CN102743313A - 具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物及其用途，是以珍珠草、黄花水倒莲、仙鹤草为原料制备的，且任一组分的重量百分含量均不超过总量的40%。试验证明，本发明具有增加皮肤含水量、增加胶原蛋白的合成和抗氧化等多重作用，能够用于皮肤保养的化妆品和治疗性药物；所涉及的成分具有效果明确、安全性好、无任何副作用和在化妆品配方中稳定的特点。

Description

具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物及其用途

技术领域

本发明涉及一种具有延缓皮肤衰老的天然药物提取物的组合物、制备方法和用途。

背景技术

皮肤衰老是一种持续渐进性的生理过程，直接影响皮肤的外观和功能，其具体表现包括表皮更新、真皮对外来化学物清除力、真皮厚度和细胞组成、受伤后表皮化能力、免疫反应、感觉能力、温度调节、汗腺和皮脂腺分泌、维生素D合成能力和血管反应性等多方面功能降低。随着全球人口平均年龄的增加，抗皮肤衰老化妆品深受开发者的重视和消费者的喜爱。天然药物种类众多，对人体皮肤副作用小，早在三千多年前的《山海经》中，就有中草药美容的记载，现代的人们更愿意接受“安全、天然、有效”的美容方式。相对其它美容方法，如激光美肤、微晶磨削、化学换肤及外敷、口服化学药物，添加中草药提取物的抗皮肤衰老化妆品具有功效持久稳定、作用温和、副作用小等优点，更加“安全有效”，是现代“纯天然”理念下延缓皮肤衰老的实验研究、临床应用及药品、化妆品中活性添加剂的最佳选择。（李骏飞，等，皮肤衰老与中药抗皮肤衰老的研究进展，中国中医药资讯，2011年3卷6期）近年来，研究人员在中药延缓皮肤衰老的研究中积累了大量的实验资料。如专利申请号201010179686.7，该申请中公开了一种抗皮肤衰老的中药面膜，该面膜的有效成分包括由15%～50%党参、15%～50%黄芪、15%～60%茯苓制成的水提取液，。如专利申请号20101046039.6，该专利公开了一种具有抗皮肤衰老作用的中药提取物的组合物，由中药桑葚、牛膝、黄精、天竺葵、厚朴、山茱萸、白豆蔻、鹿衔草和当归的提取物组成，按重量百分比计，含量为桑葚1%～20%、牛膝1%～20%、黄精1%～20%、天竺葵1%～20%、厚朴1%～20%、山茱萸1%～20%、白豆蔻1%～20%、鹿衔草1%～20%和当归1%～20%，该组合物具有抑制黑色素和促进皮肤细胞新生的双重作用。

尽管目前国内外就中草药延缓皮肤衰老作用方面做了一定的、有限的工作，但还存在着许多问题，如研究的中药仅限于800多种常见的中药，而对数量庞大的天然药物研究不够；许多研究从宫廷秘方、古书所传作出的推论和假设的出发，只有少量的实验研究，科学依据不足。这样，尽管可以取得一些眼前的效益，但长久以往，必将失去竞争力。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术中的不足之处，提供一种具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物及其用途。

本发明所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物，是以珍珠草、黄花水倒莲、仙鹤草为原料制备的，且任一组分的重量百分含量均不超过总量的40%；

优选的，所述具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物，是以如下重量份数的原料制备的：

珍珠草        1～40份

黄花水倒莲    1～40份

仙鹤草        1～40份

优选的，所述具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物，是以如下重量份数的原料制备的：

珍珠草          2～35份

黄花水倒莲      2～35份

仙鹤草          2～35份

优选的，所述具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物，是以如下重量份数的原料制备的：

珍珠草         8～30份

黄花水倒莲     9.5～30份

仙鹤草         9.5～30份

最优选的，是以如下重量份数的原料制备的：

珍珠草       30份

黄花水倒莲   30份

仙鹤草       30份

最优选的，是以如下重量份数的原料制备的：

珍珠草       8份

黄花水倒莲   10份

仙鹤草       12份

最优选的，是以如下重量份数的原料制备的：

珍珠草        12份

黄花水倒莲    10份

仙鹤草        8份

最优选的，是以如下重量份数的原料制备的：

珍珠草           11份

黄花水倒莲       9.5份

仙鹤草           9.5份

最优选的，是以如下重量份数的原料制备的：

珍珠草          9份

黄花水倒莲      12份

仙鹤草          9份

本发明所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物的制备方法，包括以下步骤：

（1）将上述的各个原料置于体积浓度为20%～80%的乙醇中浸泡2～48小时，浸泡用的乙醇用量为各个原料总重量的10～200倍，过滤，得浸泡液；

优选的，过滤残渣再用体积浓度为20%～80%的乙醇浸泡2～48小时，合并浸泡后的溶液，得浸泡液。

（2）浸泡液浓缩至原重量的2～5%，浓缩液用大孔树脂吸附，再用质量浓度5～95%的乙醇多次洗脱，收集洗脱液，即为所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物；

