CN102652021A - 特应性皮炎预防剂 - Google Patents
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Abstract
本发明的课题是提供特应性皮炎预防剂以及含有该特应性皮炎预防剂的食品。本发明人进行了认真研究，结果发现，通过口服摄取胶原可预防特应性皮炎。本发明提供一种包含胶原的特应性皮炎预防剂以及含有上述特应性皮炎预防剂的饮食品。
Description
技术领域
本发明涉及特应性皮炎预防剂以及含有该特应性皮炎预防剂的食品。
背景技术
特应性皮炎是反复加重和缓解、以发痒的湿疹为主要病变的疾病。
特应性皮炎的主要病变有皮肤的红斑或丘疹、耳下裂纹、干皮症、伴有糠秕状鳞屑的毛孔一致性角化性丘疹、患者皮肤的抓挠伤痕。根据近年来的调查，特应性皮炎的发病率在4个月儿童中为12.8％，在1岁半儿童中为9.8％，在3岁儿童中为13.2％，在小学一年级学生中为11.8％，在小学六年级学生中为10.6％，在大学一年级学生中为8.2％，在幼儿中高达每10人中1人。病因、恶化因素主要有食物、出汗、环境因素、细菌真菌、接触抗原、精神压力等，要求对其进行治疗，进而要求对其进行预防。
特应性皮炎的治疗通过以下方法进行：1)病因、恶化因素的检索和应对，2)皮肤护理，3)药物疗法。用方法1)、2)无法减轻症状时进行药物治疗。药物中使用最广泛的是类固醇外用药，有多种类固醇外用药。另一方面，作为非类固醇类外用药，免疫调节剂普特彼(protopic)的有效性在近年得到了确认。此外，作为口服药，使用抗组胺药、抗过敏药等，仅对于重症患者，有时会暂时使用类固醇的内服药。但是，类固醇在用作外用药时，可能会伴有皮肤的萎缩、血管扩张、毛囊炎等副作用，根据由厚生劳动科学研究班制作的指导手册的指导，在面部应尽可能避免使用类固醇外用药。此外，对于类固醇药物，有很多患者担心其副作用而表现出排斥。另一方面，普特彼是于1999年11月认可使用的较新的药剂，对于幼儿只认可低浓度下的使用，对于2岁以下的幼儿，低浓度下的使用也不被认可。作为内服药的抗组胺药、抗过敏药可能会引起困倦、乏力或伴随抗胆碱作用的痰的咳出困难等副作用。
另一方面，关于特应性皮炎的发病前的预防，现在几乎没有报道。但是，特应性皮炎的患者在不断增加，迫切希望对其进行预防。从预防的角度来看，重要的是确保安全性且无副作用，因此用于预防的物质希望是天然物质，甚至是来源于食材的物质。
胶原是构成动物的结缔组织的主要蛋白质成分，是明胶和动物胶的原料，自古以来被用作食材。此外，胶原也能在日常生活中从肉的高汤等中摄取，安全性得到广泛确认。胶原是指以具有胶原三螺旋结构为特征的蛋白质，已报道的共有30种以上，分别以I型、II型的方式命名。真皮、韧带、肌腱、骨骼等中，I型胶原为主要成分，关节软骨中，II型胶原为主要成分。此外，作为所有的上皮组织的衬底结构的基底膜中，主要含有IV型胶原。体内存在最丰富的是I型胶原。
有人用小鼠的特应性皮炎模型揭示了海洋胶原(marine collagen)的涂布或口服给药可抑制发病后的特应性皮炎(非专利文献1)。但是，完全未提及发病前的特应性皮炎的预防。
现有技术文献
非专利文献
非专利文献1：财团法人北海道科学技术综合振兴中心平成17年(平成16年度通过)研究开发资助事业报告书161-174页
发明内容
发明所要解决的技术问题
本发明的课题是提供特应性皮炎预防剂以及含有该特应性皮炎预防剂的食品。
解决技术问题所采用的技术方案
本发明人进行了认真研究，结果发现，通过口服摄取胶原可预防特应性皮炎，从而完成了本发明。本发明提供一种包含胶原的特应性皮炎预防剂以及含有上述特应性皮炎预防剂的饮食品。
发明的效果
胶原在哺乳类的生物体内的总蛋白质中所占的比例高，能以低廉的价格获得。此外，胶原是明胶和动物胶的原料，自古以来被用作食材，而且也能在日常生活中从肉的高汤等中摄取，安全性得到广泛确认。
附图的简单说明
