KR20120083895A - 필란투스 니루리의 추출물 - Google Patents

Abstract

필란투스 니루리의 저분자량 분획물의 제조 방법이 제공된다. 이러한 저분자량 분획물은 피부, 예를 들어 노화 징후 처리, 염증 감소 처리, 또는 피부 미백 처리를 필요로 하는 피부의 처리에 특히 유용하다.

Description

필란투스 니루리의 추출물{EXTRACTS OF PHYLLANTHUS NIRURI}

본 발명은 필란투스 니루리(Phyllanthus niruri)의 추출물을 포함하는 조성물과, 그의 제조 및 사용 방법에 관한 것이다. 본 조성물은 예를 들어 피부 외양 개선, 예를 들어 피부 노화 징후의 개선, 염증 치료 및 피부 미백에 유용하다.

피부의 노화는 피부의 세포외 매트릭스(extracellular matrix)의 두 가지 주요 구성요소인 섬유질 단백질 콜라겐과 엘라스틴의 변화를 통해 피부의 탄력 및 강도에 악영향을 줄 수 있다. 예를 들어, 엘라스틴은 엘라스틴 전구체 단백질 분자(예를 들어, 트로포엘라스틴)가 나선형 필라멘트로 가교결합되어 형성되는 큰 섬유질 단백질이다. 나선형 필라멘트는, 연장되고 나서 그 원래 형상을 되찾을 수 있는 펩티드 사슬로 이루어진다.

피부를 처리하기 위한 필란투스 니루리를 포함하는 조성물은 당업계에 공지되어 있다. 그러나, 본 발명자는 필란투스 니루리의 모든 추출물이 트로포엘라스틴(tropoelastin) 및 콜라겐 형성 촉진에 동등하게 작용하는 것은 아님을 인식하였다. 놀랍게도 본 발명자는 필란투스 니루리의 물 추출가능한 저분자량 분획물이 콜라게나아제 억제, 트로포엘라스틴 촉진 및 콜라겐 형성 촉진에 있어서 필란투스 니루리의 다른 추출물보다 유의하게 더 우수한 활성을 가짐을 알아냈다.

필란투스 니루리의 이러한 저분자량 분획물이 피부 미백에 또한 고도로 유용함이 또한 발견되었다.

필란투스 니루리의 저분자량 분획물은 유익한 항염증 효과를 제공함이 추가로 발견되었다.

본 발명은 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종이 사실상 없는 필란투스 니루리의 저분자량 분획물로 본질적으로 이루어진 조성물에 관한 것이다.

또한 본 발명은 화장용으로 허용가능한 국소 담체와, 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종이 사실상 없는 필란투스 니루리의 저분자량 분획물로 본질적으로 이루어진 조성물을 포함하는 국소 제형, 및 이러한 국소 제형을 피부에 국소적으로 도포함으로써 피부 노화 징후를 처리하는 방법에 관한 것이다.

추가로 본 발명은 필란투스 니루리의 저분자량 분획물을 제조하는 방법에 관한 것이며, 본 방법은 필란투스 니루리의 물 추출물을 형성하기에 충분한 기간 동안 필란투스 니루리를 물을 포함하는 용매와 접촉시키는 단계; 및 필란투스 니루리의 상기 물 추출물로부터 저분자량 분획물을 단리하는 단계를 포함한다.

다른 태양에서, 본 발명은 피부를 미백시키는 방법에 관한 것이며, 이는 피부 미백 처리를 필요로 하는 피부에 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종이 사실상 없는 필란투스 니루리의 저분자량 분획물을 도포하는 단계를 포함한다.

다른 태양에서, 본 발명은 피부 노화 징후를 개선시키는 방법에 관한 것이며, 이는 노화 징후 개선을 필요로 하는 피부에 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종이 사실상 없는 필란투스 니루리의 저분자량 분획물을 도포하는 단계를 포함한다.

또한 본 발명은 피부 염증을 감소시키는 방법에 관한 것이며, 이는 피부 염증 감소를 필요로 하는 피부에 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종이 사실상 없는 필란투스 니루리의 저분자량 분획물을 도포하는 단계를 포함한다.

본 발명의 다른 특징 및 이점은 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용 및 특허청구범위로부터 명백할 것이다.

달리 정의되지 않는다면, 본 명세서에서 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 숙련자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 또한, 본 명세서에서 언급된 모든 간행물, 특허 출원, 특허, 및 기타 참고 문헌이 참고로 포함된다. 달리 나타내지 않는 한, 퍼센트 또는 농도는 중량 퍼센트 또는 중량 기준 농도를 말한다 (즉, % (중량/중량)). 달리 언급되지 않는다면, 모든 범위는 종점을 포함하며, 예를 들어, "4 내지 9"는 종점 4 및 9를 포함한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부 노화의 징후"는 주름 및 주름살의 존재, 탄력 상실, 불균일한 피부, 반점, 및 검버섯을 포함한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "치료"는 소정 상태 또는 질환의 존재 또는 출현을 완화, 감소, 방지, 개선, 또는 제거하는 것을 말한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "주름살"은 잔주름, 잔주름살, 또는 굵은 주름살을 포함한다. 주름의 예에는 눈 주위의 잔주름 (예를 들어, 눈가 주름(crow's feet)), 이마 및 뺨 주름, 미간 주름(frown-line), 및 입 주위의 웃어서 생기는 주름(laugh-line)이 포함되지만 이로 한정되지 않는다.

본 명세서에 사용되는 "탄력 감소"는 처지고, 이완되고, 느슨한 조직을 포함하지만 이로 한정되지 않는, 피부 또는 조직의 탄력 또는 구조적 완전성의 감소를 포함한다. 탄력 또는 조직 구조 완전성의 상실은 질환, 노화, 호르몬 변화, 기계적 외상, 환경적 손상을 포함하지만 이로 한정되지 않는 많은 인자들의 결과, 또는 화장품 또는 약품과 같은 제품을 조직에 적용한 결과일 수 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "불균일한 피부"는 염증후 색소과다침착과 같은 색소과다침착으로 분류될 수 있는 퍼지거나 얼룩덜룩한 색소침착과 관련된 피부의 상태를 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "반점"은 홍조 또는 홍반과 관련된 피부 상태를 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "검버섯" 은 뚜렷한 색소침착, 예를 들어 손뿐만 아니라 얼굴에서 생길 수 있는 작은 더 짙은 색소침착 영역과 관련된 피부 상태를 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부 내 외부 침범의 치료"는 피부 내 외부 침범으로 인한 손상을 감소 또는 예방하는 것을 의미한다. 외부 침범의 예에는 세정제(예를 들어, 계면활성제를 함유하는 국소 세정제)의 사용, 화장, 면도로 인한 피부에의 손상, 뿐만 아니라 UV 광과 같은 환경적 손상(예를 들어, 햇빛으로부터의 손상 또는 UV 램프 및 태양 시뮬레이터와 같은 비-천연 공급원으로부터의 손상), 오존, 배기가스, 공해, 염소 및 염소 함유 화합물, 및 담배 연기로부터의 손상이 포함되나, 이에 제한되지 않는다. 피부에 대한 외부 침범의 효과는 지질, 탄수화물, 펩타이드, 단백질, 핵산 및 비타민에 대한 개질 및 이에 대한 산화적 및/또는 질산화적 손상을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 피부에 대한 외부 침범의 효과는 또한, 세포 생존성의 상실, 세포 기능의 상실 또는 변경, 및 유전자 및/또는 단백질 발현의 변화를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부 염증 감소를 필요로 하는 피부"는 발적 또는 홍반, 부종을 나타내는 피부를 의미한다. 특정한 다른 실시 형태에서, "피부 염증 감소를 필요로 하는 피부"는 외부 요소에 대하여 특히 반응성이거나 민감성인 피부를 말한다. 외부 요소는 태양광선(UV, 가시선, IR), 미생물, 대기 오염물질, 예를 들어 오존, 배기가스 오염물질, 염소 및 염소 발생 화합물, 담배 연기, 저온, 열을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 조성물의 사용에 의해 치료 또는 예방될 수 있는 염증성 장애 및 관련 병태는 하기를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다: 관절염, 기관지염, 접촉성 피부염, 아토피성 피부염, 건선, 지루성 피부염, 습진, 알러지성 피부염, 다형 광발진, 염증성 피부병, 모낭염, 탈모증, 옻, 곤충 교상, 여드름 염증, 화학물질, 외상, 오염물질 (예를 들어, 담배 연기) 및 일광 노출을 포함하지만 이에 한정되지 않는 외인성 요인에 의해 유도되는 자극, 건조증, 과각화증, 소양증, 염증후 색소과다침착, 흉터 등을 포함하지만 이에 한정되지 않는 염증에서 생긴 이차 병태. 바람직하게는, 본 발명의 방법을 이용하여 치료 또는 예방될 수 있는 염증성 장애 및 관련 병태로는 관절염, 염증성 피부병, 접촉성 피부염, 알러지성 피부염, 아토피성 피부염, 다형 광발진, 외인성 요인에 의해 유도되는 홍반을 포함하는 자극, 여드름 염증, 건선, 지루성 피부염, 습진, 옻, 곤충 교상, 모낭염, 탈모증, 및 이차 병태 등이 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "피부 미백"은 일반적으로 피부톤, 피부 색상, 및/또는 피부 음영을 미백함, 환하게 함, 미백 및/또는 고르게 함, 및/또는 누르스름함의 감소, 및/또는 착색 반점, 멜라닌 반점, 노화 반점, 태양 반점, 노인성 흑자(senile lentigo), 주근깨, 단순 흑자, 착색된 일광 각화증, 지루 각화증, 기미, 여드름 자국, 염증후 색소과다침착, 흑자, 모반, 그들의 둘 이상의 조합 등을 포함하나 이에 제한되지 않는 색소과다침착된 자국 및/또는 병변을 미백 및/또는 페이딩하는 것을 말한다. 특정 실시 형태에서, "피부 미백"은 또한, 증가된 피부 광채, 홍조, 반투명도 및/또는 발광, 및/또는 더욱 광채가 나거나, 홍조를 띄거나, 반투명하거나 빛이 나는 피부톤 외양 또는 덜 노랗거나 누르스름한 피부톤을 수득하는 것을 말한다. 특정한 바람직한 실시 형태에서, "피부 미백"은 피부톤을 밝고 고르게 하고, 피부 광채를 증가시키고/시키거나 노화 반점을 밝게 하는 것을 말한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "피부 미백 치료가 필요한 피부"는 일반적으로, 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 특성을 나타내는 피부를 말한다: 2007년에 출간된 문헌[COLIPA GUIDELINE: GUIDELINE FOR THE COLORIMETRIC DETERMINATION OF SKIN COLOUR TYPING AND PREDICTION OF THE MINIMAL ERYTHEMAL DOSE (MED) WITHOUT UV EXPOSURE](그 전체가 본 명세서에 참조로서 삽입되고 추가로 하기 기재됨)에 따라 측정된 바와 같이 41 미만의 측정된 개인 타이폴로지 앵글(Individual Typology Angle, ITA) 값을 갖는 피부, 어둡고/거나 누르스름한 피부, UV에 의해 어두워진 피부, 고르지 못한 피부톤을 갖는 피부, 또는 착색된 반점, 멜라닌 반점, 노화 반점, 태양 반점, 노인성 흑자, 주근깨, 단순 흑자, 착색된 일광 각화증, 지루 각화증, 기미, 여드름 자국, 염증후 색소과다침착, 흑자, 모반, 그들의 둘 이상의 조합을 포함하나 이에 제한되지 않는 하나 이상의 색소과다침착된 자국 및/또는 병변을 갖는 피부 등. COLIPA 가이드라인에서, 피부 색상은 ITA 값의 함수로서 정의된다: 매우 밝은 피부 >55; 밝은 피부 41 내지 55, 중간 28 내지 41, 및 어두운 피부 <28. 특정한 바람직한 실시 형태에서, "피부 미백이 필요한 피부"는 ITA 값이 41 미만, 예컨대 약 40 이하, 약 35 이하, 약 30 이하이거나, 보다 바람직하게는 약 28 이하인 피부를 가진 개인을 말한다. 특정 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 발명은 누르스름한 피부 및/또는 어두운 피부로부터 선택되는 피부 미백 치료가 필요한 피부에 사용되는 조성물 및 사용 방법에 관한 것이다. 특정 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 발명은 노화 반점, 주근깨, 여드름 후에 남겨지는 자국, 및 그들의 둘 이상의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 피부 미백 치료가 필요한 피부에 사용되는 조성물 및 사용 방법에 관한 것이다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "톤의 개선"은 피부 외양의 미백 (예를 들어, 착색된 자국 또는 병변의 미백, 피부의 누르스름함의 감소 및/또는 피부색을 고르게 함)을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "화장품"은 신체 미(bodily beauty)의 외양을 보존, 복구, 부여, 시뮬레이션, 또는 증진시키거나 미 또는 젊음을 증진시키는 것으로 보이는 미적 성분 또는 제제를 말하며, 구체적으로는 조직 또는 피부의 외양에 관한 것이다.

