CN102698272A - 一种预防糖尿病药物组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种预防糖尿病药物组合物，含有α-葡萄糖苷酶抑制剂和木蝴蝶种子提取物；其中，所述的木蝴蝶种子提取物，通过木蝴蝶种子与有机溶剂的水溶经提取，过滤，再提取，分离，干燥的工艺制备得到。本发明提出的含有木蝴蝶种子提取物和低于正常用量的α-葡萄糖苷酶抑制剂组成的药物组合物具有良好的改善IGT的效果，其主要表现在：能快速、更有效的降低餐后血糖，减少血浆葡萄糖毒性；能更好的降低HbA1c和TG水平；减少α-葡萄糖苷酶抑制剂使用量，提高了药效，有效地克服了现有预防糖尿病药物副作用大、干预效果弱的缺陷。

Description

一种预防糖尿病药物组合物及其应用

技术领域

本发明涉及一种含有α-葡萄糖苷酶抑制剂和木蝴蝶种子提取物的药物组合物，可有效地干预糖耐量受损，阻止其向Ⅱ型糖尿病转化；属于医药生物领域。 

背景技术

糖尿病(Diabetes Mellitus；DM)是一种严重危害人类健康的疾病，可导致肾脏、神经、眼睛、心脑血管等多种组织的慢性并发症，严重者可发生酮症酸中毒、昏迷等。虽然新的降糖药物不断开发，血糖控制手段不断更新，但是治疗现状不容乐观，很难根治。 

糖耐量受损(Impaired Glucose Tolerance;IGT)是一种早期的血糖稳态改变，反映了由血糖正常到Ⅱ型糖尿病(T2DM；即非胰岛素依赖型糖尿病，Non-Insulin-Dependent Diabetes Mellitus；NIDDM)的过渡阶段。IGT患者空腹血糖（Fasting plasma glucose，FPG）未达到诊断糖尿病所需浓度（即PG<7.0mmol/L），但在口服葡萄糖耐量试验中，餐后120min的血糖浓度(Plasma Glucose，PG)处于正常与糖尿病之间，IGT的过程往往伴随着血脂代谢的异常(如甘油三酯(Triglyceride；TG)和总胆固醇(Total Cholesterol；TC)含量的升高及糖化血红蛋白(HbA1c)水平的升高。如果不能引起足够的重视，IGT患者在5~10年内，有很大的概率转化成糖尿病。IGT既是发展成糖尿病的一个过渡阶段，也是预防Ⅱ型糖尿病的最后关口。所以IGT时期就进行干预治疗是预防Ⅱ型糖尿病的关键所在。因此，很有必要在Ⅱ型糖尿病的前期-IGT阶段就进行药物干预，预防从IGT阶段向糖尿病的转变。 

目前全球IGT患者正在迅猛增加，例如，杨文英教授研究组的研究表明，中国有1.482亿的糖尿病高危人群，年龄标化总患病率达15.5%，其中单纯IGT的患病率无论男性还是女性，均高于单纯FPG受损的患病率，其中男性IGT患者人数比空腹血糖受损(Impaired Fasting Glucose,IFG)患者人数高7.8%，女性则高8.7%（Diabetes in China,N.Engl.J.Med，2010,362:1090-1101.）。因此，开发一种对IGT进行有效干预的药物，有着极为重要的意义。 

当前市场上可以改善IGT的药物，主要有双胍类（郑英奇，二甲双胍干预糖耐量异常效果评价.实用糖尿病杂志，2008,4（3）:12.）、噻唑烷二酮类(李强 翔等,罗格列酮对糖耐量异常干预的临床研究,中国综合临床,2007,23(10):902)、α-糖苷酶抑制剂等。但上述药物均存在这诸多缺陷，如双胍类的消化道副作用严重，如厌食、恶心、腹痛、腹泻等；易引发乳酸性酸中毒并可能对肾脏有潜在的损伤作用等，而且二甲双胍最初是作为减肥药适用的，对较肥胖患者有一定作用，而对体重较轻的IGT患者可能造成更大的副作用。噻唑烷二酮类药物则会引起体重增加、贫血、水肿、恶心、腹泻、头晕、四肢疼痛，甚至有转氨酶升高和低血糖反应。而且长期服用可能会有潜在的肝脏毒害，甚至危及生命。故曲格列酮等多种噻唑烷二酮类药物已经被美国和欧盟限制使用。除此之外，双胍类药物和噻唑烷二酮类药物目前主要以治疗Ⅱ型糖尿病为主，在糖尿病前期阶段应否为最佳选择尚存在争议。 

