CN102764231A - 治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用凝胶剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用凝胶剂，该眼用凝胶剂由更昔洛韦、蜂蜜、聚乙二醇400与聚乙二醇4000混合物、聚山梨酯80五种原辅料组成。本发明的眼用凝胶剂运用现代制剂新技术制成，抗单纯疱疹病毒作用强，促进角膜愈合、修复、再生药效显著，明显优于同类产品且在用药过程中是安全的。

Description

治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用凝胶剂及其制备方法

技术领域

本发明属于中西药物组合眼用制剂领域，具体涉及眼用制剂领域中眼用凝胶剂的制备与应用。

技术背景

单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)，是当今世界上危害严重的感染性眼病之一，其发病机制与免疫状态有关，由于抗生素和皮质类固醇药物的广泛应用，其发病率有明显上升趋势，往往因反复发作而严重危害视功能，临床上尚无有效控制复发的药物，因而成为主要的致盲性眼病。

在治疗HSK的药物中，更昔洛韦（GCV）是现有抗单纯疱疹病毒（HSV-1）药物中作用最强的药物之一，但是，单用抗HSV药物很难控制由于病毒抗原引起的免疫性炎症反应；且对角膜修复、愈合及再生作用欠佳。

国内外学者、研究人员、临床医生为解决这一世界性的难题作了大量的工作，如：采用与其他药物联合应用的方法（加用干扰素等药物）。诸多药物与GCV合用虽然能增强抗HSV-1的作用，但皆不能有效的促进角膜修复，愈合与再生，难以控制HSK的复发。故寻找一种既能抗HSK,又能促进角膜修复、愈合及再生能力的眼药乃当务之急。

本发明一种治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用凝胶剂（命名为：新目安眼用凝胶剂）及其制备方法系蜂蜜和GCV联合应用具有抑制HSV-1的复制，增加角膜营养，增强免疫，改善机体状况，促进HSK的角膜组织修复与再生、对角膜创面收敛、保护及促进愈合作用显著。

发明内容

本发明只在克服现有抗病毒药物制剂皆不能有效的促进角膜修复，愈合与再生，难以控制HSK复发的问题，提供一种治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用凝胶剂。

为达到上述目的，本发明提供的技术方案为：

所述治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用凝胶剂，包括如下重量份的组分：

更昔洛韦           15～300；

蜂蜜              300～700；

聚乙二醇4000    1365～1490；

聚乙二醇400     5455～5960；

聚山梨酯─80    2077～2315。

优选地，所述凝胶剂各组分重量份为：

更昔洛韦           15～300；

蜂蜜              300～500；

聚乙二醇4000    1365～1450；

聚乙二醇400     5455～5790；

聚山梨酯─80    2180～2310。

优选地，所述凝胶剂各组分重量份为：

更昔洛韦            15～50；

蜂蜜              400～500；

聚乙二醇4000    1400～1450；

聚乙二醇400     5700～5790；

聚山梨酯─80    2290～2300。

优选地，所述凝胶剂各组分重量份为：

更昔洛韦                15；

蜂蜜                   500；

聚乙二醇4000          1440；

聚乙二醇400           5750；

聚山梨酯─80          2295。

其中，上述凝胶剂中所述的蜂蜜为炼制蜂蜜。

本发明还提供了一种制备上述治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用凝胶剂的方法，包括如下步骤：

（1）将PEG400070℃水浴加热成液态，然后加入PEG400，混合均匀成透明液体，保温；

（2）将更昔洛韦粉碎成微粉，置于研钵中，加入聚山梨酯-80研磨，再加入蜂蜜研磨均匀；

（3）将步骤（1）制备的PEG400、PEG4000混合透明液体加入到步骤（2）研磨制备的更昔洛韦、聚山梨酯-80及蜂蜜均匀物中，混匀。

（4）将步骤（3）混匀后的产物用减压法排空气法灌装，用γ射线灭菌法灭菌。

方法具体为：先配制PEG类基质熔融液，将PEG4000于70℃水浴加热至熔点以上使成液态，加入PEG400保温下混合均匀使之互溶制成透明液体保温。另将更昔洛韦粉碎成微粉，过200目筛，精密称定，置于研钵中，加入聚山梨酯-80研磨使之均匀分散，再加入蜂蜜研磨成稠厚乳状细腻均匀状态，最后与PEG400与PEG4000熔融混合制成的透明液体按等量递增法逐渐加入上述稠厚乳状细腻均匀物中混匀，充分研磨使之均匀分散制成半固体眼用凝胶剂。研磨时间则控制在研磨至蜂蜜颜色均匀后继续研磨1小时为佳，直到软膏光滑细腻，成型性达到成品质量要求可装眼膏管，灌装时采用减压法排空气，封口后，采用γ射线灭菌法灭菌。

