CN102548406B - 合成4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3h-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮(玫瑰红)和有关呫吨的方法 - Google Patents

合成4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3h-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮(玫瑰红)和有关呫吨的方法 Download PDF

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Abstract

制备高纯度碘化呫吨的新方法，其包括环化步骤，随后是碘化步骤。不需要萃取、色谱或溶剂浓缩步骤，并且中间体以及最终化合物经由过滤或相似手段进行分离。该方法需要单一有机溶剂，并且各步骤在低于100℃的温度完成。在反应物中排除氯阴离子、氯自由基，次氯酸根离子或次氯酸或在氧化剂存在下可以原位产生这些种类的试剂，以预防不希望的杂质形成。用这些方法已构思和分离了数种新化合物。这些新化合物也已形成的新的药物。

Description

合成4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮(玫瑰红)和有关呫吨的方法
与相关申请的交叉引用
本申请要求于2009年9月18日提交的临时申请序号61/243,701的权益。
发明领域
本发明涉及制备或合成和分离高度纯化玫瑰红、玫瑰红内酯和有关呫吨的方法，以及涉及高度纯化的玫瑰红、玫瑰红内酯和有关呫吨。本发明的一方面涉及制备碘化荧光素衍生物的合成方法，所述衍生物最多含有2％重量，优选小于0.15％重量的单独有机杂质。将杂质控制于0.15％或1500 ppm水平或更低与药物效用有关，原因是其代表遵从International Conference of Harmonisation(ICH)指南的合格门槛。因此，本发明的又一方面涉及本文所公开的新化合物的药物效用和鉴定，为此目的特地设计上述合成来控制其形成。
发明背景
荧光素结构基元和从邻苯二甲酸酐和间苯二酚的一步环化据信已首先在1871年描述于Baeyer(Berichte.1871：4，555)。Graebe(Annalen.1887：18，318)据信是首次使用卤化邻苯二甲酸酐作环化基底，在其报告提及使用相对间苯二酚过量的酸酐(1.3当量)。二氯荧光素的碘化在1887年出现在文献中，其报告于Le Royer(Annalen.1887：238，359)。在20世纪，出现荧光素类似物的数种使用。该类化合物已用作纺织品染料、生物学染料、非挥发性记忆装置的构造单元，热成像基底和食品着色剂和化妆品着色剂。例如，赤藓红(FD&C No.3)和部分碘化的赤藓红(D&C Nos.11和12)用作食品、药物和化妆品染料。一种特别的四碘呫吨，玫瑰红,已用于眼部疾病可视化，并以放射标记形式用作肝功医学诊断剂，在1965年出现在美国药典中。
然而，构造玫瑰红的呫吨核心的环化自1880的技术(在开口釜中高温熔化)以来并未实质改善，即使如此对合成非卤化类似物和修饰荧光素基元是兴许仍十分广泛。已知合成方法产生一系列不可预测的和劣质表征的杂质，其包括衍生自反应或降解过程的残余溶剂、无机化合物和有机化合物。对于在工业应用、食品染料或诊断学中的许多历史用途这些杂质是允许的。例如，美国的Code of Federal Regulations(CFR)允许FD&C No.3(赤藓红)的杂质水平不超过1％的一碘化杂质且不超过9％的其它更低碘化的荧光素。CFR也允许环化步骤产生的残余杂质，比如部分碘化的邻苯二甲酸和间苯二酚(例如参见：Kamikura，ShokuhinEiseigaku Zasshi 1985：26，243和Wada等人，Food.Add.Contam.2004：21，1137)。
上述历史着色剂规格完全不同于现代International Conference ofHarmonisation(ICH)指南对于新药物的要求，其要求报告0.05％或更高的杂质，全面鉴定水平0.1％或更高的任意有机杂质，以及大于0.15％的任意杂质的彻底毒理学规格，并且进一步提供对无机杂质的限制，特别是对残余溶剂的严格限制。于是，在将以治疗剂量将该类化合物引入身体的情况下，日益重要的是控制良好、可预测的和可重现的合成方法。在合成步骤期间或在纯化中不可预测地产生多种杂质是上述规定中，特别是对于潜在的肠胃外药物产品配制剂，所不允许的。
为了制备试剂级别的玫瑰红，美国药典XXII推荐用HCl经由酸/碱处理来纯化玫瑰红。发明人已非常令人惊讶地发现，在存在氧化剂比如过氧化氢或过一硫酸氢钾的情况下，用含有或能够产生含水氯阴离子的试剂处理碘化荧光素导致副反应，其中I取代基中的一个或多个能被卤化转移为Cl。这也能够发生于存在氯化物自由基、次氯酸根离子或次氯酸的情况下。在制备玫瑰红期间的该副反应未有先期报告，因此必须仔细地控制环化步骤、碘化步骤和任意纯化方案以预防该不希望的副反应。
虽然碘化荧光素类似物已有先期描述并常常上位提及措辞"卤素"，这些在先公开中未有任一个显得可以直接从碘-间苯二酚合成碘-呫吨取代的荧光素。另外，在先公开中未有任一个显得需要在分子中存在至少一个碘，并且未有任一个要求保护这些化合物的必然依赖碘的药物应用。由于荧光素大量用于非治疗目的，几乎未有提及有关本发明的信息：描述和概括实施制备该类化合物的高纯度活性药物成分所需要的方法，以及鉴定、表征和合成可以充当人类治疗剂或着色剂的次要副产物的方法。碘化呫吨已作为实施方式上位地包括在各种公开中，而玫瑰红是首次描述于1880的熟知化合物。然而，这些参考文献未有任一个描述由呫吨核心上的至少一个I和至少一个Cl取代基构成的卤化转移的次要产品的分离或鉴定，或者公开或指出其存在的可能性。发明人已发现这些产品能够以多至2％重量存在于玫瑰红商业样品中。另外，在先参考文献暗指较低碘化的呫吨污染物(例如，在目前的CFR 74.303中对于赤藓红的染料证明允许不超过9％)，但是这些参考文献未有任一个提出可在2’或4’位用氢取代的三碘化形式或其阻转异构体的结构或名称(参见下文的图1q和1r，并且参见U.S.专利号6,649,769对该骨架的阻转异构的讨论)。在先参考文献中未有任一个教导或启示所述分离或使得可以合成围绕呫吨核心的独立I/Cl取代基。本发明鉴定、表征和确立有效地控制这些副产物的合成以满足用于药物应用中所需要的标准的方法。此外，本发明方法避免这些副产物的不希望的形成、避免需要使用多种溶剂并且严格控制各试剂，这些全都改善用于药物用途的方法的处理、收率、纯度和可行性。
发明概要
本发明涉及控制制备用于药物用途的式3和式4的碘化呫吨中的杂质水平的物质和方法，涉及制备这些碘化呫吨化合物的方法，并且公开了有关的但未预先预料的卤化转移杂质。本发明也涉及用于制备它们的物质和方法，尤其是制备以适于药用的纯度的赤藓红(FD&C 3)、玫瑰红和其它有关的碘化呫吨的方法。在一种实施方式中，该方法仅使用单一有机溶剂，低温(小于100℃)并且要求使用很有限的添加剂和调节剂以避免形成杂质。避免形成卤化转移杂质可以例如这样实现：将反应混合物中，特别是在碘化步骤期间的反应混合物中的氯阴离子限制至小于1500ppm。不需要萃取、色谱或溶剂浓缩步骤，而且中间体以及最终化合物能够经由过滤或相似手段得以分离。本发明也涉及特定的类似物和新的化合物，特别是能够经由上文公开的方法制备或避免的那些。这些化合物已得以分离和确认，并且适用于药物、医学、化妆品和着色剂使用。
在又一种实施方式中，提供制备式3化合物的方法，
其中各位置的R1独立地是C1-C4烷基，卤素或H；和R2、R3、R4和R5独立地是I、F、Cl、C1-C4烷基或H，其中R2、R3、R4或R5中至少一个是I，而各位置的R6独立地是H或C1-C4烷基；包括在碱的水溶液存在下将式3化合物，其中各位置的R1独立地是C1-C4烷基，卤素或H；R2、R3、R4和R5独立地是F、Cl、C1-C4烷基或H而R2、R3、R4或R5中至少一个是H，与碘(I2)反应，以用I替换R2、R3、R4或R5中至少一个。
又一实施方式涉及制备式3化合物的方法，其中各位置的R1独立地是C1-C4烷基，卤素或H；R2、R3、R4和R5独立地是卤素，C1-C4烷基或H；而各位置的R6独立地是H或C1-C4烷基；包括将式1化合物，
其中各位置的R1独立地是卤素、C1-C4烷基或H，与式2化合物反应
其中R7、R8、R10独立地是F、Cl、C1-C4烷基或H；和R9是H。
另一实施方式涉及制备式3衍生物的方法，其中各位置的R1独立地是卤素或H；R2、R3、R4和R5独立地是I、Br、Cl、F或H，其中R2、R3、R4和R5中至少一个是Cl；而R6是H；包括将式3化合物与氯自由基、氯阴离子或原位产生的氯阴离子(即，比如次氯酸钠溶液或次氯酸)反应，从而是I或Br的任意R1、R2、R3、R4或R5能够独立地用Cl替换。
又一实施方式涉及式3化合物，其中选自R2、R3、R4或R5的至少一个但不超过两个位置是Cl，且各位置的R1独立地是Br、F、Cl或I；条件是不为Cl或H的任意R2、R3、R4或R5是I且各位置的R6独立地是H或C1-C4烷基。
本文描述的式3化合物具有用于药物、医学的、化妆品和着色剂工业的特性。相应地，本发明也涉及要求保护的用于局部或体内施用的药物中的化合物，将其包括作为用于人类或动物疾病的化疗治疗或光动力治疗的药物中的活性物质。
式3化合物、其制备方法、本文定义的药物和用途应包括已皂化反应或另外反应的所述化合物的全部形式，所述反应将所述化合物自其内酯形式(式3)转化为其醌型(式4)，其中R11和R12独立地是H或Na、K、Li或能够形成盐的其它平衡离子。
在又一种实施方式中，本发明涉及制备式4化合物的方法，其中R1独立地是Cl或Br，R2、R3、R4和R5是I，而R6是H。在基本上不含氯阴离子的溶液中，将式3a化合物，其中R1独立地是Cl或Br，而R2、R3、R4、R5和R6是H，与碘化物组合以形成式4化合物，其中R1独立地是Cl或Br，R2、R3、R4和R5是I，而R6是H，这提供相对制备式4化合物的在先方法的实质改善，所述改善包括基本不存在式4化合物的卤化转移衍生物，其中R1独立地是Cl或Br，R2、R3、R4和R5中至少一个是Cl并且不是Cl的任意R2、R3、R4和R5是I，而其中R6是H。
在又一种实施方式中，本发明涉及制备式3化合物的方法，
其中R1独立地是Cl或Br；R2、R3、R4和R5是I；而R6是H，包括
步骤1：在酸性溶液中，将式1化合物，
其中R1独立地是Cl或Br，与约2当量的式2化合物组合，
其中R7、R8、R9和R10是H；
在20℃至250℃的温度，和优选85℃-95℃温度一起混合；并且
分离作为结果的式3a的环化中间体产品。
其中R1独立地是Cl或Br而R2、R3、R4、R5和R6是H；随后
步骤2：将所述式3a中间体与不含氯阴离子的水溶液组合；
将式3a中间体的所述溶液用碘(I2)处理，在20℃至100℃的温度混合一段时间，使得向式3的转化基本上完成，例如由HPLC或相似手段确定；
将含有式3的反应混合物用不含氯阴离子的碘捕获剂猝灭；
将所述猝灭反应混合物用不含氯阴离子的酸性溶液酸化至pH小于5；并且
分离式3的所述最终产品。
在制备式3化合物的上述方法中还优选式1和式2化合物于其中组合的步骤1的酸性溶液不含或基本上不含氯阴离子并且不含或基本上不含能够在反应混合物中产生氯阴离子的试剂。
在制备式3化合物的上述方法中还优选在步骤2中的式3a中间体不含或基本上不含氯阴离子并且不含或基本上不含能够在反应混合物中产生氯阴离子的试剂或其它杂质。
在制备式3化合物的上述方法中还优选式3a中间体和碘在其中组合的溶液具有碱性pH。
在制备式3化合物的上述方法的变型中，制备式3化合物的方法的步骤1可以包括将式1化合物与小于2当量的式2化合物组合。该实施方式不太优选，原因是式3的收率比用优选实施方式的化学计量所提供的收率更低。
在又一实施方式中，本发明涉及制备式3化合物的方法，
其中R1独立地是I，Br，Cl，F，C1-C4烷基或H，而R2、R3、R4和R5独立地是I、F、Cl，C1-C4烷基或H，其中R2、R3、R4或R5中至少一个但不超过三个是I，包括：
步骤1：在不含或基本上不含氯阴离子和不含或基本上不含能够在反应混合物中产生氯阴离子的试剂或杂质的酸性溶液中，将式1化合物，
其中R1独立地是I，Br，Cl，F，C1-C4烷基或H与式2化合物组合
