CN102836147A - 一种包载紫杉醇的生物可降解纳米复合物及其制备方法 - Google Patents
一种包载紫杉醇的生物可降解纳米复合物及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102836147A CN102836147A CN2011101747511A CN201110174751A CN102836147A CN 102836147 A CN102836147 A CN 102836147A CN 2011101747511 A CN2011101747511 A CN 2011101747511A CN 201110174751 A CN201110174751 A CN 201110174751A CN 102836147 A CN102836147 A CN 102836147A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ptmc
- peg
- paclitaxel
- nano
- complex
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明属生物医药技术领域，涉及一种包载紫杉醇的生物可降解纳米复合物及其制备方法。本发明采用乳化/溶剂蒸发法制备紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物，以PEG-PTMC共聚物为载体，将紫杉醇包载在PTMC的疏水内核中；所制备的紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物能有效地增加紫杉醇的溶解度，且载体材料的PEG长链可起到“隐形”的作用，避免体内网状内皮细胞系统的吞噬，具有长循环效果，能延长血液中的半衰期；并通过控制其粒径实现对肿瘤组织的被动靶向作用，从而提高治疗效果。所述的纳米复合物不含Cremophor EL和乙醇，与市售的紫杉醇注射液比较，可降低药物的毒副作用，增加该药临床应用的安全性。
Description
技术领域
本发明属生物医药技术领域，涉及一种包载抗肿瘤药物紫杉醇的生物可降解纳米复合物及其制备方法。
技术背景
研究公开了紫杉醇(Paclitaxel)是新型抗微管类的抗肿瘤药，其通过促进纺锤体微管蛋白的聚合而促进微管的装配、抑制解聚、保持微管蛋白稳定、抑制细胞有丝分裂；即使在正常微管装配所需要的介质(如三磷酸鸟苷，GTP)缺失的情况下也可产生上述作用，从而形成稳定的、无功能的微管。体外实验证明，紫杉醇具有显著的放射增敏作用，可能是使细胞中止于对放疗敏感的G2和M期；临床上主要用于乳腺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、软组织肉瘤、头颈癌、胃癌、卵巢癌和前列腺癌等。
所述紫杉醇结构式为C47H51NO14，分子量：853.91，结构式如下：
但是由于紫杉醇的溶解度小于1μg/mL，目前临床上仅有两种PTX制剂；其中泰素
制剂是由聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL)和无水乙醇(50∶50，v/v)组成，使用前用生理盐水或葡萄糖溶液稀释5～20倍；尽管在一定程度上增加了药物的溶解度，但给患者却造成了严重的毒副作用如高过敏性、肾毒性、神经毒性、嗜睡、呼吸急促和低血压等；有研究发现，另一种市售PTX制剂-PTX白蛋白结合物(Abraxane)也具有较强的骨髓抑制作用和神经毒性，因此PTX新剂型的开发是一个亟待解决的问题。近年来，有研究发现选择合适的载体可改善和解决紫杉醇的应用缺陷。
聚碳酸酯(PTMC)是生物降解医用高分子材料的重要分支，系二元碳酸的相应聚酯；由于其具有优异的生物相容性、力学性能而应用于缝合线等生物医用领域。所述PTMC在体内或者酶存在的情况下可发生溶蚀性降解而不产生酸性物质，相比其他种类的聚酯具有更好的生物相容性；但是，PTMC疏水性强、降解速率较慢，使其在生物医用领域的研究和应用受到很大限制。目前已知，将碳酸酯(TMC)与其它含有羟基、羧基等亲水性功能团的分子共聚结合，制备两亲性嵌段共聚物，在PTMC原有良好性质基础上提高其亲水性，可有效的调节PTMC的降解速率，将会有利于TMC在药物递释方面的应用；而聚乙二醇(PEG)是由环氧乙烷与水或乙二醇逐步加成聚合而得到的一类相对分子质量较低的水溶性聚醚；PEG无毒性，无免疫原性，Mw小于50000的PEG能通过肾被排至体外，不会在体内产生积蓄毒性，具有良好的生物相容性和安全性。有研究指出，将PEG引入TMC中聚合形成的两亲性嵌段共聚物(PEG-PTMC)可提高TMC的亲水性，调节TMC的降解速率。
发明内容
本发明的目的是提供一种紫杉醇的纳米复合物新剂型，具体涉及一种包载抗肿瘤药物紫杉醇的生物可降解纳米复合物，该纳米复合物能有效地增加紫杉醇的溶解度，且可避免体内网状内皮细胞系统的吞噬，从而提高其在血液中的循环时间，控制纳米复合物的粒径可有效提高紫杉醇的选择性，实现肿瘤组织的被动靶向，提高紫杉醇的抗肿瘤效果。
