CN102579303B - 一种绿藻脂质体及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及化妆品领域，公开了一种绿藻脂质体及其制备方法和应用。本发明用乙醚或氯仿为溶剂溶解大豆卵磷脂得类脂溶液，然后加入绿藻提取液，在20-30℃、100-150r/min以及0.04-0.08MPa的条件下旋转制膜，形成薄膜后用含质量百分数为0.05％吐温80的水溶液洗膜并振荡得混悬液，经超声波分散后即得绿藻脂质体。本发明以大豆卵磷脂为载体，结合超声波技术将绿藻提取液中的活性物质用脂质体保护起来获得绿藻脂质体，提高了以虾青素为代表的活性物质的稳定性，有利于绿藻提取液中活性成分在化妆品中发挥最大功效。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品领域，具体涉及一种绿藻脂质体及其制备方法和应用。
背景技术
绿藻，又称小球藻，是一种单细胞球形藻类，细胞直径只有2-8微米大，大小与人体红血球大约相同，因此又被称之为“绿血球”。绿藻虽然个体极小，但含有特别丰富的营养素，人类所需的七大营养素，四十种营养物质绿藻几乎都有，如蛋白、氨基酸、矿物质、维生素等含量均十分丰富。
和绿藻丰富的营养物质相比，人们更看重的是其养颜护肤的作用。绿藻在一日之内可产生四个新细胞，含有核酸、多糖、多肽、脂肪酸、酶等多种细胞活性物质，这些成分构成了其特有的C.G.F(细胞再生因子)，细胞再生因子修复受损细胞的能力无出其右，在美容护肤品中倍受青睐。此外，绿藻中还含有虾青素，是迄今为止人类发现自然界最强的抗氧化剂，其抗氧化活性远远超过现有的抗氧化剂，其清除自由基的能力是天然VE的1000倍。因此，现有技术普遍用绿藻提取液作为美容养颜的活性物质添加到化妆品中。
但是，绿藻提取液中含有的多种活性营养成分自身不稳定，对热、光、氧稳定性较差，在无保护条件下极易失去活性，尤其是虾青素，是最不稳定的活性物质，造成了绿藻提取液添加进化妆品中其有效成分易被外界环境破坏的问题，无法达到很好的护肤效果。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种绿藻脂质体及其制备方法和应用，能够提高绿藻提取液中活性物质特别是虾青素的稳定性，从而更好地应用在化妆品的制备中。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种绿藻脂质体的制备方法，用乙醚或氯仿为溶剂溶解大豆卵磷脂得类脂溶液，然后加入绿藻提取液，在20-30℃、100-150r/min以及0.04-0.08MPa的条件下旋转制膜，形成薄膜后用含质量百分数为0.05％吐温80的水溶液洗膜并振荡得混悬液，经超声波分散后即得。
其中，绿藻提取液可以市售购得，也可以用常规方法提取获得，大豆卵磷脂可以市售获得。同时，所述溶剂和大豆卵磷脂的体积质量比优选为8-12mL∶1g，更优选为10mL∶1g；所述类脂溶液和绿藻提取液的体积比优选为4-6∶5，更优选为5∶5(即1∶1)；
在旋转制膜时，本发明通过减压(以常压为起始减小压强)旋转挥发溶剂，让绿藻提取液混合大豆卵磷脂成膜覆盖在容器壁上，由于容器中有挥发的溶剂气体，故需要用通氮气排除，避免洗膜时再溶解到溶液中。其中，所述的温度优选为25℃，所述转速优选为125r/min，所述压强优选为0.06MPa。
由于绿藻提取液中许多活性成分对光、热、氧的稳定性较差，本发明利用大豆卵磷脂为脂质材料，捕获绿藻提取液中的活性成分，在超声波分散处理下，形成多层脂质组成的人工小囊，将这些易失活的成分保护起来，提高其稳定性。
在超声波处理过程中，本发明超声波分散时间优选10-15min，超声波处理时会放热，为避免温度过高引起活性物质失活，一般需要在冷水浴中，维持混悬液在30℃左右。同理，洗膜用的吐温80水溶液也应该避免高温，维持在20-30℃。
