CN102548569A - 珍珠草的提取物 - Google Patents

珍珠草的提取物 Download PDF

Info

Publication number
CN102548569A
CN102548569A CN2010800449701A CN201080044970A CN102548569A CN 102548569 A CN102548569 A CN 102548569A CN 2010800449701 A CN2010800449701 A CN 2010800449701A CN 201080044970 A CN201080044970 A CN 201080044970A CN 102548569 A CN102548569 A CN 102548569A
Authority
CN
China
Prior art keywords
molecular weight
herba phyllanthi
low molecular
phyllanthi urinariae
skin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN2010800449701A
Other languages
English (en)
Inventor
M·加拉伊
S·考尔
M·索斯霍
闻萍
K·马哈茂迪
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Johnson and Johnson Consumer Inc
Original Assignee
Johnson and Johnson Consumer Companies LLC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Johnson and Johnson Consumer Companies LLC filed Critical Johnson and Johnson Consumer Companies LLC
Publication of CN102548569A publication Critical patent/CN102548569A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/47—Euphorbiaceae (Spurge family), e.g. Ricinus (castorbean)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation, decoction

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明提供了一种制备珍珠草的低分子量级分的方法。这种低分子量级分尤其可用于处理皮肤(例如需要处理老化迹象的皮肤)、用于减轻发炎或用于皮肤增亮。