具体而言，本发明所述的包载抗肿瘤药物紫杉醇的生物可降解纳米复合物，以PEG-PTMC共聚物为载体，将紫杉醇包载在PTMC的疏水内核中，采用乳化/溶剂蒸发法，制成紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物；该紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物能有效地增加紫杉醇的溶解度，且载体材料的PEG长链可起到“隐形”的作用，避免体内网状内皮细胞系统的吞噬，具有一定的长循环效果，从而延长血液中的半衰期；通过控制紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物的粒径可实现对肿瘤组织的被动靶向作用，从而提高治疗效果；
所述的紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物不含Cremophor EL和乙醇。
本发明中，所述的PEG-PTMC共聚物在药物递释方面具有独特的优势，可通过控制嵌段共聚物中的PEG的含量以及共聚物的总分子量，调节共聚物的载药和释药特性。所述PEG-PTMC嵌段共聚物在水溶液中可通过疏水力自发形成具有核壳结构的纳米复合物，该纳米复合物具有疏水嵌段组成的内核，使其具有较高的载药容量，可成为疏水药物储库；其外壳具有柔韧性和亲水性，可大大降低纳米复合物被网状内皮细胞系统识别和摄取的机会，在血液中具有长循环的特点；同时，该纳米复合物粒径尺度约为纳米尺度，从而可通过EPR效应在肿瘤组织富集，实现肿瘤组织的被动靶向。另外PEG-PTMC纳米复合物具有一定缓释作用，能以胞吞的方式进入肿瘤细胞内释药，具有一定的缓释作用。
本发明的另一目的是提供上述包载抗肿瘤药物紫杉醇的生物可降解纳米复合物的制备方法。
本发明的包载抗肿瘤药物紫杉醇的生物可降解纳米复合物的制备方法，其特征在于，其包括步骤：
(1)将PEG-PTMC共聚物、紫杉醇溶于有机溶剂中，使PEG-PTMC共聚物和紫杉醇形成均匀的溶液I；
(2)将溶液I加入到含表面活性剂溶液中，冰浴探头超声，得到初乳II；
(3)将初乳II加入到低浓度的表面活性剂溶液中，搅拌固化得到乳剂III；
(4)将乳剂III在旋转蒸发出去有机溶剂，即制得以PEG-PTMC共聚物为载体的紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂IV；
(5)将紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂IV，离心，除去表面活性剂，以注射用水重悬，得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物混悬液V；
(6)向紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物混悬液V中加入冻干保护剂，过滤除菌；
(7)冷冻干燥除去水分，制得干燥的紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物冻干剂。
本发明中，所述的PEG-PTMC共聚物，即PEGm-PTMCn，其中，m和n分别代表PEG和PTMC在嵌段共聚物中的分子量，m和n为任意大小，m通常为1000，2000，3000，3500，4000等，n通常选用的分子量范围为3000～30000，所述材料可单独或者混合使用；PEG-PTMC共聚物优选PEG1000～4000-PTMC3000～30000的共聚物。
本发明中，所述PEG-PTMC与紫杉醇的质量比为10∶1～1000∶1。
本发明所述步骤(1)中有机溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、乙腈、乙醚、丙酮的任意一种，优选二氯甲烷或三氯甲烷；
所述步骤(1)中PEG-PTMC共聚物和紫杉醇溶解的方法包括搅拌，超声或者加热；使用上述方法可促进PEG-PTMC共聚物和紫杉醇充分溶解；
所述步骤(2)中探头超声功率为100～400W，超声次数为10～50次，超声时间为1～15S，超声间隔时间为1～10S；
所述步骤(3)中表面活性剂溶液为胆酸钠或聚乙烯醇；初乳固化时间为1min～10min；
所述步骤(4)中旋转蒸发温度为25～40℃；
所述步骤(5)中离心除去表面活性剂方法为高速离心或超滤离心；其中，高速离心方法：转速为10000～30000，离心时间为15～60min；超滤离心方法：采用的超滤离心管截留分子量为3000～30000，离心时间为10～120min；
所述步骤(6)中冻干保护剂为甘露醇、乳糖、蔗糖、海藻糖、葡萄糖、麦芽糖、葡聚糖、氨基酸或聚乙二醇中的任一种，或者它们的混合物，优选保护剂为甘露醇；每100毫升冻干溶液中所需冻干保护剂的重量在1％～15％，优选用量10％；
所述步骤(6)中过滤除菌，为经过0.22μm的微孔滤膜过滤除菌。
本发明中，采用所述的制备方法可制备得到载有紫杉醇的PEG-PTMC纳米复合物及其冻干制剂。
本发明利用生物可降解、生物相容性良好的两亲性PEG-PTMC共聚物构建纳米复合物，包载紫杉醇在PTMC分子链形成的疏水性内核中，制备包载紫杉醇的递释系统；取制备的紫杉醇的PEG-PTMC纳米复合物适量，滴于铜网上，用2％磷钨酸负染，自然干燥后于透射电镜(TEM)下观察，结果如图1、图2所示，其粒径在15～250nm之间。
