CN102697788B - 复方乳酸左氧氟沙星口服液及制备工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了复方乳酸左氧氟沙星口服液及制备工艺,首先在溶剂草酸的水溶液中加入矫味剂D-葡萄糖醛酸-δ内脂,搅拌至全部溶解;接着加入主药乳酸左氧氟沙星、增效剂三甲氧苄氨嘧啶(TMP)、助溶剂聚乙烯吡咯烷酮(PVPk-17),搅拌至均匀溶解;再加入稳定剂苯甲醇,搅拌均匀后,加医用活性碳,过滤后即制备得到复方乳酸左氧氟沙星口服液。经实验证明,本专利研制的复方乳酸左氧氟沙星口服液,具有较高的广谱抗菌作用,还具有非常好的稳定性,动物安全性试验结果也达到国家兽药安全标准。
Description
技术领域
本发明涉及复方乳酸左氧氟沙星口服液,还涉及该口服液的制备工艺。
背景技术
乳酸左氧氟沙星,C18H20FN3O4·C3H6O3·1/2H2O,化学名为(S)-(-)-9-氟-2,3-二氢-3-甲基-10-(4-甲基-1-哌嗪基)-7-氧-7H-吡啶并[1,2,3-de][1,4]-苯并噁嗪-6-羧酸乳,分子量为460.41。乳酸左氧氟沙星是我国新研制的第三代喹诺酮类抗菌药,为氧氟沙星的旋光异构体,具有抗菌谱广、抗菌作用强等优点,其抗菌活性是光学对映体D型的8128倍,外消旋体左氧氟沙星的2倍。乳酸左氧氟沙星在酸性介质中较为稳定,有效期可达两年以上。
乳酸左氧氟沙星主要是通过抑制细菌DNA旋转酶(细菌拓扑异构酶II)的活性,来阻碍细菌DNA的复制而达到抗菌作用。乳酸左氧氟沙星的抗菌谱广、抗菌活性强及具有优秀的药代动力学性质。它是氧氟沙星的左旋光学异构体,毒副反应低、活性强、水溶性好,不易产生耐药性及交叉耐药性,可用于易产生耐药性的金黄色葡萄球菌感染的治疗,在感染组织中乳酸左氧氟沙星浓度比正常组织中高2~4倍,呈现有选择性的集中分布,发挥杀菌作用,迅速被吸收,生物利用度高,乳酸左氧氟沙星还与体内蛋白质结合率高,形成库存杀菌力,半衰期长,药效持久。
乳酸左氧氟沙星经过多年的临床试验,在人医的疾病治疗中应用广泛,对多种疾病治疗具有非常好的临床效果。国内外的大量资料均表明乳酸左氧氟沙星抗菌谱广、抗菌活性强,对兽医临床及标准菌株均有较大的抗菌活性。其人药制剂的开发研究主要在片剂和注射剂上,在兽医临床上主要是粉散剂和注射剂,目前还未见到有乳酸左氧氟沙星口服液的报道。
发明内容
本发明的第一个目的是提供一种抗菌活性好的复方乳酸左氧氟沙星口服液;
本发明的第二个目的是提供上述复方乳酸左氧氟沙星口服液的制备工艺。
为达到上述目的,本发明采用了以下技术方案:一种复方乳酸左氧氟沙星口服液,该口服液由主药乳酸左氧氟沙星、增效剂三甲氧苄氨嘧啶、稳定剂苯甲醇、助溶剂聚乙烯吡咯烷酮、矫味剂D-葡萄糖醛酸-δ内脂以及溶剂草酸的水溶液组成,每100ml口服液中含有90-110mg乳酸左氧氟沙星、0.5-2.5mg三甲氧苄氨嘧啶、0.1-1.5ml苯甲醇、0.1-1.5mg聚乙烯吡咯烷酮、0.01-0.2mgD-葡萄糖醛酸-δ内脂。
优选地,每100ml口服液中含有100mg乳酸左氧氟沙星、2mg三甲氧苄氨嘧啶、0.9ml苯甲醇、1mg聚乙烯吡咯烷酮、0.1mgD-葡萄糖醛酸-δ内脂。
具体实施时,在所述溶剂草酸的水溶液中,每100ml水中有草酸0.75g。
制备上述的复方乳酸左氧氟沙星口服液的工艺方法,包括以下步骤:
(1)在所述溶剂草酸的水溶液中加入所述矫味剂D-葡萄糖醛酸-δ内脂,搅拌至全部溶解;