본 명세서에 사용되는 "화장용으로 유효한 양"은 하나 이상의 피부 노화 징후를 치료하기에 충분하지만 심각한 부작용을 피하기에 충분히 낮은 생리학적 활성 화합물 또는 조성물의 양을 의미한다. 화합물 또는 조성물의 화장용으로 유효한 양은 처리될 특정 상태, 사용자의 연령 및 물리적 상태, 처리/예방될 상태의 심각도, 처리 기간, 다른 처리의 특성, 채용되는 구체적인 화합물 또는 제품/조성물, 이용되는 화장용으로 허용가능한 특정 담체 및 유사 인자에 따라 변할 것이다.

당업자는 본 명세서의 설명에 기초하여, 본 발명을 가장 완전한 범위까지 이용할 수 있을 것으로 여겨진다. 하기의 구체적인 실시 형태는 단지 예시적인 것으로 이해되어야 하며, 어떤 방식으로도 본 개시문헌의 나머지를 제한하는 것으로 이해되어서는 안된다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 필란투스 니루리는 필란투스 니루리 및 필란투스 아마루스(Phyllanthus amarus) 둘 모두를 포함한다.

필란투스 니루리는 전체 식물로서 수확 및 사용될 수 있거나, 또는 선택적으로 식물의 하나 이상의 부분(예를 들어, 식물의 꽃, 종자, 뿌리, 근경, 줄기, 열매 및/또는 잎)이 사용될 수 있다. 필란투스 니루리 식물 또는 그 부분은, 예를 들어, 분쇄 또는 밀링에 의해서 분말로 미분될 수 있다. 적합한 밀링된 형태의 필란투스 니루리는 미국 네바다주 칼슨 시티 소재의 레인트리 뉴트리션, 인크.(Raintree Nutrition, Inc.)로부터 구매가능하다.

본 발명의 방법의 제1 단계에 따르면, 필란투스 니루리 (상기에 논의된 바와 같이 선택적으로 준비됨)는 필란투스 니루리의 물 추출물을 형성하기에 충분한 기간 동안 물을 포함하는 용매와 접촉된다. 용매는 물, 바람직하게는 약 50% 이상의 물, 더 바람직하게는 약 75% 이상의 물, 그리고 가장 바람직하게는 약 90% 이상의 물을 포함한다.

일 실시 형태에서, 용매는 약 10% 미만의 유기 용매 (예를 들어, 에탄올, 메탄올 등)를 포함한다. 바람직한 실시 형태에서, 용매는 약 5% 미만의 유기 용매를 포함한다. 추가의 바람직한 실시 형태에서, 용매는 약 1% 미만의 유기 용매를 포함한다. 또 다른 바람직한 실시 형태에서, 용매는 유기 용매를 전혀 포함하지 않는다. 유기 용매가 용매에 포함될 경우, 생성된 액체상을 60 내지 100℃ 범위의 온도에서 환류시키는 것이 유기 용매 제거에 필요할 수 있다.

따라서, 본 발명의 소정 실시 형태에서, 필란투스 니루리의 물 추출물 중 분자종은 물 추출가능하다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "물 추출가능한"은 약 50% 이상의 물, 더 바람직하게는 약 75% 이상의 물, 그리고 가장 바람직하게는 약 90% 이상의 물을 포함하는 용매와의 접촉에 의해 추출될 수 있음을 의미한다.

필란투스 니루리 대 용매의 질량비는 달라질 수 있다. 일 실시 형태에서, 필란투스 니루리 대 용매의 질량비는 약 1:2 내지 약 1:50, 바람직하게는 약 1:3 내지 약 1:20, 더욱 더 바람직하게는 약 1:4 내지 약 1:12이다.

추출을 향상시키기 위하여, 필란투스 니루리는 용매에서 초음파 처리될 수 있다. 대안적으로, 또는 그에 더하여, 용매는 약 30℃ 내지 약 70℃, 바람직하게는 약 40℃ 내지 약 65℃, 더 바람직하게는 약 40℃ 내지 약 65℃의 온도와 같은 온도로 가열될 수 있다.

필란투스 니루리 및 용매는 바람직하게는 약 5분 이상, 바람직하게는 약 10분 내지 약 6시간, 더 바람직하게는 약 10분 내지 약 60분, 가장 바람직하게는 약 30분의 기간 동안 접촉된다.

물 추출물은 바람직하게는 와트만(Whatman) 여과지를 이용하여 뷔흐너(Buchner) 깔때기를 통한 것과 같이 통상적인 여과 기술을 이용한 여과에 의해 분리된다. 그 후 필란투스 니루리의 생성된 물 추출물은 하기와 같이 추가의 프로세싱에 이용가능하게 된다.

본 발명의 방법의 제2 단계에 따르면, 이어서 필란투스 니루리의 물 추출물의 저분자량 분획물이 단리된다. 저분자량 분획물의 단리에 적합한 수단은 젤 여과, 즉, 특정 분자량 컷오프(cutoff) 초과의 또는 그 미만의 분자종만을 선택적으로 통과시킬 막을 이용한 젤 투과 크로마토그래피(gel permeation chromatography; GPC)에 의한 것이다.

당업자에 의해 잘 이해되는 바와 같이, GPC 컬럼은 먼저 비이온성 가교결합 중합체 수지로 패킹된다. 수지는 순서대로 하기의 액체, 즉 1리터의 물, 1리터의 물-메탄올, 및 1리터의 메탄올을 이용한 것과 같이 철저하게 세척되며, 이어서 물로 컨디셔닝된다. 필란투스 니루리의 물 추출물은 스펙트럼 미니크로스(Spectrum MiniKros)를 이용하여 예를 들어 100 kD (100,000 달톤) 막에 통과시켜 농축시키고 분자량이 100,000 달톤 미만인 분자를 분리한다. 막을 통과하는 부분을 필란투스 니루리의 저분자량 분획물로서 단리한다. 물 추출물의 남아있는 부분은 선택적으로 그리고 바람직하게는 버려질 수 있다.

이러한 방식으로 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종이 사실상 없는 필란투스 니루리의 저분자량 분획물로 본질적으로 이루어진 조성물이 제조된다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종이 사실상 없는"은 이러한 조성물이 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종 약 10 중량% 미만, 바람직하게는 약 5 중량% 미만, 더 바람직하게는 약 2 중량% 미만, 더욱 더 바람직하게는 약 1 중량% 미만, 더욱 더 바람직하게는 약 0.5 중량% 미만, 그리고 더욱 더 바람직하게는 약 0.1% 중량% 미만을 함유함을 의미한다. 당업자라면 쉽게 인식하는 바와 같이, 필란투스 니루리의 저분자량 분획물 중 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종의 농도는 예를 들어 GPC의 막을 통과하도록 허용되는 컷오프 분자량을 조정함으로써 조정될 수 있다.

용매 (예를 들어, 물)는 건조 제거 또는 증발될 수도 있고 그렇지 않을 수도 있다. 본 명세서에 기재된 특정 분자량 범위를 갖는 분자종의 백분율은 임의의 잔류 용매를 배제하고 계산됨을 알아야 한다. 바람직한 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 동결 건조에 의한 것과 같이 저분자량 분획물 중 남아있는 용매를 적어도 부분적으로 (또는 완전히) 제거하는 단계를 추가로 포함한다.

국소 제형

필란투스 니루리의 저분자량 분획물로 본질적으로 이루어진 조성물은 피부 상에서의 사용에 적합한 국소 제형을 형성하기 위하여 하나 이상의 화장용으로 허용가능한 국소 담체와 조합될 수 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "화장용으로 허용가능한"은 합리적인 효과/위험 비에 비례하여, 부당한 독성, 불상용성, 불안정성, 자극, 알러지 반응 등이 없이, (인간) 조직 (예를 들어, 피부)과 접촉하여 사용하기 적합함을 의미한다.