Description

珍珠草的提取物
技术领域
本发明涉及包含珍珠草的提取物的组合物、以及制备和使用珍珠草的提取物的方法。该组合物可用于(例如)改善皮肤外观，例如，改善皮肤老化迹象、处理发炎和增亮皮肤。
背景技术
皮肤的老化会通过真皮胞外基质的两种主要组分即胶原和弹性蛋白这两种纤维状蛋白质的变化，不利地影响皮肤的弹性和强度。例如，弹性蛋白是由弹性蛋白的前体蛋白质分子(例如弹性蛋白原)交联成螺旋纤丝而形成的大的纤维状蛋白质。螺旋丝由能够伸展然后又恢复它们的原始形状的肽链组成。
处理皮肤的包含珍珠草的组合物为本领域已知的。然而，本发明人已认识到，并非珍珠草的所有提取物均等效地实现促进原弹性蛋白和胶原的形成。本发明人已吃惊地发现，珍珠草的水可提取、低分子量级分与珍珠草的其他提取物相比具有显著较好的活性以抑制胶原酶、促进原弹性蛋白、和促进胶原形成。
另外已发现，珍珠草的这些低分子量级分对于增亮皮肤也为极其可用的。
还已发现，珍珠草的低分子量级分提供有益的抗炎作用。
发明内容
本发明涉及基本上由珍珠草的低分子量级分组成的组合物，所述珍珠草的低分子量级分基本上不含分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
本发明还涉及局部用制剂以及通过将这种局部用制剂局部施用至皮肤来处理皮肤老化迹象的方法，所述局部用制剂包含美容上可接受的局部用载体和基本上由珍珠草的低分子量级分组成的组合物，所述珍珠草的低分子量级分基本上不含分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
本发明还涉及制备珍珠草的低分子量级分的方法，所述方法包括：使珍珠草与包含水的溶剂接触足以形成珍珠草的水提取物的时间段；以及从所述珍珠草的水提取物中分离低分子量级分。
在另一方面，本发明涉及增亮皮肤的方法，所述方法包括将珍珠草的低分子量级分施用至需要皮肤增亮处理的皮肤的步骤，所述珍珠草的低分子量级分基本上不含分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
在另一方面，本发明涉及改善皮肤老化迹象的方法，所述方法包括将珍珠草的低分子量级分施用至需要改善老化迹象的皮肤的步骤，所述珍珠草的低分子量级分基本上不含分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
本发明还涉及减轻皮肤发炎的方法，所述方法包括将珍珠草的低分子量级分施用至需要减轻皮肤发炎的皮肤的步骤，所述珍珠草的低分子量级分基本上不含分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
通过本发明的具体实施方式和权利要求书，本发明的其他特征和优点将显而易见。
具体实施方式
除非另有规定，否则本文使用的所有技术和科学术语都具有本发明所属技术领域普通技术人员公知的相同含义。此外，将本文提及的所有出版物、专利申请、专利和其他参考文献以引用方式并入本文中。除非另外指明，否则百分比或浓度指重量百分比或重量浓度(即％(W/W))。除非另外阐明，否则所有范围均包括端值，如“4至9”包括端值4和9。
如本文所用，“皮肤老化迹象”包括存在细纹和皱纹、损失弹性、皮肤不均、斑疤、和老年斑。
如本文所用，“处理”指减轻、减少、预防、改善或消除病症或疾病的存在或出现。
如本文所用，“皱纹”包括微细纹、微皱纹或粗皱纹。皱纹的实例包括但不限于眼睛周围的微细纹(例如“鱼尾纹”)、前额和颊皱纹、眉心纹和嘴巴周围的笑纹。
如本文所用，“损失弹性”包括皮肤或组织的弹性或结构完整性的损失，包括但不限于松垂、松弛和松散的组织。弹性或组织结构完整性的损失可由多种因素所致，包括但不限于疾病、衰老、激素变化、机械创伤、环境损害，或者是向组织施用诸如美容品或药物之类的产品的结果。
如本文所用，“肤色不均”意指与弥漫状或斑驳状色素沉着有关的皮肤状况，所述色素沉着可分类为色素沉着过度，例如发炎后色素沉着过度。
如本文所用，“斑疤”意指与发红或红斑相关的皮肤状况。
如本文所用，“老年斑”意指与不连续色素沉着有关的皮肤状况，例如可在脸上以及手上发展的较深色素沉着小区域。
如本文所用，“处理皮肤中的外部侵害”意指减少或预防皮肤中外部侵害带来的损害。外部侵害的例子包括但不限于使用清洁剂(如，含有表面活性剂的局部用清洁剂)、化妆品、剃须以及环境损害(如，来自UV光照(如，来自日光的阳光损害或来自非天然来源(如UV灯和太阳模拟器)的损害)、臭氧、废气、污染、氯和含氯化合物以及抽烟烟雾)对皮肤的损害。外部侵害对皮肤的影响包括但不限于对脂质、碳水化合物、肽、蛋白质、核酸和维生素的氧化和/或亚硝化损伤和对这些物质的修饰。外部侵害对皮肤的影响还包括但不限于细胞活力的损失、细胞功能的损失或改变以及基因和/或蛋白质表达的变化。
如本文所用，“需要减轻皮肤发炎的皮肤”意指显示具有发红或红斑、浮肿的皮肤。在某些其他实施例中，“需要减轻皮肤发炎的皮肤”是指对外部因素极具反应性或敏感性的皮肤。外部因素包括但不限于太阳光线(UV、可见光、IR)、微生物、大气污染物(例如臭氧)、废气污染物、氯和产生氯的化合物、抽烟烟雾、低温、热。可使用本发明的组合物处理或预防的炎性疾病和相关病症包括但不限于：关节炎、支气管炎、接触性皮炎、特应性皮炎、牛皮癣、皮脂溢性皮炎、湿疹、过敏性皮炎、多形性日光疹、炎性皮肤病、毛囊炎、脱发、毒藤疹、虫咬发炎、粉刺发炎、因外源性因素(包括但不限于化学品、创伤、污染物(例如抽烟烟雾)和日光照射)引起的刺激、因发炎导致的次级病症(包括但不限于干燥病、角化过度、瘙痒、发炎后色素沉着过度、结瘢等等)。优选的是，可使用本发明的方法处理或预防的炎性疾病和相关病症为关节炎、炎性皮肤病、接触性皮炎、过敏性皮炎、特应性皮炎、多形性日光疹、刺激(包括因外源性因素引起的红斑)、粉刺发炎、牛皮癣、皮脂溢性皮炎、湿疹、毒藤疹、虫咬发炎、毛囊炎、脱发、以及次级病症等等。
如本文所用，术语“增亮皮肤”通常指使肤色、皮肤颜色和/或皮肤色度变淡、变亮、变白和/或均匀，和/或指祛黄，和/或指色素斑痕和/或病损(包括但不限于色素斑、黑色素斑、老年斑、日晒斑、衰老性着色班、雀斑(freckles)、单纯性雀斑痣、色素性日光性角化病、脂溢性角化病、黑斑病、痤疮斑痕、发炎后色素沉着过度、着色斑、雀斑(ephelides)、它们中两种或更多种的组合等等)的淡化和/或褪色。在某些实施例中，“增亮皮肤”还指增加的皮肤光亮度、光泽度、半透明度和/或发光和/或获得更光亮、光泽、半透明的或发光的肤色外观或较低的黄色或萎黄色肤色。在某些优选的实施例中，“增亮皮肤”指使肤色增亮和均匀，增加皮肤光亮度和/或淡化老年斑。
如本文所用，术语“需要进行皮肤增亮治疗的皮肤”一般指表现出一种或多种选自如下特性的皮肤：具有低于41的个体类型角(IndividualTypology Angle，ITA)测量值(根据2007年公布的COLIPA GUIDELINE：GUIDELINE FOR THE COLORIMETRIC DETERMINATION OF SKINCOLOUR TYPING AND PREDICTION OF THE MINIMAL ERYTHEMALDOSE(MED)WITHOUT UV EXPOSURE测定，将该文献以引用的方式并入本文，并且其在下文中进一步描述)的皮肤，发暗和/或萎黄的皮肤，包括UV暗化的皮肤，具有不均匀肤色的皮肤，或具有一处或多处色素斑痕和/或病损(包括但不限于色斑、黑色素斑、老年斑、日晒斑、衰老性着色班、雀斑(freckles)、单纯性雀斑痣、色素性日光性角化病、脂溢性角化病、黑斑病、痤疮斑痕、发炎后色素沉着过度、着色斑、雀斑(ephelides)、它们中两种或更多种的组合等等)的皮肤。在COLIPA指南中，皮肤颜色根据ITA值定义为：非常浅色的皮肤＞55；浅色皮肤41-55，中等色皮肤28-41，棕褐色皮肤＜28。在某些优选的实施例中，“需要进行皮肤增亮的皮肤”指皮肤的ITA值低于41，例如约40或更低，约35或更低，约30或更低，或更优选约28或更低的个体。在某些优选的实施例中，本发明涉及用于选自萎黄和/或暗化皮肤的需要进行皮肤增亮处理的皮肤上的组合物和方法。在某些其他优选的实施例中，本发明涉及用于需要进行选自老年斑、雀斑、痤疮后留下的斑痕以及它们中两种或更多种的组合的皮肤增亮处理的组合物和方法。
如本文所用，“改善肤色”意指增亮皮肤外观(如，增亮色素沉着标记或病灶、减轻皮肤灰黄、和/或均匀皮肤的颜色)。
如本文所用，“化妆品”指能保持、恢复、赋予、刺激或增强体美外观或者似乎能增进美貌或年轻的美容物质或制品，特别是涉及组织或皮肤的外观时。
如本文所用，“美容上有效量”意指足以处理一种或多种皮肤老化迹象、但低至足以避免严重副作用的生理活性化合物或组合物的量。化合物或组合物的美容上有效量将随以下因素而改变：所治疗的具体病症、使用者的年龄和身体状况、所治疗/预防的病症的严重程度、治疗的持续时间、其他治疗的性质、所采用的具体化合物或产品/组合物、所具体采用的美容上可接受的载体等等。
据信，本领域的技术人员可根据本文的描述最大限度地利用本发明。以下具体实施例应被解释为仅仅是说明性的，而不以任何方式限制本公开内容的其余部分。
如本文所用，珍珠草包括珠子草和叶下珠二者。
可采集珍珠草并以全植株使用，或可任选使用植株的一个或多个部分(如植株的花、种子、根、根状茎、茎、果实和/或叶)。可将珍珠草植株或其部分细分(例如通过研磨或碾磨)成粉末。珍珠草的合适碾磨形式可从Raintree Nutrition，Inc.(Carson City，Nevada)商购获得。
根据本发明的方法的第一步骤，将珍珠草(任选地按上文所述来制备)与包含水的溶剂接触足以形成珍珠草的水提取物的时间段。所述溶剂包含水、优选至少约50％的水、更优选至少约75％的水、并且最优选至少约90％的水。