人体皮肤的间隙为50μm左右，本发明所制备的绿藻脂质体粒径大部分介于20-40μm，同时大豆卵磷脂与人体皮肤基底层含量较高的磷脂形似，故能够直达皮肤基底层被溶解吸收，对人体无害。
由本发明制备的绿藻脂质体与绿藻提取液一同在热、光、氧的环境下检测虾青素的稳定性，由于虾青素是绿藻提取液中最不稳定的物质，因此虾青素的稳定性能够代表其他活性物质的稳定性。结果显示，一周后，在上述环境下，本发明所述制备方法制备的绿藻脂质体中虾青素含量仅下降了其总量的4.5％，而绿藻提取液中虾青素含量则下降了其总量的43％。
因此，本发明除了提供本发明所述制备方法制备的绿藻脂质体，还提供所述绿藻脂质体在制备绿藻养颜护肤化妆品中的应用，如绿藻膏霜类化妆品、绿藻乳液类化妆品、绿藻水剂类化妆品、绿藻啫喱类化妆品或绿藻面膜类化妆品，更加优选地，如绿藻滋润霜、绿藻保湿修复精华乳、绿藻紧致爽肤水、绿藻修复啫喱或绿藻抗皱修复面膜贴。
由以上技术方案可知，本发明以大豆卵磷脂为载体，结合超声波技术将绿藻提取液中的活性物质用脂质体保护起来获得绿藻脂质体，提高了以虾青素为代表的活性物质的稳定性，有利于绿藻提取液中活性成分在化妆品中发挥最大功效。
附图说明
图1所示为本发明所述绿藻脂质体粒径与数量分布图；
图2所示为本发明所述绿藻脂质体虾青素残余率柱形图；
图3所示为所述绿藻提取液虾青素残余率柱形图；
具体实施方式
本发明公开了一种绿藻脂质体及其制备方法和应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明所述制备方法及产品已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
以下就本发明所提供的一种绿藻脂质体及其制备方法和应用做进一步说明。
实施例1：制备本发明所述绿藻脂质体
取大豆卵磷脂1g，加入乙醚溶液10mL使其完全溶解，待完全溶解后将10mL绿藻提取液溶入其中，得类脂溶液；
把该类脂溶液置于250mL磨口梨形烧瓶中，然后将梨形烧瓶置于25℃恒温水浴中，用旋转蒸发仪在转速125r/min及0.06Mpa下挥发有机溶剂乙醚，在瓶壁上形成薄膜，向瓶中充氮气5-10min，使溶剂完全除去；
加入25℃左右的含0.05％吐温80的水溶液，同时加入直径3-4mm的玻璃珠，在同温度条件下用旋转蒸发仪转动洗膜、震荡4h，得到混悬液；
再用探针式超声波粉碎机分散15min，同时在冷水浴中控制混悬液温度在30℃左右，即得绿藻提取液脂质体。
实施例2：绿藻脂质体粒径以及包封率检测
粒径检测：取实施例1制备的绿藻脂质体经相应的水合介质稀释后，用JI-1155型激光散射粒度测定绿藻脂质体的粒径及分布，结果见图1。由图1结果可知，本发明所制备的绿藻脂质体粒径绝大部分分布在20-40μm，小部分分布在40-50μm，极小部分分布在50-60μm，表明本发明所制备的绿藻脂质体能够充分进入基底层，被人体皮肤吸收。
包封率检测：取0.1mL实施例1制备的绿藻脂质体混悬液于10mL锥形离心管中，加入0.1mL鱼精蛋白溶液(10mg/mL)，搅匀，静置3min，再加3mL生理盐水，在室温条件下离心，吸取2mL上清液，测定游离物的浓度。将剩余上清液弃去，沉淀物以0.6mL 10％Triton X-100重新混悬，使脂质体膜材大豆卵磷脂溶解，再补充生理盐水至总体积为3.2mL，测定包封绿藻提取液的浓度，即可计算出绿藻脂质体的包封率为60.5％。表明绿藻提取液可有效被大豆卵磷脂包封。
实施例3：稳定性检测
将实施例1制备的绿藻脂质体和绿藻提取液(与制备实施例1绿藻脂质体的绿藻提取液相同)进行虾青素含量检测，然后一同置于40℃、有灯光且氧气充足的恒温培养箱中7天，每天检测虾青素含量，以虾青素含量变化为依据检测其稳定性，结果见图2和图3。
由图2和图3可知，随着时间的延长，本发明制备的绿藻脂质体中的虾青素含量下降不明显，到第7天虾青素含量仅下降了其总量的4.5％，其残余率为95.5％，而绿藻提取液中的虾青素含量下降明显，到第7天虾青素含量仅下降了其总量的43％，其残余率为57％。表明本发明制备的绿藻脂质体能够提高虾青素的稳定性，由于虾青素是绿藻提取液中最不稳定的物质，从原理上可以推知本发明所述绿藻脂质体同样可以提高其他活性物质的稳定性。