적합한 국소 담체는 물, 에탄올, 아이소프로판올, 1,2-프로판다이올, 글리세린, 벤질 알코올, 다이메틸아이소소르비드, 트라이아세틴, 글리콜 에테르, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 및 이들의 배합물을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 특히 바람직한 담체는 평균 분자량이 약 200 내지 약 400인 PEG, 피마자유, 트라이아세틴, 다이메틸아이소소르비드, 에탄올, 및 물, 및 이들의 배합물을 포함한다.

다양한 화합물이 국소 제형에 첨가되어 삼투압 및/또는 pH를 허용가능한 수준으로 변화시킬 수 있다. 이들은 만니톨, 수크로스, 염화칼슘, 염화나트륨, 제1인산나트륨, 제2인산나트륨, 수산화나트륨, 및 염산을 포함하지만 이로 한정되지 않는다.

국소 제형은 로션, 크림, 젤, 스틱, 스프레이, 연고, 클렌징 액체 워시 및 고형 바아, 샴푸 및 헤어 컨디셔너, 페이스트, 폼, 파우더, 무스, 면도 크림, 와이프, 스트립, 패치, 전동 패치, 상처 드레싱 및 접착 붕대, 하이드로젤, 필름-형성 제품, 얼굴 및 피부 마스크, 메이크업, 예를 들어 파운데이션, 아이 라이너, 및 아이 섀도우 등을 포함하지만 이로 한정되지 않는 매우 다양한 화장 용품으로 제조될 수 있다.

이들 제품 유형은 용액, 현탁액, 에멀젼 예컨대 마이크로에멀젼 및 나노에멀젼, 젤, 고체 및 리포좀을 포함하나 이에 제한되지 않는 여러 유형의 미용적으로 허용가능한 국소 담체를 함유할 수 있다. 다른 담체는 당업자에 의해 제형화될 수 있다. 적합한 담체의 제형화를 용이하게 하기 위하여, 다양한 기능성 성분들 중 임의의 성분을 포함시킬 수 있다. 예를 들어, 많은 연화제, 보습제, pH 조절제, 격리제(sequesterant), 유화제, 습윤제, 증점제, 중합체, 방부제, 착색제, 향료, 및 개인 케어 및 화장 제품에서 통상적으로 사용되는 다른 성분 중 임의의 것을 포함할 수 있다. 선택된 pH는 결정적인 것이 아니라, 예를 들어 약 4 내지 약 8, 예를 들어 약 5 내지 약 7인 범위일 수 있다.

화장용으로 허용가능한 국소 담체는 국소 제형의 약 50 중량% 내지 약 99.99 중량%, 더 바람직하게는 국소 제형의 약 80 중량% 내지 약 95 중량%를 구성할 수 있다. 특히 바람직한 실시 형태에서, 국소 제형은 약 25 중량% 이상의 물, 더 바람직하게는 약 50 중량% 이상의 물을 포함한다.

일 실시 형태에서, 국소 제형은 전술된 성분뿐만 아니라 하나 이상의 추가의 화장용 활성제(들)를 추가로 포함할 수 있다. "화장용 활성제"가 의미하는 것은 항미생물제, 예를 들어 항효모제, 항진균제, 및 항균제, 항염증제, 노화방지제, 탈색소제, 항기생충제, 산화방지제, 각질용해제, 영양분, 비타민, 미네랄, 에너지 향상제, 썬스크린 등을 포함하지만 이에 한정되지 않는, 조직에 대해 화장 또는 치료 효과를 갖는, 화합물들의 혼합물을 함유하는 천연 추출물, 또는 천연 공급원으로부터 추출되거나, 단리되거나, 정제되거나 농축된 화합물 또는 합성 화합물일 수 있는 화합물이다.

본 발명의 조성물의 구성성분일 수 있는 비타민의 예는 비타민 A, 비타민 B, 예를 들어 비타민 B3, 비타민 B5, 비타민 B7 및 비타민 B12, 비타민 C, 비타민 K, 비타민 E, 예를 들어 알파, 감마 또는 델타-토코페롤, 및 이들의 유도체(예를 들어, 염 및 에스테르) 및 이들의 혼합물을 포함하지만 이로 한정되지 않는다.

본 발명의 조성물과 방법에 사용될 수 있는 산화방지제의 예는 수용성 산화방지제, 예를 들어 설프하이드릴 화합물 및 그 유도체(예를 들어, 소듐 메타바이설파이트 및 N-아세틸-시스테인), 리포산 및 다이하이드로리포산, 레스베라트롤, 락토페린, 및 아스코르브산 및 아스코르브산 유도체(예를 들어, 아스코르빌 팔미테이트 및 아스코르빌 폴리펩티드)를 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 본 발명의 조성물에 사용하기 적합한 유용성 산화방지제는 부틸화 하이드록시톨루엔, 레티노이드(예를 들어, 레티놀 및 레티닐 팔미테이트), 상이한 유형의 토코페롤(예를 들어, 알파-, 감마-, 및 델타-토코페롤 및 그 에스테르, 예를 들어 아세테이트) 및 그 혼합물, 토코트라이에놀 및 유비퀴논을 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 본 발명의 조성물에 사용하기 적합한 산화방지제를 포함한 천연 추출물은 플라비노이드, 아이소플라비노이드, 및 그 유도체, 예를 들어 제니스테인 및 다이아드제인을 함유한 추출물(예를 들어, 대두 및 클로버 추출물), 레스베라트롤을 함유한 추출물 등을 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 하나 이상의 추가의 화장용 활성제(들)는 예를 들어 약 0.1 중량% 내지 약 10 중량%와 같은 임의의 적합한 농도로 존재할 수 있다.

이용될 수 있는 노화방지제의 예에는 레티노이드 (예를 들어, 레티놀 및 레티닐 팔미테이트) 및 하기에 예시된 화학식 I 또는 화학식 II의 아민 화합물, 또는 화장용으로 허용가능한 이들의 염이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다:

[화학식 I]

[화학식 II]

상기 식에서, R₁, R₂, R₃, R₄, 및 R₅는 독립적으로 수소, C_1-C₆ 알킬, 및 C_1-C₆ 하이드록시알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다.

화학식 I의 바람직한 아민 화합물의 예에는 N,N,N',N'-테트라키스(2-하이드록시프로필)에틸렌다이아민 (THPED), N,N,N',N'-테트라키스 (2-하이드록시에틸) 에틸렌 다이아민 (THEED), N,N,N',N'-테트라메틸에틸렌 다이아민 (TEMED), 이들의 거울상 이성체, 이들의 부분입체 이성체 및 이들의 화장용으로 허용가능한 염이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다.

노화방지 활성제의 다른 예에는 구리 함유 펩티드; 비타민, 예를 들어 비타민 E, 비타민 C, 비타민 B, 및 이들의 유도체, 예를 들어 비타민 E 아세테이트, 비타민 C 팔미테이트 등; 베타 카로틴, 알파 하이드록시산, 예를 들어 글리콜산, 시트르산, 락트산, 말산, 만델산, 아스코르브산, 알파-하이드록시부티르산, 피루브산을 포함하는 산화방지제; 베타 하이드록시산, 예를 들어 베타-하이드록시부티르산, 베타-페닐-락트산, 베타-페닐피루브산; 폴리페놀계 물질; 식물 추출물, 예를 들어 녹차, 대두 제품, 밀크시슬(milk thistle), 조류, 알로에, 안젤리카(angelica), 비터 오렌지(bitter orange), 커피, 황련, 그레이프프루트(grapefruit), 복령(hoellen), 인동덩굴(honeysuckle), 염주(Job's tears), 자근, 멀베리(mulberry), 작약, 퓨에라루아(puerarua), 나이스(nice), 잇꽃 및 이들의 혼합물이 포함된다.

적합한 탈색소제의 예에는 대두 제품, 레티노이드, 예를 들어 레티놀; 코직산 및 이의 유도체, 예를 들어 코직 다이팔미테이트; 하이드로퀴논 및 이의 유도체, 예를 들어 아르뷰틴; 트랜스엑삼산; 비타민, 예를 들어 나이아신, 비타민 C 및 이의 유도체; 아젤라산; 플라세르티아(placertia); 감초; 카모마일 및 녹차와 같은 추출물 및 이들의 혼합물이 포함되지만, 이에 한정되지 않으며, 이때 레티노이드, 코직산, 대두 제품 및 하이드로퀴논이 특히 적합한 예이다.

일 실시 형태에서, 국소 제형은 하나 이상의 추가의 피부 미백제를 포함한다. 추가의 피부 미백제의 예에는 페닐에틸 레소르시놀, 4-헥실 레소르시놀, a-아르뷰틴, 코직산, 니비톨(nivitol), 아스코르빌-2-글루코시드, 대두 추출물, 나이아신아미드, 및 이들의 둘 이상의 배합물을 포함한다.

썬스크린의 예에는 UV-A 및 UV-B 흡수 썬스크린이 포함된다. UV-A 흡수 썬스크린은 테트라하이드록시벤조페논; 다이카르복시다이하이드록시벤조페논 및 이의 알칸 에스테르 또는 산 할라이드 유도체; 다이하이드록시-, 다이카르복시-, 및 하이드록시카르복시다이벤조일메탄 및 이들의 알칸 에스테르 또는 산 할라이드 유도체; 다이하이드록시-, 다이카르복시-, 및 하이드록시카르복시스틸벤 및 이들의 알칸 에스테르 또는 산 할라이드 유도체; 비스(하이드록시스티레닐) 벤젠; 비스(카르복시스티레닐)벤젠 및 이들의 알칸 에스테르 또는 산 할라이드 유도체; 다이하이드록시-, 다이카르복시, 및 하이드록시카르복시카로틴 및 이들의 알칸 에스테르 또는 산 할라이드 유도체; 2 시아노 - 3,3 - 다이페닐 아크릴산, 2-에틸 헥실 에스테르; 및 320-400 ㎚ 범위의 자외광을 흡수할 수 있는 중합체 사슬 내에서 공중합가능한 임의의 적당하게 작용화된 화학종을 포함한다.

일 실시 형태에서, 썬스크린은 UV-흡수 트라이아졸 및/또는 UV-흡수 벤조일메탄, 예를 들어 메틸렌 비스-벤조트라이아졸릴 테트라메틸부틸페놀 (틴소르브(TINSORB) M, 미국 노스캐롤라이나주 그린스보로 소재의 시바 스페셜티 케미칼스 코포레이션(Ciba Specialty Chemicals Corporation))이다. 다른 UV-흡수 다이벤조일메탄은 2-(4-다이에틸 아미노 - 2 하이드록시벤졸)-벤조산 헥실크에스테르를 포함하며, 이는 미국 뉴저지주 파시파니 소재의 바스프(BASF)로부터 유비눌 A 플러스(UVINUL A Plus)로 구매가능하다.

