CN107058182B - 一种解淀粉芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌复配微生物菌剂及其制备方法和应用 - Google Patents

一种解淀粉芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌复配微生物菌剂及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN107058182B
CN107058182B CN201710255124.8A CN201710255124A CN107058182B CN 107058182 B CN107058182 B CN 107058182B CN 201710255124 A CN201710255124 A CN 201710255124A CN 107058182 B CN107058182 B CN 107058182B
Authority
CN
China
Prior art keywords
bacillus
bacillus amyloliquefaciens
microbial bacterial
bacterial agent
microbial
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201710255124.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107058182A (zh
Inventor
陈秀蓉
杨成德
赵智慧
薛莉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Liu Bingbing
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201710255124.8A priority Critical patent/CN107058182B/zh
Publication of CN107058182A publication Critical patent/CN107058182A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107058182B publication Critical patent/CN107058182B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/10—Animals; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F11/00—Other organic fertilisers
    • C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Fertilizers (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

本发明提供了一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和一种死谷芽孢杆菌(B.vallismortis)菌株，保藏编号分别为CGMCC No.13718和CGMCC No.13719。本发明还提供了一种微生物菌剂、其制备方法及在根腐病原菌抑菌和对马铃薯促生作用中的应用。本发明所述的菌株和菌剂能够作为微生物农药和肥料使用，能够抑制镰刀菌（Fusarium solani），其抑菌率在72.2%以上；对马铃薯有促进作用，可以作为防治根腐病专用微生物农药和微生物肥料使用，从而可以克服现有技术中化学农药环保性差、易产生抗药性和安全性差的缺陷，以实现环保性好、不易产生抗药性和安全性好的优点。