图1是表示各组的临床症状评分随时间的变化的图。
图2是表示各组的抓挠行为次数的图。
图3是表示各组的抓挠行为时间的图。
图4是表示各组的试验开始前后的血中总IgE值的图。
图5是表示各组的经表皮水分丢失量(TEWL)随时间的变化的图。
图6是表示各组的体重随时间的变化的图。
图7是表示各组的肉眼观察结果的图。
图8是表示各组的头背部皮肤组织的嗜酸性粒细胞数和肥大细胞数的图。
实施发明的方式
下面对本发明的包含胶原的特应性皮炎预防剂以及含有该特应性皮炎预防剂的饮食品进行说明。本发明的胶原的来源没有特别限定，可使用来源于牛或猪等哺乳类、鸡或鸵鸟等鸟类、鲨鱼等鱼类等的胶原。来源于牛、猪、鸡等家畜的胶原容易大量获得，因此特别优选。此外，胶原的类型没有特别限定，可使用任一类型，也可以是多种类型的胶原的混合物。此外，胶原既可以是胶原本身，也可以是明胶，还可以是胶原肽。明胶是指用酸或碱对胶原实施预处理、将其热水解来使其可溶化而得的物质。胶原肽是指用酸、碱、酶等将胶原水解而得的低分子胶原。例如，胶原水解产物可以如下所述获得：将猪、牛和鸡等动物的皮肤和关节或者鱼的鳞或皮肤浸渍于酸性或碱性的液体，通过萃取获得明胶，再用酶或酸对该明胶进行处理。
本发明的特应性皮炎预防剂是口服用的，其形态没有限制，能以例如片剂、胶囊剂、饮剂等形态给药。本发明的特应性皮炎预防剂还可以包含在饮食品中来给药，此时，包含本发明的特应性皮炎预防剂的饮食品没有限定，可以包含于例如生鲜食品、肉、鱼等动物性食品，谷物、蔬菜等植物性食品，乳制品、面包、速食食品等加工食品，点心类等嗜好食品，甜味剂、调味剂等烹饪调味用材料，健康食品，特殊用途食品，水、清凉饮料水、酒精饮料、茶等饮料，食品加工材料，食品添加剂等。
实施例
下面例举本发明的例子进行说明，但本发明的范围不限定于以下的例子。
[实施例1]
使用NC/NgaTnd小鼠来确认胶原摄取的皮炎预防效果
实验内容
通过动物试验来研究胶原的摄取对由过敏引起的皮炎的症状改善是否有效果。即，使用特应性皮炎自然发病模型小鼠NC/NgaTnd小鼠进行试验。
饲料
饲料使用胶原混合饲料和对照饲料。胶原混合饲料是在对照饲料中添加了0.20％胶原肽而得的饲料。胶原混合饲料以每天的胶原摄取量为200mg/Kg的条件配制。胶原混合饲料中的胶原使用杰乐株式会社(ゼライス株式会社)的猪胶原肽。猪胶原肽是如下所述获得的胶原肽：将猪皮浸渍于酸性或碱性的液体后，通过萃取获得明胶，再将所得的明胶酶解。该胶原肽主要来源于猪的I型胶原。
实验项目及内容
准备5周龄的雌性和雄性NC/NgaTnd小鼠，共2组，每组7只。将它们分别作为胶原给药组和对照饲料给药组。总共预饲养1周后，分别使小鼠自由摄取胶原混合饲料或对照饲料以及水6周。所有小鼠在开始给予饲料时均未发生皮炎。在各饲料给予期间及其前后，对各组评价以下7个项目。各项目的实施试验的时期示于括号内。(1)临床症状评分的判定(饲料给予期间2次/周)、(2)抓挠次数和持续时间的测定(饲料给予期间的前后)、(3)血中总IgE值的测定(饲料给予期间的前后)、(4)经表皮水分丢失量(TEWL)的测定(饲料给予期间1次/2周)、(5)体重测定(饲料给予期间1次/2周)、(6)皮肤病变的肉眼观察(饲料给予期间结束时)和(7)组织学检查(饲料给予期间结束后)。
各评价项目的试验方法
(1)临床症状评分的判定
在开始喂食试验食物的前一天及从开始喂食当天起到最后一次喂食的后一天为止，每周2次对“挠痒症状”、“红斑/出血”、“浮肿”、“擦伤/糜烂”、“落屑/干燥”这5个项目进行判定，判定分为“0：无”、“1：轻度”、“2：中度”、“3：重度”4级，以各项目的总评分表示。另外，判定人员和喂食人员在试验期间由不同人员进行，判定人员不知道动物属于哪一组。
(2)抓挠次数和持续时间的测定