在改善IGT药物中，应用最广泛的是α-糖苷酶抑制剂，α-糖苷酶抑制剂可以竞争性抑制位于小肠的各种α-葡萄糖苷酶，使淀粉类分解为葡萄糖的速度减慢，从而减缓肠道内葡萄糖的吸收，降低餐后高血糖。还可以显著降低TG、胆固醇水平，而且可以控制HBA1c的水平，α-糖苷酶抑制剂改善IGT的原理一是有效降低餐后血糖水平，降低血浆中葡萄糖毒性；二是能动员肠道类胰高糖素肽-1(GLP-1)，后者可使IGT中β细胞分泌胰岛素的轻微缺陷得到恢复。由于具有以上优点，α-糖苷酶抑制剂一直作为改善IGT的首选药物，其中α-糖苷酶抑制剂的代表药物阿卡波糖是首先被美国食品药品质量管理局（FDA）批准用于IGT干预的药物，长期使用可降低由IGT转化为糖尿病的风险。 

然而，α-糖苷酶抑制剂在改善IGT中也存在着不足，一是存在毒副作用，可能会引起过敏性反应、消化、吸收障碍的慢性肠功能紊乱、由于肠胀气而可能恶化的情况、疝气，肠梗阻和肠溃疡等，并有产生低血糖病例的报道；二是其对IGT的干预作用较弱，欧洲和北美研究-“预防Ⅱ型糖尿病的研究（STOP-NIDDM）”的结果显示：阿卡波糖只能将糖尿病前期发展为Ⅱ型糖尿病的风险降低36%，尚需开发新型的改善IGT的药物。 

当前一些研究者尝试使用天然产物组合物改善IGT，如中国发明专利CN101053092B公开了一种用苦瓜干、桑叶、三七等中药组合物改善IGT的方法；中国发明专利CN 102293274A公开了一种由大佛龙井茶、枇杷叶、桑叶等组成的粗茶组合物改善IGT的方法，但中药或粗茶组合物改善IGT时一般作用较缓慢，给药时间较长，因此有必要开发新型改善IGT药物，能快速、有效降低IGT 患者的血糖，增加机体对葡萄糖的耐受性，改善脂代谢，降低HbA1c水平，同时减少α-糖苷酶抑制剂的毒副作用，降低低血糖症的风险。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种预防糖尿病药物组合物，以解决α-葡萄糖苷酶抑制剂药物副作用大、干预作用弱的问题。本发明所述的预防糖尿病药物组合物，含有α-葡萄糖苷酶抑制剂和木蝴蝶种子提取物；其中，所述的木蝴蝶种子提取物，通过下述方法制备得到： 

①将干燥、粉碎后的木蝴蝶种子与体积浓度为0%~90%有机溶剂的水溶液按质量体积比为1:3~50g/ml混合，按下述方法之一进行提取后，过滤，得抽提液Ⅰ；其中，有机溶剂选自乙醇、甲醇、正丙醇、异丙醇、异丁醇、乙二醇、丙酮中的至少一种； 

a.水提取方法，煎煮30~120min； 

b.含水有机溶剂提取方法，冷浸1~72h； 

c.超声提取15min~24h； 

②除去抽提液Ⅰ中的水和有机溶剂，得到油状混合物； 

③将油状混合物与有机溶剂按质量比为1:1~500混合，按下述方法之一进行提取；其中，有机溶剂选自石油醚或正己烷； 

a.冷浸1~72h； 

b.或超声提取15min~24h； 

c.索氏提取30min~24h； 

④离心，除去有机溶剂后，干燥，得木蝴蝶种子提取物。 

本发明的上述预防糖尿病药物组合物中，步骤③中向油状混合物中加入有机溶剂，其目的是为了除去油状混合物中的杂质。 

本发明的上述预防糖尿病药物组合物中，为了优化技术方案，优选为木蝴蝶种子提取物与α-葡萄糖苷酶抑制剂按质量比为0.1~10000:1混合。 

本发明的上述预防糖尿病药物组合物中，为了优化技术方案，所述的α-葡萄糖苷酶抑制剂优选为含有下述单体、单体的有机盐或单体的无机盐；其中，所述的单体为阿卡波糖、伏格列波糖或米格列醇；最优选的是阿卡波糖、伏格列波糖或米格列醇。 