在一个实施例中，所述溶剂包含低于约10％的有机溶剂(如，乙醇、甲醇等等)。在一个优选的实施例中，所述溶剂包含低于约5％的有机溶剂。在另一个优选的实施例中，所述溶剂包含低于约1％的有机溶剂。在另一个优选的实施例中，所述溶剂不包含有机溶剂。如果所述溶剂中包含有机溶剂，则可需要在60至100℃的温度范围内回流所得液相以去除有机溶剂。
因此，在本发明的某些实施例中，珍珠草的水提取物中的分子物质为水可提取的。如本文所用，“水可提取的”意指能够通过接触包含至少约50％的水、更优选至少约75％的水、并且最优选至少约90％的水的溶剂来进行提取。
珍珠草与溶剂的质量比可为变化的。在一个实施例中，珍珠草与溶剂的质量比为约1∶2至约1∶50、优选约1∶3至约1∶20、甚至更优选约1∶4至约1∶12。
为了增强提取，珍珠草可在溶剂中进行超声处理。作为另外一种选择或除此之外，可将溶剂加热到(例如)约30℃至约70℃、优选约40℃至约65℃、更优选约40℃至约65℃的温度。
优选将珍珠草与溶剂接触至少约5分钟、优选约10分钟至约6小时、更优选约10分钟至约60分钟、最优选约30分钟的时间段。
通过使用常规过滤技术(例如，通过使用Whatman滤纸的布氏漏斗)的过滤法来有利地分离水提取物。珍珠草的所得水提取物随后可用于按下述方式进行其他处理。
根据本发明的方法的第二步骤，随后分离珍珠草的水提取物的低分子量级分。用于分离低分子量级分的合适方式为通过采用如下膜的凝胶过滤法(即，凝胶渗透色谱法(GPC))，所述膜将选择性地仅通过高于或低于特定分子量筛截的那些分子物质。
如本领域的技术人员所熟知的那样，首先利用非离子型交联聚合物树脂来填充GPC柱。(例如)利用下述液体顺次地充分洗涤树脂：1升水、1升水-甲醇和1升甲醇，随后用水调理。利用Spectrum MiniKros使珍珠草的水提取物穿过(例如)100kD(100,000道尔顿)的膜以浓集和分离分子量小于100,000道尔顿的分子。穿过膜的部分被分离为珍珠草的低分子量级分。可任选且优选地丢弃水提取物的剩余部分。
这样，制备出基本上由珍珠草的低分子量级分组成的组合物，所述珍珠草的低分子量级分基本上不含分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。如本文所用，“基本上不含分子量大于约100,000道尔顿的分子物质”意指这种组合物含有低于约10重量％、优选低于约5重量％、更优选低于约2重量％、甚至更优选低于约1重量％、甚至更优选低于约0.5重量％、并且甚至更优选低于约0.1重量％的分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。本领域技术人员将易于理解的是，可通过(例如)调整GPC的膜所允许穿过的筛截分子量来调整珍珠草的低分子量级分中的分子量大于约100,000道尔顿的分子物质的浓度。
可或不可干燥或蒸发溶剂(如，水)。应该指出的是，具有本文所述的特定分子量范围的分子物质的百分比是不计任何残余溶剂来计算的。在一个优选的实施例中，本发明的方法还包括(例如)通过冷冻干燥法来至少部分地(或完全地)除去低分子量级分中的剩余溶剂。
局部用制剂
可将基本上由珍珠草的低分子量级分组成的组合物与一种或多种美容上可接受的局部用载体进行混合以形成用于皮肤上的局部用制剂。
如本文所用，“美容上可接受的”意指适合用于与(人)组织(例如皮肤)接触而无不适当的毒性、不相容性、不稳定性、刺激性、过敏反应等，与合理的效益/风险比相称。
合适的局部用载体包括但不限于水、乙醇、异丙醇、1，2-丙二醇、丙三醇、苄醇、二甲基异山梨醇、甘油三乙酸酯、乙二醇醚、丙二醇、聚乙二醇(PEG)、以及它们的组合。特别优选的载体包括平均分子量在约200至约400之间的PEG、蓖麻油、甘油三乙酸酯、二甲基异山梨醇、乙醇和水以及它们的组合。
可将各种化合物添加到局部用制剂中，以将同渗容摩和/或pH改变至可接受的水平。这些化合物包括但不限于甘露糖醇、蔗糖、氯化钙、氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氢氧化钠和盐酸。
可将局部用制剂制备成多种美容制品，所述美容制品包括但不限于洗剂、霜剂、凝胶、棒(stick)、喷剂、膏剂、清洁液体洗剂和固体棒、洗发剂和护发剂、糊剂、泡沫、粉末、摩丝、剃须霜、擦拭物、带(strip)、片(patch)、电动片、伤口敷料和胶粘绷带、水凝胶、成膜产品、面部和皮肤面膜、化妆品(如粉底、眼线膏和眼影膏)等等。
这些产品类型可含有若干类型的美容上可接受的局部用载体，包括但不限于溶液、悬浮液、乳状液(如微乳液和纳米乳液)、凝胶、固体和脂质体。其他的载体可由本领域普通技术人员配制。为了促进合适载体的配制，可包含多种功能成分中的任何一种。例如，可包含多种以下载体中的任何一种：柔润剂、保湿剂、pH调节剂、螯合剂、乳化剂、湿润剂、增稠剂、聚合物、防腐剂、着色剂、香料和其他常用于个人护理和美容产品中的成分。所选的pH并不关键，而是可在一个范围内，例如约4至约8，如约5至约7。
美容上可接受的局部用载体可占局部用制剂的约50重量％至约99.99重量％、更优选占局部用制剂的约80重量％至约95重量％。在一个特别优选的实施例中，局部用制剂包含至少约25重量％的水、更优选至少约50重量％的水。
在一个实施例中，局部用制剂除了上述组分外，还可含有一种或多种附加美容活性剂。所谓“美容活性剂”是对组织具有美容或治疗作用的化合物，其可为合成的化合物，或者为从天然来源提取、分离、纯化或浓缩的化合物，或者为含有化合物的混合物的天然提取物，包括但不限于：抗微生物剂(例如抗酵母剂、抗真菌剂和抗细菌剂)、抗炎剂、抗老化剂、脱色剂、抗寄生虫剂、抗氧化剂、角质层分离剂、营养物、维生素、矿物质、能量增强剂、防晒剂等等。
可作为本发明组合物的组分的维生素的实例包括但不限于维生素A，维生素B类如维生素B3、维生素B5、维生素B7和维生素B12，维生素C，维生素K，维生素E如α，γ或δ-生育酚，以及它们的衍生物(如盐和酯)和混合物。
可用于本发明组合物和方法的抗氧化剂的实例包括但不限于：水溶性抗氧化剂如巯基化合物和它们的衍生物(例如焦亚硫酸钠和N-乙酰-半胱氨酸)、硫辛酸和二氢硫辛酸、白藜芦醇、乳铁蛋白以及抗坏血酸和抗坏血酸衍生物(例如抗坏血酸棕榈酸酯和抗坏血酸多肽)。适用于本发明组合物的油溶性抗氧化剂包括但不限于：丁基化羟基甲苯、类视色素(例如视黄醇和视黄基棕榈酸酯)、不同类型的生育酚(例如α、γ和δ-生育酚以及它们的酯(如乙酸酯))和它们的混合物、生育三烯酚和泛醌。含有适用于本发明组合物的抗氧化剂的天然提取物包括但不限于：含有类黄素、异类黄素和它们的衍生物如染料木黄酮(genistein)和大豆黄素(diadzein)的提取物(例如大豆和丁香提取物)、含有白藜芦醇的提取物等。一种或多种附加美容活性剂可以任何合适的浓度存在，例如，约0.1重量％至约10重量％。
可使用的抗老化剂的实例包括但不限于类视色素(如，视黄醇和视黄基棕榈酸酯)和具有下文所示的式I或式II的胺化合物：
Figure BPA00001531244500092
其中R1、R2、R3、R4和R5独立地选自氢、C1-C6烷基和C1-C6羟烷基；或者它们的美容上可接受的盐。
具有式I的优选胺化合物的实例包括但不限于N，N，N′，N′-四(2-羟丙基)乙二胺(THPED)、N，N，N′，N′-四(2-羟乙基)乙二胺(THEED)、和N，N，N′，N′-四甲基乙二胺(TEMED)、它们的对映体、它们的非对映异构体、以及它们的美容上可接受的盐。
抗老化活性剂的其他实例包括：含铜肽；维生素(例如维生素E、维生素C、维生素B、以及它们的衍生物(例如维生素E乙酸酯、维生素C棕榈酸酯等等))；抗氧化剂(包括β胡萝卜素)；α羟基酸(例如乙醇酸、柠檬酸、乳酸、苹果酸、扁桃酸、抗坏血酸、α-羟基丁酸、丙酮酸)；β羟基酸(例如β-羟基丁酸、β-苯基乳酸、β-苯基丙酮酸)；多酚；植物提取物(例如绿茶、大豆产品、奶蓟、藻、芦荟、当归、苦橙、咖啡、黄连、葡萄柚、hoellen、忍冬、薏苡仁、紫草、桑树、牡丹花、葛藤、nice、红花、以及它们的混合物)。
合适脱色素剂的实例包括但不限于大豆产品；类视色素(例如视黄醇)；曲酸及其衍生物(例如曲酸二棕榈酸酯)；对苯二酚及其衍生物(例如熊果苷)；氨甲环酸；维生素(例如烟酸、维生素C及其衍生物)；壬二酸；placertia；甘草；提取物(例如春黄菊和绿茶)及其与作为尤其合适的实例的类视色素、曲酸、大豆产品和对苯二酚的混合物。
在一个实施例中，局部用制剂包含一种或多种附加亮肤剂。附加亮肤剂的实例包括苯乙基间苯二酚、4-己基间苯二酚、α-熊果苷、曲酸、nivitol、抗坏血酸-2-葡糖苷、大豆提取物、烟酰胺、以及它们中两种或更多种的组合。
防晒剂的实例包括UV-A和UV-B吸收型防晒剂。UV-A吸收型防晒剂包括四羟基二苯甲酮；二羧基二羟基二苯甲酮及其烷酯或酰卤衍生物；二羟基-、二羧基-和羟基羧基二苯甲酰基甲烷以及它们的烷酯或酰卤衍生物；二羟基-、二羧基-和羟基羧基芪以及它们的烷酯或酰卤衍生物；双(羟基苯乙烯基)苯；双(羧基苯乙烯基)苯以及它们的烷酯或酰卤衍生物；二羟基-、二羧基-和羟基羧基胡萝卜素以及它们的烷酯或酰卤衍生物；2-氰基-3，3-二苯基丙烯酸、2-乙基己基酯；以及能够在能吸收320-400nm范围内的紫外线光的聚合物链内共聚的任何适宜官能化的物质。
在一个实施例中，防晒剂为UV吸收型三唑和/或UV吸收型苯甲酰基甲烷(例如亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基苯酚(TINSORB M，CibaSpecialty Chemicals Corporation，Greensboro，North Carolina，USA))。其他的UV吸收型二苯甲酰基甲烷包括以UVINUL A Plus得自BASF(Parsippany，NJ)的2-(4-二乙基氨基-2羟基苯甲酰基)-苯甲酸己酯。
