WO2004039368A1

WO2004039368A1 - アトピー性皮膚炎の予防または治療用経口剤

Info

Publication number: WO2004039368A1
Application number: PCT/JP2003/014022
Authority: WO
Inventors: Tomoya Takahashi; Asako Kobayashi
Original assignee: Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd.
Priority date: 2002-11-01
Filing date: 2003-10-31
Publication date: 2004-05-13
Also published as: KR20050072118A; AU2003301757A1; US20060034781A1; EP1559425A4; CN1708300A; EP1559425A1; JPWO2004039368A1

Abstract

本発明によれば、ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンのN-アシル化誘導体またはその塩を含有するアトピー性皮膚炎の予防または治療用経口剤、飲食品、飼料、食品添加剤または飼料添加剤、特に、ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンのN-アシル化誘導体またはその塩を0.1～90重量%含有する該経口剤、飲食品、飼料、食品添加剤または飼料添加剤を提供することができる。

Description

明細書 '

アトピー性皮膚炎の予防または治療用経口^ .

技術分野

本発明は、ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を含有するアトピー性皮膚炎の予防または治療用経口剤、飲食品、飼料、食品添加剤および飼料添加剤に関する。

背景技術

厚生労働省の疫学的調査によれば、人口め約 3 0 %が何らかのアレルギー疾患に罹患していると報告されている。特にアトピー性皮膚炎については、幼児のみならず、成人においてもその有病率の増加とともに、難治性の増加が報告されている。現在、アレルギー疾患の治療薬としては、抗ヒスタミン剤、ステロイド剤、抗ァレルギ一剤が用いられている（医学のあゆみ， 1 8 0巻， 1号， 7 0ページ， 1 9 9 7年参照）。 ,

抗ヒス夕ミン剤および抗アレルギー剤は、搔痒感を軽減する効果に対しては速効性があるが、対処療法にすぎない。 . ステロイド剤は大量または長期間使用する場合、感染症の誘発、副腎皮質機能低下、毛細血管拡張、皮膚の萎縮などの副作用があり、安全な治療薬ではない。ァトピー性皮膚炎の予防または治療効果を有する医薬品または飲食品としでは、ゥ一口ン茶抽出物 (特開平 1 0— 7 7 2 3 1号公報参照)、ラフイノース〔F00D Style (フードスタイル） 2 1 , 2卷， 4号， 2 6 2— 2 6 5ページ， 1 9 9 8年参照〕、プロポリス〔F00D Style 2 1 , . 2卷， 4号， 5 5— 5 6ページ， 1 9 9 8年参照〕等が報告されている。

ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩が外用により、ァトピー性皮膚炎予防または治療効果を発揮することは知られている（国際公開第 0 2 Z 0 6 2 2 5号パンフレット参照）。また、ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を配合した抗リゥマチ薬や創傷治療薬（特開平 8— 3 3 7 5 2 6号公報参照）が知られている。しかしながら、ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩が経口により、ァトピー性皮膚炎の予防または治療効果を発揮するということは知られていない。

尧明の開示 '

本発明の目的は、安全なァトピー性皮膚炎の防または治療用の経口剤、飲,食品、飼料、食品添加剤および飼料添加剤を提供することにある。

本発明は以下（1) 〜（14) に関する。

(1) ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を含有するアトピー性皮膚炎の予防または治療用経口剤。

(2) ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を, 0. 1〜90重量％含有する上記（1) の経口剤。

(3) ヒドロキシプロリンの N-ァシル化誘導体のァシル基が、炭素数 1〜 2 4のァシル基である上記（1)'または（2) の経口剤。

(4) ヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体が、 N—ァセチル化誘導体、 N—プロピオニル化誘導体、 N -プチリル化誘導体またはィソプチリル化誘導体である上記（1) 〜（3) のいずれか 1つの経口剤。

(5) ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を含有するアトピー性皮膚炎の予防または治療用飲食品若しくは飼料。 '

(6) ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を 0. .1〜90重量％含有する上記（5) の飲食品若しくは飼料。

(7) ヒドロキシプロリンの N-ァシル化誘導体のァシル基が、炭素数 1〜2 4のァシル基である上記（5) または（6) の飲食品若しは飼料。

(8) ヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体が、 N—ァセチル化誘導体、 N—プロピオニル化誘導体、 N -プチリル化誘導体またはィソプチリル化誘導体である、上記（5) 〜（7)のいずれか 1つの飲食品若しくは飼料。

