CN102526380A - 冠脉通片的质量控制方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及由中药材枸杞子、何首乌、淫羊藿、红花、石菖蒲、丹参、桑寄生、冰片制成的一种中药复方制剂冠脉通片的质量控制方法,其特征是利用高效液相色谱法、气相色谱法及薄层色谱法对该中药复方制剂中药材丹参、冰片进行含量测定以及对何首乌、淫羊藿做薄层鉴别。该方法能够有效控制冠脉通片的质量,可作为该药质量控制和考察工艺可靠性的方法。

Description

冠脉通片的质量控制方法
技术领域
本发明涉及一种治疗冠心病心绞痛中药的质量控制方法,属于制药领域。
技术背景
冠脉通片执行部颁标准,具有活血化瘀、芳香开窍、补益肝肾作用,用于肝肾不足,痰瘀阻络之胸痹,表现为心悸胸闷、胸痛头晕;以及冠心病心绞痛见以上症候者。该药由中药材枸杞子、何首乌、淫羊藿、红花、石菖蒲、丹参、桑寄生、冰片组成;其中丹参、冰片、何首乌、淫羊藿均是起主要治疗作用的药材。现有冠脉通片部颁标准质量控制方法中,缺少对这些起主要治疗作用药材的质量控制方法,因此,现有技术在全面评价冠脉通片质量优劣方面存在局限性。本发明克服现有技术的不足,完善冠脉通片的质量控制标准,增加了丹参、冰片含量测定的质量控制方法以及何首乌、淫羊藿薄层色谱定性鉴别方法,使本复方制剂质量控制标准进一步完善。
发明内容
本发明目的是克服现有技术不足,完善并制定冠脉通片的质量控制方法,增加了丹参、冰片含量测定的质量控制方法以及何首乌、淫羊藿薄层色谱定性鉴别方法,使质量检测方法更完善,能够有效控制冠脉通片的产品质量。
本发明通过下述技术方案得以实现:
1.冠脉通片中丹参用高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)含量测定:
a.色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.1%磷酸溶液-乙腈为流动相,二组份的配比为74∶26或75∶25;检测波长为270-290nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000。
b.对照品溶液的制备:精密称取丹酚酸B对照品适量,加70%-80%甲醇制成每1ml含丹酚酸B为0.02mg-0.06mg的溶液,摇匀,制成对照品溶液;
c.供试品溶液的制备:取冠脉通片适量,除去包衣,研细,混匀,精密称取0.1g-0.3g,精密加入70%-80%甲醇25ml-75ml,称定重量,超声提取30-60分钟,放冷,用70%-80%甲醇补足减失的重量,摇匀,过滤,取续滤液,通过0.45μm的微孔滤膜,制成供试品溶液;
d.高效液相色谱法测定:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-20μl,注入液相色谱仪,测定。以冠脉通片除去包衣,每克含丹参按丹酚酸B计,不得少于7.0mg/克。
2.冠脉通片中冰片用气相色谱法(中国药典2010年版一部附录VIE)含量测定:
a.色谱条件与系统适用性试验:以聚乙二醇为固定相的毛细管柱,柱温为140℃;进样口温度160-200℃;检测器温度为200-250℃;分流进样,分流比1∶10;采用内标物法测定;理论板数按龙脑峰计算应不低于2000;
b.内标物溶液的制备:精密称取水杨酸甲酯适量,加乙酸乙酯制成浓度为5.0-10.0mg/ml的溶液;作为内标物溶液;
c.对照品溶液的制备:精密称取龙脑对照品适量,置10ml量瓶中,加内标物溶液1ml,加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度,摇匀,制成每1ml含0.50-1.00mg的溶液,作为对照品溶液;
d.供试品溶液的制备:精密量取内标物溶液与乙酸乙酯液,配制成1∶9的混合溶液;取冠脉通片适量,除去包衣,研细,混匀,精密称取0.5g-1.5g,精密加入上述混合溶液15ml-30ml,称定重量,超声提取30-60分钟,凉至室温,称定重量,用上述混合溶液补足减失的重量,摇匀,静置,取上清液,过滤,取续滤液,通过0.45μm的微孔滤膜,制成供试品溶液;
e.气相色谱法测定:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1-3μl,注入气相色谱仪,测定。以冠脉通片除去包衣,每克含冰片按龙脑计,不得少于6.5mg/克。
3.冠脉通片中何首乌用薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)鉴别:
a.对照药材溶液的制备:取何首乌对照药材0.2-1g,加乙醇或乙酸乙酯的任一种1050ml,加热回流30-70分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇或乙酸乙酯的任一种1-5ml使溶解,制成对照药材溶液;
b.供试品溶液的制备:取冠脉通片适量,除去包衣,研细,取1.5-3.0g,加乙醇或乙酸乙酯的任一种30-120ml,加热回流30-70分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇或乙酸乙酯的任一种1-5ml使溶解,制成供试品溶液;
c.薄层色谱法试验:吸取上述对照药材和供试品两种溶液各6-20μl,分别点于同一硅胶G或GF254任一种薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂,三组份的配比为15∶2∶1或16∶3∶2,展开,取出,晾干,置365nm紫外灯下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;
4.冠脉通片中淫羊藿用薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)鉴别:
a.对照品溶液的制备:取淫羊藿苷对照品,加甲醇或乙醇制成每1ml含0.5-2mg的溶液,作为对照品溶液;