UV-흡수 다이벤조일메탄은 미국 특허 제4,489,057호에 개시되어 있으며, 4-(1,1-다이메틸에틸)-4'-메톡시다이벤조일메탄 (아보벤존, 미국 뉴저지주 너틀리 소재의 로슈 비타민즈 앤드 파인 케미칼즈(Roche Vitamins and Fine Chemicals)에서 파르솔(PARSOL) 1789로 판매됨), 2- 2-메틸다이벤조일메탄, 4- 메틸-다이벤조일메탄, 4-아이소프로필다이벤조일메탄, 4-tert-부틸다이벤조일메탄, 4-tert-부틸-4'-메톡시다이벤조일메탄 , 2,4-다이메틸벤조일메탄, 2,5- 다이메틸벤조일메탄, 4,4'-다이아이소프로필벤조일메탄, 2-메틸-5-아이소프로필-4'-메톡시다이벤조일메탄, 2-메틸-5-tert-부틸-4'-메톡시다이벤조일메탄, 2,4-다이메틸-4'- 메톡시다이벤조일메탄, 및 2,6-다이메틸-4-tert-부틸-4'-메톡시다이벤조일메탄을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

적합한 UV-B 흡수 썬스크린의 예에는 4-아미노벤조산 및 이의 알칸 에스테르; 안트라닐산 및 이의 알칸 에스테르; 살리실산 및 이의 알칸 에스테르, 이들의 하이드록시신남산 알칸 에스테르; 다이하이드록시-, 다이카르복시-, 및 하이드록시카르복시벤조페논 및 이들의 알칸 에스테르 또는 산 할라이드 유도체; 다이하이드록시-, 다이카르복시-, 및 하이드록시카르복시칼콘 및 이들의 알칸 에스테르 또는 산 할라이드 유도체; 다이하이드록시-, 다이카르복시-, 및 하이드록시카르복시쿠마린 및 이들의 알칸 에스테르 또는 산 할라이드 유도체; 및 중합체 사슬 내에서 공중합가능한 다른 적당하게 작용화된 화학종이 포함된다.

특히 적합한 UV-B 흡수 부분은 UV-흡수 벤조페논 및 UV-흡수 다이페닐시아노아크릴레이트 유도체를 포함한다. 벤조페논 유도체의 예에는 UV 방사선으로부터의 피부의 보호를 제공하는 당업계에 공지된 것, 예를 들어 미국 특허 제5,776,439호에 교시된 것이 포함된다. 바람직한 화합물은 2-하이드록시-4-메톡시벤조페논 (옥시벤존) 및 2-2'다이하이드록시-4-메톡시벤조페논 ("다이옥시벤존") 및 다이에틸아민 하이드록시벤조일 헥실 벤조에이트 ("하이드록시벤조페논")를 포함한다. 다이페닐시아노아크릴레이트 유도체의 예에는 2-에틸헥실 2-시아노-3,3-다이페닐-2-프로페노에이트 (옥토크릴렌)가 포함된다.

썬스크린은 "유기 썬스크린" (UV 필터로도 공지됨), 예를 들어 UV 방사선을 흡수하는 상기에 기재된 것일 수 있지만, 소정 실시 형태에서 제형은 일반적으로 UV 방사선을 산란시키는 수불용성 미립자형 화합물인 "물리적" 썬스크린을 또한 포함할 수 있다. 이러한 물리적 썬스크린의 예에는 산화아연 및 산화티타늄이 포함된다.

일 실시 형태에서, 국소 제형은 페닐벤즈이미다졸 설폰산, 메틸렌 비스-벤조트라이아졸릴 테트라메틸부틸페놀, 에틸헥실 살리실레이트, 옥토크릴렌, 벤조페논-3, 에틸헥실 트라이아존, 아보벤존, 호모살레이트, 비스-에틸헥실옥시페놀 메톡시페닐 트라이아진 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 썬스크린을 포함한다.

일 실시 형태에서, 국소 제형은 하나 이상의 추가의 항염증제를 포함한다. 적합한 항염증제의 예에는 치환된 레소르시놀, (E)-3-(4-메틸페닐설포닐)-2-프로펜니트릴(예를 들어 "베이(Bay) 11-7082", 미국, 미주리주 세인트루이스 소재의 시그마-알드리치로부터 구매가능함), 테트라하이드로커큐미노이드(예를 들어 테트라하이드로커큐미노이드 CG, 미국 뉴저지주 피스카타웨이 소재의 사빈사 코포레이션(Sabinsa Corporation)으로부터 입수가능함), 파울로우니아 토멘토사(Paulownia tomentosa) 목재의 추출물 및 하기로부터 유래된 추출물 및 재료가 포함된다:

펠로덴드론 아무렌세 피질 추출물(Phellodendron Amurense Cortex Extract; PCE)

비-변성 대두(글라이신 맥스(Glycine max))

피버퓨(Feverfew)(타나세툼 파르테늄(Tanacetum parthenium))

생강(진기베르 오피시날레(Zingiber officinale))

은행(긴코 빌로바(Ginko Biloba))

마데카소사이드(센텔라 아시아티카(Centella asiatica) 추출물 성분)

안개나무(Cotinus)(콘티누스 코기그리아(Cotinus coggygria))

머위 추출물(페타시테스 하이브리두스(Petasites hybridus))

구기자(라이시움 바르바룸(Lycium barbarum))

밀크시슬 추출물(실리붐 마리아눔(Silybum marianum))

인동덩굴(로니세라 자포니카(Lonicera japonica))

발삼 오브 페루(Basalm of Peru)(마이록실론 페레이라에(Myroxylon pereirae))

세이지(살비아 오피시날리스(Salvia officinalis))

크랜베리 추출물(바시늄 옥시코코스(Vaccinium oxycoccos))

아마란스유(아마란투스 크루엔투스(Amaranthus cruentus))

석류(푸니카 그라나툼(Punica granatum))

예르베 마테(일렉스 파라구아리엔시스(Ilex paraguariensis) 잎 추출물)

화이트 릴리 꽃 추출물(릴리움 칸디둠(Lilium Candidum))

올리브 잎 추출물 (올레아 유로파에아(Olea europaea))

플로레틴(사과 추출물)

귀리 가루(아비나 사티바(Aveena Sativa))

리페놀(홉: 후물루스 루풀루스(Humulus lupulus)) 추출물

부그란(Bugrane) P(오노니스 스피노사(Ononis spinosa))

리코칼콘(Licochalcone)(감초: 글라이시리자 인플레이트(Glycyrrhiza inflate) 추출물 성분)

심릴리프(Symrelief)(비스아볼올 및 생강 추출물)

및 이들의 둘 이상의 배합물 등.

레소르시놀은 하기 구조를 갖는 다이하이드록시 페놀 화합물(즉, 1,3 다이하이드록시벤젠)이다:

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "치환된 레소르시놀"은 2, 4, 5, 또는 6 위치에 적어도 하나의 치환체를 포함하는 레소르시놀을 의미한다. 따라서, 치환된 레소르시놀은 1개 내지 4개의 치환체를 가질 수 있다. 상기에 나타낸 바와 같이, 치환된 레소르시놀의 위치 1 및 위치 3은 -OH 기를 포함한다.

치환된 레소르시놀이 항염증에 사용되는 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 모든 치환체에 페닐(-C6H5 방향족) 부분이 없는 것이 고도로 바람직하다. 특정 실시 형태에서, 모든 치환체에는 방향족 부분(헤테로원자가 있거나 없음)이 없다. 특정한 이러한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 모든 치환체에는 케톤 작용기(2개의 다른 탄소 원자에 결합된 카르보닐)가 없다는 것이 바람직하다. 특정한 다른 이러한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 모든 치환체에는 페닐 작용기 및 케톤 작용기 둘 모두가 없다. 특정한 다른 이러한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 5 내지 11개의 탄소 원자, 바람직하게는 5 내지 10개의 탄소 원자, 더욱 바람직하게는 5 내지 9개의 탄소 원자, 가장 바람직하게는 5 내지 8개의 탄소 원자를 포함하는 적어도 하나의 치환체를 포함한다. 특정한 다른 이러한 실시 형태에서, 적어도 하나의 치환체는 상기 기재된 탄소 원자의 수를 갖는 것과 같은 알킬 기를 포함한다. 알킬 기는 바람직하게는 불포화된다.

특정 실시 형태에서, 레소르시놀의 4 위치는 치환되고, 특정 실시 형태에서, 4 위치만 치환된다. 다른 실시 형태에서, 4 위치는 알킬 기로 치환된다. 특정한 바람직한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 알킬 기를 포함하는, 4 위치에서 단일 치환체를 포함한다. 특정 다른 바람직한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 벤젠 고리에 직접 결합된 알킬 기로 이루어진, 4 위치에서 단일 치환체를 포함한다.

항염증제에 특히 적합한 치환된 레소르시놀은 4-헥실 레소르시놀 및 4-옥틸레소르시놀, 특히 4-헥실 레소르시놀을 포함한다. 4-헥실레소르시놀 및 4-옥틸레소르시놀의 구조는 하기에서 보여진다:

4-헥실 레소르시놀은 미국 뉴저지주 링컨 파크 소재의 사이테온(Sytheon)으로부터 사이노베아 HR(SYNOVEA HR)로서 구매가능하다. 4-옥틸레소르시놀은 미국 코네티컷주 웨스트 하벤 소재의 시티 케미칼즈 엘엘씨(City Chemical LLC)로부터 구매가능하다.

특정 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 2, 4, 5, 또는 6 위치에서 적어도 2개의 치환체를 포함한다. 그러한 치환체는 임의로 연결되어 고리, 예컨대, 황 또는 산소와 같은 헤테로원자를 임의로 포함하는 환형 지방족 탄화수소를 형성할 수 있다. 그러한 연결된 치환체는 5 내지 10개의 탄소 원자, 예를 들어, 8 내지 10개의 탄소 원자를 포함할 수 있고, 임의로 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함한다. 2 및 3 위치를 결합시키는 환형 지방족 치환체를 포함하는 적합한 치환된 레소르시놀의 예는 제아랄라논(Zearalanone) 및 β-제아랄라놀(β-Zearalanol)을 포함한다:

제아르알라논 및 β-제아르알라놀은 미국 미주리주 세인트 루이스 소재의 시그마 케미칼스(Sigma Chemicals)로부터 구매가능하다.