本发明的治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用凝胶剂的剂型为软膏剂中的水溶性基质中的眼用凝胶剂。所述眼用凝胶剂处方组成为首创配方，成型工艺独特，能最大限度地发挥治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的药效，方便使用，便于推广或工业化（大规模）生产，应用前景良好。

本发明配方的依据：中医学认为蜂蜜对角膜溃疡有独到疗效，具有消肿和抗感染的特性，中医临床用于消肿，软坚散结以及促进伤口愈合，是历代医家作眼科外用滴眼或作眼膏基质的药物，制成滴眼剂、眼膏及锭剂治疗多种眼疾，近代多配制成滴眼液。

蜂蜜含有大量的糖类和较多的酸类、酶类、维生素、蛋白质、乙酰胆碱、抗菌物质，除此之外，还含有47种微量元素，包括目前已知的人体所必须的10种微量元素。蜂蜜能增强免疫，改善机体状况，对创面有收敛、保护和促进愈合作用，能阻止病毒对宿主细胞的攻击和（或）抑制病毒体内的复制，延长复制周期，有效抑制体内外HSV-1的感染。以色列研究人员Huleihel M.和Isanu V.就蜂蜜提取物溶液在活体内和活体外HSV-1抑制作用进行了观察，结果表明，蜂蜜能有效抑制体内外HSV-1的感染，并提出蜂蜜能阻止病毒对宿主细胞的攻击和抑制病毒体的复制的假设。蜂蜜中含有较高的锌元素，锌有延缓和避免角膜溃疡穿孔的作用，其次锌能够增强体液和细胞免疫的功能，局部应用锌制剂可恢复并增强局部免疫，而且锌有抗HSV-1的作用，对于创伤愈合有促进作用。

本发明前期研究表明，采用3%阿昔洛韦加蜂蜜与基质制成的目安眼膏治疗实验性家兔HSK并与3%市售阿昔洛韦眼膏对照，用药后第6天，2组实验家兔HSK病变范围均有缩小，用药后第9天开始，目安眼膏组病变范围缩小和痊愈例数明显优于阿昔洛韦组（P＜0.05），经15天的试验观察结果表明，目安眼膏治疗HSK疗效明显优于市售阿昔洛韦眼膏(P＜0.05），通过电镜观察，蜂蜜用量为5%的目安眼膏可减轻阿昔洛韦药物分子非靶向性对正常角膜细胞的损害，保护角膜正常上皮，同时可加强网状上皮细胞的吞噬能力，说明蜂蜜和阿昔洛韦联合应用能使药物在结膜囊内滞留时间延长，具有增效、长效作用，并能减轻眼睑对眼球的摩擦；蜂蜜和阿昔洛韦联合应用具有抑制HSV-1的复制，增加角膜营养，增强免疫，改善机体状况，促进HSK的角膜组织修复与再生、对角膜创面收敛、保护及促进愈合作用显著。

本发明的有益效果是：

1、本发明的治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用凝胶剂既具有抑制HSV-1复制的作用，又能够增加角膜营养，增强免疫，改善机体状况，促进HSK的角膜组织修复与再生、对角膜创面收敛、保护及促进愈合作用显著。

2、本发明的治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用凝胶剂运用现代制剂新技术使药物与基质均匀分散，制成眼用凝胶剂，该剂型与泪液生物相容性好，释药快，起效快，由于蜂蜜的特殊性质使两者合用既能延长更昔洛韦在靶组织的滞留时间又可以显著提高药物（GCV）在房水中的浓度及提高生物利用度（使AUC增大），同时能加快更昔洛韦代谢产物的排泄，从而阐明了两者合用的配伍机理，为处方及给药方案设计提供依据。

3、本发明的治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用凝胶剂抗单纯疱疹病毒效果优于单用更昔洛韦，且无刺激性、无过敏性、无不良反应，在用药过程中是安全的。

