CN102526237B - 用于清除晚期氧化蛋白终产物的药物组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物学和制剂学领域，涉及用于清除晚期氧化蛋白终产物的药物组合物及其用途。具体地，本发明的药物组合物包含如下组分：甘草、牡丹皮、附子、大黄、和桂枝。本发明的药物组合物能够有效地清除晚期氧化蛋白产物，具有作为防治慢性肾脏疾病、糖尿病肾病、糖尿病并发症、或动脉粥样硬化的药物的潜力。

Description

用于清除晚期氧化蛋白终产物的药物组合物及其用途

技术领域

本发明属于药物学和制剂学领域，涉及用于清除晚期氧化蛋白终产物的药物组合物及其用途。

背景技术

晚期氧化蛋白产物(Advanced oxidation proteinproducts，AOPPs，本发明中也称为AOPP)是体内氧化应激过程中生成的一类含双酪氨酸的蛋白质交联物，血浆AOPPs主要由白蛋白携带。循环AOPP水平增高最先在慢性肾功能衰竭、腹膜透析的患者中发现，随后在糖尿病、肥胖或代谢综合征、动脉粥样硬化等多种常见疾病中被证实。AOPP潴留还见于类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎等免疫炎症性疾病和恶性肿瘤(结肠、直肠癌、乳腺癌等)。AOPP被认为是体内氧化应激的敏感生物学标志。近年不断增加的研究证据表明，血浆AOPP水平增高促使该分子在肾脏和血管等组织中沉积并与慢性肾脏疾病、动脉粥样硬化病变及糖尿病肾病的发生发展密切相关(黄金杰，崔明姬.慢性肾功能衰竭患者晚期氧化蛋白与动脉粥样硬化.吉林医学，2008；29(17)：1493-1496；史春虹，姜一农.血清晚期氧化蛋白产物与2型糖尿病患者动脉粥样硬化的关系.中国动脉硬化杂志，2009；17(4)：297-300.)。AOPP有希望成为上述疾病发生发展的新的生物学标志或干预靶标。

中国专利ZL200310110019.3中公开了一种用于治疗慢性肾功能不全病的组合物。但是，该专利公开的组合物的制剂至今仍未上市，并且该组合物的实验研究结果表明，只能降低慢性肾功能不全病患者血循环中的肌酐、尿素氮，其对AOPP无作用。

因此，仍需寻找和开发对AOPP有清除作用的药物。

发明内容

本发明人经过深入的研究和创造性的劳动，得到了一种药物组合物，并且本发明人惊奇地发现，本发明的药物组合物能够有效地清除晚期氧化蛋白产物，具有作为防治慢性肾脏疾病、糖尿病肾病、糖尿病并发症、或动脉粥样硬化的药物的潜力。由此提供了下述发明：

本发明的一个方面涉及一种药物组合物，包含如下组分：

甘草、牡丹皮、附子、大黄、和桂枝。

优选地，所述甘草、牡丹皮、附子、大黄、或桂枝为饮片。

在本发明的一个实施方案中，所述的药物组合物由甘草、牡丹皮、附子、大黄、和桂枝组成。

在本发明的一个实施方案中，所述的药物组合物，其包含：

甘草    1-3重量份，

牡丹皮  0.5-2重量份，

附子    1-3重量份，

大黄    2-5重量份，和

桂枝    0.1-1重量份。

根据本发明任一项所述的药物组合物，其中，其特征还在于如下的(1)-(5)任一项或多项：

(1)甘草    1.5-2.5重量份；优选1.8-2.2重量份；

(2)牡丹皮  1-2重量份；优选1.2-1.8重量份；

(3)附子    1-2重量份；优选1.2-1.8重量份；

(4)大黄    2.5-4重量份；优选2.5-3.5重量份；

           更优选2.8-3.2重量份；和

(5)桂枝    0.3-0.8重量份；优选0.4-0.6重量份。

在本发明的一个实施方案中，所述的药物组合物，其包含：

甘草       2重量份，

牡丹皮     1.5重量份，

附子    1.5重量份，

大黄    3重量份，和

桂枝    0.5重量份

根据本发明任一项所述的药物组合物(提取物)，其通过下述步骤1)或2)制备：

1)取权利要求1至3中任一项所述的甘草、牡丹皮、附子、大黄、桂枝药材(例如饮片)，加5-10倍量(优选8倍量)的60-80％(优选70％)的乙醇为溶剂，浸泡30min-2h，回流提取1-3次，每次1-3h，合并醇提取液；可选地，残渣用3倍量水煎煮30min-2h，得到水提取液，并合并水提取液与醇提取液；或