UV吸收型二苯甲酰基甲烷公开于美国专利No.4,489,057中并且包括但不限于4-(1，1-二甲基乙基)-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷(阿伏苯宗并且以PARSOL 1789出售，Roche Vitamins and Fine Chemicals，Nutley，New Jersey，USA)、2-2-甲基二苯甲酰基甲烷、4-甲基-二苯甲酰基甲烷、4-异丙基二苯甲酰基甲烷、4-叔-丁基二苯甲酰基甲烷、4-叔-丁基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷、2，4-二甲基苯甲酰基甲烷、2，5-二甲基苯甲酰基甲烷、4，4’-二异丙基苯甲酰基甲烷、2-甲基-5-异丙基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷、2-甲基-5-叔-丁基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷、2，4-二甲基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷和2，6-二甲基-4-叔-丁基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷。
合适的UV-B吸收型防晒剂的实例包括4-氨基苯甲酸及其烷酯；邻氨基苯甲酸及其烷酯；水杨酸及其烷酯；羟基肉桂酸及其烷酯；二羟基-、二羧基-和羟基羧基二苯甲酮以及它们的烷酯或酰卤衍生物；二羟基-、二羧基-和羟基羧基查耳酮以及它们的烷酯或酰卤衍生物；二羟基-、二羧基-和羟基羧基香豆素以及它们的烷酯或酰卤衍生物；以及能够在聚合物链内共聚的其他适宜官能化的物质。
特别合适的UV-B吸收部分包括UV吸收型二苯甲酮和UV吸收型二苯基氰基丙烯酸酯衍生物。二苯甲酮衍生物的实例包括本领域已知的为皮肤提供保护以防UV辐射的那些，例如美国专利No.5,776,439所教导的那些。优选的化合物包括2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮(羟甲氧二苯酮)和2-2′-二羟基-4-甲氧基二苯甲酮(“二羟苯宗”)和二乙胺羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯(“羟基二苯甲酮”)。二苯基氰基丙烯酸酯衍生物的实例包括2-乙基己基2-氰基-3，3-二苯基-2-丙烯酸酯(氰双苯丙烯酸辛酯)。
尽管防晒剂可为“有机防晒剂”(也称为UV滤光器)，例如上文所述的吸收UV辐射的那些，但在某些实施例中，制剂也可包含“物理”防晒剂(散射UV辐射的大致水不溶性粒状化合物)。此类物理防晒剂的实例包括氧化锌和氧化钛。
在一个实施例中，局部用制剂包含下述防晒剂，所述防晒剂选自苯基苯并咪唑磺酸、亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基苯酚、乙基己基水杨酸酯、氰双苯丙烯酸辛酯、二苯甲酮-3，乙基己基三嗪酮、阿伏苯宗、胡莫柳酯、双-乙基己基氧基苯酚甲氧基苯基三嗪以及它们的混合物。
在一个实施例中，局部用制剂包含一种或多种附加抗炎剂。合适的抗炎剂的实例包括取代的间苯二酚、(E)-3-(4-甲基苯基磺酰基)-2-丙烯腈(如“Bay 11-7082”，可从Sigma-Aldrich(St.Louis，Missouri)商购获得)、四氢姜黄素(如四氢姜黄素CG，可得自Sabinsa Corporation(Piscataway，NJ))、毛泡桐木的提取物以及源自下述物质的提取物和材料：
黄柏外皮提取物(PCE)
非变性大豆(黄豆)
甘菊(小白菊)
姜(生姜)
银杏(银杏属)
羟基积雪草苷(积雪草提取物成分)
黄栌(黄栌属)
蜂斗菜提取物(蜂斗菜)
枸杞子(枸杞)
奶蓟提取物(水飞蓟属)
忍冬(忍冬属)
秘鲁香胶(秘鲁香树)
鼠尾草(药用鼠尾草)
越橘提取物(越橘)
苋菜油(繁穗苋)
石榴(石榴科)
巴拉圭茶(巴拉圭茶叶提取物)
百合花提取物(百合)
橄榄叶提取物(橄榄)
根皮素(苹果提取物)
燕麦粉(燕麦)
啤酒花(蛇麻草：啤酒花)提取物
芒柄花P(刺芒柄花)
甘草查耳酮(甘草：胀果甘草提取物成分)
馨敏舒(红没药醇和姜提取物)
以及它们中两种或更多种的组合等等。
间苯二酚是具有如下结构的二羟基酚化合物(即1，3二羟基苯)：
Figure BPA00001531244500131
如本文所用，“取代的间苯二酚”意指在2、4、5或6位中具有至少一个取代基间苯二酚。因而，取代的间苯二酚可具有少至一个且多至四个的取代基。取代的间苯二酚的位置1和3具有-OH羟基，如上所示。
在其中将取代的间苯二酚用于抗炎的实施例中，高度优选的是，取代的间苯二酚的所有取代基均不含苯基(-C6H5芳族)部分。在某些实施例中，所有取代基均不含(具有或不具有杂原子的)芳族部分。在某些此类实施例中，优选的是取代的间苯二酚的所有取代基均不含酮官能团(与另外两个碳原子键合的羰基)。在某些其他此类实施例中，取代的间苯二酚的所有取代基既不含苯基官能团也不含酮官能团。在某些其他此类实施例中，取代的间苯二酚包括至少一个具有5至11个碳原子、优选5至10个碳原子、更优选5至9个碳原子、最优选5至8个碳原子的取代基。在某些其他此类实施例中，至少一个取代基包含烷基，例如具有上述碳原子数目的烷基。该烷基优选是不饱和的。
在某些实施例中，间苯二酚的4位被取代，在某些实施例中，仅4位被取代。在另一个实施例中，4位被烷基取代。在某些优选的实施例中，取代的间苯二酚包含单个4位取代基，该取代基包含烷基。在某些其他的优选实施例中，取代的间苯二酚包含单个4位取代基，该取代基由与苯环直接键合的烷基组成。
用于抗炎剂的特别合适的取代的间苯二酚包括4-己基间苯二酚和4-辛基间苯二酚，尤其是4-己基间苯二酚。4-己基间苯二酚和4-辛基间苯二酚的结构在下面示出：
Figure BPA00001531244500141
Figure BPA00001531244500142
4-己基间苯二酚可以“SYNOVEA HR”从Sytheon(Lincoln Park，NJ)商购获得。4-辛基间苯二酚可从City Chemical LLC(West Haven，Connecticut)商购获得。
在某些实施例中，取代的间苯二酚在2、4、5或6位具有至少两个取代基。这种取代基可任选连接而形成环，例如任选包含杂原子例如硫或氧的环状脂族烃。例如连接的取代基可包含5至10碳原子，如8至10碳原子，并任选包括1至3杂原子。具有连接2位和3位的环状脂族取代基的合适取代的间苯二酚的例子包括玉米赤霉酮和β-玉米赤霉醇：
Figure BPA00001531244500143
Figure BPA00001531244500144
玉米赤霉酮和β-玉米赤霉醇可从Sigma Chemicals(St.Louis，Missouri)商购获得。
在某些其他实施例中，取代的间苯二酚具有含卤和/或含亚硝基的取代基。合适的例子含有与苯环直接键合的-Cl或-N＝O。这些取代基可存在于(例如)2和4位、2和6位或4和6位上。二卤取代的间苯二酚的例子为2，6-二氯间苯二酚。二亚硝基取代的间苯二酚的例子为A2，4-二亚硝基间苯二酚：
Figure BPA00001531244500151
2，6-二氯间苯二酚和2，4-二亚硝基间苯二酚可得自City Chemical LLC(West Haven，Connecticut)。
取代的间苯二酚可通过本领域已知的方法制备，例如使用美国专利No.4,337,370中描述的技术制备，将该专利的内容以引用的方式并入本文。
取代的间苯二酚可具有任何合适的分子量。在某些实施例中，取代的间苯二酚的分子量在约175至约300之间的范围内。
“甘菊的提取物”意指(例如)可根据名称为“PARTHENOLIDEFREE BIOACTIVE INGREDIENTS FROM FEVERFEW(TANACETUMPARTHENIUM)AND PROCES SES FOR THEIR PRODUCTION”(得自甘菊(小白菊)的不含小白菊内酯的生物活性成分及其制备方法)的美国专利申请公开No.2007/0196523中设置的细节制备的植株“小白菊”的提取物。一种尤其合适的甘菊提取物可以约20％的活性甘菊从IntegratedBotanical Technologies(Ossining，NY)商购获得。
泡桐属(Paulownia)是亚洲原产的一个植物属，其已逐渐传播至欧洲和美国。在日本，泡桐称为日本泡桐，其专指一个物种：毛泡桐(也称为“公主树”)。通常使用的其他名字为“皇后树”、“毛地黄树”、“皇家树”、“泡桐”(中国)、和“Odong-Namoo”(韩国)。学名为“毛泡桐”，其具有报告于各种文献中的多个同义词，即“锈毛泡桐”、“兴山桐”和“毛泡桐”。毛泡桐属于“泡桐”科(有时称为“玄参科”)。美国农业部(plants.USDA.gov)植物数据库通过独特符号“PATO2”来鉴别公主树以及具有同义名的毛泡桐和锈毛泡桐。
可使用任何合适的毛泡桐木的提取物。一般而言，毛泡桐树的木材包括来自树杆、树枝或这二者的组合的木材。毛泡桐木的合适提取物可源于木屑、木粉和/或小切屑等等。
本发明的组合物可包含美容有效量的一种或多种附加抗炎化合物。该组合物优选包含基于活性物质计的约0.1％至约10％、更优选约0.5％至约5％的附加抗炎化合物。
珍珠草的低分子量级分、美容上可接受的局部用载体和任选的附加美容活性剂可以任何比例进行混合以形成适于局部使用的局部用制剂。在本发明的一个实施例中，局部用制剂包含至少约0.0001重量％(例如至少约0.1重量％)的珍珠草的低分子量级分。在某些实施例中，局部用制剂包含至少约0.5重量％、约0.75重量％至约2.0重量％或者至多且包括5.0重量％的珍珠草的低分子量级分。
对于包括所述组合物或制剂的亮肤用途的实施例而言，“亮肤有效量”意指在作为亮肤测试(ΔL)的皮肤表皮等同物模型中有效达到高于零的ΔL值的提取物的量，如在下文的实例IX中所述。在某些优选的实施例中，亮肤有效量为有效达到约1或更高的ΔL的量。
