CN102726458A - 一种野菊用于植物病害防治的新用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及野菊及其根或茎或叶的新的用途,特别涉及一种野菊花蕾及其根或茎或叶用于中药材土传病害防治的新用途,以及野菊花及其根或茎或叶其提取物在制备植物源杀菌剂中的应用。所述的提取物可以通过溶剂提取和超临界二氧化碳萃取从野菊及其根茎叶中获得。本发明采用植物源杀菌剂来防治土传病害作用,做到科学环保,无农药残留,符合绿色安全生产的理念。
Description
技术领域
本发明涉及野菊及其根茎叶的新的用途,特别涉及一种野菊及其根或茎或叶粉碎物以及提取物在制备植物源杀菌剂以及在防治白术、贝母土传病害中的应用。
技术背景
野菊(Chrysanthemum indicum),野生或人工栽培,对土壤要求不严,少有病害,对栽培技术要求不高,生产成本低廉,由于其明确的药用价值,收载于《中国药典一部》中。特别是主产于浙江石练的黄菊、白菊两个山中野菊品种,目前,在医药方面的应用包括消炎解毒、清热凉血、杀菌、祛风之功效,但尚未在植物源农药上的应用和开发。
土传病害素来被植物界认定为最难防治的病害之一,特别是白术、贝母的土传病害,到目前为止主要用化学杀菌剂和培育抗性品种等方法,这些都无法安全、环保、快速地从生产上满足防病治病的要求。此类病害主要由罗氏白绢小核菌,立枯丝核菌、尖孢镰刀菌、半裸镰刀菌和茄病镰刀菌等多种致病真菌复合侵染的结果。这些土传病真菌能产生大量菌体,只要条件对病菌生长发育有利而寄主又是易感的,病菌就可以大量繁殖并浸染寄主,随作物的连作而大量繁殖扩散。而且,常规防治施用化学农药,致使病菌耐药性增强,农残超标,药材质量下降,土壤和环境恶化。本发明采用植物源杀菌剂来防治土传病害特别是防治白术、贝母土传病害中的应用,做到了有效、环保,无农药残留,符合绿色安全生产的理念。
发明内容
本发明的目的在于提供一种野菊及其提取物防治土传病害的新用途,本发明的目的还在于提供野菊提取物的杀菌新用途。
本发明所述的防治土传病害的用途是指在防治白术、贝母土传病害的新用途,所述白术的土传病害为白绢病、根腐病,所述的贝母土传病害为灰霉病。
本发明所述的植物杀菌是指白绢菌、立枯丝核菌、尖孢镰刀菌、半裸镰刀菌和茄病镰刀菌等土传病致病真菌。
本发明所述用途是将野菊按照常规工艺,制成提取物,再加入常规辅料制成各种杀菌剂,如喷雾剂、乳剂、悬浮剂或粉剂的应用。本发明的用途还包括将野菊按常规方法粉碎成10-120目的组织粉碎物或切制成组织片段的应用。
本发明所述的野菊提取物是指野菊的菊米或根或茎或叶的提取物。
本发明的目的是通过如下技术方案实现的:
1、粉碎野菊米及其根或茎或叶:将野菊的根部的泥土除净后分解成花、根、茎、叶,分别干燥后粉碎至10-120目制成组织粉碎物;或将野菊根或茎切制成1-10cm植物组织片段;
2、将野菊花及其根或茎或叶粉碎物制成提取物;
本发明所述的提取物是指上述野菊花或根或茎或叶粉碎物加入4-20倍的溶剂,在30℃-100℃恒温加热,搅拌浸提2-4次,或采用回流提取,分离过滤得浸提液,浸提液常温或减压浓缩,回收浸提液中的溶剂,得到野菊或其根或茎或叶提取物的浓缩液;
本发明所述的提取物的制备方法还为:将野菊花及其根或茎或叶干燥粉碎,粉碎粒度为30-100目,超临界CO2萃取,萃取压力为18.12MPa,萃取温度为30-50℃,萃取时间为1-6h,在此条件下得到的提取物;
3、将野菊及其根或茎或叶提取物加入常规辅料,按照常规工艺,制成各种杀菌剂,如喷雾剂、乳剂、悬浮剂或粉剂。
本发明将野菊制成植物杀菌剂的制备方法为:将野菊米及其根或茎或叶的上述提取物浓缩液减压浓缩至固形物70-85%,加入固形物0.1-10重量倍的增溶剂和加入固形物0.1-10重量倍的乳化剂溶解,按常规工艺加入常规辅料制成喷雾剂、乳剂、悬浮剂或粉剂。