Description

一种解淀粉芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌复配微生物菌剂及其制 备方法和应用
技术领域
本发明属于微生物农药和微生物肥料技术领域，具体涉及一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和一株死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)及其微生物菌剂和应用。
背景技术
随着化学农药的大量、频繁使用，环境污染、农药残留和增加抗性等问题也越来越严重，植物病害的生物防治成为了研究热点，其中尤以植物内生菌作为拮抗菌的研究得到众多学者的观注。植物内生细菌是指生活在植物的根、茎、叶、花、果实和种子中，但对植物没有任何实质性伤害的细菌，其具有多种生物学功能，特别是抑菌功能成为生防菌资源的有力支撑。研究发现植物内生菌对植物有促进生长的作用，这些促生作用主要体现在内生细菌通过产IAA、固氮作用和通过解磷或溶磷作用使植物能够尽可能的得到养分的补充，从而使植物对生物量进行了积累；植物内生细菌也可以通过分泌抑菌物质、与病原菌竞争营养空间及诱导植物获得抗病性阻止或降低病原菌对植物的侵染或造成的危害。以内生细菌为菌种资源研制的微生物农药不易产生抗药性，不伤害天敌，且能利用农副产品甚至工业废水广泛生产，应用于农业生产后为生产绿色或无公害农产品提供了一个新的途径。
大量使用化学氮肥、磷肥和钾肥会导致重金属在土体中累积、资源与能源大量消耗、环境污染，且其利用率低，未被吸收利用的氮肥在农田中流失或挥发，对地下水资源、土壤和空气造成了严重污染，使农畜产品的有毒物质超标，给人类健康带来了极大的危害，同时化肥的长期大量施用破坏土壤团粒结构，造成土壤板结，肥力下降。
微生物肥料作为一种新型肥料，施入土壤后，通过其特定菌株的快速繁殖，能固定大气中的氮素、释放土壤中固定态的磷、钾元素，使得环境的养分潜力得以充分发挥，并为作物生长营造一个良好的土壤微生物环境，在减少化肥用量、降低环境污染、提高农作物品质等方面具有重要意义。尤其是集抑菌、固氮、解磷、解钾和作物生长素于一身的复合微生物肥料的研发，在农业可持续发展中有举足轻重的作用。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中化学农药和化肥环保性差、易产生抗药性和安全性差的缺陷，提供一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和一株死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)及其微生物菌剂和应用，所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)具有广谱杀菌活性和促生能力，可用来制备环保性好、不易产生抗药性和安全性好的内生芽孢杆菌微生物菌剂。另外，所述菌株和菌剂能够作为微生物农药和肥料使用，能够抑制镰刀菌（Fusarium solani），其抑菌率在72.2%以上；对马铃薯有促进作用，可以作为防治根腐病专用微生物农药和微生物肥料使用，从而可以克服现有技术中化学农药环保性差、易产生抗药性和安全性差的缺陷，以实现环保性好、不易产生抗药性和安全性好的优点。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
本发明从高寒草地珠芽蓼(Polygonum viviparum)、紫花针茅(Stipa purpurca Griseb)，线叶嵩(Kobreasia Capillifolia)，秦艽(Gentiana macrophy pall)和乳白香青(Anaphalis Lactea Maxin)等的内生细菌中筛选获得对马铃薯病原菌具有抑菌和对马铃薯具促生作用的内生细菌：解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)菌株，并对其生物学功能进行了研究，优化了其培养条件及发酵条件，并进行了防治试验，提供了2株生物防治和生物菌肥的菌种资源和其菌剂的制备方法。
一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )，所述解淀粉芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC No.13718。
一种死谷芽孢杆菌（B. vallismortis），所述死谷芽孢杆菌的保藏编号为CGMCCNo.13719。
一种微生物菌剂，所述微生物菌剂含有上述的解淀粉芽孢杆菌的活菌体和死谷芽孢杆菌的活菌体。
进一步的，以所述微生物菌剂的总重量为基准，所述解淀粉芽孢杆菌的活菌体和死谷芽孢杆菌的活菌体的含量共为6.6×1011 cfu/g ~6.6×1012 cfu/g。
进一步的，所述微生物菌剂中还含有发酵基质，所述发酵基质为草炭、有机肥、骨粉的混合物。
进一步的，以所述微生物菌剂的总重量为基准，所述菌体的质量百分比含量为5-15%，其余为发酵基质。
所述的微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：
1）制备种子液：分别将所述解淀粉芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌两种菌的单个拮抗菌株在LB平板上划线培养，48 h后挑取单菌落接入50 mL NB培养液中，28℃，150 r/min下培养12 h得种子液，用灭菌蒸馏水调节OD600为0.5后，以2%的接种量接入50 mL/150 mL摇瓶，28℃，150 r/min培养36 h，分别制得两种菌的发酵种子液；
2）制备发酵液：
所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )的发酵条件为：牛肉胨3.0g、酵母膏3.0g、乳糖22.0g、CaCl2 3.0g、pH7.0，接种量10%，温度28℃，转速210r/min，得到解淀粉芽孢杆菌发酵液；
所述死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)的发酵条件为：牛肉胨3.0g、酵母膏3.0g、乳糖20.0g、NaCl 3.0g、pH7.0，接种量14%，温度28℃，转速180r/min，得到死谷芽孢杆菌发酵液；
3）将发酵的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)按质量百分比含量为5-15%接种，其余为发酵基质，温度为24℃~32℃条件下，进行固体发酵96h~192h，制得微生物菌剂。
进一步的，所述的解淀粉芽孢杆菌、死谷芽孢杆菌及所述的微生物菌剂，可应用于制备根腐病专用微生物农药。
进一步的，所述的解淀粉芽孢杆菌、死谷芽孢杆菌及所述的微生物菌剂，可应用于制备根腐病专用微生物肥料。
本发明相比现有技术的有益效果为：
1、本发明所述的解淀粉芽孢杆菌、死谷芽孢杆菌，及利用所述两株菌株制备得到的微生物菌剂，具有抑菌作用和促生作用，能够作为微生物农药和肥料使用，能够抑制根腐病菌（Fusarium solani），其抑菌率在72%以上；
2、本发明所述的解淀粉芽孢杆菌、死谷芽孢杆菌，及利用所述两株菌株制备得到的微生物菌剂，对马铃薯有促生作用，可以作为微生物农药和微生物肥料使用，从而可以克服现有技术中化学农药环保性差、易产生抗药性和安全性差的缺陷，以实现环保性好、不易产生抗药性和安全性好的优点。