• (9) ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を含有するアトビ一性皮膚炎の予防または治療用食品添加剤若しくは飼料添加剤。

(10) ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を 0. 1〜90重量％含有する上記（9)の食品添加剤若しくは飼料添加剤。 ' ,

( 1 1 ) ヒドロキシプロリンの Ν-ァシル化誘導体のァシル基が、炭素数 1〜 2 4のァシル基である上記（ 9 )または（ 1 0 )の食品添加剤若しくは飼料添加剤。

( 1 2 ) ヒドロキシプロリンの Ν—ァシル化誘導体が、 Ν—ァセチル化誘導体、 Ν -プロピオニル化誘導体、 Ν -ブチリル化誘導体またはィソプチリル化誘導体である上記（9 ) 〜（1 1 ) のいずれか 1つの食品添加剤若しくは飼料添如剤。

( 1 3 ) ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの Ν—ァシル化誘導体またはその塩を有効量、経口投与または摂取することを特徴とするアトピー性皮膚炎の予防または治療方法。 '

( 1 4 ) アトピー性皮膚炎の予防または治療用の経口剤、食品、飼料、食品添加剤または飼料添加剤の製のためのヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプ口リンの N—ァシル化誘導体またはその塩の使用。

本発明で用いられるヒドロキシプロリンは、いずれのヒドロキシプロリンの立体異性体であってもよい。すなわち、ヒドロキシプロリンのプロリンが D体か L体か、また水酸基の位置が 3位か 4位か、およびその立体異性体がシスかトランスかによつて 8種類の立体異性体があるが、いずれの化合物も本発明に用いることができる。具体的なヒドロキシプロリンとしては、シス一 4ーヒドロキシ一L—プロリン、シス一 4—ヒドロキシ一 D—プロリン、シス一 3—ヒドロキシ一 L—プロリン、シス一 3—ヒドロキシ一 D—プロリン、トラン一 4ーヒドロキシ一 L一プロリン、トランス一 4—ヒドロキシ一 D—プロリン、トランス一 3—ヒドロキシー L—プロリンおよびトランス一 3—ヒドロキシー D—プロリンがあげられる。

ヒドロキシプロリンは、コラーゲン中の主要構成アミノ酸成分として、また、ェラスチンの構成アミノ酸として自然界に広く存在するアミノ酸の一種であり、例えばプ夕ゃゥシ等の動物由来のコラーゲンを酸加水分解し、常法により精製することにより製造することができる。

トランス一 4 —ヒドロキシ一 L —プロリンは、アミコラトプシス

(Amycolatopsis)属またはダクチロスポランジゥム (Dactylosporansium)属より単離したプロリン 4位水酸化酵素（特開平 7— 3 1 3 1 7 9 ) を用いて製造することができる。また、シス一 3—ヒドロキシー L一プロリンは、ストレブトマイセス (Streptomyces)属より単離したプロリン 3位水酸化酵素（特開平 7— 3 2 2 & 8 5 ) を用いて製造することができる（バイオインダストリ一， 1 4巻， 3 1号， 1 9 9 7年）。 .

上記した微生物由来の酵素を用いて製造されるヒドロキシプロリンは、品質が優れており、本発明で用いるヒドロキシプロリンとしてより好ましい。

本発明で用いられるヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体としては、上記の各種ヒドロキシプロリンの立体異性体の N—ァシル化誘導体をあげることができる。.該 N—ァシル化誘導体のァシル基としては、炭素数 1〜2 4、より好ましくは炭素数 1〜 1 2、特に好ましくは炭素数 1〜 6のァシル基があげられ、具体的には、例えばホルミル、ァセチル、プロピオニル、ブチリル、イソプチリル、バレリル、ビバロイル、へキサノィル、ヘプタノィル、ォク夕ソィル、ノナノィル、デカノィル、ゥンデカノィル、ドデカノィル等をあげることができ、特にァセチル、プロピォニル、プチリル、イソプチリルが好ましい。

ヒドロシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体の塩としては、トリウム、カリウム、リチウム等のアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシゥム等のアルカリ土類金属塩、アンモニゥム塩、モノェ夕ノ一ルァミン、ジェ夕ノールァミン、トリエタノールァミン、トリイソプロパノ一ルァミンなどのアミンの付加塩およびアルギニン、リジン等の塩基性ァミノ酸の付加塩などをあげることができる。

ヒドロキシプロリンの N—ァシル化^導体は、公知の方法により調製することができる。例えば、ヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体は、直鎖または分岐状の炭素数 1〜2 4の飽和または不飽和の脂肪酸を塩ィ匕チォニル、ホスゲン等のハロゲン化剤を用いてクロライド.、プロマイド等のハロゲン化物に変換した後、前述のヒドロキシプロリンと縮合させるか、または脂肪酸を酸無水物に変換した後、ヒドロキシプロリンと反応させることにより製造することができる。

脂肪酸としては、例えばギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、吉草酸、イソ吉草酸、ピバル酸、へキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ゥンデカン酸、ドデカン酸等の脂肪酸を単独若しくは組合せたものが用いられる酸ハロゲン化物を経由するヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体の製造方法を、以下に例示する。

脂肪酸を塩化メチレン、クロ口ホルム、四塩化炭素、ベンゼン、トルエン、キシレン、 n—へキサン等の溶媒中に分散し、これに 1 ~ 5倍当量のハロゲン化剤を添加して反応させ、脂肪酸ハライドを得る。次に、ヒドロキシプロリンを溶媒に溶解または分散させ、得られた溶液を 5〜7 0 °Cに保ちながら、上記の脂肪酸ハライドをヒドロキシプロリン対して 0 . 3〜3 . 0倍当量加え、ァシル化反応を行うことによりヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体を製造することができる。

ァシル化反応に用いられる溶媒としては、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、イソブタノール、アセトン、トルエン、テトラヒドロフラン、酢酸ェチル、 N , N—ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド等があげられ、これらは単独あるいは混合して用いてもよい。ヒドロキシプロリンを溶媒に溶解または分散する際、ヒドロキシプロリンに対して 0 . 8〜2 . 0倍当量の水酸化ナトリウム、水酸化力リゥム等のアル力リ物質を必要に応じて溶媒に溶解または分散させてもよい。

ヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体の塩を取得したいとき、ヒドロキシプ口リンの N—ァシル化誘導体が塩の形で得られる場合には、そのまま精製すればよく、遊離の形で得られる場合には、適当な溶媒に溶解または懸濁し、塩基を加えて塩を形成させればよい。

精製は、例えば結晶化、クロマトグラフィー等の通常の方法が用いられる。具体的なヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体としては、例えば、 N—ァセチル一シス一 4—ヒドロキシ一 L—プロリン、 N—ァセチルーシス一 4—ヒドロキシー D—プロリン、 N—ァセチルーシス一 3—.ヒドロキシ一 L—プロリン、 N—ァセチル一シス一 3—ヒドロキシ一 D—プロリン、 N—ァセチルートランス一 4—ヒドロキシー L—プロリン、 N—ァセチル一トランス一 4ーヒドロキシ一 D—プロリン、 N—ァセチル一トランス一 3—ヒドロキシー L—プロリン、 N—ァセチルートランス一 3—ヒドロキシー D—プロリン、 N—プロピオ二ルーシス一 4—ヒドロキシ一 L—プロリン、 N—プロピオ二ルーシス一 4—ヒドロキシー D—プロリン、 N —プロピオ二ルーシス一 3—ヒドロキシー L—プロリン、 N—プロピオ二ルーシス — 3—ヒドロキシ一 D—プロリン、 N—プロピオニレトランス一 4ーヒドロキシー L—プロリン、 N—プロピオ二ルートランス一 4—ヒドロキシー D—プロリン、 N —プロピオ二ルートランス一 3—ヒドロキシ一 L—プロリン、 N—プロピオニル一トランス一 3—ヒドロキシー D—プロリン、 N—ブチリルーシス一 4ーヒドロキシ —L一プロリン、 N—プチリル一シス一 4—ヒドロキシ一D—プロリン、 N—ブチリル一シス一 3—ヒドロキシ一 L—プロリン、 N—プチリル一シス一 3—ヒドロキシ一 D—プロリン、 N—ブチリルートランス一 4—ヒドロキシー L—プロリン、 N ーブチリル一トランス一 4—ヒドロキシ一 D—プロリン、 N—プチリル一トランス — 3—ヒドロキシ一 L—プロリン、 N—ブチリルートランス一 3—ヒ.ドロキシ一 D —プロリン、 N—イソブチリルーシス一 4—ヒドロキシー L—プロリン、 N—イソブチリルーシス一 4ーヒドロキシー D—プロリン、 N—ィソブチリル一シス一 3— ヒドロキシュ L一プロリン、 N—イソブチリル一シス一 3—ヒドロキシ一 D—プロリン、 N—イソプチリル一トランス一 4ーヒドロキシ一L ^プロリン、 N—イソプチリルートランス一 4—ヒドロキシ一 D—プロリン、 N—ィソブチリル一トランス —3—ヒドロキシ一 L—プロリン、 N—イソプチリル一トランス一 3—ヒドロキシ — D—プロリン等をあげることができる。