특정한 다른 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 할라이드-함유 및/또는 니트로소-함유 치환체를 포함한다. 적합한 예는 벤젠 고리에 직접 결합된 -Cl 또는 -N=O를 함유한다. 이들 치환체는 예를 들어, 2 및 4, 2 및 6, 또는 4 및 6 위치에서 존재할 수 있다. 다이할라이드-치환된 레소르시놀의 예는 2,6-다이클로로레소르시놀이다. 다이니트로소-치환된 레소르시놀의 예는 2,4-다이니트로소소르시놀이다:

2,6-다이클로로레소르시놀 및 2,4-다이니트로소소르시놀은 미국 코네티컷주 웨스트 하벤 소재의 시티 케미칼 LLC(City Chemical LLC)로부터 입수가능하다.

치환된 레소르시놀은 당업계에 알려진 수단에 의해, 예를 들어, 그 전체가 본원에 참조로서 삽입된 미국 특허 제 4,337,370 호에서 기재된 기술을 사용해 제조된다.

치환된 레소르시놀은 임의의 적합한 분자량을 가질 수 있다. 특정 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 분자량의 범위는 약 175 내지 약 300이다.

"피버퓨의 추출물"은, 발명의 명칭이 피버퓨(타나세툼 파르테늄)로부터의 무-파르테놀라이드 생활성 성분 및 이의 제조 방법(PARTHENOLIDE FREE BIOACTIVE INGREDIENTS FROM FEVERFEW (TANACETUM PARTHENIUM) AND PROCESSES FOR THEIR PRODUCTION)인 미국 특허 공개 제2007/0196523호에 개시된 상세한 내용에 따라 제조될 수 있는 것과 같은, 식물 "타나세툼 파르테늄"의 추출물을 의미한다. 하나의 특히 적합한 피버퓨 추출물은 미국 뉴욕주 오시닝 소재의 인티그레이티드 보태니컬 테크놀로지즈(Integrated Botanical Technologies)로부터 약 20% 활성 피버퓨로서 구매가능하다.

파울로우니아는 아시아가 기원이고 유럽 및 미국으로 점차적으로 퍼져 나간 식물의 속(genus)이다. 일본에서, 파울로우니아는 "참오동나무(Princess Tree)"로도 불리우는 한 가지 종, 파울로우니아 토멘토사를 구체적으로 말하는 키리(Kiri)로 불리운다. 일반적으로 사용되는 다른 명칭으로는 "여왕나무(empress tree)" "폭스글러브 트리(Foxglove Tree)" "왕실 파울로우니아(Royal Paulownia)" "파오 통(Pao tong)" (중국에서) 및"오동나무(Odong-Namoo)" (한국에서)가 있다. 학명은 "파울로우니아 토멘토사"이며, 이때 다수의 이명, 즉 "파울로우니아 임페리알리스(Paulownia imperialis)", "파울로우니아 레쿠르바(Paulownia recurva)" 및"비그노니아 토멘토사(Bignonia tomentosa)"가 다양한 문헌에 보고되어 있다. 파울로우니아 토멘토사는 때로 "현삼과(Scrophulariaceae)"로도 칭해지는 "오동나무과(family Paulowniaceae)"에 속한다. 미국 농무부(plants.USDA.gov) 식물 데이터베이스에서는 파울로우니아 토멘토사 및 파울로우니아 임페리알리스를 이명으로 하여 참오동나무를 고유 상징 "PATO2"로 확인된다.

파울로우니아 토멘토사 목재의 임의의 적합한 추출물이 사용될 수 있다. 일반적으로, 파울로우니아 토멘토사 나무의 목재는 줄기, 가지, 또는 둘 모두의 조합으로부터의 목재를 포함한다. 파울로우니아 토멘토사 목재의 적합한 추출물은 우드 칩(wood chip), 우드 더스트(wood dust) 및/또는 작은 나뭇조각 등으로부터 유도될 수 있다.

본 발명의 조성물은 화장용으로 유효한 양의 하나 이상의 추가의 항염증성 화합물을 포함할 수 있다. 조성물은 바람직하게는 활성물 기준으로 약 0.1% 내지 약 10%, 더 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 5%의 추가의 항염증성 화합물을 포함한다.

필란투스 니루리의 저분자량 분획물, 화장품용으로 허용가능한 국소 담체 및 선택적인 추가의 화장품용 활성제를 임의의 비율로 배합하여 국소용에 적합한 국소 제형을 형성할 수 있다. 본 발명의 일 실시 형태에서, 국소 제형은 약 0.0001 중량% 이상, 예를 들어 약 0.1 중량% 이상의 필란투스 니루리의 저분자량 추출물을 포함한다. 특정한 실시 형태에서, 국소 제형은 약 0.5 중량% 이상, 말하자면 약 0.75 중량% 내지 약 2.0 중량%, 또는 약 5.0 중량%를 포함하여 최대 약 5.0 중량%까지의 필란투스 니루리의 저분자량 분획물을 포함한다.

조성물 또는 제형의 피부 미백 용도를 포함하는 실시 형태에 있어서, "~의 피부 미백 유효량"은 하기 실시예 IX에 기재된 바와 같이 피부 미백 시험 (ΔL)으로서의 피부 표피 등가물 모델에 있어서 0보다 큰 ΔL 값을 성취하기에 효과적인 추출물의 양을 의미한다. 특정한 바람직한 실시 형태에서, 피부 미백 유효량은 약 1 이상의 ΔL 값을 성취하기에 효과적인 양이다.

염증 감소에 있어서의 조성물의 용도에 관련된 본 발명의 실시 형태에 있어서, "염증 감소에 유효한 양"은 하기 실시예 VI의 IL-8에 있어서의 재구성된 표피 상에서의 UV-유도된 전염증성 매개자의 방출에 대한 항염증 효과에 대한 절차에 따라 측정할 경우 0보다 큰 피부 염증 (IL-8)의 억제%를 제공하는 양을 의미한다. 특정한 바람직한 실시 형태에서, 노화 징후를 개선하는 데 유효한 양은 하기 실시예 VI의 IL-8에 있어서의 재구성된 표피 상에서의 UV-유도된 전염증성 매개자의 방출에 대한 항염증 효과에 대한 절차에 따라 측정할 경우 약 10% 이상인 큰 피부 염증 (IL-8)의 억제%를 제공하는 양이다.

필란투스 니루리의 저분자량 분획물로 본질적으로 이루어진 조성물을 포함하는 국소 제형은 상기에 기재된 바와 같이 피부 노화의 하나 이상의 징후의 처리를 필요로 하는 포유류 피부에 국소적으로 도포될 수 있다. 일 실시 형태에 있어서, 국소 제형은 주름 및 주름살 및/또는 탄력 상실에 대한 처리를 필요로 하는 피부에 도포된다. 다른 실시 형태에서, 국소 제형은 피부 염증 감소를 필요로 하는 피부에 도포된다. 다른 실시 형태에서, 국소 제형은 피부에 있어서 외부 침범 (예를 들어, 일광 노출 후 사용용) 처리에 사용된다. 추가의 실시 형태에서, 국소 제형은 피부 미백을 필요로 하는 피부의 미백에 사용된다. 국소 제형은 적합한 처리 요법, 예를 들어 매달, 매주, 격일로, 매일, 하루에 2회 등에 따라 이러한 처리를 필요로 하는 피부에 도포될 수 있다.

특정한 실시 형태에서, 본 발명의 국소 제형은 또한 피부와 관련된 다른 요구를 처리하는 데 유용할 수 있다. 예를 들어, 국소 제형은 염증후 탈색소/과다색소침착의 처리, 모공 크기의 감소, 여드름 치료, 및 흉터 완화에 유용할 수 있다. 특정한 다른 실시 형태에서, 국소 제형은 마이크로더마브레이젼(microdermabrasion) 처리와 같은 기계적 또는 물리적 박리제, 또는 살리실산과 같은 각질 용해제 또는 화학적 박리제와 동시에 또는 이의 수 시간 내에 적용될 수 있다. 특정한 다른 실시 형태에서, 국소 제형은 점막 또는 다른 조직, 예를 들어, 질, 구강, 또는 눈의 조직에 도포된다. 특정한 다른 실시 형태에서, 국소 제형은 치유를 촉진하기 위해 가벼운 상처 또는 수술후 부위에, 곤충 자상에, 옻에, 또는 유사한 피부 상태에, 또는 일반적으로 가려움을 완화하기 위해 도포된다. 특정한 다른 실시 형태에서, 국소 제형은 피부 자극을 완화시키기 위하여 도포된다. 이러한 자극은 외부 기원의 것일 수 있으며, 즉 피부 케어 제품 및 화장품 중 성분, 예를 들어 레티노이드 및 그 유도체, 벤조일 퍼옥사이드, 알파-하이드록시산 및 이들의 유도체, 살리실산, 계면활성제, 천연 식물 추출물, 썬스크린 활성제, 우레아 및 보존제 등에 의해 야기될 수 있다. 이러한 자극은 일광, 바람 또는 면도와 같은 다른 외부 기원의 것일 수 있다. 또한 자극은 여드름, 주사, 아토피성 피부염 및 기타 질환 상태와 같은 질환 및 병태에 의해 야기될 수 있다.

당업자는 본 명세서의 설명에 기초하여, 본 발명을 가장 완전한 범위까지 이용할 수 있을 것으로 여겨진다. 하기의 구체적인 실시 형태는 단지 예시적인 것으로 이해되어야 하며, 어떤 방식으로도 본 개시문헌의 나머지를 제한하는 것으로 이해되어서는 안된다. 하기 비제한적인 실시예는 추가로 본 발명을 예시한다.

실시예 I

필란투스 니루리의 4가지의 상이한 용매 추출물을 제조하였다. 필란투스 니루리 (미국 네바다주 카슨 시티 소재의 레인트리 뉴트리션, 인크.(Raintree Nutrition, Inc.))는 메탄올, 헥산, 에틸 아세테이트 및 물 각각에서 60℃에서의 30분 동안의 초음파 처리에 의해 별도로 추출하였다. 용매 추출물에서 분자량 분획화는 전혀 실시하지 않았으며, 이들 각각을 와트만 여과지를 이용하여 뷔흐너 깔때기를 통한 여과에 의해 회수하였다. 휘발성 물질을 동결 건조에 의해 증발시켰다.