附图说明

图1为本发明的凝胶剂制备方法工艺流程图。

具体实施方式

下面结合图表和实施例对本发明作进一步说明。

一.新目安眼用凝胶剂处方（1000支每支内容物重2g）

二.工艺步骤

先配制PEG类基质熔融液，将PEG4000于70℃水浴加热至熔点以上使成液态，加入PEG400保温下混合均匀使之互溶制成透明液体保温。另将更昔洛韦粉碎成微粉，过200目筛，精密称定，置于研钵中，加入聚山梨酯-80研磨使之均匀分散，再加入蜂蜜研磨成稠厚乳状细腻均匀状态，最后与PEG400与PEG4000熔融混合制成的透明液体按等量递增法逐渐加入上述稠厚乳状细腻均匀物中混匀，充分研磨使之均匀分散制成半固体眼用凝胶剂。研磨时间则控制在研磨至蜂蜜颜色均匀后继续研磨1小时为佳，直到软膏光滑细腻，成型性达到成品质量要求可装眼膏管，灌装时采用减压法排空气，封口后，采用γ射线灭菌法灭菌。

三.本发明一种治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用凝胶剂（命名为：新目安眼用凝胶剂）疗效对比验证试验

1 实验方法

1.1单疱病毒性角膜炎角膜评分标准：选用Banmeet S.Anand评分标准（见表1）

表1裂隙灯观察HSK兔眼的评分标准

1.2动物造模

造模方法参照上皮划痕法。造模操作：0.4％Benoxil溶液表面麻醉兔眼3次，用30-gauge针头在角膜中央作“#”划痕，(深度仅限上皮层，角巩缘微有渗血为度)，微量取样器吸取HSV-1SM₄₄毒株原液50微升病毒悬液，滴入兔双眼结膜囊内，闭合眼睑并按摩1分钟。接种24小时后，动物出现畏光，流泪症状，在裂隙灯显微镜下观察出现树枝状和地图状着色及角膜基质深浅不一的水肿混浊，提示造模成功。

1.3动物分组

按兔眼病情轻重分层，采用随机对照表法将模型兔随机分为7组，每组4只（8眼）。即：

Ⅰ组：含0％蜂蜜的新目安眼用凝胶剂组（0%）；Ⅱ组：含3％蜂蜜的新目安眼眼用凝胶剂组（3%）；Ⅲ组：含5％蜂蜜的目安眼眼用凝胶剂组（5%）；Ⅳ组：含7％蜂蜜的目安眼眼用凝胶剂组（7%）；Ⅴ组：模型组：阴性对照组；Ⅵ组：市售0.15%更昔洛韦眼眼用凝胶剂组；阳性对照组；Ⅶ组：凝胶基质组（空白组）

1.4给药方法

每日涂眼药3次，每次给药约0.1g，间隔4h(8am、12n、4pm)，双眼接受同样治疗，共12天。每次给药前生理盐水冲洗5min，水的流量和流速都不会导致眼损伤。

1.5裂隙灯显微镜观察

2％荧光素钠分别滴入各组兔双眼结膜囊内，闭合眼睑1分钟，30min内固定头部用裂隙灯观察。每隔3天观察一次并评分、纪录，共12天。

2 结果与分析

2.1裂隙灯观察结果

根据表1的评分标准对各组进行疗效评分。

表2各组疗效评分

注：评分越低疗效越好。

2.2数据处理及统计分析：

将表2中各组数据均依次采用3S法、狄克松（Dixon）法、格拉布斯（Grubbs）法、指数分布样本法检验异常值，结果显示每组数据无异常值（P＜0.05)；数据经正态性检验（Shapiro Wilk法、Kolmogorov-Smirnov法），均满足正态性(P＞0.05)；数据经方差齐性检验（Bartlett卡方检验、Levene检验），均满足方差齐性(P＞0.05)。所以采用完全随机单因素试验统计分析进行多重比较（SNK法），结果如表3、4、5、6。