附图说明
图1解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株的菌落形态；
图2为死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)的菌落形态。
本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
生物保藏：
本发明的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )，于2017年3月2日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101）（保藏单位的缩写为CGMCC），保藏编号为CGMCC No.13718。
本发明的死谷芽孢杆菌（B. vallismortis），于2017年3月2日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101）（保藏单位的缩写为CGMCC），保藏编号为CGMCCNo.13719。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。
实施例1 解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)的获得和鉴定
一、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)的获得。
本发明从高寒草地珠芽蓼(Polygonum viviparum)、紫花针茅(Stipa purpurca Griseb)，线叶嵩(Kobreasia Capillifolia)，秦艽(Gentiana macrophy pall)和乳白香青(Anaphalis Lactea Maxin)等的内生细菌中，利用对峙培养法即培养皿中央接入病原菌，四周2.5厘米处等距离接种内生细菌，培养5-7天后十字交叉法测量菌落直径，计算抑菌率，以抑菌率为依据筛选获得2株对根腐病原菌具有抑菌和对马铃薯具促生作用的内生细菌：解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)，本申请人将其保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No. 13718和CGMCC No. 13719，保藏时间为2017年3月2日。
二、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)的鉴定。
（1）对解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)的形态鉴定。
将解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )接种于牛肉膏蛋白胨平板培养基上，28℃培养3d的培养性状为：菌落白色，不规则形，大小6-9 mm，边缘波纹状，表面褶皱，中间隆起，干燥，菌体0.45~0.80×0.89~4.19 μm。
将死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)接种于牛肉膏蛋白胨平板培养基上，28℃培养3d的培养性状为：菌落乳白色，圆形，大小5-8 mm，边缘不规则，表面褶皱，干燥，0.32~0.57×0.81~2.81μm。
（2）对解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)的16S rDNA基因序列鉴定。
将解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )的16S rDNA基因序列在Genebank中与B. amyloliquefaciens (KJ149810.1)聚合，结合形态特征鉴定为B. amyloliquefaciens。
死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)的16S rDNA基因序列在Genebank中与 B. vallismortis (KF818642.1) 聚合，结合形态特征鉴定为 B. vallismortis。
实施例2 解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)微生物菌剂的制备
本实施例所述的微生物菌剂的生物活性组份和重量百分比含量包括：解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)5%（2菌株1：1比例）和发酵基质余量。
所述发酵基质的组份和含量包括：草炭、有机肥、骨粉混合作为发酵基质，占比分别为45%、45%、10%，含水量30-50%。
所述微生物菌剂的制备方法为：将解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)按比例接种于发酵基质中，在温度为24℃的条件下，进行固体发酵96h，得到的发酵物即为微生物菌剂。
经测定，上述发酵液中解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)的活菌数可以达到3.2×1010 CFU/mL。
实施例3 解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)微生物菌剂的制备
本实施例所述的微生物菌剂的生物活性组份和重量百分比含量包括：解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis) 10%（2菌株1：1比例）和发酵基质余量。
所述发酵基质的组份和含量包括：草炭、有机肥、骨粉混合作为发酵基质，占比分别为45%、45%、10%，含水量30-50%。
所述微生物菌剂的制备方法为：将解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)按比例接种于发酵基质中，在温度为28℃，进行液体发酵144h，得到的发酵物即为微生物菌剂。
经测定，上述发酵液中解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)的活菌数可以达到6.6×1012 CFU/mL。
实施例4 解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)微生物菌剂的制备
本实施例所述的微生物菌剂的生物活性组份和重量百分比含量包括：解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)15%（2菌株1：1比例）和发酵基质余量。
所述发酵基质的组份和含量包括：草炭、有机肥、骨粉混合作为发酵基质，占比分别为45%、45%、10%，含水量30-50%。
微生物菌剂的制备方法为：将解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)按比例接种于发酵基质中，在温度为32℃条件下，进行液体发酵192h，得到的发酵液即为微生物菌剂。
