CN102524645B - 从珍珠母贝的珍珠胎囊中提取珍珠胎囊液的方法及产品和该产品的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了从珍珠母贝的珍珠胎囊中提取珍珠胎囊液的方法及产品和该产品的应用，以珍珠母贝胎囊为主要原料，经过前处理、切碎、提取、过滤、调配、灌装、灭菌、包装制成。本发明的另一目的在于提供一种采用上述方法制备得到的珍珠胎囊液，以及该产品在制备具有抗氧化、增强免疫力功效的保健食品中的应用。

Description

从珍珠母贝的珍珠胎囊中提取珍珠胎囊液的方法及产品和该产品的应用

技术领域

本发明涉及一种珍珠胎囊液的提取方法，更具体的说，涉及一种从珍珠母贝的珍珠胎囊中提取珍珠胎囊液的方法及产品和该产品的应用。

背景技术

珍珠母贝，在西方称为“MOTHER OF PEARL”，即为孕育珍珠的贝，中国海水养殖珍珠是利用马氏珠母贝〔Pinctada martensii(Danker)〕、大珠母贝〔Pinctada maxima(Jameson)〕、珠母贝〔Pinctada margaritifera(Linnaeus)〕和企鹅珍珠贝〔Pteria penguin(Roding)〕等珍珠母贝养殖育珠而成。这些珍珠母贝主要分布于广东、广西和海南沿海，在部分地区已成为经济发展的支柱产业。中国海水养殖珍珠闻名遐迩，饮誉海内外。我国于2000年首次超过长期统治国际珍珠市场的日本成为世界海水珍珠产业第一大国。

珍珠是名贵的中药材，珍珠是母贝的外套膜和珍珠囊的表皮细胞所分泌的珍珠质而形成的。通常母贝的内部都是非常平滑光亮的，其化学成分是碳酸钙和一种称之为介质壳质的黑色有机物质。珍珠母贝的胎囊，含有丰富的珍珠胎囊角质蛋白氨基酸，特别是光基欧磷氨酸、异亮氨酸、亮氨酸等特有的美容因子，以及一些小分子活性物质起作用。这些氨基酸分子在结构上与人体皮肤表层的胶原蛋白(胶原纤维)十分相似，与人体细胞组织具有很强的相容性和亲和性，可以直接参与胶原蛋白的形成和维护其活性，而使皮肤保持弹性，阻止皱纹的产生；这些分子作用于成纤维细胞，可增强透明质酸的分泌，透明质酸具有很强的吸水性和保水性，可以维持组织中的水分，保持皮肤的柔嫩；这些蛋白氨基酸还有刺激皮脂腺的功能，皮脂腺是分泌皮脂的器官，而皮脂是人体皮肤的“润滑油”和保护伞。正常的皮脂分泌可以保护皮肤，避免风吹日晒等自然因素所导致的皮肤损害(老化)，使皮肤保持润泽。而小分子活性物质更可以增强细胞的新陈代谢过程，使皮肤去除衰老的、有色素沉着的组织，不断更新。

随着珍珠养殖业的不断壮大，珍珠副产品-珍珠母贝肉资源日益丰富，年产量达数千吨之多。科学试验证明，珍珠之所以有“令人肌肤好颜色”的功效，是由于珍珠特有的蛋白氨基酸的活性成份起作用。研究证实，珍珠胎囊中同样含有丰富的珍珠蛋白质氨基酸。目前在政府引导下，尽管广大珠农大搞综合利用，将珍珠母贝贝壳生产成珍珠贝壳钮扣或加工成珍珠层粉，但珍珠贝肉，主要是软体部分中的珍珠胎囊部分，尚没利用，都当作废物丢弃掉。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从珍珠母贝的珍珠胎囊中提取珍珠胎囊液的方法，以珍珠胎囊为主要原料，经过前处理、切碎、提取、过滤、浓缩调配、灌装、灭菌、包装制成。

