制备型高速逆流色谱仪，调整主机转速为800rpm，以2ml/min的流速将流动相泵入柱内，待柱内溶剂体系建立动态平衡后，取样品溶液由进样阀进样，然后根据紫外检测谱图收集独活素流分，减压浓缩后再应用高效液相色谱分离纯化，流动相为甲醇-水（90:10），流速10ml/min，根据检测器谱图收集目标成分，减压浓缩得到纯度98.6%的独活素。

实施例4：

将白亮独活药材粉碎加6倍体积量的甲醇超声提取2次，每次40min，合并提取液，旋转蒸发浓缩得到棕褐色浸膏，用乙酸乙酯和水（1:1）双相萃取，取上层乙酸乙酯有机相，减压浓缩成浸膏。将体积比5:3:8:3的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水混合，振荡摇匀，使两相达到平衡，静置分层后分离，下相为流动相，上相为固定相，分别对其超声脱气40min后冷却备用；取乙酸乙酯萃取浸膏溶解于等体积的上相和下相溶剂中，过滤，得样品溶液；将配制好的固定相以4ml/min的流速充满高速逆流色谱仪的螺旋管中，开启制备型高速逆流色谱仪，调整主机转速为800rpm，以2ml/min的流速将流动相泵入柱内，待柱内溶剂体系建立动态平衡后，取样品溶液由进样阀进样，然后根据紫外检测谱图收集独活素流分，减压浓缩后再应用高效液相色谱分离纯化，流动相为甲醇-水（90:10），流速12ml/min，根据检测器谱图收集目标成分，减压浓缩得到纯度99.2%的独活素。

Claims

1.一种从白亮独活中提取独活素的方法，其特征在于包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种从白亮独活中提取独活素的方法，其特征在于所述步骤A中超声提取时间每次为20-40min。

3.如权利要求1所述的一种从白亮独活中提取独活素的方法，其特征在于所述步骤C中高速逆流色谱溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，体积比为（3-7）：（3-5）：（4-8）：（2-5）。

4.如权利要求1所述的一种从白亮独活中提取独活素的方法，其特征在于所述步骤C中制备液相色谱分离条件为：流动相为甲醇-水（90:10），流速为10-20ml/min。