CN102614288B

CN102614288B - 一种防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂及其制备方法

Info

Publication number: CN102614288B
Application number: CN201110458999.0A
Authority: CN
Inventors: 吴红云; 李建正; 李凤娟
Original assignee: Zhengzhou Houyi Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: HENAN HOUYI PHARMACY CO.,LTD.
Priority date: 2011-12-31
Filing date: 2011-12-31
Publication date: 2014-06-11
Anticipated expiration: 2031-12-31
Also published as: CN102614288A

Abstract

本发明公开了一种防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂及其制备方法，其中防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂是由中药的提取液加入群落总数为0.5～1.0×10⁸CFU/ml的双歧杆菌和枯草芽孢杆菌混合菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药采用如下重量份的组分：黄连50～200份、黄柏50～200份、大黄50～100份、黄芩50～200份、板蓝根50～200份、甘草50～100份。本发明的防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂，采用双歧杆菌和枯草芽孢杆菌菌液发酵处理后，提高了配伍中药的药物活性，在保证了具有很好疗效的前提下，降低了药物对鸡所产生的耐药性，在多次用药后依然能够得到很好的治疗效果。

Description

一种防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂，同时涉及该微生态制剂的制备方法，属于兽药技术领域。

背景技术

大肠杆菌是健康畜禽肠道中的常见菌，可分为致病性和非致病性两大类。大肠杆菌病是一种条件性疾病，在卫生条件差、饲养管理不良的情况下、很容易造成此病的发生。大肠杆菌对环境的抵抗力很强，附着在粪便、土壤、鸡舍的尘埃或孵化器的绒毛、碎蛋皮等的大肠杆菌能长期存活。各种年龄的鸡(包括肉用仔鸡)都可感染大肠杆菌病，发病率和死亡率受各种因素影响有所不同。不良的饲养管理、应激或并发其它病原感染都可成为大肠杆菌病的诱因。在雏鸡和青年鸡多呈急性败血症，而成年鸡多呈亚急性气囊炎和多发性浆膜炎。本病感染途径有经蛋传染、呼吸道传染和经口传染。

因此说鸡大肠杆菌病已严重影响鸡群成活率及鸡群质量，给养殖业造成巨大的经济损失.然而现在主要采用抗菌药物进行预防和治疗鸡大肠杆菌病，但抗生素使用不当或滥用，往往达不到控制该病的目的，还常常导致药物残留和耐菌株的出现，治疗效果差。CN101947270公开了一种治疗鸡白痢的气雾剂，采用黄连、黄柏、大黄、板蓝根、甘草、黄芪配伍成中药，通过提取、活性炭脱色、加入辅料和抛射剂制成气雾剂。对鸡的白痢疾病具有很好的治疗效果，但是在治疗过程中会对鸡产生一定的耐药性，从而在多次使用后会影响其治疗效果。

发明内容

本发明的目的是提供一种防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂，降低鸡对药物的耐药性。

为了实现以上目的，本发明所防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂采用的技术方案是：一种防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂，是由中药的提取液加入双歧杆菌和枯草芽孢杆菌混合菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药采用如下重量份的组分：黄连50～200份、黄柏50～200份、大黄50～100份、黄芩50～200份、板蓝根50～200份、甘草50～100份。

所述中药采用如下重量份的组分：黄连180份、黄柏160份、大黄70份、黄芩100份、板蓝根130份、甘草60份。

所述混合菌液是由群落总数为0.5～1.0×10⁸CFU/ml的双歧杆菌液和枯草芽孢杆菌液混合而成。

本发明的防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂采用如下方法制备：

1)按照配方量取黄连、黄柏、大黄、板蓝根、甘草加水煎煮提取，得到提取液A；

2)按照配方量取黄芩加水煎煮提取，得到提取液B；

3)合并提取液A和提取液B浓缩成清膏，加入活性炭静置，过滤得到滤液；

4)向步骤3)得到的滤液中加入双歧杆菌和枯草芽孢杆菌菌液，于30℃～37℃密闭厌氧发酵36～72小时，得到防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂。

步骤1)中具体的煎煮提取方法为：将黄连、黄柏、大黄、板蓝根、甘草分三次煎煮，每次加入该5种中药总药重量5～9倍的水，第一次煎煮2小时，第二、第三次分别煎煮1小时，合并三次煎煮液，过滤、浓缩得到提取液A；

步骤2)中具体的煎煮提取方法为：将黄芩分三次煎煮，每次加入黄芩重量5～9倍的水，第一次煎煮2小时，第二、第三次分别煎煮1小时，合并三次煎煮液，过滤、浓缩至黄芩重量的5～10倍，调节pH值为1～2，保持50～60℃温度1～2h，静置16～24h得到沉淀，将沉淀用水和70％乙醇洗涤收集洗液，得到提取液B。

