CN102552367A - 一种菥蓂总芥子甙的提取方法及其医药用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了菥蓂提取物特别是菥蓂总芥子甙的制备方法，用水煮乙醇或甲醇（ 70-90% ）沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；或再用乙醇或甲醇（ 50-90% ）提取乙醇或甲醇（ 70-90% ）沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；将浸膏置于 4-10 ℃下冷藏 8-24 小时，形成沉淀；过滤并干燥沉淀，即得菥蓂总芥子甙；本发明还公开了菥蓂提取物在用于制备治疗或预防高尿酸血症药物中的应用，通过这种方法可产生治疗或预防痛风的功效。

Description

一种菥蓂总芥子甙的提取方法及其医药用途

技术领域

本发明涉及医药领域。更具体地涉及菥蓂提取物的制备方法及其应用，特别是菥蓂总芥子甙的制备方法及其在制备防止高尿酸血症和痛风的药物中的应用。

背景技术

痛风是一种由于嘌呤代谢紊乱产生过多尿酸及（或）尿酸排泄减少，并在体内蓄积沉淀所致的一组代谢性疾病。临床表现为高尿酸血症、痛风性关节炎、关节畸形、肾脏病变和尿酸结石、痛风结石等。尿酸是人类嘌呤代谢的产物，高尿酸血症是痛风的主要生化基础。痛风性关节炎是血清尿酸水平增高后，尿酸盐沉积在关节组织，刺激关节并引发一系列的炎症反应，痛风症状以反复下肢关节红肿热痛为主，在中医上多属于湿热范畴。

现有西医针对痛风患者在不同时期所变现的症状选择性进行治疗。如抗炎镇痛药秋水仙碱和消炎镇痛药用于痛风急性发作治疗，排泄尿酸药物如丙磺舒、苯溴马隆用于间歇期及慢性期治疗，黄嘌呤氧化酶抑制剂药物别嘌醇抑制尿酸合成。但上述药物毒副作用大，患者往往不能坚持长期服用，以致不易控制病情。如秋水仙碱和消炎痛具有胃肠道刺激作用，前者还产生白细胞降低和脱发等。丙磺舒、苯溴马隆具有胃肠道反应、肾绞痛及激发痛风急性发作等副作用。别嘌醇有致变态反应骨髓抑制等严重的毒副作用。这些药物副作用大，病人常常不能忍受，在一定程度上限制了其使用。因此，寻找新型的高效低毒的抗痛风和高尿酸血症药物依然是目前药学研究的一个热点。

CN97116712.5公开了茶色素可抑制高尿酸血症，预防痛风发作，并具有治疗作用；CN98110667.6公开了由木通、益母草、车前子、米仁、仓术、黄柏、牛膝组成的物质，具有清热利湿、活血化浊的作用，可以降低尿酸，治疗痛风性关节炎，预防关节畸形及肾病变；CN200410034933.9公开了主要未总黄酮、总生物碱、挥发油构成的组合物，具有降低高尿酸的效果。

菥蓂(Thlaspi arvenseLinn)为双子叶十字花科菥蓂属一年生草本植物，又叫遏蓝菜、苏败酱(江苏)、南败酱(湖北)、苦芥子、败酱草、瓜子草、野榆树、菥目(陕西)，分布全国各地，但是在川藏地区资源最为丰富。菥蓂的主要化学成分为挥发油和芥子甙。目前关于菥蓂子的研究较少, 但却是一种重要的川藏道地药材。2010版药典记载，菥蓂辛，微寒。归肝、胃、大肠经。主治清肝明目，和中利湿，解毒消肿。用于目赤肿痛，腕腹胀痛，胁痛，肠痈，水肿，带下，疮疖痈肿，目前尚无治疗痛风的报道。

发明内容

本发明提供一种单味藏药菥蓂的提取物-总芥子甙的新用途，其可以降低高尿酸血症血清尿酸水平、制备抑制黄嘌呤氧化酶和次黄嘌呤氧化酶活性、制备保护痛风性关节炎的炎症组织和制备抗关节炎肿胀的治疗或预防的药物。

本发明还提供了一种简便的菥蓂的总芥子甙的制备方法，确切地说是菥蓂的总芥子甙的浓缩纯化的方法，其技术方案是：将菥蓂粉碎至10-100目，采用：A：用水煮乙醇或甲醇（70-90%）沉淀法；乙醇或甲醇（50-90%）提取，乙醇或甲醇（70-90%）沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；B：将浸膏置于4-10℃下冷藏8-24小时，形成沉淀；C：过滤并干燥沉淀，即得菥蓂总芥子甙。总芥子甙作为活性成分，加入药学上可接受的载体或赋形剂可用于制备治疗急慢性痛风的药物。

氧嗪酸钾盐是一种尿酸酶抑制剂，可诱导导致尿酸分解，增加体内血清尿酸水平，造成高尿酸血症动物模型，国际上普遍用其评价药物的抗高尿酸血症和痛风作用。本发明亦采用此高尿酸血症动物模型，验证菥蓂提取物的抗痛风疗效。结果表明，其疗效确切，效果显著，总有效率为91.7%，未见明显的毒副作用。

该发明获得的治疗和预防高尿酸血症和痛风病的药物菥蓂为一传统藏药，来源广泛。所涉及的制备工艺简单，易于实现工业化生产。本发明的另一优点在于，本发明以菥蓂的总芥子甙为主要成分，药效成分明确，并可分别用黑芥子甙和芥子甙等成分作为质量控制指标。