其中R7，R8，和R10独立地是F，Cl，H，或C1-C4烷基并且R7，R8或R10中至少两个是H而R9是H；；
在20℃至250℃的温度一起混合；
分离作为结果的式3a环化中间体产品，例如通过过滤或相似手段；随后
步骤2：将不含或基本上不含氯阴离子并且不含或基本上不含杂质或能够产生氯阴离子的杂质的所述式3a中间体与不含氯阴离子或基本上不含氯阴离子的水溶液相组合；
将式3a中间体的所述水溶液用碘(I2)处理；
在20℃至100℃的温度混合充足的时间，使得向式3的转化基本上完成，例如由HPLC或相似手段确定；
将含有式3的反应混合物用不含氯阴离子的碘捕获剂猝灭；
将所述猝灭反应混合物用不含氯阴离子的酸性溶液酸化至pH<5；并且
通过过滤或相似手段分离所述最终产品。
在制备式3化合物的上述方法优选的是式3a中间体和碘在其中组合的步骤2的水溶液具有碱性pH。
还优选的是步骤2混合持续充足的时间，使得向式3的转化完成至少90％，和更优选至少95％，和最优选至少98％，所述时间一般为约1至24小时，和更优选约2至18小时。
在又一实施方式中，本发明涉及式4化合物，其中R1独立地是F、Cl、Br、I、H或C1-C4烷基；R2、R3、R4和R5独立地是Cl、H或I，其中选自R2、R3、R4、R5的至少一个取代基是I且至少一个其它取代基是Cl或H；而R6独立地是H或C1-C4烷基；以及全部(a)互变异构体形式，(b)阻转异构体，(c)式3所述的闭合内酯形式，(d)式3所述的内酯形式的对映体，和(e)其药学上可接受的盐。
附图说明
图1a举例说明4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4',5',7'-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,5,6,7-四氯-2’,4',5',7'-四碘荧光素或玫瑰红内酯；
图1b举例说明4,5,6,7-四溴-3’,6’-二羟基-2’,4',5',7'-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,5,6,7-四溴-2’,4',5',7'-四碘荧光素；
图1c举例说明2',4,5,6,7-五氯-3’,6’-二羟基-4',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为2’,4,5,6,7-五氯-4',5',7'-三碘荧光素；
图1d举例说明4,4',5,6,7-五氯-3',6'-二羟基-2',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,4’,5,6,7-五氯-2',5',7'-三碘荧光素；
图1e举例说明2’,4,5,6,7,7’-六氯-3’,6’-二羟基-4’,5’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮，也称为2’,4,5,6,7,7’-六氯-4’,5’-二碘荧光素；
图1f举例说明4,4’,5,5’,6,7-六氯-3’,6’-二羟基-2’,7’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮，也称为4,4’,5,5’,6,7-六氯-2’,7’-二碘荧光素；
图1g举例说明2',4,5,5',6,7-六氯-3',6'-二羟基-4',7'-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为2’,4,5,5’,6,7-六氯-4’,7’-二碘荧光素；
图1h举例说明4,5,6,7-四氯-3',6'-二羟基-2',4',5'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,5,6,7-四氯-2’,4’,5’-三碘荧光素；
图1i举例说明4,5,6,7-四氯-3',6'-二羟基-2',4',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,5,6,7-四氯-2’,4’,7’-三碘荧光素；
图1j举例说明4,5,6,7-四溴-2'-氯-3',6'-二羟基-4',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为2’-氯-4,5,6,7-四溴-4’,5’,7’-三碘荧光素；
图1k举例说明4,5,6,7-四溴-4'-氯-3',6'-二羟基-2',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4’-氯-4,5,6,7-四溴-2’,5’,7’-三碘荧光素；
图1l举例说明4,5,6,7-四溴-2',7'-二氯-3',6'-二羟基-4',5'-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为2’,7’-二氯-4,5,6,7-四溴-4’,5’-二碘荧光素；
图1m举例说明4,5,6,7-四溴-4',5'-二氯-3',6'-二羟基-2',7'-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4’5’-二氯-4,5,6,7-四溴-2’,7’-二碘荧光素；
图1n举例说明4,5,6,7-四溴-2',5'-二氯-3',6'-二羟基-4',7'-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为2’,5’-二氯-4,5,6,7-四溴-4’,7’-二碘荧光素；
图1o举例说明4,5,6,7-四溴-3',6'-二羟基-2',4',5'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,5,6,7-四溴-2’,4’,5’-三碘荧光素；
图1p举例说明4,5,6,7-四溴-3',6'-二羟基-2',4',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,5,6,7-四溴-2’,4’,7’-三碘荧光素；
图1q举例说明不对称取代呫吨的阻转异构体(aR形式)；和
图1r举例说明不对称取代呫吨的阻转异构体(aS形式)。
图1s举例说明4,5,6,7-四氯-3',6'-二羟基-2',4',5'-三碘-7’-异丙基-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为7’-异丙基-4,5,6,7-四氯-2’,4’,5’-三碘荧光素。
图1t举例说明2,3,4,5-四氯-6-(6-羟基-2,4,5,7-四碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸二钠盐，也称为4,5,6,7-四氯-2’,4',5',7'-四碘荧光素二钠或玫瑰红。
本发明优选实施方式的详细描述
定义
"C1-C4烷基"是指直链和支化的饱和的或不饱和烃基团，一般具有指定碳原子数。C1-C4烷基的实例包括，但不限于，甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，仲丁基，异丁基和叔丁基。
"卤代"和"卤素"可以可互换地使用，并且指氟、氯、溴和碘官能团。
"基本上不含氯阴离子"和相似语言是指反应条件、试剂或中间体不含氯阴离子、含有氯阴离子的杂质或能够产生氯阴离子的杂质，其纯度水平足以避免不希望的式3、式3a或式4的卤化转移杂质以0.15％(例如，1500ppm)或更高的水平形成，或者其中所述反应条件、试剂或中间体以1500ppm或更低的水平含有氯阴离子、含有氯阴离子的杂质或能够产生氯阴离子的杂质。
"基本上不含卤化转移杂质"和相似语言是指式3和式4化合物以0.15％(例如1500ppm)或更低的水平存在，其中R1独立地是Cl或Br，R2、R3、R4和R5中至少一个是Cl而其余的是I，而R6是H。
一般结构表示
出于简化原因，将各种中间体和式3、式3a、式3b和式4最终产品的结构表示为一般内酯或醌型异构形式，并且取决于pH或其它条件可以以其互变异构形式(例如，醌型而不是内酯，或内酯而不是醌型)存在。所述一般表示不期望将公开内容限制为所举例说明的特定一般异构形式。
反应方案
方案I显示本发明的一种实施方式，其牵涉制备碘化呫吨(例如式3)的方法。该方法包括将邻苯二甲酸酐(式1)与过量的间苯二酚(式2)反应，提供式3a化合物，其中R2、R3、R4、R5和R6不是I而R2-R5中至少一个是H。然后，在最低分离之后将化合物碘化，提供式3化合物，其中R2、R3、R4或R5中至少一个用I取代。
方案I
上述步骤1的环化反应可以这样进行：例如在0℃至回流的温度使用纯甲磺酸至10％甲磺酸(MSA)水溶液。在优选的实施方式中，于85℃-95℃使用纯甲磺酸，进行1-16小时。在又一优选的实施方式中，使用2-6体积的MSA，更优选4至5体积的MSA，和甚至更优选大约4.8体积的MSA。另选地，单独地或与甲磺酸组合地，可以将对甲苯磺酸，苯磺酸，硫酸或三氟甲磺酸，乙磺酸，乙酸，丙酸，三氟乙酸，樟脑磺酸，或含有熔点小于约250℃的烷基磺酸或芳基磺酸、熔点小于约250℃的烷基羧酸或芳基羧酸、非氯化物质子酸、非氯化物或氯化物-固定化(chloride-immobilized)的路易斯酸中一种或多种的酸性溶液，或它们各自聚合物键合的制备物或盐制剂，或其水溶液，用来引起环化。
形成式3a的环化能够用基本上化学计量的量的反应物(例如，比率2:1的式2间苯二酚与式1邻苯二甲酸酐)来进行。在又一种实施方式中，可以优选用过量间苯二酚(例如，约2.5当量至约3或更多当量，和更优选约3.2或更多当量)来进行反应以便确保完全消耗邻苯二甲酸酐。在分离式3a之后，在搅拌下或不加搅动地可将作为结果的固体用水和丙酮与水组合或DMF与水的组合优选加热至50℃至70℃，和更优选在约60℃用丙酮和水再悬浮，以改善纯度。可以重复分离和再悬浮直至式3a物质达到希望的纯度。
上文步骤2的碘化反应可以用摩尔浓度过量的碘(I2)优选在碱性条件下进行。例如，所述反应可以用0.1-5M氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾在0℃至回流的温度进行。在优选的实施方式中，该反应可以用0.4-1.0M NaOH于70℃-95℃进行。可将KI、NaI或KI和NaI的混合物用来将碘溶剂化于反应混合物中，例如用1-2.5当量的NaI。反应时间的范围是1-24小时其取决于加成至呫吨环系的碘原子数。
在又一种实施方式中，可能通过改变反应时间、温度或碱浓度来控制碘化程度。用于该反应的碘还可以用氧化剂比如过一硫酸氢钾或过氧化氢与选自碘化钾、碘化锂、碘化钠或其某些混合物的碘化物盐来原位产生。在该特别实例中，优选避免将能导致不希望的卤化转移的组分包含入反应混合物，比如氯化物水溶液、氯、HCl或能够产生卤素离子的其它组分，除非在所述组分加入之前已除去或猝灭包括氧气氛和碘的任意氧化剂。例如次氯酸钠是该反应混合物中特别不希望的组分，原因是其为不稳定氯阴离子和有效的氧化剂的来源，另外氯阴离子、氯残基、其它次氯酸盐衍生物、次氯酸及其混合物也能够导致不希望的副反应。在反应完成时，可将混合物冷却至大约-20℃至10℃，优选低于10℃，并且可加入碘捕获剂比如硫代硫酸钠、硫代硫酸钾、硫代硫酸铵、亚硫酸钾、亚硫酸钠或其混合物猝灭碘。在优选的实施方式中，用亚硫酸钠来进行猝灭。
容易的式3分离是可能的：优选保持温度低于10℃并用纯含水硫酸至1％硫酸水溶液，优选5％硫酸水溶液调节反应pH，直至pH调节至1.5至5，这导致式3自溶液沉淀出来。在优选的实施方式中，将pH调节至pH 1.5至pH 3。在分离式3之后，可将作为结果的固体再悬浮，并在环境温度例如用水和丙酮与水的组合或DMF与水的组合，优选丙酮和水的组合进一步分离以除去杂质。额外地，可以将pH调节至5或更高以将式3溶剂化为式4，随后转化回式3以便在酸性条件下分离。
方案II
方案II显示本发明的又一实施方式，其中式3化合物在基本中性或碱性pH还可以以醌型形式(式4)存在，而这些醌型可以作为盐存在，其中R11和/或R12的一个或两个羟基用包括Na，K或Li离子的碱性平衡离子替换。
方案III显示起始自式3化合物，其中选自R2、R3、R4和R5的至少一个位置是I，用Cl替换I以产生式3b化合物的方法，其中选自R2、R3、R4和R5的至少一个位置是Cl。
方案III
方案IV显示本发明的又一实施方式，其中式4化合物还可以作为该过程的产品分离，而这些醌型可以作为盐存在，其中R11和/或R12的一个或两个羟基用包括H、Na、K或Li离子的能形成药学上可接受的盐的平衡离子替换。