表3第3日各组疗效评分多重比较结果

α=0.05；1组=不含蜂组；2组=含3%蜂蜜组；3组=含5%蜂蜜组；

4组=含7%蜂蜜组；5组=模型组；6组=阳性组；7组=基质组。

表4第6日各组疗效评分多重比较结果

α=0.05；1组=不含蜂蜜组；2组=含3%蜂蜜组；3组=含5%蜂蜜组；

4组=含7%蜂蜜组；5组=模型组；6组=阳性组；7组=基质组。

表5第9日各组疗效评分多重比较结果

α=0.05；1组=不含蜂蜜组；2组=含3%蜂蜜组；3组=含5%蜂蜜组；

4组=含7%蜂蜜组；5组=模型组；6组=阳性组；7组=基质组。

表6第12日各组疗效评分多重比较结果

α=0.05；1组=不含蜂蜜组；2组=含3%蜂蜜组；3组=含5%蜂蜜组；

4组=含7%蜂蜜组；5组=模型组；6组=阳性组；7组=基质组。

由表3、4、5、6可知，给药后第3日，除含0%蜂蜜组外，含3%、5%、7%蜂蜜组、阳性组、基质组均与模型组在疗效上差别有统计意义（P＜0.05）。其中含3%蜂蜜组疗效优于其他含蜂蜜组和阳性组（P＜0.05）。疗效由好至差为含3%蜂蜜组＞含5%蜂蜜组≈含7%蜂蜜组≈阳性组≈基质组＞含0%蜂蜜组≈模型组。

给药后第6日，除含0%蜂蜜组外，含3%、5%、7%蜂蜜组、阳性组均与模型组、基质组在疗效上差别有统计意义（P＜0.05），其中含5%蜂蜜组和含7%蜂蜜组疗效最显著，两组之间差异有统计意义（P＜0.05），5%优于7%组（5%蜂蜜组评分低于7%蜂蜜组），疗效由好至差为：含5%蜂蜜组＞含7%蜂蜜组＞含3%蜂蜜组＞阳性组＞含0%蜂蜜组≈基质组≈模型组。

给药后第9日，含0%、3%、5%、7%蜂蜜组、阳性组与模型组、基质组在疗效上差别均有统计意义（P＜0.05），含5%蜂蜜组和含7%蜂蜜组疗效优于其他蜂蜜浓度组（P＜0.05），但两组之间差别无统计意义（P＞0.05），疗效由好至差为：含5%蜂蜜组≈含7%蜂蜜组＞含3%蜂蜜组≈阳性组≈含0%蜂蜜组＞模型组≈基质组。

给药后第12日，模型组与含3%蜂蜜组疗效差别无统计意义（P＞0.05），含5%蜂蜜组和含7%蜂蜜组疗效优于其他蜂蜜浓度组（P＜0.05），但两组之间没差别（P＞0.05），疗效由好至差为：含5%蜂蜜组≈含7%蜂蜜组＞含3%蜂蜜组≈阳性组≈含0%蜂蜜组＞模型组＞基质组。

由实验结果可知：5%～7%蜂蜜、0.15%更昔洛韦组成的新目安眼用凝胶剂药效最优。

Claims (8)

1.一种治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用凝胶剂，包括如下重量份的组分：

更昔洛韦                   15～300；

蜂蜜                      300～700；

聚乙二醇4000            1365～1490；

聚乙二醇400             5455～5960；

聚山梨酯─80            2077～2315。

2.如权利要求1所述的凝胶剂，其特征在于，所述凝胶剂各组分重量份为：

更昔洛韦                   15～300；

蜂蜜                      300～500；

聚乙二醇4000            1365～1450；

聚乙二醇400             5455～5790；

聚山梨酯─80            2180～2310。

3.如权利要求1所述的凝胶剂，其特征在于，所述凝胶剂各组分重量份为：

更昔洛韦                    15～50；

蜂蜜                      400～500；

聚乙二醇4000            1400～1450；

聚乙二醇400             5700～5790；

聚山梨酯─80            2290～2300。

4.如权利要求1所述的凝胶剂，其特征在于，所述凝胶剂各组分重量份为：

更昔洛韦                        15；

蜂蜜                           500；

聚乙二醇4000                  1440；

聚乙二醇400                   5750；

聚山梨酯─80                  2295。

5.一种制备如权利要求1至4任一项所述的凝胶剂的方法，包括如下步骤：

（1）将PEG4000水浴加热成液态，然后加入PEG400，混合均匀成透明液体，保温；

（2）将更昔洛韦粉碎成微粉，置于研钵中，加入聚山梨酯-80研磨，再加入蜂蜜研磨均匀；

（3）将步骤（1）制备的PEG400、PEG4000混合透明液体加入到步骤（2）研磨制备的更昔洛韦、聚山梨酯-80及蜂蜜均匀物中，混匀。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤（1）所述水浴加热温度为70℃。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法步骤还包括将步骤（3）混匀后的产物灌装，灭菌。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述灭菌是用γ射线灭菌法灭菌。

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