经测定，上述发酵液中解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)的活菌数可以达到4.51×1012 CFU/mL。
实施例5 解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)的室内抑菌活性和田间防治效果
试验一：解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)室内抑菌活性测定。
首次筛选出解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)拮抗菌株，将该拮抗菌株接种于牛肉膏蛋白胨平板培养基中进行培养；同时，将指示菌株根腐病菌（Fusarium solani）接种于马铃薯葡萄糖琼脂（即PDA）培养基中进行培养。当拮抗菌株和指示菌株在各自的培养基中培养活化后，分别用打孔器打成直径为6mm的菌饼。选取指示菌株的菌饼一块，置于PDA培养基中；具体的，可以将该菌饼接种于盛装PDA培养基的平皿的中央位置（平皿直径9cm）；再选取由拮抗菌株得到的菌饼四块，根据对峙法，将该四块菌饼等距接种于距该平皿中央位置为2.5cm的圆周上。将该培养皿在28℃的环境温度下培养5天后，用十字法多次重复测定该PDA培养基中上述菌株的抑菌圈直径，在本试验中，重复测定3次。解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)，单独抑菌率分别为72.2%和73%，但1：1复配后抑菌率为82%。
试验二：解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)菌株对马铃薯增产、对干腐病的防治效果测定。
于2015年5月~8月进行，地点为甘肃省白银市景泰条山农场。种植模式为垄宽与行距分别为1.35 m和0.70 m，株间距0.17 m，种植密度为5605株/667 m2。播种前一天对种薯进行1.5%高锰酸钾浸泡消毒并切块。4月下旬播种，播种时施基肥，过程中再无追肥，8月下旬收获。试验分处理和对照，约135 m2，处理和对照间留一垄为保护行。2015年6月27日，用穴施的方法将发酵的微生物菌肥埋入马铃薯根际土壤，肥穴距根际15 cm，每穴施肥5 g。
于2015年8月17日进行马铃薯采收，用随机取样方法采收面积为20 m2的马铃薯，称重，计算产量，并对采收的马铃薯储藏于室内，4个月后对马铃薯干腐病发病薯块进行统计，并计算发病薯块占总贮藏薯块百分率。
表1 对马铃薯的促生作用
菌肥 CK
折合亩产yield per mu (kg) 1135.5 892.4
增产率 yeild increase (%) 27.2
表1表明，菌肥对马铃薯的增产率达27.2%。
对储藏马铃薯干腐病的统计表明功舥处理的发病率10.4%，空白对照发病率为35%，防效为70.3%，效果良好。
表2 对马铃薯干腐病防效
两种菌（F2） CK
干腐发病率(%) 10.4% 35%
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂含有活菌体，活菌体由解淀粉芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌组成；
所述解淀粉芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC No.13718；
所述死谷芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC No.13719；
以所述微生物菌剂的总重量为基准，所述解淀粉芽孢杆菌的活菌体和死谷芽孢杆菌的活菌体的含量共为6.6×1011 cfu/g ~6.6×1012 cfu/g；
所述微生物菌剂的制备方法包括以下步骤：
1）制备种子液：分别将所述解淀粉芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌两种菌的单个拮抗菌株在LB平板上划线培养，48 h后挑取单菌落接入50 mL NB培养液中，28℃，150 r/min下培养12h得种子液，用灭菌蒸馏水调节OD600为0.5后，以2%的接种量接入50 mL/150 mL摇瓶，28℃，150 r/min培养36 h，分别制得两种菌的发酵种子液；
2）制备发酵液：
所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )的发酵条件为：牛肉胨3.0g、酵母膏3.0g、乳糖22.0g、CaCl2 3.0g、pH7.0，接种量10%，温度28℃，转速210r/min，得到解淀粉芽孢杆菌发酵液；
所述死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)的发酵条件为：牛肉胨3.0g、酵母膏3.0g、乳糖20.0g、NaCl 3.0g、pH7.0，接种量14%，温度28℃，转速180r/min，得到死谷芽孢杆菌发酵液；
3）将发酵的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )菌株和死谷芽孢杆菌(B. vallismortis)按质量百分比含量为5-15%接种，其余为发酵基质，温度为24℃~32℃条件下，进行固体发酵96h~192h，制得微生物菌剂。
2.根据权利要求1所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂中还含有发酵基质，所述发酵基质为草炭、有机肥、骨粉的混合物。
3.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，以所述微生物菌剂的总重量为基准，所述菌体的质量百分比含量为5-15%，其余为发酵基质。
4.根据权利要求1-3任一项所述的微生物菌剂，在制备根腐病专用微生物农药中的应用。
5.根据权利要求1-3任一项所述的微生物菌剂，在制备根腐病专用微生物肥料中的应用。
CN201710255124.8A 2017-04-19 2017-04-19 一种解淀粉芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌复配微生物菌剂及其制备方法和应用 Expired - Fee Related CN107058182B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710255124.8A CN107058182B (zh) 2017-04-19 2017-04-19 一种解淀粉芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌复配微生物菌剂及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710255124.8A CN107058182B (zh) 2017-04-19 2017-04-19 一种解淀粉芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌复配微生物菌剂及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107058182A CN107058182A (zh) 2017-08-18
CN107058182B true CN107058182B (zh) 2018-10-23