方案IV
本发明的优选实施方式涉及式3和式4化合物，其中R1独立地是Cl或Br，而R2-R5独立地是选自Cl、I或H，其中至少3个氢原子存在于R2-R6或至少一个氯原子存在于R2-R5，并且可行时包括阻转异构体。
本发明的一组具体实施方式包括下述化合物及其药学上可接受的盐，并且命名为内酯形式(式3)和醌型形式(式4)，如图1的说明：
4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4',5',7'-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,5,6,7-四氯-2’,4',5',7'-四碘荧光素，参见图1a，及其异构醌型形式2,3,4,5-四氯-6-(6-羟基-2,4,5,7-四碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸，参见图1t，一般称为玫瑰红，或者其二钠盐形式的玫瑰红二钠；
4,5,6,7-四溴-3’,6’-二羟基-2’,4',5',7'-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,5,6,7-四溴-2’,4',5',7'-四碘荧光素，参见图1b，及其异构醌型形式2,3,4,5-四溴-6-(6-羟基-2,4,5,7-四碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
2',4,5,6,7-五氯-3’,6’-二羟基-4',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为2’,4,5,6,7-五氯-4',5',7'-三碘荧光素，参见图1c，及其异构醌型形式2,3,4,5-四氯-6-(2-氯-6-羟基-4,5,7-三碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸和2,3,4,5-四氯-6-(7-氯-6-羟基-2,4,5-三碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
4,4',5,6,7-五氯-3',6'-二羟基-2',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,4’,5,6,7-五氯-2',5',7'-三碘荧光素，参见图1d，及其异构醌型形式2,3,4,5-四氯-6-(4-氯-6-羟基-2,5,7-三碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸和2,3,4,5-四氯-6-(5-氯-6-羟基-2,4,7-三碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
2’,4,5,6,7,7’-六氯-3’,6’-二羟基-4’,5’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮，也称为2’,4,5,6,7,7’-六氯-4’,5’-二碘荧光素，参见图1e，及其醌型形式2,3,4,5-四氯-6-(2,7-二氯-6-羟基-4,5-二碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
4,4’,5,5’,6,7-六氯-3’,6’-二羟基-2’,7’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮，也称为4,4’,5,5’,6,7-六氯-2’,7’-二碘荧光素，参见图1f，及其醌型形式2,3,4,5-四氯-6-(4,5-二氯-6-羟基-2,7-二碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
2',4,5,5',6,7-六氯-3',6'-二羟基-4',7'-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为2’,4,5,5’,6,7-六氯-4’,7’-二碘荧光素，参见图1g，及其异构醌型形式2,3,4,5-四氯-6-(2,5-二氯-6-羟基-4,7-二碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸和2,3,4,5-四氯-6-(4,7-二氯-6-羟基-2,5-二碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
4,5,6,7-四氯-3',6'-二羟基-2',4',5'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,5,6,7-四氯-2’,4’,5’-三碘荧光素，参见图1h，及其异构醌型形式2,3,4,5-四氯-6-(6-羟基-2,4,5-三碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸和2,3,4,5-四氯-6-(6-羟基-4,5,7-三碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
4,5,6,7-四氯-3',6'-二羟基-2',4',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,5,6,7-四氯-2’,4’,7’-三碘荧光素，参见图1i，及其异构醌型形式2,3,4,5-四氯-6-(6-羟基-2,4,7-三碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸和2,3,4,5-四氯-6-(6-羟基-2,5,7-三碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
4,5,6,7-四溴-2'-氯-3',6'-二羟基-4',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为2’-氯-4,5,6,7-四溴-4’,5’,7’-三碘荧光素，参见图1j，及其异构醌型形式2,3,4,5-四溴-6-(2-氯-6-羟基-4,5,7-三碘-3-氧代-9,9a-二氢-3H-呫吨-9-基)苯甲酸和2,3,4,5-四溴-6-(7-氯-6-羟基-2,4,5-三碘-3-氧代-9,9a-二氢-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
4,5,6,7-四溴-4'-氯-3',6'-二羟基-2',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4’-氯-4,5,6,7-四溴-2’,5’,7’-三碘荧光素，参见图1k，及其异构醌型形式2,3,4,5-四溴-6-(4-氯-6-羟基-2,5,7-三碘-3-氧代-9,9a-二氢-3H-呫吨-9-基)苯甲酸和2,3,4,5-四溴-6-(5-氯-6-羟基-2,4,7-三碘-3-氧代-9,9a-二氢-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
4,5,6,7-四溴-2',7'-二氯-3',6'-二羟基-4',5'-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为2’,7’-二氯-4,5,6,7-四溴-4’,5’-二碘荧光素，参见图1l，及其醌型形式2,3,4,5-四溴-6-(2,7-二氯-6-羟基-4,5-二碘-3-氧代-9,9a-二氢-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
4,5,6,7-四溴-4',5'-二氯-3',6'-二羟基-2',7'-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4’5’-二氯-4,5,6,7-四溴-2’,7’-二碘荧光素，参见图1m，及其醌型形式2,3,4,5-四溴-6-(4,5-二氯-6-羟基-2,7-二碘-3-氧代-9,9a-二氢-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
4,5,6,7-四溴-2',5'-二氯-3',6'-二羟基-4',7'-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为2’,5’-二氯-4,5,6,7-四溴-4’,7’-二碘荧光素，参见图1n，及其异构醌型形式2,3,4,5-四溴-6-(2,5-二氯-6-羟基-4,7-二碘-3-氧代-9,9a-二氢-3H-呫吨-9-基)苯甲酸和2,3,4,5-四溴-6-(4,7-二氯-6-羟基-2,5-二碘-3-氧代-9,9a-二氢-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
4,5,6,7-四溴-3',6'-二羟基-2',4',5'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,5,6,7-四溴-2’,4’,5’-三碘荧光素，参见图1o，及其异构醌型形式2,3,4,5-四溴-6-(6-羟基-2,4,5-三碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸和2,3,4,5-四溴-6-(6-羟基-4,5,7-三碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
4,5,6,7-四溴-3',6'-二羟基-2',4',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,5,6,7-四溴-2’,4’,7’-三碘荧光素，参见图1p，及其异构醌型形式2,3,4,5-四溴-6-(6-羟基-2,4,7-三碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸或异构体2,3,4,5-四溴-6-(6-羟基-2,5,7-三碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸；
在这些化合物之一在呫吨核心不对称取代的情况下，阻转异构体的aR形式，参见图1q，和aS形式，参见图1r，是可能的；以及
4,5,6,7-四氯-3',6'-二羟基-2',4',5'-三碘-7’-异丙基-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，也称为4,5,6,7-四氯-7’-异丙基-2’,4’,5’-三碘荧光素，参见图1s，及其异构醌型形式2,3,4,5-四氯-6-(7-异丙基-6-羟基-2,4,5-三碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸和2,3,4,5-四氯-6-(2-异丙基-6-羟基-4,5,7-三碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸。
本发明的式3或式4化合物可以含有手性中心，并因此可以以不同对映体形式和非对映体形式存在。本发明涉及式3或式4化合物的作为外消旋混合物和作为单独对映体的全部旋光异构体和全部立体异构体，和所述化合物的非对映异构体，及其混合物，并且涉及本文定义的含有它们的全部药物组合物或者本文定义的应用它们的治疗方法。在制备最终产品或其中间体中，单独的异构体能够通过已知方法比如光学拆分、分步结晶、光学选择性反应条件或色谱分离而获得。
类似地，式3或式4化合物的醌型形式，其中所述呫吨环由于相应呫吨芳基环上的不同取代基(也即例如，在R3＝R4的情况下R2≠R5或在R2＝R5的情况下比如图1c、1d、1g、1h、1i、1j、1k、1o、1p中所述化合物的醌型形式)而不对称，可以作为稳定阻转异构体存在(如图1q和1r所述)。在外消旋阻转异构体可以作为反应杂质存在以及作为外消旋混合物制备这些阻转异构体的情况下，本文描述的过程涵盖最小化外消旋阻转异构体对的相对量。