本发明中，所采用的方法为乳化/溶剂蒸发法，但并不局限于该方法，也可采用盐析法、注入法或薄膜分散法制备。
本发明采用MTT法考察包载紫杉醇的PEG-PTMC纳米复合物对肿瘤细胞生长抑制情况，结果表明(如图4、图5所示)，包载紫杉醇的PEG-PTMC纳米复合物对肿瘤细胞显示出与Taxol相当的抑制作用，但空白纳米材料比Taxol基质Cremophor EL具有更好的生物相容性。
本发明以荷有U87原位瘤的裸鼠为动物模型，通过静脉给予荧光探针DiR标记PEG-PTMC纳米复合物，以CRi活体成像仪，观察纳米复合物的体内分布情况和肿瘤部位的被动靶向特性，结果表明(如图6所示)，靶向纳米复合物在脑肿瘤部位的蓄积明显高于普通纳米复合物。
本发明以荷有U87原位瘤的裸鼠为动物模型，在建模后的第8，10，12天，通过静脉分别给予等剂量的包载紫杉醇的PEG-PTMC纳米复合物和Taxol注射液，以生理盐水和空白纳米粒作为空白对照，通过绘制生存曲线考察不同制剂组裸鼠的中位生存期以评价不同制剂的药效，结果表明(如图7所示)，包载抗紫杉醇的PEG-PTMC纳米复合物与Taxol比较可显著延长荷瘤裸鼠的中位生存期。
本发明的载抗肿瘤药物紫杉醇的PEG-PTMC纳米复合物及其冻干制剂，与市售的紫杉醇注射剂不同，不需Cremophor EL和乙醇增溶，仅以生物可降解的PEG-PTMC为载体；与市售的紫杉醇注射液相比，所述冻干制剂可降低药物的毒性，减少药物的不良反应，增加该药临床应用的安全性；且所述冻干制剂能有效的增加紫杉醇的溶解度，且载体材料含有PEG链可起到“隐形”的作用，避免体内网状内皮细胞系统的吞噬，具有一定的长循环效果，从而延长血液中的半衰期；同时，通过控制其粒径可实现对肿瘤组织的被动靶向作用，从而提高治疗效果。
附图说明
图1为本发明的紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物的透射电镜照片(×80000)，其中，制备的紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物分散均匀，且无团聚现象。
图2为本发明的紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物的粒径分布图。
图3为本发明的紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物和紫杉醇的差示扫描热分析图，其中，紫杉醇形成在PEG-PTMC纳米复合物后，紫杉醇的吸热峰消失，表明紫杉醇以分子形式或者固态溶液的形式分布在纳米复合物中。
图4为本发明的包载紫杉醇的PEG-PTMC纳米复合物对U87MG肿瘤细胞生长抑制趋势图，其中，结果表明，载有紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物能有效地促进U87MG肿瘤细胞的凋亡，且纳米复合物的浓度越大对细胞的凋亡量越大。
图5显示了本发明的PEG-PTMC基质与Cremophor EL生物相容性比较情况。
图6显示了本发明的DiR标记的PEG-PTMC纳米复合物，在荷有U87原位瘤的裸鼠体内的分布情况和被动靶向特性。
图7为本发明的荷有U87原位瘤的裸鼠在给予紫杉醇不同制剂后的生存曲线图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做详细说明，但本发明的保护范围不局限于下述实施例。
实施例1
称取40mg PEG(1000)-PTMC(6000)共聚物、2mg紫杉醇，加入1ml二氯甲烷，超声使载体材料和药物充分溶解；将所述溶液加到5ml的2％的聚乙烯醇溶液中，冰浴探头超声，超声功率为300W，超声时间为5s，超声间隔时间为5s，超声次数为20次；超声结束得到初乳，将该初乳滴加到25ml的1％的聚乙烯醇溶液中，磁力搅拌100r/min，搅拌1min之后，在37℃下，旋转蒸发除去二氯甲烷，即得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂。
粒径测定结果显示，制得PEG-PTMC纳米复合物的平均粒径为96±28.1nm nm。
实施例2
称取40mg PEG(3000)-PTMC(6000)共聚物、2mg紫杉醇，加入1ml二氯甲烷，超声使载体材料和药物充分溶解；将所述溶液加到5ml的0.6％的胆酸钠溶液中，冰浴探头超声，超声功率为300W，超声时间为5s，超声间隔时间为5s，超声次数为20次；超声结束得到初乳，将该初乳滴加到25ml的0.3％的胆酸钠溶液中，磁力搅拌100r/min，搅拌1min之后，在37℃下，旋转蒸发除去二氯甲烷，即得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂。
粒径测定结果显示，制得PEG-PTMC纳米复合物的平均粒径为49±8.1nm nm。
实施例3