对于本发明中涉及使用组合物来减轻发炎的实施例而言，“用于减轻发炎的有效量”意指提供高于零(对于下文实例VI的IL-8)的皮肤发炎(IL-8)抑制百分比的量，所述皮肤发炎(IL-8)抑制百分比是根据对UV引起的促炎介质在再生表皮过程中的释放的抗炎效果测得的。在某些优选的实施例中，用于改善老化迹象的有效量为提供约10％或更高(对于下文实例VI的IL-8)的皮肤发炎(IL-8)抑制百分比的量，所述皮肤发炎(IL-8)抑制百分比是根据对UV引起的促炎介质在再生表皮过程中的释放的抗炎效果测得的。
可将包含基本上由珍珠草的低分子量级分组成的组合物的局部用制剂局部施用至需要处理一种或多种上述皮肤老化迹象的哺乳动物皮肤。在一个实施例中，将局部用制剂施用至需要处理细纹和皱纹和/或弹性损失的皮肤。在另一个实施例中，将局部用制剂施用至需要减轻皮肤发炎的皮肤。在另一个实施例中，局部用制剂用于处理皮肤中的外部侵害(如，用于日光照射之后)。在另一个实施例中，局部用制剂用于增亮需要亮肤的皮肤。可将局部用制剂根据合适的处理方案(如，每月、每周、每隔一天、每天、一天两次等)施用到需要此类处理的皮肤。
在某些实施例中，本发明的局部用制剂还可用于处理与皮肤相关的其他需求状态。例如，局部用制剂可用于处理发炎后脱色素/色素沉着过度、用于减小毛孔孔径、粉刺处理和用于减轻疤痕。在某些其他实施例中，可将局部用制剂与机械或物理表皮剥脱处理(例如微晶磨皮处理)同时施用或在该处理的数小时内施用、或与化学剥脱剂或角质层分离剂(例如水杨酸)同时施用。在某些其他实施例中，将局部用制剂施用至粘膜或其它组织，例如阴道组织、口腔组织或眼组织。在某些其他实施例中，将局部用制剂施用至轻度伤口或术后部位以促进愈合、施用至昆虫叮咬处、施用至毒藤或类似皮肤病症、或通常用于减轻发痒。在某些其他实施例中，施用局部用制剂以减轻皮肤刺激。这些刺激可具有外部起源，即，由护肤和美容产品中的成分(例如类视色素及其衍生物、过氧苯甲酰、α-羟基酸及其衍生物、水杨酸、表面活性剂、天然植物提取物、防晒活性剂、脲以及防腐剂等)导致。这些刺激可具有其他外部起源，例如太阳、风或剃须。刺激也可由疾病和病症引起，例如痤疮、红斑痤疮、特应性皮炎以及其他疾病状态。
据信，本领域的技术人员可根据本文的描述最大限度地利用本发明。以下具体实施例应被解释为仅仅是说明性的，而不以任何方式限制本公开内容的其余部分。以下非限制性实例进一步说明了本发明。
实例I
制备珍珠草的四种不同的溶剂提取物。在甲醇、己烷、乙酸乙酯和水的每一个中通过在60℃下超声处理30分钟来单独地提取珍珠草(RaintreeNutrition，Inc)。未对溶剂提取物进行分子量分馏，通过过滤法(通过使用Whatman滤纸的布氏漏斗)获取所述溶剂提取物中的每一种。通过冷冻干燥法蒸发挥发物。
实例II
利用EnzChek胶原酶检测分析法针对胶原酶抑制来评价实例I的珍珠草的溶剂提取物的酶活性。在微板读数器中荧光测定各种溶剂提取物用以抑制胶原酶IV型酶活性的能力，所述胶原酶IV型酶得自从猪皮肤(基底)获取的DQ弹性蛋白上的溶组织梭状芽胞杆菌。IC50值示于下表1中。
表1
  提取物   胶原酶的IC50值
  珍珠草的甲醇提取物   ＞500ug/ml
  珍珠草的己烷提取物   223.1ug/ml
  珍珠草的乙酸乙酯提取物   334.6ug/ml
  珍珠草的水提取物   27.6ug/ml
珍珠草的水提取物与甲醇、己烷或乙酸乙酯提取物相比提供显著较高的胶原酶抑制。
实例III
利用320mL水通过在60℃下超声处理30分钟来提取51.2g珍珠草(Raintree Nutrition，Inc.(Carson City，NV))。通过过滤法(通过使用Whatman滤纸的布氏漏斗)除去液相。
利用60克XAD-4树脂(非离子型交联聚合物树脂)来填充凝胶分馏柱。在装料之前顺次地利用水(1升体积)、水-甲醇(50∶50，1升)、甲醇(1升)来充分洗涤树脂并用水进行调理。利用Spectrum MiniKros(Spectrum Laboratories，Inc.(Rancho Dominguez，CA))使上述制备的水提取物穿过100kD的膜以浓集和分离小分子，从而产生水提取物的低分子量级分。
珍珠草的对比水提取物未进行分馏(即，其包含低分子量物质和高分子量物质二者)。
通过冷冻干燥法蒸发挥发物。
针对胶原酶活性来评价两种水提取物的酶活性。IC50值示于下表2中。
表2
  提取物   胶原酶的IC50值
  珍珠草水提取物   27.6ug/ml
  珍珠草水提取物的低分子量级分   7.8ug/ml
这些结果表明，珍珠草水提取物的低分子量级分与包含高分子量物质和低分子量物质二者的珍珠草水提取物相比提供显著较高、即高不止三倍的胶原酶抑制。
实例IV
利用320mL水通过在60℃下超声处理30分钟来提取51.2g珍珠草(Raintree Nutrition，Inc.(Carson City，NV))。通过过滤法(通过使用Whatman滤纸的布氏漏斗)除去液相。
利用60克XAD-4树脂(非离子型交联聚合物树脂)来填充凝胶分馏柱。在装料之前顺次地利用水(1升体积)、水-甲醇(50∶50，1升)、甲醇(1升)来充分洗涤树脂并用水进行调理。利用Spectrum MiniKros(Spectrum Laboratories，Inc.(Rancho Dominguez，CA))使上述制备的水提取物穿过100kD的膜以浓集和分离小分子，从而产生6.4g低分子量级分和2.8g高分子量级分。
对于珍珠草的水提取物的不同样品(即，按上述方式制备的高分子量级分和低分子量级分、以及含有未经受分馏的所有分子量物质的水提取物)执行原弹性蛋白启动子检测分析法。
具体地讲，从ATCC(Manassas，VA.)购买大鼠心肌成肌细胞H9C2细胞。将培养物维持在补充有10％胎牛血清、100单位/ml青霉素和50ug/ml链霉素(Invitrogen life technologies(Carlsbad，CA))的达尔伯克氏改良伊格尔培养基(得自Invitrogen Life Technologies(Carlsbad，CA)的DMEM)中。
用驱动萤火虫荧光素酶基因的弹性蛋白启动子-荧光素酶报告基因构建体(Elp2.2-从nt-2267至nt+2的2.2kb弹性蛋白启动子片段)(其得自Promega(Madison，Wisconsin))瞬时转染细胞培养物。在所有的转染中，包括了具有胸苷激酶启动子和海肾荧光素酶报告基因的构建体(pRL-TK，Promega(Madison，Wisconsin))作为内部对照。
使用Lipofectamine 2000(Invitrogen life technologies(Carlsbad，CA))，用0.45ug总DNA/孔转染在48孔板中培养的细胞。转染一天之后，将细胞利用多种浓度的珍珠草的水提取物(全级分、高分子量级分或低分子量级分)处理大约24小时，然后按照制造商的方案将细胞利用购自Promega(Madison，Wis.)的Dual-Luciferase Reporter系统进行溶解以用于荧光素酶检测分析。使用购自Molecular Devices(Sunnyvale，CA)的发光计LMAX，首先测量萤火虫荧光素酶活性(代表弹性蛋白启动子活性)，然后测量海肾荧光素酶(内部对照)。将这两种荧光素酶活性(RLU)的比值用于评价各个样品的活性。
在进行原弹性蛋白启动子检测分析法之前，将每种水提取物以1.0mg/mL的原料浓度溶解于DMSO-水(50∶50)中，并且从该原料稀释到含有2％血清的组织培养基内。
结果示于下表3中。
表3
Figure BPA00001531244500201
*＝P＜0.05(使用Student’s t检验)**＝P＜0.1(使用Student’s t检验)
珍珠草水提取物的低分子量级分与含有高分子量物质和低分子量物质二者的珍珠草水提取物相比导致原弹性蛋白启动显著增加。低分子量级分的原弹性蛋白启动(2.35)比含有所有分子量物质的水提取物的原弹性蛋白启动(1.85)高27％。
实例V
按如下方式对于实例III中所述的珍珠草的水提取物的样品(即，高分子量级分、低分子量级分以及含有全范围分子量物质的水提取物)执行胶原启动子检测分析法。
从ATCC(Manassas，VA.)购买大鼠心肌成肌细胞H9C2细胞。将培养物维持在补充有10％胎牛血清、100单位/ml青霉素和50ug/ml链霉素(Invitrogen life technologies(Carlsbad，CA))的达尔伯克氏改良伊格尔培养基(得自Invitrogen Life Technologies(Carlsbad，CA)的DMEM)中。
用驱动萤火虫荧光素酶基因的CollagenlA启动子-荧光素酶报告基因构建体(其得自PREMAS Biotech Pvt.Ltd(Haryana，India))瞬时转染细胞培养物。在所有的转染中，包括了具有胸苷激酶启动子和海肾荧光素酶报告基因的构建体(pRL-TK，Promega(Madison，Wisconsin))作为内部对照。
使用Lipofectamine 2000(Invitrogen life technologies(Carlsbad，CA))，用0.45ug总DNA/孔转染在48孔板中培养的细胞。转染一天之后，将细胞利用多种浓度的珍珠草(全级分、或者高或低分子量级分)处理大约24小时，然后按照制造商的方案将细胞利用购自Promega(Madison，Wis.)的Dual-Luciferase Reporter系统进行溶解以用于荧光素酶检测分析。使用购自Molecular Devices(Sunnyvale，CA)的发光计LMAX，首先测量萤火虫荧光素酶活性(代表胶原启动子活性)，然后测量海肾荧光素酶(内部对照)。将这两种荧光素酶活性(RLU)的比值用于评价每种启动子的活性。
在进行胶原启动子检测分析法之前，将每种水提取物以1.0mg/mL的原料浓度溶解于DMSO-水(50∶50)中，并且从该原料稀释到含有2％血清的组织培养基内。
结果示于下表4中。
表4