在式3化合物是酸性化合物的情况下，它们能够与各种无机和有机碱形成各式各样的不同盐。本发明酸性化合物的碱加成盐通过在水溶剂或适宜有机溶剂比如乙醇或甲醇中将式3内酯用至少1或2当量的所选无机碱或有机碱处理来容易地制备。在蒸发溶剂、过滤或直接使用所得盐的水溶液之后，所希望的盐如式4描述以醌型形式容易地获得。药学上可接受的盐包括例如与钠、钙、钾、镁、葡甲胺、铵、铝、锌、哌嗪、氨丁三醇、锂、胆碱、二乙胺、4-苯基环己胺和N、N'-二苄基乙二胺形成的那些。
本发明也包括等同式3和式4那些的同位素标记化合物，除了一个或多个原子用具有不同于自然界通常存在的原子质量或质量数的原子质量或质量数的原子替换。能够掺入本发明化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氧、氟、氯和碘的同位素分别比如2H、3H、14C、13C、10C、11C、13O、14O、15O、18O、17O、17F、18F、32Cl、33Cl、34Cl、36Cl、74Br、75Br、76Br、77Br、117I、118I、120I、121I、122I、124I、126I、128I和131I。含有前述同位素和/或其它原子的其它同位素的本发明化合物其前药和所述化合物的药学上可接受的盐或所述前药的药学上可接受的盐属于本发明的范围。本发明的某些同位素标记化合物可用作药物分布测试/或基底组织分布测试的诊断剂。同位素标记的式3和式4化合物及其前药一般能够通过实施公开于下文方案和/或实施例中的程序来制备，但是用容易获得的同位素标记试剂替换非同位素标记的试剂，也即用131I替换非同位素标记的碘。
本发明的一种实施方式的情况是式4化合物占药物的约0.001％至小于约20％重量。
本发明的一种实施方式涉及药物和所述药物的某些医学用途，和使用所述药物来治疗人类或动物组织的疾病的治疗方法，其中所述药物的主要活性组分是式3或式4的卤化呫吨。所述药物可以例如在化疗上充当化学烧蚀剂或光动力剂，并且可用于治疗各种病症，所述病症影响皮肤和有关器官、口腔和消化道和有关器官、尿道和生殖道和有关器官、呼吸道和有关器官、循环系统和有关器官、头部和颈部、内分泌系统和淋巴网状系统和有关器官、各种其它组织，比如在手术期间暴露的结缔组织和各种组织表面，以及展示微生物、病毒、真菌或寄生物感染的各种组织。
这些药物可以以各种配制剂获得，其可以包括液体、半固体、固体或气雾剂递送载体，并且适于经由各种常规模式和途径进行体内给药，所述模式和途径包括静脉内注射(i.v.)，腹腔内注射(腹膜内)，肌内注射(i.m.)，颅内注射(i.c.)，瘤内注射(i.t.)，病灶内注射(i.l.)，上皮内注射(也即)，经皮递送(t.c.)，和经食管(p.o.)给药。额外地，所述药物适于经由各种常规模式和途径局部给药，所述模式和途径包括直接局部施用至某些组织或其附近。所述药物中的活性成分产生希望的治疗反应，比如破坏微生物感染，减少或消除组织刺激或炎症，减少或消除过增生组织，减少或消除癌性组织或癌症前期组织，减少或消除表面或表面下脂细胞或脂质沉积，和许多其它相似适应症。
在优选的实施方式中，所述药物以各种配制剂制备，包括液体，半固体，固体或气雾剂递送载体，以及以片剂、胶囊、栓剂和其它相似形式制备。
在又一优选的实施方式中，将至少一个靶向部分在R1至R6的任意位置或经由在羟基或羰基上的连接偶联至式3或式4的卤化呫吨。所述靶向部分可以选自包括但不限于下述的组：脱氧核糖核酸(DNA)，核糖核酸(RNA)，氨基酸，蛋白，抗体，配体，半抗原，碳水化合物受体，碳水化合物配合剂，脂质受体，脂质配合剂，蛋白质受体，蛋白质配合剂，螯合剂，包封载体，短链脂族烃，长链脂族烃，芳烃，醛，酮，醇，酯，酰胺，胺，腈，叠氮化物，亲水部分和疏水部分。
在又一优选的实施方式中，式4化合物能够用于制备药物。
实施例
下述实施例期望是示例性的而非限制性的，并且代表本发明的具体实施方式。
一般方法
全部反应在敞口容器中进行。有时覆盖容器以避免环境光照。全部反应在氮、氩或其它惰性气氛下进行，除非另有指明。所用的全部溶剂和试剂来自商业来源，并且不进行进一步纯化。用高压液相色谱法(HPLC)监测反应，其使用Agilent 1100系列四元泵/可变波长检测器(225nm检测波长)，配有Supelco Ascentis Express C18柱(4.6x150mm，2.7μm于40℃，MeCN/0.5％H3PO4的H2O溶液，运行30分钟内65/35至90/10梯度)，或者相同设备配有Waters Symmetry Shield RP-18柱(4.6x150mm，5μm于40℃，MeCN/10mM K3PO4的H2O溶液(pH 3)+5％MeCN，25分钟内10/90至80/20梯度或65/35等度)；质谱(AgilentLC/MSD阱或Waters LCMS，具有HPLC的相似色谱法条件，用甲酸修饰)；和/或薄层色谱法(TLC)，其用紫外光和碘染色进行可视化。用Thar SFC 80进行超临界流体色谱法(SFC)，配有RegisCell柱(3 x 25cm)，乙醇载量20-22mg/注射，浓度4.5mg/mL。于300MHz在VarianINOVA 300或Varian Gemini 2000或于400MHz在Varian Oxford 400记录质子核磁共振(1H NMR)谱图，各自用TMS作内标。相对DMSO-d6的2.50ppm单峰，参照0ppm的四甲基硅烷(TMS)，报告化学位移(δ，单位百万分之一，ppm)。偶联常数(J)按Hertz(Hz)报告。于75MHz在Varian INOVA 300或于100MHz在Varian Oxford 400，或于75MHz在Varian Gemini 2000光谱仪上记录噪音-去耦的碳-13核磁共振(13CNMR)谱图。相对DMSO-d6于39.5ppm的七重峰中心线以ppm报告化学位移δ。UV-VIS光谱数据在Hitachi U-2810 Double Beam分光光度计或在Spectronic Genesys 2分光光度计上获得，自200-600nm扫描，狭缝宽度1.5nm，光程10.0mm。
实施例1-制备4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮
(玫瑰红内酯，图1a)
步骤1：环化。将500mL圆底烧瓶配备加热套，J-Kem热电偶，大磁力搅拌子，氮入口线，和磁力搅拌器。向该设备加入四氯邻苯二甲酸酐(1.00当量，50.00g，174.9mmol)，间苯二酚(2.10当量，40.44g，367.3mmol)，和纯甲磺酸(250mL)。所得反应混合物在室温下是悬浮液。反应混合物用氮吹扫并加热至90℃，提供深红橙色溶液。将反应在90℃保持5小时，然后加入额外的5.78g的间苯二酚(0.3当量，52.47mmol)。于90℃继续搅拌反应2.5小时。在经HPLC测定残余的四氯邻苯二甲酸酐量<1.0％的情况下反应视为完成。将1L圆底烧瓶(3颈)配备，机械搅拌器，冰浴和J-Kem热电偶，加入环境USP水(500mL)。用正压力的氮，将90℃反应混合物经由转移线缓慢加入<10℃的USP水。在将反应混合物转移至水期间，控制转移速率使得水猝灭混合物的温度不超过60℃。用额外的100mL USP水来冲洗反应器，然后转移至含有该水的反应器。让作为结果的绿褐色悬浮液逐渐冷却至室温(RT)，在RT搅拌额外的30分钟。经由真空过滤分离固体。将反应器用USP水(2 x 250mL等分试样)冲洗，并用这些冲洗液来冲洗湿滤饼。将湿滤饼抽干60分钟，然后在真空中于70℃干燥过夜，提供88.60g的绿褐色固体。将该物质与550mL丙酮一起加入2L圆底烧瓶，其配有机械搅拌器、J-Kem热电偶、加热套、氮入口线和配备回流冷凝器的Y转接器。将所得悬浮液加热至回流持续1.5小时，然后将其用530mL USP水处理(经由滴液漏斗在60分钟内缓慢加入)，使得温度保持>56℃。在加水期间，观察到温度上升(所实现的最高温度是62℃)。在加水完成之后，将淡黄色-褐色悬浮液保持在回流下3小时，然后在大约30-40分钟内逐渐冷却至RT。在室温下将混合物搅拌额外的30分钟，然后经由真空过滤收集淡黄色-褐色悬浮液。将反应器用50％含水丙酮(v/v，4 x 100mL)冲洗，用这些冲洗液来冲洗湿滤饼。将湿滤饼在48小时内抽吸至干，然后进一步在真空中于70℃干燥过夜，提供74.43g(90.5％收率，96.8％AUC纯度)的四氯荧光素，是黄褐色固体。1H NMR(300MHz；DMSO d6)δ10.23(S，2H)，6.95(d，J＝8.7Hz，2H)，6.69(d，J＝2.1Hz，2H)，6.57(双二重峰，J＝8.7Hz，2H)。
步骤2：碘化。将500mL圆底烧瓶(3-颈)配备回流冷凝器，Y转接器，J-Kem热电偶，机械搅拌器，加热套，和氮入口线。将反应器用氮吹扫，用铝箔覆盖。该加入10.00克四氯荧光素(21.3mmol)，30mL 5M NaOH溶液和300mL USP水，提供深红色溶液。然后，将7.03克碘化钠(46.9mmol)和32.4g的碘(127.7mmol)加至反应器。在环境温度让反应混合物搅拌30分钟，然后将其加热至90℃。反应混合物等分试样的HPLC分析指出原料完全消耗，没有部分碘化的中间体，并且完全转化为所希望的产品。在反应于90℃加热1.5小时之后，关闭热源，让反应混合物在1.5小时内逐渐冷却至室温。用冰浴将深紫色-粉色反应混合物冷却至<10℃。反应混合物pH是7.13。分小批将亚硫酸钠(6.70g)加入反应混合物。在<10℃将75mL丙酮加至反应器，在<10℃让混合物搅拌10分钟。在<10℃期间，滴加5％H2SO4水溶液(24mL)实现pH2.03，产生粉色悬浮液。经由真空过滤收集该反应悬浮液。将反应器用25％含水丙酮(v/v，4 x 100mL)冲洗，用冲洗液来冲洗湿滤饼。将湿滤饼抽干3小时，在真空中于60℃干燥过夜，提供25.81g的粉色固体。将这些固体和225mL丙酮加入1L圆底烧瓶(3颈)，其配有机械搅拌器，J-Kem热电偶，和具氮入口的Y转接器。在室温下搅拌该混合物10分钟，然后在10分钟内加入255mL USP水，提供悬浮液。在室温下搅拌悬浮液2.25小时，然后经由真空过滤来过滤分离固体。将反应器用50％含水丙酮(1 x 75mL)冲洗，并将冲洗液用来冲洗湿滤饼。然后，将湿滤饼用50％含水丙酮(2 x 75mL)和USP水(1 x 75mL)冲洗，抽干1小时，于80℃进一步干燥，提供18.68g的产品(90.2％收率，珊瑚粉色固体，HPLC AUC纯度99.5％)的4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮。
1H NMR(300MHz；DMSO d6)δ10.27(s，2H)，7.59(s，2H)。13CNMR(300MHz；DMSO d6)δ163.2，158.6，151.9，146.7，138.8，136.5，135.3，131.2，126.8，124.6，110.8，81.8，79.3，77.0。MS MSD阱：m/z 974.8(M+1)+(精确质量973.67)。UV-VISλmax＝557nm，甲醇中；示差扫描量热法(DSC)确定的熔点(mp)＝215℃。
实施例2-制备4,5,6,7-四溴-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮
(图1b)
步骤1：根据实施例1步骤1描述的程序，在143mL甲磺酸中，处理四溴邻苯二甲酸酐(28.63g，61.74mmol)和间苯二酚(17g，154.4mmol)，提供33.64g的四溴荧光素，作为浅米白色固体分离(84.1％收率，AUC纯度97.4％)。1H NMR(300MHz；DMSO d6)δ10.17(s，2H)，6.86(d，J＝8.64Hz，2H)，6.65(d，J＝2.34Hz，2H)，6.54(双二重峰，J＝8.7Hz，2H)。
步骤2：根据实施例1步骤2描述的程序，处理四溴荧光素(22g，33.96mmol)，碘(51.71g，203.7mmol)和碘化钠(11.22g，74.85mmol)，提供36.02g(31.2mmol，92.1％收率，AUC纯度96.3％)的4,5,6,7-四溴-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮，作为是浅粉色固体分离。1H NMR(300MHz；DMSO d6)δ10.22(s，2H)，7.49(s，2H)。13C NMR(300MHz；DMSO d6)δ163.9，158.8，152.5，149.9，137.3，136.7，133.5，127.5，124.6，121.1，111.5，82.0，80.3，77.4。MS MSD阱：m/z 1152.6(M+1)+(精确质量1151.48)。UV-VISλmax＝558nm，甲醇中，mp(DSC测定)＝227℃。