本发明将野菊及其根或茎或叶制成植物杀菌剂的制备方法优选为:将100重量份的野菊茎叶烘干,粉碎至80目,称取上述粉碎物,置恒温水浴锅中加入5重量倍的乙醇,在80℃恒温浸提3次,每次5小时,滤过得浸提液,减压浓缩(真空度0.07Mpa),得到野菊根茎叶的浓缩液,浓缩液减压浓缩至比重1.0-2.0,加入固形物0.3重量倍的增溶剂和加入固形物0.2重量倍的乳化剂溶解,再按照常规工艺加入常规辅料制成喷雾剂、乳剂、悬浮剂或粉剂。
本发明所述的溶剂为水、乙醇、乙酸乙酯、石油醚的一种或者两种以上;所述的增溶剂为十二烷基磺酸钠或十二烷基苯磺酸钾;所述乳化剂为硬脂酸钠。
本发明提供了一种环境友好、人畜安全的药剂,与传统药剂比较有以下优点:(1)野菊及其根茎叶为天然产物,其提取物在自然界易降解;(2)野菊及其根茎叶杀菌剂具有多组分的特征,施用中致病菌不易产生抗药性;(3)实验证明本发明具有高效安全的特性;(4)本发明原料易于获得,其中野菊根茎叶是生产中的废弃物,可以实现资源的综合利用;(5)本发明制备工艺简单,有利于工业化生产。
下述实验例用于进一步说明本发明,但不限于本发明。
实验例1
1.1材料与方法
1.1.1材料
野菊根茎叶,经粉碎机粉碎后,过80目标准筛,干燥低温保存,备用;自来水;95%乙醇、乙醚均为分析纯;PDA培养基:土豆200g,琼脂25g,蔗糖30g,用自来水配制成1000mL;供试菌种包括:罗氏白绢小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc.)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani),尖孢镰刀菌(Fusarium.oxysporum)、半裸镰刀菌(Fusarium semitectum)、茄病镰刀菌(Fusarium solani)均由浙江农林大学植保植物病理组和上海抚生实业有限公司提供。
1.1.2方法
(1)提取物的制备
分别取250g野菊根茎叶粉末(80目),分别加5倍量的水、95%乙醇、甲醇、乙酸乙酯、乙醚,搅拌、浸提、抽滤,将滤液旋转蒸发浓缩直至粘稠状,用水定容在100ml的容量瓶内,备用。
(2)抑菌实验
取上述提取物对病原菌菌丝生长抑制作用采用生长速率法。参照2005版中国药典二部(附录XIA)抗生素微生物鉴定法操作,在无菌条件下,配制100mlPDA培养基若干个,在超净工作台中,将水提物、醇提物、醚提物及精油分别倒入4个PDA培养基内,迅速搅拌均匀,各分装到3-4个培养皿内,配成浓度为0.25g/ml的带药培养基。并取10ml乙醚和95%的乙醇制成醚对照和醇对照,原PDA培养基作为水对照。选取长势较好,无感染,菌面大约为培养皿的3/4的菌作为供试菌,用酒精消毒过的打孔器在菌面的最外层打一圈孔,每孔大约5mm(最多打两圈)。用接种针取出圆形菌饼,使带菌丝的一面贴在培养基表面。各样品做3个平行实验。48小时后,观察记录实验数据。根据十字交叉法,用游标卡尺测量菌面的直径,并求出平均值,以此类推,求出三个平行实验的平均直径,直到空白实验的菌面几乎长满整个培养皿为止。将实验组平均直径的大小与对照组进行比较,根据公式抑制率=[(对照组-5)-(实验组-5)]/(对照组-5)×100%,计算出抑制率。
1.2结果与分析
表1为野菊根茎叶不同溶剂提取物对不同病原菌均有抑制效果,其中乙醇提取物、乙醚提取物和超临界萃取物对5种病原菌的抑制效果最佳。
表1.菊米根茎叶不同溶剂提取物对不同病原菌的抑菌作用
注:每种试剂测试浓度均为0.2mg/mL,3次重复;不加药液为空白对照
A:罗氏白绢小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc.);B:立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)C:尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、D:半裸镰刀菌(Fusarium semitectum)E:茄病镰刀菌(Fusarium solani)