本发明的上述预防糖尿病药物组合物中的任一技术方案，当α-葡萄糖苷酶 抑制剂为阿卡波糖时，木蝴蝶种子提取物与阿卡波糖优选为按质量比0.2~400:1混合，尤其优选的是按0.4~200:1混合，更优选的是按20~60:1混合；当α-葡萄糖苷酶抑制剂为伏格列波糖时，木蝴蝶种子提取物与伏格列波糖优选为按质量比0.2~10000:1混合，最优选的是按20~5000:1混合；当α-葡萄糖苷酶抑制剂为米格列醇时，木蝴蝶种子提取物与米格列醇优选为按质量比0.2~400:1混合，最优选的是按0.4~200:1混合。 

本发明的上述药物组合物中的任一技术方案，还包括药学上可接受的载体和/或赋形剂。其在药学上可接受的载体和/或赋形剂是一种或多种常用的填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂或矫味剂的载体。填充剂可选自淀粉、蔗糖、乳糖或微晶纤维素；粘合剂选自纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮；崩解剂选自羧甲基淀粉钠、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素、琼脂、碳酸钙或碳酸氢钠；表面活性剂可以是十六烷醇或十二烷基硫酸钠；润滑剂选自滑石粉、硬脂酸钙和镁、微粉硅胶或聚乙二醇等。 

本发明的另一目的在于提供一种包含上述任一所述的药物组合物的制药剂型，包括片剂、胶囊剂、滴丸剂或颗粒剂。 

本发明的药物组合物的各种制药剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备所需要的制剂。例如，片剂可为普通片、薄膜片、肠溶片等，可以用上述组合物干粉，加入适量稀释剂选自淀粉、糊精、甘露醇、微晶纤维素，适量的粘合剂选自水、乙醇、纤维素、淀粉、明胶，适量的崩解剂选自羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、海藻酸钠，以及适当的润滑剂选自硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇，加入甜味剂，选自D-木糖、木糖醇、麦芽糖醇、甜叶菊素、天冬甜母，按常规湿法制粒，干燥后整粒或者干法制粒后压片，如为包薄膜衣片，用成膜材料选自纤维素类、聚乙二醇类，按常规包衣，分装入密闭瓶或者铝塑板中。胶囊剂可为普通胶囊剂、肠溶胶囊剂等，可将药物组合物干粉加入适当辅料选自碳酸钙、甘露醇、氧化镁、微粉硅胶等，适当润滑剂选自滑石粉、硬脂酸镁、乙二醇酯、聚硅酮类，以及适当的粘合剂选自矿物油、食油，并加入适当甜味剂，选自D-木糖、木糖醇、麦芽糖醇、甜叶菊素、天冬甜母，混合成干粉或者制成颗粒，填充入胶囊，分装在密闭瓶或者铝塑板中。 

本发明的药物组合物可通过口服的方式施用于需要这种预防的患者。 

本发明的再一目的在于提供上述任一所述的药物组合物在制备预防糖尿病药物中的应用。 

本发明的上述应用中，优选糖尿病类型为Ⅱ型糖尿病。 

本发明所使用的木蝴蝶种子是紫葳科木蝴蝶属植物木蝴蝶（Oroxylum indicum（L.）Vent.）的成熟种子。木蝴蝶性味苦甘、凉，入肺肝、胃经。有清肺利咽止咳、疏肝和胃之功效，主治肺热咳嗽、喉痹、喑哑、肝胃气痛、疮口不敛等。我们在探索快速、高效、低毒地改善IGT药物的过程中发现，木蝴蝶种子提取物与正常用量0.01-0.75倍的α-糖苷酶抑制剂的药物组合物使用后，对IGT有很强的改善作用，进而完成了本发明。 

因此，本发明具有以下优点： 

本发明提出的含有木蝴蝶种子提取物和低于正常用量的α-葡萄糖苷酶抑制剂组成的药物组合物具有良好的改善IGT的效果，其主要表现在：能快速、更有效的降低餐后血糖，减少血浆葡萄糖毒性；能更好的降低HbA1c和TG水平；减少α-葡萄糖苷酶抑制剂使用量，因此可以提高药效，有效降低α-葡萄糖苷酶抑制剂的毒副作用；而且还有效解决了药物联用易引发低血糖等问题。 

