CN102716277B - 藏药组合物及其在制备消炎止痛药物与卫生产品中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种藏药组合物包括砂生槐子40～60份、藏红花5～15份、雪莲花25～35份、铁棒锤3～12份、宽筋藤40～50份、喜马拉雅紫茉莉35～55份、雪猪油2～10份。该组合物具有消炎、止痛、杀菌、止痒等功效。本发明还提供上述藏药组合物在制备消炎、止痛、杀菌、止痒药物与卫生产品中的应用。以上述藏药组合物为活性组分，配以药剂学上可接受的辅料，可以制备成相应的药物制剂，特别是外用药的所有剂型。尤其是外用液体制剂。本发明藏物组合物能够有效对抗缓解部分革兰氏阴性菌与革兰氏阳性菌引起的机体病变，在消炎、止痛、杀菌、止痒方面具有明显的医疗卫生用途，各种藏药组合物制剂制备方法简便易控。

Description

藏药组合物及其在制备消炎止痛药物与卫生产品中的用途

技术领域

本发明涉及一种药物组合，特别是涉及一种藏药组合及其用途，属于医药生物领域。

背景技术

细菌感染是当前人们重要的致病原因之一，常见的革兰氏阴性菌、阳性菌如金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、白色念珠菌(Monilia albican)等能引发从化脓、疟疾、败血症、口腔炎、阴道炎到神经炎等诸多疾病。而红色毛癣菌(Trichophyton.rubrum)、絮状表皮癣菌(Epidermophyton.floccosum)、石膏样毛癣菌(Trichophyton mentagrophyte)等真菌则是重要的皮肤癣致病菌，会引发皮肤病变。炎症，俗称发炎，指生物组织受到外伤、出血、或病原感染等刺激，激发的生理反应，其中包括了红肿、发热、疼痛等症状。炎症是十分常见而又重要的基本病理过程，体表的外伤感染和各器官的大部分常见病和多发病(如疖、痈、肺炎、肝炎、肾炎等)都属于炎症性疾病。感染与炎症是机体常见的病变，会引发疼痛、瘙痒、红肿、发热等多种机体反应。由于部分炎症是由细菌真菌感染引起，因此目前综合治疗上述疾病的药物中，特别是致病因不明上述疾病中，以抗生素使用最为广泛。而长期大量使用抗生素则产生的日益严重的副作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种藏药组合物及其制剂，以及其制备方法与用途。

本发明藏药组合物的技术方案如下：

一种藏药组合物，其特征在于：包括砂生槐子40～60份、藏红花5～15份、雪莲花25～35份、铁棒锤3～12份、宽筋藤40～50份、喜马拉雅紫茉莉35～55份、雪猪油2～10份。

上述藏药组合中：

砂生槐子：记载于《卫生部药品标准藏药第一册》(以下简称《藏药部颁》)(标准号：WS3-BC-0070-95，藏语名称：觉伟哲吾)，是豆科植物砂生槐(Sophora moocrofiiana(Benth.)Baker)的干燥种子。功能与主治在于解毒，引吐胆病；用于白喉病，黄疸型肝炎，化脓性扁桃体炎、虫病。

藏红花(Crocus sativus L.)是鸢尾科植物番红花(Crocus sativus L.)花柱的上部及柱头。中医认为具有活血、化瘀、通络、凉血解毒、消炎止痛的作用。现代西方医学认为其药理机制为镇静、祛痰、解痉，用于胃痛、调经，可治痢疾、麻疹、发热黄疸，肝脾肿大，泌尿道感染及糖尿病等。

雪莲花：记载于《藏药部颁》(标准号：WS3-BC-0094-95，藏语名称：恰果苏巴)，为菊科植物水母雪莲花(Saussurea medusa Maxim.)或绵头雪莲花(S.laniceps Hand Mazz.)的干燥全草。功能与主治在于清热解毒，消肿止痛。用于头部创伤，炭疽，热性刺痛，妇科病，类风湿性关节炎，中风。外敷消肿。

铁棒锤：记载于《藏药部颁》(标准号：WS3-BC-0079-95，藏语名称：榜那)，为毛莨科植物伏毛铁棒锤(Aconitum flavum Hand.-Mazz.)和铁棒锤(A.pendulumBusch.)的干燥块根。功能与主治在于驱寒止痛，祛风定惊。用于龙病，寒病，黄水病，麻风，癫狂等症。

