CN112353830A - 野菊叶中除螨有效部位的提取方法及应用 - Google Patents

野菊叶中除螨有效部位的提取方法及应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种野菊叶中除螨有效部位的提取方法，包括下述步骤：(1)将原料野菊叶粉末置于萃取罐中，抽真空后向萃取罐中加入溶剂，溶剂加入量为原料量的7.5～9.5倍，温度10～30℃，压力0.75～1MPa，提取时间40～60min；所述溶剂组成包括二甲醚和乙醇，所述二甲醚与乙醇的体积比为6～8：1；(2)提取完毕，将萃取液转入蒸发罐，得野菊叶亚临界初提物；(3)所得初提物经旋转蒸发回收溶剂后，用乙醇加热回溶后冷冻；过滤，滤液经旋转蒸发得含有除螨有效部位的净油。本发明通过亚临界萃取的提取方法，通过控制其中的工艺参数条件，使得制备得到的野菊叶净油具有除螨有效部位，可以直接用于除螨，也可以辅以其他辅料制备成相应的除螨产品进行使用。

Description

野菊叶中除螨有效部位的提取方法及应用
技术领域
本发明涉及一种野菊叶的新用途，具体地说是涉及一种野菊叶中除螨有效部位的提取方法及应用。
背景技术
螨虫属于节肢动物门蛛形纲广腹亚纲的一类体型微小的动物，身体大小一般都在0.5毫米左右，有些小到0.1毫米，大多数种类小于1毫米，是一种肉眼不易看见的微型害虫，种类很多。至今5261前发现在居室内生活的螨虫有40余种，其中与人体健康有关的有十多种。最常见的有尘螨、粉螨、蠕螨、疥螨等。调查表明，成年人约有97％感染螨虫，其中以尘螨为主。尘螨的尸体、分泌物和排泄物都是可致病的过敏原。它们分布在地毯、沙发、毛绒玩具、被褥、坐垫、床垫和枕芯等处滋生，以人的汗液、分泌物、脱落的皮屑为食，繁殖速度极快。其次还有：粉螨，主要在贮存的食品和粮食中繁殖；蠕螨，主要寄生在人的毛囊和皮脂腺中，如鼻、耳、头皮、前胸、后背、耳道等地方；疥螨，寄生于人和哺乳动物的皮肤表层。值得一提的是，越来越多的家庭饲养宠物，极易导致疥螨通过衣裤、被褥直接传播给人，甚至造成人与人之间的相互传播。螨虫的侵入除了对人体可造成健康危害外，对各种动物也会造成伤害，动物螨病俗称“疥癣”，是由于多种肉食性螨寄生于动物体表或表皮内所引起的一种以皮肤剧烈瘙痒、渗出性或过敏性炎症和高度接触性传播为特征的体外寄生虫病，普遍存在各地，尤以猪、羊、兔、犬、牛及鸡较多发。
因此，各国科技人员对于螨虫的防治都展开了研究。曾有效的防治是采用农药的应用，例如杀虫脒、敌百虫等。但使用农药对人体的健康以及动物的生长与产量有所影响与危害。以及考虑环境的大方向，以保护环境为前提，应减少农药的使用，避免造成污染。
发明内容
为了克服现有技术存在的不足，本发明提供了一种野菊叶中除螨有效部位的提取方法及应用。
为了达到目的，本发明提供的技术方案为：
一种野菊叶中除螨有效部位的提取方法，包括下述步骤：
(1)将原料野菊叶粉末置于萃取罐中，抽真空后向萃取罐中加入溶剂，溶剂加入量为原料量的7.5～9.5倍，温度10～30℃，压力0.75～1MPa，提取时间40～60min；所述溶剂组成包括二甲醚和乙醇，所述二甲醚与乙醇的体积比为6～8：1；
(2)提取完毕，打开萃取罐底部的出料阀，将萃取液转入蒸发罐，得野菊叶亚临界初提物；溶剂经循环压缩机压缩回收至溶剂罐中，循环使用，循环萃取多次，合并亚临界初提物；
(3)所得初提物经旋转蒸发回收溶剂后，用乙醇加热回溶后冷冻；过滤，除去不溶的蜡质、果胶和纤维等成分，滤液经旋转蒸发得含有除螨有效部位的净油。