称取40mg PEG(3000)-PTMC(9000)共聚物、2mg紫杉醇，加入1ml二氯甲烷，超声使载体材料和药物充分溶解；将该溶液加到5ml的0.6％的胆酸钠溶液中，冰浴探头超声，超声功率为300W，超声时间为5s，超声间隔时间为5s，超声次数为15次；超声结束得到初乳，将该初乳滴加到25ml的0.3％的胆酸钠溶液中，磁力搅拌100r/min，搅拌1min之后，在37℃下，旋转蒸发除去二氯甲烷，即得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂。
粒径测定结果显示，制得PEG-PTMC纳米复合物的平均粒径为79±18.8nm nm。
实施例4
称取50mg PEG(2000)-PTMC(15000)共聚物、2mg紫杉醇，加入1ml二氯甲烷，超声使载体材料和药物充分溶解；将该溶液加到5ml的2％的聚乙烯醇溶液中，冰浴探头超声，超声功率为300W，超声时间为5s，超声间隔时间为5s，超声次数为15次；超声结束得到初乳，将该初乳滴加到25ml的1％的聚乙烯醇溶液中，磁力搅拌100r/min，搅拌1min之后，在37℃下，旋转蒸发除去二氯甲烷，即得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂。
粒径测定结果显示，制得PEG-PTMC纳米复合物的平均粒径为158±30.5nm nm。
实施例5
称取40mg PEG(3000)-PTMC(12000)共聚物、2mg紫杉醇，加入1ml二氯甲烷，超声使载体材料和药物充分溶解。将该溶液加到5ml的0.6％的胆酸钠溶液中，冰浴探头超声，超声功率为300W，超声时间为5s，超声间隔时间为5s，超声次数为15次；超声结束得到初乳，将该初乳滴加到25ml的0.3％的胆酸钠溶液中，磁力搅拌100r/min，搅拌1min之后，在37℃下，旋转蒸发除去二氯甲烷，即得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂。
粒径测定结果显示，制得PEG-PTMC纳米复合物的平均粒径为97.4±21.5nm nm。
实施例6
称取50mg PEG(3500)-PTMC(6000)共聚物、2mg紫杉醇，加入1ml二氯甲烷，超声使载体材料和药物充分溶解；将该溶液加到5ml的0.6％的胆酸钠溶液中，冰浴探头超声，超声功率为300W，超声时间为5s，超声间隔时间为5s，超声次数为20次；超声结束得到初乳，将该初乳滴加到25ml的0.3％的胆酸钠溶液中，磁力搅拌100r/min，搅拌1min之后，在37℃下，旋转蒸发除去二氯甲烷，即得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂。
粒径测定结果显示，制得PEG-PTMC纳米复合物的平均粒径为56±9.8nm nm。
实施例7
称取40mg PEG(4000)-PTMC(30000)共聚物、2mg紫杉醇，加入1ml二氯甲烷，超声使载体材料和药物充分溶解；将该溶液加到5ml的2％的聚乙烯醇溶液中，冰浴探头超声，超声功率为300W，超声时间为5s，超声间隔时间为5s，超声次数为15次；超声结束得到初乳，将该初乳滴加到25ml的1％的聚乙烯醇溶液中，磁力搅拌100r/min，搅拌1min之后，在37℃下，旋转蒸发除去二氯甲烷，即得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂。
粒径测定结果显示，制得PEG-PTMC纳米复合物的平均粒径为223±79.4nm nm。
实施例8
称取50mg PEG(3000)-PTMC(30000)共聚物、2mg紫杉醇，加入1ml二氯甲烷，超声使载体材料和药物充分溶解；将该溶液加到5ml的0.6％的胆酸钠溶液中，冰浴探头超声，超声功率为300W，超声时间为5s，超声间隔时间为5s，超声次数为15次；超声结束得到初乳，将该初乳滴加到25ml的0.3％的胆酸钠溶液中，磁力搅拌100r/min，搅拌1min之后，在37℃下，旋转蒸发除去二氯甲烷，即得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂。
粒径测定结果显示，制得PEG-PTMC纳米复合物的平均粒径为247±30.3nm nm。
实施例9
称取40mg PEG(3000)-PTMC(6000)共聚物、2mg紫杉醇，加入1ml二氯甲烷，超声使载体材料和药物充分溶解；将该溶液加到5ml的0.6％的胆酸钠溶液中，冰浴探头超声，超声功率为200W，超声时间为5s，超声间隔时间为5s，超声次数为15次；超声结束得到初乳，将该初乳滴加到25ml的0.3％的胆酸钠溶液中，磁力搅拌100r/min，搅拌1min之后，在37℃下，旋转蒸发除去二氯甲烷，即得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂。
粒径测定结果显示，制得PEG-PTMC纳米复合物的平均粒径为49.5±3.1nm。
实施例10
称取40mg PEG(3000)-PTMC(6000)共聚物、2mg紫杉醇，加入1ml二氯甲烷，超声使载体材料和药物充分溶解；将该溶液加到5ml的0.6％的胆酸钠溶液中，冰浴探头超声，超声功率为150W，超声时间为2s，超声间隔时间为5s，超声次数为15次；超声结束得到初乳，将该初乳滴加到25ml的0.3％的胆酸钠溶液中，磁力搅拌100r/min，搅拌1min之后，在37℃下，旋转蒸发除去二氯甲烷，即得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂。