优选的，乙醇的体积浓度为40%～95%；

所述大孔树脂采用河北沧州宝恩化工有限公司HPD-400型大孔树脂；

浸泡液浓缩的方法为常规的减压浓缩。

试验证明，本发明的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物，具有增加皮肤含水量、增加胶原蛋白的合成和抗氧化等多重作用，能够用于制备皮肤保养的化妆品和皮肤的治疗性药物；

本发明还涉及一种皮肤保养化妆品，包括所述具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物和化妆品领域使用的辅料；

本发明还涉及一种皮肤的治疗性药物，包括权利要求所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物和医学上可接受的载体。

尤其可以用于制备皮肤护理化妆品，包括霜剂、乳液、化妆水、凝胶剂、面膜、涂搽剂或洗剂；

制备皮肤护理化妆品时，可将制得的提取液组合物，经减压浓缩至原重量的1/2～1/10，得到组合物浓缩液，与已知的化妆品以及药品的基质或者辅料、载体、添加剂相混合，按照常规的方法进行制备，其中，所述组合物浓缩液占化妆品总重量的5～10%。

本发明根据中药理论，从大量的天然药物中，选用了珍珠草、黄花水倒莲和仙鹤草为原料，制备获得了所述的具有延缓皮肤衰老作用的组合物，其中，所述的珍珠草选用大戟科植物Phyllanthus urinaria L的全草；黄花水倒莲选用远志科植物Polygala fallaxHemsl.[P.aureocauda Dumn]的根；仙鹤草选用蔷薇科龙芽草属植物Agrimonia pilosaLedeb var.japomica(Miq.)Nakai的全草。

根据《中国药典》和文献记载：珍珠草为大戟科叶下珠属植物，又名叶下珠、关门草等，珍珠草最早收载于《生草药性备要》。珍珠草味苦，性凉，具有平肝清热，利水解毒之功效，我国民间主要用来治疗疳积、黄胆、肝炎、肠炎、痢疾、肾炎水肿等疾病。叶下珠主要含有黄酮类、木脂素类、生物碱类、有机酸等多种成分，具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、抗衰老以及抗辐射等多种药理作用；

黄花水倒莲为远志科远志属植物，又名黄花远志.是一种使用悠久的民间草药。主产福建、江西、湖南、广西和云南等省区，生于海拔1150～1650m的山谷林下，水旁阴湿处。黄花水倒莲味甘，微苦，性平；全株可供药用，具有补益气血、健脾祛湿、活血化瘀和调经等功效。现代研究表明，其根中含有皂苷、多糖、酮类和有机酸等多种成分，其总提物具有抗应激、抗衰老、抗炎、抗病毒、增强免疫、降血脂、活血等作用，其中黄酮类物质有抗氧化、防衰老、对自由基有清除作用。

仙鹤草又名脱力草、马鞭草、龙牙草、石打穿等，始载于《图经本草》。仙鹤草性寒，味苦、涩，归肺、肝、脾经，其主要成分含有仙鹤草素、仙鹤草内酯、鞣质、甾醇、有机酸、酚性成分、皂苷、仙鹤草酚(A，B，C，D)、VC、VK等。现代药理研究证实。仙鹤草具有强壮、收敛止血、截疽、止痢、解毒等作用，主要用于咳血、吐血、崩漏下血、疟疾、血痢、脱力劳伤、痈肿疮毒、阴痒带下等。

采用上述原料制备的具有延缓皮肤衰老作用的组合物，具有良好延缓皮肤衰老作用的天然药物提取物的组合物，该组合物作用可靠，具有促进皮肤细胞新生、增加皮肤细胞胶原蛋白合成和抗氧化的三重作用。

综上所述，本发明的有益效果：本发明突破研发常规，以延缓皮肤衰老的功效为唯一标准，大量筛选天然药物，通过筛选后的天然药物提取物的组合物经过动物实验和临床试验证明具有增加皮肤含水量、增加胶原蛋白的合成和抗氧化等多重作用，能够用于皮肤保养的化妆品和治疗性药物；所涉及的成分具有效果明确、安全性好、无任何副作用和在化妆品配方中稳定的特点；与现有同类产品相比，具有效果显著的特点，是一种新型延缓皮肤衰老有效天然药物提取物的组合物。