(2)接着加入所述主药乳酸左氧氟沙星、所述增效剂三甲氧苄氨嘧啶、所述助溶剂聚乙烯吡咯烷酮,搅拌至均匀溶解;
(3)再加入所述稳定剂苯甲醇,搅拌均匀后,加医用活性碳,过滤后即制备得到所述复方乳酸左氧氟沙星口服液;
在制得的每100ml所述复方乳酸左氧氟沙星口服液中,含有90-110mg乳酸左氧氟沙星、0.5-2.5mg三甲氧苄氨嘧啶、0.1-1.5ml苯甲醇、0.1-1.5mg聚乙烯吡咯烷酮、0.01-0.2mgD-葡萄糖醛酸-δ内脂。
所述溶剂草酸的水溶液中,每100ml水中溶解有草酸0.75g。
由于上述技术方案的运用,本发明与现有技术相比具有下列优点:经实验证明,本专利研制的复方乳酸左氧氟沙星口服液,具有较高的广谱抗菌作用,还具有非常好的稳定性,动物安全性试验结果也达到国家兽药安全标准。
具体实施方式
下面进一步阐述本发明。
实施例一:复方乳酸左氧氟沙星口服液的研制
1.1材料
乳酸左氧氟沙星原料药:青岛富坤兽药原料有限公司,含量98%;
三甲氧苄氨嘧啶(TMP):青岛富坤兽药原料有限公司,含量99%;
制备复方乳酸左氧氟沙星口服液所用的其他辅助试剂均为国产分析纯或化学纯试剂。
1.2方法
首先在溶剂草酸的水溶液中加入矫味剂D-葡萄糖醛酸-δ内脂,搅拌至全部溶解;接着加入主药乳酸左氧氟沙星、增效剂三甲氧苄氨嘧啶(TMP)、助溶剂聚乙烯吡咯烷酮(PVPk-17),搅拌至均匀溶解;再加入稳定剂苯甲醇,搅拌均匀后,加医用活性碳,过滤后即制备得到复方乳酸左氧氟沙星口服液。
在制得的每100ml复方乳酸左氧氟沙星口服液中,含有90-110mg乳酸左氧氟沙星、0.5-2.5mg三甲氧苄氨嘧啶、0.1-1.5ml苯甲醇、0.1-1.5mg聚乙烯吡咯烷酮、0.01-0.2mgD-葡萄糖醛酸-δ内脂。优选地,每100ml口服液中含有100mg乳酸左氧氟沙星、2mg三甲氧苄氨嘧啶、0.9ml苯甲醇、1mg聚乙烯吡咯烷酮、0.1mgD-葡萄糖醛酸-δ内脂。溶剂草酸的水溶液中,每100ml纯水中溶解有草酸0.75g。
口服液中的辅助试剂TMP用于增加主药乳酸左氧氟沙星的药效,即在主药浓度不变的情况下,TMP能够提高乳酸左氧氟沙星的抗菌活性;PVPk-17能够帮助主药溶解;苯甲醇最后添加,能够保持口服液中各组分的性状稳定,有防腐除菌的作用;D-葡萄糖醛酸-δ内脂用于调整口服液的口味。
实施例二:复方乳酸左氧氟沙星口服液的质量评价
2.1评价方法
2.1.1外观性状检测
本实验从澄清度、有无沉淀、颜色三个方面对复方乳酸左氧氟沙星口服液的外观性状进行考察。取研制的口服液100ml,肉眼观测应为淡黄绿色澄明液体,无漂浮物,无沉淀现象,置于低速离心机(EBA-8S型,德国Hettich公司),1000rpm/min10分钟应无沉淀析出,药品颜色均一,澄明。将口服液分别于低温(4℃)、室温(25℃)、高温(45℃)放置30天,分别于第10天、20天、第30天取样肉眼观测其外观颜色变化,是否为淡黄绿色,是否澄清,有无沉淀,有无药品析出。
2.1.2理化指标检测
本实验采用PHS-2C型酸度计(上海虹益仪器仪表有限公司)对生产的口服液进行PH检测,所检测的口服液PH值应在4.5-5.5范围内。
2.1.3乳酸左氧氟沙星含量测定
取本品100ml,用0.1mol/L盐酸溶液定量稀释制成每1ml中约含有乳酸左氧氟沙星5μg的溶液,在紫外分光光度计(UV-265型,日本岛津公司)上293nm的波长处测定吸收度,计算,即得乳酸左氧氟沙星的含量。对产品中的主药乳酸左氧氟沙星进行含量测定,测定的结果应为标示量的90.0~110.0%(即100ml口服液中含有主药乳酸左氧氟沙星90-110mg)。