喜马拉雅紫茉莉：记载于《藏药部颁》(标准号：WS3-BC-0103-95，藏语名称：巴朱)，为紫茉莉科植物喜马拉雅紫茉莉(Mirabilis himalaica(Edgew.)Heim.)的干燥根。功能与主治在于温肾，生肌，利尿，排石，干“黄水”。用于胃寒，肾寒，下身寒，阳痿浮肿，膀胱结石，腰痛，关节痛，“黄水”痛。

雪猪油：记载于《全国中草药汇编(上、下册)》(谢宗万主编，人民卫生出版社，1996年)，是松鼠科动物喜马拉雅旱獭的脂肪油。功能与主治在于除风湿，解疮毒。主治脚生痒疮，风湿肿痛，臁疮久烂及湿热疮毒等症。

上述藏药组合物具有消炎、止痛、杀菌、止痒等功效，经动物模型试验证明具有以下方面药效：

一、消炎作用。上述藏药组合物对二甲苯、角叉莱胶、巴豆油所致的机体炎症反应具有较强消炎作用，对角叉菜胶所致的动物关节肿胀有明显抑制作用。

二、止痛作用。上述藏药组合物能缓解由物理、化学因素引起的动物疼痛感，提高痛阈。

一、杀菌作用。上述藏药组合物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)、白色念珠菌、红色毛癣菌、絮状表皮癣菌、石膏样小孢子菌(Microsporum gypseum)、石膏样毛癣菌均有明显杀灭作用。这些微生物中，金黄色葡萄球菌是一种革兰氏染色阳性球型细菌，是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。大肠杆菌是革兰氏阴性短杆菌，是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，一般不致病，但某些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性，尤其对婴儿和幼畜(禽)，常引起严重腹泻和败血症；铜绿假单胞菌原称绿脓杆菌，在自然界分布广泛，为土壤中存在的最常见的细菌之一。铜绿假单胞菌是条件致病菌，是医院内感染的主要病原菌之一，引起的感染病灶可导致血行散播，而发生菌血症和败血症。烧伤后感染了铜绿色假单胞菌可造成死亡。白色念珠菌是一种真菌，也是一种条件致病菌。白色念珠菌可侵犯人体许多部位，可引起皮肤念珠菌病、粘膜念珠菌病、内脏及中枢神经念珠菌病。红色毛癣菌属、絮状表皮癣菌属、石膏样小孢子菌属是常见的皮肤浅部真菌病致病菌，引发如手癣、足癣、头癣等。

四、止痒作用。上述藏药组合物对磷酸组织胺引起的瘙痒有具有较好的缓解作用。

基于上述药效原理，上述藏药组合物可以应用于制备杀菌药物与卫生消毒产品，特别用于杀灭金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、红色毛癣菌、絮状表皮癣菌、石膏样小孢子菌、石膏样小孢子菌的制剂与产品；可以应用于制备消炎药物与卫生产品；可以应用于制备止痒药物，特别是同时包括清凉止痒与杀菌止痒作用的局部止痒药物与卫生产品；可以应用于制备止痛药物与卫生产品。药物与卫生产品包括“药准字”产品、“消字号”产品或“妆字号”产品等。

以上述藏药组合物为活性组分，配以药剂学上可接受的辅料，可以制备成相应的药物制剂，特别是外用药的所有剂型。尤其是外用液体制剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：(1)藏物组合物能够有效对抗缓解部分革兰氏阴性菌与革兰氏阳性菌引起的机体病变，在消炎、止痛、杀菌、止痒方面具有明显的医疗卫生用途；(2)经动物毒性试验证明具有用药安全性；(3)各药物组分均公开在国家级药材(物)标准中，具有已验证的药效与副作用；(4)各药物组分常见易得；(5)藏药组合物制剂制备方法简便易控。