实施例4：制备本发明所述绿藻脂质体
取大豆卵磷脂1g，加入乙醚溶液8mL使其完全溶解，待完全溶解后将10mL绿藻提取液溶入其中，得类脂溶液；
把该类脂溶液置于250mL磨口梨形烧瓶中，然后将梨形烧瓶置于20℃恒温水浴中，用旋转蒸发仪在转速100r/min及0.08Mpa下挥发有机溶剂乙醚，在瓶壁上形成薄膜，向瓶中充氮气5-10min，使溶剂完全除去；
加入20℃左右的含0.05％吐温80的水溶液，同时加入直径3-4mm的玻璃珠，在同温度条件下用旋转蒸发仪转动洗膜、震荡3h，得到混悬液；
再用探针式超声波粉碎机分散15min，同时在冷水浴中控制混悬液温度在30℃左右，即得绿藻提取液脂质体。
按照实施例2和实施例3的方法，对本实施例制备的绿藻脂质体进行粒径、包封率和稳定性的检测，结果显示，本实施例制备的绿藻脂质体粒径绝大部分介于20-40μm，包封率在60％以上，虾青素减少量小于5％。
实施例5：制备本发明所述绿藻脂质体
取大豆卵磷脂1g，加入乙醚溶液12mL使其完全溶解，待完全溶解后将10mL绿藻提取液溶入其中，得类脂溶液；
把该类脂溶液置于250mL磨口梨形烧瓶中，然后将梨形烧瓶置于30℃恒温水浴中，用旋转蒸发仪在转速150r/min及0.04Mpa下挥发有机溶剂乙醚，在瓶壁上形成薄膜，向瓶中充氮气5-10min，使溶剂完全除去；
加入30℃左右的含0.05％吐温80的水溶液，同时加入直径3-4mm的玻璃珠，在同温度条件下用旋转蒸发仪转动洗膜、震荡6h，得到混悬液；
再用探针式超声波粉碎机分散15min，同时在冷水浴中控制混悬液温度在30℃左右，即得绿藻提取液脂质体。
按照实施例2和实施例3的方法，对本实施例制备的绿藻脂质体进行粒径、包封率和稳定性的检测，结果显示，本实施例制备的绿藻脂质体粒径绝大部分介于20-40μm，包封率在60％以上，虾青素减少量小于5％。
实施例6：利用本发明所述绿藻脂质体制备膏霜类化妆品-绿藻滋润霜
1、配方：
A油相：单甘酯0.3-2.0g、16-18醇0.5-2.5g、聚二甲基硅氧烷0.5-3.0g、环甲基硅氧烷0.5-3.0g、硬脂酸甘油酯0.5-3.0g、葡萄籽油0.5-5.0g、棕榈酸异辛酯2.0-8.0g、角鲨烷1.0-5.0g、ETDA-Na2 0.1-0.5g、尼泊金甲酯0.08-0.3g、尼泊金丙酯0.05-0.2g；
B水相：水解珍珠液2.0-5.0g、甘油2.0-5.0g、丙二醇2.0-8.0g、吡咯烷酮羧酸钠1.0-3.0g、尿囊素0.1-1.0g、去离子水55.0-85.0g；
C相：绿藻脂质体0.5-2.0g、VE 0.1-1.0g；
D相：对咪唑烷基脲0.08-0.3g、香精适量。
2、制法：
将A、B相加热到85℃左右，保温30分钟。将A相加入B相，搅拌2分钟，均质5分钟。保温搅拌30分钟，即可冷却。冷却到50-55℃，加入C相。搅拌均匀。冷却到40-50℃，加入D相，搅拌均匀即可。
实施例7：利用本发明所述绿藻脂质体制备乳液类化妆品-绿藻保湿修复精华乳
1、配方：
A油相：单甘酯0.2-3.0g、聚氧乙烯醚(及)单硬酯酸酯0.5-2.5g、16-18醇0.2-2.0g、聚二甲基硅氧烷0.5-2.0g、环甲基硅氧烷1.0-3.0g、葡萄籽油2.0-5.0g、棕榈酸异丙酯2.0-6.0g、霍霍巴油2.0-5.0g、乳木果油2.0-5.0g、ETDA-Na20.05-0.3g、尼泊金甲酯0.08-0.3g、尼泊金丙酯0.05-0.2g；
B水相：水解珍珠液2.0-5.0g、甘油2.0-8.0g、丙二醇2.0-6.0g、吡咯烷酮羧酸钠2.0-5.0、尿囊素0.1-1.0g、去离子水50.5-78.5g；
C相：绿藻脂质体0.2-2.0g、VE 0.8g；
D相：对咪唑烷基脲0.05-0.3g、香精适量。