步骤3)中清膏为50～80℃相对密度为11～1.3。

本发明的防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂，采用双歧杆菌和枯草芽孢杆菌菌液发酵处理后，提高了配伍中药的药物活性，在保证了具有很好疗效的前提下，降低了药物对鸡所产生的耐药性，在多次用药后依然能够得到很好的治疗效果。本发明防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂，具有清热泻火、消炎止痢的功效，而且可以维持肠道菌群平衡，抑制致病菌生长，提高机体免疫力。用药方便，安全、无毒、无药残、不易产生耐药性、高效。

具体实施方式

实施例1

本实施例的防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂，是由中药的提取液加入0.5～0.6×10⁸CFU/ml的双歧杆菌液和枯草芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，中药采用如下重量份的组分：黄连50克、黄柏200克、大黄50克、板蓝根200克、甘草100克、黄芩50克。具体的制备方法如下：

1)根据上述配方量分别称取黄连50克、黄柏200克、大黄50克、板蓝根200克、甘草100克，加入5味中药总重量5倍的水，煎煮三次，第一次2h，后面两次各1h，合并三次煎液，滤过，浓缩滤液，得5种中药的提取液A；

2)称取黄芩50克，加入黄芩重量5倍的水，煎煮三次，第一次2h，后面两次各1h，合并三次煎液，滤过，浓缩至黄芩重量的6倍，调节浓缩液的pH值至1～2，经50℃保温2小时，再静置16h得沉淀，将沉淀用水和70％乙醇洗涤收集洗液，得到提取液B；

3)合并提取液A与提取液B，浓缩至60℃相对密度为11的清膏，调pH值至6.5，静置，滤过，向滤液中加入1％的活性炭，搅拌均匀后静置30min后抽滤，得滤液C；

4)取群落总数为0.5～0.6×10⁸CFU/ml的双歧杆菌和枯草芽孢杆菌混合菌液3ml，加入滤液C中，于37℃密闭厌氧发酵72小时，得到防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂。

其中双歧杆菌和枯草芽孢杆菌混合菌液可以采用双歧杆菌和枯草芽孢杆菌菌种采用常规方法培养而成，即采用斜面菌种分别进行斜面菌种培养，将每种斜面培养产生的悬浮液分别扩大培养，培养至对数生长期0.5～0.6×10⁸CFU/ml时止，或者采用市售产品混合而成。

实施例2

本实施例的防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂，是由中药的提取液加入0.7～0.8×10⁸CFU/ml的双歧杆菌和枯草芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，中药采用如下重量份的组分：黄连180克、黄柏160克、大黄70克、板蓝根130克、甘草60克、黄芩100克。具体的制备方法如下：

1)根据上述配方量分别称取黄连180克、黄柏160克、大黄70克、板蓝根130克、甘草60克，加入5味中药总重量6倍的水，煎煮三次，第一次2h，后面两次各1h，合并三次煎液，滤过，浓缩滤液，得5种中药的提取液A；

2)称取黄芩100克，加入黄芩重量6倍的水，煎煮三次，第一次2h，后面两次各1h，合并三次煎液，滤过，浓缩至黄芩重量的8倍，调节浓缩液的pH值至1～2，经55℃保温1.5小时，再静置20h得沉淀，将沉淀用水和70％乙醇洗涤收集洗液，得到提取液B；

3)合并提取液A与提取液B，浓缩至80℃相对密度为1.2的清膏，调pH值至6.5，静置，滤过，向滤液中加入1％的活性炭，搅拌均匀后静置30min后抽滤，得滤液C；

4)取群落总数为0.7～0.8×10⁸CFU/ml的双歧杆菌和枯草芽孢杆菌混合菌液3ml加入滤液C中，于34℃密闭厌氧发酵56小时，得到防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂。

其中双歧杆菌和枯草芽孢杆菌混合菌液可以采用双歧杆菌和枯草芽孢杆菌菌种采用常规方法培养而成，即采用斜面菌种分别进行斜面菌种培养，将每种斜面培养产生的悬浮液分别扩大培养，培养至对数生长期0.7～0.8×10⁸CFU/ml时止，或者采用市售产品混合而成。

实施例3

本实施例的防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂，是由中药的提取液加入0.9～1.0×10⁸CFU/ml的双歧杆菌和枯草芽孢杆菌菌液密闭厌氧发酵而成，中药采用如下重量份的组分：黄连200克、黄柏50克、大黄100克、板蓝根50克、甘草50克、黄芩200克。具体的制备方法如下：

1)根据上述配方量分别称取黄连200克、黄柏50克、大黄100克、板蓝根50克、甘草50克，加入5味中药总重量9倍的水，煎煮三次，第一次2h，后面两次各1h，合并三次煎液，滤过，浓缩滤液，得5种中药的提取液A；