所述乙醇为95％乙醇，购于市场。本发明所涉及的溶剂、原料等无特殊说明均购于市场。
作为优选，溶剂加入量为原料量的8.5倍，萃取温度为25℃，萃取压力为0.085MPa，萃取时间48min。
作为优选，所述野菊叶粉末的的含水率为1.0～1.1％。
作为优选，所述野菊叶粉末的的含水率为1.08％。
作为优选，所述二甲醚与乙醇的体积比为7.5：1。
作为优选，所述野菊叶粉末通过下述步骤制备得到：野菊叶经清洗烘干后，经粉碎机进行粉碎，粉粹后的野菊叶过60～100目筛后得野菊叶粉末。
作为优选，所述粉粹后的野菊叶过70目筛后得野菊叶粉末。
本发明还提供了基于上述提取方法得到的有效部位在除螨产品制备中的应用。
作为优选，将含有野菊叶中除螨有效部位的净油直接使用。可以将得到的净油直接滴于水中后进行面部清洁或其他皮肤部分的除螨；也可以将得到的净油直接滴于日用产品中，如洗衣液中进行衣物的除螨；还可以将得到的净油直接滴于水中后辅以喷壶进行喷洒除螨，等等。
作为优选，将含有野菊叶中除螨有效部位的净油辅以药学上常用的辅料制备成乳剂、喷雾剂或洗涤剂后使用。制成的乳剂可以用于皮肤除螨，喷雾剂可以用于居室内空间除螨，洗涤剂可以用于衣物等除螨。
本发明的有益效果在于：
本发明通过亚临界萃取的提取方法，通过控制其中的工艺参数条件，使得制备得到的野菊叶净油具有除螨有效部位，可以直接用于除螨，也可以辅以其他辅料制备成相应的除螨产品进行使用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明所要保护的范围并不限于此。
实施例1
一种野菊叶中除螨有效部位的提取方法，包括下述步骤：
(1)将原料野菊叶粉末置于萃取罐中，抽真空后向萃取罐中加入溶剂，溶剂加入量为原料量的8.5倍，温度25℃，压力0.85MPa，提取时间48min；所述溶剂组成包括二甲醚和95％乙醇，所述二甲醚与95％乙醇的体积比为7.5：1；
(2)提取完毕，打开萃取罐底部的出料阀，将萃取液转入蒸发罐，得野菊叶亚临界初提物；溶剂经循环压缩机压缩回收至溶剂罐中，循环使用，循环萃取3次，合并亚临界初提物；
(3)所得初提物经旋转蒸发(55℃，0.01MPa)回收溶剂后，用9倍体积的95％乙醇在55℃加热回溶3h后，于-25℃冷冻24h；过滤，除去不溶的蜡质、果胶和纤维等成分，滤液经旋转蒸发(55℃，0.01MPa)得含有除螨有效部位的净油。
所述野菊叶粉末通过下述步骤制备得到：野菊叶经清洗烘干后，经粉碎机进行粉碎，粉粹后的野菊叶过70目筛后得野菊叶粉末。
原料含水率的测定：在2个已恒质量的称量瓶中，分别称取2.0000g样品于烘箱中，在105℃下干燥2h后取出，放入干燥器内冷却0.5h，取出称质量，再次放入烘箱1h，取出冷却0.5h，称质量，直至前后两次质量相差不超0.0002g，表明样品已烘至绝干状态，称质量，计算含水率。实验测得野菊叶粉末的的含水率为1.08％。
GC/MS分析条件
毛细管柱：HP-5MS(30m×0.25mm×0.25μm)；进样口温度：240℃；载气：He，1mL/min；程序升温：程序升温，起始温度50℃保持1min，以10℃/min速度上升到260℃，保持260℃5min结束；进样量：0.5μL，分流比：25：1；传输线温度：280℃；电离方式：EI，电离能量：70eV；离子源温度：230℃；四级杆温度：160℃；质量范围35aum～455aum。GC/MS的部分分析结果如表1所示：
表1
Figure BDA0002792452920000041