Figure BPA00001531244500211
*＝P＜0.05(使用Student’s t检验)**＝P＜0.1(使用Student’s t检验)
珍珠草水提取物的低分子量级分与含有全范围分子量的珍珠草水提取物相比导致胶原启动显著增加。具体地讲，低分子量级分提供的胶原启动(2.03)比含有高分子量物质和低分子量物质二者的水提取物提供的胶原启动(1.51)高34％。
此外，该数据显示，高分子量级分实际上抑制低分子量级分的功效。低分子量级分占总珍珠草水提取物的大约69.6重量％(6.4g)。高分子量级分占总珍珠草水提取物的大约30.4％重量％(2.8g)。因此，全部水提取物的预期胶原启动将为(.696×2.03)+(.304×1.55)或1.88。然而，未分馏水提取物提供的实际胶原启动为1.51，这比预期值低大约20％。这种偏差表明，高分子量级分抑制低分子量级分的功效。
实例VI
针对人表皮等同物上的局部抗炎活性来评价珍珠草的低分子量(LMW)级分的效果。表皮等同物(EPI 200 HCF)，包含正常人表皮角质细胞的多层分化表皮购自MatTek(Ashland，MA)。收到以后，表皮等同物在无氢化可的松的维持培养基中在37℃下温育24小时。在暴露于日光紫外线灯(配有1-mm Schott WG 320滤光器的1000W-Oriel日光仿真器；施用的UV剂量：在360nm下测定为70kJ/m2)之前，将等同物利用溶于培养基中的珍珠草的低分子量(LMW)级分进行局部处理(2mg/cm2)。将等同物在37℃下使用维持培养基温育24小时，然后使用市售套件(Millipore Corp.(Billerica，MA))对上清液分析IL-8和IL-1α细胞因子释放。IL-8释放和皮肤发炎抑制百分比示于下表5中。相似地，IL-1的结果示于下表6中。
表5
表6
Figure BPA00001531244500232
基于这些结果可得出结论，施用本发明的珍珠草提取物能够显著降低UV刺激的炎性介质的释放。因此，珍珠草提取物在施用至皮肤时有望取得有效的抗炎效果。
实例VII
利用Martin等人的方法(Arch Dermatol Res.(2008)300：69-80)的改进方法来测定再生表皮和人上皮细胞系KB中的UV引起的过氧化氢形成。表皮等同物(EPI 200 HCF)，包含正常人表皮角质细胞的多层分化表皮购自MatTek(Ashland，MA)。收到以后，表皮等同物在无氢化可的松的维持培养基中在37℃下温育24小时。24小时之后，将组织与5μM的过氧化氢敏感型荧光探针5-(和-6)-氯甲基-2′，7′-二氯二氢-荧光素二乙酯、乙酰基酯(CM-H2DCFDA)(Invitrogen Corp.(Carlsbad，CA))温育30分钟。温育之后，漂洗板以除去过量探针并且利用溶于培养基中的低分子量水溶性珍珠草提取物来局部处理(2mg/cm2)等同物。立即在设为485nm激发波长/530nm发射波长的荧光读板器上阅读所述板以检测基本过氧化物的形成。然后将所述板暴露于UV(配有1-mm Schott WG 320滤光器的1000W-Oriel日光仿真器；施用的UV剂量：在360nm下测定为4.2kJ/m2)。在UV照射之后60分钟阅读所述板。荧光和UV引起的ROS的抑制百分比示于下表7中。
表7
基于这些结果可得出结论，施用珍珠草的低分子量(LMW)级分能够显著减少再生表皮中的UV刺激的ROS产生。因此，珍珠草提取物在施用至皮肤时有望提供保护以防日光照射诱导ROS。
实例VIII
将得自ATCC(ATCC#CCL-17，Manassas，VA)的KB细胞以5000细胞/孔的密度铺板在96-孔的组织培养处理板中的补充有10％胎牛血清(Invitrogen Corp.，San Diego，CA)的达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)内。48小时之后，将细胞与5μM的过氧化氢敏感型荧光探针5-(和-6)-氯甲基-2′，7′-二氯二氢-荧光素二乙酯、乙酰基酯(CM-H2DCFDA)(Invitrogen Corp.(Carlsbad，CA))温育30分钟。温育之后，漂洗所述板以除去过量探针并且添加指定浓度的低分子量水溶性珍珠草提取物。立即在设为485nm激发波长/530nm发射波长的荧光读板器上阅读所述板以检测基本过氧化物的形成。然后将所述板暴露于UV(配有1-mm Schott WG 320滤光器的1000W-Oriel日光仿真器；施用的UV剂量：在360nm下测定为4.2kJ/m2)。在UV照射之后60分钟阅读所述板。
荧光和UV引起的ROS的抑制百分比示于下表8中。
表8
Figure BPA00001531244500251
基于这些结果可得出结论，施用珍珠草的低分子量(LMW)级分能够显著减少人上皮细胞中的UV刺激的ROS产生。因此，珍珠草提取物在施用至皮肤时有望提供保护以防日光照射诱导ROS。
实例IX
皮肤表皮等同组织可从MatTek的MelanoDermTM System商购获得并用于以下测试。MatTek的MelanoDermTM System由正常的人源性表皮角质细胞(NHEK)和黑素细胞(NHM)组成，这些细胞已经过培养形成了多层、高度分化的人表皮模型。具体地讲，在以下测试中采用了MEL-300-B组织，每个的直径均为9mm。
每天将这些采用适当载体(水)并以测试浓度制备的测试材料局部施用至皮肤模型上，实验持续8天。在第9天进行测量。
通过用数码相机拍照，测出宏观和微观视觉组织颜色变深终点。使用分光光度计(Konica Minolta CM-2600d)测出各组织的亮度(L值)。按照以下公式计算每个测试样品的ΔL(相比于对照的亮度)：
ΔL＝处理样品的L值-对照样品的L值。亮肤测试的结果示于下表9中。
表9
  提取物代码   浓度(％)  亮度值(ΔL)   标准偏差
  LMW珍珠草提取物   0.1％  -0.41   0.42
  LMW珍珠草提取物   0.5％  0.96   0.31
  LMW珍珠草提取物   1％  2.51   0.42
实例X
利用表10和表11中所示的成分来制备根据本发明的局部用制剂。
表10
按下述方式制备该局部用制剂。
水相
步骤1.在20-40℃的温度下将纯化水注入主容器中。
步骤2.将黄原胶NF添加至主容器。如果充满块状物，则可使用30目筛网。
步骤3.利用纯化水清洗主容器的壁以从所述壁除去任何黄原胶。
步骤4.将批料混合15-25分钟。检查胶的水合。
步骤5.添加甘油USP物质和依地酸二钠USP。
步骤6.将批料加热至65℃(63-67℃)同时进行混合。
油相
步骤1.将下述化学物质以如下顺序添加到清洁的合适相容器内：中链甘油三酯、蓖麻油、椰子油和预熔凡士林USP。
步骤2.将油相温度设为65℃(63-67℃)并且启动中速混合。
步骤3.当将批料加热至65℃时，以如下顺序添加下述化学物质(在添加下一种物质之前允许各种物质溶解)：硬脂酸甘油酯SE、鲸蜡醇、乳化蜡和硬脂酸甘油酯。
步骤4.当温度达到65℃(63-67℃)时，将成分混合15-25分钟。
批料、主容器的定相
步骤1.当两个相均均匀并且处于63-67℃的温度下时，将油相转移至水相同时以中速混合水相。
步骤2.当完成转移时，利用纯化水清洗油相槽。将清洗物加热至63-67℃并且添加至主容器。
步骤3.将批料混合10-20分钟。
步骤4.将批料冷却至40℃(38-42℃)。
步骤5.当温度为48-50℃时，将混合速度增加至中高速。
步骤6.添加珍珠草(1％活性物质)。
步骤7.当温度为44℃或更低时，添加双咪唑烷基脲预混物。
步骤8.添加丁基氨基甲酸碘丙酯。
步骤9.将批料混合5-10分钟。
步骤10.如果需要，批料为具有纯化水的QS’d。
步骤11.继续混合并且开始将批料冷却至32-34℃。
步骤12.当批料达到33℃(32-34℃)时，结束混合和冷却。
双咪唑烷基脲(Germall II)预混物
步骤1.将纯化物添加到不锈钢预混槽内。
步骤2.在混合下添加双咪唑烷基脲。
步骤3.将成分混合另外的10-20分钟以完全溶解。
步骤4.保持预混物以用于添加至批料。
表11
Figure BPA00001531244500281
按下述方式来制备此局部用制剂：
水相
步骤1.将水添加至主混合容器并且启动混合。
步骤2.添加EDTA BD并混合直至溶解。
步骤3.增加混合速度并且添加TR-1。将成分进行混合直至完全分散(30分钟)。
步骤4.将Eusoulex与水进行预混；将NaOH溶液添加至水相。
步骤5.继续混合并添加Amphisol K且混合20分钟。开始加热至80℃-85℃。
步骤6.将温度保持在80℃-85℃之间直至准备用于定相。
油相
步骤1.将下述物质逐一地添加到预混容器内并进行混合：
-Neo Heliopan OS
-Tegosoft TN
-Neo Heliopan 303
-Uvinul M40
-Parsol 1789
-Neo Heliopan HMS
-Corapan TQ
-Lanette C16 98-100 MY
-Arlacel 165 FL
-Sensiva SC-50
-Ionol CP
-Dow Corning 9701化妆粉
步骤2.将混合物加热至85℃-90℃同时进行持续的混合。
定相
步骤1.当两个相均为80℃-85℃之间时，将油相添加至水相且均化和均匀加工处理10分钟。
步骤2.将成分冷却至70℃-75℃，添加氢氧化钠的10％溶液并混合直至均匀。
步骤3.当温度低于75℃时，添加TinosorbM和Tinosorb S并混合10分钟。当温度低于45-50C时，添加Spheron L-1500、二甲基硅氧烷、DC 1403和芳香剂并混合直至均匀。
步骤4.将成分冷却至35℃-40℃的温度。
步骤5.添加Microcare MTB并混合直至均匀。
步骤6.添加珍珠草(1％的活性物质)并混合直至均匀。
步骤7.将成分均匀加工处理5分钟。
表10和11中所示的局部用制剂在50℃的烘箱中放置1周并显示出原始良好稳定性。