2)取权利要求1至3中任一项所述的甘草、牡丹皮、附子、大黄、桂枝药材(例如饮片)，加5-15倍量的水进行煎煮至少15min，得到提取液。

其中，优选的是步骤1)所示的方法。

根据本发明任一项所述的药物组合物，其制备还包括下述步骤3)：

3)将步骤1)中制得的提取液(水提取液和/或醇提取液)和/或步骤2)中制得的提取液浓缩至相对密度为1.20-1.35的稠膏，50-80℃(优选60℃)真空干燥成干浸膏；可选地，将干浸膏粉碎。

本发明中提及的乙醇的浓度，如果没有特别说明，均指体积浓度(v/v)。

本发明的另一方面涉及一种药物组合物，包含如下组分：

甘草苷、丹皮酚、附子苷、大黄酚、和桂皮醛。

在本发明的一个实施方案中，所述的药物组合物由甘草苷、丹皮酚、附子苷、大黄酚、和桂皮醛组成。

在本发明的一个实施方案中，所述的药物组合物为含有甘草苷、丹皮酚、附子苷、大黄酚、和桂皮醛的提取物；具体地，为甘草、牡丹皮、附子、大黄、和桂枝的提取物；更具体地；为上面所述的步骤1)和/或2)和/或3)所制备的提取物。

在本发明的一个实施方案中，所述的药物组合物，其包含：

甘草苷    1-3重量份，

丹皮酚    0.5-2重量份，

附子苷    1-3重量份，

大黄酚    2-5重量份，和

桂皮醛    0.1-1重量份。

根据本发明任一项所述的药物组合物，其中，其特征还在于如下的(1)-(5)任一项或多项：

(1)甘草苷    1.5-2.5重量份；优选1.8-2.2重量份；

(2)丹皮酚    1-2重量份；优选1.2-1.8重量份；

(3)附子苷    1-2重量份；优选1.2-1.8重量份；

(4)大黄酚    2.5-4重量份；优选2.5-3.5重量份；

             更优选2.8-3.2重量份；和

(5)桂枝醛    0.3-0.8重量份；优选0.4-0.6重量份。

在本发明的一个实施方案中，所述的药物组合物，其包含：

甘草苷       2重量份，

丹皮酚       1.5重量份，

附子苷       1.5重量份，

大黄酚       3重量份，和

桂皮醛       0.5重量份。

根据本发明任一项所述的药物组合物，其中，所述甘草为炙甘草。

本发明的另一方面涉及一种药物制剂，其包含根据本发明任一项所述的药物组合物，以及药学上可接受的载体或辅料。

在本发明中，所述载体或辅料包括但不限于粘附剂、分散剂和表面活性剂中的任意的一种、两种、或多种。

在本发明中，将本发明的任一项所述的药物组合物利用粘附剂、润湿剂和分散剂等合适的药剂学辅料使其在体液中可以高效的润湿、分散，从而得到制剂等技术均在本发明申请保护的范围内。在实际应用中，还可以根据需要加入其它常规辅料及成型剂，比如淀粉、糊精、预胶化淀粉、微晶纤维素、羟丙基纤维素、壳聚糖、卡波姆、羧甲基纤维素钠、聚维酮、聚乙二醇、交联聚维酮、微粉硅胶、枸橼酸、甘露醇等。

在本发明中，粘附剂优选淀粉浆、聚维酮和干淀粉中的任一种或多种。

表面活性剂优选壳聚糖、泊洛沙姆和卵磷脂中的任一种或多种。不拘于理论的限制，因其对脂溶性成分有表面润湿作用，降低表面张力，可以增加脂溶性成分的溶解度，促进其分散吸收，有利于脂溶性成分更好地发挥药效。