2.2结果与分析
2.2.1外观性状检测
对生产的复方乳酸左氧氟沙星口服液进行外观性状检测。分别取5批次生产的口服液100ml,生产批号分别为:20111015、20111102、20111128、20111201和20111212。肉眼观测溶液颜色为淡黄绿色,澄明,无漂浮物,无沉淀现象,置于低速离心机,1000rpm/min10分钟,无沉淀析出,药品颜色均一,澄明。将口服液分别于低温(4℃)、室温(25℃)、高温(45℃)放置30天,肉眼观测溶液颜色为淡黄绿色,澄明,无漂浮物,无沉淀现象,置于低速离心机,1000rpm/min10分钟,无沉淀析出,药品颜色均一,澄明,说明产品均一度较好,低温稳定性,高温稳定性较好。具体结果见表1。
表1.对5批次生产的口服液外观性状进行检测
标注A:肉眼观测溶液颜色为淡黄绿色,澄明,无漂浮物,无沉淀现象,置于低速离心机,1000rpm/min10分钟,无沉淀析出,药品颜色均一,澄明。
B:肉眼观测溶液颜色为淡黄绿色,澄明,有漂浮物,有沉淀现象,置于低速离心机,1000rpm/min10分钟,有沉淀析出。
C:肉眼观测溶液颜色为其他颜色,浑浊,有漂浮物,溶液均一性不好。
2.2.2理化指标检测
使用PHS-2C型酸度计对生产的5批次口服液(生产批号分别为20111015、20111102、20111128、20111201和20111212)进行酸度值检测,所检测的口服液PH值分别为:4.92、4.94、5.02、5.02、4.95,均符合企业口服液质量检测标准(口服液的PH值应在4.5-5.5范围内)。
2.2.3乳酸左氧氟沙星含量测定
使用紫外分光光度检测仪对生产的5批次口服液(生产批号分别为20111015、20111102、20111128、20111201和20111212)进行乳酸左氧氟沙星含量的测定,测定结果显示在293nm的波长处有最大吸收峰值。取本品复方乳酸左氧氟沙星口服液适量定量稀释成约5mg/L的溶液,在波长为293nm处测定吸光度,按吸光系数公式计算乳酸左氧氟沙星浓度。根据6个浓度(C)测得的吸光度(A)求回归方程为:A=0.09017C+0.001026,C=0.9999,表明乳酸左氧氟沙星在0.9~1.1g/L浓度范围内,吸光度与浓度线性关系良好。对生产的5批次口服液(生产批号分别为20111015、20111102、20111128、20111201和20111212),成品乳酸左氧氟沙星含量分别为100.23%,100.12%,102.10%,101.21%和100.32%。
按照企业口服液质量检测标准的操作方法对该5批次产品中的主药乳酸左氧氟沙星进行含量测定,测定的结果分别为(每100ml溶液中含多少毫克的乳酸左氧氟沙星):100.23mg、100.12mg、102.10mg、101.21mg、100.32mg,符合企业标准中主药的含量应为标示量的90.0~110.0%的标准。
实施例三:复方乳酸左氧氟沙星口服液药效抑菌试验
乳酸左氧氟沙星是新型喹诺酮类药物,为氧氟沙星的左旋光性异构体。作用于细菌的脱氧核糖核酸旋转酶,抑制细菌DNA的复制和转换,达到抗菌作用。对多种革兰阳性菌、阴性菌都有较强的抗菌活性。我们以左氧氟沙星作为对照,对临床分离的4种细菌共77株,进行了体外抗菌活性的试验,现报告如下:
3.1材料
3.1.1药品
复方乳酸左氧氟沙星口服液(100ml:100mg),由本公司生产部提供,产品批号为20111015,左氧氟沙星对照品130455溶液(100ml:100mg),由本公司研发室按照复方乳酸左氧氟沙星口服液的制备工艺配制(即将主药乳酸左氧氟沙星替换为左氧氟沙星对照品130455即可),左氧氟沙星对照品130455:生研(上海)生化试剂有限公司。
3.1.2菌株
金黄色葡萄球菌ATCC25925,大肠埃希菌ATCC25922,标准菌株由本公司实验室保存,金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、链球菌、枯草芽胞杆菌由本公司实验室临床分离保存。
3.1.3培养基
MH培养基,由本公司实验室配置。
3.2方法与结果
3.2.1最低抑菌浓度(MIC)测定
采用试管2倍稀释法,取13支试管除第1管加MH培养基1.9ml外其余各11管加培养基1ml,最后1管为灭菌空试管,第1管加入供试液(口服液)0.1ml,混匀后吸取1.0ml加入第2管,同法稀释至第12管,从第12管取出1.0ml于灭菌空试管作为空白对照。13支试管中分别加入适宜的稀释级菌液0.1ml,每毫升约含1*106CFU,摇匀后,置37℃培养16~24h,测定MI C,结果见表2,测定MI C的方法为本领域技术人员的常规方法,故在此不赘述。
表2乳酸左氧氟沙星与左氧氟沙星抑菌作用比较(mg/L)
3.2.2最低杀菌浓度(MBC)测定
依次取上述未见细菌生长的各管培养物各0.1ml涂布于MH培养基平板上,在规定的温度下培养18~24h,测定MBC,结果见表3,测定MBC的方法为本领域技术人员的常规方法,故在此不赘述。
表3乳酸左氧氟沙星与左氧氟沙星杀菌作用比较(mg/L)
3.3结论
从表2的试验数据看出,复方乳酸左氧氟沙星口服液具有较高的广谱抗菌作用,对金黄色葡萄球菌和链球菌尤为敏感,MIC50为0.03mg/L和0.05mg/L,MIC90均为0.2mg/L,优于左氧氟沙星溶,MIC50为0.2mg/L和0.1mg/L,MIC90均为0.78mg/L。复方乳酸左氧氟沙星口服液对其余2种菌MIC也明显优于左氧氟沙星。
结合表3,复方乳酸左氧氟沙星口服液的MBC与MIC试验结果相一致,对金黄色葡萄球菌和链球菌MBC50均为0.05mg/L,MBC90均为0.39mg/L,而左氧氟沙星溶液的MBC50均为0.2mg/L,MBC90为1.56mg/L和0.78mg/L。复方乳酸左氧氟沙星口服液对其余2种菌MBC也明显优于左氧氟沙星。
实施例四:复方乳酸左氧氟沙星口服液的稳定性试验
根据农业部文件“兽药稳定性试验技术规范(试行)”的要求,对口服液的含量、外观性状、澄明度、PH值、含量变化等项目进行考察,研究了该口服液在温度、光照等条件下的稳定性。
4.1方法
4.1.1光加速试验
取复方乳酸左氧氟沙星口服液5批(生产批号分别为20111015、20111102、20111128、20111201和20111212)装入无色透明西林瓶内,压盖密封,放置在照度4500±500LX的强光照射条件下放置10天,于第5天、第10天定时取样,按口服液稳定性重点考察项目进行检测,即考察口服液的外观性状、澄明度、PH值、主药含量等各项指标。
4.1.2加温加湿试验