附图说明

本发明附图2幅， 

图1为实施例5测定的各实验组小鼠糖化血红蛋白图；其中，^p<0.05，^^p<0.01(vsA组)；^*p<0.05，^**p<0.01(vs B组)；&p<0.05，&&p<0.01(vs C组)；$p<0.05，$$p<0.01(vs D组)；#p<0.05，##p<0.01(vs E组)；！p<0.05，！！p<0.01(vs H组)。 

图2为实施例6测定的各实验组小鼠甘油三酯图；其中，^p<0.05，^^p<0.01(vs A组)；^*p<0.05，^**p<0.01(vs B组)；&p<0.05，&&p<0.01(vs C组)；$p<0.05，$$p<0.01(vs D组)；#p<0.05，##p<0.01(vs E组)；！p<0.05，！！p<0.01(vs H组)。 

具体实施方式

下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。本发明所使用的木蝴蝶种子原产地广西，其木蝴蝶为Oroxylum indicum(L.）Vent.；本发明所使用的阿卡波糖片来源于拜耳医药 保健有限公司，50mg/片。 

本发明所使用的粉碎机为温岭市林大机械有限公司生产的DFT-200手提式高速中药粉碎机。 

一、木蝴蝶种子提取物的制备 

实施例1 

①称取木蝴蝶种子100g，干燥后，粉碎，用1500ml、体积浓度为90%乙醇水溶液冷浸48h，过滤后，得抽提液； 

②在水浴温度为35℃的条件下，减压蒸馏除去乙醇后，将水浴温度提高至60℃，继续减压蒸馏除去水，得到油状物； 

③在油状物中加入200ml石油醚，冷浸24h； 

④离心，除去石油醚，室温干燥，得到黄色粉末状的木蝴蝶种子提取物。 

二、口服剂的制备 

实施例2：木蝴蝶种子提取物口服剂-1的制备 

准确称取按实施例1制得的木蝴蝶种子提取物粉末8mg，加入20ml 0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）的水溶液，漩涡振荡器混匀，制成均匀悬浊液；木蝴蝶种子提取物终浓度为0.4mg/ml。 

实施例3：木蝴蝶种子提取物口服剂-2的制备 

准确称取按实施例1制得的木蝴蝶种子提取物粉末160mg，加入20mL0.5%CMC-Na的水溶液，漩涡振荡器混匀，制成均匀悬浊液；木蝴蝶种子提取物终浓度为8mg/mL。 

实施例4：组合物口服剂-1的制备 

取阿卡波糖一片，加入到5mL 0.5%CMC-Na的水溶液中，磨碎混匀后，用移液枪准确移取0.32mL，稀释到20mL，称取按实施例1制得的木蝴蝶提取物粉末8mg加入其中，混匀，混合液中木蝴蝶提取物终浓度为4mg/mL，阿卡波糖终浓度为0.16mg/mL。 

实施例5：组合物口服剂-2的制备 

取阿卡波糖一片，加入到5ml 0.5%CMC-Na的水溶液中，磨碎混匀后，用移液枪准确移取0.32ml，稀释到20ml，称取按实施例1制得的木蝴蝶提取物粉 末160mg加入其中，混匀，混合液中木蝴蝶提取物终浓度为8mg/ml，阿卡波糖终浓度为0.16mg/ml。 

对比例1：阿卡波糖口服剂-1的制备 

取阿卡波糖片一片，加入到5ml 0.5%CMC-Na的水溶液中，磨碎混匀后，用移液枪准确移取0.32ml，稀释到20ml，混匀，阿卡波糖终浓度为0.16mg/ml。 

对比例2：阿卡波糖口服剂-2的制备 

取阿卡波糖片一片，加入到5ml 0.5%CMC-Na的水溶液中，磨碎混匀后，用移液枪准确移取1.6ml，稀释到20ml，混匀，阿卡波糖终浓度为0.8mg/ml。 

三、药性实验 

实施例4药物组合物对糖耐量异常小鼠葡萄糖耐受性的影响 

人造黄油和蔗糖的高脂、高糖食物（Diet containing margarine and sucrose；DCMS）的制备方法为：称取一定质量固体人造黄油，放入烧杯加热融化，将基础饲料（购于大连医科大学SPF实验动物中心）捣碎，加入到烧杯中，再加入蔗糖，搅拌均匀后，室温冷却，凝固，捏为条状；其中，基础饲料60%，人造黄油20%，蔗糖20%。 