实施例3-制备2',4,5,6,7-五氯-3’,6’-二羟基-4',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮
(图1c)
步骤1：根据实施例1步骤1描述的程序，处理四氯邻苯二甲酸酐(5g，17.48mmol)，4-氯间苯二酚(2.78g，19.23mmol)和间苯二酚(2.12g，19.23mmol)，提供7.24g的18.6％纯的2’,4,5,6,7-五氯-3',6'-二羟基-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，将其收集并作为混合物用于后续步骤。
步骤2：根据实施例1步骤2描述的程序，碘化2’,4,5,6,7-五氯-3',6'-二羟基-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮(7.24g，15.4mmol)。然后，经由SFC纯化(80g/min总流量，40％共溶剂(EtOH/0.5％TFA)/CO2中，140巴，254nm，在3x25cm 5m RegisPack柱上)分离粗制产品(5.47g)，提供427mg(0.54mmol，34.7％收率)的2',4,5,6,7-五氯-3’,6’-二羟基-4',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，是浅粉色固体，95.8％AUC HPLC纯度。1H NMR(300MHz；DMSO d6)δ10.85(s，1H)，10.2(s，1H)，7.60(s，1H)，7.38(s，1H)。13C NMR(300MHz；DMSO d6)δ163.4，159.0，155.8，152.3，151.2，146.9，139.1，136.9，135.7，131.6，128.2，127.1，125.1，116.9，111.0，109.7，82.3，80.0，78.4，78.4，77.5。MSMSD阱：m/z 882.7(M+1)+(精确质量882.2)。UV-VISλmax＝554nm，甲醇中。
实施例4–将4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮降解为4,4',5,6,7-五氯-3',6'-二羟基-2',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮和4,4’,5,5’,6,7-六氯-3’,6’-二羟基-2’,7’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮
(图1a、1d和1f)
在室温下，向100mg(0.10mmol)的4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮加入1.0mL乙腈和2.0mL 12.5％含水次氯酸钠。在RT将反应混合物搅拌1小时。HPLC分析指出于8.38分钟和9.93分钟保留时间的两种新杂质(分别27.8％和45.6％)，剩余26.6％的4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮未反应。质谱分析显示M-1离子：M-1＝791.7相应于六氯杂质，M-1＝881.4相应于五氯杂质，和M-1＝973.2相应于玫瑰红内酯。下文单独地制备卤化转移的化合物(参见实施例5和7)，以确认结构特征并用HPLC与该实施例产品进行比较。
实施例5-制备4,4’,5,6,7-五氯-3’,6’-二羟基-2’,5’,7’-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮
(图1d)
步骤1：将四氯邻苯二甲酸酐(2.5g，8.74mmol)，2-氯间苯二酚(1.33g，9.18mmol)和间苯二酚(1.01g，9.18mmol)与12.5mL纯甲磺酸相组合，加热至90℃持续19小时，然后至97℃持续10小时，然后将热混合物仔细地加入25mL冰水。将该悬浮液萃取入乙酸乙酯，用水和盐水洗涤，然后在硫酸钠上干燥。产品经由硅胶垫用66％：14％：18％：4％的甲苯：二噁烷：己烷：乙酸作洗脱液进行分离。收集1.95g的46.4％纯的4,4',5,6,7-五氯-3',6'-二羟基-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，并不加进一步纯化地用于后续步骤。
步骤2：根据实施例1步骤2描述的程序，碘化4,4',5,6,7-五氯-3',6'-二羟基-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮(1.95g，4.15mmol)。粗制获得2.70g的混合物。经由SFC纯化(80g/min总流量，40％共溶剂IPA/CO2，140巴，254nm，在3x25cm 5m RegisPack柱上)分离产品，提供630mg(0.7mmol，38.5％收率，98.7％AUC纯度)的4,4’,5,6,7-五氯-3’,6’-二羟基-2’,5’,7’-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮，是粉色固体。1H NMR(300MHz；DMSO d6)δ11.05(s，1H)，10.3(s，1H)，8.3(s,1H)，7.55(d，2H)。13C NMR(300MHz；DMSO d6)δ163.2，158.6，154.7，150.7，148.0，146.7，138.7，136.5，135.3，134.5，131.3，126.8，124.6，110.5，110.4，82.4，82.1，79.3，77.6。MS MSD阱：m/z 882.7(M+1)+(精确质量882.2)。UV-VISλmax＝555nm，甲醇中。
实施例6-制备2’,4,5,6,7,7’-六氯-3’,6’-二羟基-4’,5’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮
(图1e)
步骤1：根据实施例1步骤1描述的程序，处理四氯邻苯二甲酸酐(5g，17.49mmol)和4-氯间苯二酚(6.32g，43.73mmol)，提供10.31g粗制产品。将9.25g份上述产品悬浮于DMF：水(1:1)中，随后过滤，提供9.70g(2:1 DMF复合物17.16mmol，92.3％收率)的2’,4,5,6,7,7’-六氯-3',6'-二羟基-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，作为橙色固体分离。1HNMR(300MHz；DMSO d6)δ11.13(S，2H)，7.31(s，2H)，6.89(s，2H)。
步骤2：根据实施例1步骤2描述的程序，处理2’,4,5,6,7,7’-六氯-3',6'-二羟基-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮(2g，3.71mmol)，提供2.56g(3.22mmol，87.3％收率)的2’,4,5,6,7，7’-六氯-3’,6’-二羟基-4’,5’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮，作为粉橙色固体分离，97.9％AUC HPLC纯度。1H NMR(300MHz；DMSO d6)δ10.90(s，2H)，7.48(s，2H)。13C NMR(300MHz；DMSO d6)δ163.2，154.7，147.1，146.8，138.7，135.3，134.5，131.3，126.7，124.5，110.3，107.7，82.6，79.0。MS MSD阱：m/z 791.0(M+1)+(精确质量790.77)。UV-VISλmax＝551nm，甲醇中。
实施例7-制备4,4’,5,5’,6,7-六氯-3’,6’-二羟基-2’,7’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮
(图1f)
步骤1：根据实施例1步骤1描述的程序，处理四氯邻苯二甲酸酐(5g，17.49mmol)和2-氯间苯二酚(7.58g，41.98mmol)，提供9.3g的粗制产品。将9.3g粗制产品中的8g悬浮于DMF：水(1:1)中，随后过滤，提供8.65g(16.05mmol，91.7％AUC收率)的4,4',5,5',6,7-六氯-3',6'-二羟基-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，作为橙色固体分离。1H NMR(300MHz；DMSO d6)δ11.09(S，2H)，7.03(d，J＝9Hz，2H)，6.81(d，J＝8.7Hz，2H)。
步骤2：根据实施例1步骤2描述的程序，处理4,4',5,5',6,7-六氯-3',6'-二羟基-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮(2g，3.71mmol)，提供2.20g(2.78mmol，75.1％收率)的4,4’,5,5’,6,7-六氯-3’,6’-二羟基-2’,7’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮，作为粉色-橙色固体分离，97.7％AUC HPLC纯度。1H NMR(300MHz；DMSO d6)δ11.05(s，2H)，7.58(s，2H)。13C NMR(300MHz；DMSO d6)δ163.2，154.7，147.1，146.8，138.7，135.3，134.5，131.3，126.7，124.5，110.3，107.7，82.8，79.0。MS MSD阱：m/z 791.0(M+1)+(精确质量790.77)。UV-VISλmax＝554nm，甲醇中。
实施例8-制备2',4,5,5',6,7-六氯-3',6'-二羟基-4',7'-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮
(图1g)
步骤1：根据实施例1步骤1描述的程序，处理四氯邻苯二甲酸酐(5g，17.48mmol)，4-氯间苯二酚(2.78g，19.23mmol)和2-氯间苯二酚(2.78g，19.23mmol)，提供6.2g的粗制产品(经HPLC测大约54％纯的2’,4,5,5’,6,7-六氯-3',6'-二羟基-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮)，将其收集并作为混合物用于后续步骤。
步骤2：根据实施例1步骤2描述的程序，碘化2’,4,5,5’,6,7-五氯-3',6'-二羟基-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮(6.2g，54.4％希望的化合物，6.25mmol)，产生7.16g(60.8％希望的化合物，5.50mmol，88％收率)。经由SFC纯化(80g/min总流量，40％共溶剂(50/50 IPA/EtOH0.5％TFA/CO2，140巴，254nm，在3x25cm 5m RegisPack柱上)分离粗制产品(3.37g，60.8％希望的化合物，2.59mmol)，提供427mg(0.54mmol，20.8％SFC回收率)的2',4,5,5',6,7-六氯-3',6'-二羟基-4',7'-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮，是浅粉色固体。1H NMR(300MHz；DMSO d6)δ11.05(s，1H)，10.85(s，1H)，7.60(s，1H)，7.40(s，1H)。13C NMR(300MHz；DMSO d6)δ163.1，155.4，154.7，149.6，148.0，146.5，138.7，135.3，134.5，131.3，127.9，126.8，124.7，116.7，110.3，109.0，107.5，82.4，79.6，78.5。MS MSD阱：m/z 790.7(M+1)+(精确质量790.7)。UV-VISλmax＝552nm，甲醇中。
实施例9–将4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮降解为4,5,6,7-四氯-3',6'-二羟基-2',4',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮
(图1a和1i)
向6.5g(6.67mmol)的4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮加入130mL丙酮、30mL水和6.6g碘化钠(44.0mmol)。将混合物加热至回流持续82.5小时，HPLC分析指出35.4％的标题化合物存在于与原料的混合物中。将反应混合物用130mL水和150mL乙酸乙酯稀释，在室温下放置过夜。除去有机层，水层用100mL乙酸乙酯萃取。经合并的有机层用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，产生6.73g粗制产品，经HPLC测含有35.4％的标题化合物。标题化合物经由硅胶色谱法用66％：14％：18％：4％的甲苯：二噁烷：己烷：乙酸自上述物质的一部分分离。在连续色谱法步骤之后，4,5,6,7-四氯-3',6'-二羟基-2',4',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮得以分离，是红色固体(90mg)。1H NMR(300MHz；DMSO d6)δ11.26，(s，1H)，10.19(s，1H)，7.56(s，1H)，7.51(s，1H)，6.84(s，1H)。13C NMR(300MHz；DMSO d6)δ163.4，159.0，158.3，151.8，150.8，147.2，138.6，136.9，135.1，126.7，124.5，110.6，108.8，101.7，81.2，88.7，77.1。MS MSD阱：m/z 848.8(M+1)+(精确质量847.7)。UV-VISλmax＝539nm，甲醇中。
实施例10-通过不完全碘化制备4,5,6,7-四氯-2’,4’,5’-三碘荧光素(图1h)和有关化合物
向500mL圆底烧瓶加入10g(21.3mmol)四氯荧光素，13mL 5 MNaOH，300mL水，7.08g NaI(47.2mmol)和16.24g碘(64mmol)。将溶液加热至50℃持续6.5小时，随后将其冷却至室温。加入亚硫酸氢钠，随后加入乙酸直至pH为3.7。混合物用乙酸乙酯萃取，用水然后盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤和真空浓缩。18.2g的红橙色沫状物得以分离，是46％4,5,6,7-四氯-4’,5’-二碘荧光素和43％的标题化合物4,5,6,7-四氯-2’,4’,5’-三碘荧光素的混合物，均为AUC HPLC纯度。LCMS MS扫描800-1000：m/z 846.52(M-1)-(精确质量847.7)。UV-VISλmax＝540nm，PBS中。与实施例1相比，其中6当量的碘于90℃基本定量转化为四碘化产品，该反应使用更温和的加热和3当量的碘产生较低碘化的杂质的混合物。这展示如何改变反应条件以控制较低碘化的产品的收率。
实施例11–将4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮降解为4,5,6,7-四氯-3',6'-二羟基-2',4',5'-三碘-7’-异丙基-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮(图1a和1s)
在室温下，向充有ZnCl2(0.5mL，0.50mmol)、异丙基氯化镁(0.23mL，0.45mmol)和二(PPh3)2PdCl2(催化量)的THF溶液的圆底烧瓶，加入200mg(0.21mmol)4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮的2mL THF溶液。在室温下搅拌溶液38小时。反应用5mL USP水、0.5mL乙酸和2滴5M硫酸淬灭。有机层用USP水(3mL)洗涤，在硫酸钠上干燥，真空浓缩。分离出195mg橙红色固体，其经HPLC测是2.3％的标题化合物和42.9％的4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮的混合物。为了确认结构，在下述实施例中进行标题化合物的分离。
实施例12–分离4,5,6,7-四氯-3',6'-二羟基-2',4',5'-三碘-7’-异丙基-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮和2,3,4,5-四氯-6-(6-羟基-2,4,5,7-四碘-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸二钠盐
(图1s至1t)
将118g(0.11mol)的商业级玫瑰红二钠盐溶于985mL USP水，并用400mL 1 M HCl酸化至pH 1-2，提供浆料。将该浆料用1800mL乙酸乙酯萃取，分离有机层。水层用额外的100mL乙酸乙酯萃取，分离有机层。浓缩经合并的有机层直至剩余约1800mL溶剂。然后，将浆料用500mL庚烷处理，过滤，用250mL庚烷冲洗湿滤饼。于60℃干燥固体，然后在覆有箔的烧瓶中在氮气氛下与760mL二噁烷相组合。将所得浆料加热至95℃，并在该温度保持70分钟。冷却浆料，过滤。在氮下，将湿滤饼用2体积的二噁烷冲洗，干燥。将该样品溶于45mLTHF(不含抑制剂)，浓缩至15-20mL，并加载于氧化铝柱上(510g中性氧化铝，用300mL 90乙腈：10异丙醇：1乙酸：1 H2O溶液)。将上述柱用相同溶液洗脱，合并含有产品的级分，减压浓缩，与庚烷共沸干燥。重复该程序第二次，随后将作为结果的分离的固体溶于无水的THF并加载至硅胶制备板。将制备板用66％甲苯：14％二噁烷：18％庚烷：4％乙酸洗脱一次。从制备板刮下上方谱带，用10mL无水THF消化，过滤，用20mL THF冲洗。真空浓缩滤液，提供59mg标题化合物，是橙红色残余物，85％AUC HPLC纯度。1H NMR(300MHz；丙酮d6)δ7.67(s，1H)，6.99(s，1H)，3.27(m，1H)，1.12(d，J＝5.4Hz 3H)，1.06(d，J＝5.1Hz，3H)。MS MSD阱：m/z 888.6(M-1)-(精确质量887.65)。UV-VISλmax＝552nm，甲醇中。
仅出于示例性意图提供上述描述，并不期望限制本申请的发明。
作为新颖内容要求保护的以及希望由专利证保护的范围由所附权利要求所限定。

Claims (83)

1.制备式4化合物的方法：
其中R1独立地是Cl或Br，R2、R3、R4和R5是I，R6是H，而R11和R12独立地是H或能形成药学上可接受的盐的平衡离子，所述方法包括：
a)在基本上不含氯阴离子且基本上不含产生氯阴离子的杂质的酸性溶液中，将式1化合物，
其中R1独立地是Cl或Br，与2当量的式2化合物组合，
其中R7、R8、R9和R10是H，以形成式3a中间体化合物，
其中R1独立地是Cl或Br而R2、R3、R4、R5和R6是H；
b)在基本上不含氯阴离子且基本上不含产生氯阴离子的杂质的溶液中，将式3a中间体化合物与至少4当量的碘组合，以形成基本上不含式4化合物的卤化转移杂质的式4化合物，式4化合物的卤化转移杂质中R1独立地是Cl或Br；R2、R3、R4和R5中至少一个是Cl而其余的是I；R6是H；而R11和R12独立地是H、Na、K、Li或能形成药学上可接受的盐的平衡离子；
其中“基本上不含氯阴离子且基本上不含产生氯阴离子的杂质”是指所述反应条件、试剂或中间体以1500ppm或更低的水平具有氯阴离子、含有氯阴离子的杂质或能够产生氯阴离子的杂质；和
“基本上不含式4化合物的卤化转移杂质”是指所述杂质以0.15％重量或更低的水平存在。
2.权利要求1的方法，其中式4化合物的卤化转移杂质占小于0.15重量百分比。
3.权利要求1的方法，其中所述卤化转移杂质包含选自下述的至少一种化合物：
2’,4,5,6,7-五氯-3’,6’-二羟基-4',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮；4,4',5,6,7-五氯-3',6'-二羟基-2',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮；2’,4,5,6,7,7’-六氯-3’,6’-二羟基-4’,5’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮；4,4’,5,5’,6,7-六氯-3’,6’-二羟基-2’,7’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮；2',4,5,5',6,7-六氯-3',6'-二羟基-4',7'-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮；
它们的异构醌型；及其混合物。
4.权利要求1的方法，其中所述酸性溶液包含小于1500ppm的氯化物。
5.权利要求1的方法，其中所述酸性溶液包含选自熔点小于250℃的烷基磺酸或芳基磺酸、熔点小于250℃的烷基羧酸或芳基羧酸、非氯化物质子酸、非氯化物路易斯酸的至少一种酸，其聚合物键合的制备物、其盐、其水溶液，及其混合物，它们单用或与甲磺酸组合。
6.权利要求1的方法，其中所述酸性溶液包含选自对甲苯磺酸、苯磺酸、硫酸、三氟甲磺酸、乙磺酸、乙酸、丙酸、三氟乙酸、樟脑磺酸的至少一种酸，其聚合物键合的制备物、其盐、其水溶液，及其混合物，它们单用或与甲磺酸组合。
7.权利要求1的方法，其中所述酸性溶液包含甲磺酸。
8.权利要求1的方法，其中所述式2和式1化合物以2.5:1至3.2:1的比率组合。
9.权利要求1的方法，还包括在所述酸性溶液中在85℃至95℃的温度将式1和式2化合物加热1至16小时的时间段。
10.权利要求1的方法，还包括分离式3a中间体化合物。
11.权利要求10的方法，其中所述分离包括悬浮式3a中间体化合物，收集式3a中间体化合物，用基本上不含氯阴离子的溶剂冲洗式3a中间体化合物，其中“基本上不含氯阴离子”是指所述溶剂以1500ppm或更低的水平具有氯阴离子。
12.权利要求11的方法，其中所述溶剂包含加热至60℃的丙酮和水的混合物。
13.权利要求1的方法，其中含有式3a中间体化合物和碘的所述溶液包含小于1500ppm氯化物。
14.权利要求1的方法，还包括在碱性溶液中在20℃至100℃的温度将经组合的式3a中间体化合物和碘加热1至24小时的时间段。
15.权利要求14的方法，还包括在溶液中在70℃至95℃的温度将经组合的式3a中间体化合物和碘加热1至24小时的时间段。
16.权利要求14的方法，其中所述碱性溶液包含选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸氢钠、碳酸氢钾及其混合物的至少一种碱。
17.权利要求1的方法，其中所述溶液包含浓度0.4至1.0M的氢氧化钠。
18.权利要求1的方法，还包括将至少一种碘增溶剂加入包含式3a中间体化合物和碘的溶液，其中所述碘增溶剂选自碘化钾、碘化锂、碘化钠及其混合物。
19.权利要求18的方法，其中所述碘增溶剂包含1至2.5当量的碘化钠。
20.权利要求1的方法，其中通过向溶液加入氧化剂和碘化物盐原位产生碘化物，其中所述溶液基本上不含氯阴离子、氯离子自由基、次氯酸盐、次氯酸或其混合物，其中“基本上不含氯阴离子、氯离子自由基、次氯酸盐、次氯酸或其混合物”是指所述溶液以1500ppm或更低的水平具有氯阴离子、氯离子自由基、次氯酸盐、次氯酸或其混合物。
21.权利要求1的方法，还包括在形成式4化合物之后将碘捕获剂加入溶液，其中所述碘捕获剂选自硫代硫酸钠、硫代硫酸钾、硫代硫酸铵、亚硫酸钾、亚硫酸钠及其混合物。
22.权利要求21的方法，其中所述碘捕获剂是亚硫酸钠。
23.权利要求22的方法，其中所述碘捕获剂的加入在10℃或更低的温度进行。
24.权利要求1的方法，其中R11和R12包含钠。
25.用于制备式4化合物的方法
其中R1独立地是Cl或Br，R2、R3、R4和R5是I，R6是H，而R11和R12独立地是H、Na、K、Li或能形成药学上可接受的盐的平衡离子，包括在基本上不含氯阴离子且基本上不含产生氯阴离子的杂质的溶液中，将式3a化合物，
或其醌型异构体，其中R1独立地是Cl或Br而R2、R3、R4、R5和R6是H，并且其中式3a或其醌型异构体基本上不含氯阴离子杂质和产生氯阴离子的试剂，与至少4当量的碘组合，以形成基本上不含式4化合物的卤化转移杂质的式4化合物，式4化合物的卤化转移杂质中R1独立地是Cl或Br，R2、R3、R4和R5中至少一个是Cl而其余的是I，R6是H，而R11和R12独立地是H、Na、K、Li或能形成药学上可接受的盐的平衡离子；