附图说明

图1是酊剂制备方法示意图。

图2是搽剂制备方法示意图。

图3是涂抹剂制备方法示意图。

具体实施方式

实施例一

下面结合附图，采用优选实施例本发明藏药组合物外用药制剂的制备方法予以说明。

1、酊剂制备方法

藏药原料组分及配比：砂生槐子40～60g、藏红花5～15g、雪莲花25～35g、铁棒锤3～12g、宽筋藤40～50g、喜马拉雅紫茉莉35～55g、雪猪油2～10g；选取各药材生药。如图1所示，取砂生槐子、藏红花、雪莲花、铁棒锤、宽筋藤、喜马拉雅紫茉莉加工成粗粉，加入15.5～16.5倍乙醇(W/V)，浸提110～130hr，过滤，留取乙醇浸提液待用；取雪猪油加热熔化，放冷至常温，加入10％(W/W)氯仿充分搅拌至乳化完全，加入乙醇浸提液中，混匀即可。

2、搽剂制备方法

藏药原料组分及配比同“1、酊剂制备方法”。

如图2所示，取砂生槐子、藏红花、雪莲花、铁棒锤、宽筋藤、喜马拉雅紫茉莉加工成粗粉，加入18～22倍体积冷水常规方法渗漉，取渗漉液浓缩至稠膏，加入13.5～14.5倍乙醇(W/V)，混匀，得乙醇提取液待用；另取雪猪油加热熔化，放冷至常温，加入10％(W/W)氯仿充分搅拌至乳化完全，加入乙醇提取液中，混匀即可。

3、涂抹剂制备方法

藏药原料组分及配比“1、酊剂制备方法”，另加乙基纤维素。

如图3所示，取砂生槐子、藏红花、雪莲花、铁棒锤、宽筋藤、喜马拉雅紫茉莉加工成粗粉，加入15.5～16.5倍乙醇(W/V)，浸提110～130hr，过滤，留取乙醇浸提液待用；取雪猪油加热熔化，放冷至常温，加入10％(W/W)氯仿充分搅拌至乳化完全，加入乙醇浸提液中，加入成膜剂乙基纤维素3.5～4.5kg/100L溶液，混匀即可。

下面结合试验例，对本发明藏药组合物不同外用药剂型的药效及用药安全性予以说明。

试验例一

以下实验室抗菌效果和毒性试验例说明本藏药组合物的酊剂实际杀菌效果及其生物安全性。

1、方法

1.1试验材料及制备

1.1.1藏药酊剂制备

藏药组合物酊剂依实施例一“1、酊剂制备方法”制备得到(以下简称藏药酊剂)。

1.1.2菌悬液及菌片制备

分别取金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、大肠杆菌(8099)、铜绿假单胞菌(ATCC15442)、白色念珠菌(ATCC10231)(中国科学院微生物研究所提供)纯培养菌落接种于营养琼脂斜面，37℃培养24hr。取新鲜培养物，用含10g/L蛋白胨的磷酸盐缓冲液(PBS)洗下菌苔，充分振荡混匀，配制成试验浓度的菌悬液。分别取上述各菌悬液0.02ml，滴染于1.0cm×1.0cm脱脂白平纹布片上，置37℃恒温箱中干燥30min，制成菌片。

1.2载体定量杀菌试验

试验在20℃水浴条件下进行。按每片菌片5.0ml用量，将试验酊剂分配到无菌平皿内(阳性对照为PBS)，将菌片浸泡于其中，作用至预定时间，取出菌片移入含5.0ml中和剂(经中和剂鉴定试验确认为含1000mg/L吐温80的PBS)试管中，混匀。中和作用10min，经充分振荡洗脱，取洗脱液接种培养进行活菌计数，计算杀灭率。试验重复3次。

1.3毒性试验

1.3.1急性经口毒性试验

取体重18～22g昆明种小鼠20只(贵阳医学院实验动物中心提供，动物合格证号SCXK(黔)2009-0001)，雌、雄各半。试前禁食过夜，不限饮水，经口灌胃染毒，在预备试验基础上进行正式试验。采用一次最大限度试验法，设计5000mg/kg体重一个剂量，按0.2ml/10g体重一次经口灌胃染毒。染毒后观察动物一般状况，中毒症状及死亡情况。连续观察期限14d，计算半数致死量(LD50)，确定急性毒性分级。