Family

ID=59600632

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710255124.8A Expired - Fee Related CN107058182B (zh) 2017-04-19 2017-04-19 一种解淀粉芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌复配微生物菌剂及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107058182B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110157641B (zh) * 2019-05-20 2023-05-05 黑龙江省农业科学院土壤肥料与环境资源研究所 一株防治玉米茎基腐病的生防细菌bv23及其应用
CN111197017B (zh) * 2020-01-13 2021-09-17 中化农业（临沂）研发中心有限公司 解淀粉芽孢杆菌CGMCC No.17844及其应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101948771A (zh) * 2010-08-27 2011-01-19 黑龙江省科学院微生物研究所 防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌及其应用
WO2013153159A1 (en) * 2012-04-13 2013-10-17 Chr. Hansen A/S Antibiotic sensitive bacillus strains having antimicrobial effect against e. coli and clostridium perfringens and having high sporulation capacity
CN103789234A (zh) * 2014-01-15 2014-05-14 吉林农业大学 一种解淀粉芽孢杆菌及其应用
CN105051177A (zh) * 2012-12-31 2015-11-11 瑞纳戈若有限公司 用于减少粪肥或土壤中氨气和/或甲烷排放的新型细菌和聚生体
CN106190883A (zh) * 2015-05-05 2016-12-07 银七星控股有限公司 一种土壤改良益生菌组合物及其制备方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9737572B2 (en) * 2012-07-30 2017-08-22 Core Intellectual Properties Holdings, Llc Methods and compositions of biocontrol of plant pathogens

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101948771A (zh) * 2010-08-27 2011-01-19 黑龙江省科学院微生物研究所 防病促生植物内生解淀粉芽孢杆菌及其应用
WO2013153159A1 (en) * 2012-04-13 2013-10-17 Chr. Hansen A/S Antibiotic sensitive bacillus strains having antimicrobial effect against e. coli and clostridium perfringens and having high sporulation capacity
CN105051177A (zh) * 2012-12-31 2015-11-11 瑞纳戈若有限公司 用于减少粪肥或土壤中氨气和/或甲烷排放的新型细菌和聚生体
CN103789234A (zh) * 2014-01-15 2014-05-14 吉林农业大学 一种解淀粉芽孢杆菌及其应用
CN106190883A (zh) * 2015-05-05 2016-12-07 银七星控股有限公司 一种土壤改良益生菌组合物及其制备方法