2)称取黄芩200克，加入黄芩重量7倍的水，煎煮三次，第一次2h，后面两次各1h，合并三次煎液，滤过，浓缩至黄芩重量的10倍，调节浓缩液的pH值至1～2，经60℃保温1小时，再静置24h得沉淀，将沉淀用水和70％乙醇洗涤收集洗液，得到提取液B；

3)合并提取液A与提取液B，浓缩至50℃相对密度为1.3的清膏，调pH值至6.5，静置，滤过，向滤液中加入1％的活性炭，搅拌均匀后静置30min后抽滤，得滤液C；

4)取群落总数为0.9～1.0×10⁸CFU/ml的双歧杆菌和枯草芽孢杆菌混合菌液3ml加入滤液C中，于30℃密闭厌氧发酵36小时，得到防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂。

其中双歧杆菌和枯草芽孢杆菌混合菌液可以采用双歧杆菌和枯草芽孢杆菌菌种采用常规方法培养而成，即采用斜面菌种分别进行斜面菌种培养，将每种斜面培养产生的悬浮液分别扩大培养，培养至对数生长期0.9～1.0×10⁸CFU/ml时止，或者采用市售产品混合而成。

下面以具体实验说明本发明的药效：

1材料和方法：

11试验药品：本发明的中药微生物制剂。对照药物：黄连50克、黄柏200克、大黄50克、板蓝根200克、甘草100克、黄芩100克制备而成的中药液体制剂。

1.2试验动物：14～21日龄的鸡。

1.3试验设计

随机选择500只鸡，并进行大肠杆菌攻毒。待鸡群发病后，平均分为5个小组。试验组一饮水给药本发明实施例1的制剂，试验组二饮水给药本发明实施例2的制剂，试验组三饮水给药本发明实施例3的制剂，试验组四饮水给药对照药物，试验组五只饮水。

14试验方法

前四组连续给药一周后继续进行大肠杆菌攻毒，连续大肠杆菌攻毒和给药3次共三周。第五组，自由饮水。每天观察患鸡的临床变化、治愈、好转、死亡等情况，并进行记录。

1.5疗效判断标准

治愈率：试验结束后，病鸡症状消失，精神转好，食欲增长，完全恢复正常的鸡占该组鸡的比例。

有效率：试验结束后，鸡病症状、精神、食欲明显好转的鸡占该组鸡的比例。

无效率：试验期间出现症状，试验结束后仍不见症状消失的鸡占该组鸡的比例。

1.6临床试验结果见表1所示：

表1临床试验结果

2结论

从以上试验可以看出，本发明实例1、2、3的治愈率要比对照药物组高，说明添加益生菌的中草药制剂要比单纯的中草药制剂疗效好，而且在进行连续的大肠杆菌攻毒后，相对于对照药物消除了对鸡产生的耐药性。其中，本发明实例2的治愈率最高，无效率是最低的。由此得出，本发明对鸡大肠杆菌病有明显的防治作用。

Claims

1.一种防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂，其特征在于：是由中药的提取液加入双歧杆菌和枯草芽孢杆菌混合菌液密闭厌氧发酵而成，其中所述中药采用如下重量份的组分：黄连50～200份、黄柏50～200份、大黄50～100份、黄芩50～200份、板蓝根50～200份、甘草50～100份；其制备步骤如下：1)按照配方量取黄连、黄柏、大黄、板蓝根、甘草加水煎煮提取，得到提取液A；

2)按照配方量取黄芩加水煎煮提取，得到提取液B；

2.根据权利要求1所述的防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂，其特征在于：所述中药采用如下重量份的组分：黄连180份、黄柏160份、大黄70份、黄芩100份、板蓝根130份、甘草60份。

3.根据权利要求1所述的防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂，其特征在于：所述混合菌液是由群落总数为0.5～1.0×108CFU/ml的双歧杆菌液和枯草芽孢杆菌液混合而成。

4.一种如权利要求1所述防治鸡大肠杆菌疾病的中药微生态制剂的制备方法，其特征在于：其步骤如下：

2)按照配方量取黄芩加水煎煮提取，得到提取液B；

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤1)中具体的煎煮提取方法为：将黄连、黄柏、大黄、板蓝根、甘草分三次煎煮，每次加入该5种中药总药重量5～9倍的水，第一次煎煮2小时，第二、第三次分别煎煮1小时，合并三次煎煮液，过滤、浓缩得到提取液A。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤2)中具体的煎煮提取方法为：将黄芩分三次煎煮，每次加入黄芩重量5～9倍的水，第一次煎煮2小时，第二、第三次分别煎煮1小时，合并三次煎煮液，过滤、浓缩至黄芩重量的5～10倍，调节pH值为1～2，保持50～60℃温度1～2h，静置16～24h得到沉淀，将沉淀用水和70％乙醇洗涤收集洗液，得到提取液B。

7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤3)中清膏为50～80℃相对密度为1.1～1.3。