具体实施方式

实施例1  传统提取方法

取菥蓂10kg，粉碎至10-100目，加水50L，在60-75℃的条件下提取三次，每次提取5-8小时，将3次水提液合并，浓缩成浸膏，干燥，得到0.8 kg浸膏，即为样品A。

实施例2  水提醇沉法

取0.5 kg的样品A，向其中加入2.5 L 85%乙醇，经醇沉过滤后，将乙醇滤液回收溶剂浓缩至1.5 L，所得浓缩液置于4℃冷藏10小时，过滤，收集沉淀，干燥，即得样品B，总芥子甙0.15 kg。

实施例3  醇提醇沉法

取菥蓂10 kg，粉碎至10-100目，加50L 75%乙醇，在40-55℃的条件下提取三次，每次4-6小时，将醇提液浓缩成浸膏，加4L倍量85%乙醇，置于4℃冷藏15小时，过滤，收集沉淀，干燥，即得样品C，总芥子甙0.18 kg。

实施例4

通过一系列动物实验，分别测定样品A、B和C对高尿酸血症和正常小鼠血清尿酸水平、大鼠尿酸钠引起痛风性关节炎组织和角叉菜胶引起关节肿胀的影响。

雄性昆明种小鼠，体重24±2 g，随机分组，每天给药一次，连续4天，其中生理盐水组合高尿酸血症模型空白组每天均按100 ml/kg剂量生理盐水，各高尿酸血症模型空白组在采血前2小时氧嗪酸钾盐，给药模型组在最后一次给药前一小时氧嗪酸钾盐。最后一次给药2小时后从动物眼眶后静脉丛采血，测定血清尿酸水平。

雄性昆明种小鼠，体重24±2 g，随机分组，每天给药一次，连续7天，处死动物，取肝脏测定次黄嘌呤氧化酶（XDH）和黄嘌呤氧化酶（XO）活力。

雄性昆明大鼠，体重200±25 g，随机分组。每天给药一次，连续7天，并于第4天给药前1小时用尿酸钠致炎造模，72小时后测量大鼠踝关节肿胀程度，或造模24小时处死，取受试关节周围软组织，测定钾离子（K⁺）、5-羟色胺（5-HT）含量。

雄性昆明大鼠，体重200-250 g，随机分组，分别灌胃给药，给药后1小时，将1%角叉菜胶0.1ml注入大鼠右后趾腱膜下致炎，以容量测量法观察各鼠踝关节致炎后1h、2h、4h和6h的肿胀程度。

样品A、B和C对高尿酸血症和正常小鼠血清尿酸水平的影响结果分别见表1和表2。在实验条件下，样品A、B和C均能降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平；其中，样品B和样品C可将高尿酸血症小鼠血清水平恢复至正常，作用强度与阳性药物别嘌呤醇相近。样品A、B和C对正常小鼠血清尿酸水平无显著性影响，而别嘌呤醇可显著地降低正常小鼠血清尿酸水平。

样品A、B和C对大鼠尿酸钠引起痛风性关节炎模型的影响结果见表3。数据显示，样品B和C能显著地抑制尿酸钠引起的大鼠痛风性关节炎肿胀，作用于秋水仙碱相当。受试关节周围软组织组织血研究表明，样品A、B、C和秋水仙碱均能保护炎症组织。样品B和C能显著地减低炎症组织中K⁺含量和5-HT含量，作用强度于秋水仙碱相当。

样品A、B和C对大鼠角叉菜胶致炎引起的足趾肿胀的影响结果见表4。数据显示，样品B和样品C能显著抑制角叉菜引起的足肿胀，降低肿胀率，于阳性药强地松作用相当。

与模型空白组比较： * P<0.05，** P<0.001

与生理盐水组比较：*P<0.01

与模型空白组比较：*P<0.01

与生理盐水组比较：*P<0.01

样品B和样品C均显著地降低高尿酸血症模型下小鼠血清尿酸水平，而对正常小鼠血清尿酸水平无显著性影响，可有效的治疗和预防高尿酸血症和痛风。样品B和样品C可降低炎症组织中的K+含量和5-HT含量，显著地抑制尿酸钠引起的的大鼠痛风性关节炎，保护炎症组织，可用于治疗痛风性关节炎。样品B和样品C能显著的降低角叉菜胶引起的足趾肿胀，表明，其对炎症早期毛细血管扩张、通透性增加、炎性物质渗出、组织水肿等病理改变由显著的抑制作用。采用传统的提取方法得到的样品A由于提取过程中没有除掉一些杂质，使得其在上述方面的药理作用要大大弱于样品B和样品C，这也证明了采用水提醇沉法或醇提醇沉法能显著提高菥蓂提取物治疗痛风的效果。

Claims (4)

1.一种菥蓂提取物浸膏的制备方法，其步骤为：

1）用水煮乙醇或甲醇（70-90%）沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；

2）将浸膏置于4-10℃下冷藏8-24小时，形成沉淀；

3）过滤并干燥沉淀，即得菥蓂总芥子甙。

2.如权利要求1所述的制备方法，其步骤为：

1）用乙醇或甲醇（50-90%）提取乙醇或甲醇（70-90%）沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；

2）将浸膏置于4-10℃下冷藏8-24小时，形成沉淀；

3）过滤并干燥沉淀，即得菥蓂总芥子甙。

3.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于菥蓂提取物浸膏在制备用于治疗或预防痛风药物中的应用。

4.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于菥蓂提取物浸膏在制备用于制备（a）降低血尿酸和/或（b）治疗痛风性关节炎的药物中的应用。