Claims (29)

1.一种组合物，基本上由珍珠草的低分子量级分组成，所述珍珠草的低分子量级分基本上不含分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
2.根据权利要求1所述的组合物，包含低于约5重量％的分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述低分子量级分为从珍珠草可水提取的。
4.一种局部用制剂，包含美容上可接受的局部用载体和基本上由珍珠草的低分子量级分组成的组合物，所述珍珠草的低分子量级分基本上不含分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
5.根据权利要求4所述的局部用制剂，还包含选自类视色素、N，N，N′，N′-四(2-羟丙基)乙二胺、N，N，N′，N′-四(2-羟乙基)乙二胺、N，N，N′，N′-四甲基乙二胺以及它们的组合的化合物。
6.根据权利要求4所述的局部用制剂，其中所述组合物包含低于约5重量％的分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
7.根据权利要求4所述的局部用制剂，其中所述低分子量级分为从珍珠草可水提取的。
8.根据权利要求4所述的局部用制剂，还包含防晒剂。
9.一种制备珍珠草的低分子量级分的方法，所述方法包括：
使珍珠草与包含水的溶剂接触足以形成珍珠草的水提取物的时间段；以及
从所述珍珠草的水提取物中分离低分子量级分。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述溶剂包含至少约50重量％的水。
11.根据权利要求9所述的方法，其中所述低分子量级分基本上不含分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
12.根据权利要求9所述的方法，其中所述低分子量级分包含低于约5重量％的分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
13.根据权利要求9所述的方法，其中所述分离步骤是通过凝胶过滤进行的。
14.根据权利要求9所述的方法，还包括除去所述低分子量级分中的剩余溶剂。
15.一种处理皮肤老化迹象的方法，所述方法包括将局部用制剂施用至需要处理皮肤老化迹象的皮肤的步骤，所述局部用制剂包含美容上可接受的局部用载体和基本上由珍珠草的低分子量级分组成的组合物，所述珍珠草的低分子量级分基本上不含分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
16.根据权利要求15所述的方法，其中所述组合物包含低于约5重量％的分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
17.根据权利要求15所述的方法，其中所述低分子量级分为从珍珠草可水提取的。
18.根据权利要求15所述的方法，其中所述局部用制剂包含约0.1重量％至约5重量％的所述组合物。
19.根据权利要求15所述的方法，其中所述局部用制剂包含选自类视色素、N，N，N′，N′-四(2-羟丙基)乙二胺、N，N，N′，N′-四(2-羟乙基)乙二胺、N，N，N′，N′-四甲基乙二胺以及它们的组合的附加抗老化剂。
20.一种增亮皮肤的方法，所述方法包括将局部用制剂施用至需要皮肤增亮处理的皮肤的步骤，所述局部用制剂包含美容上可接受的局部用载体和基本上由珍珠草的低分子量级分组成的组合物，所述珍珠草的低分子量级分基本上不含分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
21.根据权利要求20所述的方法，其中所述组合物包含低于约5重量％的分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
22.根据权利要求20所述的方法，其中所述低分子量级分为从珍珠草可水提取的。
23.根据权利要求20所述的方法，其中所述局部用制剂包含约0.1重量％至约5重量％的所述组合物。
24.根据权利要求20所述的方法，其中所述局部用制剂包含选自苯乙基间苯二酚、4-己基间苯二酚、α-熊果苷、曲酸、nivitol、抗坏血酸-2-葡糖苷、大豆提取物、烟酰胺以及它们的组合的附加亮肤剂。
25.一种减轻皮肤发炎的方法，所述方法包括将局部用制剂施用至需要减轻皮肤发炎的皮肤的步骤，所述局部用制剂包含美容上可接受的局部用载体和基本上由珍珠草的低分子量级分组成的组合物，所述珍珠草的低分子量级分基本上不含分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
26.根据权利要求25所述的方法，其中所述组合物包含低于约5重量％的分子量大于约100,000道尔顿的分子物质。
27.根据权利要求25所述的方法，其中所述低分子量级分为从珍珠草可水提取的。
28.根据权利要求25所述的方法，其中所述局部用制剂包含约0.1重量％至约5重量％的所述组合物。
29.根据权利要求25所述的方法，其中所述局部用制剂还包含选自间苯二酚、甘菊提取物以及它们的组合的附加抗炎剂。
CN2010800449701A 2009-10-02 2010-10-01 珍珠草的提取物 Pending CN102548569A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US12/572,373 2009-10-02
US12/572,373 US8916209B2 (en) 2009-10-02 2009-10-02 Extracts of Phyllanthus niruri
PCT/US2010/051089 WO2011041654A1 (en) 2009-10-02 2010-10-01 Extracts of phyllanthus niruri