실시예 II

실시예 I의 필란투스 니루리의 용매 추출물의 효소 활성을 엔즈체크(EnzChek) 콜라게나아제 분석법을 이용하여 콜라게나아제 억제에 대하여 평가하였다. 돼지 피부 유래의 DQ 엘라스틴 (기질)에서의, 클로스트리듐 히스토라이티쿰(Clostridium histolyticum) 유래의 제IV형 콜라게나아제 효소의 활성을 억제하는 각각의 용매 추출물의 능력을 마이크로플레이트 판독기에서 형광 분석하였다. IC50 값을 하기 표 1에 나타낸다.

[표 1]

필란투스 니루리의 물 추출물은 메탄올, 헥산 또는 에틸 아세테이트 추출물보다 사실상 더 큰 콜라게나아제 억제를 제공하였다.

실시예 III

51.2 g의 필란투스 니루리 (미국 네바다주 카슨 시티 소재의 레인트리 뉴트리션, 인크.)는 60℃에서의 30분 동안의 초음파 처리에 의해 320 ㎖의 물로 추출하였다. 와트만 여과지를 이용하여 뷔흐너 깔때기를 통하여 여과시킴으로써 액체상을 제거하였다.

젤 분획화 컬럼에 60 g의 XAD-4 수지 (비이온성 가교결합 중합체 수지)를 패킹하였다. 수지를 철저하게 물 (1 L 부피), 물-메탄올 (50:50, 1 L), 메탄올 (1 L)로 순서대로 세척하고, 물로 컨디셔닝한 후 로딩하였다. 상기에서 제조한 물 추출물을 스펙트럼 미니크로스 (미국 캘리포니아주 란초 도밍구에즈 소재의 스펙트럼 래보러토리즈, 인크.(Spectrum Laboratories, Inc.))를 이용하여 100 kD 막에 통과시켜 작은 분자를 농축 및 분리하여 물 추출물의 저분자량 분획물을 생성하였다.

필란투스 니루리의 비교용 물 추출물은 분획화하지 않았다(즉, 이것은 저분자량 화학종 및 고분자량 화학종 둘 모두를 함유하였다).

휘발성 물질을 동결 건조에 의해 증발시켰다.

둘 모두의 물 추출물의 효소 활성을 콜라게나아제 효소 활성에 대하여 평가하였다. IC50 값을 하기 표 2에 나타낸다.

[표 2]

이들 결과는 필란투스 니루리 물 추출물의 저분자량 분획물이 고분자량 화학종 및 저분자량 분자종 둘 모두를 함유하는 필란투스 니루리 물 추출물보다 사실상 더 큰, 즉 3배 초과로 더 큰 콜라게나아제 억제를 제공함을 입증한다.

실시예 IV

51.2 g의 필란투스 니루리 (미국 네바다주 카슨 시티 소재의 레인트리 뉴트리션, 인크.)는 60℃에서의 30분 동안의 초음파 처리에 의해 320 ㎖의 물로 추출하였다. 와트만 여과지를 이용하여 뷔흐너 깔때기를 통하여 여과시킴으로써 액체상을 제거하였다.

젤 분획화 컬럼에 60 g의 XAD-4 수지 (비이온성 가교결합 중합체 수지)를 패킹하였다. 수지를 철저하게 물 (1 L 부피), 물-메탄올 (50:50, 1 L), 메탄올 (1 L)로 순서대로 세척하고, 물로 컨디셔닝한 후 로딩하였다. 상기에서 제조한 물 추출물을 스펙트럼 미니크로스 (미국 캘리포니아주 란초 도밍구에즈 소재의 스펙트럼 래보러토리즈, 인크.)를 이용하여 100 kD 막에 통과시켜 작은 분자를 농축 및 분리하여 6.4 g의 저분자량 분획물 및 2.8 g의 고분자량 분획물을 생성하였다.

필란투스 니루리의 물 추출물의 상이한 샘플들(즉, 상기에서 제조한 고분자량 분획물 및 저분자량 분획물과, 분획화하지 않은 모든 분자량의 화학종을 함유하는 물 추출물)에서 트로포엘라스틴 프로모터 분석을 행하였다.

구체적으로, 쥐 심근아세포 H9C2 세포를 ATCC (미국 버지니아주 매너서스 소재)로부터 구매하였다. 10% 소 태아 혈청, 100 단위/㎖의 페니실린 및 50 ug/㎖의 스트렙토마이신 (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스(Invitrogen life technologies))이 보충된 둘베코 변형 이글 배지(Dulbecco's modified Eagle's medium; 미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스로부터의 DMEM)에서 배양물을 유지하였다.

엘라스틴 프로모터-루시퍼라아제 리포터 제작물(Elp2.2 - 프로메가(Promega; 미국 위스콘신주 매디슨 소재)로부터 획득한, 반딧불이 루시퍼라아제 유전자를 구동하는, nt -2267 내지 nt +2의 2.2 kb 엘라스틴 프로모터 단편)을 사용하여 세포 배양물을 일시적으로 트랜스펙션시켰다. 모든 트랜스펙션에서, 티미딘 키나아제 프로모터 및 레닐라(Renilla) 루시퍼라아제 리포터 유전자(pRL-TK, 미국 위스콘신주 매디슨 소재의 프로메가)를 갖는 제작물을 내부 대조군으로서 포함시켰다.

48웰 플레이트에서 성장시킨 세포를, 리포펙타민(Lipofectamine) 2000 (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스)을 사용하여, 웰당 0.45 ug의 전체 DNA로 트랜스펙션시켰다. 트랜스펙션한지 1일 후, 세포를 다수의 농도의 필란투스 니루리의 물 추출물 (전 분획물, 고분자량 분획물, 또는 저분자량 분획물)로 대략적으로 24시간 동안 처리한 후, 제조업자의 프로토콜에 따라 프로메가 (미국 위스콘신주 매디슨 소재)로부터의 이중-루시퍼라아제 리포터 시스템(Dual-Luciferase Reporter System)을 이용하여 루시퍼라아제 분석용으로 세포를 용해시켰다. 몰레큘러 디바이시즈(미국 캘리포니아주 서니베일 소재)로부터의 발광측정기 LMAX를 사용하여, 먼저 반딧불이 루시퍼라아제 활성(엘라스틴 프로모터 활성을 나타냄), 이어서 레닐라 루시퍼라아제(내부 대조군)를 측정하였다. 이들 둘의 루시퍼라아제 활성의 비(RLU)를 사용하여 각각의 샘플의 활성을 평가하였다.

트로포엘라스틴 프로모터 분석에 처하기 전에, 각각의 물 추출물을 1.0 mg/㎖의 스톡 농도로 DMSO-물 (50:50)에 용해시키고, 상기 스톡으로부터 2% 혈청을 함유하는 조직 배양 배지 내로 희석시켰다.

결과가 하기 표 3에 나타내어져 있다.

[표 3]

필란투스 니루리 물 추출물의 저분자량 분획물은 고분자량 화학종 및 저분자량 화학종 둘 모두를 함유하는 필란투스 니루리 물 추출물에 비하여 트로포엘라스틴 촉진을 상당히 증가시켰다. 트로포엘라스틴 촉진은 모든 분자량의 화학종을 함유하는 물 추출물 (1.85)에 비하여 저분자량 분획물 (2.35)에 있어서 27% 더 높았다.

실시예 V

실시예 III에 설명한 필란투스 니루리의 물 추출물의 샘플들(즉, 고분자량 분획물 및 저분자량 분획물과, 전 범위의 분자량의 화학종을 함유하는 물 추출물)에서 하기와 같이 콜라겐 프로모터 분석을 행하였다.

쥐 심근아세포 H9C2 세포를 ATCC (미국 버지니아주 매너서스 소재)로부터 구매하였다. 10% 소 태아 혈청, 100 단위/㎖의 페니실린 및 50 ug/㎖의 스트렙토마이신 (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스)이 보충된 둘베코 변형 이글 배지(미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스로부터의 DMEM)에서 배양물을 유지하였다.

프레마스 바이오테크 피브이티. 리미티드(PREMAS Biotech Pvt. Ltd; 인도 하리아나 소재)로부터 획득한, 반딧불이 루시퍼라아제 유전자를 구동하는, 콜라겐 1A 프로모터-루시퍼라아제 리포터 제작물을 사용하여 세포 배양물을 일시적으로 트랜스펙션시켰다. 모든 트랜스펙션에서, 티미딘 키나아제 프로모터 및 레닐라 루시퍼라아제 리포터 유전자(pRL-TK, 미국 위스콘신주 매디슨 소재의 프로메가)를 갖는 제작물을 내부 대조군으로서 포함시켰다.

48웰 플레이트에서 성장시킨 세포를, 리포펙타민 2000 (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스)을 사용하여, 웰당 0.45 ug의 전체 DNA로 트랜스펙션시켰다. 트랜스펙션한지 1일 후, 세포를 다수의 농도의 필란투스 니루리 (전 분획물, 고분자량 분획물, 또는 저분자량 분획물)로 대략적으로 24시간 동안 처리한 후 제조업자의 프로토콜에 따라 프로메가 (미국 위스콘신주 매디슨 소재)로부터의 이중-루시퍼라아제 리포터 시스템을 이용하여 루시퍼라아제 분석용으로 세포를 용해시켰다. 몰레큘러 디바이시즈(미국 캘리포니아주 서니베일)로부터의 발광측정기 LMAX를 사용하여, 먼저 반딧불이 루시퍼라아제 활성(콜라겐 프로모터 활성을 나타냄), 이어서 레닐라 루시퍼라아제(내부 대조군)를 측정하였다. 이들 둘의 루시페라제 활성의 비(RLU)를 사용하여 각각의 프로모터의 활성을 평가하였다.

콜라겐 프로모터 분석에 처하기 전에, 각각의 물 추출물을 1.0 mg/㎖의 스톡 농도로 DMSO-물 (50:50)에 용해시키고, 상기 스톡으로부터 2% 혈청을 함유하는 조직 배양 배지 내로 희석시켰다.

결과가 하기 표 4에 나타내어져 있다.

[표 4]

필란투스 니루리 물 추출물의 저분자량 분획물은 전 범위의 분자량을 포함하는 필란투스 니루리 물 추출물에 비하여 콜라겐 촉진을 상당히 증가시켰다. 구체적으로, 저분자량 분획물 (2.03)에 의해 제공된 콜라겐 촉진은 고분자량 화학종 및 저분자량 화학종 둘 모두를 함유하는 물 추출물 (1.51)에 의해 제공된 것에 비하여 34% 더 높았다.