粒径测定结果显示，制得PEG-PTMC纳米复合物的平均粒径为55±10.7nm。
实施例11
称取40mg PEG(3000)-PTMC(6000)共聚物、2mg紫杉醇，加入1ml二氯甲烷，超声使载体材料和药物充分溶解；将该溶液加到5ml的0.6％的胆酸钠溶液中，冰浴探头超声，超声功率为200W，超声时间为1s，超声间隔时间为1s，超声次数为30次；超声结束得到初乳，将该初乳滴加到25ml的0.3％的胆酸钠溶液中，磁力搅拌100r/min，搅拌1min之后，在37℃下，旋转蒸发除去二氯甲烷，即得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂。
粒径测定结果显示，制得PEG-PTMC纳米复合物的平均粒径为57±23.5nm。
实施例12
称取40mg PEG(3000)-PTMC(6000)共聚物、2mg紫杉醇，加入1ml二氯甲烷，超声使载体材料和药物充分溶解；将该溶液加到5ml的0.6％的胆酸钠溶液中，冰浴探头超声，超声功率为300W，超声时间为5s，超声间隔时间为5s，超声次数为15次；超声结束得到初乳，将该初乳滴加到25ml的0.3％的胆酸钠溶液中，磁力搅拌100r/min，搅拌1min之后，在37℃下，旋转蒸发除去二氯甲烷，即得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂。4℃，14000r/min，高速离心45min，弃去上清，以注射用水复悬，加入6％的甘露醇作为冻干保护剂，过滤除菌，装于西林瓶中，置冰箱-80℃预冻过夜，然后放入冷冻干燥机中冻干48h，得到白色的无塌陷的紫杉醇纳米复合物冻干制剂，该冻干制剂中加入1ml去离子水振摇可在30s内完全复溶。
粒径测定结果显示，冻干复溶后测得纳米复合物的平均粒径为130±37.2nm。
实施例13
称取40mg PEG(3000)-PTMC(9000)共聚物、2mg紫杉醇，加入1ml二氯甲烷，超声使载体材料和药物充分溶解；将该溶液加到5ml的0.6％的胆酸钠溶液中，冰浴探头超声，超声功率为300W，超声时间为5s，超声间隔时间为5s，超声次数为15次；超声结束得到初乳，将该初乳滴加到25ml的0.3％的胆酸钠溶液中，磁力搅拌100r/min，搅拌1min之后，在37℃下，旋转蒸发除去二氯甲烷，即得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂；4℃，4000r/min，以截留分子量为3000的超滤离心管离心30min，弃去上清，以注射用水复悬，加入10％的乳糖作为冻干保护剂，过滤除菌，装于西林瓶中，置冰箱-80℃预冻过夜，然后放入冷冻干燥机中冻干48h，得到白色的无塌陷的紫杉醇纳米复合物冻干制剂，该冻干制剂加入1ml去离子水振摇可在30s内完全复溶。
粒径测定结果显示，冻干复溶后测得纳米复合物的平均粒径为243±68.3nm。
实施例14
包载紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物对U87MG肿瘤细胞生长抑制实验。将U87MG细胞以0.25％的胰蛋白酶消化，每孔104细胞接种于96孔培养板。37℃下，5％CO2条件下培养24h；然后弃去培养液，加入一定浓度的紫杉醇溶液(Taxol溶液)、包载紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物，继续孵育72h。待孵育结束，弃去培养液，加入5mg/ml的MTT试剂，37℃下继续孵育4h。待孵育结束，弃去MTT溶液，每孔加入DMSO溶剂200μl溶解甲臢沉淀，轻轻振摇1min，以酶联免疫仪在570nm测定OD值，计算细胞抑制率。
结果表明：包载抗肿瘤药物紫杉醇的PEG-PTMC纳米复合物对肿瘤细胞显示出与Taxol相当的抑制作用，但是空白纳米材料比Taxol的基质Cremophor EL具有更好的生物相容性。
实施例15
取含有5×105个U87 MG细胞的悬液种植与雄性balb/c裸鼠的脑纹状体中，在植瘤后的第8，10，12天，通过静脉分别给予等剂量的包载抗肿瘤药物紫杉醇的PEG-PTMC纳米复合物和Taxol制剂，以生理盐水和空白纳米材料作为空白对照，通过绘制生存去曲线考察不同制剂组裸鼠的中位生存期以评价不同制剂的药效。
结果表明，包载抗肿瘤药物紫杉醇的PEG-PTMC纳米复合物与Taxol比较可显著延长荷瘤裸鼠的中位生存期。
Claims (15)
1.一种包载抗肿瘤药物紫杉醇的生物可降解纳米复合物，其特征在于，以PEG-PTMC共聚物为载体，紫杉醇包载在PTMC的疏水内核中；所述的PEG-PTMC共聚物选自PEG1000～4000-PTMC3000～30000的共聚物，所述PEG-PTMC与紫杉醇的质量比为10∶1～1000∶1。
2.按权利要求1所述的包载抗肿瘤药物紫杉醇的生物可降解纳米复合物，其特征在于，所述纳米复合物不含Cremophor EL和乙醇。
3.一种包载抗肿瘤药物紫杉醇的生物可降解纳米复合物的制备方法，其特征在于，其包括步骤：