取18~22g的昆明小鼠（雌雄各半，购于大连医科大学SPF实验动物中心），按15mg/kg分两次尾静脉注射四氧嘧啶后，连续喂养小鼠DCMS食物2周后，所有小鼠禁食16h，对FPG正常小鼠（3.9mmol/L≤PG<6.1mmol/L）进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）：按2g/kg葡萄糖进行灌胃，用血糖仪（罗氏，活力型）测定2h后的血糖值，挑选血糖值大于等于7.8mmol/L而小于11.1mmol/L的小鼠共60只，作为孤立性IGT(I-IGT)模型小鼠，分雌雄随机分为6组（A-F）组，每组10只，雌雄各半，分别标号，进行实验。喂食和给药方式如下：每天早晨撤去小鼠的食物，8小时后对小鼠进行灌胃含有或者不含有药物的0.5%的CMC-Na的水溶液，溶解药物的CMC-Na的水溶液需使用前配制，灌药后随即喂食DCMS或基础饲料。 

每天各组给药及喂食情况如下： 

A组：喂食基础饲料，每天灌胃一次0.5%的CMC-Na的水溶液； 

B组：喂食DCMS，每天灌胃一次0.5%的CMC-Na的水溶液； 

C组：喂食DCMS，每天灌胃一次由对比例1制得的阿卡波糖口服剂-1，实际给药剂量为4mg/kg/d； 

D组：喂食DCMS，每天灌胃一次由实施例2制得的木蝴蝶种子提取物-1，实际给药剂量为10mg/kg/d； 

E组：喂食DCMS，每天灌胃一次由实施例3制得的木蝴蝶种子提取物-2，实际给药剂量为200mg/kg/d； 

F组：喂食DCMS，每天灌胃一次由实施例4制得的药物口服剂-1，实际给药剂量为木蝴蝶种子提取物10mg/kg/d，阿卡波糖4mg/kg/d； 

G组：喂食DCMS，每天灌胃一次由实施例5制得的药物口服剂-2，实际给药剂量为木蝴蝶种子提取物200mg/kg/d，阿卡波糖4mg/kg/d； 

H组：喂食DCMS，每天灌胃一次由对比例2制得的阿卡波糖口服剂-2，实际给药剂量为阿卡波糖20mg/kg/d； 

连续给药8周后，撤去食物，禁食16h，每只小鼠按2g/kg剂量灌胃葡萄糖，进行OGTT测试，用血糖仪测定小鼠灌胃第0，30和120min血糖值，测定小鼠葡萄糖耐受性。 

表1IGT干预后各组小鼠FPG的比较 

^p<0.05，^^p<0.01(vs A组) 

^*p<0.05，^**p<0.01(vs B组) 

&p<0.05，&&p<0.01(vs C组) 

$p<0.05，$$p<0.01(vs D组) 

#p<0.05，##p<0.01(vs E组) 

从表1的FPG的测定结果可以看出，A组、药物口服剂F、G组、阳性对照H组FPG接近，相互比较无显著差异(p>0.05)，未达到IFG的标准（IFG的标准为6.1mmol/L≤PG<7.0mmol/L））。但C组、D组、E组与A组相比，差异性分别为显著（C组；p<0.05）和极显著（D、E组，p<0.01），从个体来说，C组中的4只和D组中的2只小鼠、E组中的4只小鼠出现了IFG的现象（6.1mmol/L≤PG<7.0mmol/L），C组中的2只、D组中的1只小鼠和E组中3只小鼠的血糖值大于7.0mmol/L；而B组与C-H组相比差异性均显著（p<0.01），且B组全部个体的FPG，均达到糖尿病FPG标准（PG≥7.0mmol/L）。以上结果表明药物组合物能控制IGT小鼠FPG的升高。 

表2药物干预后各组小鼠30min血糖水平的比较 

^p<0.05，^^p<0.01(vs A组) 

^*p<0.05，^**p<0.01(vs B组) 

&p<0.05，&&p<0.01(vs C组) 

$p<0.05，$$p<0.01(vs D组) 

#p<0.05，##p<0.01(vs E组) 