根据农业部兽药稳定性技术规范,确定本口服液宜在温度为40士2℃,相对湿度为75士5%的条件下进行加温加湿试验。取批号分别为20111015、20111102、20111128、20111201和20111212的复方乳酸左氧氟沙星口服液各10瓶,在温度为40士2℃,相对湿度为75士5%的条件下进行加温加湿试验的条件下放放置6个月,在试验期间第0、1、2、3、6个月各取样一次,考察性状、PH值和含量等。
4.2结果与分析
4.2.1光加速试验结果
对复方乳酸左氧氟沙星口服液样品进行了光加速试验,结果见表4。表中结果表明,该口服液在4500士500LX强光照射10天,稳定性的各项指标均无明显变化,表明口服液对光稳定。
4.2.2加温加湿试验结果
对复方乳酸左氧氟沙星口服液样品进行了加温加湿试验,结果见表5。
表4.复方乳酸左氧氟沙星口服液十天光加速试验结果
规格:100mg:100ml(乳酸左氧氟沙星)
表5.复方乳酸左氧氟沙星口服液加温加湿试验结果
规格:100mg:100ml(乳酸左氧氟沙星)
从表5中试验结果表明,该口服液在相对湿度75%士5%,40士2℃条件下处理6个月,样品定期考察,各项指标均为正常,6个月末的平均相对含量都在99%以上。综合考虑各因素,本口服液在密闭条件下对温、湿度尚属稳定。
实施例五:复方乳酸左氧氟沙星口服液的安全性试验
5.1试验材料
5.1.1主要试剂
复方乳酸左氧氟沙星口服液,含量100mg/100ml;
左氧氟沙星对照品130455:含量≥98%。
血清生化指标测定试剂,中生北控生物科技股份有限公司;
5.1.2主要设备
CELL-DYN400全自动血细胞分析仪,美国雅培公司;
Technicon全自动生化分析仪,RA-1000,美国泰尔康公司。
5.1.3试验动物
随机挑选健康三黄鸡400羽,10日龄,体重0.5kg左右。在公司灌南养鸡场实验动物房饲养,自由饮水,饲喂不含药物的饲料,每天定时给料两次。
5.2试验方法
5.2.1给药
给药方式为复方乳酸左氧氟沙星口服液100ml兑水50kg,100ml兑水200kg;左氧氟沙星100mg兑水200kg,每天下午集中供饮,连用5天,每天给药一次。每100羽三黄鸡为一组,共4组,空白对照组一组,左氧氟沙星对照组一组,其余两组为复方乳酸左氧氟沙星口服液不同剂量的实验组。
5.2.2血样采集
所有动物分别在给药前和给药后第3天、第5天采血10ml,均分两管,其中1管加抗凝剂肝素钠。同时观察动物给药后临床症状变化(活动、呼吸、采食)。
5.2.3血样前处理
将样品室温下静置2小时,未加抗凝剂管2500rpm离心5min,取上层血清,-20℃保存。
5.2.4血样分析
5.2.4.1血常规分析
取加抗凝剂管全血进行白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、血小板计数(PTL)等项目分析。
5.2.4.2血液生化指标分析
取血清进行总蛋白(TPRO)、球蛋白、清蛋白、血K+、血Ca+、血糖(GLU)、血磷、谷氨酸丙氨酸氨基转移酶(GPT)共八个项目的分析。
5.3结果与分析
5.3.1临床症状变化
与未给药前相比,四组动物给药后每天观察进食正常、行动正常,呼吸和排泄未见异常,未观察到任何不良反应。
5.3.2血常规分析
检测结果见表6。从表6中可以看出,复方乳酸左氧氟沙星口服液实验组,左氧氟沙星对照组和空白对照组,连用5天,每天1次。在给药的第3天和第5天,各项指标数值与给药前检测结果相比,差异并不显著(P>0.05),说明复方乳酸左氧氟沙星口服液兑水浓度为0.05%~0.2%(以乳酸左氧氟沙星计)的剂量范围内对血液常规指标没有明显的影响。