具体实施方式

实施例中，大孔树脂采用河北沧州宝恩化工有限公司HPD-400型大孔树脂。

实施例1

在室温下，取珍珠草、黄花水倒莲、仙鹤草各10公斤（共30公斤），用体积浓度70%的乙醇600公斤浸泡提取，浸泡时间为24小时，残渣再用70%的乙醇600公斤浸泡24小时提取，然后将浸泡后的溶液合并，经过200目的滤网过滤后，减压浓缩至原重量的5%，再将浓缩液上大孔树脂，用体积浓度50%的乙醇洗脱，收集的洗脱液，即为所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物。

实施例2

在室温下，取珍珠草8公斤、黄花水倒莲10公斤、仙鹤草12公斤（共30公斤），用浓度体积浓度50%的乙醇1200公斤浸泡提取，浸泡时间为24小时，残渣再用体积50%的乙醇1200公斤浸泡24小时提取，然后将浸泡后的溶液合并，经过200目的滤网过滤后，减压浓缩至原重量的2.5%，再将浓缩液上大孔树脂，用体积浓度40%的乙醇洗脱，收集的洗脱液，即为所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物。

实施例3

在室温下，取珍珠草12公斤、黄花水倒莲10公斤、仙鹤草8公斤（共30公斤），用浓度80%的乙醇1000公斤浸泡提取，浸泡时间为24小时，残渣再用体积浓度80%的乙醇1000公斤浸泡24小时提取，然后将浸泡后的溶液合并，经过200目的滤网过滤后浓缩至原重量的4%，再将浓缩液上大孔树脂，用体积浓度60%的乙醇洗脱，收集的洗脱液，即为所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物。

实施例4

在室温下，取珍珠草11公斤、黄花水倒莲9.5公斤、仙鹤草9.5公斤（共30公斤），用体积浓度30%的乙醇2000公斤浸泡提取，浸泡时间为24小时，残渣再用体积浓度30%的乙醇2000公斤浸泡24小时提取，然后将浸泡后的溶液合并，经过200目的滤网过滤后浓缩重量的2%，再将浓缩液上大孔树脂，用体积浓度90%的乙醇洗脱，收集的洗脱液，即为所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物。

实施例5

在室温下，取珍珠草9公斤、黄花水倒莲12公斤、仙鹤草9公斤（共30公斤），用体积浓度60%的乙醇1200公斤浸泡提取，浸泡时间为24小时，残渣再用体积浓度60%的乙醇1200公斤浸泡24小时提取，然后将浸泡后的溶液合并，经过200目的滤网过滤后浓缩重量的3.5%，再将浓缩液上大孔树脂，用80%的乙醇洗脱，收集的洗脱液，即为所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物。

实施例6

将实施例1所获得的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物，采用减压浓缩，浓缩至原重量的十分之一，得天然药物提取物的组合物浓缩液，用于制备延缓皮肤衰老精华素，组分的重量百分比如下：

A相

B相

C相

三乙醇胺      0.02%      盛邦化工

D相

天然药物提取物的组合物   10%

聚山梨醇酯-40  0.3%      百灵威科技

生产工艺：

（1）.将卡波姆941分散于去离子水中；

（2）.待卡波姆941完全分散后，加入丙二醇，加入A相部分余下原料；

（3）.搅拌下加入B部分原料，均质1分钟；

（4）.搅拌下加入C部分原料；

（5）.搅拌下加入D部分原料，搅拌均匀，PH值控制在4.5，即可制得延缓皮肤衰老精华素。

实施例7

1.材料与方法：

1.1动物：SPF级雌性昆明种小鼠，3个月龄20只，12个月龄80只，购于广东省医学实验动物中心，实验动物许可证编号：0086042。

1.2药品：采用实施例6的化妆品配方制备延缓皮肤衰老精华素作为治疗组，治疗组分高剂量组、中剂量组、低剂量组（天然药物提取物的组合物的重量含量分别为5%、15%、25%），空白对照组仅含精华素基质原料。

硫代巴比妥酸及羟脯氨酸均为Sigma公司产品，超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、脂褐质（LF）试剂盒购自南京建成生物制品公司。

1.3小鼠自然衰老模型的建立及分组 选用自然老龄12个月龄清洁级雌性昆明种小鼠80只，随机分为4组：正常对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组20只。另将20只3个月龄清洁级雌性昆明种小鼠作为年青对照组，体质量20～23g。小鼠按组别分笼饲养。在相同的自然条件下，常规饲食饮水，适应性饲养后开始进行实验。实验前用剃毛器脱去小鼠背部两肩胛之间皮肤上的毛3cm×3cm，治疗组（低剂量组、中剂量组、高剂量组）用相应的精华素涂抹，每日2次保鲜膜保护2h，每次0.5g，空白对照组与年青对照组用不含天然药物提取物的组合物的精华素，连续涂抹90天，实验完成后将小鼠处死。

