CN102805341B - 一种山芪参胶囊的五次发酵制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种山芪参胶囊的五次发酵制备方法，所述山芪参胶囊的活性成分包括重量份为葛根10.0-30.0、黄芪8.7-25.5、山药5.0-15.0、桑叶2.5-7.5、丹参2.5-7.5的中药原料经益生菌接种，置于高温有氧和低温无氧条件下，五次发酵制成的发酵液，与0.0035-0.0105重量份的吡啶甲酸铬混合而成。本发明采用采用人体肠道内的多种益生菌，五次发酵，产品经长期临床和实践证明，发酵中药相比传统中药药效提高4-28倍。
Description
技术领域
本发明属于保健食品领域，特别涉及一种山芪参胶囊的五次发酵制备方法。
背景技术
山芪参胶囊为效果显著、安全低毒、配方精简的辅助降血糖药物，为中国国家药监局批准上市的保健食品，该产品已经申请专利CN2011104129944,是由精选的葛根、黄芪、山药、桑叶、丹参等5味中药材经过科学配比制备而成，经功能试验和人体试食试验均表明本发明产品具有显著的辅助降糖效果，经多年的临床应用表明，有效率达到99%以上；经安全性试验表明，本发明产品安全低毒，符合国家规定的人体安全性标准。然而，由于中药在人体内需要消化分解过程，加之中药中有较多的无治疗活性的大分子物质，对于产品的疗效会有较大影响，因而，只有对山芪参胶囊的制备工艺的不断改进，才能进一步提高该药物的疗效。
发明内容
本发明提供了一种具有更高治愈率的山芪参胶囊的五次发酵制备方法，具体的技术方案为：
本发明的山芪参胶囊的五次发酵制备方法，保留原有山芪参胶囊所需的中药原料组合及配比，即葛根10.0-30.0、黄芪8.7-25.5、山药5.0-15.0、桑叶2.5-7.5、丹参2.5-7.5，经益生菌接种，五次发酵制成的发酵液，与0.0035-0.0105重量份的吡啶甲酸铬混合而成，接入的菌种重量占总重量的10-15%，第五次发酵至每ml活菌数达到个105-109，所述五次发酵的条件为：
第一次发酵：将各中药原料单独发酵，将各益生菌种分别接种于培养基中，培养基的重量份组成包括K2HPO40.5-1.5，MgSO40.5-1，NaCl1.5-2.5、NaHCO30.1-0.3，起始pH值为6.2-7.2，培养温度25-27℃，摇床转速120-180转/分钟，培养时间170-230小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理得第一次发酵液、待用；
第二次发酵：取各个药材原料的第一次发酵液，将各益生菌种分别接种于培养基中，继续单独发酵，培养基同第一次发酵，起始pH值为6.2-7.2，接种量6-12％，培养温度25-27℃，摇床转速140-200转/分钟，培养时间160-200小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理，得第二次发酵液、待用；
第三次发酵：取各个药材原料的第二次发酵液，混合，将各益生菌种分别接种于培养基中，起始pH值为6.2-7.2；培养基同第一次发酵，接种量5-12％，培养温度25-27℃，搅拌转速120-160转/分钟，培养时间120-200小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理，得第三次发酵液、待用；
第四次发酵：取第三次发酵液，将各益生菌种分别接种于培养基中，培养基同第一次发酵，起始pH值为6.2-7.2，接种量5-12％，培养温度25-27℃，搅拌转速100-190转/分钟，培养时间100-180小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理，得第四次发酵液、待用；
第五次发酵：取第四次发酵液，培养基同第一次发酵，起始pH值为6.2-7.2，将各益生菌种分别接种于培养基中，在37℃左右发酵12小时，获得的发酵液过滤，浓缩，干燥，即得。
为了获得更好的发酵效果，本发明的中药原料在发酵前，可先经二氧化碳超临界提取后经益生菌接种，其中萃取温度45-60℃、解析压力6-8MPa、解析温度30-40℃、萃取压力20-35MPa、萃取时间2-3小时。