本发明的另一目的在于提供一种采用上述方法制备得到的珍珠胎囊液，以及该产品的应用。

本发明包括如下步骤：

1、前处理：用清水洗净珍珠母贝，用刀刃分离出珍珠胎囊部分；

2、切碎：将洗净后的珍珠胎囊用孔径为3-5mm绞肉机绞碎，重复2-3次；

3、提取：将绞碎的珍珠胎囊和纯净水按1∶0.5-1.0重量比混合后，加入盐酸调pH值至3-4，然后加热至100-105℃，维持8-10小时，然后冷却至75-85℃，加入相当于提取液0.15-0.25％重量份的活性炭进行脱色，冷却后取上清液进行反复抽滤，收取滤液；

4、过滤：将提取后的滤液加入氢氧化钠调pH值至6-7，然后再进行抽滤，收集滤液；

5、浓缩调配：将滤液浓缩至其中的氨基酸态氮重量含量到1.2％，然后添加麦芽糖醇，麦芽糖醇的添加量与浓缩后滤液的重量比为0.3-0.5∶100；

6、罐装、巴氏灭菌，包装得成品。

本发明所述的珍珠胎囊是指马氏珠母贝取珠后剩下的胎囊精卵部分，不包括闭合肌。

本发明所述的滤网的孔径为60-80目。

本发明在调配过程中加入麦芽糖醇主要是为了调节珍珠胎囊液的滋味和口感，去除珍珠胎囊的腥味，申请人做了大量对比实验，为说明加入麦芽糖醇的效果，本发明做了如下工艺对比，具体实验条件及结果如下：

一种珍珠胎囊液，采用上述制备方法得到。珍珠胎囊液具有如下技术指标：

表1感官要求

表2理化指标

表3微生物指标

项目	指标
		细菌总数	≤100个/mL
大肠杆菌	≤3个/mL
		致病菌	不得检出

本发明还包括由上述方法制得的珍珠胎囊液在制备具有抗氧化、增强免疫力功效保健食品中的应用。

本发明的优点在于：成功利用珍珠母贝的胎囊来提取富含珍珠角质蛋白氨基酸的珍珠胎囊液，珍珠胎囊液富含海水珍珠活性成分，拓宽了珍珠“内服外用”的范围，加强了对珍珠育珠母贝的综合利用，创造了良好的经济效益。

具体实施方式

下面以实施例对本发明进行说明，但本发明并不局限于这些实施例。

实施例1

1、前处理：用清水洗净珍珠母贝，用刀刃分离出珍珠胎囊部分；

2、切碎：将洗净后的珍珠胎囊用孔径为3-5mm绞肉机绞碎，重复2次；

3、提取：将绞碎的珍珠胎囊10kg和纯净水5kg混合后，加入盐酸调pH值至3，然后加热至105℃，维持8小时，然后冷却至80℃，加入相当于提取液0.2％重量份的活性炭进行脱色，冷却后取上清液进行反复抽滤，滤网孔径60目，收取滤液；

4、过滤：将提取后的滤液加入氢氧化钠调pH值至6，然后再进行抽滤，滤网孔径60目，收集滤液；

5、浓缩调配：将滤液浓缩至其中的氨基酸态氮重量含量到1.2％，然后添加麦芽糖醇，麦芽糖醇的添加量与浓缩后滤液的重量比为0.3∶100；

6、罐装、巴氏灭菌，包装得成品。

实施例2

1、前处理：用清水洗净珍珠母贝，用刀刃分离出珍珠胎囊部分；

2、切碎：将洗净后的珍珠胎囊用孔径为3-5mm绞肉机绞碎，重复3次；

3、提取：将绞碎的珍珠胎囊10kg和纯净水10kg混合后，加入盐酸调pH值至4，然后加热至100℃，维持8小时，然后冷却至80℃，加入相当于提取液0.2％重量份的活性炭进行脱色，冷却后取上清液进行反复抽滤，滤网孔径80目，收取滤液；

4、过滤：将提取后的滤液加入氢氧化钠调pH值至7，然后再进行抽滤，滤网孔径80目，收集滤液；

5、浓缩调配：将滤液浓缩至其中的氨基酸态氮重量含量到1.2％，然后添加麦芽糖醇，麦芽糖醇的添加量与浓缩后滤液的重量比为0.5∶100；

6、罐装、巴氏灭菌，包装得成品。

实施例3

1、前处理：用清水洗净珍珠母贝，用刀刃分离出珍珠胎囊部分；

2、切碎：将洗净后的珍珠胎囊用孔径为3-5mm绞肉机绞碎，重复2次；

3、提取：将绞碎的珍珠胎囊10kg和纯净水8kg混合后，加入盐酸调pH值至3.5，然后加热至105℃，维持10小时，然后冷却至70℃，加入相当于提取液0.25％重量份的活性炭进行脱色，冷却后取上清液进行反复抽滤，滤网孔径80目，收取滤液；

