CN102805107A - 一种防治苹果轮纹腐烂病的微生物制剂及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用微生物制剂有效防治苹果轮纹病和去除果树腐烂树皮的技术。它是采用枯草芽孢杆菌活菌制剂，通过果面、枝干喷雾或涂抹，防止苹果轮纹病的发生、扩展，本发明通过实验证明能够有效防治苹果果实轮纹病和枝干轮纹病。
Description
技术领域
本发明涉及一种苹果轮纹腐烂病的微生物制剂及应用，属于微生物领域。
背景技术
苹果果实轮纹病和枝干轮纹病是苹果树重要病害之一，为果品生产的重大威胁，严重影响了苹果的品质、产量和保鲜存储。枯草芽胞杆菌是一种耐盐，耐热、好氧且具有广泛生存适应能力的细菌，能够拮抗多种病原微生物，能够很好的拮抗苹果轮纹病病原菌。枯草芽孢杆菌生长繁殖时能够产生纤维素酶和木质素酶，能够抑制病原菌的侵染，并分解腐烂的树皮，从而减轻了病害的进一步扩展。
发明内容
1．枯草芽孢杆菌菌种的活化
将保存在冷冻冰箱中的菌种接种到牛肉膏蛋白胨培养基试管内，37℃恒温培养24h；
2．一级种子的制备
配制牛肉膏蛋白胨摇瓶培养基，用500mL三角瓶分装，装液量200mL，高压灭菌后接入活化后的枯草芽孢杆菌，37℃，220r/min培养24h；
3．二级种子的制备
配制种子罐培养基，培养基组合如下：牛肉膏 0.3%，蛋白胨1%，氯化钠 0.5%，葡萄糖0.5%。将摇床培养的种子培养基按5%接种量接入500L种子罐， 37℃,180r/min，通气比1:1培养24h；
4．发酵罐的培养
发酵罐培养基配方比例如下：麦麸1.2%，葡萄糖0.5%，豆粕0.5%，磷酸二氢钾0.02%，121℃，0.103MPa灭菌30min；将种子罐培养的种子转移发酵罐, 37℃,220r/min，通气比1:1培养至产生芽胞为止；
5．压滤浓缩
按发酵罐干物质重量1:1添加硅藻土吸附，吸附后用板框压滤机压滤，压滤后采用沸腾干燥机70℃低温烘干。
6．含菌量检测
采用稀释平板法检测干燥后滤饼的含菌量
7．原料混配
将干燥后菌剂按比例加入硅藻土稀释至芽孢浓度浓度≥100亿个/g，按重量比加2%的润湿剂，8%的助悬剂；
8．粉碎
将混合好的物料加入气流粉碎机，细度控制325～400目，粉碎后检测可湿性粉剂含菌量、悬浮性、润湿性等技术指标，达标后即为微生物制剂。
9．应用
该微生物制剂用来防治苹果轮纹病，应用方法是4月份果树开花期用稀释100倍微生物制剂喷施或涂抹树干粗皮，6月份果实套袋前用稀释1000倍微生物制剂喷施果面，7-8月份雨水较多时再用该微生物制剂喷施或涂抹处理树干病组织。
应用实例1
时间：2009年4月中旬
地点：山东淄博市沂源县东里镇香磨村
实验品种：红富士，树龄12年
试验分四个处理，每次处理选取发病果树6棵，处理1为甲基托布津100倍液涂抹树干；处理2为人工刮皮并用100倍甲基托布津处理创伤面；处理3为稀释100倍100亿/g的微生物制剂处理粗皮；处理4为空白对照。
用药分三次进行，2009年4月中旬用药一次， 2009年7月中旬用药一次。
苹果枝干轮纹病防治去除病组织效果按以下分级标准：
1级：病斑不扩散并病组织明显脱落减少； 2级：病瘤扩散，但病组织明显脱落减少； 3级：主干、骨干枝病瘤增多，病斑连成片，病组织未脱落； 4级：主干、骨干枝上有较多连片的病斑，病组织未脱落；
病情指数=100×∑（各级病株数×各级代表值）/(调查总株数×最高级代表值)
防治效果＝100×（对照区病情指数—防治区病情指数）/对照区病情指数
表1 本发明防治苹果轮纹病田间试验结果
| 处理方法 | 平均产量kg/棵 | 防治效果 | 5%显著水平 |
| 空白对照 | 175.50 | 0 | a |
| 处理1 | 197.40 | 74.5 % | b |
| 处理2 | 184.20 | 71.2% | b |
| 处理3 | 211.40 | 83.4% | c |
应用实例2
时间：2009年4月上旬
地点：山东临沂市蒙阴县野店镇野店村
实验品种：烟富，树龄15年
试验分四个处理，每处理选取发病果树6棵，处理1为甲基托布津100倍液涂抹树干；处理2为人工刮皮并用100倍甲基托布津处理创伤面；处理3为稀释100倍300亿/g的微生物制剂处理粗皮；处理4为空白对照。
用药分两次进行，2009年4月中旬用药一次， 2009年7月中旬用药一次
苹果枝干轮纹病防治去除病皮效果按以下分级标准：
1级：病斑不扩散并病组织明显脱落减少； 2级：病瘤扩散，但病组织明显脱落减少； 3级：主干、骨干枝病瘤增多，病斑连成片，病组织未脱落； 4级：主干、骨干枝上有较多连片的病斑，病组织未脱落；
病情指数=100×∑（各级病株数×各级代表值）/(调查总株数×最高级代表值)
防治效果＝100×（对照区病指—防治区病指）/对照区病指
表2 本发明防治苹果枝干轮纹病田间试验结果
| 处理方法 | 平均产量kg/棵 | 防治效果 | 5%显著水平 |
| 空白对照 | 134.50 | 0 | A |
| 处理1 | 145.60 | 72.4% | B |
| 处理2 | 147.70 | 74.6% | B |
| 处理3 | 161.20 | 87.5% | c |
应用实例 3
时间：2009年4月，
地点：青州市何官镇口埠村桃源居果园
实验品种：富士2000，树龄8年
选取24棵树势相同的果树，分为3组，每组6棵，采用喷雾方式处理果实表面，处理1为清水对照；处理2为1000倍甲基托布津喷雾；处理3为1000倍本发明稀释液喷雾。
2009年4月中旬，果树开花后施药一次，2009年6月上旬套袋前喷药一次，
计算苹果树每组处理果实轮纹病发病率和防效。
表3本发明防治苹果果实轮纹病试验结果
| 处理方法 | 发病率 | 防治效果 | 5%显著水平 |
| 处理一 | 11% | 0 | A |
| 处理二 | 3% | 72.7% | B |
| 处理三 | 1% | 90.9% | c |
Claims (2)
1.该微生物制剂其特征在于含有下列活性成分：≥100亿个/g枯草芽孢杆菌活菌制剂，该微生物制剂由10%的菌剂、80%吸附剂、2%润湿剂、8%助悬剂组成的可湿性粉剂。
2.该发明用来防治苹果轮纹病，其特征在于4月份果树开花期用本发明稀释100倍喷雾或涂抹树干，6月份果实套袋前用本发明稀释1000倍喷雾，7-8月份雨水较多时用本发明稀释100倍喷施或涂抹处理树干病组织。
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