表2为2g/kg葡萄糖灌胃30min后的各组血糖值，和FPG值相比，A-G组血糖值具有所增加并达到各自的峰值。药物组合物F、G组、阳性对照H组与A组相比，无显著差异(p>0.05)，与B-E组相比，均显示显极著性差异（p<0.01），其血糖峰值显著降低，显示药物组合物F、G组在30min时对葡萄糖的良好耐受性。表明木蝴蝶种子提取物和阿卡波糖药物组合干预后，机体对葡萄糖的耐受 性得到了极大地提高。 

表3药物干预后各组小鼠120min血糖水平的比较 

^p<0.05，^^p<0.01(vs A组) 

^*p<0.05，^**p<0.01(vs B组) 

&p<0.05，&&p<0.01(vs C组) 

$p<0.05，$$p<0.01(vs D组) 

#p<0.05，##p<0.01(vs E组) 

！p<0.05，！！p<0.01(vs H组) 

表3为2g/kg葡萄糖灌胃120min后的血糖值，该值可以反映药物以及药物组合物对IGT干预作用的最终效果。从表中可以看出，B组的血糖值达到17.82±4.54mmol/L，高于糖尿病诊断标准（OGTT测试120min PG≥11.1mmol/L）；C组和D组的平均血糖值高于糖尿病诊断标准；E组的平均血糖值也在IGT范围内（7.8mmol/L≤PG<11.1mmol/L）；同时C组和E组中有分别有4只和6只小鼠PG≥11.1mmol/L，且大多数小鼠的血糖值处在糖尿病前期与糖尿病的临界范围；而药物组合物F、G组和H组均小于7.8mmol/L，分别与B-E组显示极显著性差异（p<0.01）。H组与F组之间差异不显著(p>0.05)，G组与F组之间差异也不显著(p>0.05)，但G组与H组之间差异性显著(p<0.05)。F、G组和H组相比血糖值更低，表明药物组合物F、G组具有更强的IGT干预作用。 

表4药物干预后各组小鼠血糖曲线下面积的比较 

^p<0.05，^^p<0.01(vs A组) 

^*p<0.05，^**p<0.01(vs B组) 

&p<0.05，&&p<0.01(vs C组) 

$p<0.05，$$p<0.01(vs D组) 

#p<0.05，##p<0.01(vs E组) 

！p<0.05，！！p<0.01(vs H组) 

表4为血糖曲线下面积（AUC）分析的比较，结果表明，药物组合物F、G组、H组的AUC值，与B-E组相比差异性极显著（p<0.01），与A组相比无显著性(p>0.05)。F组与H组的AUC值相近，而G组与H组相比AUC值差异性显著（p<0.05），其AUC值也低于H组。这说明药物组合物可以降低小鼠血糖曲线下面积，提高其对葡萄糖的耐受性。 

实施例5药物组合物对糖耐量受损小鼠的糖化血红蛋白的影响 

对实施例4中的各给药组小鼠完成糖耐量的120min测试后，眼部取血。用加入抗凝剂的离心管收集；将剩余的血液以2000rpm离心10min，吸取上层血浆用于另一部分生化指标的测定；留沉淀的红细胞，再加入生理盐水洗涤后继续按上述方法离心，重复3次，得到较为纯净的红细胞。 

将得到的红细胞按HbA1c试剂盒（购于南京建成生物工程研究所）操作说明进行处理，其测定原理为血红蛋白中具有酮胺键的HbA1c在酸性环境下加热得到5-羟甲基糠醛（5-HMF），可与α-硫代巴比妥酸（TBA）反应呈黄色，进行比色定量。测得的HbA1c的结果以每10g血红蛋白的吸光度表示，其结果如图1所示。 

C组可在一定程度上抑制HbA1c水平的升高，与B组相比，差异性显著（p<0.05），但其降低HbA1c含量的能力较弱，HbA1c水平仍接近HbA1c的异常值（正常值为每10g血红蛋白吸光值应低于26）；D组的HbA1c水平在B组和C组之间。E组的HbA1c水平与B组相比，差异性极显著（p<0.01），但与A组相比，HbA1c含量升幅较大，差异性也极显著（p<0.01）；而药物组合物F组和G组，能明显降低HbA1c水平，使HbA1c恢复到正常范围内，与B-E组相比，差异性均极显著（p<0.01），其效果均好于阳性对照H组，和A组无显著性差异（p>0.05） 