1.3.2完整皮肤刺激试验

取体重2.0～2.2g新西兰兔3只(动物来源同上)，2雌1雄。实验前24hr，剪去兔背部脊柱两侧的毛，去毛面积各为3cm×3cm。在确认去毛范围无皮肤损伤后，取藏药酊剂原液0.5ml滴于2.5cm×2.5cm双层纱布上，并敷贴在左侧去毛区皮肤表面，然后用一层无刺激塑料薄膜覆盖，再用无刺激胶布和绷带固定，右侧皮肤作为空白对照。涂敷4hr后，用温蒸馏水除去残留受试物，观察除去受试物后1hr、24hr、48hr皮肤反应。按2002年版《消毒技术规范》规定的标准计算积分和刺激强度评价。

1.3.3皮肤变态反应试验

取体重200～300g豚鼠(动物来源同上)，设试验组、阳性对照组和阴性对照组，每组16只，雌雄各半。实验前24hr，剪去豚鼠背部脊柱左侧的毛，去毛面积为3cm×3cm，在确认去毛范围无皮肤损伤后，取藏药酊剂原液0.5ml滴于2.0cm×2.0cm双层纱布上，并敷贴在左侧去毛区皮肤表面，后用一层无刺激塑料薄膜覆盖，再用无刺激胶布和绷带固定，持续6hr、7d和14d以同样方法重复一次。末次诱导后14d，取藏药酊剂重复敷贴药物1次，于6hr后，用温蒸馏水除去残留受试物；24hr和48hr后观察皮肤反应。阳性对照组用浓度40g/L的2，4-二硝基氯苯作诱导物，按上述方法敷贴，然后用激发浓度12g/L的该诱导物进行激发。阴性对照组动物仅于末次诱导后14d，给藏药酊剂进行激发接触。

1.3.4小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验

取体重25～30g昆明种小鼠50只(动物来源同上)，分成5组，每组10只，雌雄各半。试验组设5000mg/kg、2000mg/kg和500mg/kg体重等3个剂量组，设阳性对照组(环磷酰胺40mg/kg体重)与阴性对照组(蒸馏水)。采用30hr染毒法，经口灌胃给药，两次给药间隔24hr。于末次给药后6hr处死动物，取胸骨髓直接涂片、甲醇固定、Giemsa染色。每只鼠镜检计数1000个嗜多染红细胞(PCE)，观察PCE/NCE的比值。微核率以千分率表示，用波松分布u检验进行统计学处理。

2结果

2.1载体定量杀菌试验结果

试验结果表明，藏药酊剂原液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌作用2min，杀灭率均达到为100％(表1)。

表1藏药酊剂杀菌试验结果

2.2毒性试验结果

2.2.1小鼠急性经口毒性试验

试验组动物在染毒后观察期间，一般情况良好，反应灵活，饮食正常，无死亡。试验结束后处死动物，大体解剖未见内脏有明显病理改变。藏药酊剂小鼠经口毒性LD₅₀＞5000mg/kg体重，属于实际无毒。

2.2.2皮肤刺激试验结果

藏药酊剂原液对新西兰兔皮肤一次完整皮肤刺激试验，皮肤无不良反应，刺激指数为0，属无刺激性。

2.2.3皮肤变态反应试验结果

藏药酊剂原液经致敏试验激发接触处理后，豚鼠皮肤试验区域未见明显红斑和水肿，致敏率为0，对豚鼠完整皮肤无变态反应。

2.2.4小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果

试验结果表明，藏药酊剂各剂量组与阴性对照组比较，对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率无显著性差异(P＞0.05，PCE/NCE均＞0.1)，与阳性对照组比较有高度显著性差异(P＜0.01)。该酊剂对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果为阴性(表2)。

表2藏药酊剂小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果

上述动物试验例表明，藏药组合物酊剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌均有良好的杀灭效果。毒理试验证明藏药酊剂属于实际无毒，其原液对皮肤黏膜无刺激性。

试验例二

以下试验例说明本藏药组合物搽剂的消炎、止痛药效及用药安全性。

1实验材料

1.1动物昆明种小白鼠和Wistar大鼠(动物来源同试验例一)；新西兰兔(动物来源同试验例一)；豚鼠(动物来源同试验例一)。

1.2药物藏药组合物搽剂依实施例一“2、搽剂制备方法”制备得到(以下简称藏药搽剂)，分别涂膜制成高(10％)、中(5％)、低(2.5％)剂量三个浓度。解痉止痛酊(江苏启东制药厂，批号：100826)，氢化可的松注射液(江苏扬州制药厂，批号101105)。