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Bacillus vallismortis EXTN-1-Mediated Growth Promotion and Disease Suppression in Rice;Kyungseok Park等;《Plant Pathol. J.》;20061231;第22卷(第3期);摘要 *
一株死谷芽抱杆菌的分离、鉴定及抗病促生效果初探;林英等;《北方园艺》;20141231(第13期);第88-92页 *
东祁连山高寒草地几株醉马草内生细菌的生物功能评价及鉴定;杨成德等;《草业学报》;20141031;第23卷(第5期);第249-255页 *
王颖等.马铃薯贮藏期主要病害拮抗内生细菌的筛选、鉴定及功能评价.《草业学报》.2014,第23卷(第3期),第269-275页. *
紫花苜蓿根腐病原——厚垣镰刀茵的鉴定及其拮抗菌的筛选;柏玉晶等;《草业学报》;20170228;第26卷(第2期);摘要，第83-84页2.4.3-2.4.4部分 *
解淀粉芽孢杆菌Q-426培养基优化及抑菌活性的预测;周广麒等;《中国生物工程杂志》;20131231;第33卷(第11期);第21-26页 *
马铃薯贮藏期主要病害拮抗内生细菌的筛选、鉴定及功能评价;王颖等;《草业学报》;20140630;第23卷(第3期);摘要，第272页左栏"2.2 263XY1菌株的鉴定"部分 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN107058182A (zh) 2017-08-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107254427B (zh) 一种贝莱斯芽孢杆菌菌株jn5及其应用
CN106591193B (zh) 一株具有广谱促生抗逆作用的解淀粉芽孢杆菌
EP2479253B1 (en) Antagonistic bacteria for preventing and treating panama wilt disease of continuously planted banana and microorganism organic fertilizer thereof
CN109652336A (zh) 一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用
CN102864100B (zh) 一株解淀粉芽孢杆菌及其应用
CN103184184B (zh) 一株微黄白链霉菌及其应用
CN103484396B (zh) 一种嗜热一氧化碳链霉菌新菌株及其应用
CN103396971B (zh) 一株洋葱伯克霍尔德菌及其应用
CN104531559A (zh) 解淀粉芽孢杆菌Lh-1及其应用
CN106635903B (zh) 一种提高中重度盐碱地作物耐盐性的促生菌组合
CN102409014B (zh) 一株冬枣根际促生枯草芽孢杆菌及其应用
CN104928201A (zh) 一种解淀粉芽孢杆菌hn-11及其菌剂
CN105475363B (zh) 一种促进黄瓜生长的复合菌剂及其应用
CN105801258A (zh) 一种枯草芽孢杆菌菌肥及其制备方法和应用
CN108552235A (zh) 一种预防烤烟根腐病与改良土壤的生物菌肥及其制备与应用
CN110129240A (zh) 一株解淀粉芽孢杆菌及其在防治芹菜软腐病中的应用
CN104152385A (zh) 一株莫哈韦芽孢杆菌菌株、微生物菌剂及其制备方法和应用
CN105567600A (zh) 黄萎病菌拮抗菌及其应用
CN107058182B (zh) 一种解淀粉芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌复配微生物菌剂及其制备方法和应用
CN104273176B (zh) 一种植物有机物-枯草芽孢杆菌混合菌剂、制备方法及应用
CN106396862A (zh) 一种防治病害的薯类专用微生物菌肥及其制备方法
CN103951483B (zh) 一种防治农作物土传病害的生防菌肥及其生产工艺和应用
CN102443559B (zh) 一株用于防治棉花黄萎病的芽孢杆菌及其应用
CN110331114A (zh) 一株耐盐碱抗病促生菌天牛微杆菌及其应用
CN105585379A (zh) 一种生物复合肥及应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
TA01 Transfer of patent application right
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20180906

Address after: 122000 Chaoyang City, Jianping, Liaoning Jianping County Yb Shou street, Ping Hutong 7 Building 3 unit 202 room.

Applicant after: Liu Bingbing

Address before: 101300 10 northeast street, mapun village, Mapo Town, Shunyi District, Beijing

Applicant before: Beijing, green biotechnology limited liability company

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20181023

Termination date: 20190419