表6.复方乳酸左氧氟沙星口服液口服饮用后血常规指标(n=100)
注:WBC,白细胞计数(109/L);RBC,红细胞计数(1012/L);HGB.血红蛋白(gL);HCT,红细胞压积(%);PLT,血小板计数(103/μL)。
5.3.3血清生化指标分析
检测结果见表7。总蛋白(TPRO)、球蛋白和清蛋白是免疫力相关指标,试验数据显示试验组与对照组差异不显著(P>0.05),结合其他项目试验结果可以看出,与未给药前检测结果相比,各项指标差异不显著(P>0.05),说明复方左氧氟沙星口服液饮用水浓度在0.05%~0.2%的剂量范围对血清生化指标没有明显的影响。
综上所述,与对照组相比,兑水饮用复方左氧氟沙星口服液饮用水浓度在0.05%~0.2%的剂量使用范围内,连用5天,每天1次,各项指标差异不显著,且对鸡的生理生化指标未观察到有显著影响。
表7.鸡口服饮用复方乳酸左氧氟沙星口服液后血清生化指标(n=100)
注:总蛋白(TPRO):g%;球蛋白:g%;清蛋白:g%;血K+:mEq/L;血Ca+:mEq/L;血糖(GLU):mg%;
血磷:mEq/L;谷氨酸丙氨酸氨基转移酶(GPT):单位。
Claims (5)
1.一种复方乳酸左氧氟沙星口服液,其特征在于:该口服液由主药乳酸左氧氟沙星、增效剂三甲氧苄氨嘧啶、稳定剂苯甲醇、助溶剂聚乙烯吡咯烷酮、矫味剂D-葡萄糖醛酸-δ内酯以及溶剂草酸的水溶液组成,每100ml口服液中含有90-110mg乳酸左氧氟沙星、0.5-2.5mg三甲氧苄氨嘧啶、0.1-1.5ml苯甲醇、0.1-1.5mg聚乙烯吡咯烷酮、0.01-0.2mgD-葡萄糖醛酸-δ内酯。
2.根据权利要求1所述的复方乳酸左氧氟沙星口服液,其特征在于:每100ml口服液中含有100mg乳酸左氧氟沙星、2mg三甲氧苄氨嘧啶、0.9ml苯甲醇、1mg聚乙烯吡咯烷酮、0.1mgD-葡萄糖醛酸-δ内酯。
3.根据权利要求1所述的复方乳酸左氧氟沙星口服液,其特征在于:在所述溶剂草酸的水溶液中,每100ml水中有草酸0.75g。
4.制备如权利要求1所述的复方乳酸左氧氟沙星口服液的工艺方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)在所述溶剂草酸的水溶液中加入所述矫味剂D-葡萄糖醛酸-δ内酯,搅拌至全部溶解;
(2)接着加入所述主药乳酸左氧氟沙星、所述增效剂三甲氧苄氨嘧啶、所述助溶剂聚乙烯吡咯烷酮,搅拌至均匀溶解;
(3)再加入所述稳定剂苯甲醇,搅拌均匀后,加医用活性炭,过滤后即制备得到所述复方乳酸左氧氟沙星口服液;
在制得的每100ml所述复方乳酸左氧氟沙星口服液中,含有90-110mg乳酸左氧氟沙星、0.5-2.5mg三甲氧苄氨嘧啶、0.1-1.5ml苯甲醇、0.1-1.5mg聚乙烯吡咯烷酮、0.01-0.2mgD-葡萄糖醛酸-δ内酯。
5.根据权利要求4所述的工艺方法,其特征在于:所述溶剂草酸的水溶液中,每100ml水中溶解有草酸0.75g。
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2012
- 2012-06-27 CN CN 201210214173 patent/CN102697788B/zh active Active
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