CN102726295A - 一种元宝枫的组织培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种元宝枫组织培养繁殖方法，该方法包括：在3月上旬采集树龄为4～6年的元宝枫母树的当年生枝芽作为外植体，消毒后切段并接种到MS+BA+NAA的培养基中进行组织诱导培养，培养环境为pH5.6～5.8，20～24℃，光照强度1500lux，每天18小时光照6小时黑暗。本发明通过建立科学的培养基，辅以合理的技术手段，实现了增值效果好，质量高的组织培养繁殖。同时结合元宝枫自身生长的特点，在进行组织培养的过程中，环境的应激较温和，提高外植体的生根率。
Description
技术领域
本发明涉及植物繁殖领域，具体地说涉及一种元宝枫的组织培养方法。
背景技术
元宝枫书槭树科槭属落叶乔木，一般高8~10m，树皮纵裂。单叶，对生，呈掌状，花期在5月份，果期在9月份。元宝枫是著名的秋季观赏类红叶树种，树姿优美，叶形秀丽，嫩叶红色，秋季转变为黄色和火红色，具有极高的观赏价值。
元宝枫弱阳性，耐半荫，耐寒，较抗风，不耐干热和强烈日晒，生长速度中等。由于其生长特性的原因，目前元宝枫主要通过种子来进行繁殖，但种子繁殖的生长周期过长，品质差异可能较大，这也是制约元宝枫推广的主要原因，因而元宝枫在市面上价格高贵。
发明内容
发明目的：本发明的目的是提供一种增值效果好、无褐化的元宝枫组织培养繁殖方法，用于对元宝枫进行无性快速繁殖。
技术方案：为了实现上述发明目的，本发明的一种元宝枫的组织培养方法包括：在3月上旬采集树龄为4~6年的元宝枫母树的当年生枝芽作为外植体，消毒后切段并接种到MS+BA+NAA的培养基中进行组织诱导培养，培养环境为pH 5.6~5.8，20~24℃，光照强度1500 lux，每天18小时光照6小时黑暗。
本发明的外植体进行灭菌后立即投入培养基，培养基制备好后，在未加入NAA情况下先进行121℃下的高温蒸汽消毒，然后再加入NAA。
本发明的培养基中，MS培养基是目前植物组织培养常用的无机物培养基，BA是生长素，而NAA是萘乙酸。本发明的培养基配制可提高外植体的生根率，并降低褐变的可能。
具体地说，所述培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.6mg/L NAA培养基，每升培养基中加入35~45g蔗糖和20~25g琼脂。
所述外植体的消毒方法是：将外植体方法如4摄氏度50%的丙醇漂洗45~60秒，再用15%双氧水再消毒4~5分钟，再用无菌水清洗多遍。
所述外植体切段后每段长0.8~1.2cm。切段时是在无菌滤纸上进行，防止受到病菌污染。本发明切段长度较长，是因为切段过短元宝枫生根率较低。
有益效果：组织培养快繁是一种有效的繁殖方式，本发明通过建立科学的培养基，辅以合理的技术手段，实现了增值效果好，质量高的组织培养繁殖。同时结合元宝枫自身生长的特点，在进行组织培养的过程中，环境的应激较温和，提高外植体的生根率。
具体实施方式
实施例
本实施例的一种元宝枫的组织培养方法包括：在3月上旬采集树龄为4~6年的元宝枫母树的当年生枝芽作为外植体，将外植体方法如4摄氏度50%的丙醇漂洗45~60秒，再用15%双氧水再消毒4~5分钟，再用无菌水清洗多遍。然后取出消毒后的外植体，在无菌滤纸上进行切段，外植体切段后每段长0.8~1.2cm，切段并接种到培养基中。培养基的配制是：MS+2.0mg/L 6-BA+0.6mg/L NAA，每升培养基中加入35~45g蔗糖和20~25g琼脂，从而从无机物、氮源、碳源、生长因子等各方面满足了细胞诱导分化的条件。组织诱导培养在pH 5.6~5.8，20~24℃的环境下进行，光照强度1500 lux，每天18小时光照6小时黑暗。
试验例
下面通过对比试验证明本发明的增值效果。
上述实施例为试验组，对照组与试验组的步骤相似，每升培养基中加入40g蔗糖和25g琼脂，在pH为5.7，22℃环境下，光照为1500 lux，进行诱导培养，所不同的在于培养基是MS+0.6mg/L 6-BA+0.3mg/L IAA，IAA是吲哚乙酸。
对照组经过1个月的培养，其中褐化苗数达到总量的28%，而本试验组的褐化苗数达到总量的8.5%。另一方面，试验组的生根率为82%，而对照组的生根率达88%。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (4)
1. 一种元宝枫的组织培养方法，其特征在于：在3月上旬采集树龄为4~6年的元宝枫母树的当年生枝芽作为外植体，消毒后切段并接种到MS+BA+NAA的培养基中进行组织诱导培养，培养环境为pH 5.6~5.8，20~24℃，光照强度1500 lux，每天18小时光照6小时黑暗。
2. 根据权利要求1所述的一种元宝枫的组织培养方法，其特征在于：所述培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.6mg/L NAA培养基，每升培养基中加入35~45g蔗糖和20~25g琼脂。
3. 根据权利要求1所述的一种元宝枫的组织培养方法，其特征在于：所述外植体的消毒方法是：将外植体方法如4摄氏度50%的丙醇漂洗45~60秒，再用15%双氧水再消毒4~5分钟，再用无菌水清洗多遍。
4. 根据权利要求1所述的一种元宝枫的组织培养方法，其特征在于：所述外植体切段后每段长0.8~1.2cm。
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