게다가, 이 데이터는 고분자량 분획물이 저분자량 분획물의 효능을 실제로 억제함을 보여준다. 저분자량 분획물은 전체 필란투스 니루리 물 추출물의 대략 69.6 중량% (6.4 g)를 구성하였다. 고분자량 분획물은 전체 필란투스 니루리 물 추출물의 대략 30.4 중량% (2.8 g)였다. 따라서, 전체 물 추출물에 있어서 예상되는 콜라겐 촉진은 (.696 × 2.03) + (.304 × 1.55), 또는 1.88일 것이다. 그러나, 분획화되지 않은 물 추출물에 의해 제공된 실제 콜라겐 촉진은 1.51이었으며, 이는 예상된 값보다 대략 20% 더 낮았다. 이러한 불일치는 고분자량 분획물이 저분자량 분획물의 효능을 억제함을 시사한다.

실시예 VI

필란투스 니루리의 저분자량(LMW) 분획물의 효과를 인간 표피 등가물에서의 국소적 항염증 활성에 대하여 평가하였다. 정상 인간 표피 각질세포로 이루어진 다층의 그리고 분화된 표피인 표피 등가물 (EPI 200 HCF)을 맷텍(MatTek) (미국 매사추세츠주 애쉬랜드)으로부터 구매하였다. 수용시에, 표피 등가물을 하이드로코르티손을 포함하지 않는 유지 배지에서 24시간 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. 배지에 용해시킨 필란투스 니루리의 저분자량(LMW) 분획물로 상기 등가물을 국소 처리하고 (2 mg/㎠) 그 후 태양 자외광 (1-㎜ 쇼트(Schott) WG 320 필터를 갖춘 1000W-오리엘(Oriel) 태양 시뮬레이터(solar simulator); 인가한 UV 선량: 360 ㎚에서 측정할 때 70 kJ/㎡)에 노출시켰다. 등가물을 유지 배지를 이용하여 24시간 동안 37℃에서 인큐베이션한 후 상청액을 구매가능한 키트(미국 매사추세츠주 빌레리카 소재의 밀리포어 코포레이션(Millipore Corp.))를 이용하여 IL-8 및 IL-1α 사이토카인 방출에 대하여 분석하였다. IL-8 방출 및 피부 염증 억제 백분율이 하기 표 5에 나타내어져 있다. 이와 유사하게, IL-1에 대한 결과가 하기 표 6에 나타내어져 있다.

[표 5]

[표 6]

이들 결과를 기반으로 하면, 본 발명의 필란투스 니루리 추출물은 염증성 매개자의 UV-자극된 방출을 유의하게 감소시킬 수 있었다는 결론을 내릴 수 있다. 따라서, 필란투스 니루리 추출물은 피부에 도포될 때 효과적인 항염증 효과를 제공할 것으로 예상된다.

실시예 VII

UV-유도된 과산화수소 형성을 문헌[Martin et al, Arch Dermatol Res. (2008) 300:69-80]의 방법을 수정한 것을 이용하여 재구성 표피 및 인간 상피 세포주, KB에서 결정하였다. 정상 인간 표피 각질세포로 이루어진 다층의 그리고 분화된 표피인 표피 등가물 (EPI 200 HCF)을 맷텍(MatTek) (미국 매사추세츠주 애쉬랜드)으로부터 구매하였다. 수용시에, 표피 등가물을 하이드로코르티손을 포함하지 않는 유지 배지에서 24시간 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. 24시간 후, 조직을 5 μM의 과산화수소-민감성 형광 프로브 5-(및-6)-클로로메틸-2',7'-다이클로로다이하이드로-플루오레세인 다이아세테이트, 아세틸 에스테르 (CM-H2DCFDA) (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 코포레이션)와 함께 30분 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 플레이트를 헹구어 여분의 프로브를 제거하고, 등가물을 배지에 용해시킨 저분자량 수용성 필란투스 니루리 추출물로 국소적으로 처리하였다 (2 mg/㎠). 485 ㎚ 여기/530 ㎚ 방사 파장으로 설정한 형광 플레이트 판독기에서 플레이트를 즉각적으로 판독하여 기저 과산화물 형성을 탐지하였다. 이어서 플레이트를 UV (1 ㎜ 쇼트 WG 320 필터를 갖춘 1000W-오리엘 태양 시뮬레이터; 인가한 UV 선량: 360 ㎚에서 측정할 때 4.2 kJ/㎡)에 노출시켰다. 플레이트를 UV 노출 후 60분에 판독하였다. UV-유도된 ROS의 억제% 및 형광이 하기 표 7에 나타내어져 있다.

[표 7]

이들 결과를 기반으로 하면, 필란투스 니루리의 저분자량(LMW) 분획물의 적용은 재구성된 표피에서 ROS의 UV-자극된 생성을 유의하게 감소시킬 수 있었다는 결론을 내릴 수 있다. 따라서, 피부에 도포될 때, 필란투스 니루리 추출물은 태양광 조사로부터의 ROS의 유도에 대한 보호를 제공할 것으로 예상된다.

실시예 VIII

ATCC (ATCC#CCL-17, 미국 버지니아주 매너서스 소재)로부터 획득한 KB 세포를, 10% 소 태아 혈청이 보충된 둘베코 변형 이글 배지(DMEM) (미국 캘리포니아주 샌디에고 소재의 인비트로겐 코포레이션) 중 5000개의 세포/웰의 밀도로 96웰 조직 배양물 처리 플레이트에 도말하였다. 48시간 후, 세포를 5 μM의 과산화수소-민감성 형광 프로브 5-(및-6)-클로로메틸-2',7'-다이클로로다이하이드로-플루오레세인 다이아세테이트, 아세틸 에스테르 (CM-H2DCFDA) (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 코포레이션)와 함께 30분 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 플레이트를 헹구어 여분의 프로브를 제거하고, 저분자량 수용성 필란투스 니루리 추출물을 지시된 농도로 첨가하였다. 485 ㎚ 여기/530 ㎚ 방사 파장으로 설정한 형광 플레이트 판독기에서 플레이트를 즉각적으로 판독하여 기저 과산화물 형성을 탐지하였다. 이어서 플레이트를 UV (1 ㎜ 쇼트 WG 320 필터를 갖춘 1000W-오리엘 태양 시뮬레이터; 인가한 UV 선량: 360 ㎚에서 측정할 때 4.2 kJ/㎡)에 노출시켰다. 플레이트를 UV 노출 후 60분에 판독하였다.

UV-유도된 ROS의 억제% 및 형광이 하기 표 8에 나타내어져 있다.

[표 8]

이들 결과를 기반으로 하면, 필란투스 니루리의 저분자량(LMW) 분획물의 적용은 인간 상피 세포에서 ROS의 UV-자극된 생성을 유의하게 감소시킬 수 있었다는 결론을 내릴 수 있다. 따라서, 피부에 도포될 때, 필란투스 니루리 추출물은 태양광 조사로부터의 ROS의 유도에 대한 보호를 제공할 것으로 예상된다.

실시예 IX

피부 표피 등가물 조직은 맷텍 멜라노덤 시스템(MatTek's MelanoDerm™ System)으로부터 구매가능하며, 하기 시험에 사용하였다. 맷텍 멜라노덤 시스템은 정상의 인간-유래 표피 케라티노사이트 (NHEK) 및 멜라노사이트 (NHM)로 구성되며, 이것은 배양되어 다층의 고도로 분화된 인간 표피 모델을 형성한다. 구체적으로, 직경이 각각 9 ㎜인 MEL-300-B 조직을 하기 시험에서 사용하였다.

적절한 비히클 (물) 및 시험 농도에서 제조된 시험 물질을 피부 모델에 매일 국소 도포하였고, 실험을 8일 동안 지속하였다. 제9일에 측정을 수행하였다.

디지털 카메라로 사진을 찍어서, 거시적 및 미시적 시각으로 조직 다크닝 종점을 측정하였다. 조직 각각에 대한 미백 정도 (L- 값)를 분광 광도계 (코니카 미놀타(Konica Minolta) CM-2600d)를 사용하여 측정하였다. 시험 샘플 각각에 대한 ΔL (대조군과 비교한 미백 정도)은 하기 수학식에 따라 계산한다:

ΔL = (처리된 샘플의 L-값) - (대조군 샘플의 L-값).

피부 미백 시험으로부터의 결과가 하기 표 9에 나타내어져 있다.

[표 9]

실시예 X

본 발명에 따른 국소 제형을 표 10 및 표 11에 나타낸 성분들을 이용하여 제조하였다.

[표 10]

이 국소 제형을 하기와 같이 제조하였다.

수상

단계 1. 20 내지 40℃의 온도에서 퓨리파이드 워터를 주 용기에 충전하였다.

단계 2. 잔탄 검 NF를 주 용기에 첨가하였다. 덩어리 투성이일 경우 30 메시 스크린을 사용할 수 있다.

단계 3. 주 용기의 벽을 퓨리파이드 워터로 헹구어 임의의 잔탄 검을 벽으로부터 제거하였다.

단계 4. 배치를 15- 25분 동안 혼합하였다. 상기 검의 수화를 체크하였다.

단계 5. 글리세린 USP 스페셜 및 에데테이트 다이소듐 USP를 첨가하였다.

단계 6. 혼합하면서 배치를 65℃ (63- 67℃)로 가열하였다.

오일상

단계 1. 청결한 적합한 상 용기 내로 하기 화학물질들을 이 순서로 첨가하였다: 중쇄 트라이글리세라이드, 피마자유, 코코아 버터 및 사전용융 바셀린 USP.

단계 2. 오일상 온도를 65℃ (63- 67℃)로 설정하고, 중속에서의 혼합을 시작하였다.

단계 3. 배치를 65℃로 가열하면서 하기 화학물질들을 이 순서로 첨가하여 각각을 그 다음 것의 첨가 전에 용해시켰다: 글리세릴 스테아레이트 SE, 세틸 알코올, 유화 왁스 및 글리세릴 스테아레이트.

단계 4. 온도가 65℃ (63- 67℃)에 도달하였을 때, 성분들을 15 - 25분 동안 혼합하였다.