2方法与结果

2.1止痛作用

2.1.1对热板所致小白鼠痛阈的影响

取20～22g昆明种小白鼠，放在预先加热至(55℃)的金属板上，以舔后足为痛反应指标，实验前将每只动物进行预选，痛阈反应在25s内的小白鼠为合格者。将预选合格小白鼠50只，随机分为5组，每组10只，测定正常痛阈值2次，取其均值为小白鼠的正常痛阈值。给药组分别于小白鼠后足涂不同浓度的藏药搽剂，阳性药组涂解痉止痛酊，空白对照组涂赋形剂，涂药体积为0.1ml/只，10min涂1次，共涂3次，于涂药后0.5、1、2hr测定其痛阈值。实验结果表明，藏药搽剂能明显提高小白鼠痛阈，结果见表1。

表1对热板所致小白鼠痛阈的影响(s，

)

与对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001

2.1.2对醋酸所致小白鼠扭体反应的影响

昆明种小白鼠100只，体重18～22g，雌雄各半，将小白鼠腹部的毛剪掉，随机分为5组，每组20只，分别于剪毛处涂上不同受试药液。对照组涂赋形剂，涂药体积每次0.2ml/只，10minl次，共3次，涂药后30min，于腹腔注射0.7％醋酸0.1ml/10g体重，5min后观察并记录小白鼠15min内扭体次数。结果表明，藏药搽剂对醋酸所致小白鼠扭体反应有明显的抑制作用，结果见表2。

表2对醋酸所致小白鼠扭体反应的影响(

)

与对照组比较，^**P＜0.01，^***P＜0.001

2.1.3小白鼠甩尾法

昆明种小白鼠50只，体重20～25g，将小白鼠随机分为5组，每组10只。对照组涂赋形剂，给药组分别涂不同浓度的藏药搽剂及解痉止痛酊(尾尖处1cm不涂药)，涂药体积0.2ml/只，15min 1次，共2次。涂药30min后，采用小白鼠光电测痛仪测定疼痛潜伏期，将小白鼠分别置于固定的圆筒内，尾巴轻轻放入尾槽，待安静后，开启测痛仪，光源对准距尾尖0.5cm处，开始测定疼痛潜伏期。实验结果表明，藏药搽剂给药后30min高剂量组及中剂量组均可使小白鼠疼痛潜伏期延长，结果见表3。

表3本发明组合物涂抹剂对小白鼠止痛作用(光电热刺激甩尾法)的影响(s，

)

与对照组比较，^*P＜0.05，^***P＜0.00l

2.2消炎实验

2.2.1对巴豆油所致小白鼠耳廓肿胀的影响

小白鼠50只，雄性，体重24～28g，随机分为5组，每组10只，分别将小白鼠右耳正反两面涂巴豆油混合致炎液(内含巴豆油2％，无水乙醇20％，无水乙醚78％)，0.05ml/只，使其发炎肿胀，30min后分别涂受试药液。对照组涂赋形剂，给药组分别涂不同浓度的藏药搽剂、氢化可的松、解痉止痛酊，涂药体积0.05ml/只，每hrl次，4hr后将小白鼠处死，用打孔器于两耳同一部位分别打下一个直径为0.9mm的耳片，精密称重，以右耳重量减去左耳重量即为右耳实验肿胀重量。由此计算肿胀抑制率，并做t检验，比较对照组与给药组间的显著差异性。实验结果表明，藏药搽剂对小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用，高、中两个剂量组其抑制作用与对照组比较有非常显著性差异(P＜0.001)，结果见表4。

表4对巴豆油所致小白鼠耳廓肿胀的影响()