实验例2
野菊茎叶,常温干燥,切制成1-10cm片段后,与当年10-12月撒于白术、贝母种植备用地中,施用量为80kg/亩,一个月后,在此地块按常规方法种植白术;相邻地块种植白术和贝母作为对照组,三块地均不施用任何农用药剂。7月份、8月份统计结果显示,白术常见的土传病害白绢病、根腐病发病率明显小于未施用野菊茎叶粉末组,分别为25%和75%;5月份统计贝母灰霉病发病率明显小于对照组。
实验例3
野菊茎叶,常温干燥后,经粉碎机粉碎后,过80目筛,与当年1-2月撒于白术、贝母种植备用地中,施用量为30kg/亩,一个月后,在此地块按常规方法种植白术;相邻地块种植白术和贝母作为对照组,三块地均不施用任何农用药剂。7月份、8月份统计结果显示,白术常见的土传病害白绢病、根腐病发病率明显小于未施用野菊茎叶粉末组,分别为25%和75%;5月份统计贝母灰霉病发病率明显小于对照组。
实验例4
将野菊的根部的泥土除净后,干燥、粉碎分别加入8倍的水、乙醇、乙酸乙酯、石油醚等溶剂,在80℃恒温加热,搅拌浸提3次,每次6小时,分离过滤得浸提液,浸提液减压浓缩,回收浸提液中的溶剂,得到野菊根茎叶提取物的浸膏。另:将野菊的根部的泥土除净后,干燥、粉碎,粉碎粒度为50目,超临界CO2萃取,萃取压力为18.12MPa,萃取温度为50℃,萃取时间为6h,在此条件下得到的超临界提取物。将上述提取物直接施用于白术种植地和贝母种植地,每8-10天喷一次,以施用10%多抗霉素可湿性粉剂为对照,田间防控效果如表2
表2制得的野菊各种溶剂提取浸膏对土传病害的防治效果(2011年7月)
下述实施例均能实现上述实验例的效果:
具体实施方式
实施例1:野菊根提取物及其喷雾剂
称取野菊根50kg,粉碎成50目粉末,加入8倍体积量的水,80℃加热提取3次,静置,上清液过滤,可采用离心机、滤膜过滤或采用明胶等澄清剂过滤,并压榨滤渣,合并滤液,浓缩至比重1.50,得野菊根提取物,加入固形物0.4重量倍的十二烷基磺酸钠和加入固形物0.5重量倍的硬脂酸钠溶解,用常规方法,加入常规辅料制成农用杀菌喷雾剂。
实施例2:野菊叶提取物及其乳油
取野菊叶20kg,自然干燥后,粉碎成粒度为80目的粉末,超临界CO2萃取,萃取压力为18.12MPa,萃取温度为50℃,萃取时间为3h,其他条件确定为:分离釜I与分离釜II压力均设为6.0MPa、温度均为45℃;CO2流量为20L/h,在此条件下得到野菊叶提取物0.8kg,上述提取物加入固形物0.3重量倍十二烷基磺酸钠和加入固形物0.35重量倍的硬脂酸钠溶解,按常规工艺,加入常规辅料制成农用杀菌乳剂。
实施例3:野菊花蕾提取物及其悬浮剂
取野菊花蕾50kg,粉碎粒度为50目,超临界CO2萃取,萃取压力为18.12MPa,萃取温度为50℃,萃取时间为3h,其他条件确定为:分离釜I与分离釜II压力均设为6.0MPa、温度均为45℃;CO2流量为20L/h,在此条件下得到提取物4kg,上述提取物加入固形物0.16重量倍十二烷基磺酸钠和加入固形物0.3重量倍的硬脂酸钠溶解,按常规工艺,加入常规辅料制成农用杀菌悬浮剂。
实施例4:野菊根茎叶提取物及其粉剂
取野菊根茎叶50kg,干燥后,粉碎成80目,加入干粉5倍重量的石油醚,在室温下浸提3次,每次2天,合并滤液,浸提液在真空度0.06Mpa下减压浓缩,回收石油醚,浓缩至比重1.20,得到石油醚提取物,上述野菊根茎叶提取物可以用常规方法,加入常规辅料制成农用杀菌粉剂。
实施例5:野菊根茎叶提取物及其粉剂
取野菊根茎叶50kg,干燥后,粉碎成80目,加入干粉5倍重量的乙酸乙酯,在室温下浸提3次,每次3天,合并滤液,浸提液在真空度0.08Mpa下减压浓缩,回收乙酸乙酯,浓缩至比重1.05,得到乙酸乙酯提取物,上述野菊根茎叶提取物可以用常规方法,加入常规辅料制成农用杀菌粉剂。