주 용기, 배치의 상 생성

단계 1. 둘 모두의 상이 균질하고, 63- 67℃의 온도일 때, 수상을 중속에서 혼합하면서 오일상을 수상으로 이전시켰다.

단계 2. 이전이 완료되었을 때, 오일상 탱크를 퓨리파이드 워터로 헹구었다. 헹군 것을 63- 67℃로 가열하고, 주 용기에 첨가하였다.

단계 3. 배치를 10- 20분 동안 혼합하였다.

단계 4. 배치를 40℃ (38- 42℃)로 냉각시켰다.

단계 5. 온도가 48- 50℃일 때 혼합 속도를 중속-고속으로 증가시켰다.

단계 6. 필란투스 니루리 (1% 활성물)를 첨가하였다.

단계 7. 온도가 44℃ 이하일 때, 다이아졸리디닐 우레아 예비혼합물을 첨가하였다.

단계 8. 요오도프로필 부틸카르바메이트를 첨가하였다.

단계 9. 배치를 5 - 10분 동안 혼합하였다.

단계 10. 필요할 경우, 배치를 퓨리파이드 워터로 QS하였다.

단계 11. 혼합을 계속하고, 32- 34℃로의 배치의 냉각을 시작하였다.

단계 12. 배치가 33℃ (32- 34℃)에 도달하였을 때, 혼합 및 냉각을 종료하였다.

디아졸리디닐 우레아 (게르몰 II) 예비혼합물

단계 1. 퓨리파이드 워터를 스테인리스강 예비혼합물 탱크 내에 첨가하였다.

단계 2. 다이아졸리디닐 우레아를 혼합하면서 첨가하였다.

단계 3. 성분들을 추가로 10 - 20분 동안 혼합하여 완전히 용해시켰다.

단계 4. 예비혼합물을 배치에의 첨가용으로 유지하였다.

[표 11]

이 국소 제형을 하기와 같이 제조하였다:

수상

단계 1. 물을 주 혼합 용기 내에 첨가하고, 혼합을 시작하였다.

단계 2. EDTA BD를 첨가하고, 용해될 때까지 혼합하였다.

단계 3. 혼합 속도를 증가시키고, 페물렌 TR-1을 첨가하였다. 완전히 분산될 때까지 (30 min) 성분들을 혼합하였다.

단계 4. 유소울렉스를 물과 사전혼합하고, NaOH 용액을 수상에 첨가하였다.

단계 5. 혼합을 계속하고, 암피솔 K를 첨가하고, 20분 동안 혼합하였다. 80℃ - 85℃로의 가열을 계속하였다.

단계 6. 상 생성 준비가 될 때까지 온도를 80℃ - 85℃ 사이에서 유지하였다.

오일상

단계 1. 예비혼합물 용기 내로 하기를 하나씩 첨가하고, 혼합하였다:

-네오 헬리오판 OS

-테고소프트 TN

-네오 헬리오판 303

-유비눌 M40

-파르솔 1789

-네오 헬리오판 HMS

-코라판 TQ

-라네트 C16 98-100 MY

-알라셀 165 FL

-센시바 SC-50

-이오놀 CP

-다우 코닝 9701 코스메틱 파우더.

단계 2. 혼합물을 계속 혼합하면서 85℃ - 90℃로 가열하였다.

상 생성

단계 1. 둘 모두의 상이 80℃ - 85℃ 사이일 때, 오일상을 수상에 균질화 하에 첨가하고, 10분 동안 균질화하였다.

단계 2. 성분들을 70℃ - 75℃로 냉각시키고, 수산화나트륨 10% 용액을 첨가하고, 균일해질 때까지 혼합하였다.

단계 3. 온도가 75℃ 미만일 때, 티노소르브 M 및 티노소르브 S를 첨가하고, 10분 동안 혼합하였다. 온도가 45-50C 미만일 때, 스페론 L-1500, 다이메티콘, DC 1403, 및 방향제를 첨가하고, 균일해질 때까지 혼합하였다.

단계 4. 성분들을 35℃ - 40℃로 냉각시켰다.

단계 5. 마이크로케어 MTB를 첨가하고, 균일해질 때까지 혼합하였다.

단계 6. 필란투스 니루리 (1% 활성물)를 첨가하고, 균일해질 때까지 혼합하였다.

단계 7. 성분들을 5분 동안 균질화하였다.

표 10 및 표 11에 나타낸 국소 제형을 50℃ 오븐 내에 1주일 동안 넣어두었으며, 이는 일차적인 우수한 안정성을 나타냈다.

Claims (29)

1. 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종이 사실상 없는 필란투스 니루리(Phyllanthus niruri)의 저분자량 분획물로 본질적으로 이루어진, 조성물.
2. 제1항에 있어서, 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종을 약 5 중량% 미만으로 함유하는, 조성물.
3. 제1항에 있어서, 상기 저분자량 분획물은 필란투스 니루리로부터 물 추출가능한, 조성물.
4. 화장용으로 허용가능한 국소 담체와, 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종이 사실상 없는 필란투스 니루리의 저분자량 분획물로 본질적으로 이루어진 조성물을 포함하는, 국소 제형.
5. 제4항에 있어서, 레티노이드, N,N,N',N'-테트라키스(2-하이드록시프로필)에틸렌다이아민, N,N,N',N'-테트라키스 (2-하이드록시에틸) 에틸렌 다이아민, N,N,N',N'-테트라메틸에틸렌 다이아민 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물을 추가로 포함하는, 국소 제형.
6. 제4항에 있어서, 상기 조성물은 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종을 약 5 중량% 미만으로 함유하는, 국소 제형.
7. 제4항에 있어서, 상기 저분자량 분획물은 필란투스 니루리로부터 물 추출가능한, 국소 제형.
8. 제4항에 있어서, 썬스크린을 추가로 포함하는, 국소 제형.
9. 필란투스 니루리의 저분자량 분획물의 제조 방법으로서, 상기 방법은
   필란투스 니루리의 물 추출물을 형성하기에 충분한 기간 동안 필란투스 니루리를 물을 포함하는 용매와 접촉시키는 단계; 및
   상기 필란투스 니루리의 물 추출물로부터 저분자량 분획물을 단리하는 단계를 포함하는, 필란투스 니루리의 저분자량 분획물의 제조 방법.
10. 제9항에 있어서, 상기 용매는 약 50 중량% 이상의 물을 포함하는, 필란투스 니루리의 저분자량 분획물의 제조 방법.
11. 제9항에 있어서, 상기 저분자량 분획물에는 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종이 사실상 없는, 필란투스 니루리의 저분자량 분획물의 제조 방법.
12. 제9항에 있어서, 상기 저분자량 분획물은 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종을 약 5 중량% 미만으로 함유하는, 필란투스 니루리의 저분자량 분획물의 제조 방법.
13. 제9항에 있어서, 상기 단리 단계는 젤 여과에 의해 실시되는, 필란투스 니루리의 저분자량 분획물의 제조 방법.
14. 제9항에 있어서, 상기 저분자량 분획물 중 남아있는 용매를 제거함을 추가로 포함하는, 필란투스 니루리의 저분자량 분획물의 제조 방법.
15. 피부 노화 징후 처리 방법으로서, 피부 노화 징후 처리를 필요로 하는 피부에, 화장용으로 허용가능한 국소 담체와 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종이 사실상 없는 필란투스 니루리의 저분자량 분획물로 본질적으로 이루어진 조성물을 포함하는 국소 제형을 도포하는 단계를 포함하는, 피부 노화 징후 처리 방법.
16. 제15항에 있어서, 상기 조성물은 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종을 약 5 중량% 미만으로 함유하는, 피부 노화 징후 처리 방법.
17. 제15항에 있어서, 상기 저분자량 분획물은 필란투스 니루리로부터 물 추출가능한, 피부 노화 징후 처리 방법.
18. 제15항에 있어서, 상기 국소 제형은 약 0.1 내지 약 5 중량%의 상기 조성물을 포함하는, 피부 노화 징후 처리 방법.
19. 제15항에 있어서, 상기 국소 제형은 레티노이드, N,N,N',N'-테트라키스(2-하이드록시프로필)에틸렌다이아민, N,N,N',N'-테트라키스 (2-하이드록시에틸) 에틸렌 다이아민, N,N,N',N'-테트라메틸에틸렌 다이아민 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 추가의 노화방지제를 포함하는, 피부 노화 징후 처리 방법.
20. 피부 미백 방법으로서, 피부 미백 처리를 필요로 하는 피부에, 화장용으로 허용가능한 국소 담체와 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종이 사실상 없는 필란투스 니루리의 저분자량 분획물로 본질적으로 이루어진 조성물을 포함하는 국소 제형을 도포하는 단계를 포함하는, 피부 미백 방법.
21. 제20항에 있어서, 상기 조성물은 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종을 약 5 중량% 미만으로 함유하는, 피부 미백 방법.
22. 제20항에 있어서, 상기 저분자량 분획물은 필란투스 니루리로부터 물 추출가능한, 피부 미백 방법.
23. 제20항에 있어서, 상기 국소 제형은 약 0.1 내지 약 5 중량%의 상기 조성물을 포함하는, 피부 미백 방법.
24. 제20항에 있어서, 상기 국소 제형은 페닐에틸 레소르시놀, 4-헥실 레소르시놀, α-아르부틴, 코직산, 니비톨(nivitol), 아스코르빌-2-글루코사이드, 대두 추출물, 니아신아미드 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 추가의 피부 미백제를 포함하는, 피부 미백 방법.
25. 피부 염증 감소 방법으로서, 피부 염증 감소를 필요로 하는 피부에, 화장용으로 허용가능한 국소 담체와 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종이 사실상 없는 필란투스 니루리의 저분자량 분획물로 본질적으로 이루어진 조성물을 포함하는 국소 제형을 도포하는 단계를 포함하는, 피부 염증 감소 방법.
26. 제25항에 있어서, 상기 조성물은 분자량이 약 100,000 달톤 초과인 분자종을 약 5 중량% 미만으로 함유하는, 피부 염증 감소 방법.
27. 제25항에 있어서, 상기 저분자량 분획물은 필란투스 니루리로부터 물 추출가능한, 피부 염증 감소 방법.
28. 제25항에 있어서, 상기 국소 제형은 약 0.1 내지 약 5 중량%의 상기 조성물을 포함하는, 피부 염증 감소 방법.
29. 제25항에 있어서, 상기 국소 제형은 레소르시놀, 피버퓨(Feverfew) 추출물 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 추가의 항염증제를 추가로 포함하는, 피부 염증 감소 방법.