1.4皮肤酸溶性胶原及总胶原的测定 酸溶性胶原的检测：各取0.2g左右的皮肤，去除皮下脂肪，4℃丙酮脱脂48小时，干燥至恒重，取20mg用0.5mol/L醋酸抽提72小时，取1mL抽提液加入6mol/L盐酸1mL，20磅高压水解4小时，调PH值至6，取1mL上清液检测（氯胺T氧化法测定羟脯氨酸含量）。总胶原的检测：取2mg皮肤4℃丙酮脱脂48小时，干燥至恒重，0.05mol/L醋酸冲洗后，加入6mol/L盐酸1.5mL，20磅高压水解4小时，调PH值至6，取1mL上清液检测，余同上。

1.5取背部脱毛后皮肤组织块约0.5g，经预冷0.9%氯化钠溶液漂洗，除去皮下脂肪和其他结缔组织，滤纸拭干，称定质量，组织块剪碎后倒人匀浆管中，加入该组织块9倍质量的预冷0.9%氯化钠溶液，用内切式组织匀浆机制成10%组织匀浆（在冰水中进行），然后反复冻融3次，使其完全破碎，细胞内容物完全游离在液相中。皮肤匀浆中SOD活性、MDA含量、皮肤LF等指标参数，均参照南京建成生物工程公司试剂盒说明书方法进行测定。

2.结果

表1的数据显示，涂抹含有高、中、低剂量的天然药物提取物的组合物的精华素后皮肤组织中酸溶性羟脯氨酸和总羟脯氨酸的含量均有明显增加（P＜0.05或P＜0.01），表明能促进皮肤胶原生成，高剂量组和中剂量组的作用明显要比低剂量组强（P＜0.05），高剂量组和中剂量组的作用强度则无显著性差异（P＞0.05）。

表1 含有天然药物提取物的精华素对衰老小鼠皮肤中羟脯氨酸含量的影响

备注：与正常对照组比较，﹡P＜0.05，﹡﹡P＜0.01。

含有高、中、低剂量的天然药物提取物的组合物的精华素对皮肤组织中SOD、MDA和LF含量的影响见表2，实验结果表明衰老小鼠涂抹含有高、中、低剂量的天然药物提取物的组合物的精华素后，皮肤中SOD的含量较正常对照组有明显提高，差异有极显著性（P＜0.05），而脂质过氧化产物MDA和LF的含量则有明显下降（P＜0.05）。

表2 含有天然药物提取物的精华素对衰老小鼠皮肤中SOD、MDA和LF含量的影响

备注：与正常对照组比较，﹡P＜0.05，﹡﹡P＜0.01。

综上，本动物试验结果证实含有天然药物提取物的组合物的精华素具有显著的抗皮肤衰老作用。

实施例8

天然药物提取物的组合物抗老年女性皮肤衰老的临床实验研究报告：

下述实验中，所用的天然药物提取物的组合物为实施例6的化妆品配方制备的延缓皮肤衰老精华素；

实验用于观察天然药物提取物的组合物延缓皮肤衰老的作用及部分机制：

纳入60名50～60岁的女性志愿者，所有纳入研究的志愿者身体健康状况良好，不吸烟，无长期服药史，按照随机双盲的试验方法，将受试者分为2组，每组30人，颜面部接受外搽6个月的含天然药物提取物的组合物的精华素，每天早、中、晚3次；另一组30人，颜面部接受外搽6个月的不含天然药物提取物的组合物的精华素，每天早、中、晚3次。在试验开始（M0）、第二个月（M2）、第四个月（M4）、试验结束（M6）依照随机表选定一侧的面部、前臂和手进行测量以下指标：

（1）鱼尾纹、口角皱纹、前臂和手背Papery样改变的评估（参照欧莱雅公司的标准照片）

（2）皮肤干燥性的评估（按照总分10分，0分：无；1～3分：轻度；4～7分：中度；7～10：重度）

（3）采用德国Courage Khazaka electroni公司的MPA9多功能皮肤测试仪开展皮肤的无创仪器检测，皮肤含水量采用皮肤含水量检测探头CM825测定，经皮水分丢失量采用皮肤TEWL检测探头TM300测定，皮肤弹性采用皮肤弹性检测探头RVM600测定。