分散剂优选微晶纤维素、微粉硅胶、聚乙二醇中的任一种或多种。不拘于理论的限制，这些分散剂本身具有亲水性，有利于脂溶性成分的润湿、分散，可以增强药物的稳定性。

将本发明的组合物与上述辅料配合使用，充分混合均匀，制成的片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂，可以增强组合物的分散性，润湿性，提高其生物利用度。

本发明中所用的术语“组合物”意指包括包含指定量的各指定成分的产品，以及直接或间接从指定量的各指定成分的组合产生的任何产品。

可改变本发明药物组合物中活性成分的实际剂量水平，以便所得的药物组合物能有效针对具体患者、剂型和给药方式得到所需的治疗反应。

在本发明的一个实施方案中，所述的药物制剂的组成为(重量份)：

本发明的药物组合物  55-90重量份，

泊洛沙姆            2-11重量份，

聚维酮              1-6重量份，

卵磷脂              1-6重量份，

微晶纤维素          3-11重量份，和

10％淀粉浆    3-11重量份。

在本发明的一个实施方案中，所述的药物制剂的组成为(重量份)：

根据本发明任一项所述的药物制剂，其为口服制剂，例如片剂、滴丸、胶囊、或颗粒剂。

根据本发明任一项所述的药物组合物或药物制剂，其用于清除晚期氧化蛋白产物；具体，用于清除生物体的体内或体外的晚期氧化蛋白产物；更具体地，用于清除生物体的体内喜欢中的晚期氧化蛋白产物；进一步具体地，所述循环包括但不限于血液循环、体液循环。

术语“清除”的含义包括但不限于全部或部分清除或去除、或者降低含量或水平。清除的对象包括但不限于期氧化蛋白产物、血尿素氮、血肌酐、和血清丙二醛中的任一种或多种。

本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的药物组合物或药物制剂在制备清除晚期氧化蛋白产物、血尿素氮、血肌酐、或血清丙二醛的药物或者提高超氧化物歧化酶活性的药物中的用途。

本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的药物组合物或药物制剂在制备预防和/或治疗和/或辅助治疗晚期氧化蛋白终产物所致疾病的药物中的用途；具体地，所述疾病为慢性肾脏疾病、糖尿病肾病、糖尿病并发症、或动脉粥样硬化。

本发明通过实施例11证明；本发明的药物组合物或药物制剂能够有效地清除AOPP，而根据背景技术中记载的参考文献等，AOPP的清除能够有效地预防和/或治疗和/或辅助治疗上述疾病。

本发明的再一方面涉及一种在体内或体外清除晚期氧化蛋白产物、血尿素氮、血肌酐、或血清丙二醛的方法或者提高超氧化物歧化酶活性的方法，包括使用有效量的本发明中任一项所述的药物组合物或药物制剂的步骤。

本发明的再一方面涉及一种预防和/或治疗和/或辅助治疗晚期氧化蛋白终产物所致疾病的方法，包括给与受试者有效量的本发明中任一项所述的药物组合物或药物制剂的步骤；具体地，所述疾病为慢性肾脏疾病、糖尿病肾病、糖尿病并发症、或动脉粥样硬化。

术语“受试者”可以指患者或者其它接受本发明组合物以治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病或病症的动物，特别是哺乳动物，例如人、狗、猴、牛、马等。

在本发明中，术语“有效量”是指可在受试者中实现治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病或病症的剂量。但应认识到，本发明药物组合物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体药物组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；给药时间、给药途径和排泄率；治疗持续时间；与所采用的具体药物组合物组合使用或同时使用的药物；及医疗领域公知的类似因素。例如，本领域的做法是，给药剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。

根据本发明的药物组合物或药物制剂可以有效地预防和/或治疗本发明所述的各种疾病或病症。

发明的有益效果

本发明的药物组合物或药物制剂能够有效地清除晚期氧化蛋白产物，具有作为防治慢性肾脏疾病、糖尿病肾病、糖尿病并发症、或动脉粥样硬化的药物的潜力。

附图说明

图1：提取物样品、甘草苷标准品、丹皮酚标准品、附子苷标准品、大黄酚标准品、桂皮醛标准品的HPLC图谱。由上到下的六条曲线依次分别是提取物样品、甘草苷标准品、丹皮酚标准品、附子苷标准品、大黄酚标准品、以及桂皮醛标准品的HPLC曲线。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