4、过滤：将提取后的滤液加入氢氧化钠调pH值至6，然后再进行抽滤，滤网孔径80目，收集滤液；

5、浓缩调配：将滤液浓缩至其中的氨基酸态氮重量含量到1.2％，然后添加麦芽糖醇，麦芽糖醇的添加量与浓缩后滤液的重量比为0.5∶100；

6、罐装、巴氏灭菌，包装得成品。

实施例4

1、前处理：用清水洗净珍珠母贝，用刀刃分离出珍珠胎囊部分；

2、切碎：将洗净后的珍珠胎囊用孔径为3-5mm绞肉机绞碎，重复3次；

3、提取：将绞碎的珍珠胎囊10kg和纯净水5kg混合后，加入盐酸调pH值至4，然后加热至105℃，维持8小时，然后冷却至75℃，加入相当于提取液0.15％重量份的活性炭进行脱色，冷却后取上清液进行反复抽滤，滤网孔径60目，收取滤液；

4、过滤：将提取后的滤液加入氢氧化钠调pH值至6-7，然后再进行抽滤，滤网孔径60目，收集滤液；

5、浓缩调配：将滤液浓缩至其中的氨基酸态氮重量含量到1.2％，然后添加麦芽糖醇，麦芽糖醇的添加量与浓缩后滤液的重量比为0.3∶100；

6、罐装、巴氏灭菌，包装得成品。

实施例5

采用本实施例1得到的珍珠胎囊液具有如下技术指标：

表1感官要求

表2理化指标

表3微生物指标

项目	指标
		细菌总数	≤100个/mL

大肠杆菌	≤3个/mL
		致病菌	不得检出

实施例6

采用实施例1得到的珍珠胎囊液，进行抗氧化功能人体试食试验研究：

1、受试对象受试者纳人标准：选择年龄在25-60岁，身体健康状况良好，无明显脑、心、肝、肺、肾、血液疾病，无长期服药史，志愿受试保证配合的人群。

受试人群排除如下对象：年龄在25岁以下或60岁以上、妊娠或哺乳期妇女、对保健食品过敏者；有心、肝、肾和造血系统等严重疾病者；短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者；不符合纳人标准，未按规定服用本产品，无法判断功效或资料不全影响功效或安全性判断者。

2、分组与试食方法依照标准，以受试者试验前的丙二醛含量(MDA)为主、并考虑超氧化物岐化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物歧化酶(GSH-Px)活性及性别、生活饮食习惯等因素，按性别分层随机分为2组，受试组58例和对照组59例。受试者按推荐服用方法，服用受试产品，每日两次，每次50mL；对照组为空白对照。试食时间1个月，试验期间受试组和对照组原生活、饮食不变。

3、结果

3.1试验中受试者脱离3人，脱离率为2.6％，最后实际有效例数为114例，受试组和对照组分别为56例、58例。受试组和对照组的受试对象在试验前、后的生活和饮食情况基本无改变。试验前后受试组的受试对象精神状况、睡眠等临床症状有一定改善。

3.2珍珠胎囊液对试验人群血清丙二醛(MDA)含量的影响

试食前两组人群间MDA含量差异无统计学意义。试食后受试组MDA含量与对照组比较明显下降；自身前后比较MDA含量降低差异具有统计学意义，下降百分率分率为4.90％。见表1：

表1试食前后血清丙二醛含量及升高百分率

[注]*自身比较p＜0.01，**组间比较p＜0.05

3.3珍珠胎囊液对试验人群血清超氧化物酶(SOD)活性的影响

试食前两组人群间SOD活性差异无统计学意义。试食后受试组SOD活性与对照组比较明显升高；自身前后比较SOD活性升高差异具有统计学意义，升高百分率分率分别为12.44％。见表2：