临床结果

（1）皱纹的评估

结果显示（具体见表1）：试验组受试者使用含有天然药物提取物的精华素6个月后，相比使用前的皮肤状况，受试者的鱼尾纹、口角皱纹、前臂和手背Papery样改变均有显著性的改善（P＜0.05或P＜0.01）。

表1 鱼尾纹、口角皱纹、前臂和手背Papery样改变的比较（

n=30）

注：与M0组比较，*P＜0.05；**P＜0.01。

（2）干燥度和粗糙度评估

表2的数据表明：试验组受试者使用含有天然药物提取物的精华素6个月后，相比使用前的皮肤状况，受试者的面颊的干燥度、面颊粗糙度、前额干燥度均有显著性的改善（P＜0.05或P＜0.01），口唇皲裂度的变化不明显，安慰剂组使用前后的各项指标则无显著性差异（P＞0.05）。

表2 面颊粗糙度、干燥度、前额干燥度和口唇皲裂度的比较（

n=30）

注：与M0组比较，*P＜0.05；**P＜0.01。

（3）皮肤含水量、经皮水分丢失量和弹性评估

表3的数据表明，试验组受试者使用含有天然药物提取物的精华素6个月后，相比使用前的皮肤状况，皮肤的含水量和弹性明显增加（P＜0.05或P＜0.01），而经皮丢失水量则显著降低（P＜0.05），安慰剂组使用前后的各项指标则无显著性差异（P＞0.05）。

表3 皮肤含水量、经皮丢失水量和弹性的比较（n=30）

注：与M0组比较，*P＜0.05；**P＜0.01。

综上，本临床试验结果显示，试验组受试者使用含有天然药物提取物的组合物的精华素6个月后，相比使用前的皮肤状况，受试者的鱼尾纹、口角皱纹、前臂的纹理、面颊的干燥度和粗糙度均有显著性的改善（P＜0.05），而安慰剂组使用前后的各项指标则无显著性差异。无创仪器检测指标结果也显示，试验组受试者在使用含有天然药物提取物的精华素6个月后，相比使用前的皮肤，受试者皮肤的含水量和弹性明显增加（P＜0.05），而经皮丢失水量则显著降低（P＜0.05），而安慰剂组变化不明显，充分说明含有天然药物提取物的组合物的精华素在人体上具有明显的抗皮肤衰老作用。

采用其它实施例的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物进行实验，结果也证明具有相同的作用。

Claims (10)

1.具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物，其特征在于，是以珍珠草、黄花水倒莲、仙鹤草为原料制备的，且任一组分的重量百分含量均不超过总量的40%。

2.具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物，其特征在于，是以如下质量份数的原料制备的：珍珠草1～40份，黄花水倒莲1～40份，仙鹤草1～40份。

3.根据权利要求2所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物，其特征在于，是以如下重量份数的原料制备的：珍珠草2～35份，黄花水倒莲2～35份，仙鹤草2～35份。

4.根据权利要求2所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物，其特征在于，是以如下重量份数的原料制备的：珍珠草8～30份，黄花水倒莲9.5～30份，仙鹤草9.5～30份。

5.根据权利要求2所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物，其特征在于，是以如下质量份数的原料制备的：珍珠草30份，黄花水倒莲30份，仙鹤草30份。

6.根据权利要求2所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物，其特征在于，是以如下质量份数的原料制备的：珍珠草 8份，黄花水倒莲10份，仙鹤草12份；

或者，是以如下重量份数的原料制备的：珍珠草12份，黄花水倒莲10份，仙鹤草8份；

或者，是以如下重量份数的原料制备的：珍珠草11份，黄花水倒莲9.5份，仙鹤草9.5份；

或者，是以如下重量份数的原料制备的：珍珠草9份，黄花水倒莲12份，仙鹤草9份。

7.根据权利要求1～6任一项所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物的制备方法，包括以下步骤：

（1）将上述的各个原料置于体积浓度为20%～80%的乙醇中浸泡2～48小时，浸泡用的乙醇用量为各个原料总重量的10～200倍，过滤，得浸泡液；

（2）浸泡液浓缩至原重量的2～5%，浓缩液用大孔树脂吸附，再用体积浓度为5～95%的乙醇洗脱，收集洗脱液，即为所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物。

8.根据权利要求1～6任一项所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物的应用，其特征在于，用于制备皮肤保养的化妆品或皮肤的治疗性药物。

9.皮肤保养化妆品，包括权利要求1～6任一项所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物和化妆品领域使用的辅料。

10.皮肤的治疗性药物，包括权利要求1～6任一项所述的具有延缓皮肤衰老作用的天然药物组合物和医学上可接受的载体。