含有野菊叶中除螨有效部位的净油的杀灭效果检测
方法：取涂有不同浓度含有野菊叶中除螨有效部位的净油样品溶液的滤纸，分别置于直经为9.0cm培养皿中，培养皿内周边涂抹白油与凡士林(1：1)混合物，以防螨虫爬出，培养皿中心放入试验螨虫，让其自由爬行。同时，在滤纸的上面放螨虫饲料，立即计时，于24h、48h、72h观察记录滤纸上的螨虫死亡数，测试重复三次，结果如表2所示。检测条件：试验室温度25±1℃，相对湿度为75±2％；计算公式：
Figure BDA0002792452920000051
表2
Figure BDA0002792452920000052
驱避效果检测
方法：取7只小培养皿(直径6cm.高1.5cm)，其中1只为中心培养皿，其余6只培养皿围绕中心培养皿摆放并有一处培养皿壁与中心培养皿接触.将7只培养皿摆好后用透明胶带使其位置得以固定。在中心培养皿中放人螨虫1000只左右.在周围6只培养皿中间隔放置涂有不同浓度含有野菊叶中除螨有效部位的净油样品溶液的滤纸和对照滤纸，滤纸的面积与培养皿底面积基本一致。在滤纸的上面各放螨虫饲料。将固定好的这一套试验装置放入一个(30×20×5cm)的有盖瓷盘中，加入饱和食盐溶液使瓷盘内湿度保持在75％左右，在恒温箱中(25±1℃)培养24小时。甩浮选法将饲料中的螨虫分离并收集起来，用水洗法将各培养皿及滤纸上的螨虫收集起来。分别记录滤纸上的螨虫数，测试重复三次，结果如表3所示。
计算公式：
Figure BDA0002792452920000061
表3
剂量(mg/cm<sup>2</sup>) 药物滤纸数(只) 对照滤纸螨虫数(只) 趋避率(％)
0.01 65 150 56.7
0.05 40 170 76.5
0.1 5 170 97
0.15 0 170 100
0.2 0 160 100
耐高温试验
方法：将含有野菊叶中除螨有效部位的净油样品分装样品瓶后封口，分别选择28℃、37℃、50℃、80℃四个温度控制点，分别加热1天、3天、7天、11天、30天、60天、90天、120大、150天，定期取出样品分别配制成乙醇溶液，以0.15mg/cm2的剂量进行对螨虫趋避效果试验。
结果：在28℃、37℃、50℃下三个月后没有任何影响，在80℃加热两个月后，样品对螨虫的趋避效果反而略有提高，猜测可能是由于高温下，部分挥发使活性含量增加所致。
耐pH试验
方法：将含有野菊叶中除螨有效部位的净油分别配制成pH＝5、pH＝7、pH＝9等不同pH值的水溶液，分别在几个不同的恒定温度下(28℃、37℃、50℃、80℃)放置一定时间后测试对螨虫的趋避率，并于原有样品进行对照。
结果：在pH＝9的范围内，28℃、37℃、50℃放置5个月，含有野菊叶中除螨有效部位的净油对螨虫的趋避效果均没有变化，显示其性能稳定，且酸、碱介质的影响，适宜应用于各类洗涤产品中。
含有野菊叶中除螨有效部位的净油在洗涤产品中的应用
方法：将0.9％含有野菊叶中除螨有效部位的净油加至洗涤类产品中(如洗衣皂、洗衣粉、洗衣液)，测试含有野菊叶中除螨有效部位的净油在介质中的配伍性剂及稳定性。
结果：根据采用不同百分比及不同稀释倍数的样品溶液来对螨虫的趋避率的检测，一般含有野菊叶中除螨有效部位的净油的推荐添加量为0.3％～1.0％，可以根据具体的应用要求选择最佳的添加量。
本发明含有野菊叶中除螨有效部位的净油可以直接使用。可以将得到的净油直接滴于水中后进行面部清洁或其他皮肤部分的除螨；也可以将得到的净油直接滴于日用产品中，如洗衣液中进行衣物的除螨；还可以将得到的净油直接滴于水中后辅以喷壶进行喷洒除螨，等等。