与对照组比较，^***P＜0.001

2.2.2对大鼠角叉菜胶性关节肿胀的影响

取Wistar大鼠40只，雄性，体重130～150g，随机分为4组，每组10只，分为给药组和对照组，各鼠灌服4ml水，以戊巴比妥钠40mg/kg腹腔注射，麻醉后，先测各鼠右后肢踝关节周长为实验前周长值，每隔15min于右后踝关节处分别涂药物或赋形剂，0.4ml/只，共2次，然后于该处皮下注射1％角叉菜胶溶液0.05ml/只致炎，于致炎后1内再涂药物或赋形剂3次，于致炎后1、3、5hr时测踝关节周长，致炎后的周长与致炎前的周长之差为肿胀度。实验结果表明，藏药搽剂对大鼠角叉菜胶所致的关节肿胀有明显的抑制作用，其作用可持续5hr以上，结果见表5。

表5对大鼠角叉菜胶性关节肿胀的影响(

)

与对照组比较，^**P＜0.01，^***P＜0.001

2.3皮肤毒性实验

2.3.1皮肤急性毒性实验

2.3.1.1完整皮肤的急性毒性实验

选用成年健康家兔16只，体重2.5～3.0kg，雌雄各半，随机分为4组，每组4只。于给药前24hr将动物背部用脱毛剂脱毛，形成6.5cm×6.5cm脱毛区。实验时，藏药搽剂组按高、中、低剂量分别涂敷于动物背部脱毛区，对照组给予赋形剂，涂药体积2ml/只。然后用无刺激性纱布覆盖，无刺激性胶布固定。24hr后将药膜揭下，用湿纱布擦净，每日观察，连续1wk。结果给药后动物皮肤、毛发、眼睛和黏膜均无变化，呼吸、心率及四肢活动也无变化，无动物死亡，动物体重日渐增加。

2.3.1.2破损皮肤的急性毒性实验

选用成年健康家兔16只，体重2.5～3.0kg，雌雄各半，随机分为4组，每组4只。于给药前24hr将动物背部脱毛，形成6.5cm×6.5cm脱毛区。实验时，在动物脱毛区刮成渗血，给药组按高、中、低剂量及赋形剂分别涂敷渗血部，涂药体积2ml/只。然后用无刺激性纱布覆盖，无刺激性胶布固定。24hr后将药膜揭下，并用湿纱布擦净，每日观察，连续1wk。结果给药后动物皮肤、毛皮、眼睛和黏膜均无变化，呼吸、心率及四肢活动也无变化，无动物死亡，动物体重日渐增加。

2.3.2本藏药搽剂的皮肤刺激实验

选用2.0～2.5kg的成年白色家兔4只，在给药前24hr预先将动物脊柱两侧对称脱毛4块，脱毛面积每块25cm2。给药采用左右侧自身对照，分完整皮肤组和破损皮肤组，即左侧2块为完整皮肤组，右侧2块为破损皮肤组。左侧2块分别赋形剂及高剂量本发明组合物涂抹剂1ml；右侧2块皮肤用手术刀片划井字破损，直径2cm，以刺伤表皮，不伤真皮，有轻度渗血为度，也分别涂赋形剂及高剂量本发明组合物涂抹剂1ml。涂药后24hr，用纱布蘸温水洗去药物，记录去除药物后1、24、48、72hr给药部位的红斑和水肿现象，进行评分。结果完整皮肤组去除药物后24、72hr给药部位红斑和水肿评分均为0分，即均未出现红斑、水肿。破损皮肤组去除药物后24h赋形型、高剂量本发明组合物涂抹剂均有1块红斑评分1分，其他均为0分；72hr红斑、水肿评分均为0分。结果表明，本藏药搽剂对完整皮肤和破损皮肤均无刺激性。

2.3.3本藏药搽剂的皮肤过敏实验

选用白色豚鼠30只，雌雄各半，体重250～300g，将豚鼠随机分为3组，即空白对照组、阳性药组、本藏药搽剂组。实验前24hr用脱毛剂将豚鼠背部两侧毛脱掉，脱毛面积每侧3cm×3cm。给药组每只豚鼠左侧脱毛区涂高剂量本发明组合物涂抹剂0.2ml，空白对照组涂等体积赋形剂，阳性药组给1％2，4-二硝基氯苯。给药后用油纸及纱布覆盖，固定，使药物持续作用6hr，实验第7d和第14d以同样方法重复给药。于末次给受试物致敏后14d，将受试物0.2ml涂于豚鼠背部右侧脱毛区，阳性药组涂0.1％2，4-二硝基氯苯。6hr后去掉受试物，即刻观察，然后于24、48及72hr再次观察皮肤过敏反应情况。结果表明，2，4-二硝基氯苯组动物皮肤受试区自激发给药6hr后，有明显轻度红斑出现，无水肿，致敏率100％。对照组(赋形剂)在激发给药6hr后1只动物略见红斑，24hr恢复正常，认为无致敏现象。本发藏药搽剂组动物皮肤受试自激发给药后6～72hr均未出现红斑及水肿，与对照组比较无差异，由此可见本藏药搽剂不产生致敏作用，结果见表6。