本发明的益生菌选自但不限于高温放线菌、酵母菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、明串珠菌、保加利亚乳杆菌、地衣芽孢杆菌、农杆菌、青春双歧杆菌的一种或组合，均为已被市售或其他方式公开菌种。
本发明中益生菌的较佳的重量份配比为酵母菌1-3、嗜热链球菌1-3、嗜酸乳杆菌1-3、明串珠菌1-3、保加利亚乳杆菌1-3。
本发明的各次发酵中，中药原料与培养基按1∶3-6混合获得最佳效果。
本发明的更优选的中药原料重量份配比为葛根16.0-24.0、黄芪14.0-21.0、山药8.0-12.0、桑叶4.0-6.0、丹参4.0-6.0，与0.0056-0.0084重量份的吡啶甲酸铬配伍使用。
最佳的是按如下重量份中药原料与280mg的吡啶甲酸铬制成1000粒胶囊，葛根800g、黄芪700g、山药400g、桑叶200g、丹参200g。
本发明的有益效果为：采用五次发酵，模拟中药在人体内的消化分解过程，采用现代生物工程技术，在人体外建立一个“工业化肠胃系统”，采用人体肠道内的多种益生菌，对中药进行预消化、分解和转化，把大分子的中间物质，分解转化成为能够被直接吸收的有效小分子物质。人体试食证明，本发明方法制得的产品相比传统山芪参胶囊药效提高4-28倍。下面通过试验例对本发明做进一步说明：
试验例人体试食试验
1材料和方法
1.1样品：五次发酵法山芪参胶囊（试食组服用）和传统山芪参胶囊（对照组服用）均由北京阳光一佰生物技术开发有限公司提供。食用方法
为每日2次，每次2粒。
对照组数据引用专利CN2011104129944试食试验的“试食组”数据。
1.2受试者选择
1.2.1纳入标准：征集经饮食控制或口服降糖药后病情稳定、不需要更换药物品种及剂量、只服用维持量降糖药的成年II型糖尿病例，年龄在18-65岁，空腹血糖≥7.8mmol/L，或餐后2小时血糖≥11.1mmol/L。
1.2.2排除标准
1.2.2.1I型糖尿病人。
1.2.2.2年龄在18-65岁以外者，妊娠或哺乳妇女，对受试样品过敏者。
1.2.2.3有严重心、肝、肾等并发症，或合并有其他严重原发疾病，精神病患者，服用糖皮质激素或其它影响血糖药物者。
1.2.2.4不合作者，无法判断疗效或资料不全者。
1.2.2.5近3个月内有糖尿病酮症、酸中毒以及感染者。
1.2.2.6短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判定者。
1.3试验设计与分组：随机分为受试组和对照组。各组采用自身对照设计，两组间对照设计。
1.4试食方法：54例受试者，在原服用的降糖药物品种及剂量均不变的基础上，加服五次发酵山芪参胶囊，服用方法均为每日二次，每次2粒。试食者原饮食习惯不变。
1.5仪器与试剂：CYSMEX-SY18001型血球计数仪，Ci8200雅培生化-免疫工作站，长春迪瑞-H500全自动尿液分析仪。
结果：
表1试食前后空腹血糖比较（mmol/L,X±S）
#表示自身前后比较P<0.05*表示两组间比较P<0.05
表6空腹尿糖结果（X±S）
表7糖尿病症状治愈率比较
结果与判定
实验周期1个月，结果表明，五次发酵法山芪参胶囊能使II型糖尿病人的空腹血糖平均下降1.70+1.97mmol/L（下降17.0%），餐后血糖下降3.90±3.62mol/L（下降22.8%），有效率提高达8.6-18.6%。
具体实施方式
最佳实施例制备1000粒胶囊
中药原料：葛根800g、黄芪700g、山药400g、桑叶200g丹参200g；
吡啶甲酸铬280mg；
培养基：K2HPO4∶MgSO4∶NaCl∶NaHCO3=1∶0.5∶2∶0.2；
中药原料：培养基=1∶4；
益生菌的重量份配比：酵母菌∶嗜热链球菌∶嗜酸乳杆菌∶明串珠菌∶保加利亚乳杆菌=1∶1∶1∶2∶1∶2
具体方法为：
A超临界萃取
取所有中药原料经二氧化碳超临界提取，其中萃取温度40-60℃、解析压力6-8Mpa、解析温度30-45℃、萃取压力20-30Mpa、萃取时间1-3小时。
B五次发酵