实施例1-3、5中使用的各药材均购自康美药业股份有限公司。

实施例1：组合物样品1的制备

取药材饮片炙甘草31.25kg、牡丹皮23.44kg、附子23.44kg、大黄46.87kg、桂枝7.8kg，加8倍量70％乙醇，回流提取2次，每次1.5h，弃渣旋转蒸发回收乙醇，60℃真空干燥。得干浸膏，粉碎成浸膏粉。

实施例2：组合物样品2的制备

取药材饮片炙甘草46.87kg、牡丹皮31.25kg、附子46.87kg、大黄78.12kg、桂枝31.25kg，加8倍量70％乙醇，回流提取2次，每次1.5h，弃渣旋转蒸发回收乙醇，60℃真空干燥。得干浸膏，粉碎成浸膏粉。

实施例3：组合物样品3的制备

取药材饮片炙甘草15.62kg、牡丹皮7.8kg、附子15.62kg、大黄31.25kg、桂枝15.62kg，加8倍量70％乙醇，回流提取2次，每次1.5h，弃渣旋转蒸发回收乙醇，60℃真空干燥。得干浸膏，粉碎成浸膏粉。

实施例4：组合物样品4的制备

按照如下的配比称取各组分(商购，例如购自上海雅吉生物科技有限公司)，并混合均匀：

甘草苷    2重量份，

丹皮酚    1.5重量份，

附子苷    1.5重量份，

大黄酚    3重量份，和

桂皮醛    0.5重量份。

实施例5：组合物样品5的制备

按照实施例1中的药材配比制备水提取物，全方药材加十倍量水，煎煮二次，每次2h，弃渣浓缩，60℃真空干燥，得浸膏，粉碎成浸膏粉。

实施例6：组合物制剂的制备(1)

取按照实施例1方法制备的浸膏粉80g，加入泊洛沙姆5g，聚维酮2.5g，卵磷脂2.5g，微晶纤维素5g。将以上成分充分混匀，加入粘合剂10％淀粉浆5g，然后制粒，干燥，整粒，共制备200片，包衣。

实施例7：组合物制剂的制备(2)

取按照实施例3方法制备的浸膏粉90g，加入泊洛沙姆2g，卵磷脂1g，聚维酮1g，微晶纤维素3g，将以上药材充分混合均匀，加入10％淀粉浆3g，然后制粒，干燥，整粒，最后分装成200粒胶囊。

实施例8：组合物制剂的制备(3)

取按照实施例4制备的样60g，加入泊洛沙姆10g，聚维酮5g，卵磷脂5g，微晶纤维素10g。将以上成分充分混匀，加入粘合剂10％淀粉浆10g，然后制粒，干燥，整粒，压200片，包衣。

实施例9：组合物制剂的制备(4)

取按照实施例4制备的样品55g，加入泊洛沙姆11g，卵磷脂6g，聚维酮6g，微晶纤维素11g，将以上药材充分混合均匀，加入10％淀粉浆11g，然后制粒，干燥，整粒，最后分装成200粒胶囊。

实施例10：药物组合物(提取物)的成分分析

取药材饮片炙甘草31.25kg、牡丹皮23.44kg、附子23.44kg、大黄46.87kg、桂枝7.8kg，加8倍量70％乙醇，回流提取2次，每次1.5h，弃渣旋转蒸发回收乙醇。

提取物经高效液相色谱(HPLC)法检测化学成分。采用Waters996HPLC仪，515型泵，色谱柱为大连依利特HypersiLODS2 C18柱(46mm×250mm，5μm)。色谱条件：乙腈：水梯度洗脱，B泵为水相，梯度洗脱程序见下面的表1，检测波长为280nm。

表1：梯度洗脱程序

时间(min)	B％
		0-5	95
5-10	85
		10-15	80
15-20	75
		20-25	65
25-30	60
		30-35	55
35-40	50
		40-50	40
50-55	30
		55-75	20