表2试食前后血清超氧化物歧化酶活性及升高百分率

[注]*自身比较p＜0.01，**组间比较p＜0.05

3.4珍珠胎囊液试验人群血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响

试食前两组人群间GSH-Px活性差异无统计学意义。试食后受试组GSH-Px活性与对照组比较无明显变化；GSH-Px活性自身前后比较差异无统计学意义，见表3：

表3试食前后血清超氧化物歧化酶活性及升高百分率

4.结论

试食后受试组丙二醛含量明显下降，超氧化物歧化酶活性明显升高，谷胧甘肽过氧化物酶自身前后比较及与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)，显示珍珠胎囊液具有良好的抗氧化效果，其抗氧化作用可能通过提高超氧化物歧化酶的活性起作用。超氧化物歧化酶是体内主要的抗氧化酶是氧自由基的特异清除剂，可使超氧阴离子自由基歧化为氧分子和过氧化氢，而过氧化氢在过氧化氢酶的作用下分解为水，使超氧阴离子灭活，进而减少过氧化产物丙二醛的生成。

实施例7

采用实施例2得到的珍珠胎囊液，进行增强免疫力试验研究：

1.实验方法参照卫生部《保健食品检验与评价技术规范-2003》中增强免疫力功能检验方法和操作规程进行。实验动物240只，体重为18-22克，每40只小鼠为1组，共6组。免疫I组，进行脏/体比值测定，血清溶血素测定和抗体生成细胞数测定；V免疫II组，进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验；免疫III组，进行迟发型变态反应实验；免疫IV-VI组，分别进行碳廓清实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验和NK细胞活性测定。

2.剂量和给予方式实验设200、400、800mg/kgBW(分别相当于人体推荐用量的5、10、20倍)3个剂量组和1个阴性对照组，每组10只动物。实验前将受试物用蒸馏水配成10，20，40mg/mL浓度的溶液，按0.2mL/10gBW的体积给予相应剂量组动物灌胃，阴性对照组给予等体积的蒸馏水，每天灌胃1次，连续灌胃30-35天，进行各项免疫指标测定。

3.结果

3.1受试物对小鼠体重的影响免疫I-VI组的小鼠初始体重均数为19.2士0.9-20.5土0.9g之间，与阴性对照组的19.05士0.7-20.2士1.0g之间比较，差异均无显著性意义(P＞0.05)，即小鼠的初始体重在各组间较为均衡。实验结束时，免疫I-VI组的受试物各剂量组的小鼠体重及体重增长量均数在33.7士2.0-36.4士2.0g之间，与阴性对照组的33.9士2.1-35.8土2.2g之间比较，差异均无显著性意义(P＞0.05)，表明该受试物对小鼠的体重增长无明显影响。

3.2受试物对小鼠免疫器官脏器/体重比值的影响

由表1可见，经口给予小鼠不同剂量的受试物30天后，小鼠的胸腺/体重及脾脏/体重比值与阴性对照组比较，均无显著性差异(P＞0.05)，表明该受试物对小鼠的免疫器官重量无明显影响。

表1受试物各剂量组试验小鼠的免疫器官/体重比值

3.3受试物对小鼠细胞免疫的影响

3.3.1受试物对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力的影响受试物各剂量组小鼠的淋巴细胞转化能力均高于阴性对照组，且高、中剂量组与阴性对照组比较差异具有显著性(P＜0.05>，表明该受试物具有促进小鼠淋巴细胞增殖、转化能力的作用，见表2。

表2受试物对小鼠脾淋巴细胞转化及迟发型变态反应(DTH)实验结果

注：表中受试物个剂量组于阴性对照组比较，差异具有显著性及非常显著性(p＜0.05和p＜0.01)

3.3.2受试物对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响

从表2可见，受试物各剂量组小鼠的左右耳片重量差值均高于阴性对照组，且高、中剂量组与阴性对照组比较差异具有显著性(分别P＜0.0l和P＜0.05)，表明该受试物具有促进小鼠的迟发型变态反应的作用。

3.4受试物对小鼠体液免疫的影响

3.4.1受试物对小鼠抗体生成细胞数的影响从表3可见，受试验物高剂量组小鼠的抗体生成细胞数高于阴性对照组，且差异具有显著性(P＜0.05)，表明该受试物具有促进小鼠的抗体生成细胞增殖的作用。