b.供试品溶液的制备:取冠脉通片适量,除去包衣,研细,取1.5-3.0g,置250ml平底烧瓶中以50ml乙酸乙酯超声提取30-60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇或乙醇的任一种1-5ml使溶解,制成供试品溶液;
c.薄层色谱法试验:吸取上述对照品溶液和供试品溶液各5-20l,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H或GF254任一种薄层板上,以乙酸丁酯-甲酸-水5-10℃以下放置的上层溶液为展开剂,三组份的配比为1.3∶1∶1或1.5∶1∶1,展开,取出,晾干,喷以5-10%三氯化铝试液,在100-110℃加热烘干2-10分钟,置365nm紫外光灯下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
本发明所述冠脉通片部颁标准为‘中药成方制剂第十九册WS3-B-3619-98’所载标准。
本发明提供了丹参、冰片含量测定的质量控制方法以及何首乌、淫羊藿薄层色谱定性鉴别方法,方法简便易行,可作为冠脉通片质量控制指标。
具体实施方式
实施例:
处方:
枸杞子100g  何首乌100g  淫羊藿100g  红花20g
石菖蒲100g  丹参100g    桑寄生100g  冰片6g
取组方中何首乌50g、丹参50g粉碎成细粉,备用;组方中枸杞子、桑寄生、淫羊藿、红花、石菖蒲及剩余的丹参、何首乌,加水煎煮三次,第一次2小时,第二、三次各1小时,合并提取液,滤过,滤液浓缩成相对密度1.43-1.45(60±5℃热测)的浸膏;浸膏加入何首乌、丹参细粉及适量辅料,混匀,制成颗粒,加入冰片及适量润滑剂,混匀,压制成713片,包衣,即得。该药物的质量控制方法包括下列步骤:
1.冠脉通片中丹参用高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)含量测定:
a.色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.1%磷酸溶液-乙腈为流动相,二组份的配比为74∶26;检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000。
b.对照品溶液的制备:精密称取丹酚酸B对照品适量,加75%甲醇制成每1ml含丹酚酸B为0.03mg的溶液,摇匀,制成对照品溶液;
c.供试品溶液的制备:取冠脉通片适量,除去包衣,研细,混匀,精密称取0.2g,精密加入75%甲醇50ml,称定重量,超声提取40分钟,放冷,用75%甲醇补足减失的重量,摇匀,过滤,取续滤液,通过0.45μm的微孔滤膜,制成供试品溶液;
d.高效液相色谱法测定:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定。以冠脉通片除去包衣,每克含丹参按丹酚酸B计,不得少于7.0mg/克。
2.冠脉通片中冰片用气相色谱法(中国药典2010年版一部附录VIE)含量测定:
a.色谱条件与系统适用性试验:以聚乙二醇为固定相的毛细管柱,柱温为140℃;进样口温度180℃;检测器温度为220℃;分流进样,分流比1∶10;采用内标物法测定;理论板数按龙脑峰计算应不低于2000;
b.内标物溶液的制备:精密称取水杨酸甲酯适量,加乙酸乙酯制成浓度为5.0mg/ml的溶液;作为内标物溶液;
c.对照品溶液的制备:精密称取龙脑对照品适量,置10ml量瓶中,加内标物溶液1ml,加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度,摇匀,制成每1ml含0.78mg的溶液,作为对照品溶液;
d.供试品溶液的制备:精密量取内标物溶液与乙酸乙酯液,配制成1∶9的混合溶液;取冠脉通片适量,除去包衣,研细,混匀,精密称取1.0g,精密加入上述混合溶液20ml,称定重量,超声提取40分钟,凉至室温,称定重量,用上述混合溶液补足减失的重量,摇匀,静置,取上清液,过滤,取续滤液,通过0.45μm的微孔滤膜,制成供试品溶液;
e.气相色谱法测定:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2μl,注入气相色谱仪,测定。以冠脉通片除去包衣,每克含冰片按龙脑计,不得少于6.5mg/克。
3.冠脉通片中何首乌用薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)鉴别:
a.对照药材溶液的制备:取何首乌对照药材0.3g,加乙醇50ml,加热回流60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇3ml使溶解,制成对照药材溶液;
b.供试品溶液的制备:取冠脉通片适量,除去包衣,研细,取2.1g,加乙醇100ml,加热回流60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇3ml使溶解,制成供试品溶液;
c.薄层色谱法试验:吸取上述对照药材和供试品两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15∶2∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置365nm紫外灯下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;
4.冠脉通片中淫羊藿用薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)鉴别:
a.对照品溶液的制备:取淫羊藿苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;
b.供试品溶液的制备:取冠脉通片适量,除去包衣,研细,取2.1g,置250ml平底烧瓶中以50ml乙酸乙酯超声提取40分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,制成供试品溶液;