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN102548569A true CN102548569A (zh) 2012-07-04

Family

ID=43598535

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2010800449701A Pending CN102548569A (zh) 2009-10-02 2010-10-01 珍珠草的提取物

Country Status (7)

Country Link
US (1) US8916209B2 (zh)
EP (1) EP2482830B1 (zh)
KR (1) KR101735350B1 (zh)
CN (1) CN102548569A (zh)
BR (1) BR112012007534A2 (zh)
CA (1) CA2774027A1 (zh)
WO (1) WO2011041654A1 (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102743313A (zh) * 2012-07-27 2012-10-24 王恩瀚 具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物及其用途
CN108029677A (zh) * 2017-12-26 2018-05-15 重庆斯德姆生物技术有限公司 一种内皮祖细胞的冻存液及冻存方法
CN108619007A (zh) * 2018-06-29 2018-10-09 广西浙缘农业科技有限公司 一种含油茶籽油面霜

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102014201541A1 (de) * 2014-01-29 2015-07-30 Beiersdorf Ag Octocrylenfreies Sonnenschutzmittel mit geringer Klebrigkeit
KR102444868B1 (ko) 2020-09-09 2022-09-19 김형길 필란두스 우리나리아 초임계 추출물을 포함하는 염증성 피부질환 예방 또는 치료용 조성물
KR102587456B1 (ko) * 2021-05-06 2023-10-12 주식회사 바이오의생명공학연구소 아니카 발효 추출물을 이용한 소염진통 조성물

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0967136A (ja) * 1995-08-25 1997-03-11 Nippon Electric Glass Co Ltd ガラス管の切断装置
CN1364085A (zh) * 1999-04-29 2002-08-14 西迈医药创新中心股份公司 利用叶下珠治疗慢性炎性和纤维化过程
US20050085454A1 (en) * 2003-10-16 2005-04-21 Natreon Inc. Phenolic antioxidant-chromium complexes for treatment or prevention of type 2 diabetes or glucose intolerance
CN101332265A (zh) * 2008-05-20 2008-12-31 上海大学 治疗皮肤顽症头皮癣、体癣的外用制剂

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2544180C2 (de) 1975-10-03 1984-02-23 Merck Patent Gmbh, 6100 Darmstadt Lichtschutzmittel für kosmetische Zwecke
US4337370A (en) 1979-11-08 1982-06-29 Sumitomo Chemical Company, Limited Process for the preparation of resorcinol derivatives
JPH0812566A (ja) 1994-06-29 1996-01-16 Shiseido Co Ltd チロシナーゼ活性阻害剤
JPH08176004A (ja) 1994-12-21 1996-07-09 Lion Corp 生体老化防止剤及び皮膚用組成物
JPH0987136A (ja) 1995-07-13 1997-03-31 Shiseido Co Ltd 皮膚外用剤
IT1286502B1 (it) 1996-11-26 1998-07-15 3V Sigma Spa Composizioni cosmetiche antisolari comprendenti derivati del dibenzoilmetano e del benzofenone
BRPI0006634B8 (pt) 1999-06-03 2021-05-25 Johnson & Johnson Consumer Fr composição tópica compreendendo extrato de matricária no tratamento e prevenção de distúrbios inflamatórios
JP4880816B2 (ja) 2000-12-15 2012-02-22 株式会社ヤクルト本社 皮膚老化防止剤
JP2002308750A (ja) * 2001-04-12 2002-10-23 Lion Corp 皮膚外用剤
JP2005008572A (ja) * 2003-06-19 2005-01-13 Yakult Honsha Co Ltd リパーゼ阻害剤
US20070166255A1 (en) 2004-11-22 2007-07-19 Gupta Shyam K Treatment of Topical Discomforts Including Acne, Sunburn, Diaper Rash, Wound, Wrinkles and Dandruff/Hair Loss by Natural Lignans via Fatty Acid Desaturase Inhibition
NZ607880A (en) 2006-02-21 2014-11-28 Akzo Nobel Surface Chemistry Llc Parthenolide free bioactive ingredients from feverfew (tanacetum parthenium) and processes for their production
US20080031833A1 (en) 2006-03-13 2008-02-07 Oblong John E Combined energy and topical composition application for regulating the condition of mammalian skin
EP1905422A1 (en) * 2006-09-28 2008-04-02 Johnson & Johnson Consumer France SAS Stabilized compositons containing retinoids and metal oxide pigments
WO2009067095A1 (en) 2007-11-19 2009-05-28 Stiefel Laboratories, Inc. Topical cosmetic skin lightening compositions and methods of use thereof
US8075931B2 (en) 2009-10-02 2011-12-13 Johnson & Johnson Consumer Companies, Inc. Extracts of Phyllanthus niruri
US8075930B2 (en) 2009-10-02 2011-12-13 Johnson & Johnson Consumer Companies, Inc. Extracts of Phyllanthus niruri

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0967136A (ja) * 1995-08-25 1997-03-11 Nippon Electric Glass Co Ltd ガラス管の切断装置
CN1364085A (zh) * 1999-04-29 2002-08-14 西迈医药创新中心股份公司 利用叶下珠治疗慢性炎性和纤维化过程
US20050085454A1 (en) * 2003-10-16 2005-04-21 Natreon Inc. Phenolic antioxidant-chromium complexes for treatment or prevention of type 2 diabetes or glucose intolerance
CN101332265A (zh) * 2008-05-20 2008-12-31 上海大学 治疗皮肤顽症头皮癣、体癣的外用制剂

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
郑秀青: "中草药叶下珠水提取物体外抗菌试验报告", 《当代畜牧》, no. 11, 15 November 2008 (2008-11-15), pages 48 - 19 *
郑秀青: "叶下珠提取物体外抗氧化和保肝作用", 《福建畜牧兽医》, vol. 30, no. 06, 20 November 2008 (2008-11-20), pages 5 - 7 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102743313A (zh) * 2012-07-27 2012-10-24 王恩瀚 具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物及其用途
CN102743313B (zh) * 2012-07-27 2013-06-05 王恩瀚 具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物及其用途
CN108029677A (zh) * 2017-12-26 2018-05-15 重庆斯德姆生物技术有限公司 一种内皮祖细胞的冻存液及冻存方法
CN108619007A (zh) * 2018-06-29 2018-10-09 广西浙缘农业科技有限公司 一种含油茶籽油面霜

Also Published As

Publication number Publication date
EP2482830A1 (en) 2012-08-08
US20110081304A1 (en) 2011-04-07
CA2774027A1 (en) 2011-04-07
KR20120083895A (ko) 2012-07-26
BR112012007534A2 (pt) 2016-12-06
EP2482830B1 (en) 2014-02-26
KR101735350B1 (ko) 2017-05-15
WO2011041654A1 (en) 2011-04-07
US8916209B2 (en) 2014-12-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101466363B (zh) Ah受体拮抗剂
CN101810552A (zh) 用于治疗皮肤老化迹象的组合物和方法
TW201206494A (en) Use of Tiliacora triandra in cosmetics and compositions thereof
CN102548569A (zh) 珍珠草的提取物
CN103180016B (zh) 包含泡桐素和/或泡桐属提取物的组合物及其用途
CN102028645A (zh) 包含nfkb抑制剂和非类视色素胶原促进剂的组合物
KR102314813B1 (ko) 피부-윤광 화장품 조성물
US8075931B2 (en) Extracts of Phyllanthus niruri
JP2008120774A (ja) 美肌用皮膚外用剤
JP2021078507A (ja) シマレンガタケを培養するための方法
CN104546523A (zh) 包含泡桐木材提取物的组合物及其用途
CN103492030B (zh) 包含榕树、莲属植物和三叶草浆液级分的组合物
CN104207972A (zh) 包含苦木裂榄木提取物的组合物
CN103491943B (zh) 包含榕树、莲属植物和三叶草浆液级分的组合物(老化)
US8075930B2 (en) Extracts of Phyllanthus niruri
KR100821482B1 (ko) 미백용 피부 외용제 조성물
JP2008088073A (ja) エンドセリン−１産生抑制剤、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制剤、抗炎症用／美白用皮膚外用剤、エンドセリン−１の産生抑制方法及びヘキソサミニダーゼの遊離抑制方法
CN104411288A (zh) 1-羟基3,5-双(4’羟基苯乙烯基)苯的局部施用
KR20140004897A (ko) 진세노사이드 Ｒｄ 및 Ｆ2를 유효성분으로 함유하는 주름개선용 화장료 조성물
AU2015275251A1 (en) Compositions comprising paulownin and/or Paulownia extracts and uses thereof
KR20020068589A (ko) 민들레 추출물을 함유하는 백발생성 억제용 모발 화장료조성물
US20140005275A1 (en) Topical application of 1-hydroxyl 3,5-bis(4'hydroxyl styryl)benzene

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1171695

Country of ref document: HK

C12 Rejection of a patent application after its publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20120704