实施例2
一种野菊叶中除螨有效部位的提取方法，包括下述步骤：
(1)将原料野菊叶粉末置于萃取罐中，抽真空后向萃取罐中加入溶剂，溶剂加入量为原料量的7.5倍，温度25℃，压力0.85MPa，提取时间48min；所述溶剂组成包括二甲醚和95％乙醇，所述二甲醚与95％乙醇的体积比为6：1；
(2)提取完毕，打开萃取罐底部的出料阀，将萃取液转入蒸发罐，得野菊叶亚临界初提物；溶剂经循环压缩机压缩回收至溶剂罐中，循环使用，循环萃取3次，合并亚临界初提物；
(3)所得初提物经旋转蒸发(55℃，0.01MPa)回收溶剂后，用9倍体积的95％乙醇在55℃加热回溶3h后，于-25℃冷冻24h；过滤，除去不溶的蜡质、果胶和纤维等成分，滤液经旋转蒸发(55℃，0.01MPa)得含有除螨有效部位的净油。
所述野菊叶粉末通过下述步骤制备得到：野菊叶经清洗烘干后，经粉碎机进行粉碎，粉粹后的野菊叶过70目筛后得野菊叶粉末。野菊叶粉末的的含水率为1.08％。
杀灭效果检测结果如表4所示：
表4
Figure BDA0002792452920000071
Figure BDA0002792452920000081
驱避效果检测结果如表5所示：
表5
剂量(mg/cm<sup>2</sup>) 药物滤纸数(只) 对照滤纸螨虫数(只) 趋避率(％)
0.1 20 170 88
0.15 5 170 97
0.2 0 160 100
实施例3
一种野菊叶中除螨有效部位的提取方法，包括下述步骤：
(1)将原料野菊叶粉末置于萃取罐中，抽真空后向萃取罐中加入溶剂，溶剂加入量为原料量的8.5倍，温度25℃，压力0.85MPa，提取时间60min；所述溶剂组成包括二甲醚和95％乙醇，所述二甲醚与95％乙醇的体积比为8：1；
(2)提取完毕，打开萃取罐底部的出料阀，将萃取液转入蒸发罐，得野菊叶亚临界初提物；溶剂经循环压缩机压缩回收至溶剂罐中，循环使用，循环萃取3次，合并亚临界初提物；
(3)所得初提物经旋转蒸发(55℃，0.01MPa)回收溶剂后，用9倍体积的95％乙醇在55℃加热回溶3h后，于-25℃冷冻24h；过滤，除去不溶的蜡质、果胶和纤维等成分，滤液经旋转蒸发(55℃，0.01MPa)得含有除螨有效部位的净油。
所述野菊叶粉末通过下述步骤制备得到：野菊叶经清洗烘干后，经粉碎机进行粉碎，粉粹后的野菊叶过70目筛后得野菊叶粉末。野菊叶粉末的的含水率为1.08％。
杀灭效果检测结果如表6所示：
表6
Figure BDA0002792452920000082
Figure BDA0002792452920000091
驱避效果检测结果如表7所示：
表7
剂量(mg/cm<sup>2</sup>) 药物滤纸数(只) 对照滤纸螨虫数(只) 趋避率(％)
0.1 24 170 85.9
0.15 8 170 95.3
0.2 0 160 100
实施例4
一种野菊叶中除螨有效部位的提取方法，包括下述步骤：
(1)将原料野菊叶粉末置于萃取罐中，抽真空后向萃取罐中加入溶剂，溶剂加入量为原料量的8.5倍，温度25℃，压力0.85MPa，提取时间48min；所述溶剂组成包括二甲醚和95％乙醇，所述二甲醚与95％乙醇的体积比为7.5：1；
(2)提取完毕，打开萃取罐底部的出料阀，将萃取液转入蒸发罐，得野菊叶亚临界初提物；溶剂经循环压缩机压缩回收至溶剂罐中，循环使用，循环萃取3次，合并亚临界初提物；