表6本发明组合物涂抹剂对豚鼠皮肤过敏的影响

上述动物试验表明，本藏药组合物搽剂对小鼠热板致痛有明显的抑制作用，用药后1hr作用最强，在2hr时仍有止痛作用；对醋酸诱发的小鼠扭体反应次数也有明显的抑制作用；对光热刺激所致小鼠疼痛潜伏期明显延长；本发明组合物涂抹剂对巴豆油混合致炎液所致小鼠耳肿胀和对角叉菜胶所致大鼠关节肿胀也有明显的抑制作用。本藏药组合物搽剂用于家兔完整皮肤和破损皮肤上均未引起急性毒性反应，对家兔皮肤无刺激性，外用对豚鼠皮肤无致敏作用。

试验例三

以下试验例说明本藏药组合物的涂抹剂的药效学效果

1材料

1.1受试药物及药品藏药组合物涂抹剂同试验例一，以下简称藏药涂抹剂；0.5％碘伏消毒液(四川大学华西药学院药理学教研室，批号100707)；醋酸可的松眼药水(江西抚州制药厂，批号100905)。

1.2菌株金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、乙型溶血性链球菌、变形杆菌、绿脓杆菌、肺炎双球菌、加德纳杆菌、淋球菌四川大学微生物教研室提供，试验采用第二代纯培养物。

1.3动物新西兰兔(动物来源同试验例一)；昆明种小白鼠、SD大鼠(动物来源同试验例一)；豚鼠(动物来源同试验例一)。

2方法与结果

2.1体外抗菌试验

上述细菌每个菌种采用10株。常规试管法试验，每稀释管1ml，加入新鲜菌液(含菌量10万个)，18hr观察细菌生长情况，如无法判断时则将可疑管接种到相应平板培养基上，培养18hr观察有无细菌生长。根据每个菌种10个菌株的MIC(最低抑菌浓度)，利用回归方程求得MIC₅₀、MIC₉₀。结果见表1。

表1藏药涂抹剂、0.5％碘伏消毒液体外印菌试验结果

“-”示无菌生长，“+”示有菌生长

2.2抗二甲苯致小鼠耳肿胀试验

雄小鼠72只体重25.55±2.28g，随机分6组，轻麻下将二甲苯涂于动物左耳前后两面，每鼠0.02ml，0.5hr后再按表2剂量在试验部位涂受试药物和对照物。4hr后将小白鼠颈椎脱臼致死，6mm打孔器打下圆耳片，称取鼠耳重量，计算肿胀度与肿胀抑制率，见表2。

表2藏药涂抹剂对小鼠耳肿胀的影响(n＝12)

与对照组比较^**P＜0.01

2.3抗角叉菜胶致大鼠足跖肿胀试验

大白鼠50只雌雄各半，体重140.5±12.16g，随机分成5组，以千分尺测定各鼠右后足厚度，随即涂药一次，每只0.1ml。涂药后1hr，各组大鼠右后足足跖皮下注射1％角叉菜胶每只0.1ml，同时再涂药0.1ml。分别于注入角叉菜致炎后1、2、4、6hr测定各组动物右后足肿胀程度(肿胀度＝致炎后厚度-致炎前正常厚度)，并计算抑制率。结果藏药涂抹剂能抑制角叉菜胶所致的大鼠足肿胀程度，见表3。

表3藏药涂抹剂对大鼠足肿胀试验的影响(

n＝10)