第一次发酵：将各中药原料单独发酵，将各益生菌种分别接种于培养基中，起始pH值为7，培养温度25℃，摇床转速140转/分钟，培养时间200小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理得第一次发酵液、待用，；
第二次发酵：取各个药材原料的第一次发酵液，将各益生菌种分别接种于培养基中，继续单独发酵，起始pH值为7，接种量10％，培养温度25℃，摇床转速200转/分钟，培养时间160小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理，得第二次发酵液、待用；
第三次发酵：取各个药材原料的第二次发酵液，混合，将各益生菌种分别接种于培养基中，起始pH值为7；接种量10％，培养温度25℃，搅拌转速140转/分钟，培养时间120小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理，得第三次发酵液、待用；
第四次发酵：取第三次发酵液，将各益生菌种分别接种于培养基中，起始pH值为7，接种量10％，培养温度25℃，搅拌转速140转/分钟，培养时间180小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理，得第四次发酵液、待用；
第五次发酵：取第四次发酵液，培养基同第一次发酵，起始pH值为6.2-7.2，将各益生菌种分别接种于培养基中，在37℃左右发酵12小时，获得的发酵液过滤，浓缩，干燥，即得。
C成囊
将五次发酵后的活性物质与吡啶甲酸铬充分混合后，加入适量辅料，按照常规胶囊制备技术，制得1000粒。
以上所述实施例仅仅是本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。
Claims (1)
1.一种山芪参胶囊的五次发酵制备方法，其特征在于，制备1000粒山芪参胶囊包括：
中药原料：葛根800g、黄芪700g、山药400g、桑叶200g丹参200g；
吡啶甲酸铬280mg；
培养基：K2HPO4∶MgSO4∶NaCl∶NaHCO3＝1：0.5：2：0.2；
中药原料：培养基＝1∶4；
益生菌的重量份配比：酵母菌∶嗜热链球菌∶嗜酸乳杆菌∶明串珠菌∶保加利亚乳杆菌＝1-3∶1-3∶1-3∶1-3∶1-3
具体方法为：
A超临界萃取
取所有中药原料经二氧化碳超临界提取，其中萃取温度40-60℃、解析压力6-8Mpa、解析温度30-45℃、萃取压力20-30Mpa、萃取时间1-3小时；
B五次发酵
第一次发酵：将各中药原料单独发酵，将各益生菌种分别接种于培养基中，起始pH值为7，培养温度25℃，摇床转速140转/分钟，培养时间200小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理得第一次发酵液、待用；
第二次发酵：取各个药材原料的第一次发酵液，将各益生菌种分别接种于培养基中，继续单独发酵，起始pH值为7，接种量10％，培养温度25℃，摇床转速200转/分钟，培养时间160小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理，得第二次发酵液、待用；
第三次发酵：取各个药材原料的第二次发酵液，混合，将各益生菌种分别接种于培养基中，起始pH值为7；接种量10％，培养温度25℃，搅拌转速140转/分钟，培养时间120小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理，得第三次发酵液、待用；
第四次发酵：取第三次发酵液，将各益生菌种分别接种于培养基中，起始pH值为7，接种量10％，培养温度25℃，搅拌转速140转/分钟，培养时间180小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理，得第四次发酵液、待用；
第五次发酵：取第四次发酵液，培养基同第一次发酵，起始pH值为6.2-7.2，将各益生菌种分别接种于培养基中，在37℃左右发酵12小时，获得的发酵液过滤，浓缩，干燥，即得；
C成囊
将五次发酵后的活性物质与吡啶甲酸铬充分混合后，加入适量辅料，按照常规胶囊制备技术，制得1000粒。
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