其中“基本上不含氯阴离子且基本上不含产生氯阴离子的杂质”或“基本上不含氯阴离子杂质和产生氯阴离子”是指所述反应条件、试剂或中间体以1500ppm或更低的水平具有氯阴离子、含有氯阴离子的杂质或能够产生氯阴离子的杂质；和
其中“基本上不含式4化合物的卤化转移杂质”是指所述杂质以0.15％重量或更低的水平存在。
26.权利要求25的方法，其中式4化合物的卤化转移杂质占小于0.15的重量百分比。
27.权利要求25的方法，其中所述卤化转移杂质包含选自下述的至少一种化合物：
2’,4,5,6,7-五氯-3’,6’-二羟基-4',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮；4,4',5,6,7-五氯-3',6'-二羟基-2',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮；2’,4,5,6,7,7’-六氯-3’,6’-二羟基-4’,5’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮；4,4’,5,5’,6,7-六氯-3’,6’-二羟基-2’,7’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮；2',4,5,5',6,7-六氯-3',6'-二羟基-4',7'-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮；
其异构醌型；及其混合物。
28.权利要求25的方法，其中所述溶液包含小于1500ppm的氯化物。
29.权利要求25的方法，还包括在碱性溶液中在20℃至100℃的温度将经组合的式3a化合物和碘加热1至24小时的时间段。
30.权利要求29的方法，还包括在溶液中在70℃至95℃的温度将经组合的式3a化合物和碘加热2至18小时的时间段。
31.权利要求25的方法，其中所述溶液包含选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸氢钠、碳酸氢钾及其混合物的至少一种碱。
32.权利要求25的方法，其中所述溶液包含浓度0.4至1.0M的氢氧化钠。
33.权利要求25的方法，还包括将至少一种碘增溶剂加入包含式3a化合物和碘的溶液，其中所述碘增溶剂选自碘化钾、碘化锂、碘化钠及其混合物。
34.权利要求33的方法，其中所述碘增溶剂包含1至2.5当量的碘化钠。
35.权利要求25的方法，其中通过向溶液加入氧化剂和碘化物盐原位产生碘化物，其中所述溶液基本上不含氯阴离子、氯离子自由基、次氯酸盐、次氯酸或其混合物，其中“基本上不含氯阴离子、氯离子自由基、次氯酸盐、次氯酸或其混合物”是指所述溶液以1500ppm或更低的水平具有氯阴离子、氯离子自由基、次氯酸盐、次氯酸或其混合物。
36.权利要求25的方法，还包括在形成式4化合物之后将碘捕获剂加入溶液，其中所述碘捕获剂选自硫代硫酸钠、硫代硫酸钾、硫代硫酸铵、亚硫酸钾、亚硫酸钠及其混合物。
37.权利要求36的方法，其中所述碘捕获剂是亚硫酸钠。
38.权利要求37的方法，其中所述碘捕获剂的加入在10℃或更低的温度进行。
39.权利要求25的方法，其中R11和R12包含钠。
40.用于制备式3化合物的方法
其中R1独立地是Cl或Br，R2、R3、R4和R5是I而R6是H，包括：
a)在酸性溶液中在20℃至250℃的温度将式1化合物，
其中R1独立地是Cl或Br，与2当量的式2化合物组合，
其中R7、R8、R9和R10是H，以形成式3a化合物；
分离式3a中间体化合物，
其中R1独立地是Cl或Br而R2、R3、R4、R5和R6是H；
b)在基本上不含氯阴离子和基本上不含产生氯阴离子的杂质的溶液中将式3a中间体化合物与4当量的碘在20℃至100℃的温度组合以形成式3化合物；
d)将碘捕获剂加入式3化合物；
e)将式3化合物酸化至小于5的pH，冷却至小于10℃的温度；和
f)分离基本上不含卤化转移杂质的式3化合物，卤化转移杂质中R1独立地是Cl或Br，R2、R3、R4和R5中至少一个是Cl而其余的是I，而R6是H；
其中“基本上不含氯阴离子和基本上不含产生氯阴离子的杂质”是指所述反应条件、试剂或中间体以1500ppm或更低的水平具有氯阴离子、含有氯阴离子的杂质或能够产生氯阴离子的杂质；和
其中“基本上不含卤化转移杂质”是指所述杂质以0.15％重量或更低的水平存在。
41.权利要求40的方法，其中式3化合物的卤化转移杂质占小于0.15的重量百分比。
42.权利要求40的方法，其中所述卤化转移杂质包含选自下述的至少一种化合物：
2’,4,5,6,7-五氯-3’,6’-二羟基-4',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮；4,4',5,6,7-五氯-3',6'-二羟基-2',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮；2’,4,5,6,7,7’-六氯-3’,6’-二羟基-4’,5’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮；4,4’,5,5’,6,7-六氯-3’,6’-二羟基-2’,7’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮；2',4,5,5',6,7-六氯-3',6'-二羟基-4',7'-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮；
其异构醌型；及其混合物。
43.权利要求40的方法，其中所述酸性溶液包含小于1500ppm的氯化物。
44.权利要求40的方法，其中所述酸性溶液包含选自熔点小于250℃的烷基磺酸或芳基磺酸、熔点小于250℃的烷基羧酸或芳基羧酸、非氯化物质子酸、非氯化物路易斯酸的至少一种酸，其聚合物键合的制备物、其盐、其水溶液，及其混合物，它们单用或与甲磺酸组合。
45.权利要求40的方法，其中所述酸性溶液包含选自对甲苯磺酸、苯磺酸、硫酸、三氟甲磺酸、乙磺酸、乙酸、丙酸、三氟乙酸、樟脑磺酸的至少一种酸，其聚合物键合的制备物、其盐、其水溶液，及其混合物，它们单用或与甲磺酸组合。
46.权利要求40的方法，其中所述酸性溶液包含甲磺酸。
47.权利要求40的方法，其中所述式2和式1化合物以2.5:1至3.2:1的比率组合。
48.权利要求40的方法，还包括在所述酸性溶液中在85℃至95℃的温度将式1和式2化合物加热1至16小时的时间段。
49.权利要求40的方法，还包括分离式3a中间体化合物。
50.权利要求49的方法，其中所述分离包括悬浮式3a中间体化合物，收集式3a中间体化合物，并用基本上不含氯阴离子的溶剂冲洗式3a中间体化合物，其中“基本上不含氯阴离子”是指所述溶剂以1500ppm或更低的水平具有氯阴离子。
51.权利要求50的方法，其中所述溶剂包含加热至60℃的丙酮和水的混合物。
52.权利要求40的方法，其中含有式3a中间体化合物的溶液包含小于1500ppm的氯化物。
53.权利要求40的方法，还包括在碱性溶液中在20℃至100℃的温度将经组合的式3a中间体化合物和碘加热1至24小时的时间段。
54.权利要求53的方法，还包括在溶液中在70℃至95℃的温度将经组合的式3a中间体化合物和碘加热1至24小时的时间段。
55.权利要求40的方法，其中组合的式3a中间体化合物和碘的溶液包含选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸氢钠、碳酸氢钾及其混合物的至少一种碱。
56.权利要求40的方法，其中所述溶液包含浓度0.4至1.0M的氢氧化钠。
57.权利要求40的方法，还包括将至少一种碘增溶剂加入包含经组合的式3a中间体化合物和碘的溶液，其中所述碘增溶剂选自碘化钾、碘化锂、碘化钠及其混合物。
58.权利要求57的方法，其中所述碘增溶剂包含1至2.5当量的碘化钠。
59.权利要求40的方法，其中通过向含有式3a中间体化合物的溶液加入氧化剂和碘化物盐原位产生碘化物，其中所述溶液基本上不含氯阴离子、氯离子自由基、次氯酸盐、次氯酸或其混合物，其中“基本上不含氯阴离子、氯离子自由基、次氯酸盐、次氯酸或其混合物”是指所述溶液以1500ppm或更低的水平具有氯阴离子、氯离子自由基、次氯酸盐、次氯酸或其混合物。
60.权利要求40的方法，还包括在形成式3化合物之后将碘捕获剂加入溶液，其中所述碘捕获剂选自硫代硫酸钠、硫代硫酸钾、硫代硫酸铵、亚硫酸钾、亚硫酸钠及其混合物。
61.权利要求60的方法，其中所述碘捕获剂是亚硫酸钠。
62.权利要求61的方法，其中碘捕获剂的加入在10℃或更低的温度进行。
63.权利要求40的方法，其中酸化包括将不含氯阴离子的酸加入含有式3的溶液。
64.权利要求63的方法，其中所述不含氯阴离子的酸包含浓度1百分比至5百分比的硫酸，并且其中以足以调节所述溶液pH至pH＝2至pH＝5的量加入所述硫酸。
65.权利要求64的方法，其中将所述pH调节至3。
66.权利要求40的方法，其中所述分离包括将式3化合物悬浮于选自水、二甲基甲酰胺、丙酮及其混合物的溶剂中；真空过滤；用选自水、二甲基甲酰胺、丙酮及其混合物的溶剂冲洗作为结果的滤液。
67.权利要求40的方法，其中将其中R1独立地是Cl或Br，R2、R3、R4、R5是I而R6是H的式3化合物转化为式4醌型，其中R11和R12独立地是H或能形成药学上可接受的盐的平衡离子
68.权利要求67的方法，其中R11和R12包含钠。
69.化学合成式4化合物的方法，
其中R1独立地是Cl或Br；R2、R3、R4和R5是I；R6是H；R11和R12独立地是H、Na、K、Li或能形成药学上可接受的盐的平衡离子，
包括在基本上不含氯阴离子和基本上不含产生氯阴离子的杂质的溶液中将式3a化合物，其中式3a化合物基本上不含氯阴离子杂质和产生氯阴离子的杂质，
其中R1独立地是Cl或Br；R2、R3、R4、R5和R6是H；
与碘组合，以形成式4化合物，其改进包括实质上不存在式4化合物的卤化转移杂质，其中对于式4化合物的卤化转移杂质而言，R1独立地是Cl或Br；R2、R3、R4和R5中至少一个是Cl而其余的是I；R6是H；R11和R12独立地是H、Na、K、Li或能形成药学上可接受的盐的平衡离子；
其中“基本上不含氯阴离子和基本上不含产生氯阴离子的杂质”或“基本上不含氯阴离子杂质和产生氯阴离子的杂质”是指所述反应条件、试剂或中间体以1500ppm或更低的水平具有氯阴离子、含有氯阴离子的杂质或能够产生氯阴离子的杂质。
70.权利要求69的方法，其中式4化合物的任意单一卤化转移杂质占小于0.15的重量百分比。
71.权利要求69的方法，其中所述卤化转移杂质包含选自下述的至少一种化合物：
2’,4,5,6,7-五氯-3’,6’-二羟基-4',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮；4,4',5,6,7-五氯-3',6'-二羟基-2',5',7'-三碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮；2’,4,5,6,7,7’-六氯-3’,6’-二羟基-4’,5’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮；4,4’,5,5’,6,7-六氯-3’,6’-二羟基-2’,7’-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9’-呫吨]-3-酮；2',4,5,5',6,7-六氯-3',6'-二羟基-4',7'-二碘-3H-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3-酮；
其异构醌型；及其混合物。
72.权利要求69的方法，其中所述溶液包含小于1500ppm的氯化物。
73.权利要求69的方法，还包括在碱性溶液中在20℃至100℃的温度将经组合的式3a化合物和碘加热1至24小时的时间段。
74.权利要求73的方法，还包括在溶液中在70℃至95℃的温度将经组合的式3a化合物和碘加热2至18小时的时间段。
75.权利要求69的方法，其中所述溶液包含选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸氢钠、碳酸氢钾及其混合物的至少一种碱。