本発明のアトピー性皮膚炎の予防または治療用の経口剤、飲食品、飼料、食品添加剤または飼料添加剤において、ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩は、シス Zトランス一 4—ヒドロキシ一L/D —プロリン、シス/トランス一 3—ヒドロキシ一 L/D—プロリン、若しくはこれらの種々の N—ァシル化誘導体またはその塩を、単独または混合して用いることができる。

本発明のアトピー性皮膚炎の予防または治療用の経口剤、飲食品、飼料、食品添加剤または飼料添加剤中のヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N 一ァシル化誘導体またはその塩の含有量は目的とする効果に応じて広い範囲で増減する,ことができ、例えば、 0 . 1〜9 0重量％、好ましくは 1〜7 0重量％、特に好ましくは 5〜5 0重量％である。

本発明のアトピー性皮膚炎の予防または治療用の経口剤、飲食品、飼料、食品添加剤または飼料添加剤には、上記必須成分に加え、適宜、各用途に適した添加剤を含有させることができる。

本発明の経口剤は、ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を含有し、必要に応じて薬理学的に許容される一種若しくはそれ以上の担体、さらに必要に応じて他の治療のための有効成分を含有していてもよい。 ,

本発明の経口剤は、ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を必要に応じ担体と一緒に混合し、製剤学の技術分野においてよく知られている任意の方法により製造することができる。

本発明の経口剤を製剤化する際には、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、分散剤、懸濁剤、乳化剤、希釈剤、緩衝剤、抗酸化剤、細菌抑制剤等の添加剤を用いることができる。 ' '

経口剤の剤形としては、錠紘散剤、顆粒剤、乳剤、シロップ剤、カプセル剤等があげられる。例えば、経口剤の剤形が、錠剤、散剤、顆粒剤等の場合には、乳糖、白糖、ブドウ糖、蔗糖、，マンニトール、ソルビトール等の糖類、バレイショ、コムギ、トウモロコシ等の澱粉、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、塩化ナトリゥム等の無機物、力ンゾゥ末、ゲンチアナ末等の植物末等の賦形剤、澱粉、寒天、ゼラチン末、結晶セルロース、カルメロースナトリウム、カルメロ一スカルシウム、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、アルギン酸ナトリウム等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、タルク、水素添加植物油、マクロゴール、シリコン油等の滑沢剤、ポリビニールアルコール、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ェチルセルロース、カルメロース、ゼラチン、澱粉のり液等の結合剤、脂肪酸エステル等の界面活性剤、グリセリン等の可塑剤などを添加して、製剤化することができる。

経口剤の剤形がシロップ剤等の液体調製物である場合は、水、蔗糖、ソルビトール、果糖等の糖類、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール等のグリコール類、ごま油、ォリーブ油、大豆油等の油類、 p—ヒドロキシ安息香酸エステル類等の防腐剤、ストロベリ一フレーバー、ペパーミント等のフ.レーバー類などを添加して、製剤化することができる。，

本発明の経口剤中のヒドロキシプ Dリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩の濃度は、経口剤の種類、当該経口剤の投与により期待する効果等に応じて適宜選択されるが、ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプ口リンの N—ァシル化誘導体またはその塩として、通常は◦. 1〜9 0重量％、好ましくは 1〜7 0重量％、特に好ましくは 5〜5 0重量％である。