(3)所得初提物经旋转蒸发(55℃，0.01MPa)回收溶剂后，用9倍体积的95％乙醇在55℃加热回溶3h后，于-25℃冷冻24h；过滤，除去不溶的蜡质、果胶和纤维等成分，滤液经旋转蒸发(55℃，0.01MPa)得含有除螨有效部位的净油。
所述野菊叶粉末通过下述步骤制备得到：野菊叶经清洗烘干后，经粉碎机进行粉碎，粉粹后的野菊叶过80目筛后得野菊叶粉末。野菊叶粉末的的含水率为1.1％。
剂量为0.15mg/cm2的含有野菊叶中除螨有效部位的净油，24h灭螨率为84.5％，48h灭螨率为94.7％，72h灭螨率为99.7％。
剂量为0.15mg/cm2的含有野菊叶中除螨有效部位的净油对螨虫的趋避率为99％，剂量为0.2mg/cm2的含有野菊叶中除螨有效部位的净油对螨虫的趋避率为100％。
实施例5
一种野菊叶中除螨有效部位的提取方法，包括下述步骤：
(1)将原料野菊叶粉末置于萃取罐中，抽真空后向萃取罐中加入溶剂，溶剂加入量为原料量的9倍，温度30℃，压力0.9MPa，提取时间55min；所述溶剂组成包括二甲醚和95％乙醇，所述二甲醚与95％乙醇的体积比为8：1；
(2)提取完毕，打开萃取罐底部的出料阀，将萃取液转入蒸发罐，得野菊叶亚临界初提物；溶剂经循环压缩机压缩回收至溶剂罐中，循环使用，循环萃取3次，合并亚临界初提物；
(3)所得初提物经旋转蒸发(55℃，0.01MPa)回收溶剂后，用9倍体积的95％乙醇在55℃加热回溶3h后，于-25℃冷冻24h；过滤，除去不溶的蜡质、果胶和纤维等成分，滤液经旋转蒸发(55℃，0.01MPa)得含有除螨有效部位的净油。
所述野菊叶粉末通过下述步骤制备得到：野菊叶经清洗烘干后，经粉碎机进行粉碎，粉粹后的野菊叶过80目筛后得野菊叶粉末。野菊叶粉末的的含水率为1.08％。
剂量为0.15mg/cm2的含有野菊叶中除螨有效部位的净油，24h灭螨率为80.1％，48h灭螨率为91.2％，72h灭螨率为98.2％。
剂量为0.15mg/cm2的含有野菊叶中除螨有效部位的净油对螨虫的趋避率为95％，剂量为0.2mg/cm2的含有野菊叶中除螨有效部位的净油对螨虫的趋避率为99％。
本发明含有野菊叶中除螨有效部位的净油可以直接使用，也可以将含有野菊叶中除螨有效部位的净油辅以药学上常用的辅料制备成乳剂、喷雾剂或洗涤剂后使用。制成的乳剂可以用于皮肤除螨，喷雾剂可以用于居室内空间除螨，洗涤剂可以用于衣物等除螨。
对比例1
采用实施例1的方法提取野菊叶，溶剂采用二甲醚。
剂量为0.15mg/cm2的含有野菊叶中除螨有效部位的净油，24h灭螨率为54.1％，48h灭螨率为63.2％，72h灭螨率为70.1％；剂量为0.2mg/cm2的含有野菊叶中除螨有效部位的净油，24h灭螨率为62.4％，48h灭螨率为69.7％，72h灭螨率为77.2％。
剂量为0.15mg/cm2的含有野菊叶中除螨有效部位的净油对螨虫的趋避率为75％，剂量为0.2mg/cm2的含有野菊叶中除螨有效部位的净油对螨虫的趋避率为80％。
对比例2
采用实施例1的方法提取野菊叶，溶剂加入量为原料量的10倍，温度40℃，压力0.5MPa，提取时间30min；二甲醚与乙醇的体积比为10：1。
所述野菊叶粉末通过下述步骤制备得到：野菊叶经清洗烘干后，经粉碎机进行粉碎，粉粹后的野菊叶过50目筛后得野菊叶粉末。野菊叶粉末的的含水率为1.2％。
剂量为0.15mg/cm2的含有野菊叶中除螨有效部位的净油，24h灭螨率为50.2％，48h灭螨率为60.1％，72h灭螨率为66.7％；剂量为0.2mg/cm2的含有野菊叶中除螨有效部位的净油，24h灭螨率为58.4％，48h灭螨率为65.7％，72h灭螨率为72.6％。