括号内为抑制率；与模型对照组比较^**P＜0.01

2.4止痒试验

豚鼠50只雌雄兼用，体重276.58±31.12g，随机分5组，实验前日豚鼠右后足背剃毛、涂药1次。实验当天，以粗砂纸擦伤右后足背，面积1cm²，局部再涂药1次，对照组给予等量生理盐水。末次涂药后10min，在创面处滴0.01％磷酸组织胺每只0.05ml，此后，每隔3min依照0.01％、0.02％、0.03％、......递增浓度，每次均为每只0.05ml，直至出现豚鼠回头舔右后足，所给予的磷酸组织胺总量为致痒阈。结果藏药涂抹剂能明显提高豚鼠致痒阈，见表4。

表4致痒阈所需磷酸组织胺总量(mg，

)

2.5对细胞免疫功能的影响

雄性小鼠60只体重21.2±2.88g，随机分5组，每鼠每天肌肉注射植物血凝素10mg/kg共3d，同时实验组每日皮下注射药物或生理盐水每只0.1ml，共8d。第8d剪尾，取血推片，瑞氏染色，油镜下计数200个淋巴细胞、淋巴母细胞、过渡型细胞，结果藏药涂抹剂三个剂量组均可使小鼠对植物血凝素刺激淋巴细胞转化反应增强，见表5。

表5对小鼠淋巴细胞转化反应的影响(

n＝12)

与对照组比较^*P＜0.05

上述动物试验表明，藏药组合物涂抹剂对常见致病菌具有较强抑菌效力；对二甲苯和角叉莱胶所致的炎症反应具有较强的消炎作用；对磷酸组织胺引起的瘙痒有具有较好的缓解作用，并且有软提高细胞免疫力的功能。

Claims (8)

1.一种外用藏药组合物，其特征在于：藏药原料组分及重量配比是：砂生槐子40～60份、藏红花5～15份、雪莲花25～35份、铁棒锤3～12份、宽筋藤40～50份、喜马拉雅紫茉莉35～55份、雪猪油2～10份。

2.一种含有权利要求1所述的藏药组合物的药物制剂，其特征在于：是外用药剂型，含有所述藏药组合物与药剂学上可接受的辅料。

3.根据权利要求2所述的药物制剂，其特征在于：是外用液体制剂。

4.根据权利要求3所述的药物制剂，其特征在于：依照如下方法之一制备：

酊剂：取砂生槐子、藏红花、雪莲花、铁棒锤、宽筋藤、喜马拉雅紫茉莉加工成粗粉，加入15.5～16.5倍乙醇（W/V），浸提110～130hr，过滤，留取乙醇浸提液待用；取雪猪油加热熔化，放冷至常温，加入适量氯仿充分搅拌至乳化完全，加入乙醇浸提液中，混匀；

搽剂：取砂生槐子、藏红花、雪莲花、铁棒锤、宽筋藤、喜马拉雅紫茉莉加工成粗粉，加入18～22倍体积水渗漉，取渗漉液浓缩至稠膏，加入13.5～14.5倍乙醇（W/V），混匀，得乙醇提取液待用；另取雪猪油加热熔化，放冷至常温，加入适量氯仿充分搅拌至乳化完全，加入乙醇提取液中，混匀；

涂抹剂：取砂生槐子、藏红花、雪莲花、铁棒锤、宽筋藤、喜马拉雅紫茉莉加工成粗粉，加入15.5～16.5倍乙醇（W/V），浸提110～130hr，过滤，留取乙醇浸提液待用；取雪猪油加热熔化，放冷至常温，加入适量氯仿充分搅拌至乳化完全，加入乙醇浸提液中，加入适量成膜剂，混匀。

5.根据权利要求4所述的制剂，其特征在于：所述涂抹剂制备中，成膜剂是乙基纤维素，加入量为3.5～4.5kg/100L乙醇浸提液。

6.权利要求1所述的藏药组合物在制备消炎药物或卫生产品中的应用，或者在制备止痒药物或卫生产品中的应用，或者在制备止痛药物或卫生产品中的应用。

7.权利要求1所述的藏药组合物在制备杀菌药物或卫生产品中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述杀菌药物或卫生产品是用于杀灭金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、红色毛癣菌、絮状表皮癣菌、石膏样小孢子菌、石膏样毛癣菌中一种或几种的药物或卫生产品。

Images