本発明の経口剤の投与量は、投与形態、投与される者の年齢、体重等に応じて異なるが、通常成人に対し一日あたりヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を有効量として、 1 0 0〜 1 0 0 0 0 m g、好ましくは 1 0 0〜2 0 0 O m s 特に好ましくは 2 0 0〜： L 0 0 O mgであり、 1日に 1回または数回に分けて投与する。

本発明の経口剤は、他のステロイド剤等の抗搔痒剤と併用してもよい。

ステロイド剤としては、プレドニゾロン、コルチゾ一ル、デキサメタゾン、ベ夕メタゾン等の糖質ステロイド剤、フルド口コルチゾン、アルドステン等の塩類ステロイド剤などが用いられるが、糖質ステロイド剤が好適に用いられる。

なお、本発明において「アトピー性皮膚炎の予防」とは、日常的に本発明のアトピー性皮膚炎の予防剤を投与または摂取することで、アトピー性皮膚炎の（a )発症を完全に防く、、 ( b ) 発症率を低減させる、または（c ) 発症時の症状を抑制する、などの効果を及ぼすことをいう。

本発明の食品添加剤は、上記で説明した経口剤と同様な方法により調製することができる。食品添加剤は、通常、必要に応じて他の食品添加剤を混合または溶解し、例えば粉末、顆粒、ペレヅト、錠剤、各種液剤の形態に加工製造される。

本発明の飲食品としては、飲食品中にヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を添したものをあげることができる。

本発明の飲食品は、飲食品中にヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を添加する以外は、一般的な飲食品の製造方法を用いることにより、加工製造することができる。

本発明の飲食品は、例えば流動層造粒、攪拌造粒、押し出し造粒、転動造粒、気流造粒、圧縮成形造粒、解砕造粒、噴霧造粒、噴射造粒等の造粒方法、パンコーティング、流動層コーティング、ドライコ一ティング等のコーティング方法、パフドライ、'過剰水蒸気法、フォームマット方法、マイクロ波加熱方法等の膨化方法、押出造粒機やエキストルーダー等の押出方法等を用いて製造することもできる。

本発明の飲食品は、ジュース類、清涼飲料水、茶類、乳酸菌飲料、発酵乳、冷菓、バタ一、チーズ、ヨーグルト、加工乳、脱脂乳等の乳製品、ハム、ソーセージ、ハンバーグ等の畜肉製品、蒲鋅、竹輪、さつま揚げ等の魚肉練り製品、だし巻き、卵豆腐等の卵製品、クッキ一、ゼリー、チューインガム、キャンデー、スナック菓子等の菓子類、パン^、麵類、漬物類、燻製品、干物、佃煮、塩蔵品、スープ類、調味料等、いずれの形態のものであってもよい。

'また、本発明の飲食品は、例えば粉末食品、シート状食品、瓶詰め食品、缶詰食品、レトルト食品、カプセル食品、夕ブレット状食品、流動食品、ドリンク剤等の形態のものであってもよい。

本発明の飲食品は、ァトピー性皮膚炎の予防または治療用健康食品または機能性食品等の飲食品として用いることができる。

本発明の飲食品または食品添加剤には、一般的に飲食品に用いられる食品添加剤、例えば甘味料、着色料、保存料、増粘安定剤、酸化防止剤、発色料、漂白料、防かび剤、ガムべ一ス、苦味料、酵素、光沢剤、酸味料、調味料、乳化剤、強化剤、製造用剤、香料、香辛料抽出物等が添加されてもよい。

本発明の飲食品中へのヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N— ァシル化誘導体またはその塩、または本発明の食品添加剤の添加量は、飲食品の種類、当該飲食品の摂取により期待する効果等に応じて適宜選択されるが、ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩として、通常は 0 . 1〜9 0重量％、好ましくは 1〜7 0重量％、特に好ましくは 5〜 5 0重量％含有するように添加される。

本発明の飲食品の摂取量は、摂取形態、摂取者の年齢、体重等に応じて異なるが、通常成人に対し一日あたりヒド口キシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N —ァシル化誘導体またはその塩を有効量として、 1 0 0〜1 0 0 0 O m g、好ましくは 1 0 0〜 2 0 0 O m ：、特に好ましくは 2 0 0〜： L 0 0 O m gであり、 1日に 1回または数回に分けて摂取する。摂取期間は、特に限定はないが、通常は 1日間〜1年間、好ましくは 1週間〜 3ヶ月間である。