实施例6:野菊根茎叶提取物及其悬浮剂
取野菊根茎叶40kg,干燥后,粉碎成80目,加入干粉10倍重量的甲醇,浸泡过夜,105℃回流提取2小时,取滤液,浸提液在真空度0.06Mpa下减压浓缩,回收乙醇,浓缩至比重1.08,得到甲醇提取物,上述提取物加入固形物0.3重量倍十二烷基磺酸钠和加入固形物0.15重量倍的硬脂酸钠溶解,按常规方法,加入常规辅料制成农用杀菌悬浮剂。
实施例7:野菊根茎叶提取物及其粉剂
取野菊根茎叶50kg,干燥后,粉碎成50目,加入干粉9倍重量的乙醇,浸泡过夜,105℃回流提取4小时,取滤液,浸提液在真空度0.09Mpa下减压浓缩,回收乙醇,浓缩至至比重1.05,得到乙醇提取物,上述野菊根茎叶乙醇提取物可以用常规方法,加入常规辅料制成农用杀菌粉剂。
下述实施例均能实现上述实验例2和3的效果:
实施例6
野菊根茎叶,常温干燥后,经粉碎机粉碎后,过80目筛,得到野菊茎叶粉末,按100kg/亩施用于白术种植大田。
实施例7
野菊米(花蕾),常温干燥后,经粉碎机粉碎后,过50目筛,得到野菊粉末,按10kg/亩施用于贝母种植大田。
Claims (10)
1.野菊用于植物病害防治,其特征在于:野菊及其根或茎或叶提取物在白术白绢病、根腐病、贝母根霉病等土传病害防治中的应用。
2.野菊用于植物病害防治,其特征在于:野菊提取物在制备抑制白术、贝母土传病害真菌罗氏白绢小核菌,立枯丝核菌、尖孢镰刀菌、半裸镰刀菌和茄病镰刀菌等土传病害真菌抑制中的应用。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述将野菊加入常规辅料,按照常规工艺,制成喷雾剂、乳油、悬浮剂或粉剂。
4.按照权利要求1或2或3所述野菊的用途,其特征在于:所述野菊为植物Chrysanthemum indicum的花蕾或根或茎或叶,以及花蕾、根、茎、叶的任意组合。
5.按照权利要求1所述野菊的用途,其特征还在于将权利要求4所述原料粉碎或切成段,经粉碎成10-120目组织粉末或根茎叶经切制成1-10cm的组织片段,直接施用于田间防控白术、贝母土传病害的应用。
6.如权利要求1或2或3所述野菊的用途,其特征在于:取权利要求4所述的原料,粉碎后,经超临界CO2萃取、溶剂提取等工艺得到提取物,加入常规辅料,按照常规工艺,制成各种杀菌剂,如喷雾剂、乳油、悬浮剂或粉剂。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于将野菊制成植物杀菌剂的制备方法为:将野菊根茎叶烘干,粉碎至80目,称取上述粉碎物,置恒温水浴锅中加入溶剂,浸提、滤过得浸提液,减压浓缩,得到野菊根茎叶的浓缩物,加入增溶剂和乳化剂,再按照常规工艺加入常规辅料制成喷雾剂、乳油、悬浮剂或粉剂。
8.如权利要求1或2或3或6所述的提取物,其特征在于:该提取物是由如下方法制成:
取权利要求4所述的原料,粉碎,粉碎物加入4-20倍的乙醇,恒温40-100℃恒温加热提取,分离过滤得浸提液,浸提液常温或减压浓缩,回收浸提液中的溶剂,得到提取物。
9.如权利要求1或2或3或6所述提取物,其特征还在于:该提取物是由如下方法制成:
取权利要求4所述的原料,粉碎,粉碎粒度为30-100目,超临界CO2萃取,萃取压力为18.12MPa,萃取温度为30-50℃,萃取时间为1-6h,在此条件下得到的提取物。
10.按照权利要求6或7所述的提取物,其特征还在于制成该提取物方法中,溶剂还可用水、甲醇、乙酸乙酯、石油醚替换分别得到水提取物、甲醇提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物;所述的增溶剂为十二烷基苯磺酸钠或十二烷基苯磺酸钾;所述的乳化剂为硬脂酸钠。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20121017 |