2、制法：
将A、B相加热到85℃左右，保温30分钟。将A相加入B相，搅拌2分钟，均质5分钟。保温搅拌30分钟，即可冷却。冷却到50-55℃，加入C相。搅拌均匀。冷却到40-50℃，加入D相，搅拌均匀即可。
实施例8：利用本发明所述绿藻脂质体制备水剂类化妆品-绿藻紧致爽肤水
1、配方：
A相：水解珍珠3.0-10g、尿囊素0.05-0.3g、金缕梅提取液3.0-10.0g、甘油2.0-8.0g、丙二醇2.0-8.0g、透明质酸钠0.01-0.2g、水50.0-90.0g；
B相：绿藻指质体1.0-2.0g；
C相：杰马-BP 0.2-0.8g、香精适量。
2、制法：
将A相各物质混合搅拌均匀并加热到85℃左右，过滤，冷却到50-55℃，加入B相，搅拌均匀。冷却到40-50℃，加入C相，搅拌均匀即可。
实施例9：利用本发明所述绿藻脂质体制备啫喱类化妆品-绿藻修复啫喱
1、配方：
A相：卡波-940 0.05-0.8g、水50.0-90.0g；
B相：水解珍珠3.0-10.0g、金缕梅蒸馏液3.0-6.0g、甘油2.0-8.0g、丙二醇2.0-8.0g、吡咯烷酮羧酸钠1.0-5.0g；
C相：绿藻脂质体0.2-2.0g；
D相：杰马-BP 0.2-1.0g、三乙醇胺0.2-3.0g。
2、制法：
先将A相卡波-940在去离子充分搅拌溶解完全。将B相物质混合搅拌均匀并过滤，加入A相。将C相加入AB相，搅拌均匀。先将杰马-BP加入ABC相，搅拌均匀，再加入三乙醇胺，搅拌均匀即可。
实施例10：利用本发明所述绿藻脂质体制备面膜类化妆品-绿藻抗皱修复面膜贴
1、配方：
A相：汉生胶0.05-1.0g、水50.0-90.0g；
B相：水解珍珠3.0-10.0g、金缕梅蒸馏液2.0-8.0g、甘油3.0-10.0g、丙二醇2.0-5.0g、吡咯烷酮羧酸钠1.0-3.0g、银耳多糖1.0-3.0g；
C相：绿藻提取液脂质体0.2-2.0g；
D相：杰马-BP 0.2-1.0g、香精适量。
2、制法：
先将A相汉生胶在去离子水充分搅拌溶解完全。再将B相物质混合搅拌均匀并过滤，加入A相。接着将C相加入AB相，搅拌均匀。将D相加入ABC相，搅拌均匀即可。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (8)
1.一种绿藻脂质体的制备方法，其特征在于，用乙醚或氯仿为溶剂溶解大豆卵磷脂得类脂溶液，然后加入绿藻提取液，在20-30℃、100-150r/min以及0.04-0.08MPa的条件下旋转制膜，形成薄膜后用20-30℃、含质量百分数为0.05%吐温80的水溶液洗膜并振荡得混悬液，在冷水浴中，维持混悬液在30℃并经超声波分散10-15min后即得；
其中，所述溶剂和大豆卵磷脂的体积质量比为8-12mL:1g，所述类脂溶液和绿藻提取液的体积比为4-6:5。
2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述旋转制膜的温度为25℃。
3.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述旋转制膜的转速为125r/min。
4.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述旋转制膜的压强0.06MPa。
5.权利要求1-4任意一项所述制备方法制备的绿藻脂质体。
6.权利要求5所述绿藻脂质体在制备绿藻养颜护肤化妆品中的应用。
7.根据权利要求6所述应用，其特征在于，所述绿藻养颜护肤化妆品为绿藻膏霜类化妆品、绿藻乳液类化妆品、绿藻水剂类化妆品、绿藻啫喱类化妆品或绿藻面膜类化妆品。
8.根据权利要求7所述应用，其特征在于，所述绿藻养颜护肤化妆品为绿藻滋润霜、绿藻保湿修复精华乳、绿藻紧致爽肤水、绿藻修复啫喱或绿藻抗皱修复面膜贴。
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