实施例6药物组合物对糖耐量受损小鼠甘油三酯含量的影响 

将按实施例5方法得到的血浆按TG测定试剂盒（购于北京北化康泰临床试剂有限公司）操作说明进行处理，实验结果如图2所示。 

由于DCMS食物热量较高，其中的人造黄油含有大量反式脂肪酸，加之餐后高血糖带来糖-脂代谢异常，长期喂养小鼠后模型组TG含量维持在高水平，即使使用阳性药物处理的H组，其TG值依然较高，和A组相比差异显著（p<0.05）。C组的小鼠血浆内TG含量的升高受到一定程度的抑制，与B组相比，差异性显著（p<0.05），但其降低TG的幅度较弱，与A组相比差异性极显著（p<0.01）；D组血浆内TG水平与B组相比，差异性显著（p<0.05），其降血脂效果要好于C组；E组的血浆内TG水平与B组相比，差异性极显著（p<0.01），效果与H组相当；而药物组合物F、G组，均能显著降低TG水平，使TG水平恢复到正常水平附近，其中G组的TG水平和A组无显著性差异（p>0.05），和H组有显著性差异（p<0.05），TG水平低于H组，与C、D、E组相比，差异性均极显著（p<0.01）。以上结果表明，药物组合物能够有效降低IGT小鼠的TG水平。 

实施例7：药物组合物和木蝴蝶种子提取物对小鼠的急性毒性研究： 

取18-22g昆明小鼠（购于大连医科大学SPF实验动物中心），分为2组，每组10只（雌雄各半），给药情况如下： 

第1组：按1g/kg/d木蝴蝶种子提取物+20mg/kg阿卡波糖单体的组成药物组合物对小鼠进行灌胃，每天灌胃1次，共7天； 

第2组：按200mg/kg木蝴蝶种子提取物+4mg/kg阿卡波糖单体组成药物 组合物对小鼠进行灌胃，每天每隔8小时灌胃1次，共28天； 

整个过程中跟踪记录小鼠体重，观察其精神状态。实验结束后，将实验小鼠处死，进行病理分析。 

结果表明：实验期间，所有小鼠精神状态良好，发育正常，无一死亡，未观察到毒性。 

Claims (9)

1.一种预防糖尿病药物组合物，含有α-葡萄糖苷酶抑制剂和木蝴蝶种子提取物；其中，所述的木蝴蝶种子提取物，通过下述方法制备得到：

①将干燥、粉碎后的木蝴蝶种子与体积浓度为0%~90%有机溶剂的水溶液按质量体积比为1:3~50g/ml混合，按下述方法之一进行提取后，过滤，得抽提液Ⅰ；其中，有机溶剂选自乙醇、甲醇、正丙醇、异丙醇、异丁醇、乙二醇、丙酮中的至少一种；

a.水提取方法，煎煮30~120min；

b.有机溶剂水溶液提取方法，冷浸1~72h；

c.超声提取15min~24h；

②除去抽提液Ⅰ中的水和有机溶剂，得到油状混合物；

③将油状混合物与有机溶剂按质量比为1:1~500混合，按下述方法之一进行提取；其中，有机溶剂选自石油醚或正己烷；

a.冷浸1~72h；

b.或超声提取15min~24h；

c.索氏提取30min~24h；

④离心，除去有机溶剂后，干燥，得木蝴蝶种子提取物。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述的木蝴蝶种子提取物与α-葡萄糖苷酶抑制剂按质量比为0.1~10000:1混合。

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于所述的α-葡萄糖苷酶抑制剂为含有下述单体、单体的有机盐或单体的无机盐；其中，所述的单体为阿卡波糖、伏格列波糖或米格列醇。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于所述的α-葡萄糖苷酶抑制剂为阿卡波糖、伏格列波糖或米格列醇。

5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于所述的木蝴蝶种子提取物与阿卡波糖按质量比为0.2~400:1混合；木蝴蝶种子提取物与米格列醇按质量比为0.2~400:1混合；木蝴蝶种子提取物与伏格列波糖按质量比为20~5000:1混合。

6.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于还包括药学上可接受的载体和/或赋形剂。

7.一种包含权利要求1所述的药物组合物的制药剂型，其特征在于包括片剂、胶囊剂、滴丸剂或颗粒剂。

8.权利要求1所述的药物组合物在制备预防糖尿病药物中的应用。

9.根据权利要求8所述的药物组合物在制备预防糖尿病药物中的应用，其特征在于所述的糖尿病为Ⅱ型糖尿病。

Images