CN102703286A - 一种具有高稳定性、长半衰期的sod保健酒的生产工艺 - Google Patents
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Abstract
一种具有高稳定性、长半衰期的SOD保健酒的生产工艺，包括如下步骤：1、将活化的聚乙二醇PEG与SOD冻干粉按摩尔比溶于四硼酸缓冲液中反应；2、将步骤①的产物在透析缓冲液中透析1-3h，然后用用聚乙二醇PEG浓缩成浓缩液；3、将浓缩液进行柱层析，收集第一蛋白峰，冷冻干燥后获PEG-SOD冻干粉；4、将PEG-SOD冻干粉溶于去离子水中，得到修饰后的SOD溶液；5、将修饰后的SOD溶液倒入白酒中，再加入木犀草素，搅拌均匀，即可。本发明可有效解决天然SOD冻干粉在白酒中稳定性差及在人体内半衰期短的问题，同时又避免了SOD清除体内氧自由基产生的过量过氧化氢所带来的危害，保证了饮用者的身体更加健康。
Description
一、技术领域
本发明涉及一种功能性饮用酒的生产工艺，特别是一种具有高稳定性、长半衰期的SOD保健酒的生产工艺。
二、背景技术
我国是酒的故乡，也是酒文化的发源地，是世界上最早酿酒的国家，早在2000年前就发明了酿酒技术，随着科技的发展和消费者日益丰富的物质生活需求，现在已发展到能生产各种浓度、各种香型、各种功能作用的酒类。
氧对一切需氧生物是必不可少的生存条件，但是高浓度氧对有机体是有害的，会引起氧中毒。实验已证明，氧中毒是由于氧在机体内大量地被转变为活性氧自由基，氧自由基可以进攻和损害细胞膜、蛋白质、酶和DNA，从而引起组织病变、器官功能失常。超氧化物歧化酶（SOD）作为生物体内的一种抗氧化酶，是生物体内清除自由基的首要物质。因此SOD具有保护人体的正常代谢机能的作用，如抗氧化、抗衰老、抗疲劳、消炎、预防慢性病及其并发症。正是由于SOD的功效，使其在化妆品、饮料、食品、药品等行业被广泛使用。SOD保健酒便是其中一种。
天然SOD冻干粉在酒中的稳定性较差，而酒类的待售期往往较长，如此便造成酒未售完，产品已变质的情况，造成巨大的经济损失。同时，天然SOD在人体胃环境中稳定性极差，易被水解，且在体内酶活力半衰期通常只有5~8min，并不能达到应有的功效。
同时，有SOD存在时，超氧阴离子自由基歧化产生单线态氧，且反应速度提高14倍，使过氧化氢（H2O2）量增加。H2O2能穿透细胞膜，这是超氧阴离子自由基所不及的，进入细胞后，H2O2通过Fenton反应生成反应性极强的羟自由基，这是已知的最强氧化剂，几乎能和所有的细胞成分发生反应，速度常数很高。因此单一加入SOD冻干粉的SOD保健酒，既有利又有弊，需探究一种更为全面的工艺。
三、发明内容
针对上述情况，本发明的目的就是提供一种具有高稳定性、长半衰期的SOD保健酒的生产工艺，该工艺既可以克服天然SOD冻干粉在白酒中稳定性差、在人体内半衰期短的问题，又可有效地解决了在白酒中单一应用SOD的隐患，使消费者身体更加健康。
如上构思，本发明的技术方案是：一种具有高稳定性、长半衰期的SOD保健酒的生产工艺，其特征在于：包括如下步骤：
①将活化的聚乙二醇PEG与SOD冻干粉按摩尔比溶于四硼酸缓冲液中反应；
②将步骤①的产物在透析缓冲液中透析1-3h，然后用用聚乙二醇PEG浓缩成浓缩液；
③将浓缩液进行柱层析，收集第一蛋白峰，冷冻干燥后获白色PEG-SOD冻干粉；
④将PEG-SOD冻干粉溶于去离子水中，得到修饰后的SOD溶液；
⑤将修饰后的SOD溶液倒入白酒中，再加入木犀草素，搅拌均匀，即得高稳定性、长半衰期SOD保健酒。
上述活化的聚乙二醇PEG的分子量为6000，其与SOD冻干粉的摩尔比为40:1，四硼酸缓冲液的pH=9.2。
上述透析缓冲液pH=7.3，透析时间为2小时。
上述柱层析采用Sephadex-G75。
本发明的优势在于：本发明生产工艺独特、产品质量好、饮用效果佳，克服了天然SOD保健酒存放期短，SOD在体内半衰期短的问题，同时木犀草素的存在也解决了SOD歧化“过剩超氧阴离子自由基所产生的过氧化氢对人体的危害，对人体更加健康。