75-80	10
		80-90	5
90-100	5--0

HPLC的检测结果如附图1所示。

结果表明，通过与标准品(商购，例如购自中国药品生物制品检定所)进行比对，药物组合物(提取物)中含有甘草苷、丹皮酚、附子苷、大黄酚和桂皮醛。

为了验证本发明的效果，本发明进行了系统的药效实验，如下面的实施例11。

实施例11：药效学实验

本实验用整体的动物病理模型，即慢性肾病(CRF)模型进行。

1.实验材料与方法

1.1实验动物

SD雄性大鼠，体重180-220g，购于南方医科大学实验动物中心，许可证号：SCXK粤2006-0015，实验前动物置于室内适应环境一周。

1.2试验药品、试剂及主要仪器

水提取物，按照实施例5中的方法制备；

醇提取物，按照实施例1中的方法制备；

组分配方，按照实施例4中的方法制备。

尿毒清颗粒，康臣药业，批号：20101032。腺嘌呤，批号：28882(阿拉丁)。超氧化物歧化酶(SOD)测试盒，批号：20110301、丙二醛(MDA)测试盒，批号：20110301(南京建成生物工程研究所)。SpectraMax M5多功能酶标仪(MDS公司)，AU2700全自动生化分析仪(Olympus)，BX51正置荧光显微镜(Olympus)。

1.3动物分组、造模和给药

45只SD雄性大鼠随机分为9组，分别是：正常对照组、CRF模型组、尿毒清颗粒组，水提取物高剂量组、水提取物低剂量组、醇提取物高剂量组、醇提取物低剂量组，组分配方高剂量组、组分配方低剂量组，每组5只。

CRF模型大鼠是慢性肾脏疾病模型，慢性肾脏疾病时大鼠体内循环中AOPP增高。按照参照文献(傅晓晴，林若勤，武一曼，等.腺嘌呤制作肾阳虚型慢性肾功能衰竭大鼠模型的生化研究.福建中医学院学报，2003，13(1)：22-24；Witko-Sarat V，Friedlander M，Nguyen-Khoa T，et al.Advanced oxidation protein products asnovel mediators of inflammation and monocyte activation inchronic renal failure.J Immunol，1998，161(5)：2524-32.)，稍作改进，采用灌胃腺嘌呤混悬液(以0.5％CMC-Na混悬，剂量：200mg·kg^-1·d)诱导CRF模型。实验共持续8周，1-2周每天上午灌胃造模，3-4周隔天上午灌胃造模，5-8周每周灌胃造模二次(剂量减为100mg·kg^-1·d，每周二和周六上午)，正常对照组灌胃等体积0.5％CMC-Na。从造模第一天开始每天下午灌胃给药治疗，水提取物高、低剂量组分别灌胃水提取物13.26g·kg^-1，6.63g·kg^-1；醇提取物高、低剂量组分别灌胃醇提取物5.24g·kg^-1，2.62g·kg^-1；组分配方高、低剂量组分别灌胃组合物0.81g·kg^-1，1.62g·kg^-1；尿毒清颗粒组灌胃尿毒清颗粒4.5g·kg^-1，所有药物均以0.5％CMC-Na溶解或混悬。正常对照和模型组灌胃等体积0.5％CMC-Na。

1.4观察指标及检测方法

给药8周后，所有大鼠麻醉后腹主动脉采血，分离血清，全自动生化分析仪测定血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)，硫代巴比妥酸反应法测定血清丙二醛(MDA)。

按照参考文献(Nosratola D，Vaziri.Oxidation stress inuremia：nature，mechanisms，and potential consequences.SeminNephrol，2004，24(5)：469-473.)方法测定血清晚期氧化蛋白产物(AOPPs)，以氯胺T为标准曲线，测定酸性条件下340nm处吸光度值。