本発明の飼料添加剤は、本発明の経口剤と同様な方法により調製することができる。飼料添加剤は、通常、必要に応じて他の飼料添加物を混合または溶解し、例えば粉末、顆粒、ペレット、錠剤、各種液剤の形態に加工製造される。

本発明の飼料は、哺乳類、鳥類等の動物に対するアトピー性皮膚炎の予防または治療用の飼料であれば、ぺット用飼料、家畜用飼料、家禽用飼料等、，いずれの飼料であってもよいが、例えばサル、ィヌ、ネコ、ラットおよびマウス等のぺット用のァトビ一性皮膚炎の予防または治療用の飼料として好適に用いることができる。本発明の飼料は、飼料中にヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシズ口リンの N 一ァシル化誘導体またはその塩、あるいは本発明の飼料添加剤を添加する以外は、一般的な飼料の製造方法を用いることにより加工製造することができる。

飼料としては、穀物類、そうこう類、植物性油かす類、 .動物性飼料、その他の飼料、精製品、またはこれらの混合物等があげられる。

穀物類としては、例えばマイ口、小麦、大麦、えん麦、らい麦、玄米、そば、あわ、きび、ひえ、と,うもろこし、大豆等があげられる。

そうこう類としては、例えば米ぬか、脱脂米ぬか、ふすま、末粉、小麦、胚芽、麦ぬか、ペレット、トウモロコシぬか、トウモロコシ胚芽等があげられる。

植物性油かす類としては、例えば大豆油かす、きな粉、亜麻仁油かす、綿実油かす、落花生油かす、サフラワー油かす、やし油かす、パ一ム油かす、胡麻油かす、ひまわり油かす、菜種油かす、カポック油かす、芥子油かす等があげられる。 ' 動物性飼料としては、例えば北洋ミール、輸入ミール、ホールミール、沿岸ミール等の魚粉、フィッシュソルプル、肉粉、肉骨粉、血粉、分解毛、骨粉、象畜用処理副産物、フエザ一ミール、蚕よう、脱 S旨粉乳、カゼイン、乾燥ホェ一等があげられる。

その他の飼料としては、アルフアルファ、ヘイキューブ、アルフアルファリ一フミール、ニセアカシア粉末等の植物茎葉類、コーングルテン、ミール、コーングルテンフィード、コーンステ一プリカ一等のトウモロコシ加工工業副産物、デンプン等のデンプン加工品、酵母、ビールかす、麦芽根、アルコールかす、しょう油かす等の発酵工業産物、柑橘加工かす、豆腐かす、コーヒーかす、ココアかす等の農産製造副産物、キヤッサバ、そら豆、グァミール、海藻、ォキアミ、スピルリナ、クロレラ、鉱物等があげられる。精製品としては、カゼイン、アルブミン等のタンパク質、アミノ酸、スターチ、セルロース、蔗糖、グルコース等の糖質、ミネラル、ビタミン等があげられる。本発明の飼料は、例えば流動層造粒、攪拌造粒、押し出し造粒、転動造粒、気流造粒、圧縮成形粒、解碎造粒、噴霧造粒、噴射造粒^の造粒方法、パンコーティング、流動層コーティング、ドライコーティング等のコ一ティング方法、パフドラィ、過剰水蒸気法、フォームマット方法、マイクロ波加熱方法等の膨化方法、押出造粒機やエキストル一ダ一等の押出方法等を用いて製造することもできる。

本発明の飼料中へのヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩、または飼料添加剤の添加量は、飼料の種類、当該飼料の摂食により期待する効果等.に応じて適宜選択されるが、ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩として、通常は 0 . 1 〜9 0重量％、好ましくは 1〜7 0重量％、特に好ましくは 5〜5 0重量％含有するように添加される。

本発明の飼料の摂取量は、摂取形態、摂取動物の種類、該動物の年齢、体重等に応じて異なるが、通常動物に対し一日あたりヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を有効量として、 1 0 0〜 1 0 0 0 O m g、好ましくは 1 0 0〜2 0 0 O mgs特に好ましくは 2 0 0〜1 0 0 0 m g であり、 1日に 1回または数回に分けて摂取する。摂取期間は、特に限定はないが、通常は 1日間〜 1年間、好ましくは 1週間〜 3ヶ月間である。

以下に、ヒドロキシプロリンまたはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体による、アトピー性皮膚炎の予防または治療効果調べた試験例を示す。

試験例 1 ァトピー性皮膚炎発症モデルマウスを用いた耳介浮腫の抑制評価試験には、 NC/Ngaマウス（5週齢、チャールズ ' リバ一より購入）を用いた。 ■ 飼育条件は、室温 2 2 ± 2 °C、湿度 3 5 ± 1 5 %、飼料および水は自由摂取とした。 ' ハプテン塗布 9日前より、第 1表に示す試験飼料の投与を開始した。試験飼料は、粉末飼料 CE- 2 (日本クレア社製）に、 0 . 2 5重量％の —ァセチル—トランス— 4—ヒドロキシ一 L—プロリン、または 0 . 5 0重量％のトランス一 4ーヒドロキシ一 L一プロリンをよく混合することにより調製した。 N—ァセチルートランス一 4ーヒドロキシ一 L一プロリンを含む飼料を飼料 1、トランス一 4ーヒドロキシ一 L一プロリンを含む飼料を飼料 2とし、対照飼料には粉末飼料 CE- 2を用いた c

第 1表

ハプテンとしては 1. 5重量％のジニトロクロ ΰベンゼン（DNCB) を、 20 体積％オリ一ブオイルと 80体積％アセトン液からなる溶液に溶解したものを用いた。

マウスは各試験群 3匹ずつとし、飼料投与開始後 9日後、 10日後、 13日後、 14日後に 1. 5%DNCBを 20〃 1ずつ右耳介部の両面に塗布した。

ハプテン塗布開始日より 1日 1回、右耳介部の厚さを PESCOCK DIAL THICKNESS GAUGE (尾崎製作所製）を用いて測定した。 ''

耳介浮腫の増加量を、 D N C B未処理マウスの耳介浮腫の増加量に対する相対値として、下記式 1に従って算出した結果を第 2表に示す。

(式 1)

相対耳介浮腫の増加量（％) 二 [ (A1 XB 2) / (A2 XB 1) ] x 100

A 1 ：被検マウスの経過日数後の耳介の厚み

A 2 ：被検マウスの試験閧始時の耳介の厚み

B 1 ：未処理マウスの経過日数後の耳介の厚み

B 2 ：未処理マウスの試験開始時の耳介の厚み第 2表

対照飼料食群では、 DNCBにより耳介浮腫が誘発されたのに対して、 0.25% の N—ァセチル—トランス— 4—ヒドロキシー L一プロリン含有飼料食群および 0. 5%のトランス— 4—ヒドロキシ— L—プロリン含有飼料食群では明らかに耳介浮腫が抑制された。 '

試験例 2 アトピー性皮膚炎発症モデルマウスを用いた IgE濃度の評価

試験例 1で用いたァトピ一性皮膚炎発症モデルマウスについて、試験飼料投与閧始 27日後に、右大腿部より採血を行った。採血したサンプルは遠心分離後、血清を回収し、 ELISAにて血清中 IgE濃度を測定した結果を第 3表に示す。

第 3表

対照飼料食群では、 DNCB塗布により血清中 IgE濃度が上昇したのに対して、

0. 25%の N—ァセチルートランス一 4ーヒドロキシー L—プロリン含有飼料食群および 0. 5 %のドランス一 4ーヒドロキシ—L—プロリン含有飼料食群では D.

NCB塗布による血清 IgE濃度の上昇が有意に抑制された。

試験例 3 アトピー性皮膚炎発症モデルマウスを用いた肥満細胞数評価

試験例 1で用いたァトピー性皮膚炎発症モデルマウスについて、試験飼料投与開始 2 7日後に、耳介部組織を Tissue- Tek O. T.コンパゥンド（サクラ精機株式会社製）に凍結包埋した。クリオス夕ットにて、の薄切切片を作成後、トルイジンブル一染色し、肥満細胞数を計測した結果を第 4表に示す。 ·

第 4表 '