(1)将PEG-PTMC共聚物、紫杉醇溶于有机溶剂中，使PEG-PTMC共聚物和紫杉醇形成均匀的溶液I；
(2)将溶液I加入到表面活性剂溶液中，冰浴探头超声，得到初乳II；
(3)将初乳II加入到低浓度的表面活性剂溶液中，搅拌固化得到乳剂III；
(4)将乳剂III旋转蒸发出去有机溶剂，即制得以PEG-PTMC共聚物为载体的紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂IV；
(5)将紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物制剂IV，离心，除去表面活性剂，以注射用水重悬，得紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物混悬液V；
(6)向紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物混悬液V中加入冻干保护剂，过滤除菌；
(7)冷冻干燥除去水分，制得干燥的紫杉醇PEG-PTMC纳米复合物冻干剂。
4.按权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中有机溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、乙腈、乙醚或丙酮。
5.按权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中有机溶剂选自二氯甲烷或三氯甲烷。
6.按权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中采用搅拌，超声或者加热的方法溶解PEG-PTMC共聚物和紫杉醇。
7.按权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中探头超声功率为100～400W，超声次数为10～50次，超声时间为1～15S，超声间隔时间为1～10S。
8.按权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中表面活性剂溶液为胆酸钠或聚乙烯醇；初乳固化时间为1min～10min。
9.按权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中旋转蒸发温度为25～40℃。
10.按权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(5)中采用高速离心或超滤离心除去表面活性剂；其中，高速离心方法中，转速为10000～30000，离心时间为15～60min；超滤离心方法中，超滤离心管截留分子量为3000～30000，离心时间为10～120min。
11.按权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(6)中冻干保护剂选自甘露醇、乳糖、蔗糖、海藻糖、葡萄糖、麦芽糖、葡聚糖、氨基酸或聚乙二醇中的任一种，或者它们的混合物。
12.按权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(6)中冻干保护剂为甘露醇。
13.按权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(6)中，每100毫升冻干溶液中所需冻干保护剂的重量为1％～15％。
14.按权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(6)中，每100毫升冻干溶液中所需冻干保护剂的重量为10％；
15.按权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(6)中采用0.22μm的微孔滤膜过滤除菌。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201110174751.1A CN102836147B (zh) | 2011-06-25 | 2011-06-25 | 一种包载紫杉醇的生物可降解纳米复合物及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201110174751.1A CN102836147B (zh) | 2011-06-25 | 2011-06-25 | 一种包载紫杉醇的生物可降解纳米复合物及其制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102836147A true CN102836147A (zh) | 2012-12-26 |
| CN102836147B CN102836147B (zh) | 2014-07-09 |
Family
ID=47364052