3.4.2受试物对小鼠血清溶血素的影响

受试物各剂量组小鼠的抗体积数均高于阴性对照组，其中高剂量组与阴性对照组比较差异具有非常显著性(P＜0.01)，表明该受试物具有提高小鼠的血清溶血素水平的作用。见表3。

表3受试物对抗体生成细胞检测及溶血素的测定实验结果

注：表中受试物个剂量组于阴性对照组比较，差异具有显著性及非常显著性(p＜0.05和p＜0.01)

3.5受试物对小鼠单核一巨噬细胞吞噬功能的影响

3.5.1受试物对小鼠的单核一巨噬细胞碳廓清的影响从表4可见，受试物各剂量组小鼠的吞噬指数均高于阴性对照组，且高、中剂量组与阴性对照组比较差异具有显著性(P＜0.05)，表明该受试物具有促进小鼠的单核一巨噬细胞碳廓清功能的作用。

3.5.2受试物对小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响

受试物各剂量组小鼠的腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率及吞噬指数与阴性对照组比较，差异均无显著性意义(P＞0.05)，表明该样品对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能无明显的促进作用，见表4。

表4受试物对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清及腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验结果

注：表中受试物各剂量组于阴性对照组比较，差异巨头显著性(p＜0.05)

3.6受试物对小鼠NK细胞活性的影响

从表5可见，受试物各剂量组小鼠的NK细胞活性均高于阴性对照组，但与阴性对照组比较差异均无显著性意义(P＞0.05)，表明该受试物对小鼠的NK细胞活性无明显的提高作用。

表5受试物对小鼠NK细胞活性测定结果

4结论

本实验结果表明，珍珠胎囊液对细胞免疫、体液免疫和单核-巨噬细胞吞噬功能有较强的促进作用，显示珍珠胎囊液具有增强免疫力的功效。研究结果显示，珍珠胎囊液的药理作用多样，涉及全身几乎每一个系统和器官，具有保护心肌细胞、强心、双向调节血压、增强机体免疫功能等药理作用。还可作用于多种免疫活性细胞、促进某些细胞因子的分泌，进一步发挥免疫调节作用，它对免疫抑制剂造成的免疫低下有明显的保护作用，是具有双向作用的免疫调节剂。

Claims (4)

1.一种从珍珠母贝的珍珠胎囊中提取珍珠胎囊液的方法，以珍珠母贝胎囊为主要原料，经过前处理、切碎、提取、过滤、调配、灌装、灭菌、包装制成，具体包括如下步骤：

1）、前处理：用清水洗净珍珠母贝，用刀刃分离出珍珠胎囊部分；

2）、切碎：将洗净后的珍珠胎囊用孔径为3-5mm绞肉机绞碎，重复2-3次；

3）、提取：将绞碎的珍珠胎囊和纯净水按1：0.5-1.0重量比混合后，加入盐酸调pH值至3-4，然后加热至100-105℃，维持8-10小时，然后冷却至75-85℃，加入相当于提取液0.15-0.25%重量份的活性炭进行脱色，冷却后取上清液进行反复抽滤，收取滤液；

4）、过滤：将提取后的滤液加入氢氧化钠调pH值至6-7，然后再进行抽滤，收集滤液；

5）、浓缩调配：将滤液浓缩至其中的氨基酸态氮重量含量到1.2%，然后添加麦芽糖醇，麦芽糖醇的添加量与浓缩后滤液的重量比为0.3-0.5：100；

6）、罐装、巴氏灭菌，包装得成品。

2.根据权利要求1所述的从珍珠母贝的珍珠胎囊中提取珍珠胎囊液的方法，其特征在于：所述的珍珠胎囊是指马氏珠母贝取珠后剩下的胎囊精卵部分，不包括闭合肌。

3.权利要求1-2中任一项所述从珍珠母贝的珍珠胎囊中提取珍珠胎囊液的方法制得的珍珠胎囊液。

4.权利要求3所述的珍珠胎囊液在制备具有抗氧化、增强免疫力功效的保健食品中的应用。