为了使小鼠适应测定环境，自开始喂食试验食物3天前起，使小鼠在抓挠次数测定装置(SCLABA(注册商标)-Real，诺华泰克公司(ノベルテツク))内进行适应，频率为1天1次，共进行2天，每次30分钟。开始给予饲料前的抓挠次数和持续时间的测定中，在开始喂食的前一天使小鼠适应30分钟后，进行30分钟的拍摄和记录。饲料给予期间结束后次日，用同样的方法使小鼠适应后，进行30分钟的抓挠次数和持续时间的拍摄和记录。另外，拍摄中记录拍摄日期和个体编号，在12:00～18:00间进行拍摄。
(3)血中总IgE值测定
在开始给予饲料前从尾静脉采血，在饲料给予期间结束后的次日，进行抓挠次数和持续时间的拍摄和记录后，在乙醚麻醉下用经肝素处理的注射器从腹大动脉采集约1mL血液。所采集的血液通过离心分离(4℃)而分离出血浆，冻存(-20℃)。用所保存的血浆来测定IgE浓度。IgE的测定采用识别2种不同的表位的抗小鼠IgE抗体(雅玛山公司(YAMASA)，ME-01-DE及ME-02-B)通过三明治ELISA法进行。
(4)TEWL测定
开始给予饲料前和饲料给予期间结束后进行2次测定，并且在此期间每2周进行1次测定。在测定前一天将小鼠背部剃毛，用多探头皮肤测试系统(Multi Probe Adapter)(CK电子公司(CK electronic GmbH社)制)测定背部的TEWL。每次对一个个体进行3次测定，将其平均值作为TEWL。
(5)体重测定
自开始给予饲料的前一天起每隔2周进行。测定使用电子天平(艾恩斯特汉森公司(ア一ンストンハンセン社)，HL-320)。
(6)皮肤病变的肉眼观察
拍摄饲料给予期间结束时的各组小鼠的头背部和面部的照片。
(7)组织学检查
饲料给予期间结束后，采集背部的皮肤，用10％缓冲福尔马林固定，进行石蜡包埋后，制作薄切片标本。组织标本进行刚果红染色和甲苯胺蓝染色后，在显微镜下大幅放大(400倍)，分别计数嗜酸性粒细胞数(刚果红染色标本)和肥大细胞数(甲苯胺蓝染色标本)。将各标本中4个视野的平均值作为个体数据，将整个组集中在一起计算。
实验期间
平成19年1月17日～平成19年5月25日
结果
(1)临床症状评分的判定
结果示于表1及图1。图1中，各组的临床症状评分的平均值±标准差分别用○(对照饲料组)和▲(胶原给药组)表示。
[表1]
表1各组的临床症状评分的平均值和标准差
两组中，开始给予饲料时的临床症状评分为0(未发病)。对照饲料给药组中，自开始给予饲料3天后起可观察到临床症状评分随时间上升，饲料给予期间结束时的临床症状评分为5.9±1.7。胶原给药组中，直至开始给予饲料后第25天为止皮炎评分都与对照饲料给药组大致同样地增加，但开始给予饲料25天以后，皮炎症状未表现出明显的恶化，饲料给予期间结束后(第43天)的临床症状评分为3.6±0.8，保持轻度状态。胶原给药组中，从开始给予饲料25天以后到饲料给予期间结束为止，虽然未见统计学上的显著差异，但存在显示出比对照饲料组更低的临床症状评分的倾向。
(2)抓挠次数和持续时间的测定
图2所示为各组在饲料给予期间前后的抓挠行为次数(30分钟)。开始给予饲料前(第0天)和饲料给予期间结束后(第43天)的数据用平均值±标准差(各组7只)表示。
图3所示为各组在饲料给予期间前后的抓挠行为时间(秒/30分钟)。开始给予饲料前(第0天)和饲料给予期间结束后(第43天)的数据用平均值±标准差(各组7只)表示。
两组中，开始给予饲料前(试验第0天)的抓挠行为次数(ScratchingFrequency)和抓挠行为时间(Scratching Duration)(秒)在30分钟的拍摄时间内分别为10次和10秒左右。两组在饲料给予期间结束后(第43天)与开始给予饲料前相比均显示出抓挠行为次数和抓挠行为时间增加的倾向，虽然未见显著差异，但胶原给药组与对照饲料给药组相比，抓挠行为次数和抓挠行为时间的值均更低。
(3)血中总IgE值测定
图4所示为各组在饲料给予期间前后的血中总IgE值。开始给予饲料前(第0天)和饲料给予期间结束后(第43天)的数据用平均值±标准差(各组7只)表示。