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201110174751.1A Expired - Fee Related CN102836147B (zh) | 2011-06-25 | 2011-06-25 | 一种包载紫杉醇的生物可降解纳米复合物及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102836147B (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105560179A (zh) * | 2016-01-06 | 2016-05-11 | 四川大学 | Mpeg-ptmc两嵌段共聚物载药胶束及其制备方法和应用 |
| CN110790911A (zh) * | 2019-11-05 | 2020-02-14 | 临沂大学 | 一种两亲性聚三亚甲基碳酸酯及其制备方法和应用 |
| CN111249475A (zh) * | 2020-02-24 | 2020-06-09 | 爱尔眼科医院集团股份有限公司 | 一种药物和基因双重运载系统、其制备方法及应用 |
| WO2021150962A1 (en) * | 2020-01-24 | 2021-07-29 | W. L. Gore & Associates, Inc. | Sustained-release matrices for adventitial or periadventitial neural ablation and uses thereof |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101011357A (zh) * | 2006-11-16 | 2007-08-08 | 西安力邦医药科技有限责任公司 | 一种紫杉醇脂质体制剂的制备方法 |
| CN101947333A (zh) * | 2010-08-27 | 2011-01-19 | 安泰科技股份有限公司 | 一种可生物降解载药高分子材料支架及其制备方法 |
-
2011
- 2011-06-25 CN CN201110174751.1A patent/CN102836147B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101011357A (zh) * | 2006-11-16 | 2007-08-08 | 西安力邦医药科技有限责任公司 | 一种紫杉醇脂质体制剂的制备方法 |
| CN101947333A (zh) * | 2010-08-27 | 2011-01-19 | 安泰科技股份有限公司 | 一种可生物降解载药高分子材料支架及其制备方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| HONGLIANG XIN 等: "Enhanced anti-glioblastoma efficacy by PTX-loaded PEGylated poly(-caprolactone) nanoparticles: In vitro and in vivo evaluation", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF PHARMACEUTICS》 * |
| 陈维: "功能性生物可降解聚碳酸酯的设计合成", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库（电子期刊）》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105560179A (zh) * | 2016-01-06 | 2016-05-11 | 四川大学 | Mpeg-ptmc两嵌段共聚物载药胶束及其制备方法和应用 |
| CN110790911A (zh) * | 2019-11-05 | 2020-02-14 | 临沂大学 | 一种两亲性聚三亚甲基碳酸酯及其制备方法和应用 |
| WO2021150962A1 (en) * | 2020-01-24 | 2021-07-29 | W. L. Gore & Associates, Inc. | Sustained-release matrices for adventitial or periadventitial neural ablation and uses thereof |
| CN111249475A (zh) * | 2020-02-24 | 2020-06-09 | 爱尔眼科医院集团股份有限公司 | 一种药物和基因双重运载系统、其制备方法及应用 |
| CN111249475B (zh) * | 2020-02-24 | 2024-05-10 | 爱尔眼科医院集团股份有限公司 | 一种药物和基因双重运载系统、其制备方法及应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102836147B (zh) | 2014-07-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Xiong et al. | A NIR light triggered disintegratable nanoplatform for enhanced penetration and chemotherapy in deep tumor tissues | |