c.薄层色谱法试验:吸取上述对照品溶液5-10μl,供试品溶液10-15μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上,以乙酸丁酯-甲酸-水(1.3∶1∶1)10℃以下放置的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%三氯化铝试液,在105℃加热烘干2-5分钟,置365nm紫外光灯下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。

Claims (2)

1.冠脉通片的质量控制方法,其中所述的药物配方由中药材枸杞子、何首乌、淫羊藿、红花、石菖蒲、丹参、桑寄生、冰片组成,其特征在于该方法包括下列步骤:
(1)该药物中药材丹参用高效液相色谱法含量测定:
a.色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.1%磷酸溶液-乙腈为流动相,二组份的配比为74∶26或75∶25;检测波长为270-290nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000。
b.对照品溶液的制备:精密称取丹酚酸B对照品适量,加70%-80%甲醇制成每1ml含丹酚酸B为0.02mg-0.06mg的溶液,摇匀,制成对照品溶液;
c.供试品溶液的制备:取冠脉通片适量,除去包衣,研细,混匀,精密称取0.1g-0.3g,精密加入70%-80%甲醇25ml-75ml,称定重量,超声提取30-60分钟,放冷,用70%-80%甲醇补足减失的重量,摇匀,过滤,取续滤液,通过0.45μm的微孔滤膜,制成供试品溶液;
d.高效液相色谱法测定:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-20μl,注入液相色谱仪,测定。以冠脉通片除去包衣,每克含丹参按丹酚酸B计,不得少于7.0mg/克。
(2)该药物中冰片用气相色谱法含量测定:
a.色谱条件与系统适用性试验:以聚乙二醇为固定相的毛细管柱,柱温为140℃;进样口温度160-200℃;检测器温度为200-250℃;分流进样,分流比1∶10;采用内标物法测定;理论板数按龙脑峰计算应不低于2000;
b.内标物溶液的制备:精密称取水杨酸甲酯适量,加乙酸乙酯制成浓度为5.0-10.0mg/ml的溶液;作为内标物溶液;
c.对照品溶液的制备:精密称取龙脑对照品适量,置10ml量瓶中,加内标物溶液1ml,加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度,摇匀,制成每1ml含0.50-1.00mg的溶液,作为对照品溶液;
d.供试品溶液的制备:精密量取内标物溶液与乙酸乙酯液,配制成1∶9的混合溶液;取冠脉通片适量,除去包衣,研细,混匀,精密称取0.5g-1.5g,精密加入上述混合溶液15ml-30ml,称定重量,超声提取30-60分钟,凉至室温,称定重量,用上述混合溶液补足减失的重量,摇匀,静置,取上清液,过滤,取续滤液,通过0.45μm的微孔滤膜,制成供试品溶液;
e.气相色谱法测定:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1-3μl,注入气相色谱仪,测定。以冠脉通片除去包衣,每克含冰片按龙脑计,不得少于6.5mg/克。
2.根据权利要求1所述冠脉通片的质量控制方法,其特征在于该方法包括下列步骤:
(1)该药物中药材何首乌用薄层色谱法鉴别:
a.对照药材溶液的制备:取何首乌对照药材0.2-1g,加乙醇或乙酸乙酯的任一种10-50ml,加热回流30-70分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇或乙酸乙酯的任一种1-5ml使溶解,制成对照药材溶液;
b.供试品溶液的制备:取冠脉通片适量,除去包衣,研细,取1.5-3.0g,加乙醇或乙酸乙酯的任一种30-120ml,加热回流30-70分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇或乙酸乙酯的任一种1-5ml使溶解,制成供试品溶液;
c.薄层色谱法试验:吸取上述对照药材和供试品两种溶液各6-20μl,分别点于同一硅胶G或GF254任一种薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂,三组份的配比为15∶2∶1或16∶3∶2,展开,取出,晾干,置365nm紫外灯下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;
(2)该药物中药材淫羊藿用薄层色谱法鉴别:
a.对照品溶液的制备:取淫羊藿苷对照品,加甲醇或乙醇制成每1ml含0.5-2mg的溶液,作为对照品溶液;
b.供试品溶液的制备:取冠脉通片适量,除去包衣,研细,取1.5-3.0g,置250ml平底烧瓶中以50ml乙酸乙酯超声提取30-60分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇或乙醇的任一种1-5ml使溶解,制成供试品溶液;
c.薄层色谱法试验:吸取上述对照品溶液和供试品溶液各5-20μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H或GF254任一种薄层板上,以乙酸丁酯-甲酸-水5-10℃以下放置的上层溶液为展开剂,三组份的配比为1.3∶1∶1或1.5∶1∶1,展开,取出,晾干,喷以5-10%三氯化铝试液,在100-110℃加热烘干2-10分钟,置365nm紫外光灯下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
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