取血完毕，取出肾脏，除去包膜，称重后，按下式计算肾脏器指数(Kidney index)。取各组大鼠右肾，用眼科剪剪取0.2g肾脏组织块，放入组织重量9倍的冷0.9％生理盐水中，匀浆机使组织充分匀浆化，匀浆液低温低速2500r·min^-1，离心10min，留取上清液。黄嘌呤氧化酶法测定肾匀浆中SOD，随机选取各组部分大鼠左肾脏放入4％的福尔马林溶液中固定24h、脱水、石蜡包埋、常规切片、HE染色，光镜下观察病理组织学变化。

按照如下公式计算肾脏指数：

肾脏指数＝肾脏重量(g)/体重(g)×100％

1.5统计学处理

实验数据用

表示，采用SPSS 13.0统计软件包处理，组间比较采用单因素方差分析多重比较，P＜0.05表示有显著性差异。

2实验结果

2.1一般情况

除正常对照组外，各组大鼠在灌胃腺嘌呤造模1周后即出现少食、多饮、多尿，至第8周时均出现体毛干枯不齐，精神萎靡，各治疗组情况均较模型组轻。在第3周时水提取物高剂量组死亡一只。

2.2组合物对CRF大鼠肾功能的影响

如下面的表2所示。

结果显示：

模型组大鼠血清SCr和BUN水平均较正常对照组显著升高(P＜0.01)，肾脏肿大，肾脏器指数显著高于正常对照组(P＜0.01)，说明CRF大鼠模型造模成功；

各治疗组SCr水平均显著低于模型组(P＜0.05或P＜0.01)，其中醇提取物比水提取物作用要强(P＜0.05或P＜0.01)；水提取物低剂量，醇提取物高、低剂量组，组分配方高、低剂量组均比尿素清颗粒作用强(P＜0.01)；

水提取物低剂量组，醇提取物高、低剂量组，组分配方高、低剂量组血清BUN水平均显著低于模型组(P＜0.01)，其中醇提取物高、低剂量组，组分配方高、低剂量组显著低于尿毒清颗粒组(P＜0.01)；

水提取物，醇提取物和组分配方各给药组肾脏器指数与模型组相比均显著降低(P＜0.05或P＜0.01)，其中水提取物低剂量组和醇提取物高、低剂量组，组分配方高、低剂量组均比尿毒清颗粒组低(P＜0.05或P＜0.01)。

2.3组合物对CRF大鼠氧化水平的影响

如下面的表3所示。

结果显示：

模型组大鼠血清MDA，AOPPs含量与正常对照组相比显著上升(P＜0.01)，肾组织内SOD活性显著下降(P＜0.01))，提示CRF大鼠循环氧化水平升高，肾组织抗氧化能力下降，机体处于氧应激状态；

水提取物低剂量组，醇提取物高、低剂量组，组分配方高、低剂量组血清MDA、AOPPs含量与模型相比显著降低(P＜0.05或P＜0.01)，其中醇提取物高、低剂量，组分配方高、低剂量组对MDA的作用比水提取物和尿毒清颗粒要强(P＜0.01)，水提取物低剂量对AOPPs的作用强于尿毒清颗粒、水提取物高剂量及醇提取物高、低剂量(P＜0.05或P＜0.01)；

水提取物高、低剂量及醇提取物高、低剂量组、组分配方高、低剂量组肾组织SOD活性均较模型组显著提高(P＜0.01)，且作用均强于尿毒清颗粒(P＜0.01)。

结果表明本发明的药物组合物能抑制CRF大鼠循环氧应激，提高肾组织抗氧化能力。

表2：对CRF大鼠血中SCr，Bun及Kidney index的影响

注：与正常对照组相比，^aP＜0.05，^aaP＜0.01；与模型组相比，^bP＜0.05，^bbP＜0.01。

表3：对CRF大鼠血中MDA，AOPPs及肾匀浆中SOD的影响

注：与正常对照组相比，^aP＜0.05，^aaP＜0.01；与模型组相比，^bP＜0.05，^bbP＜0.01。

2.4组合物对CRF大鼠病理组织学的影响

光镜下观察：模型组见区域性肾单位萎缩、消失；肾小球明显减少，有不同程度的萎缩、硬化甚至坏死；肾小管破坏严重，部分肾小管萎缩变小或扩张，扩张的肾小管内偶见蛋白管型或颗粒管型；肾小管及间质内可见大量腺嘌吟代谢物结晶沉积，结晶周围可见异物巨细胞反应；间质有淋巴细胞及巨细胞浸润，部分可见纤维组织增生。给药各组基本病变与模型对照组一致，但肾小管的破坏及间质内结晶沉积物均不同程度地减少。