| Zhang et al. | Pharmacokinetics, biodistribution, efficacy and safety of N-octyl-O-sulfate chitosan micelles loaded with paclitaxel | |
| Kim et al. | The delivery of doxorubicin to 3-D multicellular spheroids and tumors in a murine xenograft model using tumor-penetrating triblock polymeric micelles | |
| CN101804021B (zh) | 载多烯紫杉醇纳米粒混合胶束制剂及冻干剂的制备方法 | |
| CN112089704B (zh) | 一种仿生纳米载体及其制备方法和应用 | |
| CN106806343A (zh) | 一种叶酸和聚多巴胺修饰的肿瘤靶向介孔二氧化硅纳米粒及制备方法与应用 | |
| Li et al. | Reduction breakable cholesteryl pullulan nanoparticles for targeted hepatocellular carcinoma chemotherapy | |
| Zhang et al. | Improving anti-tumor activity of curcumin by polymeric micelles in thermosensitive hydrogel system in colorectal peritoneal carcinomatosis model | |
| EP3421519B1 (en) | Ovarian cancer specifically targeted biodegradable amphiphilic polymer, polymer vesicle prepared thereby and use thereof | |
| Bhatnagar et al. | Hyaluronic acid grafted PLGA copolymer nanoparticles enhance the targeted delivery of Bromelain in Ehrlich’s Ascites Carcinoma | |
| EP2515946A2 (en) | Nanoconjugates and nanoconjugate formulations | |
| CN101422615B (zh) | 一种冬凌草甲素聚合物胶束给药制剂及制备方法 | |
| CN104758255A (zh) | 一种姜黄素胶束载药系统及其制备方法 | |
| CN105566511B (zh) | 电荷翻转普鲁兰多糖衍生物及其合成方法和用途 | |
| CN109771663B (zh) | 一种酸响应性抗癌纳米药物的制备及应用 | |
| Wang et al. | Two novel nanoscale preparations of micelle and thermosensitive hydrogel for docetaxel to treat malignant tumor | |
| CN104666251A (zh) | 一种半乳糖胺和聚多巴胺修饰的肝癌靶向纳米粒及制备方法与应用 | |
| Lin et al. | A comparative investigation between paclitaxel nanoparticle-and nanocrystal-loaded thermosensitive PECT hydrogels for peri-tumoural administration | |
| Yi et al. | Synthesis, characterization, and formulation of poly-puerarin as a biodegradable and biosafe drug delivery platform for anti-cancer therapy | |
| CN102836147B (zh) | 一种包载紫杉醇的生物可降解纳米复合物及其制备方法 | |
| CN111479593A (zh) | 奎尼酸-修饰的纳米粒子及其用途 | |
| CN102766262A (zh) | 双功能纳米粒载体及双功能纳米粒制剂的制备方法 | |
| CN103800915B (zh) | 一种靶向整合素受体的联合载药胶束及其制备方法 | |
| CN104434792A (zh) | 聚合物胶束及其制备方法和抗肿瘤药物组合物、制剂及其制备方法 | |
| CN105153428A (zh) | 一种用于粘液渗透的pH响应性高分子胶束及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20140709 Termination date: 20170625 |