开始给予饲料前(第0天)的血中总IgE值(ng/ml)为500ng/ml左右，组间未见统计学上的显著差异。试验结束后(第43天)，血中总IgE值均有所增加，虽然未见统计学上的显著差异，但胶原给药组的血中总IgE值比对照饲料组低。
(4)TEWL测定
图5所示为各组的TEWL随时间的变化。开始给予饲料前(第0天)、第15天、第29天和饲料给予期间结束后(第43天)的数据用平均值±标准差(各组7只)表示。
两组中，开始给予饲料时的TEWL为5g/hr/m2以下，处于正常范围内。开始给予饲料第15天以后，TEWL显示出上升的倾向，特别是对照饲料给药组中，TEWL随时间上升，在饲料给予期间结束时(第43天)显示出25.97±3.85g/hr/m2的高值。胶原给药组中，虽然TEWL也上升，但在饲料给予期间结束时为23.72±9.38g/hr/m2，虽然未见显著差异，但值略低。
(5)体重测定
图6所示为各组的体重随时间的变化。开始给予饲料前(第0天)、第15天、第29天和饲料给予期间结束后(第43天)的数据用平均值±标准差(各组7只)表示。
开始给予饲料时的体重为18.7～20.8g。然后，两组均随时间而增加，增加率无组间差异。
(6)皮肤病变的肉眼观察
图7所示为各组的肉眼观察结果。这些微距照片是在对饲料给予期间结束后的各组小鼠实施(7)组织学检查的试样采集之前拍摄的。
B：胶原；D：对照饲料如果将试验结束时的各组小鼠的头背部和面部的肉眼观察结果进行比较，则可以观察到在对照饲料给药组中，各部位的皮炎不断加重。但是，胶原给药组中，虽然有皮炎发作，但程度轻。
(7)组织学检查
图8所示为各组的头背部皮肤组织的嗜酸性粒细胞数和肥大细胞数。其中，针对饲料给予期间结束后(第43天)采集的皮肤组织进行计数，结果用平均值±标准差(各组7只)表示。胶原给药组与对照饲料组相比，虽然未见显著差异，但嗜酸性粒细胞数、肥大细胞数均更少。
实施例1的总结
开始给予饲料时，两组在任一试验中均未见皮炎。
各组中，虽然之后都发生了皮炎，但给予胶原混合饲料的NC/NgaTnd小鼠在临床症状评分、抓挠次数和持续时间、血中总IgE值、TEWL、病变的肉眼观察及组织学检查中，与对照组相比均可见值的下降。综上所述，通过自发病之前起给予胶原，具有预防特应性皮炎的效果。
另一方面，胶原给药组中，体重增加与对照饲料给药组没有差别，可以确认胶原给药的安全性。
根据以下配方制造饮料、散剂、片剂、口香糖、糖果、压片糖。
[实施例2]
饮料的配方
使用酸味剂调制至pH3.8后，用精制水定容为100容量份。
[实施例3]
饮料的配方
使用酸味剂调制至pH3.8后，用精制水定容为100容量份。
[实施例4]
饮料的配方
使用酸味剂调制至pH3.8后，用精制水定容为100容量份。
[实施例5]
饮料的配方
使用酸味剂调制至pH3.8后，用精制水定容为100容量份。
[实施例6]
果冻饮料的配方
使用酸味剂调制至pH3.8后，用精制水定容为100容量份。
[实施例7]
果冻饮料的配方
使用酸味剂调制至pH3.8后，用精制水定容为100容量份。
[实施例8]
咖啡饮料的配方
使用碳酸氢钠调制至pH6.5后，用精制水定容为100容量份。
[实施例9]
绿茶饮料的配方
使用碳酸氢钠调制至pH6.5后，用精制水定容为100容量份。
[实施例10]
散剂的配方
[实施例11]
片剂的配方
[实施例12]
口香糖的配方
[实施例13]
糖果的配方
[实施例14]
压片糖的配方
[实施例15]
软糖的配方
[实施例16]
巧克力的配方
[实施例17]
果子露冰激淋的配方
本申请要求基于2009年12月10日提出申请的日本专利申请号2009-280606的优先权，引用其内容作为本申请的一部分。
Claims (2)
1.一种特应性皮炎预防剂，其特征在于，包含胶原。
2.一种饮食品，其特征在于，含有权利要求1所述的预防剂。
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