本发明是用PEG-6000对SOD进行修饰，PEG-6000与SOD酶活力中心相连，改变了其属性，使其更稳定，功效更好，同时加入木犀草素可与SOD在人体内的反应作用互补，使高稳定性、长半衰期SOD保健酒与其他SOD酒相比有更大的优势，更强的竞争力。
具体实施方式：
一种具有高稳定性、长半衰期的SOD保健酒的生产工艺，包括如下步骤：
（1）将2g 6000U/mg的SOD冻干粉和15ml活化的的PEG-6000溶于185ml四硼酸缓冲液（pH9.2）中反应；活化的聚乙二醇PEG与SOD冻干粉的摩尔比为40:1；
（2）将反应液置于pH7.3的缓冲液中透析2小时（透析袋使用前必须处理，将透析袋剪成一定长度，再将透析袋置于0.5mol/LEDTA溶液中煮0.5h，弃去溶液，用蒸镏水洗净），用PEG浓缩透析液；
（3）将浓缩液过Sephadex-G75柱层析，收集第一蛋白峰，冷冻干燥得修饰后SOD冻干粉，将修饰后SOD冻干粉溶于20ml去离子水得修饰后SOD溶液；
（4）将修饰后SOD溶液倒入15L白酒中，再加入15g木犀草素搅拌均匀，即得高稳定性、长半衰期SOD保健酒。
对高稳定性、长半衰期SOD保健酒进行热稳定性试验，将高稳定性、长半衰期SOD保健酒和普通SOD酒分别在40℃、50℃、60℃保温，定时取样测定酒中SOD酶活力单位含量，50℃时高稳定性、长半衰期SOD保健酒中SOD酶活力单位含量高出普通SOD酒的一倍，60℃后普通SOD酒中酶活力丧失2/3，高稳定性、长半衰期SOD保健酒中SOD活力只损失少量。
对高稳定性、长半衰期SOD保健酒进行半衰期测定实验，将天然SOD水溶液和修饰后SOD水溶液放在30℃模拟胃环境中，保温一定时间（5min、10min、15min、20min、25min、30min、35min、40min）后迅速冷却，取出一定量经处理的溶液，加入对应的酶活反应体系测定残余活力，以保温前的酶活力为100％，使用一级失活模型公式计算，即t=ln2/kd，最后得出天然SOD在胃环境中半衰期为5min，修饰后SOD在胃环境中的半衰期为30min。
Claims (4)
1.一种具有高稳定性、长半衰期的SOD保健酒的生产工艺，其特征在于：包括如下步骤：
①将活化的聚乙二醇PEG与SOD冻干粉按摩尔比溶于四硼酸缓冲液中反应；
②将步骤①的产物在透析缓冲液中透析1-3h，然后用用聚乙二醇PEG浓缩成浓缩液；
③将浓缩液进行柱层析，收集第一蛋白峰，冷冻干燥后获白色PEG-SOD冻干粉；
④将PEG-SOD冻干粉溶于去离子水中，得到修饰后的SOD溶液；
⑤将修饰后的SOD溶液倒入白酒中，再加入木犀草素，搅拌均匀，即得高稳定性、长半衰期SOD保健酒。
2.根据权利要求1所述的一种具有高稳定性、长半衰期的SOD保健酒的生产工艺，其特征在于：上述活化的聚乙二醇PEG的分子量为6000，其与SOD冻干粉的摩尔比为40:1，四硼酸缓冲液的pH=9.2。
3.根据权利要求1所述的一种具有高稳定性、长半衰期的SOD保健酒的生产工艺，其特征在于：上述透析缓冲液pH=7.3，透析时间为2小时。
4.根据权利要求1所述的一种具有高稳定性、长半衰期的SOD保健酒的生产工艺，其特征在于：上述柱层析采用Sephadex-G75。
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| CN (1) | CN102703286A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109112119A (zh) * | 2018-08-28 | 2019-01-01 | 佛山科学技术学院 | 经化学修饰的鸭血sod制剂的制备方法 |
| CN115029204A (zh) * | 2022-07-15 | 2022-09-09 | 曾会明 | 一种具有sod活性的酒及其制备方法 |
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2012
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