结果表明，本发明的药物组合物能够有效地清除晚期氧化蛋白产物、血尿素氮、血肌酐、或血清丙二醛，或者有效提高超氧化物歧化酶活性，能够有效地治疗慢性肾脏疾病。

尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。

Claims (18)

1.一种用于治疗慢性肾病的药物组合物，其由如下组分组成：

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其由如下组分组成：

3.根据权利要求1至2中任一项所述的药物组合物，其通过下述步骤1）或2）制备：

1）取权利要求1至2中任一项所述的甘草、牡丹皮、附子、大黄、桂枝药材，加5－10倍量的60－80%的乙醇为溶剂，浸泡30min－2h，回流提取1－3次，每次1－3h，合并醇提取液，得到药物组合物；或

2）取权利要求1至2中任一项所述的甘草、牡丹皮、附子、大黄、桂枝药材，加5－15倍量的水进行煎煮至少15min，得到提取液，其为药物组合物。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其中，步骤1）或2）中所述的甘草、牡丹皮、附子、大黄、桂枝药材为甘草、牡丹皮、附子、大黄、桂枝饮片。

5.根据权利要求1至2中任一项所述的药物组合物，其通过下述步骤制备：

取权利要求1至2中任一项所述的甘草、牡丹皮、附子、大黄、桂枝药材，加5－10倍量的60－80%的乙醇为溶剂，浸泡30min－2h，回流提取1－3次，每次1－3h，合并醇提取液，残渣用3倍量水煎煮30min－2h，得到水提取液，并合并水提取液与醇提取液。

6.根据权利要求1至2中任一项所述的药物组合物，其通过下述步骤1）和3），或者2）和3）制备：

1）取权利要求1至2中任一项所述的甘草、牡丹皮、附子、大黄、桂枝药材，加5－10倍量的60－80%的乙醇为溶剂，浸泡30min－2h，回流提取1－3次，每次1－3h，合并醇提取液；或

2）取权利要求1至2中任一项所述的甘草、牡丹皮、附子、大黄、桂枝药材，加5－15倍量的水进行煎煮至少15min，得到提取液；和

3）将步骤1）或2）中制得的提取液浓缩至相对密度为1.20－1.35的稠膏，50－80℃真空干燥成干浸膏，得到药物组合物。

7.根据权利要求6所述的药物组合物，其中，步骤3）中将干浸膏粉碎。

8.一种用于治疗慢性肾病的药物组合物，其由如下组分组成：

9.根据权利要求8所述的药物组合物，其由如下组分组成：

10.根据权利要求1、2、4、5、6、7中任一项所述的药物组合物，其中，所述甘草为炙甘草。

11.根据权利要求3所述的药物组合物，其中，所述甘草为炙甘草。

12.一种用于治疗慢性肾病的药物制剂，其由权利要求1至11中任一项所述的药物组合物，以及药学上可接受的载体或辅料组成。

13.根据权利要求12所述的药物制剂，其中，所述载体或辅料为粘附剂、分散剂和表面活性剂。

14.根据权利要求13所述的药物制剂，其中，所述粘附剂选自淀粉浆、聚维酮和干淀粉中的任一种或多种，所述分散剂选自微晶纤维素、微粉硅胶、聚乙二醇中的任一种或多种，所述表面活性剂选自壳聚糖、泊洛沙姆和卵磷脂中的任一种或多种。

15.根据权利要求12所述的药物制剂，其为口服制剂。

16.根据权利要求12所述的药物制剂，其为片剂、滴丸、胶囊或颗粒剂。

17.根据权利要求12至16中任一项所述的药物制剂，其由如下组分组成：

18.权利要求1至11中任一项所述的药物组合物或者权利要求12至17中任一项所述的药物制剂在制备预防和/或治疗和/或辅助治疗慢性肾脏疾病的药物中的用途。

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