76.权利要求69的方法，其中所述溶液包含浓度0.4至1.0M的氢氧化钠。
77.权利要求69的方法，还包括将至少一种碘增溶剂加入包含式3a化合物和碘的溶液，其中所述碘增溶剂选自碘化钾、碘化锂、碘化钠及其混合物。
78.权利要求77的方法，其中所述碘增溶剂包含1至2.5当量的碘化钠。
79.权利要求69的方法，其中通过向溶液加入氧化剂和碘化物盐原位产生碘化物，其中所述溶液基本上不含氯阴离子、氯离子自由基、次氯酸盐、次氯酸或其混合物，其中“基本上不含氯阴离子、氯离子自由基、次氯酸盐、次氯酸或其混合物”是指所述溶液以1500ppm或更低的水平具有氯阴离子、氯离子自由基、次氯酸盐、次氯酸或其混合物。
80.权利要求69的方法，还包括在形成式4化合物之后将碘捕获剂加入溶液，其中所述碘捕获剂选自硫代硫酸钠、硫代硫酸钾、硫代硫酸铵、亚硫酸钾、亚硫酸钠及其混合物。
81.权利要求80的方法，其中所述碘捕获剂是亚硫酸钠。
82.权利要求80的方法，其中碘捕获剂的加入在10℃或更低的温度进行。
83.权利要求69的方法，其中R11和R12包含钠。
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20140038382A (ko) * 2011-03-10 2014-03-28 프로벡투스 파마슈티컬스 인코포레이티드 암의 치료 증대를 위한 국소 면역조절 치료제와 전신 면역조절 치료제의 복합제
US20150111301A1 (en) * 2013-10-22 2015-04-23 The Government Of The United States As Represented By The Secretary Of The Air Force Rose bengal for detection of oxidative decomposition of contaminants
JP7015232B2 (ja) * 2018-11-21 2022-02-02 東レ・ファインケミカル株式会社 高純度のフルオレセイン類化合物の製造方法
CN115916343A (zh) 2020-03-26 2023-04-04 普罗维克图斯药品技术公司 卤代呫吨在肿瘤学和病毒学中的新用途
US11938182B2 (en) 2020-03-26 2024-03-26 Provectus Pharmatech, Inc. Halogenated xanthenes as vaccine adjuvants

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5637733A (en) * 1995-09-27 1997-06-10 Warner-Jenkinson Company, Inc. Syntheses of fluorescein compounds with excess resorcinol as a solvent
WO2002062333A1 (en) * 2001-02-05 2002-08-15 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Use of 9h-xanthenes in a method of inhibiting viral replication targeting the nucleocapsid protein
WO2006001925A1 (en) * 2004-06-10 2006-01-05 Xantech Pharmaceuticals, Inc. Diagnostic agents for positron emission imaging using radiolabeled halogenated xanthenes and methods for positron emission imaging with radiolabeled halogenated xanthene diagnostic agents
CN1331797C (zh) * 2005-04-30 2007-08-15 南京师范大学 无氯无碱多功能复合混凝土矿渣掺合料及其生产方法

Family Cites Families (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE108838C (zh)
US1931049A (en) * 1931-11-21 1933-10-17 Nat Aniline & Chem Co Inc Process of making dihydroxyfluoranes
US1965842A (en) * 1931-11-21 1934-07-10 Nat Aniline & Chem Co Inc Production of hydroxybenzenephthaleins
US3829440A (en) * 1972-12-21 1974-08-13 Richardson Merrell Inc Xanthene derivatives
SU517222A1 (ru) 1974-10-25 1977-06-25 Институт Биофизики Министерства Здравохранения Ссср Способ получени препарата бенгальска роза, меченного радиоизотопами йода
SU792878A1 (ru) 1978-08-29 1982-02-07 Ленинградский институт ядерной физики им. Б.П.Константинова Способ получени галогенированных производных флуоресцеина,меченных радиоизотопом йода
EP0050684B1 (en) 1980-10-27 1986-01-22 Syva Company Novel ether substituted fluorescein compounds as fluorescers and quenchers
SU992516A1 (ru) 1981-06-11 1983-01-30 Ленинградский Институт Ядерной Физики Им.Б.П.Константинова Способ получени галогенированных производных флуоресцеина,меченных радиоизотопом иода -123
ES8606451A1 (es) 1985-10-28 1986-04-16 Zoster Sa Procedimiento para la obtencion de la eritrosina sodica
IN168346B (zh) 1987-09-07 1991-03-16 Council Scient Ind Res
WO1997015832A1 (en) * 1995-10-23 1997-05-01 Novartis Ag Optical sensor system for the determination of ph values independently of ionic strength
US6162931A (en) 1996-04-12 2000-12-19 Molecular Probes, Inc. Fluorinated xanthene derivatives
US5945526A (en) * 1996-05-03 1999-08-31 Perkin-Elmer Corporation Energy transfer dyes with enhanced fluorescence
US6331286B1 (en) * 1998-12-21 2001-12-18 Photogen, Inc. Methods for high energy phototherapeutics
US7648695B2 (en) 1998-08-06 2010-01-19 Provectus Pharmatech, Inc. Medicaments for chemotherapeutic treatment of disease
US6372907B1 (en) * 1999-11-03 2002-04-16 Apptera Corporation Water-soluble rhodamine dye peptide conjugates
US6448407B1 (en) * 2000-11-01 2002-09-10 Pe Corporation (Ny) Atropisomers of asymmetric xanthene fluorescent dyes and methods of DNA sequencing and fragment analysis
US6800765B2 (en) * 2001-08-02 2004-10-05 Molecular Devices Corporation Fluorescent pH indicators for intracellular assays
JP2005532434A (ja) * 2002-07-01 2005-10-27 グアヴァ テクノロジーズ，インコーポレーテッド 蛍光色素、エネルギー転移ペア及び方法
FR2846331B1 (fr) * 2002-10-29 2006-11-17 Synth Innove Lab Phtaleines de purete elevee et leur procede de preparation
ATE552985T1 (de) * 2003-02-28 2012-04-15 Zink Imaging Llc Abbildungssystem
CN101528222A (zh) * 2006-06-19 2009-09-09 范德比尔特大学 用于诊断性和治疗性靶向cox-2的方法和组合物
GB0613287D0 (en) * 2006-07-05 2006-08-16 Ge Healthcare Ltd Dye imaging agents
ITMI20061713A1 (it) * 2006-09-08 2008-03-09 St Microelectronics Srl Procedimento per la sintesi di derivati alogenati della fluoresceina utili nella produzione di dispositivi di memoria non volatile

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5637733A (en) * 1995-09-27 1997-06-10 Warner-Jenkinson Company, Inc. Syntheses of fluorescein compounds with excess resorcinol as a solvent
WO2002062333A1 (en) * 2001-02-05 2002-08-15 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Use of 9h-xanthenes in a method of inhibiting viral replication targeting the nucleocapsid protein
WO2006001925A1 (en) * 2004-06-10 2006-01-05 Xantech Pharmaceuticals, Inc. Diagnostic agents for positron emission imaging using radiolabeled halogenated xanthenes and methods for positron emission imaging with radiolabeled halogenated xanthene diagnostic agents
CN1331797C (zh) * 2005-04-30 2007-08-15 南京师范大学 无氯无碱多功能复合混凝土矿渣掺合料及其生产方法

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