剂量为0.15mg/cm2的含有野菊叶中除螨有效部位的净油对螨虫的趋避率为71％，剂量为0.2mg/cm2的含有野菊叶中除螨有效部位的净油对螨虫的趋避率为79％。
对比例3
将野菊叶粉末采用水提得到野菊叶提取物：称取野菊叶适量，提取三次，第一次加15～20倍量水，提取1.3～1.6h，第二次加10～15倍量水，提取1～1.2h，第三次加5～9倍量水，提取0.5～0.9h，每次过滤，合并滤液，滤液浓缩至野菊叶重量的4～6倍，过滤即得。
剂量为0.15mg/cm2的野菊叶提取物，24h灭螨率为23.1％，48h灭螨率为28.9％，72h灭螨率为30.4％。
剂量为0.15mg/cm2的野菊叶提取物对螨虫的趋避率为40％，剂量为0.2mg/cm2的野菊叶提取物对螨虫的趋避率为44％。
以上结合实施例对本发明进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍属于本发明的专利涵盖范围之内。

Claims (10)

1.一种野菊叶中除螨有效部位的提取方法，其特征在于包括下述步骤：
(1)将原料野菊叶粉末置于萃取罐中，抽真空后向萃取罐中加入溶剂，溶剂加入量为原料量的7.5～9.5倍，温度10～30℃，压力0.75～1MPa，提取时间40～60min；所述溶剂组成包括二甲醚和乙醇，所述二甲醚与乙醇的体积比为6～8：1；
(2)提取完毕，打开萃取罐底部的出料阀，将萃取液转入蒸发罐，得野菊叶亚临界初提物；溶剂经循环压缩机压缩回收至溶剂罐中，循环使用，循环萃取多次，合并亚临界初提物；
(3)所得初提物经旋转蒸发回收溶剂后，用乙醇加热回溶后冷冻，过滤，滤液经旋转蒸发得含有除螨有效部位的净油。
2.根据权利要求1所述野菊叶中除螨有效部位的提取方法，其特征在于：溶剂加入量为原料量的8.5倍，萃取温度为25℃，萃取压力为0.085MPa，萃取时间48min。
3.根据权利要求1所述野菊叶中除螨有效部位的提取方法，其特征在于：所述野菊叶粉末的的含水率为1.0～1.1％。
4.根据权利要求3所述野菊叶中除螨有效部位的提取方法，其特征在于：所述野菊叶粉末的的含水率为1.08％。
5.根据权利要求1所述野菊叶中除螨有效部位的提取方法，其特征在于：所述二甲醚与乙醇的体积比为7.5：1。
6.根据权利要求1所述野菊叶中除螨有效部位的提取方法，其特征在于：所述野菊叶粉末通过下述步骤制备得到：野菊叶经清洗烘干后，经粉碎机进行粉碎，粉粹后的野菊叶过60～100目筛后得野菊叶粉末。
7.根据权利要求6所述野菊叶中除螨有效部位的提取方法，其特征在于：所述粉粹后的野菊叶过70目筛后得野菊叶粉末。
8.一种基于权利要求1提取方法得到的有效部位在除螨产品制备中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：将含有野菊叶中除螨有效部位的净油直接使用。
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：将含有野菊叶中除螨有效部位的净油辅以药学上常用的辅料制备成乳剂、喷雾剂或洗涤剂后使用。
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罗金岳等: "超临界CO_2提取野菊花中的精油", 《生物质化学工程》 *

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