対照飼料食群では、 D N C B塗布により炎症部位での肥満細胞密度が増加したのに対して、 0 . 2 5 %の N—ァセチル一トランス一 4—ヒドロキシ一 L—プロリン含有飼料食群および 0 . 5 %のトランス— 4ーヒドロキシ— L—プロリン含有飼料食群では、明らかに D N C B塗布による肥満細胞密度の増加が抑制された。

以上より、ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体の経口摂取がァトピー性皮膚炎の予防または治療に有効であることが示された。以下に、本発明の実施例を示す。

発明を実施するための最良の形態

実施例 1 ヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体を含む錠剤の製造

N—ァセチルートランス一 4—ヒドロキシ一L—プロリンを含む錠剤を、常法により製造した。すなわち、第 5表に記載した各成分を均一に混合し、この混合物を単発式打錠機にて打錠し、直径 5 mm、重量 1 5 m gの錠剤を得た。

JP2003/014022 第 5表

実施例 2 ヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体を含む顆粒剤の製造

実施例 1で得た錠剤を粉砕、製粒し、篩別して 2 0 - 5 0メッシュの顆粒剤を得た。，

実施例 3 ヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体を含む飲料の製造

N—ァセチルートランス一 4ーヒドロキシ一 L—プロリンを含む飲料は、第 6表に記載した各成分を均一に攪拌溶解させ、精製水を加えて全量を 1 0 0 0 m lとすることにより製造した。なお、第 6表中の適量とは、香料、色素に関しては、通常の飲料の製造に用いられる量であり、精製水に関しては、他の成分に加え、全量として 1 0 0 0 m lにするために必要な量のことをいう。

第 6表

実施例 4 'ヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体を含む飴の製造第 7表に記載した各成分かもなる N—ァセチルートランス— 4ーヒドロキシ' L—プロリンを含む飴は、常法により製造した。

第 7表

産業上の利用可能性

本発明により、安全なアトピー性皮膚炎の予防または治療用の経口剤、飲食品、飼料、食品添加剤または飼料添加剤を提供することができる。

Claims

請求の範囲

1. ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を含有するアトビー性皮膚炎の予防または治療用経口剤。

2. ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を 0 . 1〜9 0重量％含有する請求項 1記載の経口剤。

3. ヒドロキシプロリンの N-ァシル化誘導体のァシル基が、炭素数 1〜2 4 のァシル基である請求項 1または 2記載の経口剤。

4. ヒドロキシプロリンの N— シル化誘導体が、 N—ァセチル化誘導体、 N—プロピオニル化誘導体、 N一プチリル化誘導体またはィソプチリル化誘導体である、請求項 1〜 3のいずれか 1項に記載の経口剤。

5. ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を含有するアトピー性皮膚炎の予防または治療用飲食品若しくは飼料。 .

6. ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を 0 . 1〜9 0重量％含有する請求項 5記載の飲食品若しくは飼料。

7. ヒドロキシプロリンの N-ァシル化誘導体のァシル基が、炭素数 1〜 2 4 のァシル基である請求項 5または 6記載の飲食品若しくは飼料。

8. ヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体が、 N—ァセチル化誘導体、 N -プロピオニル化誘導体、 N—プチリル化誘導体またはィソプチリル化誘導体である請求項 5 ~ 7のいずれか 1項に記載の飲食品若しくは飼料。

9. ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を含有するアトピー性皮膚炎の予防または治療用食品添加剤若しくは飼料添加剤。

10. ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を 0 . 1〜9 0重量％含有する請求項 9記載の食品添加剤若しくは飼料添加剤。

11. ヒドロキシプロリンの N-ァシル化誘導体のァシル基が、炭素数 1〜2 4のァシル基である靖求項 9または 1 0記載の食品添加剤若しくは飼料添加剤。

12. ヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体が、 N—ァセチル化誘導体、 N—プロピオニル化誘導体、 N—プチリル化誘導体またはィソプチリル化誘導体である請求項 9〜 1 1のいずれか 1項に記載の食品添加剤若しくは飼料添加剤。

13. ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩を有効量、経口投与または摂取することを特徴とするアトピー性皮膚炎の予防または治療方法。

14. アトピー性皮膚炎の予防または治療用の経口剤、食品、飼料、食品添カロ剤または飼料添加剤の製造のためのヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシプロリンの N—ァシル化誘導体またはその塩の使用。